專利名稱：二氮雜除草劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及除草化合物(其中有些是新化合物)、其制備方法以及含這些化合物的組合物。
我們已發(fā)現(xiàn)下式(Ⅰ)的3，6，7，8-四氫咪唑并[4，5-d]-[1.3]二氮雜
-8-醇衍生物及其糖軛合物具有除草活性，式Ⅰ為
根據(jù)慣例，上式中的虛線表明兩個碳原子之間的鍵既可以是單鍵也可以雙鍵。其中相鄰碳原子之間是單鍵的上述化合物是新化合物，本發(fā)明的一個方面就是提供這些化合物。
本文所指的式Ⅰ化合物的糖軛合物包括這樣一些化合物，即其分子上的一個或多個-OH基團(tuán)或-NH基團(tuán)分別由基團(tuán)-OR或-NR取代，這里R是糖基，尤其是己糖基，具體的是葡萄糖基。較為理想的是，糖軛合物上僅存在單一糖基。同樣理想的是，基團(tuán)-OR取代式Ⅰ-CHOH基團(tuán)中的-OH。
下文中所用“式Ⅰ化合物”一詞包括糖軛合物。
式Ⅰ化合物對于寬葉雜草具有廣譜除草活性。因此，它們可用作除草劑，既可用于整體除草，也可作為選擇性除草劑，尤其用于控制谷類植物或其它作物上的雜草。所述作物包括小麥、水稻、大麥、玉米、大豆、油菜、棉花或糖甜菜。
另一方面，本發(fā)明提供了一種或多種用作除草劑的式Ⅰ化合物;還提供了除草組合物，該組合物包括一種或多種式Ⅰ化合物以及與之結(jié)合的適宜載體和/或表面活性劑。
各式Ⅰ化合物包含若干旋光中心和旋光異構(gòu)體。本發(fā)明決不限定于具體的旋光異構(gòu)體，但通常在這類化合物中，某些旋光異構(gòu)體在某些方面可能比其它異構(gòu)物具有高得多的活性。
本發(fā)明的優(yōu)選化合物包括3-[2，3-二羥基-4-(羥甲基)環(huán)戊基]-3，6，7，8-四氫咪唑并[4，5-d][1，3]二氮雜
-8-醇(下文稱之為“化合物A”)、3-[2，3-二羥基-4-(β-D-葡萄糖基氧甲基)環(huán)戊基]-3，6，7，8-四氫咪唑并[4，5-d][1，3]二氮雜
-8-醇(即化合物A的葡萄糖軛合物)，以及3-[4，5-二羥基-3-(羥甲基)環(huán)戊-2-烯-1-基]-3，6，7，8-四氫咪唑并[4，5-d][1，3]-二氮雜
-8-醇(下文稱之為“化合物B”)。這些化合物的優(yōu)選旋光異構(gòu)體被認(rèn)為是8R-3-[(1R，2S，3R，4R)-2，3-二羥基-4-(羥甲基)環(huán)戊基]-3，6，7，8-四氫咪唑并[4，5-d][1，3]二氮雜
-8-醇(下文稱之為“化合物A1”)，相應(yīng)的4-(β-D-葡萄糖基氧甲基)衍生物(下文稱之為“化合物A2”)，8R-3-[(1R，2S，3R，4S)-2，3-二羥基-4-(羥甲基)環(huán)戊基]-3，6，7，8-四氫咪唑并[4，5-d][1;3]二氮雜
-8-醇(下文稱之為“化合物A3”)，以及8R-3-[(1R，4R，5S)-4，5-二羥基-3-(羥甲基)環(huán)戊-2-烯-1-基]-3，6，7，8-四氫咪唑并[4，5-d][1，3]-二氮雜
-8-醇(下文稱之為“化合物B1”)。
所述組合物通常含0.01%至99%(重量)本發(fā)明化合物，一般最初是以濃縮物形式制備的，濃縮物含0.5%至99%、優(yōu)選的是0..5%至85%、特別優(yōu)選的是10%至50%(重量)所述化合物。需要時，在施于待處理目標(biāo)物前對上述濃縮物進(jìn)行稀釋，使活性成分占所用配方的0.01%至5%(重量)。
所用載體可以是水，在此情況下，也可采用有機(jī)溶劑，盡管這時通常是不用有機(jī)溶劑的。
另外，該載體也可以是化合物溶解或混懸于其中的不溶于水的有機(jī)溶劑?？衫帽砻婊钚詣┬纬珊胁蝗苡谒娜軇┑目扇榛瘽饪s液，這樣，該濃縮液與水混合時起著自身乳化油的作用。
