專利名稱：水溶性喜樹堿類似物及其中間體的制備方法，由所述方法制備的化合物及其使用方法
技術領域：
本發(fā)明是關于水溶性喜樹堿類似物的制備方法，包括其中間體的制備方法。本發(fā)明也關系到由該方法制備的化合物，提供了可用于抑制對此類似物敏感的癌細胞生長的水溶性喜樹堿類似物。
DNA鏈的分離是細胞法，如DNA復制和轉(zhuǎn)錄的基礎。因為真核生物DNA由染色體蛋白組織成染色質(zhì)，其尾端強硬、不借助于能改變局部結(jié)構(gòu)的酶，其鏈不能解開。局部異構(gòu)酶(Topoisomerases)是能改變真核細胞內(nèi)DNA局部結(jié)構(gòu)的酶。這種功能使他們成為真核細胞增殖的關鍵。局部異構(gòu)酶Ⅰ是一種分子量約為100，000的單體酶。該酶與DNA結(jié)合，引起短暫的單鏈破裂，散開雙鍵螺旋(或者說使它散開)，并隨后在從DNA鏈上分離以前再填上斷裂處。因此，具抑制局部異構(gòu)酶Ⅰ功能的試劑可以因此功能而作為一種抗癌劑，干擾真核細胞的增殖。
喜樹堿是原生于中國的Camptotheca accuminato和原生于印度的Nothapodytes foetida(也稱之為Mappia foetida)植物產(chǎn)生的水溶性細胞毒性生物堿。喜樹堿及其幾種接近的同類物質(zhì)，是已知的抑制局部異構(gòu)酶Ⅰ的化合物。喜樹堿及其相連的局部異構(gòu)酶Ⅰ抑制劑，因為缺乏臨床效果、不希望的限制劑量的毒性、無法予言的毒性、水溶性差、和/或不合要求的貯存穩(wěn)定性時間，而未能作為溶細胞劑而開發(fā)成臨床藥物。因此，需要能避免這些化合物缺陷的抗癌劑。
Miyasaka等人的U.S.專利No.4，604，463(1986年8月5日公開)，公開了在其A環(huán)的9-，10-和11-位的任一位上帶有一個氨基羰氧基或氯代羰氧基的喜樹堿衍生物，并報道這樣的化合物具抗癌活性并具低毒性。U.S.專利No.4，604，463中公開的該喜樹堿衍生物制備如下將在9-、10-和11-位中任一位上帶有羥基的、并在7-位上取代或未取代的喜樹堿衍生物，用碳酰氯處理，可選擇地再將得到的氯代羰氧基衍生物或者與胺反應，或者采用另一個方法，將9-，10-和11-位中任一位上帶有羥基的，并在7-位上取代或未取代的喜樹堿衍生物，直接用氨基甲酸活性功能衍生物處理。
Miyasaka等人的U.S.專利No.4，473，692(1984年9月25日批準)和他們的U.S.專利4，545，880(1985年10月8日批準)以及歐洲專利公開No.0074，256均公開本文所指的具抗癌活性并帶低毒性的喜樹堿衍生物。這些文獻所公開的化合物指在5-，7-和10-位上帶有某種取代基的化合物。這些文獻公開了制備這些化合物的方法，包括制備其中間體的方法。一個方法包括，在溶劑，例如乙酸、二噁烷-乙酸或二噁烷-鹽酸中、在貴金屬催化劑存在下，于大氣壓下將喜樹堿催化加氫制備1，2，6，7-四氫喜樹堿。所得到的四氫產(chǎn)物按一個煩瑣的，包括用氧化劑將四氫衍生物脫氫在內(nèi)的，多步驟一連串反應，轉(zhuǎn)化成10-硝基喜樹堿。這種氧化劑不引入羥基進喜樹堿衍生物中。使用該文介紹的化學方法，可將硝基轉(zhuǎn)化成各種相關化合物。由這些文獻公開的另一個方法，是關于通過兩步過程，將喜樹堿-1-氧化物光解，來制備10-羥基喜樹堿。
據(jù)報道，10-羥基喜樹堿具藥物活性。尚未審批的日本專利No.59-5188(1984)，公開了從1，2，6，7-四氫喜樹堿制備10-羥基喜樹堿的方法。1，2，6，7-四氫喜樹堿據(jù)該日本專利報道，是在鉑催化劑存在下，于常溫常壓下，在乙酸或二噁烷/乙酸中氫化喜樹堿獲得的。在本文中公開的10-羥基喜樹堿，是將1，2，6，7-四氫喜樹堿，用選自由四醋酸鉛、CAN(硝酸鈰(Ⅳ)銨)、Fremy鹽(亞硝基二磺酸鉀(KSO3)2NO)、鉻酸或酸酐、二鉻酸鹽、高錳酸鉀和氯化鐵組成的一組氧化劑處理而獲得的。
歐洲專利公開No.0088，642(1983年9月14日)，揭示了喜樹堿-7-羧酰胺及其衍生物。據(jù)該文指出，該化合物通過首先將喜樹堿-7-羧酸用羧基活性劑處理，然后用氨或相應的胺處理而制備。該歐洲專利文獻報道，這類化合物被用作制備藥物或其它新的各類喜樹堿衍生物的中間體。
Wani等人(J.Med.Chem，29，2358-2363(1986))報道了有關幾種喜樹堿衍生物抗癌活性的評價，包括9-硝基-20(S)-喜樹堿、9-氨基-20(S)-喜樹堿、9-硝基-10-甲氧基-20(S)-喜樹堿、9-氨基-10-甲氧基-20(S)-喜樹堿、9-硝基-10-羥基-20(S)-喜樹堿和9-乙酰胺基-10-羥基-20(S)-喜樹堿。該文中也公開了這些化合物的制備方法。
Wani等人(J.Med.Chem，23，554-560(1980))揭示了各種喜樹堿類似物的合成，包括在C-10上有二乙基氨基乙基醚的一種類似物。
Wani等人(J.Med.Chem，30，1774-1779(1987))揭示了各種11-取代的喜樹堿類似物的合成，包括氰基、硝基、氨基、二甲基氨基、甲?；?、氨基甲基和羥甲基取代物。Wani等人也介紹了各種化合物的制劑。11-氨基甲基類似物據(jù)該文介紹按如下方法制備將11-甲?；矘鋲A和α-氨基異丁酸在DMF中的溶液回流，隨后濃縮，并加入HCl水溶液。然而，據(jù)報道11-氨基甲基類似物及其鹽酸鹽是無活性的。
盡管人們已作出上面介紹的種種努力，仍然極需有效的抗癌藥物及制備它們的有效的方法。
本發(fā)明提供制備水溶液喜樹堿類似物的新方法，包括制備其中間體的方法。本文中公開的各種方法，單獨的或結(jié)合在一起作為完整生產(chǎn)方案，提供獲得這類化合物的有效手段。
本發(fā)明也提供由上述方法所制備的化合物及這些化合物的使用方法。本發(fā)明的化合物能滿足局部異構(gòu)酶Ⅰ抑制劑的要求，使其作為溶細胞劑，在臨床藥物開發(fā)中深具吸引力。
具體地說，本發(fā)明提供制備下式(Ⅰ)的水溶性喜樹堿類似物及其藥用鹽的完整方法
其中R是氫或C1-6烷氧基R1是-O-R2;-S-R3;或-N-(R4)(R5);
R2，R3，R4和R5是相同的或不相同，是氫;C1-6烷基;C2-6羥烷基;C1-6二烷基氨基-C2-6烷基;C1-6烷基氨基-C2-6-烷基;C2-6氨基烷基;或一個3-7元的未取代或取代的碳環(huán);或者當R′是-N-(R4)(R5)時，該R4和R5基團可以同連于其上連的氮原子結(jié)合在一起，形成取代或非取代的雜環(huán);(它可含其它某些雜原子)而R6是氫;-C1-6非取代或取代的脂族基;或者是能與連結(jié)于其上的氧原子相結(jié)合形成可藥用的酯基團的一種取代基;
式(Ⅰ)化合物作為抗癌劑特別有用，本發(fā)明也關系到使用式(Ⅰ)化合物的方法。
制備式(Ⅰ)化合物的整個方法，由下面圖解Ⅰ表示。式(Ⅰa)化合物是R1為-N-(R4)(R5)，而R4或R5都不為羥乙基的式(Ⅰ)化合物。其中R4或R5是羥乙基的式(Ⅰ)化合物，可以通過例如，以醋酸中的多聚甲醛和乙醇進行的圖解Ⅰ中步驟(2)制備化合物的Mannich反應來制備。
圖解Ⅰ說明R6是氫的化合物的制備法，而其中R6不是氫的式(Ⅰ)化合物，可以通過例如下面的方法來獲得在步驟(3)增加9-位取代基，隨后形成適當?shù)拿鸦蝓セ?。形成此類醚或酯基的方法，可以挑選本領域?qū)I(yè)人員熟知的方法。
圖解Ⅰ
整個說明書和權利要求書，均按如下方式，給環(huán)標以字母，各位置編上號
正如從圖解Ⅰ所看到的，整個方法反應的第一步包括將喜樹堿或其11-烷氧基類似物轉(zhuǎn)換成1，2，6，7-四氫喜樹堿(此后稱為四氫-喜樹堿)及其11-烷氧基類似物。11-烷氧基喜樹堿初始原料可通過任何已知方法生產(chǎn)，例如用Wani等人(在J.Med.Chem，29，2358-2363(1986))中描述的喜樹堿類似物的合成法。在本發(fā)明中，11-甲氧基喜樹堿作為11-烷氧基喜樹堿的優(yōu)選化合物使用。
