一種高純度酪醇的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種高純度酪醇的制備方法,包括以下步驟：提取步驟，取紅景天藥材，加水進(jìn)行煎煮、超聲或微波提取，提取液進(jìn)行減壓濃縮，獲得第一提取物濃縮液；純化，將第一提取物濃縮液采用醇沉法進(jìn)行兩次醇沉，過(guò)濾獲得第二提取物濃縮液，再上聚酰胺柱進(jìn)行水洗脫，獲得水洗脫液進(jìn)行濃縮，得第三提取物濃縮液；精制，將第三提取物濃縮液上大孔樹(shù)脂柱進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮后獲得第四提取物濃縮液，經(jīng)過(guò)萃取結(jié)晶獲得純度大于80％的酪醇。本發(fā)明方法獲得酪醇純度較高；工藝操作過(guò)程簡(jiǎn)單，適合工業(yè)化生產(chǎn)；死吸附較少，酪醇轉(zhuǎn)移率高，且材料可以重復(fù)利用，節(jié)能環(huán)保；僅用水、乙醇和乙酸乙酯，均屬于低毒或無(wú)毒試劑，對(duì)操作人員身體危害小。
【專利說(shuō)明】一種高純度酪醇的制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種高純度酪醇的制備方法，屬于酪醇提取分離方法領(lǐng)域。

【背景技術(shù)】
[0002] 酪醇是一種天然的抗氧化劑，是紅景天藥材中的主要活性成分之一，是苯乙醇的 一種衍生物。其具有極強(qiáng)的抗心肌缺血、縮小心肌梗死面積，減少心肌細(xì)胞凋亡數(shù)，降低缺 血再灌注動(dòng)物室性心動(dòng)過(guò)速和室顫的發(fā)生率及嚴(yán)重度。同時(shí)還能提高喂高膽固醇飼料的敲 除低密度脂蛋白受體小鼠的抗氧化能力，并降低被升高的血膽固醇和甘油三酯水平。
[0003] 酪醇可以顯著提高柯薩奇病毒性心肌炎小鼠心臟中的超氧化物歧化酶和谷胱甘 肽過(guò)氧化物酶活性，降低血清乳酸脫氫酶活性和過(guò)氧化脂質(zhì)含量，對(duì)心臟有很好的保護(hù)作 用，臨床上主要用于治療心血管方面疾病。
[0004] 目前提取分離酪醇的方法主要有：
[0005] 高山紅景天中紅景天苷、苷元酪醇、香豆素的生產(chǎn)工藝（王化田，東北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩 士論文）公開(kāi)了一種紅景天中酪醇提取方法，具體是：采用超臨界萃取后的粉渣，用40%乙 醇浸泡提取，提取液過(guò)濾濃縮，濃縮液上大孔樹(shù)脂，乙醇-二氯甲烷（3:7)洗脫后，濃縮至 干，少量蒸餾水溶解，過(guò)濾，濃縮至小體積，真空凍干，得到紅景天苷和酪醇的提取物，其中 紅景天苷和酪醇含量之和約為80 %，收率為0. 27 %。該方法提取過(guò)程中大量使用了二氯甲 烷，其毒性較大，導(dǎo)致產(chǎn)品存在安全隱患，且酪醇收率較低，極大的浪費(fèi)藥材。
[0006] 橄欖多酚中酪醇等成分的分離純化研宄（黃北川.西北大學(xué)碩士論文）公開(kāi)了一 種酪醇提取分離方法，具體是：采用了超聲提取，提取條件為：溫度為60,時(shí)間為20min，料 液比為1:25。提取液采用硅膠柱層析法分離酪醇，分出的酪醇純度為85. 81 %。用氧化鋁 吸附法分離酪醇純度為40%。該方法提取酪醇是采用硅膠柱層析法進(jìn)行分離，由于硅膠柱 死吸附較嚴(yán)重，導(dǎo)致酪醇損失較多，且產(chǎn)業(yè)化過(guò)程中會(huì)用到大量的有機(jī)溶劑，對(duì)操作工人身 體不利；由于大量的使用有機(jī)溶劑且分離過(guò)程使用的硅膠柱無(wú)法重復(fù)利用，導(dǎo)致酪制備過(guò) 程中成本較高。
