專利名稱：制備吡咯并嘧啶及其中間體的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種制備新的吡咯并〔2，3-d〕嘧啶衍生物的方法，這種衍生物能有效地用作抗癌藥;本發(fā)明還涉及該衍生物的中間體及其制備方法。
在生物體中作為甲酸，甲醛等的一碳(C1)單元轉(zhuǎn)移劑的葉酸，在各種酶反應(yīng)系統(tǒng)中起著輔酶的作用。例如，在核酸生物合成，氨基酸肽代謝和甲烷形成體系中。具體地說，在核酸生物合成系統(tǒng)中，該化合物對(duì)核酸兩種生物合成途徑(即嘌呤核苷酸途徑和胸苷核苷酸途徑)的甲?；磻?yīng)來說是必不可少的。為了證明其生物活性，葉酸一般要經(jīng)兩步驟還原反應(yīng)，以轉(zhuǎn)化為活性輔酶。氨甲蝶呤(氨甲蝶呤MTX)及其類似化合物是公知的強(qiáng)烈地結(jié)合酶(二氫葉酸還原酶)的藥物，這類藥物能控制其第二階段，從而抑制了二氫葉酸還原成四氫葉酸。這些藥物(起著削弱DNA合成的作用，致使細(xì)胞死亡)已被研制成抗癌藥物，而且目前作為臨床藥物占據(jù)了很重要的作置。另一方面，已提出了一種新的四氫氨其蝶呤抗癌藥(5，10-二氮雜
-5，6，7，8-四氫氨基蝶呤DDATHF)，它具有蝶啶環(huán)的基本骨架，但其作用機(jī)理與這種結(jié)構(gòu)類似的藥物不同，對(duì)二氫葉酸還原酶沒有抑制活性，且主要是通過在嘌呤生物合成途徑的初始步驟中抑制甘氨酰胺“核苷”轉(zhuǎn)移甲酰酶的機(jī)理完成的(醫(yī)藥化學(xué)雜志28，914(1985))。
已提出常用臨床藥物的MTX-主要是通過葉酸拮抗作用的抗癌藥。但由于這種藥具有較強(qiáng)的毒性和對(duì)固體腫瘤作用不大，因此不能獲得滿意的治療效果。另外，還存在著腫瘤細(xì)胞對(duì)這種藥物嚴(yán)重的抗藥性問題。因此，目前特別期望開發(fā)出能顯示出改進(jìn)的效率和以新的作用機(jī)理對(duì)癌細(xì)胞顯示出選擇性毒性的抗癌藥物。
根據(jù)以上情況，本發(fā)明人對(duì)制備無蝶啶環(huán)化合物的方法及這種化合物的抗癌活性進(jìn)行了廣泛深入研究。所以，本發(fā)明人提出了制備5-取代的吡咯并〔2，3-d〕嘧啶衍生物的新方法，所述衍生物在產(chǎn)率、吡咯環(huán)形成的選擇性等具有工業(yè)化優(yōu)點(diǎn);而且，本發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)，由這種生產(chǎn)方法制得的大量的新的化合物可以對(duì)人體腫瘤細(xì)胞具有強(qiáng)大的抑制生長活性?；谝陨习l(fā)現(xiàn)便建立了本發(fā)明。
因此，本發(fā)明涉及(1)一種制備以下通式表示的化合物或其鹽的方法
其中環(huán)A代表一個(gè)可以被氫化的吡咯環(huán);X代表氨基、羥基或巰基;R2和R3可相同或不同，分別代表氫或可以被取代的烷基、烯基或炔基;R4代表OR5(其中R5代表氫或可以被取代的烴基)或NHCH(COOR6)CH2CH2COOR7(其中R6和R7分別代表氫或可以被取代的烴基);n代表一個(gè)1-4的整數(shù)，其特征在于所述方法包括以下步驟;
使以下通式表示的化合物或其鹽
(其中X，R1，R2，R3，R4和n定義如上;Y1和Y2分別代表氧或硫原子;R8和R9可相同或不同，分別代表可以被取代的烴基)在化合物中
基再生成羰基期間或之后進(jìn)行閉環(huán)反應(yīng)，從而形成吡咯并〔2，3-d〕嘧啶環(huán)，然后需要的話，將環(huán)(A)的吡咯環(huán)還原成吡咯啉環(huán)，或/和將R4的OR5(R5定義如上)轉(zhuǎn)變成NHCH(COOR6)CH2CH2COOR7(其中R6和R7定義如上);
(2)前項(xiàng)(1)中說明的化合物(Ⅱ);
(3)一種制備以下通式表示的化合物或其鹽的前項(xiàng)(1)介紹的方法
其中X是氨基、羥基或巰基;R1，R2和R3可相同或不同，分別代表氫或可以被取代的烷基、烯基或炔基;R4是OR5(R5代表氫或可以被取代的烴基)或NHCH(COOR6)CH2CH2COOR7(R6和R7分別代表氫或可以被取代的烴基)且n是一個(gè)1～4的整數(shù)，其特征在于所述方法包括以下步驟(ⅰ)催化還原通式(Ⅱ)的化合物或其鹽
其中X，R1，R2，R3，R4和n定義如上;R8和R9可相同或不同，分別代表可以被取代的烴基;且Y1和Y2分別代表氧或硫原子，(ⅱ)使所述化合物或其鹽與酸或金屬鹽接觸，或(ⅲ)用氧化劑還原所述化合物或其鹽;以及(4)一種制備通式(Ⅱ)表示的化合物或其鹽的方法
其中X代表氨基、羥基或巰基;R1，R2和R3可相同或不同，分別代表氫或可以被取代的烷基、烯基或炔基;R4代表OR5(R5代表氫)或可以被取代的烴基或NHCH(COOR6)CH2CH2COOR7(R6和R7分別代表氫或可以被取代的烴基)，n代表一個(gè)1～4的整數(shù)，R8和R9可相同或不同，分別代表可以被取代的烴基;Y1和Y2分別代表氧或硫原子，其特征在于所述方法包括使式(Ⅴ)化合物
〔其中E代表CN，COOR10，CSOR10或CSSR10(R10代表可以被取代的烴基)，其它符號(hào)定義如上〕與胍或其鹽反應(yīng)。
以上通式的化合物(Ⅰ)和(Ⅱ)(其中X是羥基或巰基)能以與其互變異構(gòu)體平衡混合物的形式存在。以下示出了對(duì)X來說易發(fā)生互變異構(gòu)現(xiàn)象的部分的結(jié)構(gòu)式，以及它們之間的平衡關(guān)系式。
為便于表示，在通篇本說明書中只介紹了羥基和巰基形式，并采用了相應(yīng)的系統(tǒng)命名法。但是，不用說在這兩種情況中也包括氧代或硫代異構(gòu)體。
雖然大量的不對(duì)稱分子可存在于本發(fā)明的化合物(Ⅰ)和(Ⅱ)中，但除了由R4表示的谷氨酸衍生的側(cè)鏈中不對(duì)稱碳原子具有S(L)的絕對(duì)構(gòu)型之外，這類不對(duì)稱中心的絕對(duì)構(gòu)型還可以是S-或R型或R-和S-型的混合物。在這種情況下，存在非對(duì)映異構(gòu)體，而且需要的話可通過常規(guī)少離和純化手段對(duì)其容易地進(jìn)行分離。上述用這類方法能分離的非對(duì)映異構(gòu)體均包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
參考上式，X代表氨基、羥基或巰基，常用的是氨基;由R1，R2和R3表示的烷基、烯基或炔基分別包括C1-6烷基，如甲基、乙基、丙基和異丙基;C2-6烯基，如乙烯基、1-甲基乙烯基、1-丙烯基、烯丙基和丙二烯基;C2-6炔基，如乙炔基、1-丙炔基和炔丙基，從而這些由R2和R3表示的基團(tuán)在n所示的重復(fù)單元中可各不相同。
R1，R2，和R3的優(yōu)選例子是氫等等。n代表一個(gè)1～4的整數(shù)、最好代表2或3。
