一種糖脂分離純化的方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種糖脂分離純化的方法。本發(fā)明用正己烷將粗磷脂溶解，然后用乙醇水溶液萃取，最后收集乙醇水溶液，采用真空濃縮的方式除去乙醇水溶液，得出糖脂產(chǎn)品。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是利用磷脂和糖脂在乙醇水溶液中溶解度的差異從粗磷脂分離純化糖脂，所得糖脂經(jīng)真空干燥成糖脂含量為80%以上的糖脂產(chǎn)品。一方面，方法簡(jiǎn)單高效，糖脂得率高；另一方面，解決了磷脂加工過(guò)程中美拉德反應(yīng)對(duì)磷脂產(chǎn)品外觀影響的問(wèn)題。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種糖脂分離純化的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及大豆油脂下腳料的深加工領(lǐng)域，一種從大豆油脂下腳料中分離純化糖 脂的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 糖脂為含糖的脂類(lèi)，是由一個(gè)或多個(gè)單糖殘基與脂類(lèi)部分如單脂酰或二脂酰甘 油、鞘氨醇、神經(jīng)酰胺等相連形成的化合物。糖脂廣泛存在于各種生物體中，自然界中的糖 脂可按其組分中的醇基種類(lèi)而分為兩大類(lèi)：甘油糖脂及鞘糖脂。糖基化的甘油醇脂類(lèi)稱(chēng)為 甘油糖脂。
[0003] 糖類(lèi)及其復(fù)合物是自然界廣泛存在的一大類(lèi)物質(zhì)，是生物生命過(guò)程中的重要的 物質(zhì)基礎(chǔ)和能量基礎(chǔ)。而目前更為人們所關(guān)注的則是其作為生物信息的載體，糖類(lèi)作為自 然界的一大類(lèi)生物活性分子，參與了很多重要的生理和病理過(guò)程。無(wú)論是在受精、發(fā)育、分 化、神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)恒態(tài)的維持方面，還是在炎癥及自身免疫疾病、老化、癌細(xì)胞異常 增殖及轉(zhuǎn)移、病原體感染、植物與病原菌相互作用等過(guò)程中都涉及糖鏈的參與，糖鏈在這 些生命過(guò)程中起到特異性的識(shí)別和介導(dǎo)的作用。甘油糖脂是細(xì)胞膜重要組成部分、具有抗 氧化、抗病毒、抗腫瘤、抗炎、抗菌等活性。有研究證明橄欖油內(nèi)的甘油糖脂是橄欖油能防止 動(dòng)脈粥樣硬化的原因。
[0004] 植物油脫膠過(guò)程中糖脂常與磷脂等一起作為膠體物質(zhì)從油中去除，因此，大豆 磷脂中常含有一定量的糖脂，磷脂中的糖脂主要為半乳糖脂。糖脂加熱易發(fā)生美拉德反應(yīng)， 產(chǎn)生棕褐色物質(zhì)，使大豆磷脂加工過(guò)程中顏色加深，風(fēng)味發(fā)生變化，質(zhì)量下降。鑒于糖 脂對(duì)于大豆磷脂生產(chǎn)的限制和糖脂具有多種生物活性，在大豆磷脂中提取糖脂對(duì)提高大豆 磷脂的產(chǎn)品附加值，不斷地挖掘其新的利用價(jià)值，具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。
[0005] 對(duì)糖脂化合物的分離純化，盡管目前己有多種有效成分的提取分離方法，但都不 同程度地存在著提取時(shí)間長(zhǎng)，提取過(guò)程繁瑣，分離純化困難等不足。目前國(guó)內(nèi)外普遍采用 大孔吸附樹(shù)脂法、高效薄層層析法和柱層析色譜法。大孔吸附樹(shù)脂法主要用來(lái)樣品的粗分 離，獲得的產(chǎn)物是糖脂混合物，很難得到單一化合物。高效薄層層析要分離得到糖脂單一 組分通常需要大量反復(fù)提取，而且提取量少，很難滿(mǎn)足糖脂結(jié)構(gòu)鑒定和生物活性的進(jìn)一步 研究。柱層析色譜法近年來(lái)，柱層析色譜柱法是糖脂分離廣泛采用的一種分離方法，柱層 析色譜法雖然可以大量的處理樣品，但是存在不可逆吸附嚴(yán)重、分離效率低、耗時(shí)長(zhǎng)且溶 劑消耗量大等缺點(diǎn)。
[0006]