[0007] 紅景天苷和紅景天苷元標(biāo)準(zhǔn)品的制備方法研宄（丁朝武.分析測(cè)試學(xué) 報(bào)，1997, 16(1) :38-41)公開(kāi)了酪醇標(biāo)準(zhǔn)品的制備方法，其具體是采用了超聲提取，提取液 加醋酸鉛溶液除鞣質(zhì)、黃酮等，后用活性炭吸附除色素，最后經(jīng)膜過(guò)濾后用制備色譜柱進(jìn)行 分離，得到的酪醇純度為97%。該方法采用制備色譜來(lái)進(jìn)行分離，僅僅只能適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室的分 離，無(wú)法實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化。
[0008] 紅景天中紅景天苷和酪醇提取工藝研宄（李辰，陳東生，陳娟等.中藥 材，2006, 29 (11) : 1239-1241)公開(kāi)了酪醇提取工藝，其是采用了 80 %乙醇回流提取，溶劑 用量為6倍，提取2次，每次2小時(shí)。賀美艷，張小龍.唐古特發(fā)表的紅景天提取工藝研宄 (中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，2012, 29 (6) : 495-497)公開(kāi)了酪醇提取方法，其是采用了 8倍量50% 乙醇80°C時(shí)回流提取，提取2次，每次1小時(shí)。馬濤，熊春媚，張忠華發(fā)表的正交試驗(yàn)法提取 云南大花紅景天中的紅景天苷和酪醇（昆明師范高等專科學(xué)校學(xué)報(bào)，2006, 28(4) : 14-16) 公開(kāi)了酪醇的提取方法，其實(shí)采用了 65°C時(shí)用90%甲醇或無(wú)水甲醇超聲提取，提取時(shí)間為 15分鐘，料液比為1:20。得到的酪醇含量為0.015%。專利名稱為一種乙醇為夾帶劑的苷 元酪醇C02超臨界萃取方法開(kāi)了一種提取酪醇的方法，其實(shí)采用超臨界萃取的方法提取酪 醇，得到酪醇的提取率為1. 637%。這些方法均是初步的提取研宄，其分別采用了回流提取、 超聲提取和超臨界萃取，沒(méi)有進(jìn)一步分離純化酪醇，因此純度均較低。
[0009] 專利名稱名稱為一種提純橄欖多酚粗品中酪醇的方法公開(kāi)了另一種提取酪醇的 方法，具體是將橄欖多酚粗粉用酸水溶液溶解，將氯化鈉加入上述橄欖多酚溶液中，制得食 鹽飽和的橄欖多酚溶液；用乙酸乙酯萃取食鹽飽和的橄欖多酚溶液中的酪醇；除去乙酸乙 酯萃取相中的水分。液相法測(cè)得乙酸乙酯相中酪醇含量為70%-90%。該方法得到的酪醇 純度較低，其所述70% -90%為采用峰面積歸一化法所得，真實(shí)純度應(yīng)該是50% -70%。 [0010] 專利名稱為酪醇及酪醇副產(chǎn)物紅景天苷植物提取物及其制劑與用途公開(kāi)了另外 一種提取酪醇的方法，具體是將原材料用乙醇回流、浸漬或滲漏提取，收集提取液，濃縮至 無(wú)醇味，加水冷藏，去沉淀，水溶液用酸性溶液調(diào)PH至2-4,冷藏，去沉淀，澄清液上弱極 性大孔樹(shù)脂，先用水洗脫至流出液呈中性，再以堿性溶液洗脫大孔樹(shù)脂，然后再以去離子 水洗至中性，再以酸性溶液洗脫，再以去離子水洗脫至偏中性，以上洗脫液均棄去；再以 5% -30%乙醇洗脫，收集洗脫液，洗脫液濃縮，干燥后用有機(jī)溶劑溶解，去除不溶物，澄清液 濃縮，加沉淀用有機(jī)溶劑，充分?jǐn)嚢?，冷藏，去沉淀，取澄清液濃縮后，加入層析硅膠進(jìn)行拌 樣，蒸干，上硅膠層析柱；采用有機(jī)溶劑或者混合有機(jī)溶劑進(jìn)行除雜和洗脫或者梯度洗脫， 采用薄層檢測(cè)，收集主斑點(diǎn)為酪醇的洗脫液，回收洗脫液，得固體物質(zhì)以重結(jié)晶有機(jī)溶劑進(jìn) 行重結(jié)晶，即得。該方法操作復(fù)雜繁瑣，分離純化時(shí)間長(zhǎng)，且硅膠柱死吸附嚴(yán)重，酪醇損失較 多；洗脫液用薄層來(lái)監(jiān)測(cè)酪醇，收集主斑點(diǎn)為酪醇的洗脫液合并，濃縮，這種方式不適用與 大規(guī)模的生產(chǎn)上；由于硅膠柱無(wú)法重復(fù)利用，成本較高，并且不利于環(huán)保及節(jié)能減排。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0011] 為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種高純度 酪醇的制備方法。