由R4表示的OR5基中的R5以及NHCH(COOR6)CH2CH2COOR7中的R6和R7分別氫或可以被取代的烴基，舉例來說，可提到的烴基有C1-5低級(jí)烷基，如甲基、乙基、丙基、異丙基、亞丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、異戊基、仲戊基、新戊基和叔戊基，和
基或苯基。R4優(yōu)選的例子有由式OR5a或-NHCH(COOR6a)CH2CH2COOR7a(其中R5a，R6a和R7a分別表示例如C1-3烷基，象甲基和乙基，或
基)表示的基團(tuán)，等等。
Y1和Y2可相同或不同，分別表示氧或硫，最好是氧。由R8和R9表示的烴基包括C1-5低級(jí)烷基、
基或苯基(R5，R6和R7中已作介紹)，其中常用的是C1-3烷基，如甲基或乙基。
由以上R1，R2和R3表示的烷基、烯基和炔基以及由R5、R6、R7、R8和R09表示的烴基可具有1～3個(gè)取代基。舉例來說，這類取代基包括鹵素原子(如氯，氟，溴和碘)、硝基、氰基、約C1-4烷氧基(如甲氧基，乙氧基，丙氧基，異丙氧基，正丁氧基，異丁氧基，仲丁氧基和叔丁氧基)、約C1-4烷?；?如甲?；阴；?，丙?；?，正丁酰基和異丁?；?、約C1-4烷酰氧基(如甲酰氧基，乙酰氧基，丙酰氧基，丁酰氧基和異丁酰氧基)，約C3-4烷氧羰基(如甲氧羰基，乙氧羰基，正丙氧羰基，異丙氧羰基，正丁氧羰基，異丁氧羰基和叔丁氧羰基)、三氟甲基、約C1-4烷硫基(如甲硫基，乙硫基，丙硫基，異丙硫基，正丁硫基，仲丁硫基和叔丁硫基)約C1-4烷基磺?；?如甲基亞硫?；一鶃喠蝓；?，丙基亞硫?；投』鶃喠蝓；?、約C1-4烷基磺?；?如甲磺?；?，乙磺?；?，丙磺酰基和丁磺?；?等等。當(dāng)R5，R6，R7和R8或R9是芐基或苯基時(shí)，它可以被C1-4烷基(如甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，異丁基，仲丁基和叔丁基)、C1-3烯基(如亞甲基，乙烯基，1-甲基乙烯基，1-丙烯基，烯丙基和丙二烯基)、C2-3炔基(如乙炔基，1-丙炔基和炔丙基)等等取代。
以下詳細(xì)介紹制備本發(fā)明的化合物(Ⅰ)或其鹽的方法。
在制備本發(fā)明的化合物(Ⅰ)或其鹽的步驟中，將化合物或其鹽中
基團(tuán)再生為羰基的反應(yīng)可通過使化合物(Ⅱ)或其鹽本身進(jìn)行分解反應(yīng)或在一種合適的反應(yīng)溶劑存在下進(jìn)行分解反應(yīng)而進(jìn)行，反應(yīng)溫度約-40℃-所述溶劑的沸點(diǎn)(約150℃以下)、最好約-10℃-75℃，歷時(shí)約10分鐘-100小時(shí)，最好約30分鐘-24小時(shí)。舉例來說，可提到的所述分解反應(yīng)有催化還原反應(yīng)(方法A)、酸性條件下的水解反應(yīng)(方法B-1)或酸性無水條件下的分解反應(yīng)(方法B-2)以及使金屬鹽的分解反應(yīng)(方法(-1)或使用氧化劑的分解反應(yīng)(方法C-2)，特別優(yōu)選的是方法B-1或B-2。
方法A中催化劑的用量一般為1摩爾待還原的化合物用約0.005-2.0摩爾、最好是約0.01-0.5摩爾?？梢允褂勉K、銠Raney鎳等作為催化劑，同時(shí)加入微量的酸(如乙酸，三氟乙酸，鹽酸，硫酸等等)也對(duì)反應(yīng)有利。在方法B-1中酸的用量一般為1摩爾要水解的化合物用約0.01-100摩爾，最好約0.1-10摩爾，且酸的例子包括無機(jī)酸，例如鹽酸，氫溴酸、硫酸，硝酸和磷酸，有機(jī)酸，例如三氟乙酸、三氯乙酸、甲磺酸、苯磺酸、對(duì)甲苯磺酸和樟腦磺酸，等等，具體地說，常用的是無機(jī)酸，如鹽酸等。
方法B-2中酸的用量一般為1摩爾要分解的化合物用約0.01-10摩爾、最好約0.1-2摩爾，且酸的例子是無機(jī)酸，如氯化氫、溴化氫、過氯酸、硫酸、硝酸、磷酸等等;有機(jī)酸，如三氟乙酸、三氯乙酸、甲磺酸、苯磺酸、對(duì)甲苯磺酸、樟腦磺酸等等;Lewi酸，如無水氯化鋅、無水氯化鋁(AlCl3)、無水氯化亞鐵，四氯化鈦、四氯化錫、氯化銻、氯化鈷、氧化銅、三氟化硼-二乙醚等等。
方法C-1中金屬鹽的用量一般為1摩爾要分解的化合物用約0.1-10當(dāng)量、最好約0.5-2當(dāng)量，且金屬鹽的例子有氯化銅、硝酸銀、氧化銀、氧化汞、碲鹽(如硝酸碲，三氟乙酸碲等等。
方法C-2中氯化劑的用量一般為約0.25-10當(dāng)量、最好0.25-2當(dāng)量(對(duì)要氧化的1mol化合物)且氧化劑的例子有氧氣-發(fā)光體、過氧化氫、過苯甲酸、間氯過苯甲酸、過氯酸鹽(過氯酸鋰，過氯酸銀，過氯酸汞，過氯酸四丁基銨等)、亞硝基硫酸、烷基亞硝酸(如亞硝基異戊酯等等)、碘、溴、氯、N-溴琥珀酰亞胺、磺酰氯、氯胺丁等等。
對(duì)反應(yīng)溶劑來說，可用于方法A和B-1的例子有水、醇(如甲醇，乙醇，異丙醇，丙醇，丁醇，仲丁醇，異丁醇，乙二醇，甲氯乙醇，乙氧基乙醇)、乙酸酯(如乙酸甲酯，乙酸乙酯)、醚(如甲醚，乙醚，四氫呋喃，二噁烷，一甘醇二甲醚，二甘醇二甲醚)、其烴(苯，甲苯，二甲苯)、酮(如，丙酮)、腈(如乙腈)、吡啶、酰胺(如二甲基甲酰胺，二甲基乙酰胺)、亞砜(如二甲亞砜)、環(huán)丁砜以及它們的溶劑混合物;在方法A的情況下，最好使用甲醇、乙醇、乙酸乙酯、四氫呋喃、二噁烷或苯;在方法B的情況下，常使用一種含水有機(jī)溶劑，其中0.01-100克，最好0.1-10克親水溶劑〔最好是醇(如甲醇，乙醇等)，乙酸酯(如乙酸乙酯)，酯(如四氫呋喃)，二噁烷，等)，酮(如丙酮等)或腈(如丙腈等)〕與1克水包含在一起。
這些溶劑所用的量通常為對(duì)每克化合物(Ⅱ)或其鹽，用1.0至2，000ml，優(yōu)選5.0至100ml。
在方法B-2中，可用的溶劑有乙酸酯(如乙酸甲酯，乙酸乙酯)，醚(如，二甲醚，乙醚，四氫呋喃，二噁烷，單甘醇二甲醚，二甘醇二甲醚)，芳香烴(如，苯，甲苯，二甲苯)，鹵代烴(如，二氯甲烷，氯仿，四氯化碳)，酮(如，丙酮)，腈(如，乙腈)，硝基甲烷，吡啶，二甲基甲酰胺或它們的適宜混合物;優(yōu)選的溶劑是芳香烴(如，苯，甲苯等)，鹵代烴(如，二氯甲烷，氯仿，四氯化碳等)，或腈(如乙腈等)。
在應(yīng)用方法C-1和C-2情況下，可用的溶劑有水，醇(如甲醇，乙醇，丙醇，異丙醇，丁醇，仲丁醇，叔丁醇，乙二醇，甲氧乙醇，乙氧乙醇)，醚(如，二甲醚，二乙醚，四氫呋喃，二噁烷，單甘醇二甲醚，二甘醇二甲醚)，芳香烴(如，苯，甲苯，二甲苯)鹵代烴(如，二氯甲烷，氯仿，四氯化碳等)，丙酮，乙腈和它們的適宜混合物。在方法C-1和C-2中，優(yōu)選的溶劑是甲醇，乙醇，四氫呋喃，二噁烷或乙腈和這些溶劑與水的混合物。至于對(duì)于再生羰基(＞＝CO)應(yīng)使用那種方法可根據(jù)-Y1-R8和-Y2-R9的化學(xué)性質(zhì)等來決定，通常，方法B-1常用作更優(yōu)選的方法。
