專利名稱：含三唑類的藥用組合物的制備方法
本申請(qǐng)是CN91100706.7的分案申請(qǐng)。原申請(qǐng)的申請(qǐng)日為1991年2月2日，原申請(qǐng)的發(fā)明名稱為“三唑類抗真菌劑”。
本發(fā)明涉及具有抗真菌活性的三唑衍生物。
更具體地講，本發(fā)明涉及可用于治療動(dòng)物(包括人)真菌感染的2-芳基-3-(3-鹵代吡啶-4-基或5-鹵代嘧啶-4-基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)鏈烷-2-醇衍生物。
在本申請(qǐng)人的歐洲專利申請(qǐng)書(shū)NO 89307920.2(EP-A-0357241)中對(duì)本發(fā)明的某些化合物作了一般公開(kāi)，但沒(méi)有對(duì)它們進(jìn)行具體描述或舉例說(shuō)明。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物抗真菌，特別是抗曲霉屬真菌作用水平之高令人驚奇，這主要是由于本發(fā)明化合物的藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)之好出乎意料，以致于具有很長(zhǎng)的半衰期(t1/2值)。
本發(fā)明提供了下式抗真菌劑及其可藥用的鹽 式中R是由1至3個(gè)分別獨(dú)立地選自鹵素、-CF3和OCF3的取代基取代的苯基;
R1是C1-4烷基;
R2是H或C1-4烷基;
X是CH或N;和Y是F或C1。
在對(duì)式(Ⅰ)化合物的上述限定中，鹵素是F、C1、Br或I，C3和C4烷基可以是直鏈或支鏈烷基。優(yōu)選的烷基是甲基和乙基。
R的例子包括2-氟苯基、4-氟苯基、2-氯苯基、4-氯苯基、2-溴苯基、2-碘苯基、2-三氟甲基苯基、2，4-二氯苯基、2，4-二氟苯基、2-氯-4-氟苯基、2-氟-4-氯苯基、2，5-二氟苯基，2，4，6-三氟苯基、4-溴-2，5-二氟苯基和2-三氟甲氧基苯基。
R優(yōu)選由1至3個(gè)鹵素取代基，特別是由1或2個(gè)鹵素取代基取代的苯基。
R特別優(yōu)選由1或2個(gè)分別獨(dú)立選自氟和氯的取代基取代的苯基。
優(yōu)選R的具體實(shí)例包括2-氟苯基、4-氟苯基、2，4-二氟苯基、2-氯苯基和2，4-二氯苯基。
特別優(yōu)選的R是2-氟苯基、2，4-二氟苯基、2-氯苯基或2，4-二氯苯基。
R1優(yōu)選甲基。
R2優(yōu)選H或甲基。
R2特別優(yōu)選H。
R1優(yōu)選甲基和R2優(yōu)選H或甲基。
特別優(yōu)選的是R1為甲基，而R2為H。
X優(yōu)選N。
Y優(yōu)選F。
式(Ⅰ)化合物的可藥用的鹽包括由能形成無(wú)毒鹽的酸生成的酸加成鹽，例如，鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硫酸鹽或硫酸氫鹽、磷酸鹽或磷酸氫鹽、乙酸鹽、馬來(lái)酸鹽、富馬酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、葡糖酸鹽、苯甲酸鹽、甲磺酸鹽、苯磺酸鹽和對(duì)甲苯磺酸鹽。有關(guān)適宜藥用鹽的綜述參見(jiàn)Berge et al.，J.Pharm.Sci.，66，1-19(1977)。
如果R1與R2相同，式(Ⅰ)化合物含有一個(gè)手性中心，因此，以一對(duì)對(duì)映異構(gòu)體(外消旋體)存在。
