專利名稱：4-取代的6，9-雙(取代的氨基)苯并[g]異喹啉-5，10-二酮的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及4-羥基-，烷氧基-或芳烷氧基-6，9-雙(取代的氨基)苯并[g]異喹啉-5，10-二酮類化合物，特別是涉及具有本身為(氨烷基)氨基取代基的6，9-取代基的4-羥基衍生物。這些化合物在體內(nèi)外均顯示了抗腫瘤的活性。
一些1，4-雙((氨基烷基)氨基)蒽-9，10-二酮類化合物經(jīng)報告在臨床試驗上具有抗腫瘤的活性。特別有利的是雙羥胺蒽醌(ametantrone)，1，4-雙｛[2-(2-羥基乙基氨基)乙基]氨基｝蒽-9，10-二酮及米他蒽酚酮(mitoxanthrone)，5，8-二羥基-1，4-雙｛[2-(2-羥基乙基氨基)乙基]氨基)蒽-9，10-二酮[Zee-Cheng等人，J.Med.Chem.21，291-4(1978);Cheng等人，“醫(yī)藥化學的進展(Progress in Medicinal Chemistry)”，Ellis，G.P.及West，G.B.編著;ElsevierAmsterdam，1983 20，83及其中所引述的文獻]。米他蒽酚酮為廣譜性腫瘤消除劑，其活性與蒽環(huán)類抗生素阿霉素(doxorubicin)類似。臨床試驗顯示米他蒽酚酮在治療晚期乳癌，急性白血癌及淋巴瘤[Legha，今日醫(yī)藥(Drugs of Today)，20，629(1984)]方面特別具有所期望的活性。雖然在動物研究中顯示與阿霉素比較，米他蒽酚酮具有較低的心臟中毒性，但是使用米他蒽酚酮亦會產(chǎn)生一些臨床上的心臟中毒性，其中大部分是那些原先已用阿霉素治療的病人(R.Stuart Harris等人，Lancet，219.(1984)及其中所引用的文獻)。
在動物身上，雙羥胺蒽醌已經(jīng)被報告較米他蒽酚酮降低10倍的效果及心臟中毒性。因為僅于兩種藥物以腹腔內(nèi)注射途徑將等效抗腫瘤劑量施用于無腫瘤的大鼠后，使用米他蒽酚酮，才會觀察到一種遲發(fā)性的毒性，而此種現(xiàn)象建議，在米他蒽酚酮中5，8-二羥基取代反應的存在與遲發(fā)性死亡相關(Corbett等人，Cancer Chemother. Pharmacol.，6，161(1981))。
另外，米他蒽酚酮及雙羥胺蒽醌兩者皆具有相當?shù)墓撬枰种贫拘?，且兩種化合物對于藉由糖蛋白P的過度表現(xiàn)來抵抗阿霉素的細胞組織型態(tài)發(fā)展性抗性，顯示具有交叉抵抗性。此種抵抗力被稱為多重藥物抗藥性，涉及一些抗腫瘤性抗生素，特別是胺苯吖啶(amsacrine)及鬼臼毒素(podophyllotoxinic)的衍生物，并且，這是上述的抗生素治療固體腫瘤時治療失敗的最主要原因之一。
因此，尋找新的蒽二酮抗腫瘤性抗生素是有必要的，其應較米他蒽酚酮的治療指數(shù)為高，且同時對抑制或延遲這些對化學治療無效的固體腫瘤(如肺癌，乳癌，及大腸腫瘤)的生長具有效果，并能對抗腫瘤組織型態(tài)發(fā)展性多重藥物抗藥性。
在尋找更安全、有效的蒽二酮類似物過程中，對在蒽-9，10-二酮核心不同位置上具有羥基取代基及/或(氨基烷基)氨基支鍵已加以研究[Cheng等人，未來的藥物(Drug of the Future，8，229，(1983)]，卻沒有值得注意的改進。
疊氮及重氮蒽-9，10-二酮，如6，9-雙(乙氧基羰基氨基)苯并[g]喹唑啉-5，10-二酮(1)，6，9-雙(乙氧基羰基氨基)苯并[g]異喹啉-5，10-二酮(2)，6，9-雙(乙氧基羰基氨基)苯并[g]喹唑啉-5，10-二酮(3)，由Potts等人所披露(Synthesis，1983，31)。這些化合物被報告與抗腫瘤的1，4-雙[(氨基烷基)氨基]蒽-9，10-二酮相關;然而，上述化合物并未被報告具有抗腫瘤活性。與米他蒽酚酮有關的6，9-二羥基苯并[g]異喹啉-5，10-二酮的1-[(氨基烷基)氨基]衍生物(4)已被披露作為DNA內(nèi)嵌劑，但是他們完全缺乏任何體外或體內(nèi)抗腫瘤活性(Croisy-Delcey等人，Eur.J.Med.Chem.，23，(1988)，101-106)。
式5a-d(見表Ⅰ)的6，9-雙(乙氧基羰基氨基)苯并[g]喹啉-5，10-二酮披露于J.Med.Chem.(1985)，28，1124-26中，其中他們被稱為5，8-雙[(氨基烷基)氨基]-1-疊氮蒽二酮。
如在后述的表Ⅱ中所報告的，現(xiàn)有技術化合物(5)與相關的碳環(huán)性類似物(6)比較，很明顯地具有較低的活性。
事實上，如表Ⅱ中所報告的，化合物5a及5b與類似物6a及6b相比具有較低的細胞毒性。進而，化合物5a在體外幾乎沒有細胞毒性，在體內(nèi)則無活性，且其與碳環(huán)性類似物6a相比既有較少的活性且具有較差的效力。
雖然一雜原子的介入為在醫(yī)藥化學上的普通過程，但是其效果則必須依個別情況加以評估。
在此蒽二酮的疊氮類似物的特別情況中，現(xiàn)有技術的指導很明顯表示一氮原子介入蒽二酮的骨架中對抗腫瘤性活性而言具有損害性。事實上經(jīng)疊氮取代的蒽二酮與相關的蒽二酮相比具有較低的細胞毒性且在體內(nèi)無活性。
因此本領域技術人員，將不必考慮將雜原子加入蒽二酮的骨架上以作為得到較有效抗腫瘤劑的可能方式。
已知的在眾多類似物中發(fā)現(xiàn)抗腫瘤劑米他蒽酚酮的篩選(J.Med.Chem.，21，291-4(1978))使用老鼠白血癌P388作為實驗模型，該模型在人類至少可以針對此類抗腫瘤性抗生素的抗腫瘤效果具有預測性。許多其它臨床上具有活性的抗腫瘤性抗生素對老鼠白血癌P388及L1210具有活性，如間-雙羥胺蒽醌及阿霉素。
我們已發(fā)現(xiàn)本發(fā)明4-羥基或4-烷氧基-6，9-雙[(氨基烷基)氨基]苯并[g]異喹啉-5，10-二酮化合物具有作為抗腫瘤劑的活性。
表Ⅰ現(xiàn)有技術化合物