在羰基再生期間和之后，在制備本發(fā)明化合物(Ⅰ)或其鹽的步驟中的分子內(nèi)閉環(huán)反應(yīng)中，羰基通常與在嘧啶環(huán)上的氨基自動(dòng)縮合，從而生成吡咯并〔2，3-d〕嘧啶環(huán)。
具體講，在方法B-1和B-2中，羰基的再生和分子內(nèi)閉環(huán)反應(yīng)進(jìn)行很快，得到的產(chǎn)物產(chǎn)率較好。在方法A，C-1和C-2中，酸催化劑的存在會(huì)促進(jìn)閉環(huán)反應(yīng)的快速進(jìn)行并且改善了產(chǎn)率。作為酸催化劑，可提到的有在方法B-1和B-2中詳述的無機(jī)酸，有機(jī)酸或路易斯酸。
如果需要，由此得到的環(huán)(A)為吡咯環(huán)的化合物(Ⅰ-1)可通過催化還原很容易轉(zhuǎn)變?yōu)榄h(huán)(A)為吡咯啉環(huán)的化合物(Ⅰ-2)。該催化還原反應(yīng)用上述的方法A較為有利。
化合物(Ⅰ-1)或(Ⅰ-2)或它們的鹽，其中R4為OR5，R5為可被取代的烴，也可進(jìn)行所說的酯分解或水解反應(yīng)，從而得到R5為氫的化合物，隨后將該化合物轉(zhuǎn)變?yōu)镽4為NHCH(COOR6)CH2CH2COOR7的化合物。酯分解反應(yīng)及轉(zhuǎn)變?yōu)镹HCH(COOR6)CH2CH2COOR7的反應(yīng)可按已知方法進(jìn)行〔J.F.W.MCOmine，“Protective Groups in Organie Chemistry”，Plcnum Press，Lonolon and New York(1973);and M.Fieoer and L.Fieser，“Reagent for Orgamc Synthcrio”，Volo 1 to 13，Wiley-Interscience，New York，London，Sydney and Toronto(1969-1988)〕。
此外，在化合物(Ⅰ)和(Ⅱ)或它們的鹽中，由X代表的氨基，羥基或巰基可通過文獻(xiàn)中已知的吡咯環(huán)上的取代基轉(zhuǎn)換反應(yīng)轉(zhuǎn)換成其它基團(tuán)〔a Separate Volume of Tanpakushitsu Kakusan Kohso(Protein Nuclcic Acids and EnEymes)，“Chemical Synthcsis of Nucleic Acids”，Kyoritsu Publishing Co.(1968)〕。
由上述步驟制備的本發(fā)明化合物(Ⅰ)或其鹽可通過常用方法，如濃縮，溶劑萃取，色譜，重結(jié)晶等，從反應(yīng)混合物中分離出來或純化。
在本發(fā)明方法中用作中間體的本發(fā)明化合物(Ⅱ)或其鹽可通過下面所示的反應(yīng)步驟來制備。
在上面式中，Y1，Y2，R1，R2，R3，R4，R8，R9和n如上定義，E代表CN基團(tuán)或COOR10，CSOR10或CSSR10(其中R10為可被取代的烴基，而Z為鹵原子，如氯，溴，碘)。COOR10，CSOR10或CSSR10中的R10可以是如對(duì)R5至R9詳述的可被取代的烴基，優(yōu)選的基團(tuán)是C1-4烷基，如甲基和乙基等，或芐基等。上述反應(yīng)步驟如下詳述步驟A該步驟包括將
加到化合物(Ⅲ)的雙鍵(R8-Y1-C＝CH-)上從而生成化合物(Ⅳ)的步驟。
相對(duì)化合物(Ⅲ)的用量一般為0.5至4摩爾當(dāng)量，優(yōu)選0.8至1.5摩爾當(dāng)量。該反應(yīng)在合適的溶劑存在下，于反應(yīng)溫度為-10℃至所用反應(yīng)溶劑沸點(diǎn)(高至150℃)，優(yōu)選0℃至100℃下進(jìn)行30分鐘至48小時(shí)。反應(yīng)中使用的溶劑有醇(如，甲醇，乙醇)，醚(如，二甲醚，二乙醚，四氫呋喃，二噁烷，單甘醇二甲醚，二甘醇二甲醚，腈(如乙腈)，酯(如乙酸乙酯)，鹵代烴(如，二氯甲烷，氯仿，四氯化碳)，芳香烴(如苯，甲苯，二甲苯)或它們的適宜混合物。在進(jìn)行該反應(yīng)中，曝光或加入有機(jī)過氧化物也可使該反應(yīng)進(jìn)行得更有利。所說的有機(jī)過氧化物包括叔丁基氫過氧化物，過氧乙酸，過氧苯甲酸，m-氯過氧苯甲酸等。由該步驟得到的化合物(Ⅳ)具有相對(duì)的反應(yīng)活性，且可在該步驟中通過上述常規(guī)方法分離出來，也可不必分離直接用于下一步反應(yīng)中。
步驟B在適宜溶劑存在下，于反應(yīng)溫度為-10℃至反應(yīng)溶劑的沸點(diǎn)(高達(dá)100℃)，優(yōu)選0℃至50℃下將步驟A得到的化合物(Ⅳ)與R9-Y2-H表示的醇或硫醇反應(yīng)10分鐘至24小時(shí)，從而轉(zhuǎn)變?yōu)榛衔?Ⅴ)。在該反應(yīng)使用的溶劑有醚(如二甲醚，二乙醚，四氫呋喃，二噁烷，單甘醇二甲醚，二甘醇二甲醚)，腈(如乙腈)，酯(如乙酸乙酯)，鹵代烴(如二氯甲烷，氯仿，四氯化碳)，芳香烴(如苯，甲苯，二甲苯等)或它們的適宜混合物。另外，由R9-Y2-H代表的醇或其硫醇作為溶劑使用時(shí)可過量。由此得到的化合物(Ⅴ)可按上述的常規(guī)方法從反應(yīng)混合物中分離出來，也可不必分離。將該反應(yīng)混合物作為原料直接用于下一步反應(yīng)中。
步驟C在適宜溶劑中，用胍或其鹽(如與上面方法B-1等中所述的與酸形成的鹽)處理化合物(Ⅴ)，胍與化合物(Ⅴ)的氰基，酯基或硫代酯基進(jìn)行反應(yīng)并同時(shí)引起環(huán)合形成嘧啶環(huán)，由此生成本發(fā)明化合物(Ⅱ)或其鹽。該反應(yīng)在0℃至150℃，優(yōu)選20℃至100℃進(jìn)行1至48小時(shí)。該反應(yīng)在堿性條件下進(jìn)行較有利。所用的堿包括金屬醇鹽，如甲醇鈉，乙醇鈉，叔丁醇鉀等?？捎玫姆磻?yīng)溶劑有甲醇，乙醇，丙醇，叔丁醇，二甲基亞砜，六甲基膦酰胺或它們的適宜混合物等。
本發(fā)明的化合物(Ⅱ)及在這些步驟中制備的作為起始物或中間體的化合物(Ⅲ)至(Ⅴ)可用常規(guī)分離或純化方法，如濃縮，溶劑萃取，色譜，重結(jié)晶等，從相應(yīng)反應(yīng)混合物中得到分離或純化。
由本發(fā)明制備方法制得的或化合物(Ⅰ)和化合物(Ⅱ)或其中間體可以鹽的形式存在，優(yōu)選藥用鹽?？捎玫膲A性鹽有與堿金屬，堿土金屬，無毒金屬，銨和取代的銨形成的鹽，如與鈉，鋰，鈷、鎂、鋁、鋅、銨、三甲基銨，三乙基銨，三乙醇銨，吡啶鎓，或由例如氨甲?；螓u素(如氯，溴)取代的吡啶鎓等形成的鹽。酸性鹽有與無機(jī)酸形成的鹽，如鹽酸，硫酸，硝酸，磷酸和硼酸，和與有機(jī)酸(如草酸，酒石酸，乙酸，三氟乙酸，甲磺酸，苯磺酸，對(duì)-甲苯磺酸和樟腦磺酸等)形成的鹽。