如果R1和R2不同，則式(Ⅰ)化合物含有至少兩個(gè)手性中心(＊)，因此，以至少兩對(duì)彼此非對(duì)映異構(gòu)的對(duì)映異構(gòu)體存在，即 本發(fā)明包括式(Ⅰ)化合物的各個(gè)立體異構(gòu)體以及它們的混合物。采用常規(guī)方法，例如，將式(Ⅰ)化合物或其適宜鹽或衍生物的非對(duì)映體混合物經(jīng)分步結(jié)晶，層析或經(jīng)H.P.L.C法分離，可以分離各非對(duì)映體。采用下述方法也可制得式(Ⅰ)化合物的單一對(duì)映體從相應(yīng)的光學(xué)純中間體開(kāi)始進(jìn)行合成，或者通過(guò)下述兩個(gè)方法之一拆分外消旋體即，以適宜的手性載體通過(guò)H.P.L.C法分離外消旋體，或者使外消旋體與適宜的光學(xué)活性酸(如1R-(-)-或1S-(+)-10-樟腦磺酸)反應(yīng)形成非對(duì)映的鹽，然后將后者分級(jí)結(jié)晶拆分之。
當(dāng)R2是H時(shí)，優(yōu)選的式(Ⅰ)化合物具有2R、3S-構(gòu)型，即 本發(fā)明化合物的特別優(yōu)選的具體實(shí)例是2R、3S-2-(2，4-二氟苯基)-3-(3-氟吡啶-4-基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇，2R、3S-2-(2-氯苯基)-3-(3-氟吡啶-4-基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇，2R、3S-2-(2-氟苯基)-3-(3-氟吡啶-4-基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇，2R、3S-2-(2，4-二氟苯基)-3-(5-氟嘧啶-4-基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇，和2R、3S-2-(2，4-二氯苯基)-3-(5-氟嘧啶-4-基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇，以及上述化合物的可藥用鹽。
本發(fā)明提供的式(Ⅰ)化合物可由下述方法制得1)按反應(yīng)式Ⅰ所示方法可以制得所有式(Ⅰ)化合物
其中，R、R1、R2、X和Y的定義如式(Ⅰ)化合物中所述。
在一般方法中，通過(guò)加入大約1當(dāng)量適宜的堿(如二異丙基氨基鋰、或二(三甲基硅烷基)氨基鈉或鉀)使式(Ⅱ)化合物去質(zhì)子，然后使所得鹽(優(yōu)選鋰、鈉或鉀鹽)就地與式(Ⅲ)酮反應(yīng)。一般在適宜的有機(jī)溶劑(如四氫呋喃、甲苯或乙醚)中，在惰性氣氛(如氮或氬)下，于-80℃至-50℃，優(yōu)選-70℃至-60℃進(jìn)行該反應(yīng)。
作為起始原料的式(Ⅱ)化合物或是已知化合物(參見(jiàn)D.L.Comins et al，Heterocycles，22，339(1984))，或可以按已有文獻(xiàn)的常規(guī)方法制得。作為起始原料的式(Ⅲ)化合物或是已知化合物(參見(jiàn)EP-A-44605、EP-A-69442或GB-A-1464224)，或可以按類似于為此所述的方法制得。
2)按反應(yīng)式2所述方法也可以制得所有式(Ⅰ)化合物
反應(yīng)式2 式中R、R1、R2、X和Y的定義如對(duì)式(Ⅰ)化合物所述，Z是適宜的離去基團(tuán)，例如，氯、溴或C1-4烷磺酰氧基(如甲磺酰氧基)。1H-1，2，4-三唑的適宜堿鹽的實(shí)例是堿金屬鹽，優(yōu)選鈉鹽和鉀鹽，以及四烷基銨鹽，優(yōu)選四正丁銨鹽(參見(jiàn)US-A-4259505)。
最好采用式(Ⅳ)環(huán)氧化物體作為起始原料進(jìn)行該反應(yīng)。如果在該方法中使用式(Ⅵ)化合物，反應(yīng)機(jī)理表明在該反應(yīng)條件下就地形成(至少部分形成)相應(yīng)的式(Ⅳ)環(huán)氧化物。因此，就此而言這一方法與采用式(Ⅳ)環(huán)氧化物作為起始原料的方法相似。