或者，該載體可以是溶于水的有機(jī)溶劑，例如2-甲氧乙醇、甲醇、丙二醇、二甘醇、二甘醇-乙醚、甲基甲酰胺或二甲基甲酰胺。
或者，該載體可以是細(xì)分或顆粒固體。適宜固體的例子是石灰石、粘土、砂、云母、白堊、硅鎂土、硅藻土、珍珠巖、海泡石、硅石、硅酸鹽、木素磺酸鹽和固體肥料。載體可以是天然的或人造的，或者可以是改性的天然原料。
將顆粒狀的化合物與顆粒狀載體混合，或者將熔融的化合物噴在粒狀載體上，將濕潤劑和分散劑混合，最后研磨全部粉狀混合物，可形成溶于或分散于水的可濕性粉劑。
將本發(fā)明化合物與推進(jìn)劑(例如二氯氟甲烷之類的多鹵烷烴)混合，并且與適宜溶劑混合，可形成氣霧劑組合物。
所用“表面活性劑”一詞在廣義上包括多種稱為乳化劑、分散劑和濕潤劑的材料，這類材料是專業(yè)上公知的。
所用表面活性劑可包括陰離子表面活性劑，例如磷酸與脂肪醇乙氧化物的單酯或雙酯，或這類酯的鹽，脂肪醇硫酸鹽，例如十二烷基硫酸鈉，乙氧基脂醇硫酸鹽，乙氧基烷基酚硫酸鹽，木素硫酸鹽，石油硫酸鹽，烷芳基磺酸鹽，例如烷基苯磺酸鹽或低級烷基萘磺酸鹽，磺化萘甲醛縮合物的鹽，磺化酚甲醛縮合物的鹽，或多種復(fù)合物的磺酸鹽，例如酰胺磺酸鹽，如沒酸和N-甲基牛磺酸的磺化縮合產(chǎn)物，或二烴基硫代琥珀酸鹽，例如二辛基琥珀酸酯的磺酸鈉。
表面活性劑還可包含非離子型表面活性劑，例如脂肪酸酯，脂肪醇、脂肪酸酰胺或烷基取代的酚與環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物，多元醇醚的脂肪酯，如脫水山梨醇脂肪酯，這類酯與環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物，如聚氧乙烯脫水山梨糖醇脂肪酸酯，環(huán)氧乙烷與環(huán)氧丙烷的嵌段共聚物，炔甘醇，例如2，4，7，9-四甲基-5-癸炔-4，7-二醇，或乙氧炔甘醇。
表面活性劑還可包含陽離子表面活性劑，例如烷基-和/或芳基-取代的季銨化合物，例如十六烷基三甲基溴化銨，或乙氧基叔脂肪胺。
優(yōu)選的表面活性劑包括乙氧脂醇硫酸鹽、木素磺酸鹽、烷基-芳基磺酸鹽、磺化萘甲醛縮合物的鹽、磺化酚甲醛縮合物的鹽、油酰N-甲基?；撬徕c、二烴基硫代琥珀酸鹽、烷基酚乙氧基化物，以及脂肪烷基乙氧化物。
本發(fā)明化合物可與無機(jī)化合物[例如(NH4)2SO4]油或其它農(nóng)藥(如除草劑、殺菌劑或殺蟲劑)或植物生長調(diào)節(jié)劑混合，尤其是與其它除草劑混合。其它適宜的除草劑包括草達(dá)津、利谷隆、2甲4氯，2，4-滴丙酸、isoxaben、diflufenican、metolachlor、伏草隆、oxyfluofen、fomesafen、噻草平、撲草津、達(dá)草滅、chlomazone、撲草滅、imazaquin，尤其是草甘磷、metsulfuro methyl、sulfom-eturon、ixoproturon、噻唑隆、氟樂靈、碘苯腈、溴苯腈、鹽酸妥拉蘇林、mecoprop、fulroxypyr、劃不綠、acifluorfen、lactofen、賽克津、pendimethalin、ethofumesate、benfuresate和苯敵草。
可將本發(fā)明化合物施于植物、土壤、田地或水地，尤其是作物生長地，該化合物尤其具有萌后活性。它們可以按0.02至2kg/ha，尤其是0.1至1kg/ha的比例施用。
可通過下述方法制備本發(fā)明化合物。
因此，本發(fā)明的第三個方面提供了制備式Ⅰ化合物的方法，該方法包括以下步驟，培養(yǎng)一種能產(chǎn)生式Ⅰ化合物的微生物，需要時，從中分離出所述化合物。
