專(zhuān)利名稱(chēng)：2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷衍生物及其鹽。這些化合物抗癌活性高、抗病毒活性優(yōu)良，并用作抗腫瘤劑或抗病毒劑。
2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷(FudR)顯示抗腫瘤活性高，但毒性大，提出一個(gè)在安全范圍受到限制的問(wèn)題。
為了克服這個(gè)問(wèn)題，開(kāi)發(fā)了各種各樣的2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷衍生物。例如日本未審查的專(zhuān)利公開(kāi)No.61，591/1985和No.106，593/1985公開(kāi)一系列2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷衍生物。被公開(kāi)的2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷衍生物在某種程度上減輕了這個(gè)問(wèn)題，但在抗腫瘤活性上并不滿意，并在治療學(xué)指數(shù)、吸收作用等等方面不足。
我們進(jìn)行廣泛研究以克服現(xiàn)有技術(shù)中的上述問(wèn)題，和成功地開(kāi)發(fā)了新的2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷衍生物，這些衍生物比常用的2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷衍生物抗腫瘤活性高、對(duì)人體更安全。本發(fā)明是基于這個(gè)新的發(fā)現(xiàn)完成的。
本發(fā)明提供式(Ⅰ)代表的2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷衍生物，
其中R1和R2中的一個(gè)是芐基，其苯環(huán)上可以任意有從C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵代C1-C3烷基、鹵素原子、羥基和硝基中選擇的取代基，而另一個(gè)是氨基酸殘基。
根據(jù)本發(fā)明式(Ⅰ)的化合物的特征是該化合物用作抗腫瘤劑和抗病毒劑，毒性低、溶水快和安全范圍寬。
在式(Ⅰ)中用R1和R2代表的芐基中，取代基的具體實(shí)施例如下。
烷基作芐基取代基的實(shí)例是有1到6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、仲-丁基、叔-丁基、戊基、己基，等等。
烷氧基作取代基的實(shí)例是有1到6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，如甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、仲-丁氧基、叔-丁氧基、戊氧基、己氧基，等等。
鹵素原子作取代基的實(shí)例是氟、氯、溴、碘。
鹵代烷基作取代基的實(shí)例是有1到3個(gè)碳原子，而且用1到3個(gè)鹵素原子取代的烷基，如氯甲基、溴甲基、三氟甲基、1，2-二氯乙基、1，2-二氟乙基、2，2，2-三氟乙基，等等。
用R1和R2代表的芐基上取代基的數(shù)目最好是1、2或3。
任意地有1到3個(gè)取代基的芐基的最好實(shí)例是芐基和在苯環(huán)上有1或2個(gè)取代的芐基，如2-氯芐基、3-氯芐基、4-氯芐基、2-溴芐基、3-溴芐基、4-溴芐基、2-氟芐基、3-氟芐基、4-氟芐基、2，4-二氯芐基、3，4-二氯芐基、2-氯-4-溴芐基、2-三氟甲基芐基、4-三氟甲基芐基、4-硝基芐基、2，4-二硝基芐基、2-甲基芐基、4-甲基芐基、4-乙基芐基、4-叔丁基芐基、4-甲氧基芐基、3-乙氧基芐基、4-羥基芐基、2，4-二羥基芐基、2-甲基-3-硝基芐基，等等。
一般來(lái)說(shuō)，在苯環(huán)上有1或2個(gè)鹵素原子的芐基是最好的。
在此所用的術(shù)語(yǔ)“氨基酸殘基”是指從氨基酸的羧基中除去OH基團(tuán)后所剩下的一價(jià)基團(tuán)。在此所用的術(shù)語(yǔ)“氨基酸”意指包括天然氨基酸和合成的氨基酸，每個(gè)化合物至少含一個(gè)氨基和至少一個(gè)羧基，并在每個(gè)分子中有2到20個(gè)碳原子。
天然氨基酸的實(shí)例是有機(jī)體蛋白質(zhì)成份的那些氨基酸，如丙氨酸、異亮氨帷⒏拾彼?、丝氨酸、苏氨酸、缬氨酸、翝i彼?、精氨酸、赖氨酸、天冬酰百E⑻於彼?、箘駷I０貳⒐勸彼?、胙b彼?、半胙b彼?、蛋氨酸、酪氨酸、豹?jiǎng)彼?、色氨酸、组氨酸、羟基脯氨酸、脯氨酸，爹o取２皇怯謝宓鞍字首櫸藎諢畹撓謝逯釁鷸匾饔玫奶烊話被岷禿銑砂被嵋捕及ㄔ諛?，其实例是肌氨酸、肌酸、竾Z裝彼?、半胙b彼嶧撬帷⒄漣彼?、覡F堪彼?、高丝氨酸、羟基赖氨酸、正缬氨酸、蛠嗏缬氨酸、鸟氨酸、精氨基琥珀酸、二羟基豹?jiǎng)彼帷 -碘酪氨酸、3，5-二碘酪氨酸、甲狀腺素、α、γ-二氨基丁酸、2，3-二氨基琥珀酸、α-氨基己二酸、α，β-二氨基丙酸、酵母氨酸、β-丙氨酸、γ-氨基丁酸、β-氨基丁酸、ε-氨基己酸、acediasulfone、傘菌氨酸、aranocine、殺腺癌菌素、苯丙氨酸氮芥、鵝膏蕈氨酸，等等。另外的實(shí)例是乙酰絲氨酸、乙酰蘇氨酸、芐基天冬氨酸，等等，即取代氨基酸，它有乙?；?、乙氧基羰基、芐氧基羰基或芐基作氨基酸的羥基、氨基或羧基的取代基，如絲氨酸、蘇氨酸和類(lèi)似的羥氨酸、天冬酰胺、鳥(niǎo)氨酸、賴氨酸和至少有二個(gè)氨基的類(lèi)似堿性氨基酸、谷氨酸、天冬氨酸和至少有二個(gè)羧基的類(lèi)似酸性氨基酸。
在本發(fā)明的化合物中，用R1或R2所代表的氨基酸殘基中，α-氨基酸殘基是好的。比較好的是作為蛋白質(zhì)組分的氨基酸殘基。這些氨基酸殘基具體實(shí)例是丙氨酸、異亮氨酸、甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、亮氨酸、精氨酸、羥基賴氨酸、賴氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、組氨酸、羥基脯氨酸、脯氨酸等的殘基。最好的是丙氨酸、異亮氨酸、甘氨酸、0-乙酰絲氨酸、纈氨酸、亮氨酸、賴氨酸、天冬氨酸-β-芐酯、苯丙氨酸、組氨酸、脯氨酸等的殘基。
根據(jù)本發(fā)明的氨基酸殘基，可以包括用式(f)表示的那些氨基酸殘基
其中B是任意有苯基或低級(jí)烷硫基的低級(jí)亞烷基，R10和R11每一個(gè)代表氫原子或低級(jí)烷基，或與連接它們的氮原子合在一起形成哌啶環(huán)，并該氨基酸殘基也包括吡咯烷基羰基或哌啶基羰基，其中羰基不連接在雜環(huán)的氮原子上。
關(guān)于式(f)的氨基酸殘基，可任意有苯基或低級(jí)烷硫基和用B代表的低級(jí)亞烷基的實(shí)例是任意有苯基或C1-C6直鏈或支鏈烷硫基的C1-C6直鏈或支鏈亞烷基，如亞甲基、甲基亞甲基、乙基亞甲基、異丙基亞甲基、異丁基亞甲基、叔丁基亞甲基、1，2-亞乙基、1，3-亞丙基、1，4-亞丁基、2-甲基1，3-亞丙基、1，5-亞戊基、1，6-亞乙基、苯基亞甲基、芐基亞甲基、5-苯基戊基亞甲基、3-苯基1，6-亞己基、甲硫基亞甲基、2-甲硫基乙基亞甲基、己硫基亞甲基、異丙硫基甲基亞甲基、3-叔-丁硫基1，6-亞己基，等等。用R10和R11所代表的低級(jí)烷基的實(shí)例是有1到6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基，如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、叔-丁基、戊基、己基，等等。
依據(jù)本發(fā)明的2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷衍生物的鹽，包括酸加成鹽，酸能與氨基酸的氨基形成鹽，和堿的加成鹽，堿能與氨基酸的羧基形成鹽，等等。能形成鹽的有用酸的實(shí)例是無(wú)機(jī)酸，如鹽酸、溴化氫、磷酸、硝酸、硫酸、亞硫酸，等等;有機(jī)酸，如對(duì)-甲苯磺酸、甲磺酸、酒石酸、鄰苯二甲酸、富馬酸、檸檬酸、馬來(lái)酸、丙二酸、乳酸、琥珀酸、抗壞血酸、亞麻酸、油酸、尼克酸、間三硝基苯基磺酸，等等。能形成鹽的有用堿的實(shí)例是氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉，等等。