化合物(Ⅰ)或它們的鹽對(duì)小鼠腫瘤細(xì)胞株(P388，L1210，L5178Y，B16黑素瘤，MethA，路易斯腫瘤，S180肉瘤，腸癌和Colon38)和人體腫瘤細(xì)胞株(HL60和KB)顯示出極好的抗腫瘤活性，與此同時(shí)，它們對(duì)進(jìn)攻熱血?jiǎng)游锏哪[瘤(如黑素瘤，肉瘤，肥大細(xì)胞瘤，癌，腫瘤形成等)具有減少腫瘤活性及可延長患腫瘤的熱血?jiǎng)游飰勖淖饔谩Ａ硗?，含化合?Ⅰ)或它們的鹽的藥物制劑可作為安全的抗腫瘤劑用于治療患腫瘤的熱血?jiǎng)游铮绕涫遣溉轭悇?dòng)物(如小鼠，大鼠，貓，狗，兔子等)。
在用作抗腫瘤劑情況下，化合物(Ⅰ)或其鹽可按常規(guī)方法通過與藥用載體，賦形劑，稀釋劑等混合制成通過口服或非腸道給藥各種劑量形式，如粉劑，粘劑，片劑，膠囊，栓劑和注射液。雖然劑量要根據(jù)治療動(dòng)物的種類，疾病的種類，癥狀，化合物類型，給藥途徑等變化，但在口服情況下，化合物(Ⅰ)或其鹽可按日劑量2.0-200mg/kg體重，優(yōu)選5.0-100mg/kg體重，給藥于上述熱血?jiǎng)游铮蛟诜悄c道給藥情況下，按日劑量1.0-100mg/kg體重，優(yōu)選2.0-50mg/kg體重，給藥于上述熱血?jiǎng)游?。注射液給藥方法包括肌內(nèi)，腹膜內(nèi)，皮下和靜脈注射等。
上述各種劑型的制備可按下面已知方法進(jìn)行。口服制劑，如片劑，可通過加入適量的粘合劑(如，羥丙基纖維素，羥丙甲基纖維素，大粒凝膠等)，崩解劑(如，淀粉，羧甲基纖維素鈣等)，潤滑劑(如，硬脂酸鎂，滑石等)等來制備。
非腸道制劑，如注射液，可通過加入適量補(bǔ)劑(如，葡萄糖，D-山梨糖醇，D-甘露醇，氯化鈉等)，防腐劑(如，芐醇，氯代丁醇，對(duì)一氧代苯甲酸甲酯，對(duì)一氧代苯甲酸丙酯等)，緩沖液(如磷酸緩沖液，乙酸鈉緩沖液等)等來制備。
制備片劑的具體例子為以每片為基準(zhǔn)，將1.0-25mg本發(fā)明化合物(Ⅰ)或其鹽，100-500mg乳糖，50-100mg玉米淀粉和5-20mg羥丙基纖維素通過常規(guī)方法混合，將該混合物?；S后與玉米淀粉和硬脂酸鎂混合，壓成直徑3-10mm，重100-500mg的片劑。該制得的片劑可通過用含羥丙基甲基纖維素(約10-20mg)的丙酮-乙醇混合物和濃度5-10%(該量是以每片為基準(zhǔn))的蓖麻油(0.5-2mg)來包衣，由此得到腸包衣片劑。
制備注射液的具體實(shí)例為，以每個(gè)安瓿的量為基準(zhǔn)，將2.0-50mg本發(fā)明化合物(Ⅰ)鈉鹽的2ml等滲鹽水的溶液填裝進(jìn)一安瓿中，然后將其封口并在110℃加熱滅菌30分鐘，或?qū)?.0-50mg所述鈉鹽溶于10-40mg甘露醇或山梨醇的2ml無菌蒸餾水的溶液中，然后將得到的溶液裝入安瓿，隨后將該安瓿冷凍干燥，然后封口，得到注射液。當(dāng)使用時(shí)，將冷凍制劑封口打開，將活性成份與生理鹽水相溶從而使溶液中化合物濃度為1-25mg/ml，由此得到注射液可用于皮下，靜脈或肌內(nèi)給藥。
綜上所述，本發(fā)明的制備方法是以價(jià)廉的工業(yè)用的粗原料起始，并以縮短的反應(yīng)步驟和提高的反應(yīng)產(chǎn)率提供了作為藥用的抗腫瘤試劑。另外，從反應(yīng)能力和效率看，該方法特別簡單容易，從制備容易觀點(diǎn)看，該方法更可取，因此，本發(fā)明提供了制備5-取代吡咯并〔2，3-d〕嘧啶衍生物的工業(yè)有利方法。
下面具體介紹本發(fā)明的參照實(shí)例和實(shí)例。
參照例14-(4-甲氧基-3-丁烯基)-苯甲酸叔丁酯的制備于0℃，將1.0摩爾叔丁醇鉀的四氫呋喃溶液(11.0ml)加到氯化(甲氧甲基)三苯基鏻(3.77g)的甲苯溶液(12ml)中，攪拌10分鐘后，于同一溫度下，將4-(4-丙氧基)苯甲酸叔丁酯(2.34g)的甲苯溶液(10ml)滴加到該混合物中，隨后于0℃攪拌20分鐘。將該反應(yīng)液與乙醚(40ml)混合，分出有機(jī)層，然后用水和飽和氯化鈉水溶液依次洗滌，用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，得到的殘余物用己烷處理，然后過濾掉三苯基膦氧化物。減壓濃縮濾液，殘余物通過柱色譜(80g硅膠，乙醚-己烷＝20∶1)純化，得到標(biāo)題化合物(1.92g)。
IR(純凈)2980，2945，1715，1655，1610，850Cm-11H-NMR(CDCl3)1.59(9H，s)，2.24(1.2H，td，J＝8Hz，7Hz)，2.39(0.8H，td，J＝8Hz，7Hz)，3.48(1.8H，s)，3.56(1.2H，s)，4.33(0.4H，td，J＝7Hz，6Hz)，4.71(0.6H，dt，J＝13Hz，7Hz)，5.88(0.4H，d，J＝6Hz)，6.28(0.6H，d，J＝13Hz)，7.21(2H，d，J＝8Hz)，7.91(2H，d，J＝8Hz).
參照例24-〔4，4-二氰基-3-(二甲氧甲基)丁基〕苯甲酸叔丁酯的制備在氬氣氛下，將溴丙二腈(1.27g)和參照例1得到的化合物(1.91g)溶于二氯甲烷(66ml)中，加分子篩(3A，1.0g)后，反應(yīng)混合物用不帶蓋的分析用紫外燈的紫外線幅射2小時(shí)。將甲醇(4ml)加到反應(yīng)混合物中，攪拌10分鐘，然后傾入含2N碳酸鉀水溶液(5ml)的冰水中，接著用二氯甲烷萃取。有機(jī)層用水洗滌，用無水硫酸鈉干燥。減壓蒸除溶劑，得到的殘余物用柱色譜(75g硅膠，乙酸乙酯-己烷＝1∶10)純化，得到呈無色油狀的標(biāo)題化合物(2.08g)。
IR(純凈)2980，2945，2840，2250，1710，1606，845Cm-1.
1H-NMR(CDCl3)1.60(9H，s)，1.90-2.20(2H，m)，2.20-2.32(1H，m)，2.89(2H，t，J＝8Hz)，3.39(3H，s)，3.46(3H，s)，4.13(1H，d，J＝4Hz)，4.36(1H，d，J＝5Hz)，7.28(2H，d，J＝8Hz)，7.95(2H，d，J＝8Hz).
參照例34-(5-甲氧基-4-戊烯基)-苯甲酸叔丁酯的制備按與參照實(shí)例1所述的同樣步驟，將4-(4-丁氧基)苯甲酸叔丁酯(993mg)用氯化(甲氧甲基)三苯基鏻處理，得到呈無色油狀的標(biāo)題化合物(918mg)。
IR(純凈)2980，2940，2860，1710，1660，1603，860，845Cm-1。
1H-NMR(CDCl3)1.55-1.76(2H，m)，1.59(9H，s)，1.96(0.6H，dt，J＝7Hz，7Hz)，2.10(0.4H，tdd，J＝7Hz，7Hz，7Hz)，2.66(2H，t，J＝8Hz)，3.51(1.8H，s)，3.59(1.2H，s)，4.35(0.4H，td，J＝7Hz，6Hz)，4.73(0.6H，dt，J＝13Hz，7Hz)，5.91(0.4H，dt，J＝6Hz，1Hz)，6.29(0.6H，d，J＝13Hz)，7.21(2H，d，J＝8Hz)，7.89(0.8H，d，J＝8Hz)，7.90(1.2H，d，J＝8Hz).