正如上面討論過的，這步反應的初始原料喜樹堿作為天然生物堿是可以得到的。另外，關于喜樹堿的全合成法已曾有過報道，例如見，Hutchinson在Tetrahedron，37，1047(1981)中的記載，以及Suffness和Cordell的“The Alkaloids，Chemistry and Pharmacalogy”(Brossi，A，ed，Vol.25，Academic Press，Orlando Florida，73(1985))一書中的綜述。生產(chǎn)在第20-位碳原子上外消旋喜樹堿的路線由Wani等人(在J.Med.Chem，23，554(1980)中介紹過。在該方法中，由Wani等人獲得的外消旋喜樹堿由色譜提純，隨后從特定介質(zhì)中結(jié)晶出來。然后，Wani等人用于結(jié)晶的介質(zhì)，當將喜樹堿從相關生物堿雜質(zhì)中加以提純時，屬一種不良溶劑，這樣，色譜法就是提純過程中的必需部分。
無論天然的或合成的喜樹堿都可用作本發(fā)明方法的初始原料。
就20-位來說，初始原料選擇S異構(gòu)體為好。
喜樹堿或11-烷氧基喜樹堿初始原料的提純喜樹堿或其11-C1-6烷氧基類似物，用于制備本發(fā)明的水溶性喜樹堿類似物的整個方法中，作為初始原料時，采用下面的方法提純，將產(chǎn)生特別好的效果。具體地說，提純喜樹堿或11-C1-6烷氧基喜樹堿的方法包括第一步，將含喜樹堿或11-C1-6烷氧基喜樹堿和它們所帶雜質(zhì)的混合物與一種溶劑接觸，其中所說的溶劑能從所說的混合生物堿(而不是所說的喜樹堿和11-C1-6烷氧基喜樹堿)以及雜質(zhì)(這些雜質(zhì)能妨礙所說喜樹堿或11-C1-6烷氧基喜樹堿氫化成相應的1，2，6，7-四氫類似物)中分離出，并至少能部分溶解所說的喜樹堿或11-C1-6烷氧基喜樹堿，或所說雜質(zhì)，或者能溶解二者;第二步，從其中分離出所說的喜樹堿或11-C1-6烷氧基喜樹堿，提純過程的第二步分離出的喜樹堿或11-C1-6烷氧基喜樹堿，最好基本上不含能妨礙喜樹堿或11-C1-6烷氧基喜樹堿氫化成相應的1，2，6，7四氫類似物的雜質(zhì)。若需要，可以用相同的或不同的溶劑將提純法重復多次，以提高喜樹堿或11-烷氧基類似物的純度。
該提純處理，對除去在本發(fā)明整個方法中最后幾步難于消除的雜質(zhì)特別有用。例如，未經(jīng)提純的，含85-87%W/W喜樹堿，帶9-12%雜質(zhì)(HPLC，PAR(峰面積比))的喜樹堿，可按本方法提純，獲得純度高于96%的喜樹堿(HPLC，PAR)。與未徑提純的，含妨礙氫化作用的雜質(zhì)的化合物相比，經(jīng)過提純的喜樹堿或11-烷氧基喜樹堿，可以更有效地氫化成相應的四氫產(chǎn)物，尤其當氫化加工擴大化生產(chǎn)時，就更是這樣的。此外，此法只需使用相對少量的溶劑，而能有效地除去雜質(zhì)。
在第一步中，使用的溶劑量，優(yōu)選每一體積喜樹堿或11-烷氧基喜樹堿，用10-35倍體積溶劑?？捎糜诒景l(fā)明提純處理的代表性的溶劑，包括N，N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、乙酸、三氟乙酸、二甲基亞砜、乙酸和二甲基亞砜的混合物、乙醇和二甲基亞砜的混合物以及乙酸和鹽酸的混合物。
本發(fā)明的提純方法可用于提純天然的或合成的喜樹堿。優(yōu)選采用上面例舉的溶劑。從Nothapodytes foetidn植物得到的喜樹堿，宜于用醋酸或N，N-二甲基甲酰胺來提純，或采用單獨提純處理，或者特別地首先用乙酸提純處理(尤其是熱乙酸)，然后優(yōu)選使用N，N-二甲基甲酰胺，(尤其是熱N，N-二甲基甲酰胺)進行第二次提純處理(可隨意省略)。第二次提純處理的結(jié)果，使得隨后的氫化步驟產(chǎn)量進一步增加。對于取自Nothapodytes foetidn的喜樹堿，在提純時(優(yōu)選以乙酸提純)，加入吸附雜質(zhì)的物質(zhì)，例如脫色的碳，是有用的。從Camptotheca accuminata樹得到的喜樹堿宜于用N，N-二甲基甲酰胺(特別是熱N，N-二甲基甲酰胺)提純。可以采用第二次純化處理(優(yōu)選用熱N，N-二甲基甲酰胺)來提高所獲得的喜樹堿的純度。
用于溶解的溫度優(yōu)選60℃至溶劑的回流溫度，最優(yōu)選約100℃，溶解以后進行冷卻可提高純化作用。喜樹堿或11-烷氧基喜樹堿，例如可以采用諸如過濾這類技術手段，按本發(fā)明的第二步進行分離。
加氫生成四氫喜樹堿或其11-烷氧基類似物喜樹堿加氫生成四氫喜樹堿已有過報道，例如上面討論過的日本專利No，59-5188介紹了在鉑催化劑存在下，于常溫常壓下，在乙酸或二惡烷/乙酸中進行氫化反應。然而，因為該氫化產(chǎn)物是活性的，該方法是不能完全合人滿意的，因為，所需的四氫喜樹堿產(chǎn)物制劑的繼續(xù)加氫的結(jié)果形成過還原產(chǎn)物。此外，若使用高于大氣壓的氫壓(上述日本專利未介紹過)，從獲得更快反應速度和/或提高喜樹堿初始原料的轉(zhuǎn)換率的觀點來看是有利的，但發(fā)現(xiàn)采用這樣的壓力用在該日本專利的方法中并不是有效的，因為它進一步增加過氫化產(chǎn)物的形成。
本發(fā)明提供一種轉(zhuǎn)化喜樹堿或其11-烷氧基類似物成四氫喜樹堿或其11-烷氧基類似物的方法，該方法包括在加氫催化劑緩和劑存在下，將喜樹堿或11-C1-6烷氧基喜樹堿與氫和加氫催化劑接觸，其中緩和劑選自加氫催化劑毒物。該緩和劑調(diào)節(jié)反應，能任其反應完全而限制或完全避免過反應產(chǎn)物產(chǎn)生。使用本發(fā)明的方法，對底物轉(zhuǎn)換及反應選擇性有本質(zhì)上的改善。在包括使用高于大氣壓的氫壓和提高溫度這樣的反應條件下，四氫產(chǎn)物對于進一步氫化來說是穩(wěn)定的。
由任何方法獲得的喜樹堿或11-烷氧基喜樹堿(優(yōu)選按上面討論過的按本發(fā)明方法提純的這類化合物)都可按本發(fā)明方法加氫。
本發(fā)明方法使用的加氫催化緩和劑，可從本技術領域已知的能使加氫催化劑中毒的化合物中挑選。代表性的緩和劑包括硫化合物，如二甲基亞砜(DMSO)或噻吩，特別優(yōu)選DMSO作為催化劑緩和劑。當采用硫化合物作為緩和劑時，可將它裹于加氫催化劑上、硫化加氫催化劑便是其實例。
催化劑緩和劑的用量可這樣選擇以使獲得的底物轉(zhuǎn)換和/或選擇性，相對于無緩和劑存在時進行反應得到的基質(zhì)轉(zhuǎn)換和/或選擇性要得到改善。例如DMSO緩和劑，優(yōu)選用量為每1體積反應底物加入約0.2-5%體積緩和劑。
適合的加氫催化劑可從本領域公知的加氫催化劑中挑選。代表性的是貴金屬催化劑，例如鉑，包括可以通過在乙酸中于氫氣下進行處理的這類予還原過的氧化鉑(PtO2)、鈀或銠。
催化劑可以用諸如碳或鋁這類材料作支撐體，使用支撐催化劑可以減少金屬總用量，而仍然保持充分的加氫速率，因此屬優(yōu)選方案。這類催化劑的實例包括載于碳上的鉑，如5%Pt/C、載于硫化碳上的鉑，如5%Pt/硫化碳以及載于鋁上的鉑，如5%Pt/鋁。載于碳上的鉑，特別是5%Pt/c是特別優(yōu)選的。
加氫催化劑的使用量可選擇能保證有效反應的量，例如，當使用5%Pt/c作為加氫催化劑時，包括支撐體在內(nèi)，催化劑的重量相對于喜樹堿或11-烷氧基喜樹堿底物重量的約20-110%，優(yōu)選約50%。含約2.5%鉑的5%Pt/c催化劑(以初始材料重量計)是尤其優(yōu)選的。
轉(zhuǎn)化成四氫產(chǎn)物的反應可按照本發(fā)明在適當?shù)臍鋲合逻M行，例如使用大氣壓氫壓，而優(yōu)選采用高于大氣壓氫壓。在較高壓力下，反應進行更快和/或使初始原料更完全轉(zhuǎn)化，而避免形成過還原產(chǎn)物，從而達到具較高產(chǎn)率的體積效率。優(yōu)選采用大于約35psi的氫壓，特別優(yōu)選約50-70psi的氫壓。
優(yōu)選基本上由氫組成的大氣。本發(fā)明方法的反應介質(zhì)，優(yōu)選含有能溶介產(chǎn)物且使催化劑具活性的溶劑的液相，它的體積應能使介質(zhì)有效混合以及氫反應劑能良好分散。一種形成液相的代表性液體是乙酸，它的優(yōu)選量是大約每體積喜樹堿或11-烷氧基喜樹堿10-30倍體積，偏低的量，例如10倍體積為特別優(yōu)選。雖然液體介質(zhì)過剩會降低反應速度，而體積初始原料用超過30倍體積乙酸的量仍實用。