表Ⅱ已知化合物的抗腫瘤活性(來自J.Med.Chem.(1985)，28(1)，1124-1126)在體外: 于L1210 在體內(nèi) T/C上的ID50(毫克/千克)(微克/毫升)5a 0.16 50 1305b 100 有毒性5c 1.76a 0.08 30 150本發(fā)明的化合物具有下式[Ⅰ] 其中P為氫，C1-C10烷基，C7-C10苯烷基;
R為C1-C10烷基或C7-C10苯烷基;具有一或兩種選自包括OR1及-NR2R3的取代基的C2-C10烷基;一種式-(CH2)n-O-(CH2)mH的二烷基醚或一種式-(CH2)n-NR4-(CH2)mH的二烷基胺，其中m+n等于-由2到10的整數(shù)，且可為未取代或由-或兩個羥基(OH)或-NR2R3基團所取代;
R1選自氫，C1-C6烷基，C7-C10苯烷基，未經(jīng)取代或被-NR2R3取代的C2-C6烷基;
R2及R3可為相同或不同的基團，且選自氫，C1-C10烷基，C7-C10苯烷基，苯基，被一或兩個羥基(OH)取代的C2-C10烷基;或者，R2或R3其中之一為H且另一個為C(CH3)(CH2OH)2;或R2及R3與一氮原子形成一種撐乙基亞胺(ethyleneimine)環(huán)或一個五元-或六元-芳香性或非芳香性雜環(huán)，其可以包含另一個雜原子，如硫，氧或氮;
R4選自氫，C1-C10烷基，C2-C10羥基烷基，C7-C10芳烷基;
以游離堿或與醫(yī)藥上可接受的酸形成的鹽型式存在。
本發(fā)明亦涉及式Ⅰ化合物類的互變異構體形式，單一鏡像異構體或立體異構體及其混合物。
本發(fā)明亦涉及式Ⅰ化合物與醫(yī)藥上及獸醫(yī)用途方面可接受的酸所形成的非毒性鹽，這類鹽由無機酸，如由鹽酸，氫溴酸，硫酸，磷酸，焦磷酸的加入所得到和/或由有機酸，如乙酸，丙酸，檸檬酸，苯甲酸，乳酸，馬來酸，富馬酸，丁二酸，酒石酸，戊二酸，天門冬酸，葡萄糖酸，抗壞血酸及類似物的加入所得到。
C1-C10烷基基團的優(yōu)選實例為甲基，乙基，正丙基，仲丙基，正丁基，仲丁基，叔丁基，正戊基，正已基。C7-C10苯烷基的優(yōu)選實例為芐基及4-甲氧基芐基。當式Ⅰ的化合物中R為一式(CH2)n-O-(CH2)m-H的二烷基醚或式(CH2)n-NR4-(CH2)m-H的二烷基胺并選擇性地被一或兩個羥基或-NR2R3基團取代時，在所述的氧原子和/或-NR4-及-NR2R3基團之間優(yōu)選插入至少兩個碳原子。
當在式Ⅰ的化合物中，-NR2R3取代基為5-6元、可含有另一個如硫，氧及氮的雜原子的芳香性或非芳香性雜環(huán)時，該雜環(huán)優(yōu)選的實例為1-咪唑基，1-吡咯基，1-四氫吡咯基，1-吡唑基，4-嗎啉基，1-哌啶基，1-哌嗪基，1-(4-甲基)-哌嗪基，1-(4-芐基)哌嗪基。
R為C2-C10烷基的式Ⅰ化合物是特別優(yōu)選的，其中所述的C2-C10烷基選自下述一組基團中的一種式-(CH2)p-NH2的殘基，其中p為2，3或4;
式-(CH2)p-NH2R3的殘基，其中p與上述定義相同且R2及R3為-C1-C6烷基，或與氮原子一起形成一雜環(huán)，該雜環(huán)選自下述一組基團中的一種1-撐乙基亞胺，1-吡咯烷，4-嗎啉，1-哌嗪，4-甲基-1-哌嗪，4-芐基-1-哌嗪，1-哌啶;
式-(CH2)p及-NR2R3的殘基，其中p與上述定義相同且R2為氫，R3為-C1-C6烷基;
式-(CH2)p-NH-(CH2)q-OH的殘基，其中p及q分別為獨立選自2，3及4的整數(shù);
式-(CH2)p-OH的殘基，其中p與上述定義相同;
式-(CH2)p-O-(CH2)q-OH的殘基，其中p及q與上述定義相同。
本發(fā)明優(yōu)選的化合物的具體實例如下4-羥基-6，9-雙｛[2-(氨基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;
4-甲氧基-6，9-雙｛[2-(氨基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;
4-羥基-6，9-雙｛[2-(4'-嗎啉基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;
4-羥基-6，9-雙｛[2-(二甲基氨基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;
4-甲氧基-6，9-雙｛[2-(二甲基胺基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;
4-芐氧基-6，9-雙｛[2-(二甲基氨基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;
4-羥基-6，9-雙｛[2-(二乙基氨基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;
4-羥基-6，9-雙｛[2-(1'-吡咯啶基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;
4-羥基-6，9-雙｛[4-(氨基)丁基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;
4-羥基-6，9-雙｛[3-(氨基)丙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;
4-羥基-6，9-雙｛[2-[(2-羥基乙基)氨基]乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;
4-羥基-6，9-雙｛[3-(二甲基氨基)丙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;
4-羥基-6，9-雙｛[2-(羥基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;
4-羥基-6，9-雙｛[2-(甲基氨基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;
4-羥基-6，9-雙｛[2-(乙基氨基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮。