用式(Ⅰ)代表的本發(fā)明的化合物可以用下面的反應(yīng)圖解-1和-2中所示的方法制備。
<反應(yīng)圖解-1>
其中R1和R2定義如上;R3和R4中一個(gè)是氫原子，而另一個(gè)是芐基，其苯環(huán)上可以任意有從C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵代C1-C3烷基、鹵素原子、羥基和硝基中選擇的取代基;R5和R6中的一個(gè)是在N-位置上有一個(gè)保護(hù)基的一個(gè)氨基酸殘基，而另一個(gè)是芐基，其苯環(huán)上可任意有從C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵代C1-C3烷基、鹵素原子、羥基和硝基中選擇的取代基，而A是在N-位置上有保護(hù)基的氨基酸殘基。
把化合物(Ⅱ)和氨基酸(Ⅲ)進(jìn)行酯縮合可制備化合物(Ⅳ)。氨基酸可以其本身或以反應(yīng)衍生物如鹵化物、酸酐等的形式使用。氨基酸的N-位保護(hù)基的實(shí)例包括一般在現(xiàn)有技術(shù)中所用的那些基團(tuán)，如叔-丁氧基羰基(Boc)、三氯乙氧基羰基、芐氧基羰基、有1至3個(gè)取代基如甲氧基、甲基、硝基等芐氧基羰基。通常在堿性化合物和縮合劑存在下于無(wú)水溶液中，將化合物(Ⅱ)和化合物(Ⅲ)進(jìn)行酯縮合作用。有用的溶劑實(shí)例是芳香族碳?xì)浠衔铮绫?、甲苯、二甲苯，等?鹵代碳?xì)浠衔?如二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷，等等;醚，如乙醚、二惡烷、四氫呋喃，等等;吡啶、硝基甲烷、二甲基甲酰胺，等等。有用的堿性化合物的實(shí)例是三烷基胺、吡啶、二烷基氨基吡啶、皮考啉、二甲基吡啶、和類(lèi)似叔胺、碳酸鈉、碳酸鋇和類(lèi)似的金屬碳酸鹽，等等，其中二烷基氨基吡啶，特別是二(C1-C3烷基)氨基吡啶如二甲基氨基吡啶、二乙基氨基吡啶或類(lèi)似物是最好的。有用的縮合劑的實(shí)例是對(duì)-甲苯磺酰氯、2，4，6-三異丙基苯磺酰氯(TPS氯化物)和類(lèi)似芳基磺酰氯、烷基磺酰氯(特別是C1-C3烷基磺酰氯如甲磺酰氯、乙磺酰氯或類(lèi)似物)、N，N-二環(huán)己基碳化二亞胺(DCC)，亞硫酰氯、磷酰氯，等等，其中DCC和TPS氯化物是較好的。所用化合物(Ⅲ)對(duì)每摩爾化合物(Ⅱ)的量大約是1到1.5摩爾。堿性化合物和縮合劑對(duì)每摩爾化合物(Ⅱ)的量大約是1到5摩爾。進(jìn)行反應(yīng)通常在溫度大約-50℃到室溫下進(jìn)行。
如果需要的話，這樣所得到的化合物(Ⅳ)可以進(jìn)行去除保護(hù)基團(tuán)的反應(yīng)。用常規(guī)方法進(jìn)行這個(gè)反應(yīng)。如在溶劑存在下，用0.5-5N鹽酸溶液進(jìn)行該反應(yīng)。這個(gè)反應(yīng)除去保護(hù)氨基酸殘基的基團(tuán)，生成化合物(Ⅰ)的鹽酸化合物(1′)。有用的溶劑包括二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、二惡烷，等等。
<反應(yīng)圖解-2>
其中R1和R2定義同上;A1是在N-位置上有保護(hù)基的氨基酸殘基;X是鹵素原子;R7和R8中的一個(gè)是氫原子，而另一個(gè)是在N-位置上有保護(hù)基的氨基酸殘基，R9是芐基，其在苯環(huán)上可任意有從C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵化C1-C3烷基、鹵素原子，羥基和硝基中選擇的取代基。
在堿性化合物存在下，于溶劑中將FudR和氨基酸鹵化物反應(yīng)制備化合物(Ⅳ)。在三氟甲磺酸存在下，化合物(Ⅵ)和取代的或未取代的亞氨酸芐酯(Ⅶ)進(jìn)行反應(yīng)，由此除去保護(hù)氨基酸殘基的基團(tuán)，得到三氟甲磺酸鹽形式的化合物(1″)。
在式(Ⅴ)中用X代表的鹵素原子的實(shí)例是氯和溴。
有用的溶劑和有用的堿性化合物包括在上面反應(yīng)圖解-1的描述中已提到的實(shí)例。對(duì)每摩爾FudR來(lái)說(shuō)，使用大約1到1.5摩爾氨基酸鹵化物和大約0.1到0.5摩爾堿性化合物。反應(yīng)在溫度大約-50℃到室溫下進(jìn)行，反應(yīng)約在2到12小時(shí)內(nèi)完成。
在化合物(Ⅵ)和取代或未取代的亞胺基酸芐酯(Ⅶ)之間的反應(yīng)，對(duì)每個(gè)摩爾化合物(Ⅵ)來(lái)說(shuō)，使用大約1到5摩爾化合物(Ⅶ)和大約0.01到0.5摩爾三氟甲磺酸。對(duì)于上面反應(yīng)列舉的溶劑可以用于這個(gè)反應(yīng)中。反應(yīng)溫度在室溫到接近溶劑沸點(diǎn)的范圍內(nèi)。反應(yīng)時(shí)間大約2到12小時(shí)。
用反應(yīng)圖解1或2的方法制備的本發(fā)明的化合物的鹽酸鹽及三氟甲基磺酸鹽，可以用常規(guī)的、迄今為止在現(xiàn)有技術(shù)中普遍使用的鹽交換反應(yīng)轉(zhuǎn)換成其它所需的鹽。例如，用反應(yīng)圖解-1或-2的方法所得到的化合物，溶解在氫氧化鈉、氫氧化?、碳酸钠、碳酸丘G蘋(píng)蚶嗨萍畹乃芤褐?，譃a退峒映裳?，以后将所需要的酸成分加入，生硞需要的酸加成盐，随后进行罎干枣| 用上面描述的方法制備的本發(fā)明的化合物可以用常用的分離方法例如柱色譜法進(jìn)行分離，并且可以用常用提純方法如重結(jié)晶進(jìn)行提純。
關(guān)于作為藥物的組合物的應(yīng)用，本發(fā)明的衍生物與藥理上可接收的適當(dāng)載體結(jié)合，并將這種混合物按照具體配制方法制成合適的制劑形式。有用的載體包括在現(xiàn)有技術(shù)中已知的那些物質(zhì)，如賦形劑、粘合劑、潤(rùn)滑劑、著色劑、分解劑，等等。藥物組合物的典型制劑形式是如片劑、膠囊、顆粒劑、粉劑、液體、皮下或類(lèi)似非腸道使用的針劑、塞入直腸的栓劑，等等。
本發(fā)明的化合物作為有效成份用藥物組合物的劑量單位中所含的量，可以按照制劑的形式適當(dāng)決定，與常規(guī)藥物制劑中所用量沒(méi)有很大不同。通常有效成份的最好劑量是每劑量單位約25-500mg。本發(fā)明的化合物可以通過(guò)常規(guī)方法配制成合適的制劑形式。
這樣所得的藥物的組合物的劑量隨病人的癥狀嚴(yán)重程度、體重、年令和其它因素而變化。每日劑量按成人計(jì)的有效成分約為50-2000mg，藥物組合物每天可以單一劑量或分2-4劑量使用。
實(shí)施例下面列舉實(shí)施例和制劑實(shí)例說(shuō)明本發(fā)明，并以藥理試驗(yàn)結(jié)果解釋本發(fā)明。
與實(shí)施例中NMR數(shù)據(jù)有關(guān)，用在“H”符號(hào)的右方或“C”或“N”符號(hào)的右方作角標(biāo)的數(shù)字是指在化合物中的位置。因此例如術(shù)語(yǔ)“H6”或“C6-H”指氫與在6-位置上的碳原子連接。同樣如術(shù)語(yǔ)“H3′、H4′H5′”或“C3′、4′、5′-H”表明氫與在3′-、4′-、5′-位上的碳原子連接。