通過小規(guī)模試驗(yàn)，以及通過高效液相層析，對微生物發(fā)酵后得試樣進(jìn)行分析，可容易地鑒定所述能產(chǎn)生本發(fā)明化合物的微生物。
尤其是，用于本發(fā)明方法的微生物是先前未描述的微生物菌株，是于1989年4月13日存放在NationalCollectionofIndustrialandMarineBacteria，TorryResearchStation，135AbbeyRoad，Aberdeen，Scotland的永久培養(yǎng)物收藏中心的，其保藏號為No.NCIMB40131。NCIMB40131是某種放線菌，在以下分類標(biāo)記的基礎(chǔ)上，可稱之為Amycolatopsisspp[(LechevieretalIntJSyst.Bacteriol36，29-37(1986)]，分類標(biāo)記為-化學(xué)類型4細(xì)胞壁(WallChemotypeⅣ)，含有介二氨基庚二酸，阿拉伯糖和半乳糖，作為特征糖(整個細(xì)胞糖為A型);
-不存在霉菌酸;
-磷脂Ⅱ型，因此含有作為特征脂的phosopatidyl乙醇胺。
采用對于AmycolatopsisSpp(PrauserW2，W4，W7，W11)具有特異性的放線菌噬菌體也可證實(shí)有機(jī)體的屬類。
以下實(shí)施例6中給出了NCIMB40131的特性。
本發(fā)明的第四個方面提供了微生物NCIMB40131本身及其突變體。
上述菌株的突變體可自發(fā)產(chǎn)生，或者可通過多種方法產(chǎn)生，這些方法包括HIAdler在TechniquesfortheDevelopmentofMicroorganisms中概括的方法[見“RadiationandRadioisotopesforIndustrialMicroorganisms”，ProceedingsoftheSymposium，Vienna1973，p241，InternationalAtomicEnergyAuthority]。這些方法涉及電離輻射，用N-甲基-N′-硝基-N-硝基胍(NTC)處理、加熱等化學(xué)方法，遺傳技術(shù)(例如重組、轉(zhuǎn)導(dǎo)作用、轉(zhuǎn)換、溶原化作用和溶原轉(zhuǎn)變)，以及用于自發(fā)突變體的選擇技術(shù)。
本發(fā)明的第五個方面是提供了NCIMB40131遺傳物質(zhì)及其在合成式Ⅰ化合物時沉淀的突變體?？刹捎贸Ｒ?guī)遺傳工程技術(shù)獲得這類物質(zhì)。所述常規(guī)遺傳工程技術(shù)包括DAHopwood概述的一類，參見“CloningGenesforAntibioticBiosynthesisinStreptomycesSppProductionofaHybridAntibiotic”P409-413，Microbiology1985，EdLLieve，AmericanSocietyofMicrobiology，WashingtonDC1985?？砂凑疹愃朴谇懊嫠龅姆绞剑瑢⑦@類技術(shù)用于無性繁殖抗菌素生物合成基因，包括放線紫素生物合成基因(Malpartida，F(xiàn)andHopwood，DA1984，Nature309，P462-464)，紅霉素(Stanzak，Retal，1986，Biotechnology，4，P229-232)和青霉素涉及的重要酶和以AcremoniumChrysogenum生產(chǎn)先鋒霉素(Sansom，SMetal，1985，Nature，318，P191-194)。由此得到的遺傳物質(zhì)可用于改良菌株，用于生產(chǎn)供體外應(yīng)用的生物合成酶，或者通過將這類物質(zhì)引入不同于NCIMB40131的有機(jī)體而產(chǎn)生新的除草劑。