本發(fā)明的生物活性的評估遵循美國國家癌癥研究中心(U.S.National Cancer Institute)所發(fā)展出的方法于體外及體內(nèi)分別進行。
本發(fā)明化合物的體外細胞毒性的活性評估，使用自惡性轉移瘤節(jié)所分離出的人類結腸腺癌的細胞系(Lovo)，以及得到可對抗多種抗腫瘤劑，如阿霉素，VP-16及醛基長春堿(vincristine)的抗藥性的亞系(subline)進行。此亞系(名為Lovo/DX)顯示阿霉素的累積降低及-蛋白質(zhì)的過度表現(xiàn)(Grandi，M.，Geroni，C.，Giuliani，F(xiàn)，C.，British J.Cancer，(1986)，54，515)。該化合物依據(jù)MTT試驗[Mosman，T.，“針對細胞生長及存活的快速比色度測量試驗應用于繁殖及細胞毒性試驗”(Rapid Colorimetric assay for cellular growth and survivalapplication to proliferation and cytotoxicity assay)，J.Immunol Methods，(1983)，65，55-63;Green，L.M.，“針對細胞活力的快速比色度測量試驗應用于細胞毒性及生長抑制性淋巴細胞活力的測定”(Rapid colorimetric assay for cell viabilityapplication to the quantitation of cytotoxic and growth inhibitory lymphokines”)，J.Imnunol.Methods，(1984)，70，257-268]進行測試并與米他蒽酚酮、雙羥胺蒽醌及阿霉素比較。這些數(shù)據(jù)被報告于實施例1的表Ⅲ中。
通常，本發(fā)明代表性化合物在Lovo細胞系中的細胞毒性與雙羥胺蒽醌及米他蒽酚酮相當，具有最高細胞毒性的(優(yōu)于米他蒽酚酮的細胞毒性)為4-羥基-6，9-雙｛[2-(氨基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮。當雙羥胺蒽醌或米他蒽酚酮在Lovo/DX細胞系中進行測試時，發(fā)現(xiàn)抗藥性指數(shù)R.I.(其定義為抵抗性細胞系的IC50與感受性細胞系的IC50之比)分別達到148及30，顯示該亞系對米他蒽酚酮及雙羥胺蒽醌確定具有已獲得的抗藥性。另一方面，當本發(fā)明的代表性化合物在相同的抗藥性細胞亞系中進行測試時，其抗藥性指數(shù)明顯低于米他蒽酚酮及雙羥胺蒽醌測試時得到的抗藥性指數(shù)。
特別是，化合物4-羥基-6，9-雙｛[2-(氨基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮在該抗藥性Lovo/DX細胞系中測試得到R.I.＝7而具有優(yōu)于米他蒽酚酮的活性(見表Ⅲ)。
這些體外試驗的數(shù)據(jù)顯示本發(fā)明的代表性化合物可有利于克服經(jīng)由腫瘤抗藥性的機制的多重藥物抗性。
體外細胞毒性評估亦于L1210老鼠白血癌細胞上進行，其中將上述細胞維持在懸浮性培養(yǎng)物中(McCoy's 5A培養(yǎng)基，其中添加10%馬血清，谷氨酸胺，青霉素及鏈霉素)并使其于37℃且在10%二氧化碳及90%空氣的潮濕環(huán)境下生長。該化合物被溶解于二甲基亞砜(DMSO)中并以合適的濃度加入懸浮的細胞中。經(jīng)過72小時連續(xù)暴露，使用Coulter計數(shù)器計算細胞的滑度并使用下列公式計算生長抑制性生長抑制性＝1-[經(jīng)過處理的細胞數(shù)/僅加入DMSO的細胞數(shù)]×100。
由生長抑制性數(shù)據(jù)可計算出ID50并報告于表Ⅳ中，且與米他蒽酚酮及現(xiàn)有技術化合物5a(見表Ⅰ化合物5a的結構)進行比較。本發(fā)明的一種代表性化合物明顯較米他蒽酚酮具有較佳的細胞毒性且較化合物5a更顯著地具有活性。
當對粘連性老鼠肉瘤細胞系S180及其亞系S180/A10進行試驗時，該亞系對阿霉素具有抗藥性并對米他蒽酚酮具有100倍的抗藥性，本發(fā)明的化合物同時在敏感性及在抗藥性細胞系上顯示出較米他蒽酚酮具有更佳的細胞毒性并且對米他蒽酚酮沒有交叉抗藥性。表Ⅴ報告了針對本發(fā)明代表性化合物，4-羥基-6，9-雙｛[2-(氨基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮的數(shù)據(jù)，當米他蒽酚酮顯示RI值為98時，其所顯示的抗藥性指數(shù)為2。
本發(fā)明的代表性化合物的體內(nèi)生物活性使用P388老鼠白血癌模式加以研究。
將P388老鼠白血癌細胞以腹膜內(nèi)(ip)或靜脈內(nèi)(iv)注射的方式注入CD2F1老鼠。處理在腫瘤移植前約24個小時開始，且藥物的劑量根據(jù)預先建立的實驗程序予以靜脈注射(P388 iv/iv)，通常是3天(P388iv/iv)的間隔。此研究于-60天的期間內(nèi)完成且每只動物死亡的日期要加以記錄。使用存活時間中間值(MST)的每組%T/C根據(jù)下式加以確定%T/C＝[(處理組的MST)/(對照組之MST)]×100。
對P388老鼠白血癥進行體內(nèi)測試時，將本發(fā)明的化合物與抗腫瘤藥劑米他蒽酚酮及阿霉素在活性與潛力兩個項目進行比較。表Ⅵ報告的數(shù)據(jù)由對本發(fā)明的代表性化合物，4-羥基-6，9-雙｛[2-(氨基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮進行的試驗獲得。
因為本發(fā)明的代表性化合物在體內(nèi)對抗老鼠P388模式，如上述，顯示出良好的結果而預測其于人類身上也具有良好的結果，在此所揭示的化合物則被期望在對抗人類白血癌及個體腫瘤上可以發(fā)揮功效。
