用于檢測次氯酸的熒光探針的制備及其應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及用于檢測次氯酸的熒光探針的制備及其應用。具體地，本發(fā)明的熒光探針為一類2-苯并噻唑啉苯酚類化合物，其可作為熒光探針用于次氯酸/次氯酸根的檢測。這類探針可實現(xiàn)如下技術效果中的至少一個：高靈敏度高選擇性地識別次氯酸/次氯酸根；可以瞬時對次氯酸/次氯酸根實現(xiàn)響應；可以實現(xiàn)對次氯酸/次氯酸根的實時檢測；性質穩(wěn)定，可以長期保存使用；有利于在生理水平條件下對次氯酸/次氯酸根進行檢測；以及具有較強的抗干擾能力。
【專利說明】用于檢測次氯酸的熒光探針的制備及其應用

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及用于檢測次氯酸的熒光探針的制備及其應用。具體地，本發(fā)明的檢測 次氯酸的熒光探針為2-苯并噻唑啉苯酚類化合物，其可在生理水平條件下對次氯酸進行 實時高靈敏高選擇性識別應用，或者其可測定生物樣品和水中次氯酸/次氯酸根的濃度。

【背景技術】
[0002] 次氯酸（HClO)或次氯酸根（CKT)是活性氧簇中極其重要的一種，它從在生物體 內抵抗病原體入侵到我們日常生活中的飲用水消毒中都起著關鍵的作用。在生物體內，當 病原體入侵時，吞噬體中髓過氧化物酶（MPO)催化過氧化氫和氯離子產(chǎn)生次氯酸根來消滅 病原體維持生物體的正常運行。此外，次氯酸根還能調節(jié)蛋白質、DNA和RNS等各種生物分 子的化學變化。在我們日常生活中，次氯酸根由于其強氧化性被廣泛用作消毒劑和漂白劑， 比如供應水的消毒、游泳池的消毒等，因此，次氯酸根充斥于我們生活的環(huán)境中。
[0003] 然而，無論是體內的CKT過量產(chǎn)生還是從體外過量攝取CKT都是對人體健康的重 大威脅：由于CKT高反應活性及無針對性，當體內過量的CKT產(chǎn)生時它會像摧毀病原體微 生物那樣進攻宿主細胞，造成宿主組織的損害，引起相關聯(lián)的一系列疾病，例如腎疾、動脈 硬化、炎癥甚至癌癥。另外，當環(huán)境中CKT及其生成物被人體攝入后，也會帶來一系列的不 良反應。例如，用氯消毒后的水中或其它環(huán)境中殘留生成的氯酸鹽及亞氯酸鹽會引起胃部 不適等，更嚴重的是，存在產(chǎn)生劇毒的有機消毒副產(chǎn)物（DBPS)比如三氯甲烷和氯乙酸的潛 在威脅。因此，無論是在活細胞或是環(huán)境中，我們都需要發(fā)展一種能夠快速檢測CKT的簡 單高效手段。
[0004] 到目前為止，在滴定法、比色法、電化學檢測法、色譜法和熒光探針法等眾多 CKT檢測方法中，熒光探針法因具有操作簡單、高靈敏度和能夠實現(xiàn)實時原位成像分析等 優(yōu)點而成為研宄人員關注的焦點。然而不幸的是，目前報道的熒光探針仍存在眾多缺陷，如 靈敏度低、選擇性差、響應速度慢以及合成復雜等。為了進一步揭示CKT的生理功能及致 病機理，發(fā)展高靈敏度、高選擇性、合成簡單且能夠實時響應的熒光探針是本領域技術人員 急需解決的問題。


【發(fā)明內容】

[0005] 本領域急需一種高靈敏度、高選擇性且制備簡單的實時響應次氯酸的熒光探針， 從而能夠有效檢測特別是能夠在生理水平條件下檢測次氯酸。為此，本發(fā)明合成了一類新 穎的次氯酸熒光探針，其合成簡單、穩(wěn)定性好、和/或靈敏度高、和/或選擇性高，和/或能 夠快速識別次氯酸。本發(fā)明的探針可在生理水平條件下進行次氯酸的測定。
[0006] 具體而言，本發(fā)明提供了如下次氯酸熒光探針的合成方法：其為2-苯并噻唑啉苯 酚類化合物，其結構如下：
[0007]

【權利要求】
1. 化合物的制備方法，其中包括將一定摩爾比的鄰氨基苯硫酚類化合物和水楊醛類化 合物溶于有機試劑中，然后高溫下加熱一段時間，反應結束后去除有機溶劑，最后將殘留液 進行柱色譜分離，其中所述的化合物具有以下結構：
上式中成，r2,r3,r4,r5,r6, &和r8獨立地選自氫原子，直鏈或支鏈烷基，直鏈或支鏈 烷氧基，磺酸基，酯基，羧基；Ri，R2,R3,R4,R5,R6,R7,R8可以相同或不同。
2. 根據(jù)權利要求1的方法，其中所述的化合物為
3. 根據(jù)權利要求1或2的方法，其中反應溫度是60°C?140°C。
4. 根據(jù)權利要求1或2的方法，其中反應溫度是120°C。
5. 根據(jù)權利要求1或2的方法，其中反應時間是8h?10h。
6. 根據(jù)權利要求1或2的方法，其中反應溶劑是甲醇、乙醇、異丙醇、正丁醇、乙腈、甲苯 和二甲苯等有機試劑中的一種或兩種。
7. 根據(jù)權利要求1或2的方法，其中鄰氨基苯硫酚類化合物與水楊醛類化合物的摩爾 比為1 :1至1 :5。
8. 根據(jù)權利要求1或2的方法，其中所述的鄰氨基苯硫酚類化合物是鄰氨基苯硫酚，所 述的水楊醛類化合物是水楊醛。
9. 根據(jù)權利要求1或2的方法，其中將1 :1至1 :5的鄰氨基苯硫酚和水楊醛溶于正丁 醇和甲苯的混合溶劑中，然后以120°C恒溫加熱10h，反應結束后旋蒸得到粗產(chǎn)品，然后使 用二氯甲烷進行柱色譜分離獲得所述純凈化合物。
10. 檢測樣本（例如血液樣本、自來水等）中次氯酸濃度的方法，其包括本發(fā)明的探針 與待測樣本接觸的步驟，優(yōu)選地，本發(fā)明的檢測方法在緩沖液中進行（例如在磷酸鹽緩沖 液中）；任選地，在接觸步驟之后（例如1 一 2分鐘之后）測量液體的熒光光譜。
【文檔編號】C07D277/66GK104478826SQ201410784125
【公開日】2015年4月1日 申請日期:2014年12月16日 優(yōu)先權日:2014年12月16日
【發(fā)明者】徐祖鈞, 李昌旺 申請人:山東省章丘市第四中學