采用常規(guī)的手段，即在可同化的碳源、氮源和無機(jī)鹽的存在下，對有機(jī)體進(jìn)行培養(yǎng)，對適宜有機(jī)物進(jìn)行發(fā)酵，由此生產(chǎn)本發(fā)明化合物。
可通過單一或復(fù)雜營養(yǎng)素來提供可同化的碳源、氮源和無機(jī)物。碳源通常包括葡萄糖、麥芽糖、淀粉、甘油、糖漿、糊精、乳糖、蔗糖、果糖、羧酸、氨基酸、甘油酯、醇、烷烴和植物油。碳源通常占發(fā)酵介質(zhì)的0.5%至10%(重量)。
氮源通常包括大豆粉、玉米浸泡液、酒糟、酵母提取物、棉籽粉、蛋白胨、花生粉、麥精、糖漿、軀蛋白、氨基酸混合物、氨(氣體或溶液)、銨鹽或硝酸鹽。也可采用尿素或其它酰胺。氮源占發(fā)酵介質(zhì)的0.1%至10%(重量)。
可引入到培養(yǎng)介質(zhì)中的營養(yǎng)無機(jī)鹽包括用的能夠產(chǎn)生鈉、鉀、銨、鐵、鋅、鎳、鈷、錳、鋇、鉻、鈣、銅、鉬、硼酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、氯化物和碳酸鹽離子的鹽。
有機(jī)體的培養(yǎng)通常在20℃至40℃、優(yōu)選的是25℃至35℃(尤其是約28℃)下進(jìn)行，最好利用吹氣和攪拌(搖振或攪拌)。開始時可用少量已形成孢子微生物的混懸液對介質(zhì)接種，但為了避免生長滯后，可通過用孢子形式的有機(jī)體接種少量培養(yǎng)介質(zhì)，制備有機(jī)體的營養(yǎng)接種物，由此得到的營養(yǎng)接種物可移至發(fā)酵介質(zhì)，或者更理想的是移至一種或多種接種物有機(jī)體，在此進(jìn)一步生長，然后移至主要發(fā)酵介質(zhì)。通常在5.5至8.5、優(yōu)選的是5.5至7.5的pH范圍內(nèi)進(jìn)行發(fā)酵?？梢园葱枰獙A或酸加到發(fā)酵介質(zhì)中，使pH保持在理想的范圍內(nèi)?？刹捎玫倪m宜堿包括堿金屬氫氧化物，例如氫氧化鈉水溶液，適宜的酸包括無機(jī)酸，例如鹽酸或硫酸。
發(fā)酵可進(jìn)行2-10天，例如大約5天?？杉尤敕滥瓌钥刂七^度的泡沫產(chǎn)生。根據(jù)所要求的間隔進(jìn)行添加。
本發(fā)明化合物主要包含在發(fā)酵肉湯中。通過過濾或離心，可方便地將菌絲體從肉湯中移出。
作為農(nóng)業(yè)除草劑使用時，可不必使化合物同產(chǎn)生該化合物的發(fā)酵介質(zhì)分離。
若需要使本發(fā)明化合物同整個發(fā)酵物分離時，可通過慣用的分離技術(shù)實(shí)現(xiàn)之。這種分離技術(shù)也可應(yīng)用于澄清前或澄清后的發(fā)酵肉湯。可以理解，分離技術(shù)的選擇余地是很寬的。
可采用多種分離技術(shù)分離本發(fā)明化合物。這些技術(shù)包括吸附洗脫、沉淀、分級結(jié)晶、溶劑萃取和液-液分配，它們可按多種方式組合使用。
可在適宜床式載體上進(jìn)行層析，或者更理想的是將待分離物填充到柱上，這樣尤其適于分離本發(fā)明化合物。
在下述適宜的載體上進(jìn)行層析(包括高效液相層析)，可容易地將本發(fā)明化合物從發(fā)酵肉湯中分離和/或提純。所述適宜載體包括二氧化硅;無官能團(tuán)大網(wǎng)絡(luò)吸附樹脂，如交聯(lián)苯乙烯二乙烯苯聚合物樹脂[例如AmberliteXAD-2、XAD-4、XAD-16或XAD-1180樹脂(Rohm&HaasLtd)或卡斯特爾樹脂S1112(Montedison)];取代的苯乙烯二乙烯苯聚合物，例如鹵化(例如溴化)苯乙烯二乙烯苯聚合物，如甲醛系樹脂SP207(Mitsubishi);與有機(jī)溶劑相溶的交聯(lián)糊精，例如羥丙基化葡聚糖凝膠(PharmaciaUKLtd)，或反相載體，例如烴連接的二氯化硅(如C連接的二氧化硅)。