本發(fā)明的化合物因此可作為治療性組合物的活性成分以誘發(fā)在哺乳動物身上癌癥的消退和/或減輕，其施用的劑量為每千克體重1毫克到0.4克。該化合物在治療對于疊氮蒽二酮治療具有感受性的腫瘤上具有功效，這些腫瘤包括乳癌，卵巢癌，肺癌，及白血癌。
優(yōu)選的劑量為每天每千克體重由約1毫克到約50毫克?？梢允褂玫膯挝粍┝繛樵?4小時期間對-約70千克體重的個體施用約由70毫克到約3.5克的活性化合物。該劑量可加以調(diào)整以相容于其它的治療方式，如放射治療。
該藥物組合物的形式可為錠劑，膠囊，凝膠膠囊，栓劑，低溫干燥的粉劑及靜脈注射用的溶液。
本發(fā)明由下列非限制性的實施例，及對本領域技術人員而言極為明顯的變化，予以示范說明。
實施例1體外生物性評估在人類結腸腺癌的Lovo細胞上進行的MTT試驗。
MTT試驗的進行根據(jù)Mosmann，T.，J.Immunol.Methods，(1983).65，55-63，及Green，L.M.，J.Immunol.Methods，(1984)，70，257-268。
于使用前，立即將化合物及參考性標準化合物溶解于合適的溶劑中并進而于完全的培養(yǎng)基中稀釋。人類結腸腺癌的Lovo細胞及其對阿霉素具有抗藥性的亞系(Lovo/DX)(2.5×104細胞/毫升)涂敷于96孔平皿中并在培養(yǎng)基中預先培育24個小時。經(jīng)過此時間以后，該細胞暴露于藥物中1小時，隨即加入噻唑基蘭四唑基溴溶液(MTT溶液)，且該細胞再培育4小時。移去上清液并加入150微升二甲基亞砜以穩(wěn)定甲 (formazan)結晶。該平皿以微板讀數(shù)機于570微毫米進行測量并計算50%細胞生長的抑制濃度(IC50;微克/毫升)。
其結果列于表Ⅲ中。
表Ⅲ本發(fā)明的代表性化合物在對抗Lovo及Lovo/DX細胞系方面與現(xiàn)有技術化合物比較的體外細胞毒性活性。
IC50(微克/毫升)a化合物 Lovo Lovo/DX R.I.b4-羥基-6,9- 0.1 0.7 7雙{[2-(氨基)乙基]氨基)苯并[g]異喹啉-5,10-二酮雙羥胺蒽醌 4.8 713.8 148米他蒽酚酮 0.03 0.9 30該化合物及標準化合物被溶解于無菌水中。
將所有這些化合物于培養(yǎng)基中進一步稀釋以供體外試驗a細胞生長的50%抑制濃度。
b抗藥性指數(shù)＝IC50(LOVO/DX)/IC50LOVO。
實施例2體外生物性評估L1210老鼠白血癌L1210老鼠白血癌細胞被例行性維持在懸浮性培養(yǎng)基中，其在添加10%馬血清，谷氨酰胺，青霉素及鏈霉素的MCcCoy's 5A培養(yǎng)基中，并使其于37℃且在10%二氧化碳及90%空氣的潮濕環(huán)境下生長。
為了評估體外毒性，每種化合物被溶解于二甲基亞砜中并加入1毫升L1210細胞(105細胞/管)，以達到最終濃度為0.01，0.1及1微克藥物/毫升的培養(yǎng)液。經(jīng)過72小時持續(xù)性暴露于該藥物之后，以Coulter計數(shù)器決定細胞的濃度。針對每種藥物使用下列公式計算生長抑制性;
生長抑制性%＝1-[經(jīng)處理的細胞數(shù)/僅加入DMSO的細胞數(shù)]×100。
該生長抑制性數(shù)據(jù)隨即被用于計算IC50值(以對照組的50%計算出抑制細胞生長的藥物濃度)。
結果報告于表Ⅳ中。
表Ⅳ本發(fā)明的代表性化合物在對抗L1210白血癥方面與現(xiàn)有技術化合物5a及米他蒽酚酮比較的體外細胞毒性活性化合物 IC50(微克/毫升)4-羥基-6,9- 0.0015雙{[2-(氨基)乙基]氨基}苯并[g]異喹啉-5,10-二酮米他蒽酚酮 0.0055a(a)0.155(a)現(xiàn)有技術化合物為6，9-雙｛[2-(二甲基氨基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;A.P.Krapcho等人，J.Med.Chem.(1985)，28，1124-1126。
實施例3體外生物性評估S180及S180/A10細胞系對S180(粘連性老鼠肉瘤細胞)及其亞系S180/A10(S180的亞，其經(jīng)由將細胞持續(xù)性暴露于高濃度的藥物中而得到對阿霉素的抗藥性，該系對米他蒽酚酮約具有100倍的抗藥性)的實驗依據(jù)所述針對L1210的相同實驗步驟進行。其結果示于表Ⅴ。
表Ⅴ本發(fā)明的代表性化合物在對抗S180及S180/A10方面與米他蒽酚酮比較的體外細胞毒性活性IC50(微克/毫升)化合物 S180 S180/A10 RF*4-羥基-6,9- 0.007 0.014 2
雙{[2-(氨基)乙基]氨基}苯并[g]異喹啉-5,10-二酮米他蒽酚酮 0.017 1.6 98*RF=抗藥性因子(IC50S180/A10/IC50S180)實施例4體內(nèi)生物性研究P388老鼠白血癥(iv/iv，d1，4，7)P388老鼠白血癌細胞藉由106個細胞連續(xù)在CD2F1老鼠進行腹腔內(nèi)注射(i.p.)而得以在體內(nèi)維持。為了實驗的目的，老鼠以106個P388細胞進行靜脈內(nèi)(i.v)接種并于24小時后開始治療。藥物靜脈注射的劑量于第1天，第4天及第7天施用。對老鼠則每天觀察毒性征兆及存活率。在60天研究期間內(nèi)記錄每只動物死亡或被犧牲(sacrificed)的日期。計算每一經(jīng)處理組的存活時間中間值(MST)并使用下列公式確定T/C值%T/C＝[(經(jīng)處理組的MST)/(對照組的MST)]×100
表Ⅵ本發(fā)明的代表性化合物對抗P388老鼠白血病的抗腫瘤活性化合物 劑量 T/C% 毒性毫克/千克4-羥基-6,9-雙{[2-(氨基)乙基]氨基}苯并[g]異喹啉 0.6 158 0/8-5,10-二酮 0.8 179 0/81.3 216 0/82 169 8/8米他蒽酚酮 2 172 0/583 168 12/924 129 28/32阿霉素 4.6 162 0/86 175,178 0/157.5 181,211 0/169 222 2/8實施例5 合成制備本發(fā)明化合物的最佳反應路線如下所示