[0012] 本發(fā)明解決上述技術(shù)問(wèn)題的技術(shù)方案如下：一種高純度酪醇的制備方法，包括以 下步驟：步驟（1):提取，取紅景天藥材，加水進(jìn)行煎煮、超聲或微波提取，提取液進(jìn)行減壓 濃縮，獲得第一提取物濃縮液；步驟（2):純化，將步驟（1)制備的第一提取物濃縮液采用醇 沉法進(jìn)行兩次醇沉，過(guò)濾獲得第二提取物濃縮液，再將第二提取物濃縮液上聚酰胺柱進(jìn)行 水洗脫，獲得水洗脫液進(jìn)行濃縮，獲得第三提取物濃縮液；步驟（3)精制，將步驟（2)獲得的 第三提取物濃縮液上大孔樹(shù)脂柱進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮后獲得第四提取物濃縮液，所 述第四提取物濃縮液經(jīng)過(guò)萃取結(jié)晶獲得純度大于80%的酪醇。
[0013] 在上述技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，本發(fā)明還可以做如下改進(jìn)。
[0014] 本發(fā)明如上所述一種高純度酪醇的制備方法，進(jìn)一步，步驟（1)中所述紅景天藥 材為按照中醫(yī)藥分類劃分的細(xì)粉。
[0015] 本發(fā)明如上所述一種高純度酪醇的制備方法，進(jìn)一步，所述煎煮、超聲或微波提 取提取條件為：提取1?3次，加水量為5?20倍，提取時(shí)間為2?60分鐘。
[0016] 本發(fā)明如上所述一種高純度酪醇的制備方法，進(jìn)一步，所述煎煮提取條件為提取 三次后混合，每次加水量為10倍，煎煮時(shí)間為2小時(shí)，溫度為100°C ;所述超聲提取條件為： 提取三次后混合，每次加水量為10倍，每次超聲45分鐘；所述微波提取條件為提取三次后 混合，每次提取加10倍水量，每次微波5分鐘，其中微波功率為中低檔到高檔。優(yōu)選為微波 提取提取三次后混合，每次提取加10倍水量，每次微波5分鐘，微波功率為435w?450w，微 波提取紅景天中的酪醇效率高，方法簡(jiǎn)單易操作且提取時(shí)間短，縮短工藝流程。
[0017] 本發(fā)明如上所述一種高純度酪醇的制備方法，進(jìn)一步，步驟（2)所述第一提取物 濃縮液50°C的相對(duì)密度為1. 05-1. 35 ;所述第一提取物濃縮液采用醇沉法進(jìn)行兩次醇沉， 其中第一次醇沉乙醇含量達(dá)到50% -70wt%;第二次醇沉乙醇含量達(dá)到75% -85wt%;醇沉 時(shí)間為12-48小時(shí)。
[0018] 本發(fā)明如上所述一種高純度酪醇的制備方法，進(jìn)一步，所述第一次醇沉乙醇含量 達(dá)到50 % -70wt %，靜置冷藏24小時(shí)；第二次醇沉乙醇含量達(dá)到75 % -85wt %，靜置冷藏24 小時(shí)。第一次醇沉可以使得植物蛋白，多糖，淀粉，鞣質(zhì)等形成沉淀；第二次醇沉可進(jìn)一步除 去多糖等高分子雜質(zhì)，這些雜質(zhì)除去后會(huì)改善溶液的澄明度。
[0019] 本發(fā)明如上所述一種高純度酪醇的制備方法，進(jìn)一步，步驟（2)所述第二提取物 濃縮液上聚酰胺柱進(jìn)行水洗脫是采用10倍柱體積水進(jìn)行洗脫；其中所述聚酰胺柱內(nèi)的聚 酰胺粉粒徑為14?120目；紅景天藥材與聚酰胺柱內(nèi)的聚酰胺粉的重量比例2:1?1:4。 使用上述酰胺柱的工藝流程可以有效去除鞣質(zhì)。