顯然適合于層析提純/分離本發(fā)明化合物的溶劑/洗脫劑根據(jù)柱載體的性質(zhì)而定。已發(fā)現(xiàn)，在使用諸如苯乙烯二乙烯苯交聯(lián)葡聚糖SAD-2和C-18連接的二氧化硅之類的柱載體是時，甲醇特別適合，在與諸如水之類的極性溶劑結(jié)合使用時尤其如此。
通過常規(guī)技術(shù)(例如高效液相色譜或紫外光譜法)，或利用下述化合物性質(zhì)，可監(jiān)測本發(fā)明化合物在提取/分離過程中的情況。
當(dāng)通過層析提純得到的本發(fā)明化合物呈溶液(含有機(jī)溶劑)時，可通過常規(guī)方法，例如蒸發(fā)，除去溶液，得到呈固體或結(jié)晶狀的化合物，需要時，通過上述層析技術(shù)和/或結(jié)晶法，可進(jìn)一步將本發(fā)明化合物純化。
通過適宜地組合上述方法，分離出呈固體狀的本發(fā)明化合物，可以理解，實(shí)施上述純化步驟的順序以及這些步驟的選擇余地是很大的。
利用以下實(shí)施例說明本發(fā)明。
實(shí)施例1將放線菌類的NCIMB40131孢子接種到由下列成分構(gòu)成的瓊脂斜面培養(yǎng)物上，在28℃下培養(yǎng)10天，培養(yǎng)物成分為g/l酵母提取物(OxoidL21)0.5麥精(OxoidL39)30.0真菌蛋白胨(OxoidL40)5.0瓊脂No.3(OxoidL13)15.0蒸餾水加至1升pH約為5.4然后，用6ml10%甘油溶液覆蓋成熟的敘面培養(yǎng)物，用消毒工具刮擦，以便使孢子和菌絲體分散。將0.4ml所得孢子混懸液的等分液移至消毒的聚丙烯包內(nèi)，然后熱封，以液氮汽化液體內(nèi)儲存，以備后用。
將單個包的內(nèi)含物用來接種兩份50ml的接種物介質(zhì)(A)等份液，該介質(zhì)(A)由如下成份組成g/lD-葡萄糖15.0甘油15.0大豆蛋白胨15.0NaCl3.0CaCO31.0蒸餾水加至1升在高壓消毒前，用氫氧化鈉水溶液將介質(zhì)的未經(jīng)調(diào)整的pH值由6.7調(diào)至pH7.0。高壓消毒后，介質(zhì)的pH為7.3。
將兩份在250ml錐瓶內(nèi)的50ml體積的接種后介質(zhì)于28℃下培養(yǎng)3天;該錐瓶架在沿50mm直徑軌跡、以250rpm旋轉(zhuǎn)的搖動器上振動。
將培養(yǎng)后的介質(zhì)匯集起來，以3%、20×250ml的水平接種到含50ml介質(zhì)(B)的錐瓶內(nèi)，用NaOH將pH調(diào)至6.5，介質(zhì)(B)包含以下成分g/lD-葡萄糖2.5麥芽糊精MD30E(Roquette(UK)Ltd)25.0Arkasoy50(BritishArkadyCoLtd)12.5甜菜糖漿1.5KH2PO40.125碳酸鈣MOPS(3-(N-嗎啉代)丙烷磺酸)21.0蒸餾水加至1升該培養(yǎng)物在振蕩下，于28℃生長5天。
通過離心，分離細(xì)胞和培養(yǎng)物流體。
實(shí)施例2將50ml接種物介質(zhì)(A)置于八只各為250ml的錐瓶中，用氫氧化鈉水溶液將pH值由開始的6.7調(diào)至7.0。高壓消毒后的pH為7.3。用0.2ml取自包內(nèi)的孢子混懸液分別接種各錐瓶，并按以上實(shí)施例1中所述的方法進(jìn)行制備。
在28℃下，對將錐瓶培養(yǎng)3天，該錐瓶架在沿50mm直徑軌跡、以250rpm旋轉(zhuǎn)的搖動器上振動。