該方法的起始原料為二甲基-5-甲氧基-吡啶二甲酸鹽或3-甲氧基-4，5-二甲氧甲?；?吡啶Ⅱ[Korytuyk，N.及Angelino，N.J.，J.Med.Chem.，(1977)，20，745]。根據(jù)反應(a)，化合物Ⅱ藉由在一堿性羥基鹽如氫氧化鈉的存在下，于水，乙醇，甲醇或其混合物中可以進行的堿性水解反應被水解成相應的5-甲氧基-吡啶二甲酸Ⅲ。該反應于95℃下進行1小時(反應a)。
化合物Ⅲ隨即被轉變成相應的酐(Ⅳ)3-甲氧基-呋喃甲酰-[4，5-d]吡啶-4，6-二酮或5-甲氧基吡啶二甲酸酐，其中回流溫度下在乙酸酐加熱30分鐘至3個小時，優(yōu)選為30分鐘(反應b)。
在THF的仲丁基噻姆(thium)存在下將酐Ⅳ用1，4-二氟苯在-78℃加以濃縮，得到3-甲氧基-4-(2′，5′-二氟苯甲?；?-吡啶-5-羧酸(Ⅴ)(反應c)。該酮酸(Ⅴ)可接著在發(fā)煙硫酸[30%SO3]中于130-135℃加熱30分鐘進行環(huán)化作用而得到4-羥基-6，9-二氟苯并[g]異喹啉-5，10-二酮。該苯并[g]異喹啉-5，10-二酮(Ⅵ)可隨即被轉變成通式為Ⅶ的中間產(chǎn)物，其中P1為C1-C10烷基，芐基，對甲氧基芐基(反應e)。該反應經(jīng)由將化合物Ⅵ與重氮甲烷，苯基重氮甲烷或對一甲氧基苯基重氮甲烷的醚性溶液在一溶劑混合物，如甲醇-THF中，于0℃至室溫的溫度范圍內(nèi)進行。此中間產(chǎn)物(Ⅶ)與一式為Ⅸ的氨進行反應。
NH2-R1(Ⅸ)其中R1具有在式Ⅰ中針對R所定義的相同意義或其為一可轉變?yōu)镽的基團，得到通式Ⅷ的化合物，其可選擇性地進行下列一個或多個步驟而被轉變成化合物Ⅰa)當R1不為R時，將R1轉變成Rb)若必須得到式Ⅰ的化合物，其中P為氫，則將化合物Ⅷ(其中P1＝CH2-苯基)與氫在合適的催化劑存在下進行反應;
c)將得到的式(Ⅰ)化合物選擇地進行鹽化或溶劑化，或分離其異構體。
5-甲氧基吡啶二甲酸酯(Ⅱ)將少量重氮甲烷的醚性溶液加到5-羥基吡啶二甲酸二甲基酯(2.55克，0.012摩爾)在甲醇(77毫升)中形成的溶液中，直到非暫時性黃色持續(xù)存在為止。約2個小時后，該溶劑由旋轉揮發(fā)方式去除以得到黑色油狀物。該油狀物用醚(4×50毫升)萃取并由旋轉揮發(fā)的方式得到化合物Ⅱ，1.29克(47%)，mp 76-77℃[lit mp 78-80℃]。
1H NMR(CDCl3)8.86(s，1H)，8.52(s，1H)，3.97(s，3H)，3.96(s，3H)，3.92(s，3H)。[Korytnyk，N.及Angelino，N.J.Med.Chem，1977，20，745]。
5-甲氧基吡啶二甲酸(Ⅲ)將二酯(Ⅱ)，(1.71克，0.0076摩爾)加入一磁棒攪拌的氬氧化鈉(1.28克，0.032摩爾)在水(5.6毫升)中所形成的溶液中。該混合物被加熱到95℃1小時且隨即以冰浴的方式冷卻。逐滴加入濃縮的HC1于攪拌中的混合物且將分離出的白色固體以過濾方式收集，并以冰水(2毫升)清洗。進一步酸化該濾液可得到第二批化合物Ⅲ。其產(chǎn)量為1.38克(92%)的式Ⅲ化合物，mp224-225℃。
1H NMR(DMSO-d6)13.54(br，1H)，8.68(s，1H)，8.67(s，1H)，3.94(s，3H)。
3-甲氧基-呋喃醛基[4，5-d]吡啶-4，6-二酮或5-甲氧基吡啶二甲酸酐(Ⅳ)。
將二酸化合物Ⅲ(1.34克，0.007摩爾)及乙酸酐(40毫升)的混合物加熱到回流溫度0.5小時。適量的酐通過減壓蒸餾被去除。該淡棕色固體在真空下[110℃，0.12毫米]由升華得到純化，從而得到0.938克(77%)的化合物Ⅳ，mp158-159℃。
1H NMR(CDCl3)8.91(s，1H)，8.38(s，1H)，4.23(s，3H)。
3-甲氧基-4-(2'，5'-二氟苯甲?；?吡啶-5-羧酸(Ⅴ)將仲丁基噻姆(在環(huán)已烷中為1.32M;0.92毫升，1.21毫摩爾)由一針筒逐滴加入攪動中的1，4-二氟苯(136毫克，1.20毫摩耳)在THF(20毫升)中所形成的溶液，其于-77℃及氮氣環(huán)境下進行。當攪拌約20分鐘以后，該黃色混合物經(jīng)由一具護套的套管-78℃且充滿氮氣的環(huán)境下逐滴轉移到攪拌中的化合物Ⅳ(196毫克，109毫摩耳)在THF(50毫升)中形成的溶液。該琥珀色的溶液回溫到室溫并攪拌19個小時。THF于慢速氮氣流之下被去除且殘余的棕色液體被置于水(2毫升)中且在冰浴下攪拌。該琥珀色的溶液以濃鹽酸進行酸化且得到的沉淀物以過濾方式收集。該沉淀物以冰水(5毫升)及醚(10毫升)清洗。將灰白色固體溶于熱氯仿中并使其緩慢分層。由過濾收集白色固體而得到化合物V，251毫克(78%)，mp210-211℃。
1H NMR(丙酮 d6)8.86(s，1H)，8.73(s，1H)，7.64(m，1H)，7.44(m，1H)，7.26(m，1H)，3.95(3H)。
4-羥基-6，9-二氟苯并[g]異喹啉-5，10-二酮(Ⅵ)將酮酸V(48毫克，0.104毫摩爾)加進發(fā)煙硫酸[30%SO3](0.20毫升)中且該混合物在-油浴中經(jīng)快速加熱到130-135℃并維持0.5小時。得到的金黃色溶液被冷卻并傾倒于冰水(4毫升)之上。該混合物以CH2Cl2(6×10毫升)進行萃取，且該黃色萃取液于Na2SO4之上干燥。由轉動揮發(fā)方式去除溶劑得到化合物Ⅵ(40毫克，94%)，mp160℃(dec)。
1H NMR(CDCl3)11.60(s，1H)，9.00(s，1H)，8.83(s，1H)，7.56(m，2H)。
4-芐氧基-6，9-二氟苯并[g]異喹啉-5，10-二酮(Ⅶ，P1＝CH2Ph)將苯基重氮甲烷在乙基醚(25毫升)中形成的溶液逐滴加入攪動中的化合物Ⅵ(167毫克，0.64毫摩爾)在甲醇/THF/乙醚(1∶2∶3;30毫升)中形成的溶液。該橙紅色的溶液在室溫下攪拌18個小時。溶劑由轉動揮發(fā)的方式去除。該未干的紅色固體以已烷(2×10毫升)及乙醚(10毫升)加以清洗，而得到一淡黃色固體(135毫克，61%)，mp210-212℃。
1H NMR(CDCl3)9.09(s，1H)，8.81(s，1H)，7.56(d，2H)，7.42(m，5H)，5.44(s，2H)。