完成反應的溫度優(yōu)選從室溫到90℃，最優(yōu)選40-80℃。當加熱時，反應比在室溫進行更快，也更完全。
反應成份與介質(zhì)接觸的次序可按需要選擇。
將初始原料氫化可產(chǎn)生四種相應產(chǎn)物的立體異構(gòu)體，這四種立體異構(gòu)體是在B環(huán)和C環(huán)共享的橋頭碳原子上所鍵合的氫的相對位置不同，任何的和所有的這樣的立體異構(gòu)體都被考慮在本方法范圍內(nèi)。
本發(fā)明也關系到由此制備的新11-C1-6烷氧基-1，2，6，7四氫喜樹堿中間體。該新中間體可使用包括下述步驟的方法來制備如上面討論的將11-C1-6烷氧基喜樹堿與氫和加氫催化劑相接觸，并優(yōu)選進一步使用加氫催化劑緩和劑。
四氫產(chǎn)物的分離可采用適當?shù)姆椒ㄟM行，例如日本專利N.59-5188中介紹的提純方法。優(yōu)選方法包括過濾除去氫催化劑，然后可立即進行總反應圖解中表示的下一步反應，即按下述方法，將四氫產(chǎn)物轉(zhuǎn)化成它們的10-羥基類似物。
氧化生成10-羥基喜樹堿及其10-羥基-11-烷氧基類似物圖解Ⅰ的總過程的第二步，包括四氫喜樹堿或其11-烷氧基類似物轉(zhuǎn)化成10-羥基喜樹堿或其10-羥基-11-烷氧基類似物。這一步驟的初始原料，優(yōu)選采用由本發(fā)明上述的氫化方法獲得的原料。
正如上面指出的四氫喜樹堿轉(zhuǎn)換成10-羥基喜樹堿在日本專利No.59-5188中介紹過，它公開了使用的氧化劑選自四乙酸鉛、CAN(硝酸鈰(Ⅳ)銨)、Fremy鹽(亞硝基二磺酸鉀(KSO3)2NO))、鉻酸或酸酐、二鉻酸鹽、高錳酸鉀和氯化鐵。該日本專利指出，此反應中使用的溶劑，包括乙酸、甲醇、乙醇、氯仿、吡啶、苯、二氯甲烷、二噁烷、THF、水和三氟乙酸以及它們的混合物。然而，發(fā)現(xiàn)該日本專利的缺點是氧化反應選擇性不高，除了生成10-羥基喜樹堿外，還形成相當數(shù)量的不需要的喜樹堿，必需從最終產(chǎn)物中將其分離除去，10-羥基喜樹堿本身也是活性的，在日本專利的方法中趨于被破壞。此外四乙酸鉛這類氧化劑的使用也造成最終產(chǎn)物中的重金屬污染。
本發(fā)明提供一個將四氫喜樹堿或其11-C1-6烷氧基類似物氧化成10-羥基喜樹堿或其10-羥基-11-烷氧基類似物的方法，包括這樣的步驟將四氫喜樹堿或11-C1-6烷氧基喜樹堿在液體反應介質(zhì)中與氧化劑接觸，其中(a)，液體反應介質(zhì)包括這樣挑選的介質(zhì)，即在所說反應期間，至少部份10-羥基喜樹堿或10-羥基-11-烷氧基喜樹堿產(chǎn)物要形成沉淀，而有這樣一個限制條件假若當采用四氫喜樹堿作為初始原料，而不用正如下面所列舉的那些氧化劑B，那么作為液體反應介質(zhì)(a)采用的液體則不得由甲醇組成;和/或(b)，氧化劑是過硫酸鉀、亞碘酰苯、亞碘酰苯的酯、過碘酸鈉或過碘酸鉀。當采用四氫喜樹堿作為初始原料，不使用氧化劑(b)，那么上述液體反應介質(zhì)(a)最好優(yōu)選不是由單獨的甲醇、乙醇、氯仿、苯、二氯甲烷、二噁烷或水任何一種組成的介質(zhì)。
使用在(1)中所述反應介質(zhì)(a)的優(yōu)點在于能使10-羥基或10-羥基-11-烷氧基喜樹堿產(chǎn)物沉淀出而基本上離析出來，從而可使所需產(chǎn)物的進一步反應達極小或者完全消除。使用這樣的介質(zhì)也可使不需要的付產(chǎn)物喜樹堿或11-烷氧基喜樹堿的形成達極小或避免。此外，在反應介質(zhì)中，過氧化反應化合物(而不是所需產(chǎn)物)的形成達極小或被避免，由此使產(chǎn)量大大增加。
優(yōu)選采用含水和一種有機溶劑的混合物的液體反應介質(zhì)(a)能有效產(chǎn)生沉淀。含水和有機溶劑混合物的液體介質(zhì)(a)可以這樣獲得，比如將水與諸如乙酸、丙酮、N，N-二甲基甲酰胺的有機液體、或甲醇、乙醇或異丙醇這類低分子量醇類相混合，形成的液體組合物的相對量要使部份10-羥基喜樹堿或10-羥基-11-烷氧基類似物形成沉淀。
上面所用術語“低分子量醇”以及本文其它地方使用的該術語均表示一種于使用溫度下呈液態(tài)的醇，優(yōu)選C1-C4醇。
作為反應介質(zhì)使用的優(yōu)選的液體組合物含有水和有機溶劑，其含量水為約25-75%體積(根據(jù)液體的總體積計)的那些組合物。特別優(yōu)選的是水與諸如乙酸、丙酮、N，N-二甲基甲酰胺或低分子醇類這樣的有機溶劑之比為1∶1。
產(chǎn)品化合物在本發(fā)明的液體反應介質(zhì)(a)中基本上不溶解為好。
當水與乙酸結(jié)合使用作為液體介質(zhì)具有另外的優(yōu)點，當乙酸單獨使用時，既形成10-乙酰氧基喜樹堿或其10-乙酰氧基-11-烷氧基類似物，也形成10-羥基喜樹堿或其10-羥基-11-烷氧基類似物，前一種乙酰氧基化合物形成有相當?shù)牧?。加入水，則反應后介質(zhì)中此類乙酰氧化合物的總量降到極小或消除，以致于假如需要，使這類化合物轉(zhuǎn)換成10-羥基喜樹堿或其10-羥基-11烷氧基類似物的分離水解步驟便可省略。
上述的氧化劑(b)，優(yōu)點在于他們相當溫和，以至其結(jié)果極小或不會發(fā)生進一步氧化，而破壞10-羥基或10-羥基-11烷氧基喜樹堿產(chǎn)物。上述氧化劑(b)特別優(yōu)選的是亞碘酰苯的酯，例如分子式為PhI(OR7)2的那些酯，其中Ph是苯基;在每一個-OR7基團中的R7可以相同也可以不同，是氫、-C(O)-R8或-SO2-R9;R8和R9是未取代的或經(jīng)取代的烴基;其中至少一個-OR7基團的R7不是氫。代表性的這類酯是(二)三氟醋酸碘代苯酯，由亞碘酰苯與三氟醋酸酯化形成、二醋酸碘代苯，由亞碘酰苯與醋酸酯化而成以及羥基(甲苯磺酰氧)碘代苯，由亞碘酰苯與甲苯磺酸酯化而成。這些酯中最為優(yōu)選的是二醋酸碘代苯酯。(PhI(OC(O)CH3)2)。
當使用上述液體介質(zhì)(a)時，優(yōu)選采用上述(b)中的氧化劑，尤其是二醋酸碘代苯酯，因由其結(jié)合產(chǎn)生特別好的結(jié)果。
可以選擇氧化劑的量來改善反應，優(yōu)選相對于四氫樹堿或11-烷氧基喜樹堿類似物來說氧化劑大于約二(2)當量的量，最為優(yōu)選氧化劑的量是相對于四氫喜樹堿或其11-烷氧基類似物約三(3)當量。雖然上述液體介質(zhì)(a)是最優(yōu)選的，當采用上述氧化劑(b)時，可以采用這樣的液體介質(zhì)，如N，N-二甲基甲酰胺、丙酮、低分子醇或優(yōu)選醋酸。
四氫初始原料的投料量，以液體介質(zhì)的重量計，優(yōu)選約2-10%，特別優(yōu)選5-10%?？蛇x擇適宜的壓力和溫度進行該反應，優(yōu)選大氣壓和室溫，該反應可在空氣中進行。
本發(fā)明也關系到這里所制備的新的10-羥基-11-C1-6烷氧基喜樹堿中間體，這些新的中間體可采用包括下述步驟的方法來制備將11-C1-6烷氧基-1，2，6，7-四氫喜樹堿在液體反應介質(zhì)中與氧化劑接觸，并優(yōu)選上面討論的方法。
式(Ⅰ)化合物的制備制備式(Ⅰ)化合物從上述圖解Ⅰ的總過程的第三步開始。在此步驟中的10-羥基喜樹堿或10-羥基-11-烷氧基喜樹堿初始原料，優(yōu)選由上述氧化方法獲得的產(chǎn)物，然而也可使用其它途徑獲得的初始原料，例如，10-羥基喜樹堿是天然的化合物，它可以從產(chǎn)生喜樹堿的同一種植物中找到。10-甲氧基喜樹堿也可從產(chǎn)生喜樹堿的同樣植物中分離出，可將其與溴化氫一起回流，可以轉(zhuǎn)化成10-羥基喜樹堿。如上面所述，10-羥基喜樹堿也可以按日本專利申請No.59-5188的方法獲得還原喜樹堿的吡啶環(huán)，隨后用四乙酸鉛氧化。此外，外消旋10-羥基喜樹堿可以用Wani等人(在J.Med.Chem，23，554(1980)中介紹的方法制備。
本發(fā)明提供制備式(Ⅰ)化合物的方法，在該方法中，初始原料很快進行反應，可以基本上都被消耗掉。具體說來，本發(fā)明提供制備式(Ⅰb)化合物及其可供藥用的鹽的方法，式(Ⅰb)化合物結(jié)構(gòu)如下
其中R是氫或C1-6烷氧基R1是-O-R2;-S-R3;或-N-(R4)(R5);