收集8只錐瓶的內(nèi)含物，用于接種到含12升介質(zhì)(B)的20升發(fā)酵容器中去，在高壓消毒前用5NNaOH將pH調(diào)至6.5。
采用以800rpm旋轉(zhuǎn)的普通高速攪拌機(jī)對接種后的介質(zhì)進(jìn)行攪拌。使消毒空氣以0.5體積空氣/培養(yǎng)物體積/分鐘的水平分配給介質(zhì)，從而對培養(yǎng)物進(jìn)行充氣。
將溫度控制在28℃，通過添加硅酮防沫劑來克服過度的泡沫產(chǎn)生。經(jīng)過5天生長后，收集培養(yǎng)物，按實(shí)施例1所述的方法加工。
將100g苯乙烯二乙烯苯交聯(lián)共聚凝膠樹脂(Rohm and Haas Ltd)加到2升取自上述發(fā)酵物的含水上清液中，于室溫下將混合物攪拌20小時，濾出樹脂，接著用250ml 10%甲醇水溶液洗滌，收集到約250ml洗出液。將各洗出液的5μl等分液施于若干酸模葉蓼植物的生長著的頂芽上，然后使之于控制環(huán)境下生長7天，此后，就除草效果對植物進(jìn)行評價。將顯示除草活性的部分合并，將其加到填充在水中的C連接的二氧化硅柱(5cm×2cm)上。接著，用98∶2水∶甲醇洗滌柱，收集到大約250ml洗出液。將上述試驗(yàn)中的顯示除草活性的洗出液合并，蒸發(fā)，在Dynamax C-18柱(250mm×21mm，Rainin Instruments)上經(jīng)制備高效液相色譜純化，采用水和甲醇梯度系統(tǒng)洗脫。通過紫外光譜法，在280nm處監(jiān)測到柱上洗出物。采用Dynamax C-18柱(250mm×4.6mm，Rainin Instruments)，經(jīng)高效液相色譜對具有生物活性的部分進(jìn)行分析，以1ml/min的流速，用水作為洗脫相，合并含類似成分的部分(化合物B1、A3、A1和A2的滯留時間分別大約為10分鐘、17分鐘、21分鐘和23分鐘)，蒸發(fā)，采用Zorbax TMS(250×10mm)柱進(jìn)一步經(jīng)高效液相色譜純化，在280nm處監(jiān)測洗脫液、將具有生物活性的部分蒸發(fā)后，得到呈固體的化合物A和B以及各自的葡萄糖軛合物(其中葡糖殘基取代了-CH2OH中OH的氫原子)。
利用UV.nmr以及質(zhì)譜法證實(shí)所得化合物的結(jié)構(gòu)，主要化合物的特征峰值如下化合物B1(滯留時間約10分鐘)UV(甲醇)279nm質(zhì)譜(熱擴(kuò)散)281(M+H)NMR(300MHz，DO)δ7.25(1H，s)，7.05(1H，s)，5.80(1H，d)，5.22(1H，d)，5.05(1H，d)，4.55(1H，d)，4.20(2H，s)，4.10(1H，m)，3.35(1H，d)，3.20(1H，d)化合物A1(滯留時間大約21分鐘)UV(甲醇)282nm質(zhì)譜(熱擴(kuò)散)283(M+H)NMR(300MHz，D2O)δ7.50(1H，s)，7.05(1H，s)，5.02(1H，d)，4.50(1H，m)，4.20(1H，dd)，3.90(1H，dd)，3.55(2H，d)，3.40(1H，dd)，3.30(1H，d)，2.30(1H，m)，2.10(1H，m)，1.48(1H，m)化合物A2(滯留時間大約23分鐘)UV(甲醇)281nm質(zhì)譜(快速原子轟擊，硫甘油)467(M+H)445(M+H)NMR(300MHz，D2O)δ7.40(1H，s)，7.05(1H，s)，5.05(1H，d)，4.55(1H，m)，4.41(1H，d)，4.20(1H，dd)，4.05(1H，m)，3.75(1H，d)，3.60(1H，dd)，3.50(2H，m)，3.2-3.4(6H，m)，2.30(2H，m)，1.45(1H，m).