當(dāng)采用1H-1，2，4-三唑的堿鹽時(shí)，在適宜的有機(jī)溶劑(如N，N-二甲基甲酰胺或四氫呋喃)中，在室溫至100℃下進(jìn)行該反應(yīng)。如果使用1H-1，2，4-三唑的鈉鹽，優(yōu)選約60℃的反應(yīng)溫度;如果采用相應(yīng)的四正丁銨鹽，則優(yōu)選室溫左右的反應(yīng)溫度。
另外，在適宜的溶劑(如N，N-二甲基甲酰胺、甲醇或含水丙酮)中，優(yōu)選50°至100℃的反應(yīng)溫度，在附加的適宜堿(如Na2CO3或K2CO3)存在下，采用1H-1，2，4-三唑也可進(jìn)行該反應(yīng)。
按照下文反應(yīng)式3和4歸納的常規(guī)方法，可以制得式(Ⅳ)和(Ⅵ)中間體反應(yīng)式3
式中R、R1、R2、X和Y的定義如對(duì)式(Ⅰ)化合物所述，Z是離去基團(tuán)，優(yōu)選C1或Br。
在一般方法中，通過(guò)加入約1當(dāng)量適宜的堿(如二異丙基氨基鋰、或二(三甲硅烷基)氨基鈉或鉀)使式(Ⅱ)化合物去質(zhì)子，并且，使所得有機(jī)金屬中間體就地與式(Ⅴ)化合物反應(yīng)。一般在適宜的有機(jī)溶劑(如四氫呋喃、甲苯或乙醚)中，并且在惰性氣氛(如氮或氬)中，于-80℃至-50℃，優(yōu)選約-70℃進(jìn)行該反應(yīng)。所形成的式(Ⅵ)化合物不必分離，一般在較高溫度(如室溫)下攪拌一定時(shí)間后就地環(huán)合，得到式(Ⅳ)環(huán)氧乙烷。
在無(wú)水條件下，由式(Ⅳ)環(huán)氧化物與適宜的鹵化氫反應(yīng)，也可以制得其中Z是Cl或Br的式(Ⅵ)化合物。
反應(yīng)式4
式中R、R1、R2、X和Y的定義如對(duì)式(Ⅰ)化合物所述，Z1是適宜的離去基團(tuán)，例如，Cl、Br、I或甲磺酰氧基。
在一般方法中，由下述反應(yīng)直接制得式(Ⅷ)、(Ⅸ)或(Ⅹ)化合物，即，由式(Ⅶ)的酯與有機(jī)金屬中間體反應(yīng)，所述有機(jī)金屬中間體由下式化合物 根據(jù)需要與約1當(dāng)量適宜堿(如二異丙基氨基鋰或二(三甲基硅烷基)氨基鈉)反應(yīng)經(jīng)去質(zhì)子作用而制得的。一般在適宜的有機(jī)溶劑(如四氫呋喃或乙醚)中，在惰性氣氛(如氮或氬)中，于-80℃至-50℃、優(yōu)選約-70℃下進(jìn)行該反應(yīng)。
另外，分別由式(Ⅷ)或(Ⅸ)化合物與約1當(dāng)量適宜的堿(如氫化鈉)反應(yīng)，然后用適宜的烷基化劑將所得負(fù)碳離子就地烷基化，可以制得式(Ⅸ)或(Ⅹ)化合物。一般在適宜的有機(jī)溶劑(如N，N-二甲基甲酰胺)中，在0℃至室溫下進(jìn)行該反應(yīng)。
最好在0℃至室溫(一般為室溫)，在相轉(zhuǎn)移條件下，例如，使用NaOH/〔CH3(CH2)3〕4N HSO4/H2O/CHCl3(C1-4烷基)Z1(其中Z1最好是碘)，將式(Ⅷ)或(Ⅸ)化合物烷基化。
采用常規(guī)方法，例如，采用二甲基氧化锍次甲基化物(dimethyloxosulphonium methylide)(參見(jiàn)J.A.C.S.〔1965〕，87，1353)或氯甲基鋰(參見(jiàn)Tet.Lett.〔1986〕，795〕，使式(Ⅸ)或(Ⅹ)酮環(huán)氧化。
3)按下文反應(yīng)式5所示，可以制得式中R、R1、R2和Y的定義如對(duì)式(Ⅰ)化合物所述，X是N的式(Ⅰ)化合物反應(yīng)式5 式中R、R1、R2和Y的定義如對(duì)式(Ⅰ)化合物所述，Z2和Z3分別獨(dú)立地選自H和能通過(guò)還原選擇除去的基團(tuán)，其前提是Z2和Z3不能同時(shí)為氫。最好Z2是能通過(guò)還原被選擇性地除去的基團(tuán)，而Z3是H。能通過(guò)還原被選擇性地除去的基團(tuán)優(yōu)選鹵素(即為F、Cl、Br或I)，特別優(yōu)選Cl。