R2，R3，R4和R5是相同的或不相同的，是氫;C1-6烷基;C3-6羥烷基;C1-6二烷氨基-C2-6烷基;C1-6烷基氨基-C2-6-烷基;C2-6氨基烷基;或-3-7元的未取代或取代的碳環(huán);或者當R′是-N-(R4)(R5)時，R4和R5基團可連同連于它們上面的氮原子一起，形成取代的或未取代的雜環(huán)，該雜環(huán)還可含其它雜原子;而R6是氫;-C1-6非取代或取代的脂族基;或一個能聯(lián)合連于其上的氧原子一起形成藥用酯基團的一種取代基;
該方法包括(ⅰ)將10-羥基喜樹堿或10-羥基11-C1-6烷氧基喜樹堿與式(Ⅱ)化合物接觸，制備R1是胺基-N-(R4)(R5)和R6是氫的式(Ⅰb)化合物或其藥用鹽，式(Ⅱ)化合物的結(jié)構(gòu)如下
其中R4和R5與上面式(Ⅰb)中定義的相同;和(ⅱ)可選擇地進行(a)，通過將在步驟(ⅰ)制備的化合物的胺基轉(zhuǎn)換成-O-R2或-S-R3制備R1是-O-R2或-S-R3的式(Ⅰb)化合物或其可供藥用的鹽，和/或(b)，通過將在步驟(ⅰ)中制備的化合物的10-位羥基轉(zhuǎn)化成-OR6基，其中R6是除氫以外的，如上述式(Ⅰb)所定義的其它一系列基團，來制備R6不是氫的式(Ⅰb)化合物或其藥用鹽。
本發(fā)明上述方法的步驟(ⅱ)(a)中，R1是-O-R2或-S-R3的那些化合物可這樣制備;例如，將上述步驟(ⅰ)制備的化合物與式HO-R2的適當醇或式HS-R3的適當硫醇(其中R2和R3如式(Ⅰb)中定義)，在如N，N-二甲基甲酰胺這樣的惰性溶劑中加熱。要考慮制備帶-O-R2或-S-R3(作為R1)基團的化合物，那么在步驟(ⅰ)中，最好制備帶-N(CH3)基團(作為R1)的化合物。當步驟(ⅰ)中制備的化合物是游離堿時，那么步驟(ⅱ)(a)中可以加入少量強酸、例如鹽酸。步驟(ⅱ)(a)可與步驟(ⅰ)同時進行，也可在其后進行。例如，制備R1是-O-R2或-S-R3的化合物時這兩步驟可按如下方式同時進行在步驟(ⅰ)的反應混合物中加入適當?shù)拇蓟蛄虼?，并且，或者將強酸加入反應混合物中，或者胺基就是以強酸鹽的形式出現(xiàn)的。步驟(ⅱ)(b)可隨步驟(ⅰ)后進行。
至于R6，典型的C1-6未取代的或取代的脂肪基包括直鏈或支鏈的脂肪基，優(yōu)選未取代或取代的C1-4烷基。典型的可藥用的酯，包括其中R6是C1-6未取代的或取代的，直鏈或支鏈的脂肪羰基的那些化合物，優(yōu)選C1-4未取代或取代的烷羰基。
術語“碳環(huán)”指完全飽和的，部份飽和的或完全不飽和的環(huán)系。
優(yōu)選的式(Ⅰb)化合物包括R1是二甲基氨基、N-嗎啉基、N-甲基哌嗪基、(4′-哌啶)N-哌啶基、環(huán)己基氨基、N-甲基苯胺基、乙氧基、環(huán)丙基氨基、N，N-二甲基氨基乙氧基、N，N-二甲基氨基乙基硫代、N，N-二甲基氨基乙基氨基，或甲基氨基的那些化合物。特別優(yōu)選的是其中R1是二甲基氨基或N-嗎啉基(尤其是二甲基氨基)的式(Ⅰb)化合物和它們的鹽酸或乙酸鹽。
在步驟(ⅰ)中可選擇反應劑的相對量來實現(xiàn)反應，優(yōu)選采用過量的式(Ⅱ)化合物，比如相對于10-羥基或10-羥基-11-烷氧喜樹堿初始原料，式(Ⅱ)化合物等于或超過1.2當量的量。
與式(Ⅱ)化合物進行反應的溫度優(yōu)選0℃到溶劑的回流溫度之間，最優(yōu)選室溫。使用室溫可將具有較小穩(wěn)定性的式(Ⅰb)化合物的熱分解降至最低，這類化合物，例如可是游離堿形式，或當采用乙酸作溶劑時產(chǎn)生的乙酸鹽形式。優(yōu)選采用大氣壓，該反應可在空氣大氣壓下進行。
制備式(Ⅰb)化合物的本發(fā)明方法，可在溶劑中進行，例如乙酸。10-羥基或10-羥基-11-烷氧初始原料的投料優(yōu)選溶劑重量的約4%至10%。
本發(fā)明方法的優(yōu)選方案特別在步驟(ⅰ)包括使用選自乙腈或低分子量醇類這樣的溶劑。該乙腈或低分子量醇溶劑，可與一種或多種其它有機液體混合。當乙腈用作溶劑時，它可以，例如單獨使用或與低分子量醇或如二氯甲烷這樣的惰性氯代烴混合使用。當?shù)头肿恿看急挥米魅軇r，例如，它可以單獨使用或與惰性氯代烴混合使用。
低分子量醇和一種惰性氯代烴混合物作溶劑是較好，特別優(yōu)選例如1-丙醇這樣的低分子量醇和二氯甲烷混合使用，最優(yōu)選按體積計的比例為約5份醇比約10份二氯甲烷。
與使用醋酸這樣的溶劑相比，用于制備式(Ⅰb)化合物的優(yōu)選溶劑系的優(yōu)點在于，例如，反應可在無酸條件下進行，可使酸鹽直接離析出來不進行鹽交換，由于更完全地消耗初始原料，而使回收產(chǎn)物產(chǎn)率提高。若希望得到給定的鹽，可直接將相應的酸單獨的或以溶液形式加入。此外，使用上述優(yōu)選溶劑體系，例如在上述氧化步驟中，可將作為雜質(zhì)產(chǎn)生的喜樹堿排除在母液中，而增加離析產(chǎn)物的純度。
式(Ⅰ)化合物可在下述重結(jié)晶法中采用，式(Ⅰb)化合物不包括R2、R3、R4或R5是羥乙基的式(Ⅰ)化合物，后一類化合物可按歐洲專利No.0321，122的方法獲得(該文引入本文作為參考)。
已認識到由于式(Ⅰ)化合物的E環(huán)上有不對稱碳原子，即第20個碳原子，因此將出現(xiàn)光學異構(gòu)體。優(yōu)選S-異構(gòu)體，盡管R-異構(gòu)體和外消旋混合物(外消旋物)也包括在式(Ⅰ)化合物的范圍內(nèi)。
藥物學上可用的鹽和它們的制備方法，可由本領域的專業(yè)人員選擇。優(yōu)選的式(Ⅰ)化合物藥用鹽包括乙酸鹽、甲磺酸鹽，尤其是鹽酸鹽如單或二鹽酸鹽。二鹽酸鹽可以通過加入過量的鹽酸而形成，很可能是B環(huán)上的喹啉氮以及R1基上的氮進行質(zhì)子化反應造成。典型的藥用鹽也包括季銨鹽，例如，可以將上述方法的步驟(ⅰ)獲得的化合物用烷基化試劑處理來獲得。優(yōu)選的此種鹽是9-位取代基是-CH2-N(CH3)3的式(Ⅰ)化合物。典型的式(Ⅰ)化合物的季鹽的可藥用陽離子包括甲磺酸鹽和氯化物。
本發(fā)明也關系到R是C1-6烷氧基的式(Ⅰ)新化合物。
水溶性喜樹堿類似物的提純和分離由上述方法獲得的式(Ⅰ)化合物或其藥用鹽，例如可以由柱層析法，凍干法或汽抽法來提純和分離。然而，結(jié)構(gòu)如下的式(Ⅰ)化合物及其藥用鹽
其中R是氫或C1-6烷氧基R1是-O-R2;-S-R3;或-N-(R4)(R5);
R2，R3，R4和R5是相同的或不相同的，是氫;C1-6烷基;C2-6羥烷基;C1-6二烷基氨基-C2-6烷基;C1-6烷基氨基-C2-6-烷基;C2-6氨基烷基;或-3-7元的未取代或取代的碳環(huán);或當R′是-N-(R4)(R5)時，R4和R5基連同連于它們上面的氮原子一起，形成取代的或未取代的雜環(huán)，該雜環(huán)還可含其它雜原子;
R6是氫;-C1-6非取代或取代的脂族基;或連同連于其上的氧原子一起形成藥用酯基團的一種取代基;
通過包括下述步驟的方法來提純和分離較好(a)加入第一種液體，該液體是該化合物的溶劑，加入的量要使該化合物至少部份溶解形成溶液或漿液。
(b)步驟(a)以后，加入第二種液體到步驟(a)獲得的溶液或漿液中，該液體能使溶解于其中的化合物的重結(jié)晶，這樣化合物便進行重結(jié)晶;
(c)過濾收集式(Ⅰ)的化合物或其鹽。
本方法的步驟(a)至步驟(c)，優(yōu)選在一個基本上能避免式(Ⅰ)化合物及其鹽不穩(wěn)定的溫度下進行。
本發(fā)明的提純方法，與例如由層析提純相比，可節(jié)省投資和勞力，由本方法獲得的產(chǎn)物也比由層析獲得的要純。與凍干法相比，由過濾分離產(chǎn)物要節(jié)省時間和勞力，也比凍干產(chǎn)物更容易處理。此外，在本方法中，產(chǎn)物的鹽成分，例如氯化物成份可以調(diào)節(jié)，例如，對于單鹽酸鹽，粗產(chǎn)物的氯化物成份可于理論值的100%以下200%以上之間變化，這樣可調(diào)節(jié)到單鹽酸鹽的那一接近值。
步驟(a)使用的溶劑可采用，在足夠量下，能至少部份溶解式(Ⅰ)化合物或其鹽形成溶劑或漿液的任何溶劑。優(yōu)選溶劑的性質(zhì)和量能使基本上完全溶解。步驟A中可以輕微加熱，優(yōu)選能基本上避免化合物不穩(wěn)定的溫度，比如低于約40℃的溫度，于室溫溶解量為優(yōu)選。優(yōu)選采用每1體積欲提純的化合物用3-15倍體積的溶劑。