參照實(shí)例44-〔5，5-二氰基-4-(二甲氧甲基)戊基〕苯甲酸叔丁酯的制備按參照例2所述的同樣步驟，將參照例3得到的化合物(276mg)與溴丙二腈反應(yīng)，得到呈無色油狀的標(biāo)題化合物(202mg)。
IR(純凈)2975，2930，2245，1710，1605，860，845Cm-1。
1H-NMR(CDCl3)1.59(9H，s)，1.60-1.92(4H，m)，2.20-2.30(1H，m)，2.73(2H，t，J＝7Hz)，3.40(3H，s)，3.45(3H，s)，4.11(1H，d，J＝4Hz)，4.31(1H，d，J＝5Hz)，7.24(2H，d，J＝8Hz)，7.93(2H，d，J＝8Hz).
參照例54-(6-甲氧基-5-己烯基)苯甲酸叔丁酯的制備按參照例1所述的同樣步驟，用氯化(甲氧甲基)三苯基鏻處理4-(5-丁氧基)苯甲酸叔丁酯(476mg)，得到呈無色油狀的標(biāo)題化合物(430mg)。
IR(neat)2940，1715，1650，1605，1455，850cm-1.
1H-NMR(CDCl3)1.32-1.44(2H，m)，1.59(9H，s)，1.52-1.70(2H，m)，1.94(1.2H，td，J＝8Hz，7Hz)，2.09(0.8H，td，J＝8Hz，7Hz)，2.65(2H，t，J＝8Hz)，3.49(1.8H，s)，3.58(1.2H，s)，4.31(0.4H，td，J＝7hz，6Hz)，4.70(0.6H，dt，J＝13Hz，7Hz)，5.88(0.4H，d，J＝6Hz)，6.28(0.6H，d，J＝13Hz)，7.21(2H，d，J＝8Hz)，7.90(2H，d，J＝8Hz).
參照例64-〔6，6-二氰基-5-(二甲氧甲基)己基〕苯甲酸叔丁酯的制備按參照例2的同樣步驟，將參照例5得到的化合物(420mg)與溴丙二腈反應(yīng)，得到呈無色油狀的標(biāo)題化合物(432mg)。
IR(Neat)2940，2250，1715，1610，1455，845cm-1.
1H-NMR(CDCl3)1.48-1.81(6H，m)，1.59(9H，s)，2.18-2.28(1H，m)，2.71(2H，t，J＝7Hz)，3.40(3H，s)，3.46(3H，s)，4.10(1H，d，J＝4Hz)，4.31(1H，d，J＝5Hz)，7.23(2H，d，J＝8Hz)，7.92(2H，d，J＝8Hz).
實(shí)例14-〔3-(2，4，6-三氨基-嘧啶-5-基)-4，4-二甲氧丁基〕苯甲酸叔丁酯的制備于氬氣氛下，將胍鹽酸鹽(640mg)的叔丁醇懸浮液(30ml)與10摩爾叔丁醇鉀的四氫呋喃溶液(6.70ml)混合，隨后攪拌10分鐘，將參照例2的化合物(2.00g)的叔丁醇溶液(10ml)加到該混合物中，隨后加熱回流2小時(shí)。將反應(yīng)溶液傾入含1.0N硫酸氫鉀水溶液(1ml)的水(200ml)中，接著用二氯甲烷萃取。有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑。殘余物用柱色譜(50g硅膠;二氯甲烷-甲醇＝30∶1→15∶1)純化，得到呈無色無定形狀的標(biāo)題化合物(2.17g)。
IR(KBr)3475，3360，3200，2975，2930，1710，1607，1563，1430，843，800cm-1.
1H-NMR(CDCl3)1.58(9H，s)，1.86-2.05(1H，m)，2.25-2.53(2H，m)，2.57-2.80(2H，m)，3.45(3H，s)，3.48(3H，s)，4.35(1H，d，J＝3Hz)，4.36(2H，brs)，4.48(2H，brs)，5.21(2H，brs)，7.18(2H，d，J＝8Hz)，7.88(2H，d，J＝8Hz).
實(shí)例2N-〔4-〔2-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)乙基〕苯甲?！?C-谷氨酸二乙酯的制備將參照例1得到的化合物(200mg)溶于三氟乙酸(1ml)和水(20mg)中，接著在室溫?cái)嚢?小時(shí)。減壓蒸除三氟乙酸，然后于70℃真空干燥，得到的殘余物與谷氨酸二乙酯鹽酸鹽(172mg)懸浮在二甲基甲酰胺(2ml)中。于0℃將氰基磷酸二乙酯(diethyl Phxphorocyanidate)(82mg)的二甲基甲酰胺溶液(2ml)加到該懸浮液中，接著攪拌15分鐘，再于同樣溫度下將三乙胺(218mg)的二甲基甲酰胺溶液滴加到該混合物中，接著于0℃攪拌30分鐘，再于室溫?cái)嚢?小時(shí)。減壓蒸除溶劑，得到的殘余物用柱色譜(15g硅膠，從濃氨水分出的二氯甲烷，從10%氨水的乙醇分出的二氯甲烷＝40∶1→30∶1)純化，得到呈無色無定形狀的標(biāo)題化合物(195mg)。
IR(KBr)3375，3200，2980，2930，1735，1640，1605，1572cm-1.
1H-NMR(CDCl3)1.23(3H，t，J＝7Hz)，1.31(3H，t，J＝7Hz)，2.10-2.40(2H，m)，2.48(2H，dd，J＝6Hz，6Hz)，3.00(4H，brs)，4.12(2H，q，J＝7Hz)，4.25(2H，q，J＝7Hz)，4.61(2H，brs)，4.75-4.86(1H，m)，4.95(2H，brs)，6.40(1H，s)，7.13(1H，d，J＝7Hz)，7.22(2H，d，J＝8Hz)，7.74(2H，d，j＝8Hz)，8.55(1H，brs).
實(shí)例3N-〔4-〔2-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)乙基〕苯甲?！?L-谷氨酸的制備經(jīng)實(shí)例2得到的化合物(80mg)的四氫呋喃-水混合液(2∶1，3ml)中加入1.0N氫氧化鈉水溶液(0.497ml)，接著于室溫?cái)嚢?小時(shí)。減壓濃縮反應(yīng)液至總體積為1ml，通過Milliporl過濾器過濾掉得到的不溶物后，將溶液冷卻至0℃并與乙酸(0.1ml)混合。過濾收集得到的結(jié)晶，用冰水充分洗滌，于70℃減壓干燥，得到呈白色結(jié)晶的標(biāo)題化合物(61mg)。
IR(KBr)3320，1660，1637，1540cm-1.
1H-NMR(Me2SO-d6)1.85-2.20(2H，m)，2.46(2H，t，J＝8Hz)，2.96(4H，brs)，4.30-4.45(1H，m)，5.49(2H，brs)，6.13(2H，s)，6.37(1H，s)，7.33(2H，d，J＝8Hz)，7.80(2H，d，J＝8Hz)，8.46(1H，d，J＝7hz)，10.34(1H，brs).
實(shí)例4〔4-〔4-(2，4，6-三氨基嘧啶-5-基)-5，5-二甲氧戊基〕苯甲酸叔丁酯的制備。
按實(shí)例1中所述的同樣步驟，將參照實(shí)例4得到的化合物(190mg)與胍鹽酸鹽反應(yīng)，得到呈白色粉狀的標(biāo)題化合物(214mg)。
IR(KBr)3480，3380，3200，2980，2940，1715，1610，1570，1440，850，805cm-1.
1H-NMR(CDCl3)1.40-1.65(3H，m)，1.59(9H，s)，1.75-2.05(1H，m)，2.62(2H，t，J＝7Hz)，2.81(1H，ddd，J＝11Hz，3Hz，1Hz)，3.46(3H，s)，3.50(3H，s)，4.36(1H，d，J＝3Hz)，4.49(4H，brs)，5.16(2H，brs)，7.18(2H，d，J＝8Hz)，7.88(2H，d，J＝8Hz).
實(shí)例54-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基〕丙基〕苯甲酸叔丁酯的制備將實(shí)例4得到的化合物(206mg)溶于四氫呋喃-水混合液(3∶1，8ml)中，將1N鹽酸(4.8ml)加到該溶液中，接著于室溫?cái)嚢?8小時(shí)。反應(yīng)液用1N氫氧化鈉溶液(4.8ml)中和，接著用二氯甲烷萃取，萃取層用無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑。得到殘余物用柱色譜(10g硅膠，二氯甲烷-甲醇＝15∶1)純化，得到呈白色結(jié)晶的標(biāo)題化合物(126mg)。
m.p.172-173℃。
IR(KBr)3335，3180，2975，2935，1710，1607，1287，1163，1110cm-1.