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 為了解決上述存在的問(wèn)題，本發(fā)明建產(chǎn)了一種新的從大豆磷脂中分離純化糖脂的 技術(shù)，以進(jìn)一步挖掘大豆磷脂新的利用價(jià)值，提高糖脂提取率，同時(shí)降低糖脂對(duì)磷脂加工的 影響。
[0008] 本發(fā)明的目的在于提供一種糖脂分離純化的方法。
[0009] 本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是： 一種糖脂的分離純化的方法，該方法為：用正己烷將粗磷脂溶解，然后用乙醇水溶液作 為萃取劑進(jìn)行萃取，收集萃取液并除去萃取劑，即可獲得糖脂。
[0010] 進(jìn)一步的，上述粗磷脂正己烷溶解的料液質(zhì)量比為I :(1. 2?1. 8)。
[0011] 進(jìn)一步的，上述萃取的次數(shù)為3?4次。
[0012] 進(jìn)一步的，上述乙醇水溶液的體積為正己烷的1?1. 5倍。
[0013] 進(jìn)一步的，上述乙醇水溶液為50?60% (v/v)的乙醇水溶液。
[0014] 進(jìn)一步的，上述除去萃取劑的方法采用真空濃縮法。
[0015] 進(jìn)一步的，上述除去萃取劑的具體操作為：將萃取液置于真空濃縮設(shè)備中，在真空 度小于-0. 08Mpa、溫度為60°C?80°C的條件下，濃縮至干，使水分含量小于10%。
[0016] 進(jìn)一步的，上述真空濃縮設(shè)備為旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器。
[0017] 本發(fā)明的有益效果是： 本發(fā)明的利用磷脂和糖脂在乙醇水溶液中溶解度的差異從粗磷脂分離純化糖脂，本發(fā) 明分離純化的糖脂產(chǎn)品中總糖含量可達(dá)26%，其中糖脂含量可占83%。
[0018] 本發(fā)明方法不僅簡(jiǎn)單高效，糖脂得率高；還解決了磷脂加工過(guò)程中因糖脂的美拉 德反應(yīng)影響磷脂產(chǎn)品外觀的問(wèn)題。

【具體實(shí)施方式】
[0019] 一種糖脂的分離純化的方法，該方法為：用正己烷將粗磷脂溶解，然后用乙醇水溶 液作為萃取劑進(jìn)行萃取，收集萃取液并除去萃取劑，即可獲得糖脂。
[0020] 優(yōu)先的，上述粗磷脂正己烷溶解的料液質(zhì)量比為I :(1. 2?1. 8)，最優(yōu)選為1 :1。
[0021] 優(yōu)先的，上述萃取的次數(shù)為3?4次，最優(yōu)選為萃取3次。
[0022] 優(yōu)先的，上述乙醇水溶液的體積為正己烷的1?1. 5倍，最優(yōu)選為正己烷的1倍。
[0023] 優(yōu)先的，上述乙醇水溶液為50?60% (v/v)的乙醇水溶液。
[0024] 優(yōu)先的，上述除去萃取劑的方法采用真空濃縮法。
[0025] 優(yōu)先的，上述除去萃取劑的具體操作為：將萃取液置于真空濃縮設(shè)備中，在真空度 小于-0. 08Mpa、溫度為60°C?80°C的條件下，濃縮至干，使水分含量小于10%。
[0026] 進(jìn)一步的，上述真空濃縮設(shè)備為旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器。
[0027] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明，但并不局限于此。
[0028] 實(shí)施例1 :從粗磷脂中分離純化糖脂 用量筒取粗磷脂（即大豆油脂下腳料）500ml (567g)于2000ml的大燒杯中，加入正己 烷750ml，不斷攪拌，直至粗磷脂完全溶解，然后轉(zhuǎn)入2000ml的分液漏斗中。配制50%(w/w) 的乙醇水溶液750ml，第一次倒入250ml乙醇水溶液至正己烷磷脂體系中，上下震動(dòng)5min， 然后靜置分層，取上層乙醇水溶液；第二次倒入250ml乙醇水溶液至正己烷磷脂體系中，上 下震動(dòng)5min，然后靜置分層，取上層乙醇水溶液；第三次倒入250ml乙醇水溶液至正己烷磷 脂體系中，上下震動(dòng)5min，然后靜置分層，取上層乙醇水溶液。收集乙醇水溶液于IOOOml的 圓底燒瓶中，利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，真空度小于-〇. 〇8Mpa，溫度60°C -80°C之間，濃縮至干，刮出 粉末稱(chēng)重。