雖然可以采用有機溶劑或水和可溶混的有機溶劑的混合物，但步驟(a)中優(yōu)選水作溶劑。
過濾優(yōu)選步驟(a)后進行，以除去存在的任何不需要的不溶性物質(zhì)，可按本領域公知的方法操作。步驟(a)獲得的溶液或漿液，或者步驟(a)后采用過濾步驟得到的濾液，最好進行濃縮，例如使用真空、濃縮最好在室溫下進行。
在步驟(b)中，加入一種能促進溶液或漿液再結(jié)晶的液體，在此步驟中，優(yōu)選的是將溫度保持在40℃以下，最佳為室溫下，在步驟(b)中，這種液體的優(yōu)選加入量為每體積要純化的化合物中加入約15到60體積的該液體。在步驟(b)中可加入的液體包括丙酮，乙腈，低級醇如甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇或四氫呋喃，正丙醇或丙酮是優(yōu)選的。在步驟(a)中加入溶劑后步驟(b)中液體的加入，與例如這些液體同時加入相比提供了有利條件。步驟(a)中的溶解可以完成的更快及更安全，允許使用除去不溶的不純物的過濾步驟。另外，在步驟(a)中，通過依次加入使得溶解步驟在相對低的溫度下完成而獲得增溶作用，由此減少或避免需被純化的化合物的分解。
最好將再結(jié)晶的混合物攪拌和/或冷卻以全部沉淀此化合物，然后通過過濾收集?？梢詫a(chǎn)物干燥，如在真空下和/或加熱干燥。
式(Ⅰ)的可水溶的喜樹堿類似物或其鹽可以其需要的形式能夠抑制對上述類似物敏感的瘤細胞的生長的有效量在動物體中使用，并且在藥物組合物中也有上述抑制作用。分子式(Ⅰ)的胞毒化合物是純化的拓撲異構(gòu)酶Ⅰ的有效抑制劑。該藥物組合物可以包含一個分子式(Ⅰ)，或其鹽的有效抑制瘤細胞生長的組合物的量，及一種惰性藥物學可接受的載體稀釋劑。
以根據(jù)傳統(tǒng)方法將治療學上有效的化合物的量(“活性成份”)與標準的藥物學載體或稀釋劑結(jié)合而制備的傳統(tǒng)的劑量形式來使用分子式(Ⅰ)，或其鹽的化合物。這些過程可以涉及混合，制粒和壓片或溶解該成份以適合所需要的制劑?？梢赃m于不經(jīng)腸胃或口服的劑量單位形式制備該藥物組合物。
可以使用例如固體或液體的藥物學載體。典型的載體為，乳糖、石膏粉、蔗糖、滑石、明膠、瓊脂、果膠、阿拉伯膠、硬酯酸鎂、硬酯酸或其他。典型的液體載體為糖漿、花生油、橄欖油、水或類似物。相似的，載體或稀釋劑可以包括本領域已知的時間延遲物質(zhì)，如單硬酯酸甘油酯或單獨的二硬酯酸甘油酯或與蠟、乙基纖維素、羥基丙基甲基纖維素、異丁烯酸甲酯及類似物。
可以使用各種藥劑學形式。例如，如果使用固體載體，則可制成片劑，以粉末或顆粒的形式或以錠制的形式裝在硬明膠膠囊中。固體載體的量可在較大的范圍內(nèi)變化，但優(yōu)選的是從約25mg到約1g。如果使用液體載體，可制成糖漿，乳劑，軟明膠膠囊，滅菌注射液或裝在安瓿或管狀瓶中的懸浮劑或非水溶懸浮劑。
為了蕕得穩(wěn)定的水溶液劑量形式，將分子式(Ⅰ)的化合物藥物學可接受的鹽溶解在一種有機或無機酸，如0.3M的琥珀酸或優(yōu)選的檸檬酸的水溶液中。如果可溶性鹽形式是不可得的，則將分子式(Ⅰ)的化合物溶解在一種合適的共溶劑或結(jié)合物中。這些共溶劑的實例包括，但不限于，醇.丙二醇.聚1，2-亞乙基二醇300，聚山梨酸酯80，甘油和類似物其濃度為全部體積的0-60%。
組合物也可以是以活性組分的鹽的一適當?shù)暮x形劑中的水溶液的形式，如水、等滲鹽水或葡萄糖溶液。對于那些在9位沒有堿側(cè)鏈的分子式的分子式(Ⅰ)的化合物而言，在E-環(huán)內(nèi)酯堿解形成的羧酸的堿金屬鹽，如鈉鹽，將產(chǎn)生一可溶性鹽。很顯然，用于本發(fā)明組合物中的分子式(Ⅰ)的實際上優(yōu)選劑量隨便用的特殊的配合物，特殊的組合物配方、給藥方式和所治療的特殊部位、宿主和疾病而改變。在一系列給定條件下的最佳劑量可通過使用傳統(tǒng)的劑量測定試驗測定。
對于分子式(Ⅰ)化合物的胃腸外給藥，劑量水平可高達每天體表面積約20mg/M2使用1至5天的期望量。但在實踐中，使用劑量可以提高。優(yōu)選地，每4個星期進行4個療程重復給藥，對于口服使用的劑量水平可達每天體表面積約20mg/M2維持1到5天的期望量。以適當?shù)拈g隔重復療程。但在實踐中，劑量可以提高。
一種抑制對分子式(Ⅰ)，或其鹽的化合物敏感的動物瘤細胞的生長的方法，包括給帶所說瘤細胞的宿主動物以能有效的抑制瘤細胞生長的量服用上述化合物。在療程中，按上述的討論活性成分可以通過胃腸外或口服以體表面積有通常預期的不超過約20mg/M2的量每天服用維持1至5天，以適當?shù)拈g隔重復療程。在實踐中，劑量可以提高。
下列的實施例僅用于說明本發(fā)明，但并不以任何方式限制于此范圍內(nèi)。
實施例1喜樹堿(中國材料)的再結(jié)晶在約155℃，將31.1克(20S)的喜樹堿溶解在620ml的N，N-二甲基甲酰胺中，劇烈攪動。將溶液慢慢冷卻到環(huán)境溫度。攪拌直到結(jié)晶完成，過濾懸浮液以得到一種淡黃色固體。通過HPLC分析表明，約98%的喜樹堿含有兩種少量雜質(zhì)(各約為1%)，它們比喜樹堿的保留時間長。樣品用甲醇沖洗并空氣干燥。回收的干物質(zhì)為24.9克，M.P.263-265℃(檢測校正率91%)。
實施例2喜樹堿(中國材料)的再結(jié)晶301克的粗制喜樹堿隨著攪拌懸浮在3000ml的N，N-二甲基甲酰胺中?；旌衔镌诩s100℃攪拌14小時，并隨著攪拌緩慢冷卻到環(huán)境溫度。該固體用一合適的方法收集并用甲醇洗滌。干燥后得到恒重為250g的產(chǎn)品后，在100℃用2500ml(10Vol.V/W)的N，N-二甲基甲酰胺制漿＞12小時。懸浮液隨攪拌緩慢冷卻到環(huán)境溫度。收集產(chǎn)品，用甲醇洗滌并干燥得到236g恒重的產(chǎn)品。
M.P.263-265℃。(全部回收物的檢測校正率86%)實施例3喜樹堿(印度材料)的再結(jié)晶291克(20S)的喜樹堿通過攪拌用10.2升的乙酸通過熱回流溶解。加入10%重的活性炭(29克)，該熱懸浮液通過Celite過濾。所得的混合物通過蒸餾濃縮到約5.8升。隨著攪拌冷卻到環(huán)境溫度后，收集固體產(chǎn)品，用甲醇洗滌并干燥到恒重?；厥盏?30克的物質(zhì)。通過HPLC，樣品分析確定98%為喜樹堿。
一部分23.4克上述方法純化的喜樹堿樣品(20S)在100℃用234ml的N，N-二甲基甲酰胺混合攪拌約24小時。隨著攪拌將上清液冷卻到環(huán)境溫度，并通過過濾收集固體喜樹堿。用甲醇洗滌后干燥得到恒重產(chǎn)品，該產(chǎn)品通過HPLC測定＞99%為喜樹堿。
實施例4喜樹堿(中國材料)的再結(jié)晶1500g的喜樹堿中國樣品(20S)，在100℃用15.0升的N，N-二甲基甲酰胺混合攪拌24小時。該漿液隨攪拌24小時后冷卻到環(huán)境溫度，過濾并用2X7.5升的甲醇洗滌，得到一淡黃色固體。固體在真空下干燥，得到1277g的物質(zhì)。
從上述過程得到的1277g喜樹堿(20S)用12.8升N，N-二甲基甲酰胺于100℃混合攪拌24小時。該漿液隨攪拌24小時后冷卻至環(huán)境溫度，過濾并用2×6.4升的甲醇洗滌。淡黃色固體在真空下干燥。得到1197g物質(zhì)。該產(chǎn)品用HPLC與標準物質(zhì)樣品相比，喜樹堿含量＞99%。
實施例510-羥喜樹堿的制備(a)四氫化喜樹堿的制備5加侖，不銹鋼的高壓攪拌釜裝入含1000g的喜樹堿的冰乙酸。500g的5%的鉑碳漿液與冰乙酸一起加到反應器中，這樣在反應中共使用了約10升乙酸(10體積V/W與喜樹堿相比)。加入75ml的二甲基亞砜，并密封反應器。用氮氣清洗后，攪拌反應器裝入約70psi的氫氣。在隨后的反應中保持氫氣的壓力。反應器逐漸加熱至65℃，并仔細監(jiān)測氫氣的攝取量。大約6小時后，氫的攝取基本停止，雖然反應可安全的持續(xù)至少24小時，沒觀察到產(chǎn)物的生成增加。反應冷卻到約30℃，與大氣相通并從反應器取出。反應器用約11升的冰乙酸沖洗。過濾全部乙酸以除去催化劑，并用HLPC測定已結(jié)合的體積，以測定四氫化喜樹堿的含量(約874g，產(chǎn)率89%)。檢測完后，在乙酸溶液中的產(chǎn)品象已描述的直接氧化。