1H-NMR(Me2SO-d6)1.54(9H，s)，1.77-1.90(2H，m)，2.68(2H，t，J＝8Hz)，2.72(2H，t，J＝8Hz)，5.54(2H，brs)，6.11(2H，brs)，6.45(1H，s)，7.33(2H，d，J＝8Hz)，7.82(2H，d，J＝8hz)，10.51(1H，s).
實(shí)例6N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕-苯甲酰〕-L-谷氨酸二乙酯的制備(A)將實(shí)例5得到的化合物(381mg)溶于三氟乙酸(3ml)中，該溶液于室溫?cái)嚢?小時(shí)。減壓蒸除三氟乙酸，隨后于70℃減壓干燥，將得到的殘余物與谷氨酸二乙酯鹽酸鹽(748mg)一起懸浮在二甲基甲酰胺(4ml)。于0℃將二苯基磷酸疊氨化物(858mg)的二甲基甲酰胺溶液(4ml)加到該懸浮液中，隨后攪拌，于同一溫度下，將三乙胺(631mg)的二甲基甲酰胺溶液(4ml)滴加到該混合液中，于0℃攪拌30分鐘，然后于室溫再攪拌63小時(shí)。減壓蒸除溶劑，得到的殘余物用柱色譜(15g硅膠，由濃氨水分出的二氯甲烷→從濃氨水分出的二氯甲烷-乙醇＝40∶1→30∶1)純化，得到呈無色結(jié)晶的標(biāo)題化合物(374mg)。
(B)按實(shí)例2所述的同樣步驟，由實(shí)例4得到的化合物可制備本標(biāo)題化合物。
1H-NMR(Me2SO-d6)1.17(3H，t，J＝7Hz)，1.20(3H，t，J＝7Hz)，1.80-2.20(4H，m)，2.44(2H，t，J＝7hz)，2.68(2H，t，J＝7Hz)，2.72(2H，t，J＝7Hz)，4.05(2H，q，J＝7Hz)，4.11(2H，q，J＝7Hz)，4.35-4.50(1H，m)，5.34(2H，s)，5.91(2H，s)，6.42(1H，s)，7.31(2H，d，J＝8Hz)，7.80(2H，d，J＝8Hz)，8.66(1H，d，J＝8Hz)，10.51(1H，s).
實(shí)例7N-〔4-(3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸的制備按實(shí)例3所述的同樣步驟，將實(shí)例6得到的化合物進(jìn)行水解反應(yīng)，得到呈白色結(jié)晶狀的標(biāo)題化合物(201mg)。
m.p.220-221℃。
IR(KBr)3340，3200，2940，1660-1630，1540，1500，1397cm-1.
1H-NMR(Me2SO-d6)1.75-2.20(4H，m)，2.35(2H，t，J＝7Hz)，2.68(2H，t，J＝7Hz)，2.71(2H，t，J＝7Hz)，4.30-4.47(1H，m)，5.53(2H，brs)，6.15(2H，s)，6.46(1H，s)，7.31(2H，d，J＝8Hz)，7.81(2H，d，J＝8Hz)，8.48(1H，d，J＝8Hz)，10.51(1H，s).
實(shí)例84-〔5-(2，4，6-三氨基嘧啶-5-基)-6，6-二甲氧基己基〕苯甲酸叔丁酯的制備按照與實(shí)例1所述的相同步驟，使參照例6所獲得的化合物(378mg)與鹽酸胍反應(yīng)，得到白色晶狀的標(biāo)題化合物(433mg)。
IR(KBr)3475，3360，3220，2975，2930，1715，1640，1607，1563，1435，843，800cm-1.
1H-NMR(CDCl3)1.14-1.32(2H，m)，1.45-1.72(3H，m)，1.58(9H，s)，1.86-2.04(1H，m)，2.56-2.68(2H，m)，2.72-2.83(1H，m)，3.47(3H，s)，3.52(3H，s)，4.39(1H，d，J＝3Hz)，4.36(2H，brs)，4.48(2H，brs)，5.21(2H，brs)，7.18(2H，d，J＝8Hz)，7.88(2H，d，J＝8Hz).
實(shí)例9N-〔4-〔4-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丁基〕苯甲?！?L-谷氨酸二乙酯的制備按照與實(shí)例2所述的相同步驟，用實(shí)例8所獲得的化合物(230mg)進(jìn)行反應(yīng)，得到白色粉末狀的標(biāo)題化合物(228mg)。
IR(KBr)3380，3200，2980，2930，1735，1640，1605，1572cm-1.
1H-NMR(CDCl3/CD3OD)1.22(3H，t，J＝7Hz)，1.31(3H，t，J＝7Hz)，1.60-1.83(4H，m)，2.43-2.51(2H，m)，_.63-2.76(4H，m)，4.11(2H，q，J＝7Hz)，4.24(2H，q，J＝7Hz)，4.74-4.86(1H，m)，6.45(1H，s)，7.24(2H，d，J＝8Hz)，7.74(2H，d，J＝8Hz).
實(shí)例10N-〔4-〔4-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丁基〕苯甲?！?L-谷氨酸的制備按照與實(shí)例3所述的相同步驟，對(duì)實(shí)例9獲得的化合物(103mg)進(jìn)行水解反應(yīng)，獲得白色晶狀的標(biāo)題化合物。
IR(KBr)3340，3200，2930，1650，1635，1540cm-1.
1H-NMR(Me2SO-d6)1.45-1.76(4H，m)，1.88-2.19(2H，m)，2.29-2.43(2H，m)，2.58-2.76(4H，m)，4.32-4.46(1H，m)，5.54(2H，brs)，6.16(2H，brs)，6.42(1H，s)，7.29(2H，d，J＝8Hz)，7.79(2H，d，J＝8hz)，8.52(1H，d，J＝7Hz)，10.48(1H，brs).
實(shí)例11N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-5，6-二氫吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲酰〕-L-谷氨酸二乙酯的制備將實(shí)例9獲得的化合物(20mg)溶于2%鹽酸乙醇溶液(20ml)中，加入氧化鉑(3mg)后，在氫氣氣氛下催化還原反應(yīng)12小時(shí)。濾去催化劑，濃縮濾液至干。用柱色譜法(2.0g硅膠;從濃氨中分離的二氯甲烷∶從濃氨-乙醇中分離的二氯甲烷＝40∶1→30∶1)提純得到的殘余物，得到標(biāo)題化合物(4.8mg)。
IR(KBr)3350，2990，2945，1740，1610，1540，1508，1438cm-1.
1H-NMR(CDCl3)1.23(6H，tx2，J＝7Hz)，1.43-1.80(3H，m)，1.85-2.77(7H，m)，2.95-3.30(2H，m)，3.58(1H，t，J＝11Hz)，4.07(2H，q，J＝7Hz)，4.20(2H，q，J＝7hz)，4.25(1H，brs)，4.63-4.83(1H，m)，4.68(1H，brs)，7.00-7.23(1H，m)，7.13(2H，d，J＝8Hz)，7.67(2H，d，J＝8Hz).
實(shí)例12N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-5，6-二氫吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲酰〕-L-谷氨酸的制備按照與實(shí)例3所述的相同步驟，對(duì)實(shí)例11獲得的化合物(4.4mg)進(jìn)行水解反應(yīng)，得到標(biāo)題化合物(3.2mg)。
IR(KBr)3700-2350，3215，1690-1620，1540cm-1.
1H-NMR(Me2SO-d6)1.02-1.85(4H，m)，1.85-2.83(6H，m)，2.90-3.30(2H，m)，3.55(1H，t，J＝11Hz)，4.15-4.45(1H，m)，6.38(2H，brs)，6.77(2H，brs)，6.90(1H，brs)，7.22(2H，d，J＝8Hz)，7.74(2H，d，J＝8Hz)，8.22(1H，d，J＝7Hz).
實(shí)例134-〔4-(2，4，6-三氨基嘧啶-5-基)-5，5-二甲氧基戊基苯甲酸乙酯的制備在氬氣氣氛下，將1.0摩爾乙醇鈉于乙醇中的溶液(0.612ml)加入到鹽酸胍(58.5mg)的乙醇懸浮液(1.0ml)中。往該溶液中加入4-〔5，5-二氰基-4-(二甲氧基甲基)戊基〕-苯甲酸乙酯(190mg)的乙醇溶液(3.0ml)并加熱回流混合物2小時(shí)。(190mg)按參照例3和2由4-(4-丁氧基)苯甲酸乙酯獲得。
將反應(yīng)混合物倒入水(10ml)中，于二氯甲烷萃取，用無水硫酸鈉干燥有機(jī)層。用減壓蒸餾法從萃取液中除去溶劑，殘余物用閃蒸柱色譜法純化(15g硅膠;二氯甲烷∶甲醇＝30∶1→15∶1)，得到標(biāo)題化合物(214mg)。
IR(KBr)3460，3340，3180，2940，1710，1610，1565，1435，1275，1110，1060，805cm-1.