[0020] 本發(fā)明如上所述一種高純度酪醇的制備方法，進(jìn)一步，所述聚酰胺柱內(nèi)的聚酰胺 粉粒徑為60?80目。聚酰胺的粒徑過(guò)大，使用的聚酰胺的量越多。
[0021] 本發(fā)明如上所述一種高純度酪醇的制備方法，進(jìn)一步，步驟（3)中所述大孔樹(shù)脂 柱為SP825。
[0022] 本發(fā)明如上所述一種高純度酪醇的制備方法，進(jìn)一步，所述SP825與紅景天藥材 的重量比例為1:1以上。
[0023] 本發(fā)明如上所述一種高純度酪醇的制備方法，進(jìn)一步，所述SP825與紅景天藥材 的重量比例2:1。采用SP825與紅景天藥材的重量比例為2:1可以大大減少酪醇的損失，提 高大孔樹(shù)脂對(duì)酪醇的吸附量。
[0024] 本發(fā)明如上所述一種高純度酪醇的制備方法，進(jìn)一步，步驟（3)中所述第三提 取物濃縮液上大孔樹(shù)脂柱進(jìn)行洗脫的具體步驟是：預(yù)處理后大孔樹(shù)脂裝柱，按照大孔樹(shù)脂 與紅景天藥材的比2 :1加入第三提取物濃縮液，先用水洗脫至洗脫液近乎無(wú)色，再用大 于5%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫的洗脫液；其中所述第三提取物濃縮液50°C的相對(duì)密度為 1. 15-1. 2。更優(yōu)選的，預(yù)處理后大孔樹(shù)脂裝柱，按照大孔樹(shù)脂與紅景天藥材的比2 :1加入第 三提取物濃縮液，先用水洗脫至洗脫液近乎無(wú)色，再用10 %?25wt %乙醇洗脫；所述10? 25wt%的乙醇的用量為21?25倍柱體積。
[0025] 本發(fā)明如上所述一種高純度酪醇的制備方法，進(jìn)一步，步驟（3)中大孔樹(shù)脂洗脫 的條件是：所述第三提取物濃縮液中的藥液濃度為〇. 5-2. Og/ml，大孔樹(shù)脂的徑高比1? 1:15,其中所述濃度為紅景天生藥材/第三提取物濃縮液體積比，洗脫流速l-8BV/h時(shí)，所 述第三提取物濃縮液中的藥液濃度為紅景天的質(zhì)量與所述第三提取物濃縮液的體積比。
[0026] 本發(fā)明如上所述一種高純度酪醇的制備方法，進(jìn)一步，徑高比為1:10,第三提取 物濃縮液中的藥液濃度為I. 〇g/ml，洗脫速度為4BV/h。徑高比對(duì)酪醇純度有顯著性影響， 采用上述的徑高比和藥液濃度及洗脫速度可以大大提高酪醇純度。
[0027] 本發(fā)明如上所述一種高純度酪醇的制備方法，進(jìn)一步，步驟（3)所述第四提取物 濃縮液中的藥液濃度為50g-lg/ml，所述第四提取物濃縮液中的藥液濃度為每Iml第四提 取物濃縮液含50g紅景天藥材到每Iml第四提取物濃縮液含Ig紅景天藥材。
[0028] 本發(fā)明如上所述一種高純度酪醇的制備方法，進(jìn)一步，所述萃取結(jié)晶是：向所述 第四提取物濃縮液加入與所述第四提取物濃縮液相對(duì)應(yīng)量的乙酸乙酯，萃取1-10次，合并 萃取液，減壓回收溶劑至每ml含酪醇20mg至200mg，冷藏，析晶，獲得純度大于80%的酪 醇。經(jīng)過(guò)大孔樹(shù)脂分離得到的酪醇經(jīng)過(guò)該步驟的萃取結(jié)晶步驟可以有效提高酪醇的純度。
[0029] 本發(fā)明在一個(gè)優(yōu)選的具體是實(shí)施方案，具體包括以下步驟：