4-芐氧基-6，9-雙｛[(2-二甲基氨基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮[Ⅷ，P1＝CH2Ph，R1＝(CH2)2N(CH3)2]將N，N-二甲基撐乙基二胺(87毫克，0.99毫摩爾)在吡啶(0.33毫升)中形成的混合物加入攪動中的化合物Ⅶ(P1＝CH2Ph)在吡啶(0.17毫升)中形成的溶液。該反應混合物在室溫攪拌49個小時。溶劑及過量的反應劑藉由一緩慢的氮氣流去除。當將冰(5克)加入該未干的藍色固體后，該混合物以二氯甲烷(6×5毫升)進行萃取。此藍色的溶液用Na2SO4加以干燥，且該溶劑以轉動揮發(fā)的方式去除。該藍色固體于一硅膠柱(1.25×25cm)上進行色層分析。梯度性洗提液為CHCl3(100毫升);1%MeOH/CHCl3(100毫升);5%MeOH/CHCl3(400毫升);10%MeOH/CHCl3(100毫升);35%MeOH/CHCl3(400毫升)。去除溶劑得到藍色產(chǎn)物30毫克(68%)，mp204-206℃。
1H NMR(CDCl3)10.00(t，1H)，10.80(t，1H)，9.27(s，1H)，8.57(s，1H)，7.62(d，2H)，7.40(t，2H)，7.30(q，1H)，7.20(dd，2H)，5.37(s，2H)，3.47(m，4H)，2.65(m，4H)，2.35(s，6H)，2.34(s，6H)。
4-羥基-6，9-雙｛[(2-二甲基氨基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮[I，R＝(CH2)2N(CH3)2，P＝H]化合物Ⅷ[P1＝CH2Ph，R1＝(CH2)2N(CH3)2](50毫克，0.100毫摩爾)和皮爾曼氏(Pearlman's)催化劑(12毫克)在甲醇/乙酸(4∶1∶1.0毫升)中形成的混合物于一氫氣正壓下進行攪拌45分鐘。該磚紅帶白的混合物以一氧氣緩流及額外的甲醇(2毫升)再行氧化1.5小時。溶劑以一氮氣流去除且得到的混合物被置于真空泵中12小時。該藍色混合物被加入氯仿中并經(jīng)由次乙酰塑料(celite)床加以過濾。該溶液于一硅膠柱(2×4cm)上進行色層分析。梯度性洗提液為CHCl3;10%MeOH/CHCl3(洗提玫瑰白色帶);30%MeOH/CHCl3(150毫升)。去除溶劑得到藍色產(chǎn)物(25毫克，61%)，mp227-229℃。
1H NMR(CDCl3)12.90(br，1H)，11.10(br，1H)，10.65(br，1H)，9.01(s，1H)，8.53(s，1H)，7.25(d，1H)，7.14(d，1H)，3.51(m，4H)，2.68(m，4H)，2.38(s，6H)，2.37(s，6H)。
4-芐氧基-6，9-雙[｛[2-[N-(叔丁氧基羰基)氨基]乙基｝氨基]苯并[g]異喹啉-5，10-二酮[Ⅷ，P1＝CH2Ph，R1＝(CH2)2NHBoc]將化合物Ⅶ(P1＝CH2Ph)(135毫克，0.39毫摩爾)加入攪動中的化合物N-(叔丁氧基羰基)撐乙基二胺(934毫克，5.77毫摩爾)在DMSO(3毫升)中形成的混合物。該反應混合物在室溫下攪拌約72小時。于冰(112克)上驟冷后，以抽氣過濾方式收集沉淀并以水(3×25毫升)清洗。該藍色固體于一硅膠柱(1.25×14cm)上進行色層分析。梯度性洗提液為CHCl3(100毫升);1%MeOH/CHCl3(100毫升);2%MeOH/CHCl3(200毫升)[洗提出玫瑰色經(jīng)單取代的化合物，6毫克);5%MeOH/CHCl3(200毫升)。去除最后的洗提液得到產(chǎn)物(221毫克，87%)，mp192-194℃。
1H NMR(CDCl3)11.04(br，1H)，10.89(br，1H)，9.22(s，1H)，8.58(s，1H)，7.56(d，2H)，7.38(m，5H)，5.42(s，2H)，4.99(br，2H)，3.57(br，4H)，3.42(br，4H)，1.46(s，18H)。
4-羥基-6，9-雙[｛[2-[N-(叔丁氧基羰基)氨基]乙基｝氨基]苯并[g]異喹啉-5，10-二酮[I，P＝H，R＝(CH2)2NHBoc]化合物Ⅷ[P1＝CH2Ph，R1＝(CH2)2NHBoc](135毫克，0.213毫摩爾)和皮爾曼氏催化劑(29毫克)在甲醇/乙酸(4∶1，5.8毫升)中形成的混合物于-氫氣正壓下攪拌15分鐘。該磚紅帶白的混合物以一氧氣緩流再行氧化13個小時。溶劑以一氮氣流去除且得到的混合物被置于真空泵中2小時。該藍色混合物被加入氯仿中并經(jīng)由次乙酰塑料加以過濾。該溶液于一硅膠柱(2.00×15cm)上進行色層分析。梯度性洗提液為CHCl3(50毫升)1%MeOH/CHCl3(100毫升);2%MeOH/CHCl3(100毫升)(洗提淺紅色帶);4%MeOH/CHCl3(100毫升);10%MeOH/CHCl3(200毫升)。由最后的洗提液中去除溶劑得到產(chǎn)物(112毫克，98%)，mp208-211℃。
1H NMR(CDCl3)12.55(s，1H)，10.98(br，1H)，10.45(br，1H)，8.56(s，1H)，8.23(s，1H)，7.00(d，1H)，6.92(d，1H)，5.93(br，1H)，5.92(br，1H)，3.44(m，8H)，1.49(s，18H)。
4-羥基-6，9-雙[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]異喹啉-5，10-二酮[I，P＝H，R＝(CH2)2NH2x HCl]一無水氯化氫氣體流被導入一攪拌中的化合物I[P＝H，R＝(CH2)2NHBoc](26毫克，0.049毫摩爾)在氯仿中形成的溶液。對該反應維持該氣體于正壓狀態(tài)20分鐘。藉由抽氣過濾去除溶劑而得到一藍色產(chǎn)物(20毫克，99%)。
1H NMR(DMSO-d5)12.91(s，1H)，11.07(br，1H)，10.64(br，1H)，8.86(s，1H)，8.56(s，1H)，7.71(d，2H)，3.83(m，4H)，3.05(m，4H)。