實(shí)施例12.44克量的03′-三苯甲基-2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷溶于15毫升四氫呋喃(THF)中。加入氫化鈉(0.5克)，并于60℃攪拌混合物30分鐘。加入0.63克芐氯和0.375克碘化鈉，該混合物于60℃反應(yīng)6小時(shí)。用1N HCl水溶液中和反應(yīng)混合物，并濃縮。將20毫升0.5N HCl的甲醇溶液加到殘余物中，該混合物于室溫?cái)嚢枰灰?。用飽和的NaHCO3水溶液中和反應(yīng)混合物，并濃縮。20毫升氯仿加到殘余物中，用過(guò)濾收集沉淀物。沉淀物溶于乙酸乙酯，并用水洗滌溶液，芒硝上干燥并濃縮，得到O5′-芐基-2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷。這樣得到的化合物懸浮在15毫升二氯甲烷中。0.84克Boc-甘氨酸、1.24克DCC和0.05克二甲基氨基吡啶加到該懸浮液中。在室溫下攪拌混合物一夜。過(guò)濾反應(yīng)混合物，并濃縮濾液。將殘余物和5毫升4NHCl的二惡烷溶液進(jìn)行混合，攪拌混合物30分鐘，并加入20毫升乙醚。用過(guò)濾收集沉淀結(jié)晶物，用甲醇-乙醚提純，得到1.28克下面表1中所示的化合物1。
實(shí)施例2除了用于制備所希望的化合物所需要的起始物質(zhì)不同外，重復(fù)實(shí)施例1的同樣步驟。制備下面表1所示化合物2到11和28到30重復(fù)該步驟。
實(shí)施例32.44克O5′-三苯甲基-2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷溶于15毫升THF中。將0.5克氫氧化鈉粉末和0.225克3A分子篩粉(商標(biāo)，美國(guó)Linde公司產(chǎn)品)加到溶液中。該混合物加熱回流2小時(shí)，隨后加0.845克對(duì)-氯芐氯和0.15克碘化鈉。該混合物加熱回流2小時(shí)，并放置冷卻。過(guò)濾反應(yīng)混合物，并用15毫升飽和氯化胺水溶液中和濾液和用飽和氯化鈉水溶液洗滌。在芒硝上干燥有機(jī)層和濃縮。將20毫升0.5N HCl的甲醇溶液加到殘余物中，并攪拌混合物一夜。用飽和的NaHCO3水溶液中和混合物，并濃縮。將THF(20毫升)加到殘余物中，并用飽和NaCl水溶液洗滌該混合物，在芒硝上干燥和濃縮。濃縮物從乙醇中重結(jié)晶，得到1.32克O3′-對(duì)-氯芐基-2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷。將1.07克DCC和0.73克Boc-甘氨酸溶于12毫升THF中。將1.32克O3′-對(duì)-氯芐基-2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷和0.05克二甲基氨基吡啶加到該溶液中。該混合物于室溫下攪拌5小時(shí)，和過(guò)濾。濃縮濾液，并將5毫升4N HCl的二惡烷溶液加到殘余物中。該混合物攪拌30分鐘后尤 0毫升乙醚，過(guò)濾出沉淀結(jié)晶物，并從乙醇-異丙醇中重結(jié)晶，得到下面表1中所示的0.83克化合物12。
實(shí)施例4除了用于制備所希望的化合物的所需要的起始物質(zhì)不同外，重復(fù)實(shí)施例3的同樣步驟，制備下面表1中所示化合物13-22的每一個(gè)。
實(shí)施例50.10克O3′-對(duì)-氯芐基-O5′-丙氨酰-2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷鹽酸鹽溶于4毫升的1∶1水和氯仿的混合物中。將0.018克NaHCO3在攪拌下加到該溶液中。攪拌該混合物10分鐘，并分離氯仿層。將0.10克4-甲苯磺酸的2毫升甲醇溶液逐滴加入上述混合物中，并過(guò)濾白色沉集物，從甲醇-乙醚中重結(jié)晶，得到下面表1所示0.105克化合物23。
實(shí)施例6除了用于制備所希望化合物所需要的起始物質(zhì)不同外，重復(fù)實(shí)施例5的同樣步驟，制備下面表1所示化合物24到27每一個(gè)。
實(shí)施例72.44克2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷溶于25毫升吡啶中。加入Boc-甘氨酰氯化物(0.97克)。該混合物用冰冷卻反應(yīng)3小時(shí)。隨后蒸出溶劑，將水加到殘余物中，用二氯甲烷萃取混合物，并在芒硝上干燥萃取物，并濃縮。將殘余物溶于25毫升二氯甲烷中。2.14克亞氨酸對(duì)-氯芐酯和0.75克三氟甲基磺酸加到該溶液中。該混合物于室溫下反應(yīng)3小時(shí)，并蒸出溶劑。將飽和NaHCO3水溶液加到殘余物中使溶液呈堿性。用乙醚萃取溶液，并在芒硝上干燥萃取物。加氯化氫，過(guò)濾出沉淀結(jié)晶物，并使過(guò)濾物從甲醇-乙醚中重結(jié)晶，得到下面表1所示的0.75克化合物12。
實(shí)施例1到7中所制備的化合物1到30的化學(xué)結(jié)構(gòu)和物理化學(xué)常數(shù)列于下面表1中。
表1化合物1結(jié)構(gòu)
，R2＝NH2CH2CO-形式(鹽)鹽酸鹽結(jié)晶形狀無(wú)定形收率57.5%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.7-12.0(b，1H，NH)，7.96(d，1H，J＝7Hz，H6)，7.34(s，5H，芳族的)，6.14(t，1H，J＝7Hz，H1′)，4.54(s，2H，
)，3.80-4.30(m，1H，H4′)，3.85(s，2H，NH2CH2CO2-)，3.50-3.80(m，2H，H5′)，2.0-2.2(m，2H，H2′).
化合物2結(jié)構(gòu)R1＝
，R2＝NH2CH2CO-形式(鹽)鹽酸鹽收率63%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.6-12.0(b，1H，NH)，7.96(d，1H，H6)，7.35(s，4H，芳族的)，6.20(t，1H，J＝7Hz，H1′)，
4.50(s，2H，
)，3.90-4.50(m，1H，H4′)，3.50-3.90(m，2H，H5′)，3.84(s，2H，NH2CH2CO2-)，2.1-2.4(m，2H，H2′).
化合物3結(jié)構(gòu)R1＝NH2CH2CO-，R2＝
形式(鹽)鹽酸鹽收率71%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.7-12.0(b，1H，NH)，7.95(d，1H，H6)，7.0-7.6(m，4H，芳族的)，6.13(t，1H，J＝7Hz，H1′)，4.52(s，2H，
)，3.9-4.4(m，4H，H3′，H4′，H5′)，3.85(s，2H，NH2CH2CO2-)，3.64(b，2H，H2O)，2.1-2.3(m，2H，H2′).
化合物4結(jié)構(gòu)R1＝NH2CH2CO-，R2＝
形式(鹽)鹽酸鹽收率62%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.8-12.0(b，1H，NH)，7.98(d，1H，H6)，7.4-7.8(m，4H，芳族的)，6.14(t，1H，J＝7Hz，H1′)，
4.65(s，2H，
)，3.9-4.3(m，4H，H3′，H4′，H5′)，3.85(s，2H，NH2CH2CO2-)，3.37(b，2H，H2O)，2.0-2.5(m，2H，H2′).
化合物5結(jié)構(gòu)R1＝NH2CH2CO-，R2＝
形式(鹽)鹽酸鹽收率52%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.7-11.9(b，1H，NH)，7.95(d，1H，H6)，8.15(d，J＝9Hz，芳族的)，7.62(d，J＝9Hz，芳族的)，6.14(t，1H，J＝7Hz，H1′)，4.70(s，2H，
)，3.90-4.30(m，4H，H3′，H4′，H5′)，3.85(s，2H，NH2CH2CO2-)，3.64(b，2H，H2O)，2.1-2.4(m，2H，H2′).
化合物6結(jié)構(gòu)R1＝NH2CH2CO-，R2＝
形式(鹽)鹽酸鹽章剩 2%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.7-11.9(b，1H，NH)，8.01(d，1H，J＝7Hz，H6)，
7.27(2H，d，J＝9Hz，芳族的)，6.94(2H，d，J＝9Hz，芳族的)，6.11(t，1H，J＝7Hz，H1′)，4.45(s，2H，
)，3.90-4.20(m，4H，H3′，H4′，H5′)，3.85(s，2H，NH2CH2CO2-)，3.60(b，2H，H2O)，2.10-2.40(m，2H，H2′).