化合物A3(滯留時間大約17分鐘)UV(甲醇)280nm質(zhì)譜(熱擴(kuò)散)283(M+H)NMR(300MHz，D2O)δ7.50(1H，s)，7.00(1H，s)，5.00(1H，d)，4.61(1H，m)，4.25(1H，dd)，4.10(1H，dd)，3.50(2H，m)，3.35(1H，dd)，3.25(1H，dd)，2.45(1H，m)，2.00(1H，m)，1.75(1H，m)實(shí)施例3-4重復(fù)實(shí)施例1和2的步驟，但用下列介質(zhì)取代介質(zhì)(B)g/l甘油23.0L-脯氨酸11.5MOPS(3-(N-嗎啉代)丙烷磺酸21.0EDTA0.25NaCl0.5MgSO4.7H2O 0.49CaCl2.2H2O 0.029K2HPO40.52微量鹽0.5mlpH6.5所含的微量鹽
H2SO4(1M) 10mlZnSO4.4H2O 8.6gMnSO4.4H2O 2.23gH3BO30.62gCuSO4.5H2O 1.25gNa2MoO4.2H2O 0.48gCoCl4.6H2O 0.48gFeSO4.7H2O 18.0gKI0.83g蒸餾水加至1升按所示順序?qū)⒏鞒煞秩芙庥谡麴s水中。
實(shí)施例5使下表中所列的作物和雜草在25℃(非溫帶種)或21℃(溫帶種)的控制環(huán)境下、于滅菌的亞粘土中生長。在早期生長階段，對作物進(jìn)行噴霧。將按照實(shí)施例2生產(chǎn)的和下面所列的化合物分別配入含25%甲醇的蒸餾水中，加入0.5%Tween20和0.05%起泡劑作為潤濕劑。噴灑體積為每公頃2000升，活性成分施用比例為0.2至0.5kg/ha。將經(jīng)過處理的植物放回控制環(huán)境下，或置于溫室內(nèi)，兩星期后根據(jù)以下尺度進(jìn)行評估，即0表示無作用，1表示輕微損害，2表示中度損害，3表示良好控制，4表示完全殺死。在下表中，化合物A1、A2、A3和B1如前所鑒定。
所得結(jié)果如下化合物B1A1A2A3比例(kg/ha)0.20.50.20.4稻2---
大麥1321棉花2---淺色蓼屬2442珍珠菊3310朝顏花1222鳥麥0212茅草0201燈心草1222實(shí)施例6NCIMB40131的特征孢子顏色(ISP介質(zhì)4)白色基質(zhì)顏色(ISP介質(zhì)4)淡桔色孢子鏈形狀(ISP介質(zhì)4)短，呈波狀彌散性顏料(ISP介質(zhì)5)的生產(chǎn)-黑色素的生產(chǎn)(ISP介質(zhì)6)-黑色素的生產(chǎn)(ISP介質(zhì)7)-黃嘌呤的降解-彈性蛋白的降解+馬尿酸鹽的降解-(弱)軀蛋白的降解+酪氨酸的降解-采用下述糖生長-L-鼠李糖+肌醇+D-蜜二糖+葡萄糖+
蔗糖+甘露糖醇+蜜三糖-阿東糖醇+葡聚糖-木糖-利用-DL-α-氨基丁酸+L-半胱氨酸-L-纈氨酸+L-苯基丙氨酸+L-組氨酸+L-羥基脯氨酸-脂類分解作用-卵磷脂酶活性生長(溫度)-28℃+37℃差45℃-采用下列無機(jī)物生長-NaCl(7%，W/V)-NaN3(0.01%，W/V -酚(0.1%，W/V)-亞碲酸鉀(0.001%，W/V)+乙酸亞鉈(0.001%，W/V)+在28℃下，有機(jī)物在麥芽酵母瓊脂、燕麥粉瓊脂和Bonnt瓊脂上良好地生長7-14天。