(b)10-羥喜樹堿的制備。
約一半的上述四氫化喜樹堿乙酸溶液(約10.4升溶液，含約398g，1.13摩爾的四氫化喜樹堿)裝到22升的攪拌玻璃容器中。溶液通過蒸餾濃縮至原體積的40%(4升)。溶液用等量的蒸餾水稀釋并在約20℃攪拌。得到一重的、白的沉淀懸浮物。迅速攪拌懸浮物同時迅速加入728g(2.0eq)的二乙酸碘代苯。觀察到輕微散溫到約35℃。另外的400g(1.1eq)的二乙酸碘代苯分成三等份每隔一小時加入。添加劑加完后，將懸浮液攪拌14小時。將懸浮液蒸餾，分幾次加入6升1∶1的乙酸∶水以保持與蒸餾開始基本恒定的體積。收集到12升的溶劑后，停止蒸餾并將懸浮液攪拌約16小時到環(huán)境溫度。收集產(chǎn)物并用甲醇洗滌。產(chǎn)物干燥到398g恒重(產(chǎn)率88%，分析容量校正)產(chǎn)物的M.P.267-268℃，含約1%的喜樹堿。
實施例610-羥喜樹堿的制備1720ml的水緩慢加到含172g(20S)四氫化喜樹堿的1720乙酸溶液中。加到最后時，得到一種濃稠的，難以攪拌的奶油色漿。
在約6分鐘中，迅速攪拌加入314克(2.0當量)的二乙酸碘代苯。漿變成深綠色，幾乎全部沉淀都溶解了。過幾分鐘后，漿液變成黃色，同時，更多的沉淀形成。溫度升到最高36℃。在室溫下繼續(xù)攪拌1小時。此時，在一分鐘內(nèi)另外加入79g(0.5當量)的二乙酸碘代苯。懸浮液沒有顯著地放熱再攪拌1小時，其間另加入63克(0.4當量)的二乙酸碘代苯并連續(xù)攪拌。1.5小時后，加入16克(0.1當量)的二乙酸碘代苯，氧化劑總添加量達到3.0當量。
懸浮液在室溫下攪拌18小時。在大氣壓下，將混合物加熱蒸餾溶劑，將5160ml的1∶1的乙酸∶水溶液定時加入以便在蒸餾過程中保持體積的基本恒定。將懸浮液濃縮，最后體積約為1720ml。最初的餾份是渾濁的收集時分成兩相。餾份的重相含大部分碘代苯。停止蒸餾，在室溫下，將黃色的漿料攪拌冷卻24小時。通過過濾收集固體并用860ml份的甲醇洗滌兩次，隨后過濾除去甲醇。將收集的固體在真空下干燥。干燥后，得到171g的產(chǎn)物(91%的分離產(chǎn)率，通過HPLC，與標準物質(zhì)樣品相比檢測產(chǎn)物的純度的校正值)。分離的產(chǎn)品含約1%的喜樹堿副產(chǎn)品。
實施例7鹽酸9-N，N二甲氨甲基-10-羥喜樹堿鹽(20S)的制備。
在22升的燒瓶中裝上428g的四-羥喜樹堿。加入4280ml的二氯甲烷和2140ml的正丙醇后，被攪拌的懸浮液中在約5分鐘中加入259g的雙二單氨基甲烷。攪拌懸浮液，定時通過HLPC觀測起始物質(zhì)的存在。5小時后，沒有可探測(＜0.1%)的起始保留。反應6小時后，將在2140ml正丙醇中的濃的，含水的鹽酸在約2小時中逐漸加入。連續(xù)攪拌16小時。過濾收集產(chǎn)物并用二氯甲烷洗滌。將產(chǎn)物干燥得到恒重為415g的題目所說的化合物(產(chǎn)率91%)。
實施例89-N，N-二甲氨基甲基-10-羥喜樹堿乙酸鹽的制備(20S)。
2.60毫摩爾的10-羥喜樹堿(20S)在15.45ml的乙酸中與6.08毫摩爾的雙(二甲氨基)甲烷結(jié)合。反應后，將題目所說的化合物分離。
實施例99-嗎啉代甲基-10-羥喜樹堿乙酸鹽的制備(20S)題目所說的化合物用實施例8中的方法制備，用雙(N′-嗎啉代)甲烷代替雙(二甲氨基)甲烷。
實施例109-N-甲基哌嗪基甲基-10-羥喜樹堿乙酸鹽的制備(20S)。
題目所說的化合物用實施例8中的方法制備，用雙(N-甲基哌嗪基)甲烷代替雙(二甲氨基)甲烷。
實施例119-(4′-哌啶子基哌啶基)-甲基-10-羥喜樹堿乙酸鹽的制備(20S)題目所說的化合物用實施例8中的方法制備，用雙(4′-哌啶子基哌啶基)甲烷代替雙(二甲氨基)甲烷。
E實施例12甲磺酸9-N-三甲基銨甲基-10-羥喜樹堿鹽的制備(20S)。
按實施例8制備的65mg的乙酸9-N，N-二甲氨基甲基-10-羥喜樹堿鹽，在約70ml的CH2Cl2中溶解并過濾。濾液與甲磺酸甲酯(1ml)結(jié)合，冷卻并在氬流下部分地濃縮。4小時后，溶劑濃縮到一半體積并冷卻。將沉淀物過濾，溶解在水(10ml)中，用乙酸乙酯(3×10ml)、然后石油醚(10ml)洗滌，并冷凍干燥得到題目所述的化合物。
實施例139-環(huán)丙基氨甲基-10-羥喜樹堿鹽酸鹽的制備(20S)按實施例8中的方法制備，9-環(huán)丙基氨甲基-10-羥喜樹堿乙酸鹽，用雙(環(huán)丙基氨基)甲烷代替雙(二甲氨基)甲烷。通過用0.1N HCl研磨將乙酸鹽變成鹽酸鹽。
實施例149-乙氧甲基-10-羥喜樹堿的制備(20S)按實施例7中的方法用95%的乙醇回流(20S)鹽酸9-N，N-二甲氨甲基-10-羥喜樹堿鹽制備題目所述的化合物。
實施例15
9-(N-甲苯胺甲基)-10-羥喜樹堿的制備(20S)題目所說的化合物按實施例8中的方法制備，其中，用雙(N-甲苯胺)甲烷代替雙(二甲氨基)甲烷。
實施例16鹽酸9-環(huán)己基氨甲基-10-羥基喜樹堿鹽的制備(20S)按實施例7的方法制備題目所說的化合物，用雙(環(huán)己基氨基)甲烷代替雙(二甲氨基)甲烷。
實施例17鹽酸9-N，N-二甲基氨己基硫甲基-10-羥基喜樹堿鹽的制備。
如實施例7，所制備的鹽酸9-N，N-二甲氨甲基-10-羥基喜樹堿鹽和2-二甲氨乙硫醇的混合物于85℃在氬下加熱5小時。不溶的固體(過量的硫醇)通過過濾除去。將濾液在真空中濃縮至一種油狀殘留物用反相MPLC純化。將產(chǎn)物用5%和10%在水中的甲醇洗脫，得到題目所說的為黃色固體的化合物。
實施例18鹽酸9-N，N-二甲基氨乙氧基甲基-10-羥基喜樹堿鹽的制備方法。
如在實施例7的反應步驟第一步中制備的9-N，N-二甲基氨甲基-10-羥基喜樹堿鹽(100mg)游離堿，在含三滴3NHCl的2-二甲氨乙醇(4ml)的混合物中在80℃在氬下加熱24小時。用水(5ml)和異丙醇(10ml)處理半固體反應混合物，攪拌過濾以得到題目所說的化合物。
實施例199-N，N-二甲基氨乙基氨甲基-10-羥基喜樹堿二鹽酸鹽的制備(20S)。
按實施例8的方法制備的(20S)乙酸9-N，N-二甲基氨乙基氨甲基-10-羥基喜樹堿鹽，用雙(二甲氨基乙基氨基)甲烷代替雙(二甲氨基)甲烷。獲得的乙酸鹽用水(10ml)和含3N HCl的(3ml)異丙醇處理。收集沉淀物固體，用異丙醇沖洗并干燥得到題目所說的化合物。
實施例20乙酸9-N，N-二甲基氨甲基-10-羥基喜樹堿鹽的制備(20R.S)除起始物是按Wani.等人，J.M.Chem，23，554(1980)的方法制備的外消旋10-羥喜樹堿外，按實施例8中的描述制備題目所說的化合物。外消旋的10-羥喜樹堿也可以從10-羥喜樹堿按下列方法制備(20S)a)10-羥-20-氯-20-去-10-羥喜樹堿的制備。
在室溫下將7.8g的10-羥喜樹堿懸浮在780ml二氯甲烷中加入16ml的吡啶，然后加22ml的亞硫酰氯。在氮的氣氛下攪拌混合物。固體迅速溶解得到澄清的，鮮黃色溶液，在經(jīng)15小時后，該溶液轉(zhuǎn)成棕色。將溶液冷卻到0℃并仔細加入4N含水的鹽酸以得到一深紅色漿液。在2.5小時中加熱到室溫，通過離心收集固體產(chǎn)物，用水洗滌并空氣干燥，得6.57g的黃色固體，M.P.215-218(dec)。通過從反應母液中分離沉淀得到1.2g第二批產(chǎn)品。
b)10-羥-20-去-羥喜樹堿的制備。
從上述反應(a)得到的6.03g的產(chǎn)物與5.15g的活性鋅粉懸浮在300ml的冰乙酸中。在室溫下用力攪拌所得的稠懸浮液。約24小時后，加入6ml 4N含水鹽酸，攪拌繼續(xù)幾小時。用1200ml 1∶1(V/V)的甲醇∶二氯代甲烷稀釋桔黃色漿液。以得到一透明的棕黃色的帶一些懸浮的鋅顆粒的溶液。溶液通過Celite過濾并在真空下濃縮以得到深棕固體。用水完全洗滌該固體產(chǎn)物，通過過濾分離并空氣干燥到恒重5.36g M.P.292℃(dec)。
c)10-羥基喜樹堿的制備(20R，S)將上述過程(b)中得到的2.51g產(chǎn)物溶解在25ml的N，N-二甲基甲酰胺中。加入1.6ml40%水溶液二甲胺以得到一很黑的溶液。邊將空氣通入使溶液鼓泡邊在環(huán)境溫度下攪拌混合物。5.5小時后，該反應物用75ml的水稀釋以得到一黃褐色沉淀。通過離心收集固體產(chǎn)物，用水沖洗并空氣干燥到恒重1.97g。此物質(zhì)被用來按實施例8中描述的方法來制備該題目的外消旋化合物。