化合物7結(jié)構(gòu)R1＝NH2CH2CO-，R2＝
形式(鹽)鹽酸鹽收率65%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.8-12.0(b，1H，NH)，7.98(d，1H，J＝7Hz，H6)，7.20-7.60(m，芳族的)，6.11(t，1H，J＝7Hz，H1′)，4.49(s，2H，
)，3.90-4.20(m，4H，H3′，H4′，H5′)，3.85(s，2H，NH2CH2CO2-)，3.34(b，2H，H2O)，2.00-2.40(m，2H，H2′).
化合物8結(jié)構(gòu)R1＝NH2CH2CO-，
形式(鹽)鹽酸鹽收率78%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物
δ(DMSO-d6)11.7-12.0(b，1H，NH)，7.99(d，1H，J＝7Hz，H6)，7.20-7.60(m，4H，芳族的)，6.13(t，1H，J＝7Hz，H1′)，4.54(s，2H，
)，3.90-4.20(m，4H，H3′，H4′，H5′)，3.85(s，2H，NH2CH2CO2-)，3.36(b，2H，H2O)，2.0-2.40(m，2H，H2′).
化合物9結(jié)構(gòu)R1＝NH2CH2CH2CO-，R2＝
形式(鹽)鹽酸鹽收率63%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.7-11.90(b，1H，NH)，8.10(d，1H，J＝7Hz，H6)，7.23(s，4H，芳族的)，6.12(t，1H，J＝7Hz，H1′)，4.49(s，2H，
)，3.90-4.20(b，4H，H3′，H4′，H5′)，3.40(b，2H，H2O)，2.97(t，J＝8Hz，NH2CH2CH2CO2-)，2.67(t，J＝8Hz，NH2CH2CH2CO2-)，2.66(q，J＝8Hz，
)，2.12-2.40(m，2H，H2′)，1.17(t，J＝8Hz，
).
化合物10結(jié)構(gòu):
形式(鹽)鹽酸鹽收率79%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.8-11.90(b，1H，NH)，7.98(d，1H，J＝7Hz，H6)，7.20-7.60(m，3H，芳族的)，6.13(t，1H，J＝7Hz，H1′)，4.55(s，2H，
)，4.00-4.40(b，4H，H3′，H4′，H5′)，3.35(b，2H，H2O)，2.10-2.50(m，2H，H2′)，1.50-1.9(m，1H，(CH3)2CHC(NH2)HCO2-)，0.7-1.2(m，6H，(CH3)2CHC(NH2)HCO2-).
化合物11結(jié)構(gòu)R1＝NH2(CH2)5CO-，R2＝
形式(鹽)鹽酸鹽收率76%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.7-11.9(b，1H，NH)，8.00(d，1H，J＝7Hz，H6)，7.1-7.2(m，4H，芳族的)，6.12(t，1H，J＝7Hz，H1′)，4.52(s，2H，
)，4.0-4.4(b，4H，H3′，H4′，H5′)，3.34(b，2H，H2O)，3.0(t，J＝8Hz，NH2(CH2)4CH2CO2-，2.10-2.50(m，2H，H2′)，1.0-2.5(m，8H，NH2(CH2)4CH2CO2-)，
2.29(s，3H，
).
化合物12結(jié)構(gòu)R1＝NH2CH2CO-，R2＝
形式(鹽)鹽酸鹽結(jié)晶形狀無(wú)定形收率72%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.7-11.9(b，1H，NH)，8.02(d，1H，J＝7Hz，H6)，7.40(s，4H，芳族的)，6.13(t，1H，J＝7Hz，H1′)，4.55(s，2H，
)，4.0-4.4(b，4H，H3′，H4′，H5′)，3.84(s，2H，NH2CH2CO2-)，3.34(bs，2H，H2O)，2.10-2.50(m，2H，H2′).
化合物13結(jié)構(gòu)
形式(鹽)鹽酸鹽收率78%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)
11.8-12.0(b，1H，NH)，8.00(d，1H，J＝7Hz，H6)，7.40(s，4H，芳族的)，6.12(t，1H，J＝7Hz，H1′)，4.55(s，2H，
)，3.90-4.4(b，4H，H3′，H4′，H5′)，4.00(m，1H，CH3C(NH2)HCO2-)，3.35(bs，2H，H2O)，2.10-2.50(m，2H，H2′)，1.43(d，3H，J＝8Hz，CH3C(NH2)HCO2-).
化合物14結(jié)構(gòu)R1＝
，R2＝
形式(鹽)鹽酸鹽收率82%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.0-11.5(b，1H，NH)，7.95(d，1H，J＝7Hz，H6)，7.35(s，4H，芳族的)，6.10(t，1H，J＝7Hz，H1′)，4.50(s，2H，
)，4.00-4.40(b，4H，H3′，H4′，H5′)，3.80(d，1H，(CH3)2CHC(NH2)HCO2-)，3.30(bs，2H，H2O)，2.10-2.50(m，2H，H2′)，1.50-1.90(b，1H，(CH3)2CHC(NH2)HCO2-)，0.70-1.10(m，6H，(CH3)2CHC(NH2)HCO2-).
化合物15結(jié)構(gòu)R1＝
R2＝
形式(鹽)鹽酸鹽收率77%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.50-11.90(b，1H，NH)，7.96(d，1H，J＝7Hz，H6)，7.40(s，4H，芳族的)，6.15(t，1H，J＝7Hz，H1′)，4.53(s，2H，
)，3.60-4.20(m，4H，H3′，H4′，H5′)，3.25(t，1H，J＝11Hz，(CH3)2CHCH2C(NH2)HCO2-)，2.12-2.50(m，2H，H2′)，1.20-1.90(m，3H，(CH3)2CHCH2C(NH2)HCO2-)，1.00(s，3H，
0.90(s，3H，
化合物16結(jié)構(gòu)
收率81%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)
11.50-12.00(b，1H，NH)，8.00(d，1H，J＝7Hz，H6)，7.40(s，4H，芳族的)，6.15(t，1H，J＝7Hz，H1′)，4.60(s，2H，
)，4.01-4.42(m，4H，H3′，H4′，H5′)，3.85(d，1H，J＝6Hz，CH3CH2C(CH3)HC(NH2)HCO2-)，3.20-3.40(m，2H，H2O)，2.20-2.40(b，2H，H2′)，1.80-2.40(b，1H，CH3CH2C(CH3)HC(NH2)HCO2-)，0.70-1.80(m，8H，CH3CH2C(CH3)HC(NH2)HCO2-).
化合物17結(jié)構(gòu)
形式(鹽)鹽酸鹽收率75%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.8-12.0(b，1H，NH)，8.22(d，1H，J＝7Hz，H6)，7.41(s，4H，芳族的)，6.14(t，1H，J＝7Hz，H1′)，4.61(s，2H，
)，4.00-4.40(m，4H，H3′，H4′，H5′)，3.20-3.40(m，2H，H2O)，2.10-2.50(b，2H，H2′)，2.0(s，3H，CH3CO2CH2C(NH2)HCO2-).
化合物18結(jié)構(gòu)
形式(鹽)鹽酸鹽收率74%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.80-12.00(b，1H，NH)，7.98(d，1H，J＝7Hz，H6)，7.38(s，4H，芳族的)，6.10(t，1H，J＝7Hz，H1′)，4.52(s，2H，
，3.95-4.45(b，4H，H3′，H4′，H5′)，3.15-3.45(m，2H，H2O)，3.40(t，1H，CH3SCH2CH2C(NH2)HCO2-)，2.85-2.90(m，2H，CH3SCH2CH2C(NH2)HCO2-)，2.20-2.40(b，2H，H2′)，2.20(s，3H，CH3SCH2CH2C(NH2)HCO2-)，1.50-1.60(m，2H，CH3SCH2CH2C(NH2)HCO2-).
化合物19結(jié)構(gòu)
形式(鹽)鹽酸鹽收率73%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.8-12.0(b，1H，NH)，8.00(d，1H，J＝7Hz，H6)，
7.39(s，4H，芳族的)，7.35(s，4H，
)，6.11(t，1H，J＝7Hz，H1′)，5.11(s，2H，
)，4.52(s，2H，
)，3.95-4.40(b，4H，H3′，H4′，H5′)，3.10(bs，2H，H2O)，2.10-2.40(b，2H，H2′).
