一種次血紅素二肽及其制備方法和用途
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明屬于生物技術(shù)的領(lǐng)域,特別涉及一種作為辣椒紅色素穩(wěn)定劑的次血紅素二肽(Deuterohemin-β-Ala-His,DhHP-2)及其制備方法。本發(fā)明經(jīng)過(guò)優(yōu)選的次血紅素二肽作為辣椒紅色素穩(wěn)定劑具有成本低、穩(wěn)定性好、疏水性強(qiáng)、保護(hù)作用強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),具有較好的應(yīng)用前景。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種次血紅素二肽及其制備方法和用途
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物技術(shù)的領(lǐng)域,特別涉及一種作為辣椒紅色素穩(wěn)定劑的次血紅素二 肽及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 辣椒紅色素(Capsicum red pigment)又名辣紅素,是一種成熟紅辣椒中的提取 物,是類(lèi)胡蘿卜素類(lèi)色素的一種,其主要的成分是辣椒紅素(Capsanthin)和辣椒玉紅素 (Capsonrubin),占總量50 %?60%,如結(jié)構(gòu)式I。
[0003]
【權(quán)利要求】
1. 一種次血紅素二肽,是次血紅素的羧基與二肽分子中丙氨酸殘基上的氨基以酰胺鍵 相連,其特征在于,所述的二肽,鏈接方式依次為a-Ala殘基、His殘基。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的次血紅素二肽,其特征在于,具體結(jié)構(gòu)式是:
3. -種權(quán)利要求1的次血紅素二肽的制備方法,具體過(guò)程是次血紅素二肽的固相合 成: ① 樹(shù)脂溶脹:稱(chēng)取Rink-NH2樹(shù)脂,加入二氯甲烷溶脹2h,抽濾,用二甲基甲酰胺洗滌 Rink-NH2樹(shù)脂3次;二氯甲烷和二甲基甲酰胺用量按照每5mmolRink-NH2樹(shù)脂分別加入 100ml計(jì)算; ② 保護(hù):加入二氯甲烷2倍體積的20%哌啶/二甲基甲酰胺溶液(v/v),于室溫震蕩 30min,抽濾,用二甲基甲酰胺洗滌Rink-NH2樹(shù)脂3次,用顯色劑檢測(cè)氨基脫保護(hù)情況,當(dāng)樹(shù) 脂顆粒全部變?yōu)樗{(lán)色為脫保護(hù)完全; ③ 連接氨基酸:將Fmoc-a-Ala-OH、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷、 1-羥基苯并三唑、N-甲基嗎啉和Rink-NH2樹(shù)脂按摩爾比為2. 5 : 2. 5 : 2. 5 : 2. 5 : 1 依次加入反應(yīng)器中,加入與二氯甲烷等體積的二甲基甲酰胺室溫震蕩lh,抽濾,用二甲基甲 酰胺洗滌樹(shù)脂3次,用顯色劑檢測(cè)氨基酸連接情況,樹(shù)脂顆粒全部變?yōu)辄S色即反應(yīng)完全; ④ 重復(fù)步驟②和用Fmoc-His(MMt) -〇H替換Fmoc-a-Ala-〇H重復(fù)步驟③; ⑤ 重復(fù)步驟②和用次血紅素替換Fmoc_a-Ala_0H重復(fù)步驟③; ⑥ 切割和沉淀:加入二氯甲烷2倍體積的切割試劑,室溫反應(yīng)3h,將切割液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā); 將所得殘留液在二氯甲烷5倍體積的乙醚中沉淀,離心,收集,得次血紅素二肽粗品;所述 的切割試劑,按體積計(jì)由96. 0%三氟乙酸、2. 0%三異丙基硅烷和2. 0%超純水組成; ⑦ 純化:將粗品用反相C18制備柱純化,流動(dòng)相:0. 1 %三氟乙酸/25?85%乙腈/水梯 度洗脫,接收主峰,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),凍干,得產(chǎn)物次血紅素二肽純品。
4. 一種權(quán)利要求1的次血紅素二肽的用途,作為辣椒紅色素穩(wěn)定劑。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的次血紅素二肽用途,其特征在于,次血紅素二肽的添加量是 次血紅素二肽與辣椒紅色素質(zhì)量比為0.4?1.0 : 100。
6. 根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的次血紅素二肽的用途,其特征在于,次血紅素二肽的添加 量是次血紅素二肽與辣椒紅色素質(zhì)量比為0.4?0.6 : 100。
【文檔編號(hào)】C07K5/062GK104478990SQ201410649484
【公開(kāi)日】2015年4月1日 申請(qǐng)日期:2014年11月15日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月15日
【發(fā)明者】王麗萍, 修志明, 于欣冉, 李惟 申請(qǐng)人:吉林大學(xué)