根據(jù)所述的化合物I(R＝-(CH2)2N(CH3)2的制備方法，藉由將化合物Ⅶ(P1＝CH2-Ph)與合適的經(jīng)取代的撐乙基二胺反應，如所述的針對化合物Ⅷ(P1＝CH2Ph，R1＝-(CH2)2N(CH3)2的制備，并移除保護性芐基，如所述的針對化合物I(R＝-(CH2)2N(CH3)2)的制備，制備出下列化合物4-羥基-6，9-雙｛[2-(4′-嗎啉代(morpholino)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮1H NMR(DMSOd6)11.65ppm(s，1H);11.21(t，1H);10.73(t，1H);9.05(s，1H);8.56(s，1H);7.30(m，2H);3.65(m，8H);3.53(m，4H);2.78(m，12H);
4-羥基-6，9-雙｛[2-(二乙基氨基)乙基氨基]苯并[g]異喹啉-5，10-二酮1H NMR(DMSOd6)11.7(s，1H);11.3(t，1H);10.75(t，1H);9.06(s，1H);8.56(s，1H);7.30(m，2H);3.50(q，4H);3.25(m，8H);2.75(t，4H);1.25(m，12H);
4-羥基-6，9-雙｛[2-(1′-吡咯啶基(pyrrolidino))乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮1H NMR(DMSOd6)11.8(s，1H);11.0(t，1H);10.5(t，1H);9.07(s，1H);8.55(s，1H);7.30(m，2H);3.60(q，4H);2.85(t，4H);2.62(m，8H);1.85(m，8H);
4-羥基-6，9-雙｛[2-(2-羥基乙基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮。
1H NMR(DMSOd6)12.3(s，1H);11.7(t，1H);10.91(t，1H);9.07(s，1H);8.56(s，1H);7.32(m，2);3.75(t，4H);3.60(q，4H);3.11(t，4H);2.98(t，4H);2.50(q，4H);
4-羥基-6，9-雙｛[2-(甲基氨基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮
1H NMR(DMSOd6)11.8(s，1H);11.22(t，1H);10.75(t，1H);9.07(s，1H);8.56(s，1H);7.29(m，2H);3.60(q，4H);2.80(s，6H);
4-羥基-6，9-雙｛[2-(乙基氨基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮1H NMR(DMSOd6)11.92(s，1H);11.35(t，1H);10.78(t，1H);9.05(s，1H);8.56(s，1H);7.28(m，2H);3.58(q，4H);3.38(t，4H);3.30(q，4H);1.58(s，6H)。
權利要求
1.一種式(Ⅰ)的化合物， 其中P為氫，C1-C10烷基，C7-C10苯烷基；R為C1-C10烷基，C7-C10苯烷基，具有一種或兩種選自包括OR1及-NR2R3的取代基的C2-C10烷基；一種式為-(CH2)n-O-(CH2)mH的二烷基醚或一種式為-(CH2)n-NR4-(CH2)mH的二烷基胺，其中m+n等于一由2到10的整數(shù)，其中所述的醚或胺的烷基基團可以是未經(jīng)取代的或經(jīng)由一或兩個羥基或-NR2R3基團所取代的基團；R1選自氫，C1-C6烷基，C7-C10苯烷基，未經(jīng)取代或經(jīng)由-NRC2R3取代的C2-C6烷基。R2及R3可為相同或不同的基團，且選自氫，C1-C10烷基，C7-C10苯烷基，苯基，經(jīng)由一或兩個羥基取代的C2-C10烷基；或者，R2或R3其中之一為H且另一個為C(CH3)(CH2OH)2；或R2及R3與一氮原子形成一撐乙基亞胺環(huán)或一五元-或六元-芳香性或非芳香性雜環(huán)，其可以包含另一個雜原子，如硫，氧或氮；R4選自氫，C1-C10烷基，C2-C10羥基烷基，C7-C10芳烷基；該化合物(Ⅰ)以游離堿或與醫(yī)藥上可接受的酸形成的鹽的形式存在。
2.如權利要求1所述的化合物，其中R2及R3一起連接一氮原子而形成一雜環(huán)，該雜環(huán)選自下列一組基團中的一種1-撐乙基亞胺，1-吡咯啶，4-嗎啉，1-哌嗪，4-甲基-1-哌嗪，4-芐基-1-哌嗪及1-哌啶。
3.如權利要求1所述的化合物，其中R為-(CH2)P-NR2R3，其中p為2，3或4，R2及R3為C1-C6烷基，或與氮原子一起形成一雜環(huán)，該雜環(huán)選自下列一組基團中的一種1-撐乙基亞胺，1-吡咯啶，4-嗎啉，1-哌嗪，4-甲基-1-哌嗪，4-芐基-1-哌嗪及1-哌啶。
4.如權利要求1所述的化合物，其中R為(CH2)p-NH2，其中p為2，3或4。
5.如權利要求1所述的化合物，其中R為-(CH2)p-NR2R3，其中p為2，3或4，R2為氫，R3為C1-C6烷基。
6.如權利要求1所述的化合物，其中R為-(CH2)p-NH-(CH2)q-OH，其中p及q為各自獨立地選自2、3及4的整數(shù)。
7.如權利要求1所述的化合物，其中R為-(CH2)p-OH，其中p為2、3或4。
8.如權利要求1所述的化合物，其中R為-(CH2)p-O-(CH2)q-OH，其中p及q各自獨立地選自2、3及4的整數(shù)。