[0029] 總糖及糖脂含量測(cè)定：稱(chēng)取O.Olg試樣于磨口圓底燒瓶中，移取25mLlmol/l KOH -乙醇溶液（無(wú)醛乙醇），水浴20min，滴加2 ml鹽酸，水浴加熱15min，加7ml I mol /I KOH 溶液，定容，離心分離。精密移取上層清液2 ml于10 ml離心管，80°C以下蒸干，加蒸餾水2 ml溶解。向離心管中加2ml菲林試劑，沸水浴加熱IOmin,離心5min，棄去上層清液，加2ml 硫酸-鑰酸銨顯色劑，稀釋?zhuān)ㄈ葜?00 ml，靜置30 min，用紫外分光光度計(jì)測(cè)定吸光度，并 在半乳糖標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出半乳糖含量。由于磷脂中主要糖脂為半乳糖脂，本方法主要計(jì)算 半乳糖脂含量。
[0030] 總糖含量計(jì)算如下： X =(aXbXVX100%)/m 式中：X為總糖含量；a為根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線查出的半乳糖質(zhì)量濃度，g/ml ;b為糖脂干重 (直接干燥法)，％ 為定容體積，ml。
[0031] 糖脂含量計(jì)算如下： 半乳糖脂=XX (4.41+2.99+2.73+2.5)/4 式中：X為總糖含量；4. 41=單半乳糖苷二酯相對(duì)分子質(zhì)量/半乳糖相對(duì)分子質(zhì)量； 2. 99=單半乳糖苷一酯相對(duì)分子質(zhì)量/半乳糖相對(duì)分子質(zhì)量；2. 73=雙半乳糖苷二酯相對(duì)分 子質(zhì)量/(半乳糖相對(duì)分子質(zhì)量X 2) ;2. 5=雙半乳糖苷一酯相對(duì)分子質(zhì)量/(半乳糖相對(duì) 分子質(zhì)量X2)。
[0032] 按照上述試驗(yàn)步驟，得到匯總結(jié)果見(jiàn)下表。

【權(quán)利要求】
1. 一種糖脂的分離純化的方法，其特征在于：該方法為：用正己烷將粗磷脂溶解，然后 用乙醇水溶液作為萃取劑進(jìn)行萃取，收集萃取液并除去萃取劑，即可獲得糖脂。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：粗磷脂正己烷溶解的料液質(zhì)量比為1 : (1. 2 ?1. 8)。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：萃取的次數(shù)為3?4次。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述乙醇水溶液的體積為正己烷的1? 1.5 倍。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的方法，其特征在于：所述乙醇水溶液為50?60%(v/v)的 乙醇水溶液。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述除去萃取劑的方法采用真空濃縮法。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1或6所述的方法，其特征在于：所述除去萃取劑的具體操作為：將萃 取液置于真空濃縮設(shè)備中，在真空度小于_〇. 〇8Mpa、溫度為60°C?80°C的條件下，濃縮至 干，使水分含量小于10°/。。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于：所述真空濃縮設(shè)備為旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器。
【文檔編號(hào)】C07H1/08GK104356172SQ201410547463
【公開(kāi)日】2015年2月18日 申請(qǐng)日期:2014年10月16日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月16日
【發(fā)明者】李小林, 龐水秀 申請(qǐng)人:廣州海莎生物科技有限公司