當(dāng)所說(shuō)基團(tuán)是鹵素(優(yōu)選Cl)時(shí)，優(yōu)選的還原方法是氫解。在一般方法中，采用適宜的催化劑(如鈀-炭)和適宜的溶劑(如乙醇)，根據(jù)需要在其他適宜的堿(如乙酸鈉)存在下，使式(Ⅺ)化合物氫解。在室溫至溶劑的回流溫度下，在1至5個(gè)大氣壓(100kPa至500kPa)下進(jìn)行該反應(yīng)，但是，一般在大約室溫及常壓下即可取得令人滿意的結(jié)果。
按反應(yīng)式6所示，可以方便地制得式(Ⅺ)中間體，式中，Z2和Z3之一是H，而另一個(gè)是能夠通過(guò)還原被選擇性除去的基團(tuán)反應(yīng)式6 式中R、R1、R2和Y的定義如對(duì)式(Ⅰ)化合物所述，Z2和Z3之一是H，而另一個(gè)是能通過(guò)還原被選擇性除去的基團(tuán)。按類似于方法(1)所述步驟進(jìn)行該反應(yīng)。
按類似于方法2所述步驟，也可制得下述式(Ⅺ)中間體，式中，Z2和Z3之一是H，而另一個(gè)是能通過(guò)還原被選擇性地被除去的基團(tuán)。
采用常規(guī)方法，例如，下文制備部分所述方法，可以制得式(Ⅻ)起始化合物。
采用適宜的環(huán)氧化物起始原料，按類似于方法(2)所述步驟，可以制得式中Z2和Z3均為能通過(guò)還原被選擇性除去的基團(tuán)的式(Ⅺ)中間體，按反應(yīng)式7所示，采用常規(guī)方法，可以制得前述環(huán)氧化物起始原料
反應(yīng)式7 式中R、R1、R2和Y的定義如對(duì)式(Ⅰ)化合物所述，Z2和Z3均為能通過(guò)還原被選擇性除去的基團(tuán)，Z4是氯或C1-4烷氧基。
按照先有文獻(xiàn)及參照本文的實(shí)施例，所有上述反應(yīng)都是常規(guī)反應(yīng)，用于這些反應(yīng)的適宜試劑和反應(yīng)條件，以及用于分離所期產(chǎn)物的方法，對(duì)本領(lǐng)域普遍技術(shù)人員來(lái)說(shuō)都是熟知的。
將含有游離堿的溶液與所期酸一起混合即可很方便地制備可藥用的酸加成鹽。該鹽一般從溶液中沉淀而出，并通過(guò)過(guò)濾收集之，或者通過(guò)蒸發(fā)溶劑回收之。
式(Ⅰ)化合物及其鹽是抗真菌劑，可用于治療或預(yù)防動(dòng)物(包括人)的真菌感染。例如，可將它們用于治療特別是由念珠菌、發(fā)癬菌、小孢子菌或表皮癬菌引起的局部真菌感染或由白色念珠菌引起的粘膜感染(例如鵝口瘡或陰道念珠菌病)。還可將它們用于治療由下述真菌引起的全身性真菌感染，例如念珠菌(如白色念珠菌)、新型隱球菌、黃曲霉菌、煙曲霉菌、球孢子菌、巴西牙生菌、組織胞漿菌或芽生菌。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物對(duì)臨床重要的曲霉菌屬真菌的對(duì)抗活性之好出乎預(yù)料。這主要應(yīng)歸因于它們的藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)特別優(yōu)越，因此，半衰期更長(zhǎng)(t1/2值)。
通過(guò)確定最小抑制濃度(m.i.c)，即，在適宜的培養(yǎng)基中抑制具體微生物生長(zhǎng)的受試化合物濃度，可以評(píng)價(jià)本發(fā)明的體外抗真菌活性。具體作法是將一系列各自摻有一具體濃度受試化合物的瓊脂培養(yǎng)皿用例如白色念珠菌的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物接種，然后將每一培養(yǎng)皿在37℃孵育48小時(shí)。繼之檢查有無(wú)真菌生長(zhǎng)，記錄適當(dāng)?shù)膍.i.c.值。在該試驗(yàn)中可采用的其他微生物包括煙曲霉菌、發(fā)癬菌、小孢子菌、絮狀表皮癬菌、粗球孢子菌和光滑球擬酵母菌。