9.如權利要求1所述的化合物，該化合物選自下列一組化合物中的一種4-羥基-6，9-雙｛[2-(氨基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;4-甲氧基-6，9-雙｛[2-(氨基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;4-羥基-6，9-雙｛[2-(4'-嗎啉代)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;4-羥基-6，9-雙｛[2-(二甲基氨基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;4-甲氧基-6，9-雙｛[2-(二甲基氨基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;4-芐氧基-6，9-雙｛[2-(二甲基氨基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;4-羥基-6，9-雙｛[2-(二乙基氨基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;4-羥基-6，9-雙｛[2-(1'-吡咯啶基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;4-羥基-6，9-雙｛[4-(氨基)丁基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;4-羥基-6，9-雙｛[3-(氨基)丙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;4-羥基-6，9-雙｛[2-[(2-羥基乙基)氨基]乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;4-羥基-6，9-雙｛[3-(二甲基氨基)丙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;4-羥基-6，9-雙｛[2-(羥基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;4-羥基-6，9-雙｛[2-(甲基氨基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;4-羥基-6，9-雙｛[2-(乙基氨基)乙基]氨基｝苯并[g]異喹啉-5，10-二酮;以游離堿或與醫(yī)藥上可接受的酸形成的鹽的形式存在。
10.一種適合治療病人身上的腫瘤的藥物組合物，包括如權利要求1所述的化合物及一種醫(yī)藥上可接受的稀釋劑或賦形劑。
11.一種治療對疊氮蒽二酮的處理具感受性的腫瘤的方法，包括施用于一需要此種治療的哺乳動物身上一有效抗腫瘤劑量的如權利要求1所述的化合物。
12.一種制備式(Ⅰ)化合物的方法 其中P為氫，C1-C10烷基，C7-C10苯烷基;R為C1-C10烷基，C7-C10苯烷基，具有一或兩種選自包括OR1及-NR2R3的取代基的C2-C10烷基;一種式-(CH2)n·(CH2)mH的二烷基醚或一種式-(CH2)n-NR4-(CH2)mH的二烷基胺，其中m+n等于-2到10的整數(shù)，且其中的烷基基團可為未經(jīng)取代的或經(jīng)由一或兩個羥基或-NR2R3基團所取代的基團;R1選自氫，C1-C6烷基，C7-C10苯烷基，未經(jīng)取代或經(jīng)由-NR2R3取代的C2-C6烷基;R2及R3可以是相同或不同的基團，且選自氫，C1-C10烷基，C7-C10苯烷基，苯基，經(jīng)由一或兩個羥基取代的C2-C10烷基;或者，R2或R3其中之一為H且另一個為(CH3)(CH2OH)2;或R2及R3與一氮原子形成一撐乙基亞胺環(huán)或-五元-或六元-芳香性或非芳香性雜環(huán)，其可以包含另一個雜原子，如硫，氧或氮;R4選自氫，C1-C10烷基，C2-C10羥基烷基，C7-C10芳烷基;該方法包括下列步驟e)將3-甲氧基-4-(2′、5′-二氟芐?；?-吡啶-5-羧酸(Ⅴ) 在發(fā)煙硫酸[30%SO3]中于130-135℃加熱30分鐘進行環(huán)化，而得到3-羥基-6，9-二氟苯并[g]異喹啉-5，10-二酮(Ⅵ) f)將化合物(Ⅵ)與重氮甲烷，苯基重氮甲烷或對-甲氧基苯基重氮甲烷的醚性溶液于0℃至室溫的溫度范圍內(nèi)進行反應，形成式Ⅶ的中間產(chǎn)物; g)將中間產(chǎn)物(Ⅶ)與一式與NH2-R1的胺進行反應，其中R1具有在式(Ⅰ)中針對R所定義的相同意義或其為一可轉變?yōu)镽的基團，得到通式(Ⅷ)的化合物; h)選擇性地進行至少一個額外步驟將化合物(Ⅷ)轉變成化合物(Ⅰ)。
13.如權利要求12所述的方法，其中式Ⅷ的化合物藉由進行至少一個下列的步驟而轉變成式(Ⅰ)化合物1)當R1不為R時，將R1轉變成R;2)若必須得到式(Ⅰ)的化合物，其中P為氫的產(chǎn)物，則將化合物(Ⅷ)與氫在合適的催化劑存在下進行反應，其中P1＝CH2-苯基;3)將得到的式(Ⅰ)化合物選擇性地進行鹽化或溶劑化，或分離其異構體。
14.一種合成3-羥基-6，9-二氟苯并[g]異喹啉-5，10-二酮(Ⅵ)的方法，包括下列步驟a)經(jīng)由堿性水解將3-羥基-4，5-二甲氧基羰基-吡啶(Ⅱ) 水解成相應的5-甲氧基吡啶二甲酸(Ⅲ); b)在乙酸酐中于回流溫度下加熱化合物(Ⅲ)以形成酐(Ⅳ); c)在仲丁基噻姆的存在下用1，4-二氟苯縮合化合物(Ⅳ)而形成3-甲氧基-4-(2′，5′-二氟芐?；?-吡啶-5-羧酸(Ⅴ); d)藉由在發(fā)煙硫酸中加熱將化合物(Ⅴ)環(huán)化形成3-羥基-6，9-二氟苯并[g]異喹啉-5，10-二酮(Ⅵ)。
15.化合物3-羥基-6，9-二氟苯并[g]異喹啉-5，10-二酮。
全文摘要
本發(fā)明涉及4-羥基-，烷氧基-或芳烷氧基-6，9-雙(取代的氨基)苯并[g]異喹啉-5，10-二酮類化合物，特別涉及具有本身的(氨烷基)氨基取代基的6，9-取代基的4-羥基衍生物。這些化合在體內(nèi)及體外均顯示了抗腫瘤的活性。這些化合物的合成途徑涉及一新穎的中間產(chǎn)物。
文檔編號C07D221/08GK1101038SQ9311737
公開日1995年4月5日 申請日期1993年9月8日 優(yōu)先權日1992年9月8日
發(fā)明者克瑞普喬·保羅A 申請人:佛蒙特大學