[0030] 步驟（1)提取，取紅景天藥材，按照藥典要求研磨成細(xì)粉，加水進(jìn)行微波提取，提 取液進(jìn)行減壓濃縮，獲得第一提取物濃縮液。微波提取優(yōu)選功率為100?800W功率提取，優(yōu) 選細(xì)粉粒徑為30目的粉末，微波提取時(shí)間為5?20分鐘，優(yōu)選為10分鐘；加水量為5?20 倍，優(yōu)選為10倍，提取次數(shù)為1?3次，優(yōu)選為3次，獲得50°C的相對(duì)密度為1. 05-1. 35的 第一提取物濃縮液；步驟（2):純化，將步驟（1)采用醇沉法進(jìn)行第一次醇沉，即在第一提取 物濃縮液中，加入95%的乙醇的量使得第一提取物濃縮液中乙醇含量達(dá)到50% -70wt%， 優(yōu)選為70%，常規(guī)冷藏條件下靜置12小時(shí)以上，優(yōu)選靜置24小時(shí)，然后過(guò)濾，濾液回收乙 醇并濃縮，濃縮液進(jìn)行第二次醇沉，再加入95%乙醇，使其含量達(dá)75% -85 %，優(yōu)選含量到 80%，進(jìn)行二次醇沉淀，靜置冷藏24小時(shí)，然后過(guò)濾，獲得第二提取物濃縮液；
[0031] 將60-80目聚酰胺粉加水浸泡24小時(shí)后，裝入3根相同內(nèi)徑的玻璃柱，用水處理 至流出液不顯渾濁，再將第二提取物濃縮液上聚酰胺柱進(jìn)行水洗脫，獲得水洗脫液進(jìn)行濃 縮，獲得第三提取物濃縮液，其中紅景天藥材與聚酰胺柱內(nèi)的聚酰胺粉的重量比例2:1? 1:4,優(yōu)選為2:1 ;步驟（3)精制，將步驟（2)獲得的第三提取物濃縮液中的藥液濃度為 0. 5-2. Og/ml，優(yōu)選藥液濃度為I. Og/ml，大孔樹(shù)脂的徑高比1?1:15,優(yōu)選徑高比為1:10， 其中所述濃度為生藥材/藥液體積比，洗脫流速l_8BV/h，優(yōu)選洗脫速度為4BV/h上大孔樹(shù) 脂柱進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮后獲得第四提取物濃縮液，所述第四提取物濃縮液中藥液 濃度為50g-lg/ml (即每Iml溶液含50g生藥材到每Iml含Ig生藥材），加入對(duì)應(yīng)量的乙酸 乙酯，萃取1-10次，合并萃取液，減壓回收溶劑至每ml含酪醇200mg至20mg，放冷，析晶，即 獲得純度大于92 %的酪醇。
[0032] 本發(fā)明方法使用的紅景天可以選擇高山紅景天，圣地紅景天、大花紅景天、狹葉紅 景天、長(zhǎng)鞭紅景天、薔薇紅景天、唐古特紅景天、大紫紅景天、四裂紅景天、大株紅景天中的 一種或任意幾種。
[0033] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有如下的有益效果：
[0034] (1)得本發(fā)明方法獲得酪醇純度較高，可達(dá)95%以上，可以直接用治療心血管方 面疾病的藥物；
[0035] (2)工藝操作過(guò)程簡(jiǎn)單，適合工業(yè)化生產(chǎn)；
[0036] (3)本發(fā)明方法所用由于采用了聚酰胺及大孔樹(shù)脂作為分離材料，死吸附較少，酪 醇轉(zhuǎn)移率高，且材料可以重復(fù)利用，節(jié)能環(huán)保；
[0037] (4)本工藝僅用水、乙醇和乙酸乙醋，均屬于低毒或無(wú)毒試劑，對(duì)操作人員身體危 害小。

【具體實(shí)施方式】
[0038] 結(jié)合以下實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的原理和特征進(jìn)行描述，所舉實(shí)例只用于解釋本發(fā)明， 并非用于限定本發(fā)明的范圍。
[0039] 以下具體實(shí)施例中使用的原料為大花紅景天、大株紅景天，高山紅景天，其中大花 紅景天中酪醇含量為0. 73%，大株紅景天中酪醇含量為0. 65%，高山紅景天中酪醇含量為 0. 47%。。酪醇含量檢測(cè)主要是用HPLC法，具體參數(shù)如下：
[0040] 色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水 (10:90)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為275nm。理論塔板數(shù)按酪醇峰計(jì)不應(yīng)低于2000。