給小鼠接種例如白色念珠菌或煙曲霉菌菌珠，然后通過(guò)腹膜內(nèi)或靜脈注射，或口服，給予上述小鼠不同劑量的受試化合物，由此可以評(píng)價(jià)化合物體內(nèi)活性。該活性按未經(jīng)治療的小鼠組死亡后治療組小鼠的存活率計(jì)算。記錄對(duì)感染致死效應(yīng)產(chǎn)生50%保護(hù)時(shí)所需化合物的濃度(PD50)。對(duì)于曲霉菌屬感染模型而言，在服用給定劑量受試化合物后小鼠感染治愈數(shù)可作為評(píng)價(jià)活性的另一方法。
對(duì)人類用藥而言，可單獨(dú)服用具有抗真菌作用的式(Ⅰ)化合物及其鹽，但是，一般與根據(jù)給藥途徑及常規(guī)藥學(xué)實(shí)踐所選擇的藥用載體混合給藥。例如，可以下述劑型口服給藥含有賦形劑(如淀粉或乳糖)的片劑，只含化合物或與賦形劑混合之混合物的膠囊劑或陰道栓，或者是含有香味劑或著色劑的酏劑、溶液或混懸液。還可以通過(guò)胃腸道外注射給予這些化合物，例如靜脈、肌內(nèi)或皮下注射。就胃腸道外給藥而言，最好以無(wú)菌水溶液的形式使用這些化合物，該溶液可以含有使之與血液等滲的其他物質(zhì)，例如足量的鹽或葡萄糖。
在制備適宜的藥物組合物時(shí)，使式(Ⅰ)化合物與環(huán)糊精的羥烷基衍生物進(jìn)行配位后，可以提高式(Ⅰ)化合物在水性介質(zhì)中的溶解度。優(yōu)選使用的環(huán)糊精是α-、β-或γ-環(huán)糊精，最優(yōu)選的是β-環(huán)糊精。優(yōu)選的羥烷基衍生物是羥丙基衍生物。
在給患者口服以及經(jīng)胃腸道外給藥時(shí)，無(wú)論是口服還是經(jīng)胃腸道外給藥，式(Ⅰ)抗真菌化合物的日劑量是0.01-20mg/kg(一次或分次劑量)。上述化合物的片劑或膠囊劑中含有5mg至0.5g活性化合物，根據(jù)需要每次服用1粒或2?；蚨嗔?。在任何情況下，醫(yī)生將確定最適合于各個(gè)患者的具體劑量，該劑量隨具體患者的年齡、體重和反應(yīng)而異。上述劑量是平均情況的范例;當(dāng)然，有時(shí)也需要采用高出或低于上述劑量范圍的劑量，這也屬于本發(fā)明的范疇。
另外，也可以以栓劑或陰道栓的形式給藥，或者以洗液、溶液、霜?jiǎng)?、軟膏或粉塵劑的形式局部給藥。例如，可以將它們摻入由聚乙二醇或液體石蠟組成的霜?jiǎng)┲?或者，將它們以1-10%的濃度摻入由白蠟或白色凡士林及所需穩(wěn)定劑和防腐劑組成的軟膏中。
因此，本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，它含有式(Ⅰ)化合物或其可藥用鹽，以及可藥用稀釋劑或載體。
因此，本發(fā)明還提供了藥用、特別是作為抗真菌劑的式(Ⅰ)化合物或其藥用鹽或其組合物。
本發(fā)明還提供了式(Ⅰ)化合物，或其可藥用鹽或其組合物在制備抗真菌劑中的應(yīng)用。
因此，本發(fā)明還提供了治療動(dòng)物(包括人)的方法，借以治愈或預(yù)防真菌感染，該方法包括用有效量的式(Ⅰ)化合物，或者根據(jù)需要采用式(Ⅰ)化合物的可藥用鹽或組合物治療所說(shuō)動(dòng)物。
本發(fā)明還提供了式(Ⅳ)、(Ⅵ)和(Ⅺ)、4-乙基-5-氟嘧啶和4-氯-6-乙基-5-氟嘧啶新中間體。