實施例219-N，N-二甲基氨甲基-10-羥基喜樹堿二鹽酸鹽的制備(20S)。
將實施例8中所制備的乙酸9-N，N-二甲基氨甲基-10-羥基喜樹堿鹽(0.389克溶解在0.4N的鹽酸(6ml)中，冷凍干燥并在高真空下泵40小時以產(chǎn)生的題目所說的化合物。
實施例22鹽酸9-N，N-二甲氨甲基-10-羥基喜樹堿鹽的再結(jié)晶(20S)。
用1000ml的去離子水將101克的題目所說的鹽酸鹽化合物(含84.0g的游離堿)通過攪拌在環(huán)境溫度下溶解。所得的稀漿液通過Celite的墊過濾。用500ml水沖洗濾餅，并合并透明溶液該溶液在較低的壓力下通過蒸餾濃縮至約1/2體積。得到一種稠的、黃漿液。加入3000ml丙酮中時攪拌將料漿逐漸稀釋。淡黃色懸浮液在環(huán)境溫度下共攪拌16小時。通過過濾收集固體產(chǎn)物并在真空下干燥得到一恒重為86.8g的產(chǎn)物(91%的產(chǎn)率，校正為游離堿含量)M.P.229-230℃。
實施例23(20S)9-N，N-二甲氨甲基-10-羥基喜樹堿乙酸鹽的再結(jié)晶。
用1240ml的去離子水在室溫下將124克的題目所說的化合物(含90克游離堿)混合攪拌。所得的稀漿液通過Celite過濾。用水沖洗滌濾餅后，合并的含水層濃縮到1/2體積并然后用1860ml(15體積V/W)的正丙醇稀釋。在分次另外加入3720ml(30體積V/W)的正丙醇共沸時，溶液通過真空蒸餾濃縮。繼續(xù)蒸餾直到最后體積為約1860ml(15體積V/W)。此懸浮液在環(huán)境溫度下攪拌數(shù)小時到完全結(jié)晶。收集固體產(chǎn)物并干燥到恒重。得到113g的產(chǎn)物(92%的回收率，校定為游離堿的含量)M.P.229-230℃。
權利要求
1.一種純化喜樹堿或11-C1-6烷氧基喜樹堿的方法，包括第一步，使一種含喜樹堿或11-C1-6烷氧基喜樹堿及其雜質(zhì)的混合物與一種溶劑接觸，其中所說的溶劑能夠從所述的混合物中分離出所述喜樹堿和11-C1-6烷氧基喜樹堿除外的生物堿，及其阻滯所述的喜樹堿或11-C1-6烷氧基喜樹堿氫化成為其各自的1，2，6，7-四氫化類似物的雜質(zhì)；和溶解至少部分所述的喜樹堿或11-C1-6烷氧喜樹堿，或所述的雜質(zhì)，或兩者；和第二步，從中分離所述的喜樹堿或11-C1-6烷氧喜樹堿。
2.權利要求1的方法，其中在第二步中分離的喜樹堿或11-C1-6烷氧喜樹堿是基本不含能阻滯喜樹堿或11-C1-6烷氧喜樹堿氫化成為其各自的1，2，6，7-四氫化類似物的雜質(zhì)。
3.權利要求1的方法，其中，所說的溶劑是N，N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、乙酸、三氟乙酸、二甲亞砜，一種乙酸和二甲亞砜的混合物，一種乙醇和二甲亞砜的混合物，或一種乙酸和鹽酸的混合物。
4.權利要求1的方法，其中在第一步中使用的是天然喜樹堿。
5.權利要求4的方法，其中所述的喜樹堿已由Nothapodytes foedia生產(chǎn)的，并且在第一步中使用的溶劑是乙酸。
6.權利要求5的方法，其中所述喜樹堿在乙酸中純化之后，進一步至少部分溶解在N，N-二甲基甲酰胺中，并從中分離。
7.權利要求5的方法，其中加入一種吸收雜質(zhì)的物質(zhì)。
8.權利要求7的方法，其中所述為吸收雜質(zhì)而加入的物質(zhì)是脫色炭。
9.權利要求4的方法，其中所述的喜樹堿已由Camptotheca accuminate樹生產(chǎn)，在第一步中使用的溶劑是N，N-二甲基甲酰胺。
10.一種氫化喜樹堿或11-C1-6烷氧基喜樹堿以相應地產(chǎn)生1，2，6，7-四氫喜樹堿或相應的11-C1-6烷氧基-1，2，6，7-四氫喜樹堿的方法，包括在有氫化催化劑緩和劑存在的情況下，用氫氣和氫化催化劑接觸喜樹堿或11-C1-6烷氧基喜樹堿，其中所述的緩和劑選自氫化催化劑毒物。
11.權利要求10的方法，其中所說的氫化催化劑緩和劑是一種硫化合物。
12.權利要求11的方法，其中所說的氫化催化劑緩和劑是二甲亞砜。
13.權利要求10的方法，其中所述氫化催化劑是貴金屬。
14.權利要求13的方法，其中所述氫化催化劑是鉑。
15.權利要求14的方法，其中所述鉑載于碳或氧化鋁上。
16.權利要求10的方法，其中所述的氫化是在氫氣的超大氣壓下進行。
17.權利要求16的方法，其中所述的壓力選用大于約35psi的壓力。
18.權利要求10的方法，其中使用一種其中所述的四氫喜樹堿或11-C1-6烷氧基四氫喜樹堿可溶的液體反應介質(zhì)。
19.權利要求18的方法，其中所述的液體反應介質(zhì)含有乙酸。
20.一種氫化喜樹堿或11-C1-6烷氧喜樹堿以分別地產(chǎn)生1，2，6，7-四氫化喜樹堿或相應的11-C1-6烷氧-1，2，6，7-四氫化喜樹堿的方法，包括在氫化催化劑緩和劑存在的條件下，用氫氣和氫化催化劑接觸喜樹堿或11-C1-6烷氧基喜樹堿的步驟，其中所述喜樹堿或11-烷氧基喜樹堿基本不含防礙氫化作用的雜質(zhì)，其中所述的緩和劑選自氫化催化劑毒物。
21.一種11-C1-6烷氧基-1，2，6，7-四氫化喜樹堿化合物。
22.一種將1，2，6，7-四氫喜樹堿或11-C1-6烷氧基-1，2，6，7-四氫化喜樹堿氧化以分別產(chǎn)生10-羥喜樹堿或相應的10-羥-11-C16烷氧基喜樹堿的方法，包括有在液體反應介質(zhì)中用一種氧化劑接觸所述的四氫化喜樹堿或11-烷氧基四氫化喜樹堿的步驟，其中(a)所述液體反應介質(zhì)含一種選擇的液體以便在反應期間至少形成10-羥喜樹堿或10-羥-11-烷氧喜樹堿產(chǎn)物部分沉淀，但當用四氫化喜樹堿為起始物和不使用下述氧化劑時，作為液體反應介質(zhì)的該液體不含甲醇;和/或(b)所述氧化劑為過硫酸鉀，亞碘酰苯、亞磺酰苯的一種酯、高碘酸鈉、高碘酸鉀。
23.權利要求22的方法，其中，當用四氫化喜樹堿為起始物并且不使用氧化劑時，使用的作為所述液體反應介質(zhì)的液體不單獨使用任何乙醇、氯仿苯、二氯甲烷、二噁烷或水。
24.權利要求22的方法，其中所述產(chǎn)品在所述液體反應介質(zhì)(a)中基本不溶。
25.權利要求22的方法，其中所述液體反應介質(zhì)(a)含有一種水和一種有機溶劑的混合物。
26.權利要求25的方法，其中所述有機溶劑為乙酸、丙酮、N，N-二甲基甲酰胺或一種低分子量醇。
27.權利要求22的方法，其中所述液體反應介質(zhì)是液體反應介質(zhì)(a)和所述氧化劑是一種氧化劑(b)。
28.權利要求22的方法，其中所述氧化劑是一種亞碘酰苯的酯。
29.權利要求28的方法，其中所述的酯是一種有分子式為PhI(OR7)2的酯，Rh是苯基，在每一個-OR7基中的R7可以是同樣的或不同的并是氫，-C(O)-R8或-SO2R9;R8和R9是不被取代或被取代的羧基;在所述-OR7基中至少一個R7不是氫。
30.權利要求29的方法，其中所述酯是雙三氟乙酸碘代苯酯，乙酸碘代苯酯或羥(甲苯磺酰氧)碘代苯。
31.一種氧化1，2，6，7-四氫化喜樹堿或11-C1-6烷氧基-1，2，6，7-四氫化喜樹堿以分別產(chǎn)生10-羥喜樹堿或相應的10-羥-11-C1-6烷氧基喜樹堿的方法，包括用一種在一種液體反應介質(zhì)中的氧化劑接觸所述四氫化喜樹堿或11-烷氧四氫化喜樹堿的步驟，其中所述四氫化喜樹堿或11-烷氧四氫化喜樹堿是按權利要求20的方法獲得的，其中(a)所述液體反應介質(zhì)含有一種選擇的液體以便在所述反應中形成的至少部分的10-羥喜樹堿或10-羥-11-烷氧基喜樹堿沉淀，但當使用四氫化喜樹堿為起始物和不使用下述氧化劑(b)時，作為所述液體反應介質(zhì)使用的液體不單獨由甲醇組成;和/或(b)所述氧化劑是過硫酸鉀、亞碘酰苯、一種亞碘酰苯酯、高碘酸鈉、高碘酸鉀。
32.一種10-羥-11-C1-6烷氧基喜樹堿。
33.一種制備分子式(Ⅰb)化合物或其藥物學可接受的鹽的方法，所述化合物的分子式有下列結(jié)構(gòu)