[0041] 對(duì)照品洛液的制備
[0042] 取酪醇對(duì)照品適量，精密稱定，加水制成每Iml含0. 4mg的溶液，即得。
[0043] 供試品溶液的制備
[0044] 取本品粉末（過(guò)三號(hào)篩）約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇 10ml，密塞，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再精密稱定，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻， 濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。
[0045] 測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10um，注入液相色譜儀，測(cè)定，即 得。
[0046] 實(shí)施例1
[0047] 對(duì)大花紅景天中酪醇提取方法中紅景天藥材粒度、提取方法、提取條件等分別進(jìn) 行考察
[0048] 1、紅景天藥材粒度的考察
[0049] 取大花紅景天藥材5份，每份100g，其中4份分別按《中國(guó)藥典》要求粉粹成最粗 粉、粗粉、中粉、細(xì)粉，加入10倍量水微波提取3次，每次10分鐘，合并提取液，檢測(cè)其中酪 醇含量，結(jié)果見(jiàn)下表1 :
[0050] 表1.紅景天粉粹程度對(duì)提取率的影響
[0051]

【權(quán)利要求】
1. 一種高純度酪醇的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： 步驟（1):提取，取紅景天藥材，加水進(jìn)行煎煮、超聲或微波提取，提取液進(jìn)行減壓濃 縮，獲得第一提取物濃縮液； 步驟（2):純化，將步驟（1)制備的第一提取物濃縮液采用醇沉法進(jìn)行兩次醇沉，過(guò)濾 獲得第二提取物濃縮液，再將第二提取物濃縮液上聚酰胺柱進(jìn)行水洗脫，獲得水洗脫液進(jìn) 行濃縮，獲得第三提取物濃縮液； 步驟（3)精制，將步驟（2)獲得的第三提取物濃縮液上大孔樹(shù)脂柱進(jìn)行洗脫，收集洗 脫液，濃縮后獲得第四提取物濃縮液，所述第四提取物濃縮液經(jīng)過(guò)萃取結(jié)晶獲得純度大于 80 %的酪醇。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種高純度酪醇的制備方法，其特征在于，所述煎煮、超聲或微 波提取條件為：提取1?3次，加水量為5?20倍，提取時(shí)間為2?60分鐘。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述一種高純度酪醇的制備方法，其特征在于，所述煎煮提取條件 為提取三次后混合，每次加水量為10倍，煎煮時(shí)間為2小時(shí)，溫度為100°C ;所述超聲提取 條件為：提取三次后混合，每次加水量為10倍，每次超聲45分鐘；所述微波提取條件為提 取三次后混合，每次提取加10倍水量，每次微波5分鐘。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)所述一種高純度酪醇的制備方法，其特征在于，步驟 (2) 所述第一提取物濃縮液50°C的相對(duì)密度為1. 05-1. 35 ;所述第一提取物濃縮液采用醇 沉法進(jìn)行兩次醇沉，其中第一次醇沉乙醇含量達(dá)到50% -70% ;第二次醇沉乙醇含量達(dá)到 75% -85% ;醇沉?xí)r間為12-48小時(shí)。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)所述一種高純度酪醇的制備方法，其特征在于，所 述第一次醇沉乙醇含量達(dá)到50 % -70%，靜置冷藏24小時(shí)；第二次醇沉乙醇含量達(dá)到 75% -85%，靜置冷藏24小時(shí)。