下列實(shí)施例說(shuō)明式(Ⅰ)化合物的制備。據(jù)信對(duì)映異構(gòu)對(duì)B(如果出現(xiàn)于任何下文實(shí)施例或制備的話)及實(shí)施例1、3、4、和5的產(chǎn)物(在其中的每個(gè)實(shí)施例中，只能得到兩對(duì)可能對(duì)映異構(gòu)對(duì)中的一對(duì))是2R、3S-和2S、3R-對(duì)映異構(gòu)體的外消旋混合物。
實(shí)施例13-(3-氯吡啶-4-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇
在-60℃和氮?dú)夥障?，將濃度?.6M正丁鋰的己烷溶液(0.25ml，10mmol)滴加到二異丙胺(1.01g，10mmol)的無(wú)水THF(60ml)溶液中。該混合物溫?zé)嶂?20℃，然后再將其冷卻至-70℃，于-70℃，在所得二異丙基氨基鋰(LDA)(10mmol)的溶液中滴加3-氯-4-乙基吡啶(參見(jiàn)D.L.Comins et al，Heterocycles，22，339(1984))(1.41g，10mmol)。將所得混合物在該溫度下攪拌15分鐘，然后加入1-(2，4-二氟苯基)-2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)乙酮(2.23g，10mmol)的THF(15ml)溶液。使該反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝胤磻?yīng)30分鐘，加入水使(30ml)反應(yīng)驟停，用乙酸乙酯提取(3×60ml)，合并有機(jī)提取液，用MgSO4干燥，過(guò)濾，減壓濃縮，經(jīng)硅膠閃層析分離標(biāo)題化合物，用乙酸乙酯脫，產(chǎn)物經(jīng)乙酸乙酯重結(jié)晶，產(chǎn)量0.46g，m.p.182-184℃。
元素分析實(shí)測(cè)值C，55.76;H，4.15;N，15.23;C17H15ClF2N4O計(jì)算值C，55.98;H，4.14;N，15.36%.
實(shí)施例22-(2，4-二氟苯基)-3-(3-氟吡啶-4-基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇
按類似于實(shí)施例1的方法進(jìn)行反應(yīng)，采用4-乙基-3-氟吡啶(見(jiàn)制備1)代替3-氯-4-乙基吡啶作起始原料。該反應(yīng)的粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析純化，用乙酸乙酯作為第一洗脫劑洗脫，合并并蒸發(fā)適宜的級(jí)份，得到標(biāo)題化合物，經(jīng)1H-NMR 譜定性為對(duì)映異構(gòu)對(duì)A，m.p.178-181℃。
1H-NMR(CDCl3)δ＝1.6(d，3H)，3.95(q，1H)，4.7和5.15(AB q，2H)，5.1(s，1H(OH))，6.5(m，1H)，6.7(m，1H)，6.95(m，1H)，7.45(t，1H)，7.8(s，1H)，7.95(s，1H)，8.15(s，1H)，8.25(d，1H)ppm.
用95∶5乙酸乙酯/甲醇進(jìn)一步洗脫，合并適宜的級(jí)份，蒸發(fā)，得到含雜質(zhì)的標(biāo)題化合物，對(duì)映異構(gòu)對(duì)B。進(jìn)一步經(jīng)硅膠柱層析純化，用93∶7∶1二氯甲烷/甲醇/0.880氨水洗脫，合并適宜的級(jí)份、蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物，對(duì)映異構(gòu)對(duì)B，m.p.188-9℃。
元素分析實(shí)測(cè)值C，57.63;H，4.32; N，15.71;C17H15F3N4O.O.25H2O計(jì)算值C，57.87;H，4.43; N，15.88%.