化合物20結(jié)構(gòu)
形式(鹽)鹽酸鹽收率26%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.45-11.90(b，1H，NH)，7.95(d，1H，J＝7Hz，H6)，7.35(s，4H，芳族的)，6.13(t，1H，J＝7Hz，H1′)，4.50(s，2H，
)，3.95-4.45(b，4H，H3′，H4′，H5′)，3.10-3.65(b，1H，NH2(CH2)4C(NH2)HCO-)，3.20-3.40(m，2H，H2O)，2.65-3.10(b，2H，NH2CH2(CH2)3C(NH2)HCO2-)，2.10-2.50(m，2H，H2′)，1.00-2.10(b，6H，NH2CH2(CH2)3C(NH2)HCO2-).
化合物21
結(jié)構(gòu)
形式(鹽)鹽酸鹽收率79%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.90(b，1H，NH)，8.00(d，1H，J＝8Hz，H6)，7.40(s，4H，芳族的)，7.23(s，5H，芳族的，
)，6.10(t，1H，J＝8Hz，H1′)，4.50(s，2H，
)，4.00-4.40(b，5H，H3′，H4′，H5′，
)，3.20-3.50(m，2H，H2O)，3.19(s，2H，
)，2.00-2.15(b，2H，H2′)，1.08(t，1H，J＝8Hz，乙醚(溶劑)化合物22結(jié)構(gòu)
形式(鹽)1/2酒石酸鹽收率80%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物
δ(DMSO-d6)7.60(s，1H，
)，7.40(s，4H，芳族的)，6.90(s，1H，
)，6.10(t，1H，J＝8Hz，H1′)，4.50(s，2H，
)，3.80-4.40(m，5H，H3′，H4′，H5′，
)，2.80-3.05(m，2H，
2.10-2.40(m，2H，H2′).
化合物23結(jié)構(gòu)
Form(salt)
結(jié)晶形狀無(wú)定形收率82%
1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.65-12.00(b，1H，NH)，7.95(d，1H，J＝8Hz，H6)，7.20，7.38，7.78&7.90(s，4H，
)，7.40(s，4H，芳族的)，6.11(t，1H，J＝8Hz，H1′)，4.55(s，2H，
)，3.90-4.40(m，4H，H3′，H4′，H5′)，3.72，(m，1H，CH3C(NH2)HCO2-)，3.38(s，2H，H2O)，2.20-2.40(b，2H，H2′)，2.23(s，3H，
1.40(d，3H，J＝8Hz，CH3C(NH2)HCO2-).
化合物24結(jié)構(gòu)
形式(鹽)1/2馬來(lái)酸鹽收率38%1H-NMR TMS 內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)12.45(s，1H，
)，7.95(d，1H，J＝8Hz，H6)，7.40(s，4H，芳族的)，6.30(s，1H，
)，6.10(t，1H，J＝8Hz，H1′)，4.52(s，2H，
)，3.90-4.42(m，4H，H3′，H4′，H5′)，4.05(q，1H，J＝8Hz，CH3C(NH2)HCO2-)，3.38(b，2H，H2O)，2.18-2.40(m，2H，H2′)，1.39(d，1H，J＝8Hz，CH3C(NH2)HCO2-).
化合物25結(jié)構(gòu)
形式(鹽)1/2酒石酸鹽收率57%1H-NMR TMS 內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.80-12.00(b，1H，NH)，7.98(d，1H，J＝8Hz，H6)，7.39(s，4H，芳族的)，6.10(t，1H，J＝8Hz，H1′)，4.50(s，2H，
)，4.00-4.50(m，4H，H3′，H4′，H5′)，4.40(s，1H，
)，4.00(m，1H，CH3C(NH2)HCO2-)，3.40(b，2H，H2O)，2.20-2.40(m，2H，H2′)，1.40(d，3H，J＝8Hz，CH3C(NH2)HCO2-).
化合物26
結(jié)構(gòu)
形式(鹽)1/3檸檬酸鹽收率74%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.70-12.10(b，1H，NH)，10.0-12.0(b，2H，
)，7.95(d，1H，J＝8Hz，H6)，7.40(s，4H，芳族的)，6.11(t，1H，J＝8Hz，H1′)，4.51(s，2H，
)，4.00-4.50(m，4H，H3′，H4′，H5′)，4.05(m，1H，CH3C(NH2)HCO2-)，3.35(b，2H，H2O)，2.72(s，2H，
)，2.20-2.39(m，2H，H2′)，1.39(d，3H，J＝8Hz，CH3C(NH2)HCO2-).
化合物27結(jié)構(gòu)
形式(鹽)磷酸鹽收率40%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.65-12.00(b，1H，NH)，7.90(d，1H，J＝8Hz，H6)，7.40(s，4H，芳族的)，6.05(t，1H，J＝8Hz，H1′)，4.50(s，2H，
)，4.00-4.50(m，4H，H3′，H4′，H5′)，4.00(m，1H，CH3C(NH2)HCO2-)，3.35(b，2H，H2O)，2.15-2.40(m，2H，H2′)，1.40(d，3H，J＝8Hz，CH3C(NH2)HCO2-).
化合物28結(jié)構(gòu)R1＝NH2CH2CO-，
形式(鹽)-收率75%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.80-12.00(b，1H，NH)，7.90(d，1H，J＝8Hz，H6)，7.40(s，4H，芳族的)，6.15(t，1H，J＝8Hz，H1′)，4.54(s，2H，
)，4.00-4.50(m，4H，H3′，H4′，H5′)，4.06(2H，s，NH2CH2CO2-)，3.32(b，2H，H2O)，2.10-2.50(m，2H，H2′).
化合物29
結(jié)構(gòu)
形式(鹽)鹽酸鹽收率63%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.80-12.10(b，1H，NH)，8.03(d，1H，J＝8Hz，H6)，9.3-10.2(b，1H，
)，7.41(s，4H，芳族的)，6.13(t，1H，J＝8Hz，H1′)，4.56(s，2H，
)，4.00-4.50(m，4H，H3′，H4′，H5′)，3.22(b，2H，H2O)，2.00-2.50(m，2H，H2′).
化合物30結(jié)構(gòu)R1＝NH2CH2CO-，R2＝
形式(鹽)鹽酸鹽收率53%1H-NMR TMS內(nèi)標(biāo)物δ(DMSO-d6)11.7-11.9(b，1H，NH)，9.37-(bs，
)，7.92(d，1H，J＝8Hz，H6)，7.14(d，J＝8Hz，2H，芳族的)，6.70(d，J＝8Hz，2H，芳族的)，6.08
(t，1H，J＝8Hz，H1′)，4.52(s，2H，
)，4.0-4.4(m，4H，H3′，H4′，H5′)，3.82(s，2H，NH2CH2CO2-)，3.35(bs，2H，H2O)，2.0-2.45(m，2H，H2′).