1H-NMR(CDCl3)1.38(3H，t，J＝7.2Hz)，1.43-1.70(3H，m)，1.83-2.05(1H，m)，2.63(2H，t，J＝7Hz)，2.77-2.87(1H，m)，3.46(3H，s)，3.50(3H，s)，4.36(2H，q，J＝7.2Hz)，4.37(1H，d，J＝3.6Hz)，4.45(4H，brs)，5.10(2H，brs)，7.20(2H，d，J＝8Hz)，7.94(2H，d，J＝8Hz)實(shí)例144-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲酸乙酯的制備往實(shí)例13的產(chǎn)品(404mg)于乙醇中形成的懸浮液中加入含20%(W/W)鹽酸的乙醇(2.0ml)和水(0.02ml)，并在室溫下攪拌混合物2小時(shí)，用水(10ml)稀釋反應(yīng)混合物并往其中加入氨水使其呈堿性，接著通過減壓蒸餾除去大部分乙醇，過濾收集得到的沉淀，依次用水、乙醇和乙醚洗滌，干燥，得到標(biāo)題化合物(300mg)。
IR(KBr)3330，3225，2930，1705，1610，1575，1490，1450，1410，1280，1180，1105，1020，830cm-1.
1H-NMR(CDCl3/CD3OD)1.39(3H，t，J＝7.2Hz)，2.05(2H，m)，2.67(2H，t，J＝7.2Hz)，2.78(2H，t，J＝7.2Hz)，4.37(2H，q，J＝7.2Hz)，6.50(1H，s)，7.27(2H，d，J＝8Hz)，7.98(2H，d，J＝8Hz)實(shí)例154-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲酸的制備將實(shí)例14的產(chǎn)品(340mg)懸浮在四氫呋喃-水的混合溶液(5∶1，60ml)中，往其中加入1N氫氧化鈉的水溶液(4.0ml)，并在50℃攪拌混合物18小時(shí)。減壓蒸餾以從混合物中除去大部分四氫呋喃，往其中加入1N鹽酸以中和殘余物。過濾收集得到的沉淀，依次用水、甲醇和乙醚洗滌，減壓干燥，得到標(biāo)題化合物(305mg)。
IR(KBr)3480，3390，3130，2940，1650，1605，1550，1460，1390，1255，1180，1095，980，780cm-1.
1H-NMR(Me2SO-d6)1.73-1.95(2H，m)，2.67(2H，t，J＝7Hz)，2.71(2H，t，J＝7Hz)，5.37(2H，s)，5.95(2H，s)，6.43(1H，s)，7.33(2H，d，J＝8Hz)，7.86(2H，d，J＝8Hz)，10.40(1H，s)實(shí)例16N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基〕丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸二乙酯的制備將實(shí)例15的產(chǎn)品(339mg)和谷氨酸二乙酯鹽酸鹽(748mg)懸浮在二甲基甲酰胺(4.0ml)中，在0℃往其中加入二苯基磷酰基疊氮化合物(858mg)于二甲基甲酰胺中的溶液(858mg)并攪拌。接著在相同的溫度下往其中滴加三乙胺于二甲基甲酰胺中的溶液(4.0ml)，在0℃攪拌混合物30分鐘，然后在室溫下攪拌63小時(shí)，接著減壓蒸餾以除去溶劑。用柱色譜法(15g硅膠，從濃氨水分離出的二氯甲烷∶從濃氨水-乙醇分離出的二氯甲烷＝40∶1→30∶1)萃取得到的殘余物，得到無色晶狀的標(biāo)題化合物(386mg)。
化合物的IR(KBr)和1H-NMR(Me2SO-d6)與實(shí)例6的產(chǎn)品的數(shù)據(jù)完全相同實(shí)例17N-〔4-〔4-(2，4，6-三氨基嘧啶-5-基)-5，5-二甲氧芐基〕戊基〕-L-谷氨酸二乙酯的制備將實(shí)例13的產(chǎn)品(403mg)懸浮在四氫呋喃-水的混合溶液(5∶1，8.0ml)中，往其中加入1N氫氧化鈉的溶液(2.0ml)并在40℃攪拌混合物過夜。在加入1N鹽酸(2.0ml)中和混合物后，用減壓蒸餾的方法除去溶劑，干燥殘余物，得到粗的4-〔4-(2，4，6-三氨基嘧啶-5-基)-5，5-二甲氧基戊基〕苯甲酸。將所有的粗產(chǎn)品和谷氨酸二乙酯鹽酸鹽(360mg)懸浮在二甲基甲酰胺(4.0ml)中，在0℃往其中加入氰基膦酸二乙酯(171mg)于二甲基甲酰胺中的溶液(4.0ml)，并攪拌混合物。接著在相同的溫度下往其中滴加三乙胺(303mg)于二甲基甲酰胺中的溶液(4.0ml)，并在0℃攪拌混合物30分鐘，然后在室溫下攪拌3小時(shí)，接著通過減壓蒸餾除去溶劑。用閃蒸柱色譜法(15g硅膠，二氯甲烷-甲醇＝30∶1→5∶1)對(duì)得到殘余物進(jìn)行提純，得到標(biāo)題化合物(417mg)。
1-HNMR(CDCl3/CD3)1.22(3H，t，J＝7Hz)，1.32(3H，t，J＝7Hz)，1.52-1.74(2H，m)，1.93-2.38(4H，m)，2.45-2.56(2H，m)，2.63(2H，t，J＝7.4Hz)，2.77-2.87(1H，m)，3.48(3H，s)，3.51(3H，s)，4.12(2H，q，J＝7Hz)，4.25(2H，q，J＝7Hz)，4.35(1H，d，J＝3.2Hz)，4.77-4.85(1H，m)，7.21(1H，d，J＝8.4Hz)，7.94(2H，d，J＝8.4Hz)實(shí)例18N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲酰〕-L-谷氨酸二乙酯的制備往實(shí)例17的產(chǎn)品(100mg)于乙醇(2.0ml)中形成的懸浮液中加入含20%(W/W)鹽酸的乙醇(2.0ml)和水(0.02ml)，在室溫下加熱混合物2小時(shí)。用水(10ml)稀釋反應(yīng)混合物，往其中加入氨水進(jìn)行中和，接著通過減壓蒸餾以除去溶劑。用柱色譜法(15g硅膠;從濃氨水分離出的二氯甲烷∶從濃氨水-乙醇分離出的二氯甲烷＝40∶1→30∶1)提純得到的殘余物，得到標(biāo)題化合物(69mg)。
化合物的IR(KBr)和1H-NMR(Me2SO-d6)與實(shí)例6的產(chǎn)品的數(shù)據(jù)相同實(shí)例194-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕-嘧啶-5-基)丙基〕苯甲酸的制備將依次按照參照例3、參照例2和實(shí)例13的步驟，由4-(4-丁氧基苯甲酸甲酯)獲得的4-〔4-(2，4，6-三氨基嘧啶-5-基)-5，5-二甲氧基戊基〕苯甲酸甲酯(2.15g)溶于1N四氫呋喃(15.5ml)和1N鹽酸(7.1ml)的混合溶液中，并在68℃攪拌混合物1小時(shí)。在這步中不分離反應(yīng)混合物中制得的4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔3，2-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲酸甲酯。往反應(yīng)混合物中直接加入甲醇(5.7ml)和氫氧化鈉(0.684g)的水溶液(2.85ml)，在67℃水解1小時(shí)。用減壓蒸餾法除去反應(yīng)混合物中的有機(jī)溶劑，用6N鹽酸將殘留的水溶液的PH值調(diào)節(jié)到3。過濾收集得到的沉淀，用少量水洗滌，減壓干燥，得到標(biāo)題化合物(1.72g)化合物的IR(KBr)和1H-NMR(Me2SO-d6)與實(shí)例19的產(chǎn)品的數(shù)據(jù)完全相同。
按與實(shí)例1至19所述的相同方法，可合成下列化合物(1)N-〔4-〔3-(2-氨基-4-羥基-7H-吡咯并〔2，3-d〕-嘧啶-5-基)丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸二苯甲酯，(2)N-〔4-〔3-(2-氨基-4-羥基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲酰〕-L-谷氨酸，(3)N-〔4-〔3-(2-氨基-4-羥基-6，7-二氫-5H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基〕丙基〕苯甲酰〕-L-谷氨酸，(4)N-〔4-〔3-(2-氨基-4-巰基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸二(對(duì)甲氧基芐基)酯，(5)N-〔4-〔3-(2-氨基-4-巰基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(6)N-〔4-〔3-(2-氨基-4-巰基-6，7-二氫-5H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(7)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-6-甲基-7H-吡咯并〔2，3-d〕-嘧啶-5-基)丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(8)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-6-甲基-6，7-二氫-5H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-6-基)丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(9)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-6-乙基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲酰〕-L-谷氨酸，(10)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-6-乙基-6，7-二氫-5H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(11)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-6-乙烯基-7H-吡咯并〔2，3-d〕-嘧啶-5-基)丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(12)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-6-乙炔基-7H-吡咯并〔2，3-d〕-嘧啶-5-基〕丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(13)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-6-羥基甲基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(14)N-〔4-〔3-2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕吡啶-5-基)-1-甲基丙基〕苯甲酰〕-L-谷氨酸，(15)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-6，7-二氫-5H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-甲基丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(16)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-