采用手性載體(CHIRACEL OG)經(jīng)H.P.L.C拆分對(duì)映異構(gòu)對(duì)B，并用1∶1異丙醇/己烷洗脫。合并適宜的級(jí)份，蒸發(fā)，得到經(jīng)拆分的各對(duì)映體，各自均被手性載體污染。
將各含雜質(zhì)的對(duì)映體進(jìn)一步用硅膠柱層析純化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)洗脫，合并適宜的級(jí)份，蒸發(fā)，用己烷/乙醚研制后，得到純的對(duì)映異構(gòu)體單體。
其中一個(gè)對(duì)映體，m.p.57-59℃〔α〕25D-59°(C＝1mg/ml，甲醇)，而另一個(gè)則m.p.56-57℃，〔α〕25D+57℃(C＝1mg/ml，甲醇)。
實(shí)施例3-6按照類似于實(shí)施例1的方法，采用適宜的4-乙基-3-鹵吡啶和(1-鹵苯基)-2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)乙酮作為起始原料，制得了下表列出的下述通式化合物


(1)采用硅膠柱層析純化，先用2∶1乙酸乙酯/二氯甲烷，再用乙酸乙酯進(jìn)行梯度洗脫。將所得固體用乙醚研制，得到所期產(chǎn)物。
(2)起始原料參見(jiàn)實(shí)施例1。
(3)起始原料參見(jiàn)制備1。
(4)采用硅膠柱層析純化，先用2∶1乙酸乙酯/二氯甲烷，再用乙酸乙酯進(jìn)行梯度洗脫。合并、蒸發(fā)適宜的級(jí)份，將所得物質(zhì)進(jìn)一步用硅膠柱層析純化，用93∶7∶1二氯甲烷/甲醇/0.880氨水洗脫，合并適宜的級(jí)份，蒸發(fā)，用乙醚研制殘留物，得到所期產(chǎn)物。
(5)采用類似于實(shí)施例2所述方法，用H.P.L.C.法拆分所得對(duì)映異構(gòu)對(duì)。由此得到各對(duì)映體，其中之一m.p.83-84℃，〔α〕25D-80°，(C＝1mg/ml，甲醇)，而另一個(gè)m.p.78-79℃，〔α〕25D+82°(C＝1mg/ml，甲醇)。
(6)采用硅膠柱層析純化，用80∶20∶1.5己烷/異丙醇/0.880氨水洗脫。合并適宜的級(jí)份，蒸發(fā)，將所得物質(zhì)進(jìn)一步用硅膠柱層析純化，用97∶3乙酸乙酯/乙醇洗脫，合并適宜的級(jí)份，蒸發(fā)，得到分離的對(duì)映異構(gòu)對(duì)，用乙醚研制每一對(duì)映異構(gòu)對(duì)，得到所期產(chǎn)物。
(7)采用類似于實(shí)施例2的方法，通過(guò)H.P.L.C.拆分所得對(duì)映異構(gòu)對(duì)。
實(shí)施例72-(2，4-二氟苯基)-3-(5-氟嘧啶-4-基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇
將3-(4-氯-5-氟嘧啶-6-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇對(duì)映異構(gòu)對(duì)B(見(jiàn)制備2(ⅲ))(0.307g，0.8mmol)的乙醇(20ml)溶液在常壓、室溫下，在10%鈀-炭(30mg)和乙酸鈉(0.082g，1mmol)存在下進(jìn)行氫化。5小時(shí)后，再加入10mg10%鈀-炭，氫化1小時(shí)。濾除催化劑，減壓濃縮濾液，殘留物經(jīng)硅膠閃層析純化，用97∶3乙酸乙酯/甲醇洗脫，合并適宜的級(jí)份，蒸發(fā)，用乙醚研制，得到標(biāo)題化合物，對(duì)映異構(gòu)對(duì)B，(0.249g，89%)m.p.127℃。
元素分析實(shí)測(cè)值C，55.08;H，4.00;N，19.96;C16H14F3N5O計(jì)算值C，55.01;H，4.01;N，20.05%.
將標(biāo)題化合物、對(duì)映異構(gòu)對(duì)B樣品(0.105g，0.3mmol)和1R-(-)-10-樟腦磺酸(0.07g，0.3mmol)溶解在甲醇(4ml)中，然后在0℃冷卻2小時(shí)。過(guò)濾收集所得結(jié)晶固體，得到2R、3S-2-(2，4-二氟苯基)-3-(5-氟嘧啶-4-基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇1R-(-)-10-樟腦磺酸鹽半甲醇合物(0.06g)，m.p.176℃，〔α〕25D-49.5°(C＝2mg/ml，甲醇)。
元素分析實(shí)測(cè)值C，53.09;H，5.36;N，11.43;C26H30F3N5O5S.0.5 CH3OH計(jì)算值C，53.27;H，5.36;N，11.73%.
經(jīng)單晶X-衍射分析確認(rèn)該化合物的絕對(duì)構(gòu)型。
減壓蒸發(fā)結(jié)晶濾液，并使之在二氯甲烷(10ml)和飽和碳酸氫鈉溶液(5ml)之間分配，用硫酸鎂干燥有機(jī)層，過(guò)濾，減壓濃縮。將殘留物與1S-(+)-10-樟腦磺酸(0.46g，0.2mmol)溶解在甲醇(3ml)中，然后在0℃冷卻2小時(shí)，過(guò)濾收集固體結(jié)晶，得到2S，3R-2-(2，4-二氟苯基)-3-(5-氟嘧啶-4-基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇1S-(+)-10-樟腦磺酸鹽半甲醇合物(0.052g)，m.p.176℃，〔α〕25D+54.5°(C＝2mg/ml，甲醇)。
元素分析實(shí)測(cè)值C，53.27;H，5.31;N，11.64;C26H30F3N5O5S.0.5 CH3OH計(jì)算值C，53.27;H，5.36;N，11.73%.