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)所述一種高純度酪醇的制備方法，其特征在于，步驟（2) 所述第二提取物濃縮液上聚酰胺柱進(jìn)行水洗脫是采用10倍柱體積水進(jìn)行洗脫；其中所述 聚酰胺柱內(nèi)的聚酰胺粉粒徑為14?120目；紅景天藥材與聚酰胺柱內(nèi)的聚酰胺粉的重量比 例 2:1 ?1:4。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述一種高純度酪醇的制備方法，其特征在于，所述聚酰胺柱內(nèi)的 聚酰胺粉粒徑為60?80目。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)所述一種高純度酪醇的制備方法，其特征在于，步驟（3) 中所述大孔樹(shù)脂柱為SP825。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述一種高純度酪醇的制備方法，其特征在于，所述SP825與紅景 天藥材的重量比例為1:1以上。
10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述一種高純度酪醇的制備方法，其特征在于，所述SP825與紅景 天藥材的重量比例2:1。
11. 根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)所述一種高純度酪醇的制備方法，其特征在于，步驟 (3) 中所述第三提取物濃縮液上大孔樹(shù)脂柱進(jìn)行洗脫的具體步驟是：預(yù)處理后大孔樹(shù)脂裝 柱，按照大孔樹(shù)脂與紅景天藥材的比2 :1加入第三提取物濃縮液，先用水洗脫至洗脫液近 乎無(wú)色，再用5%乙醇洗脫，用10?25%乙醇洗脫；收集10?25%乙醇洗脫的洗脫液；其中 所述第三提取物濃縮液50°C的相對(duì)密度為1. 15-1. 2,所述10?25%的乙醇的用量為21? 25倍柱體積。
12. 根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)所述一種高純度酪醇的制備方法，其特征在于，步驟 (3)中大孔樹(shù)脂洗脫的條件是：所述第三提取物濃縮液中的藥液濃度為0. 5-2. Og/ml，大孔 樹(shù)脂的徑高比1 :1?15,其中所述濃度為生藥材/藥液體積比，洗脫流速l-8BV/h時(shí)，所述 第三提取物濃縮液中的藥液濃度為紅景天的質(zhì)量與所述第三提取物濃縮液的體積比；步驟 (3)所述第四提取物濃縮液中的藥液濃度為50g-lg/ml，第四提取物濃縮液中的藥液濃度 為每lml第四提取物濃縮液含50g紅景天藥材到每lml第四提取物濃縮液含lg紅景天藥 材。
13. 根據(jù)權(quán)利要求12所述一種高純度酪醇的制備方法，其特征在于，徑高比為1:10， 藥液濃度為1. 〇g/ml，洗脫速度為4BV/h。
14. 根據(jù)權(quán)利要求12所述一種高純度酪醇的制備方法，其特征在于，所述萃取結(jié)晶是： 向所述第四提取物濃縮液加入與所述第四提取物濃縮液相對(duì)應(yīng)量的乙酸乙酯，萃取1-10 次，合并萃取液，減壓回收溶劑至每ml含酪醇20mg至200mg，冷藏，析晶，獲得純度大于 80 %的酪醇。
【文檔編號(hào)】C07C37/82GK104496760SQ201510004953
【公開(kāi)日】2015年4月8日 申請(qǐng)日期:2015年1月6日 優(yōu)先權(quán)日:2015年1月6日
【發(fā)明者】樂(lè)智勇, 閔建華, 孟亞會(huì), 董婧婧, 許冬瑾, 馬興田 申請(qǐng)人:康美（北京）藥物研究院有限公司, 廣東康美藥物研究院有限公司, 康美藥業(yè)股份有限公司