其中R是氫或C1-6烷氧基R1是-O-R2;-S-R3;或-N-(R4)(R5);R2，R3，R4和R5可相同或不同，為氫;C1-6烷基;C3-6羥烷基;C1-6二烷氨基-C2-6烷基;C1-6烷氨基-C2-6-烷基;C2-6氨烷基;或-3-7元的非取代或取代的碳環(huán);或當R1是-N-(R4)(R5)時，R4和R5可以與它們所連的氮原子一起形成一個可含其它雜原子的取代或非取代雜環(huán);和R6是氫;-C1-6非取代或取代的脂族基;或者是能與連結(jié)于其上的氧原子相結(jié)合形成可藥用的酯基團的一種取代基;包括(ⅰ)將10-羥基喜樹堿或10-羥基11-C1-6烷氧基喜樹堿與式(Ⅱ)化合物接觸，制備R1是胺基-N-(R4)(R5)和R6是氫的式(Ⅰb)化合物或其藥用鹽，所說的式Ⅱ化合物的結(jié)構(gòu)如下其中R4和R5如對分子式(Ⅰb)的限定一樣;和(ⅱ)可選擇地，(a)通過將在步驟(ⅰ)中制備的化合物的胺基轉(zhuǎn)換成-O-R2或-S-R3制備分子式(Ⅰb)的化合物，或其藥物學可接受的鹽，其中R1是-O-R2或-S-R3;和/或(b)通過將在步驟(ⅰ)中制備的化合物的10-位羥基轉(zhuǎn)換成-OR6基，R6與上述分子式(Ⅰb)的限定相同，(除氫以外)制備分子式(Ⅰb)的化合物或-藥物學可接受的鹽，其中R6不包括氫。
34.權利要求33的方法，其中，在步驟(ⅱ)中，通過將在步驟(ⅰ)中制備的化合物與分子式HOR2的醇加熱把胺基轉(zhuǎn)換成-O-R2，R2與權利要求33的限定相同。
35.權利要求33的方法，其中，在步驟(ⅱ)中，通過加熱在步驟(ⅰ)中制備的化合物與分子式HS-R3的硫醇把胺基-N(R4)(R5)轉(zhuǎn)換成-S-R3，其中R3與權利要求33的限定相同。
36.權利要求33的方法，在所述分子式(Ⅰb)的化合物中的R1是二甲氨基、N-嗎啉代、N-甲基哌嗪基，(4′-哌啶)N-哌啶基、環(huán)己氨基、N-甲基苯胺基、乙氧基、環(huán)丙氨基、N，N-二甲氨乙氧基、N，N-二甲氨乙基硫基，N，N-二甲氨乙氨基、或甲氨基。
37.權利要求36的方法，其中R1是二甲氨基或N-嗎啉代。
38.權利要求33的方法，其中步驟(ⅰ)是在含乙腈或一低分子量醇的液體介質(zhì)中完成的。
39.權利要求38的方法，其中所述液體介質(zhì)含有低分子量醇和隋性氯化烴。
40.權利要求39的方法，其中所述液體介質(zhì)含有一選自C1-C4的低分子量醇和二氯甲烷。
41.一種制備分子式(Ⅰb)的化合物，或其藥物學可接受的鹽的方法，所述的分子式(Ⅰb)的化合物有下列結(jié)構(gòu)式
其中R是氫或C1-6烷氧基R1是-O-R2;-S-R3;或-N-(R4)(R5);R2，R3，R4和R5可相同或不同，為氫;C1-6烷基;C3-6羥烷基;C1-6二烷氨基-C2-6烷基;C1-6烷氨基-C2-6-烷基;C2-6氨烷基;或-3-7元的非取代或取代的碳環(huán);或，當R1是-N-(R4)(R5)時，R4和R5可與它們所連的氮原子一起形成一個可含其它雜原子的取代或非取代雜環(huán);和R6是氫;-C1-6非取代或取代的脂族基;或者是能與連結(jié)于其上的氧原子相結(jié)合形成可藥用的酯基團的一種取代基;包括(ⅰ)通過用分子式(Ⅱ)的化合物接觸10-羥基喜樹堿與10-羥-11-C1-6烷氧基喜樹堿，制備所述的分子式(Ⅰb)的化合物或其藥物學可接受的鹽的方法，其中R1是胺基-N-(R4)(R5)與R6是氫，所述分子式(Ⅱ)化合物有下列結(jié)構(gòu)式其中R4和R5與對式(Ⅰb)的限定一樣;和(ⅱ)可選擇地，(a)通過將把在步驟(ⅰ)中制備的化合物的胺基轉(zhuǎn)換成-O-R2或-S-R3制備分子式(Ⅰb)的化合物，或其藥物學可接受的鹽，其中R1是-O-R2或-S-R3;和/或(b)通過將把在步驟(ⅰ)中制備的化合物的10-位羥基轉(zhuǎn)換成-OR6，而制備分子式(Ⅰb)的化合物或其藥物學可接受的鹽，其中R6不包括氫，R6與上述對分子式(Ⅰb)的限定一樣。
42.一種分子式(Ⅰ)的化合物，或其藥物學可接受鹽的純化和分離方法，其中，所述分子式(Ⅰ)的化合物有下列結(jié)構(gòu)式
其中R是氫或C1-6烷氧基R1是-O-R2;-S-R3;或-N-(R4)(R5);R2，R3，R4和R5可相同或不同，為氫;C1-6烷基;C2-6羥烷基;C1-6二烷氨基-C2-6烷基;C1-6烷氨基-C2-6-烷基;C2-6氨烷基;或-3-7元的非取代或取代的碳環(huán);或當R1為-N-(R4)(R5)時，R4和R5可以與它們所在的氮原子一起形成可含其它雜原子的取代或非取代雜環(huán)，包括步驟包括步驟(a)以某一用量加入第一種液體，以便至少部分所述化合物溶解以形成或者溶液或者漿液，該液體是所述化合物的溶劑。(b)在(a)步驟后，在(a)步驟中得到的溶液或漿液中加入第二種液體，該液體促進溶解于其中的化合物的再結(jié)晶，并結(jié)晶所述化合物;并(c)通過過濾收集分子式(Ⅰ)的化合物或其鹽。
43.權利要求42的方法，其中步驟(a)到(c)是在一基本避免所述分子式(Ⅰ)的化合物或其鹽不穩(wěn)定的溫度下完成的。
44.權利要求42的方法，其中，在步驟(a)中，使用低于約40℃的溫度溶解。
45.權利要求42的方法，其中，在步驟(a)中，所述第一種液體使用的量是達到基本完全溶解的量。
46.權利要求42的方法，其中，在步驟(a)中，所述第一種液體包括水。
47.權利要求42的方法，其中，在步驟(b)中，所述第二種液體含有一種丙酮、乙腈、一低醇或四氫嘻呋喃的液體。
48.權利要求42的方法，其中，在步驟(a)中形成的所述溶液或漿液在再結(jié)晶前先濃縮。
49.權利要求42的方法，其中，在步驟(a)后，進行一過濾步驟以除去不溶的物質(zhì)。
50.一種分子式(Ⅰb)的化合物，或其藥物學可接受的鹽的純化和分離方法，其中所述化合物與權利要求41的方法限定的一樣，并由權利要求41的方法獲得，包括下列步驟(a)以一個使所述化合物的至少部分溶解以形成或者溶液或者漿液的量加入第一種液體，該液體是所述化合物的一種溶劑。(b)在(a)步驟后，在(a)步驟得到的溶液或漿液中加入第二種液體，該液體促進溶解于其中的化合物的再結(jié)晶，并結(jié)晶所述化合物;和(c)通過離心收集分子式(Ⅰb)的化合物或其鹽。
51.一種通過權利要求42的方法純化和分離的化合物。
52.分子式(Ⅰ)的化合物或其藥物學可接受的鹽，其中，所述分子式(Ⅰ)有下列結(jié)構(gòu)式
其中R是氫或C1-6烷氧基R1是-O-R2;-S-R3;或-N-(R4)(R5);R2，R3，R4和R5，可相同或不同，為氫;C1-6烷基;C2-6羥烷基;C1-6二烷氨基-C2-6烷基;C1-6烷氨基-C2-6-烷基;C2-6氨烷基;或-3-7元的非取代或取代的碳環(huán);或當R1是-N-(R4)(R5)時，R4和R5可以與和它們結(jié)合的氮原子結(jié)合在一起，以形成一個可含其它雜原子的取代或非取代雜環(huán);和R7是氫;-C1-6非取代或取代的脂族基;或者是能與連結(jié)于其上的氧原子相結(jié)合形成可藥用的酯基團的一種取代基;
53.一種藥物組合物，含有權利要求51的化合物，其中R是氫，和一種惰性的藥物學可接受的載體或稀釋劑。
54.一種藥物組合物，含有權利要求51的化合物，其中R是C1-6烷氧基，和一種惰性的藥物學可接受的載體或稀釋劑。
55.一種藥物組合物，含有權利要求52的化合物，和一種惰性的藥物學可接受的載體和稀釋劑。
56.一種抑制瘤細胞生長的方法，含有給患有所述瘤細胞的宿主動物服用一定量的能有效產(chǎn)生所述抑制的權利要求51的化合的步驟。
全文摘要
一種制備水溶的喜樹堿類似物的方法，包括其中間產(chǎn)物的制備方法，及通過所述方法，制備的化合物。制備的水溶的喜樹堿類似物可用于抑制對這種類似物敏感的瘤細胞的生長。
文檔編號C07D491/22GK1062731SQ9111065
公開日1992年7月15日 申請日期1991年9月28日 優(yōu)先權日1990年9月28日
發(fā)明者J·M·福圖納克, J·L·伍德, A·R·馬斯特羅科拉, M·梅林杰, P·L·伯克 申請人:史密絲克萊恩比徹姆公司