實(shí)施例8(A)5′-0-〔N-(叔丁氧基羰基)甘氨?！?3′-0-(4-氯芐基)-2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷的制備在冰冷卻及攪拌下，將6.13克二環(huán)己基碳化二亞胺加入到含9.45克N-(叔丁氧基羰基)-甘氨酸的60毫升乙腈溶液中三小時(shí)后，將產(chǎn)生的二環(huán)己基脲濾出，濃縮濾液。油狀殘余物溶于15毫升無(wú)水吡啶中，并向該溶液中加入5.00克3′-0-(4-氯芐基)-2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷。該混合物在室溫放置三小時(shí)后，再于溫度40℃放置30分鐘。于室溫下向混合物加入5毫升水后混合物放置30分，然后進(jìn)行濃縮。殘余物溶于50毫升乙酸乙酯中，并用飽和碳酸氫鈉水溶液洗三次，用飽和氯化鈉水溶液洗二次，接著該溶液用無(wú)水硫酸鎂干燥并濃縮。殘余物放入硅膠柱中并用1%甲醇-氯仿洗脫，得到5.33克(75%)5′-0-〔N-(叔丁氧基羰基)甘氨?！?3′-0-(4-氯芐基)-2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷。
NMR(DMSO-d6)δ11.85(1H，bs，NH)，7.94(1H，d，J＝7Hz，C6-H)，7.40(4H，s，C6H4Cl)，7.20(1H，t，J＝6Hz，OCONH)，6.14(1H，t，J＝6Hz，C1，-H)，4.54(2H，s，CH2C6H4Cl)，4.30-4.16(4H，m，C3′，4′，5′-H)，3.74(2H，d，J＝6Hz，CH2CO)，2.38-2.32(2H，m，C2，-H)，1.37(9H，s，CH3X3)
(B)和(C)按照上面(A)中所述的步驟和使用適當(dāng)?shù)钠鹗嘉镔|(zhì)，制備出表2所示的化合物。在表2中，化合物用式(Ⅰ)中的R1和R2基團(tuán)表示。該方法適用于下列各表。同樣在表2和隨后各表中，術(shù)語(yǔ)“Str”代表“結(jié)構(gòu)”。
(D).5′-0-(N-芐氧基羰基)甘氨酰-3′-0-(4-氯芐基)-2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷的制備向含有1.00克3′-0-(4-氯芐基)-2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷的20毫升吡啶溶液中，加入1.23克N-芐氧基羰基甘氨酸的氯化物，該混合物在室溫下反應(yīng)兩天。
反應(yīng)混合物減壓濃縮，將30毫升乙酸乙酯和20毫升水加入殘余物中。有機(jī)層從溶液中分離出來(lái)，用無(wú)水硫酸鎂干燥，并將溶劑蒸餾出去。得到的油狀物質(zhì)放入硅膠柱中，用1%甲醇-氯仿溶液洗脫，得到0.26克(17%)所要的5′-0-(N-芐氧基羰基)甘氨酰-3′-0-(4-氯芐基)-2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷。
如此獲得的產(chǎn)品經(jīng)鑒定即為在例8(B)中通過(guò)薄層色譜法提供的化合物(展開(kāi)溶劑)氯仿∶甲醇＝39∶2，檢測(cè)紫外線照射)(E).3′-0-(4-氯芐基)-2′-脫氧-5-氟-5′-0-甘氨酰尿嘧啶核苷鹽酸鹽的制備在3毫升4NHCl的二惡烷中，溶解0.88克由例8(A)獲得的5′-0-〔N-(叔丁氧基羰基)甘氨酰〕-3′-0-(4-氯芐基)-2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷，該溶液在室溫下放置30分鐘。蒸掉溶劑，將殘余物置于硅膠柱中，用4-6%的甲醇-氯仿洗脫，得到0.36克(45%)的3′-0-(4-氯芐基)-2′-脫氧-5-氟-5′-0-甘氨酰尿嘧啶核苷鹽酸鹽。
形狀吸濕粉末NMR(RMSO-d6)δ11.83(1H，bs，NH)，8.68(3H，bs，NH2，HCl)，
8.04(1H，d，J＝7Hz，C6-H)，7.41(4H，s，C6H4Cl)，6.15(1H，t，J＝6Hz，C1，-H)，4.56(2H，s，CH2C6H4Cl)，4.41-4.15(4H，m，C3′，4′，5′-H)，3.83(2H，s，CH2CO)，2.44-1.99(2H，m，C2′-H)元素分析C18H19ClFN3O6·HCl·H2O計(jì)算值C，44.83%;H，4.60%;N，8.71%實(shí)驗(yàn)值C，44.64%;H，4.91%;N，8.43%實(shí)施例9-17使用適當(dāng)?shù)钠鹗嘉镔|(zhì)，按照例8(A)的步驟和之后的例8(E)的步驟進(jìn)行，從而可獲得在下面表3中所示的化合物。然而，在例12中所予期的化合物可通過(guò)例8(A)步驟獲得。
實(shí)施例185′-0-芐基-2′-脫氧-5-氟-3′-甘氨酰尿嘧啶核苷鹽酸鹽的制備將0.78克N-(叔丁氧基羰基)甘氨酸和1.80克2，4，6-三異丙基苯磺酰氯加到含1.00克5′-0-芐基-2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷的30毫升無(wú)水吡啶溶液中。將混合物于室溫下反應(yīng)一夜。
反應(yīng)混合物減壓濃縮，在乙酸乙酯和水之間分配剩余物。用飽和的碳酸氫鈉水溶液洗滌有機(jī)層，在無(wú)水硫酸鎂上干燥，并減壓濃縮。殘余物放入硅膠柱中，用1%甲醇-氯仿洗脫進(jìn)行純化，得到1.06克所需要的5′-0-芐基-3′-0-〔N-(叔丁氧基羰基)甘氨酰〕-2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷。
接著，將上面制備的化合物(中間體)溶解在10毫升的10%的鹽酸-二惡烷中，并在室溫下攪拌2小時(shí)。反應(yīng)混合物減壓濃縮，剩余物置于硅膠柱中，用10%甲醇-氯仿洗脫進(jìn)行純化，得到0.77克(60%)所需要的5′-0-芐基-2′-脫氧-5-氟-3′-0-甘氨酰尿嘧啶核苷鹽酸鹽。
形狀吸濕粉末NMR(DMSO-d6)δ9.10(3H，bs，NH2，HCl)，7.97(1H，d，J＝7Hz，C6-H)，7.35(5H，s，C6H5)，6.22(1H，t，J＝6Hz，C1，-H)，5.36(1H，bs，C3，-H)，4.58(2H，s，CH2C6M5)，4.27(1H，bs，C4，-H)，3.81(2H，s，CH2CO)，3.77-3.71(2H，m，C5，-H)
2.55-2.31(C2，-H，用DMSO聚結(jié))實(shí)施例19-26按照例18的步驟和用適當(dāng)?shù)钠鹗嘉镔|(zhì)，制備下面表4所示的化合物。
實(shí)施例273′-0-(4-氯芐基)-2′-脫氧-5′-0-(3-二乙基氨基丙?；?-5-氟尿嘧啶核苷鹽酸鹽的制備將0.56毫升三乙胺和0.50毫升氯甲酸異丁酯加入含3-二乙基氨基丙酸鹽酸鹽的30毫升四氫呋喃的冷卻到-15℃的溶液中，得到混合酸酐。
向混合物中加入1.00克的3′-0-(4-氯芐基)-2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷和0.50毫升三乙胺，并在室溫下攪拌混合物一夜，過(guò)濾掉不溶物，濃縮濾液。殘余物置于硅膠柱中，用5%甲醇-氯仿洗脫進(jìn)行純化，得到0.10克(7%)的3′-0-(4-氯芐基)-2′-脫氧-5′-0-(3-二乙基氨基丙酰基)-5-氟尿嘧啶核苷鹽酸鹽。
形狀吸濕粉末NMR(DMSO-d6)δ11.96(1H，bs，NH)，7.98(1H，d，J＝7Hz，C6-H)，7.41(4H，s，C4H6Cl)，6.16(1H，t，J＝6Hz，C1，-H)，4.55(2H，s，CH2C6H4Cl)，4.27-4.23(4H，m，C3′，4′，5′，-H)，3.19-2.94(8H，m，CH2CH2CO，CH2CH3X2)2.41-2.33(2H，m，C2，-H)1.21(6H，t，J＝7Hz，CH3X2)實(shí)施例283′-0-(4-氯芐基)-2′-脫氧-5-氟-5′-0-甘氨酰尿嘧啶核苷L-酒石酸鹽的制備將2毫升4N鹽酸-二惡烷加入例8(A)得到的0.50克5′-0-(N-(叔丁氧基羰基)甘氨酰)-3′-0-(4-氯芐基)-2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷中，并將混合物于室溫下放置15分鐘。然后，蒸出溶劑，殘余物溶于少量水中，用飽和碳酸氫鈉水溶液使溶液成為弱堿性，并用40毫升乙酸乙酯萃取三次，在無(wú)水硫酸鎂上干燥乙酸乙酯層，將含有0.14克L-酒石酸的乙酸乙酯溶液加入其中，然后將混合液濃縮到大約40毫升。過(guò)濾所形成的沉淀物，得到0.38克(65%)的3′-0-(4-氯芐基-2′-脫氧-5-氟-5′-0-甘氨酰尿嘧啶核苷L-酒石酸鹽形狀吸濕粉末NMR(DMSO-d6)δ7.97(1H，d，J＝7Hz，C6-H)，7.40(4H，s，C6H4Cl)，7.26(7H，bs，NH，NH2，OHX2，COOH X 2)，6.14(1H，t，J＝6Hz，C1，-H)，4.54(2H，s，CH2C6H4Cl)，4.43-4.20(4H，m，C3′，4′，5′-H)，4.06(2H，s，HOOCCHOHCHOHCOOH)，3.75(2H，s，CH2CO)，2.41-2.28(2H，m，C2′-H)實(shí)施例29和30按照實(shí)施例28的步驟，并使用適當(dāng)?shù)钠鹗嘉镔|(zhì)，制備表5所示的化合物。
藥物學(xué)試驗(yàn)Ⅰ本發(fā)明的化合物12用來(lái)測(cè)試抗腫瘤作用，以證明這個(gè)化合物的用途。
試驗(yàn)方法(a)測(cè)定抗腫瘤活性的方法將每次量為5×106個(gè)細(xì)胞的肉瘤-180組織，被皮下移植到雄性ICR/JCC種鼠的背部(鼠重量27-30克)。試驗(yàn)化合物配成弱酸水溶液的形式。移植后24小時(shí)，連續(xù)七天，每天給每一只鼠(每組7只)口服劑量為1.0毫升/100克體重的該溶液一次，并且，移植后24小時(shí)，連續(xù)七天，每天給對(duì)照組每一只鼠口服1.0毫升/100克體重的不含試驗(yàn)化合物弱酸性溶液一次。
移植后第10天，腫瘤被移出體外，并稱(chēng)重計(jì)算服用含有試驗(yàn)化合物組的腫瘤的平均重量，以及對(duì)照組的相應(yīng)重量。達(dá)到抑制50%腫瘤的有效劑量(ED50)由劑量一反應(yīng)曲線測(cè)定。體重增加的50%抑制劑量(IB50)由劑量-體量變化曲線測(cè)定。治療指數(shù)(T.I.＝IB50/ED50)由下面表6所示的結(jié)果測(cè)定。
表6ED50IB50T.I.