羥基甲基丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(17)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-(甲酰甲基)丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(18)N-〔4-〔3-2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基-1-氯甲基丙基〕苯甲酰〕-L-谷氨酸，(19)N-〔4-〔3-2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-二氯甲基丙基〕苯甲酰〕-L-谷氨酸，(20)N-〔4-3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-三氟甲基丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(21)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-甲氧基甲基丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(22)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-乙氧基甲基丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(23)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基-1-氰基甲基丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(24)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基-1-甲硫基甲基)丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(25)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-2-甲丙丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸(26)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-3-甲基丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(27)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1，1-二甲基丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(28)N-4-〔3-(2，4-二氨基-6，7-二氫-5H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1，1-二甲基丙基〕苯甲酰〕-L-谷氨酸，(29)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-2，2-二甲基丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(30)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-乙基丙基〕苯甲酰-L-谷氨酸，(31)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-6，7-二氫-5H-吡咯并〔2，3-d〕-嘧啶-5-基-1-乙基丙基苯甲?！?L-谷氨酸(32)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-羥基乙基丙基〕苯甲酰〕-L-谷氨酸，(33)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-(2-甲酰基乙基)丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(34)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-甲氧基乙基丙基〕苯甲酰〕-L-谷氨酸，(35)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-乙氧基乙基丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(36)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-二嘧啶-5-基)-2-乙基丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(37)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-乙烯基丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(38)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基-2-乙烯基丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(39)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基-1-烯丙基丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(40)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-乙基-丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(41)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-(異丙基)丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(42)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-(丙烯-1-基)丙基〕苯甲酰〕-L-谷氨酸，(43)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-(炔丙-1-基)丙基〕苯甲酰〕-L-谷氨酸，(44)N-〔4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)-1-丙炔-1-基)丙基〕苯甲?！?L-谷氨酸，(45)4-〔4-(2，4，6-三氨基嘧啶-5-基)-5，5-二甲氧戊基〕苯甲酸甲酯，(46)4-〔4-(2，4，6-三氨基嘧啶-5-基)-5，5-二甲氧戊基〕苯甲酸苯甲酯，(47)4-〔4-(2，4，6-三氨基嘧啶-5-基)-5，5-二(甲巰基)戊基〕苯甲酸對(duì)甲氧基苯甲酯，(48)N-〔4-〔4-(2，4，6-三氨基嘧啶-5-基)-5，5-二甲氧基戊基〕苯甲?！?L-谷氨酸二苯甲酯，(49)4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基丙基〕苯甲酸甲酯，(50)4-〔3-(2，4-二氨基-7H-吡咯并〔2，3-d〕嘧啶-5-基)丙基〕苯甲酸苯甲酯。
權(quán)利要求
1.一種制備下列通式所示的化合物或其鹽的方法，
式中環(huán)(A)代表可被氫化的吡咯環(huán)，X代表氨基、羥基或巰基；R1、R2和R3可相同或不同，各代表可被取代的烷基、鏈烯基或炔基；R4代表OR5，其中R5代表氫或可被取代的烷基或NHCH(COOR6)CH2CH2COOR7，其中R6和R7各代表氫或可被取代的烴基；n代表1至4的整數(shù)，其特征在于該方法包括使下列通式的化合物或其鹽
(式中X、R1、R2、R3、R4和n與上述定義相同；Y1和Y2各代表氧或硫原子；R8和R9可相同或不同，代表可被取代的烴基)在該化合物中的基團(tuán)
被再生成羰基期間或之后進(jìn)行閉環(huán)反應(yīng)以形成吡咯并[2，3-d]嘧啶環(huán)，此外，如果需要，將環(huán)(A)的吡咯環(huán)還原成二氫化吡咯，或/和將R4的OR5(其中R5與上述定義相同)轉(zhuǎn)化成NHCH(COOR6)CH2CH2COOR7(其中R6和R7與上述定義相同)
2.下列通式所示的化合物或其鹽
式中X，Y1、Y2、R1、R2、R3、R4、R8、R9和n與權(quán)利要求1的定義相同。
3.權(quán)利要求1所述的制備下列通式所示的化合物或其鹽的方法
式中X為氨基、羥基或巰基;R1、R2和R3可相同或不同，代表氫、或可被取代的烷基、鏈烯基或炔基;R4為OR5，其中R5代表氫或可被取代的烴基，或NHCH(COOR6)CH2CH2COOR7，其中R6和R7各代表氫或烴基;n為1至4的整數(shù)，其特征在于該方法包括(ⅰ)催化還原下列通式的化合物或其鹽，
式中Y1和Y2各代表氧或硫原子;R8和R9可相同或不同，各代表可被取代的烴基，其它符號(hào)與上述定義相同，(ⅱ)使所述化合物或其鹽與一種酸或金屬鹽相接觸，或(ⅲ)使所述化合物或其鹽與一種氧化劑進(jìn)行反應(yīng)。
4.權(quán)利要求1所述的制備下式化合物或其鹽的方法，
式中X代表氨基、羥基或巰基;R1、R2和R3可相同或不同，各代表氫或可被取代的烷基、鏈烯基或炔基;R4代表OR5，其中R5代表氫或可被取代的烴基，或NHCH(COOR6)CH2CH2COOR7，其中R6和R7各代表氫、或可被取代的烴基;n代表1至4的整數(shù)，其特征在于該方法包括使下式的化合物或其鹽與一種酸相接觸，
式中X、R1、R2、R3、R4和n與上述定義相同;R8和R9可相同或不同，代表可被取代的烴基;Y1和Y2各代表氧或硫原子
5.權(quán)利要求4所述的方法，其中化合物與一種酸的接觸反應(yīng)在含水的有機(jī)溶劑中進(jìn)行。
6.權(quán)利要求5所述的方法，其中含水的有機(jī)溶劑是一種醇、乙酸酯、醚、酮、酰胺、亞砜或腈與水的混合物。
7.權(quán)利要求4所述的方法，其中酸是一種無機(jī)酸。
8.權(quán)利要求4所述的方法，其中R1、R2和R3各為氫原子。
9.權(quán)利要求4所述的方法，其中Y1和Y2均為氧原子。
10.權(quán)利要求4所述的方法，其中R8和R9各為C1-3烷基。
11.權(quán)利要求4所述的方法，其中R5、R6和R7各為C1-5烷基或芐基。
12.一種制備下列通式所示的化合物或其鹽的方法，
式中X代表氨基、羥基或巰基;R1、R2和R3可相同或不同，各代表氫或可被取代的烷基、鏈烯基或炔基;R4代表OR5，其中R5代表氫或可被取代的烴基，或NHCH(COOR6)CH2CH2COOR7，其中R6和R7各代表氫或可被取代的烴基;R8和R9可相同或不同，各代表可被取代的烴基;n為1至4的整數(shù);Y1和Y2各代表氫或硫原子，其特征在于該方法包括使下式的化合物
(式中E代表CN、COOR10、CSOR10或CSSR10，其中R10代表可被取代的烴基，其它符號(hào)與上述定義相同)與胍或其鹽反應(yīng)。
全文摘要
本發(fā)明提供了制備新通式I的化合物或其鹽(式中符號(hào)A、X、R
文檔編號(hào)C07D239/42GK1048705SQ9010443
公開日1991年1月23日 申請(qǐng)日期1990年6月14日 優(yōu)先權(quán)日1989年6月14日
發(fā)明者秋元浩, 飛高武, 三輪哲生 申請(qǐng)人:武田藥品工業(yè)株式會(huì)社