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從酵母發(fā)酵液中分離腺苷蛋氨酸的方法

文檔序號:3498270閱讀:541來源:國知局
從酵母發(fā)酵液中分離腺苷蛋氨酸的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種腺苷蛋氨酸的制備方法,屬于功能性食品及其制備方法領域。所述的從酵母發(fā)酵液中分離腺苷蛋氨酸的方法,包括以下步驟:將酵母發(fā)酵液過濾,將濾液離心,對收集底物酵母進行預處理,然后采用擠壓式細胞破碎法進行細胞破碎處理,離心得上清液,加入丙酮溶劑,過濾收集沉淀物,在低壓冷凍干燥,得腺苷蛋氨酸。本發(fā)明所述的方法,對酵母菌的破碎率能達到85%左右,腺苷蛋氨酸的提取率達75%以上,具有工藝簡單、可操作性強,適用于工業(yè)化生產(chǎn)以及回收率高等特點。
【專利說明】從酵母發(fā)酵液中分離腺苷蛋氨酸的方法

【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種腺苷蛋氨酸的制備方法,屬于功能性食品及其制備方法領域。

【背景技術】
[0002]腺苷蛋氨酸(SAM),又稱腺苷甲硫氨酸,是人體內最重要的甲基供體,該物質在體外能抑制反轉錄病毒(例如HIV)增值,對許多疾病的預防和治療及維護人體的健康都至關重要。1999年,美國FDA批準SAM作為保健品上市,迅速在美國成為最暢銷的營養(yǎng)品之一。近年來,國外已轉向肝臟疾病的治療,市場需求量不斷增加,具有巨大的市場前景。
[0003]SAM可以從微生物發(fā)酵提取、化學合成或酶促合成得到?;瘜W合成法有產(chǎn)率低、消旋性等明顯缺點而很少被實際應用;酶法合成盡管反應產(chǎn)物純度高,但成本太高,一般只用于合成同位素標記的SAM 些微生物可以通過細胞代謝,在培養(yǎng)基中存在一定量甲硫氨酸,便能夠在細胞內轉化和積累較高濃度的SAM。因此,通過微生物的發(fā)酵、提取純化SAM,是目前SAM的主要工業(yè)生產(chǎn)途徑。
[0004]SAM為胞內產(chǎn)物,從酵母中分離提純SAM是一個較為復雜的過程,約有45%的SAM存在于細胞質內的液泡中,其他存在于細胞質內。成熟的酵母菌細胞壁較厚,不易被破碎,而且SAM對溫度及酸堿度很敏感,容易分解或降解,因此尋找一種既能高效率破碎酵母細胞,又能有效保持SAM的穩(wěn)定性的方法,有利于提高SAM的收率,從而大大提高SAM的收率而降低生產(chǎn)成本。


【發(fā)明內容】

[0005]本發(fā)明旨在提供一種工藝簡單、可操作性強,適用于工業(yè)化生產(chǎn)以及回收率高的從酵母發(fā)酵液中分離腺苷蛋氨酸的方法。
[0006]本發(fā)明所述的從酵母發(fā)酵液中分離腺苷蛋氨酸的方法,包括以下步驟:
將酵母發(fā)酵液過濾,將濾液離心,對收集底物酵母進行預處理,然后采用擠壓式細胞破碎法進行細胞破碎處理,離心得上清液,加入丙酮溶劑,過濾收集沉淀物,在低壓冷凍干燥,得腺苷蛋氨酸。
[0007]優(yōu)選的,本發(fā)明所述的酵母預處理方法為在酵母菌中加入適量的乙酸乙酯,對酵母菌浸泡45分鐘。
[0008]更優(yōu)選的,本發(fā)明所述的擠壓式細胞破碎法為利用高壓氮氣對酵母菌液進行3次循環(huán)破碎,每次破碎時間為15-25min。
[0009]本發(fā)明所述的從酵母發(fā)酵液中分離腺苷蛋氨酸的方法,采用擠壓式細胞破碎法進行細胞破碎處理,擠壓式細胞破碎法破碎效果好,而且產(chǎn)熱量少,不會影響SAM的穩(wěn)定性和SAM合成酶的活力,而且對其它的干擾物質釋放量少,有利于SAM的分離和純化,但由于酵母細胞壁較堅韌,需要多次循環(huán)破碎才能達到理想效果。同時,成熟的酵母菌細胞壁較堅厚,為了提高破碎效率,在破碎之前,先用適量的乙酸乙酯對酵母菌進行45分鐘的浸泡處理。
[0010]本發(fā)明所述的方法,對酵母菌的破碎率能達到85%左右,腺苷蛋氨酸的提取率達75%以上,具有工藝簡單、可操作性強,適用于工業(yè)化生產(chǎn)以及回收率高等特點。

【具體實施方式】
[0011]實施例一:
將酵母發(fā)酵液過濾,將濾液離心,對收集底物酵母在破碎之前用適量的乙酸乙酯浸泡45分鐘,然后利用高壓氮氣對酵母菌液進行3次循環(huán)破碎,每次破碎時間為20min,離心得上清液,加入丙酮溶劑,過濾收集沉淀物,在低壓冷凍干燥,得腺苷蛋氨酸。經(jīng)測定,發(fā)明所述的方法,對酵母菌的破碎率能達到85%左右,腺苷蛋氨酸的提取率達78%。
[0012]實施例二:
將酵母發(fā)酵液過濾,將濾液離心,對收集底物酵母在破碎之前用適量的乙酸乙酯浸泡45分鐘,然后利用高壓氮氣對酵母菌液進行3次循環(huán)破碎,每次破碎時間為15min,離心得上清液,加入丙酮溶劑,過濾收集沉淀物,在低壓冷凍干燥,得腺苷蛋氨酸。經(jīng)測定,發(fā)明所述的方法,對酵母菌的破碎率能達到83%左右,腺苷蛋氨酸的提取率達75%。
【權利要求】
1.從酵母發(fā)酵液中分離腺苷蛋氨酸的方法,包括以下步驟: 將酵母發(fā)酵液過濾,將濾液離心,對收集底物酵母進行預處理,然后采用擠壓式細胞破碎法進行細胞破碎處理,離心得上清液,加入丙酮溶劑,過濾收集沉淀物,在低壓冷凍干燥,得腺苷蛋氨酸。
2.如權利要求1所述的從酵母發(fā)酵液中分離腺苷蛋氨酸的方法,其特征在于所述的酵母預處理方法為在酵母菌中加入適量的乙酸乙酯,對酵母菌浸泡45分鐘。
3.如權利要求1所述的從酵母發(fā)酵液中分離腺苷蛋氨酸的方法,其特征在于所述的擠壓式細胞破碎法為利用高壓氮氣對酵母菌液進行3次循環(huán)破碎,每次破碎時間為15-25min。
【文檔編號】C07H19/167GK104387432SQ201410569908
【公開日】2015年3月4日 申請日期:2014年10月23日 優(yōu)先權日:2014年10月23日
【發(fā)明者】李勇, 劉文斌 申請人:西安米億生物科技有限公司
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