mg/kg/天mg/kg/天化合物120.753.604.80O3′-對(duì)-氯芐基-2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷0.941.541.64表6說(shuō)明化合物12比03′-對(duì)-氯芐基-2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷有較好的效果和較大的治療指數(shù)，因此具有優(yōu)良的抗癌效果。
藥物學(xué)試驗(yàn)Ⅱ用生理鹽水將在ICR鼠腹水內(nèi)每次培養(yǎng)的肉瘤-180稀釋?zhuān)⒁悦看?×107個(gè)細(xì)胞將肉瘤-180皮下移植到雄性ICR鼠的背部。移植24小時(shí)后，將溶解在消毒的生理鹽水中的試驗(yàn)化合物每天一次，連續(xù)七天，注入每皇蟮木猜鮒小 移植后第十天，將固體腫瘤從鼠的背部皮下分離出測(cè)定腫瘤的重量。這樣測(cè)出試驗(yàn)化合物組的腫瘤重量(T)與對(duì)照組的腫瘤重量(C)的比率(T/C)。其中T/C為0.5的50%腫瘤抑制劑量(ED50值)由劑量-反應(yīng)曲線和比率(T/C)測(cè)定。表7說(shuō)明結(jié)果。
下面列出的是制備實(shí)例，說(shuō)明含有本發(fā)明化合物的藥物制劑的制備。
制備實(shí)例1膠囊劑的制備將化合物3，乳糖、結(jié)晶纖維素和谷物淀粉按下列比例混合，再按下面所示的量加入硬脂酸鎂用適當(dāng)?shù)陌z囊機(jī)將每膠囊約為293毫克混合物包上膠囊。
成份毫克/膠囊化合物3200.0乳糖30.0結(jié)晶纖維素50.0谷物淀粉10.0硬脂酸鎂3.0293.0制備實(shí)例2顆粒劑的制備將化合物7，乳糖、結(jié)晶纖維素和谷物淀粉按下面比例混合。加入10%羥基丙基纖維素的乙醇溶液，捏合混合物并以適當(dāng)?shù)脑炝C(jī)制成顆粒。顆粒進(jìn)行干燥，并調(diào)節(jié)其為12-42目。用適當(dāng)包覆機(jī)，按下面所示的量，將所得的顆粒狀物用羥基丙基甲基纖維素包覆并調(diào)節(jié)其為12-24目。
成份毫克/膠囊化合物7200.0乳糖200.0結(jié)晶纖維素311.0谷物淀粉200.0羥基丙基纖維素10.0羥基丙基甲基纖維素70.0脂肪酸單甘油酯3.5二氧化鈦5.51000.0制備實(shí)例3片劑的制備將化合物1，谷物淀粉，甘醇酸纖維素鈣按下列的比例混合。加入10%的羥基丙基纖維素的乙醇溶液，然后，捏合混合物，用適當(dāng)?shù)脑炝C(jī)造粒，顆粒進(jìn)行干燥。按下面的比例加入硬脂酸鎂和硅酸酐，用適當(dāng)?shù)膲浩瑱C(jī)將混合物壓成片，并且用羥基丙基甲基纖維素包覆。
成份毫克/膠囊化合物1200.0谷物淀粉5.0甘醇酸纖維素鈣20.0羥基丙基纖維素2.0硬脂酸鎂2.5硅酸酐2.5
羥基丙基甲基纖維素19.999Macrogol60000.001二氧化鈦2.0254制備實(shí)例4栓劑的制備“WitepsolW-35”(商標(biāo)，西德DynamiteNobel公司的產(chǎn)品)在約60℃熔化，溶液在溫度約45°保持。按下列比例將溶液和化合物5進(jìn)行混合，用適當(dāng)?shù)乃▌┲苽錂C(jī)制成每個(gè)1克的栓劑。
成份毫克/栓劑化合物5400.0WitepsolW-35600.01000.0制備實(shí)例5實(shí)施例13的化合物50毫克乳糖97毫克結(jié)晶纖維素50毫克硬脂酸鎂3毫克制成含有上述組合物的膠囊(每個(gè)200毫克)。
制備實(shí)例6實(shí)施例14的化合物10毫克乳糖184毫克結(jié)晶纖維素100毫克硬脂酸鎂6毫克制成含有上述組合物的膠囊(每個(gè)300毫克)。
制備實(shí)例7實(shí)施例19的化合物10毫克乳糖240毫克谷物淀粉340毫克羥基丙基纖維素10毫克制成含有上述組合物的顆粒(每個(gè)包覆物600毫克)。
制備實(shí)例8實(shí)施例8(E)的化合物10毫克Macrogol300500毫克注射用蒸餾水(適量)配制成含有上述組合物的注射液(每安瓿5毫升)。
制備實(shí)例9制備一千個(gè)口服片劑，每個(gè)都含有實(shí)施例22中得到的10毫克化合物，每個(gè)都含有下列組合物。
實(shí)施例22的化合物10毫克乳糖(日本藥典)45毫克谷物淀粉(″)25毫克結(jié)晶纖維素(″)25毫克甲基纖維素(″)1.5毫克硬脂酸鎂(″)1毫克將實(shí)施例22的化合物、乳糖、谷物淀粉、結(jié)晶纖維素完全混合，并且用5%的甲基纖維素水溶液將混合物制成顆粒。這樣得到的顆粒通過(guò)200目的篩，并小心干燥。干燥顆粒通過(guò)200目的篩，與硬脂酸鎂混合，混合物壓成片劑。
制備實(shí)例10實(shí)施例9的化合物10毫克Macrogol500毫克注射用蒸餾水適量配制成含有上述組合物的注射液(每安瓿5毫升)。
制備實(shí)例11實(shí)施例8(E)的化合物0.4克聚乙二醇100030克聚乙二醇600050克凈化水20克制備含有上述組合物的栓劑，每個(gè)重2.5克。
權(quán)利要求
1.式(Ⅰ)代表的2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷衍生物或其鹽
其中R1和R2中的一個(gè)是芐基，其苯環(huán)上可以任意有從C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵代C1-C3烷基、鹵素原子、羥基和硝基中選擇的取代基，而另一個(gè)是氨基酸殘基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1化合物和其鹽，其中可以任意有取代基的芐基是從下列基團(tuán)中選擇的一個(gè)基團(tuán)芐基、2-氯芐基、3-氯芐基，4-氯芐基、2-溴芐基、3-溴芐基、4-溴芐基、2-氟芐基、3-氟芐基、4-氟芐基、2、4-二氯芐基、3，4-二氯芐基、2-氯-4-溴芐基，2-三氟甲基芐基、4-三氟甲基芐基、4-硝基芐基、2，4-二硝基芐基、2-甲基芐基、4-甲基芐基、4-乙基芐基、4-叔-丁基芐基、4-甲氧基芐基、3-乙氧基芐基、4-羥基芐基、2，4-二羥基芐基和2-甲基-3-硝基芐基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中可有取代的芐基是在苯環(huán)上有一個(gè)或二個(gè)鹵原子的芐基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中氨基酸殘基是α-氨基酸殘基。
5.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中α-氨基酸殘基是蛋白質(zhì)成份的氨基酸殘基。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的化合物，其中作為蛋白質(zhì)成份的氨基酸殘基是從下列氨基酸中選擇的氨基酸的殘基，它們是丙氨酸、異亮氨酸、甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、亮氨酸、精氨酸、羥基賴氨酸、賴氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、組氨酸、羥脯氨酸和脯氨酸。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中氨基酸殘基是從下列氨基酸中選擇的氨基酸的殘基，它們是丙氨酸、異亮氨酸、甘氨酸、0-乙酰絲氨酸、纈氨酸、亮氨酸、賴氨酸、天冬氨酸-β-芐酯、苯丙氨酸、組氨酸和脯氨酸。
8.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R1是α-氨基酸殘基，R2是從下列基團(tuán)中選擇的一個(gè)基團(tuán)、它們是芐基、2-氯芐基、3-氯芐基、4-氯芐基、2-溴芐基、3-溴芐基、4-溴芐基、2-氟芐基、3-氟芐基、4-氟芐基、2，4-二氯芐基、3，4-二氯芐基、2-氯-4-溴芐基、2-三氟甲基芐基、4-三氟甲基芐基、4-硝基芐基、2，4-二硝基芐基、2-甲基芐基、4-甲基芐基、4-乙基芐基、4-叔丁基芐基、4-甲氧基芐基、3-乙氧基芐基、4-羥基芐基、2，4-二羥基芐基和2-甲基-3-硝基芐基。