細(xì)胞壁含介二氨基庚二酸，由下列物質(zhì)產(chǎn)生酸阿東糖醇-阿拉伯糖+纖維二糖+半乳糖+肌醇+乳糖+麥芽糖+甘露糖醇-蜜二糖+蜜三糖-鼠李糖+水楊甘-山梨糖醇-蔗糖+Threhalose+木糖+果糖+甘油+甘露糖+
權(quán)利要求
1.一種除草組合物，該組合物包含0.01%至99%(重量)一種或多種下式(I)的3，6，7，8-四氫咪唑并[4·5-d]-[1.3]二氮雜
-8-醇衍生物及其糖軛合物，以及與之結(jié)合的適宜載體和/或表面活性劑。式(I)為
式中虛線表示兩個碳原子之間的鍵既可以是單鍵也可以是雙鍵。
2.按權(quán)利要求1的除草組合物，其中式Ⅰ化合物是3-[2，3-二羥基-4-(羥甲基)環(huán)戊基]-3，6，7，8-四氫咪唑并[4，5-d][1，3]二氮雜
-8-醇。
3.按權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的除草組合物，其中式Ⅰ化合物是8R-3-[(1R，2S，3R，4R)]-3，6，7，8-四氫咪唑并[4，5-d][1，3]二氮雜
-8-醇。
4.按權(quán)利要求1的除草組合物，其中活性成份是權(quán)利要求2或權(quán)利要求3中所定義化合物的糖軛合物。
5.按權(quán)利要求4的除草組合物，其中糖軛合物是葡萄糖軛合物。
6.按權(quán)利要求4或權(quán)利要求5的除草組合物，其中糖軛合物是具有下述性質(zhì)的一類，即式Ⅰ化合物中-CH2OH的-OH被-OR取代，其中R是糖基。
7.按權(quán)利要求6的除草組合物，其中式Ⅰ化合物是8R-3-[(1R，2S，3R，4R)-2，3-二羥基-4-(β-D-葡糖氧基甲基)-環(huán)戊基]-3，6，7，8-四氫咪唑并[4，5-d][1，3]-二氮雜
-8-醇。
8.按權(quán)利要求1至7中任一權(quán)項(xiàng)的除草組合物，該組合物含總量為0.5%至85%(重量)的式Ⅰ化合物或其糖軛合物。
9.一種制備如權(quán)利要求1所定義的式Ⅰ化合物或其糖軛合物的方法，該方法包括培養(yǎng)能產(chǎn)生所述化合物的微生物，需要時從中分離所述化合物。
10.一種抗雜草的方法，該方法包括將有效量的一種或多種如權(quán)利要求1所定義的式Ⅰ化合物或其糖軛合物施于雜草。
全文摘要
本發(fā)明公開了式(I)的具有除草作用的除草3，6，7，8-四氫咪唑并[4，5-d]-[1，3]二氮雜草-8-醇衍生物及其糖軛合物，含這類化合物的組合物，以及它們的制備方法，式I為
文檔編號C07D487/04GK1047188SQ9010351
公開日1990年11月28日 申請日期1990年5月12日 優(yōu)先權(quán)日1989年5月13日
發(fā)明者布賴恩·戴維·布什, 鄧肯·阿利斯泰爾·蓋茨, 戴維·蘭利 申請人:先靈農(nóng)業(yè)化學(xué)品公司