9.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中R1是α-氨基酸殘基，而R2是在苯環(huán)上有1個(gè)或2個(gè)鹵素原子的芐基。
10.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R1是蛋白質(zhì)成份的氨基酸殘基，而R2是從下列基團(tuán)中選擇的一個(gè)基團(tuán)，它們是芐基、2-氯芐基、3-氯芐基、4-氯芐基、2-溴芐基、3-溴芐基、4-溴芐基、2-氟芐基、3-氟芐基、4-氟芐基、2，4-二氯芐基、3，4-二氯芐基、2-氯-4-溴芐基、2-三氟甲基芐基、4-三氟甲基芐基、4-硝基芐基、2，4-二硝基芐基、2-甲基芐基、4-甲基芐基、4-乙基芐基、4-叔丁基芐基、4-甲氧基芐基、3-乙氧基芐基、4-羥基芐基、2，4-二羥基芐基和2-甲基-3-硝基芐基。
11.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中R1是蛋白質(zhì)成份的氨基酸殘基，而R2是苯環(huán)上有一到二個(gè)鹵原子的芐基。
12.根據(jù)權(quán)利要求10的化合物，其中R1是下列氨基酸中選擇的氨基酸的殘基，它們是丙氨酸、異亮氨酸、甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、亮氨酸、精氨酸、羥基賴氨酸、賴氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、組氨酸、羥脯氨酸和脯氨酸。
13.根據(jù)權(quán)利要求11的化合物，其中R1是從下列氨基酸中選擇的氨基酸的殘基，它們是丙氨酸、異亮氨酸、甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、亮氨酸、精氨酸、羥基賴氨酸、賴氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、酪氨酸、芐丙氨酸、色氨酸、組氨酸、羥脯氨酸和脯氨酸。
14.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R1是從下列氨基酸中選擇的氨基酸的殘基，它們是丙氨酸、異亮氨酸、甘氨酸、0-乙酰絲氨酸、纈氨酸、亮氨酸、賴氨酸、天冬氨酸-β-芐酯、苯丙氨酸、組氨酸和脯氨酸，而R2是從下列基團(tuán)中選擇的一個(gè)基團(tuán)，它們是2-氯芐基、3-氯芐基、4-氯芐基、2-溴芐基、3-溴芐基、4-溴芐基、2-氟芐基、3-氟芐基、4-氟芐基、2，4-二氯芐基、3，4-二氯芐基、2-氯-4-溴芐基、2-三氟甲基芐基、4-三氟甲基芐基、4-硝基芐基、2，4-二硝基芐基、2-甲基芐基、4-甲基芐基、4-乙基芐基、4-叔丁基芐基、4-甲氧基芐基、3-乙氧基芐基、4-羥基芐基、2，4-二羥基芐基和2-甲基-3-硝基芐基。
15.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中R1是從下列氨基酸中選擇的氨基酸的殘基，它們是丙氨基、異亮氨酸、甘氨酸、0-乙酰-絲氨酸、纈氨酸、亮氨酸、賴氨酸、天冬氨酸-β-芐酯、苯丙氨酸、組氨酸和脯氨酸，而R2是苯環(huán)上有1或2個(gè)鹵素原子的芐基。
16.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R1和R2中的一個(gè)是芐基，其苯環(huán)上有1到3個(gè)從低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基和鹵素原子中選擇的取代基，而R1和R2中的另一個(gè)是下式代表的基團(tuán)，-CO-B-NR10R11其中B是可任意有苯基或低級(jí)烷硫基的低級(jí)亞烷基、而R10和R11每一個(gè)代表氫原子或低級(jí)烷基，或與連接它們的氮原子結(jié)合在一起形成哌啶環(huán)，或在雜環(huán)上的羰基不和氮原子連在一起的吡咯烷基羰基或吡啶基羰基。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的化合物，其中R2是芐基，其苯環(huán)上可任意有從低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基和鹵素原子中選擇1到3個(gè)取代基。
18.根據(jù)權(quán)利要求17中的化合物，其中R1是下式代表的基團(tuán)，其中R10和R11每一個(gè)代表氫原子，而B(niǎo)是未取代的低級(jí)亞烷基，R2是在苯環(huán)上有1或2個(gè)鹵素原子的芐基。
19.根據(jù)權(quán)利要求17的化合物，其中R1是下式代表的基團(tuán)，其中R10和R11每一個(gè)代表氫原子，而B(niǎo)是有苯基或低級(jí)烷硫基作取代基的低級(jí)亞烷基，而R2是在苯環(huán)上有1或2個(gè)鹵素原子的芐基。
20.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物是3′-0-(4-氯芐基)-2′-脫氧-5-氟-5′-0-甘氨酰尿嘧啶核苷鹽酸鹽。
21.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物是3′-0-(2，4-二氯芐基)-2′-脫氧-5-氟-5′-0-甘氨酰尿嘧啶核苷鹽酸鹽。
22.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物是3′-0-(4-氯芐基)-2′-脫氧-5-氟-5′-0-纈氨酰尿嘧啶核苷鹽酸鹽。
23.式(Ⅰ)的2′-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷衍生物或其鹽的制備方法，
其中R1和R2中的一個(gè)是芐基，其苯環(huán)上可任意有從C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵代C1-C3烷基、鹵素原子、羥基和硝基中選擇的取代基，而另一個(gè)是氨基酸殘基，該方法包括下式的化合物，
其中，R3和R4中的一個(gè)是氫原子，而另一個(gè)是芐基，其苯環(huán)上可任意有從C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵代C1-C3烷基、鹵素原子、羥基和硝基中選擇的取代基，與下式的氨基酸或其反應(yīng)衍生物進(jìn)行反應(yīng)，其中A是在N-位置上有保護(hù)基團(tuán)的氨基酸殘基，而且如果需要，從得到的化合物中除去保護(hù)基。
24.下式的化合物或其鹽的制備方法
其中R1和R2中的一個(gè)是芐基，其苯環(huán)上可任意有從C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵代C1-C3烷基、鹵素原子、羥基和硝基中選擇的取代基，而另一個(gè)是氨基酸殘基，該方法包括在三氟甲基磺酸存在下，下式的2′-脫氧尿嘧啶核苷衍生物
其中R7和R8中的一個(gè)是氫原子，而另一個(gè)是在N-位置上有保護(hù)基團(tuán)的氨基酸殘基，與下式的亞胺酸芐脂進(jìn)行反應(yīng)，
其中R9是芐基，其苯環(huán)上可任意有C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、鹵代C1-C3烷基、鹵素原子、羥基和硝基中選擇的取代基，如果需要，將所得到的化合物進(jìn)行鹽的交換反應(yīng)。
25.治療癌的組合物，包括有效量的權(quán)利要求1的化合物和其醫(yī)藥上可接受的載體。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了3式(I)的2，-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷衍生物或其鹽。
文檔編號(hào)C07H19/06GK1032169SQ88106380
公開(kāi)日1989年4月5日 申請(qǐng)日期1988年8月1日 優(yōu)先權(quán)日1987年7月31日
發(fā)明者多田幸雄, 上村敦彥, 安本三治, 武田節(jié)夫, 齊藤等, 采見(jiàn)男 申請(qǐng)人:大鵬藥品工業(yè)株式會(huì)社, 大制藥株式會(huì)社