將按前述方法制得的1R-(-)-10-樟腦磺酸鹽(1.22g，2.1mmol)在二氯甲烷(20ml)和飽和碳酸氫鈉水溶液(3ml)之間分配，用水(5ml)洗滌有機(jī)層，然后用硫酸鎂干燥，過(guò)濾，減壓蒸餾，得到2R、3S-2-(2，4-二氟苯基)-3-(5-氟嘧啶-4-基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇(0.64g)，m.p.127℃，〔α〕25D-62°(C＝1mg/ml，甲醇)。
按類似于前述處理1R-(-)-10-樟腦磺酸鹽的方法處理前述方法所得1S-(+)-10-樟腦磺酸鹽(1.17g，2.0mmol)的樣品，得到2S、3R-2-(2，4-二氟苯基)-3-(5-氟嘧啶-4-基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇(0.63g)，m.p.127℃，〔α〕25D+59.5°(C＝2mg/ml，甲醇)。
實(shí)施例82-(2，4-二氟苯基)-3-(5-氟嘧啶-4-基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇，對(duì)映異構(gòu)對(duì)B。
將二(三甲基硅烷基)氨基鈉(79ml，1.0M的四氫呋喃溶液)加到THF(200ml)中，并在氮?dú)夥障聦⒃撊芤豪鋮s至-65℃。用30分鐘，加入4-乙基-5-氟嘧啶(10g)(參見(jiàn)制備8)的THF(100ml)溶液。在-65℃攪拌3小時(shí)后，用30分鐘滴加1-(2，4-二氟苯基)-2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)乙酮(17.7g)的THF(100ml)溶液，使之與前述稀漿液反應(yīng)。將該溶液在-65℃再攪拌1小時(shí)，然后用乙酸(20ml)處理之。溫?zé)嶂?20℃后，用水(200ml)洗滌該溶液，分離有機(jī)層，并用乙酸乙酯(200ml)反提水相，合并有機(jī)層，減壓濃縮，得到-固體，用乙醚(230ml)研制，過(guò)濾收集之。將濾液減壓濃縮，經(jīng)硅膠層析純化，用1∶1乙醚/乙酸乙酯洗脫，合并含有標(biāo)題化合物的級(jí)份，減壓濃縮，殘留物經(jīng)硅膠層析純化，用1∶1乙酸乙酯/己烷洗脫，合并所期級(jí)份，減壓蒸發(fā)，得到經(jīng)過(guò)純化的標(biāo)題化合物(0.82g)，m.p.125-127℃。
元素分析實(shí)測(cè)值C，54.89;H，4.06;N，19.66;C16H14F3N5O計(jì)算值C，55.01;H，4.01;N，20.05%.
實(shí)施例92-(2，4-二氟苯基)-3-(5-氟嘧啶-4-基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇對(duì)映異構(gòu)對(duì)A采用3-(4-氯-5-氟嘧啶-6-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇對(duì)映異構(gòu)對(duì)A(參見(jiàn)制備2(ⅲ))作為起始原料，按照類似于實(shí)施例7采用的方法，制得了標(biāo)題化合物，產(chǎn)物m.p.137℃。
元素分析實(shí)測(cè)值C，54.89;H，4.06;N，19.82;C16H14F3N5O計(jì)算值C，55.01;H，4.01;N，20.05%.
實(shí)施例103-(5-氯嘧啶-4-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇對(duì)映異構(gòu)對(duì)B 將3-(4，5-二氯嘧啶-6-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇對(duì)映異構(gòu)對(duì)B(參見(jiàn)制備6(ⅲ))(0.58g，1.46mmol)溶解在乙醇(20ml)中，在10%鈀-炭(45mg)和乙酸鈉(122mg，1.5mmol)存在下，于常壓、室溫下將上述溶液氫化7小時(shí)。然后濾除催化劑，減壓濃縮濾液。殘留物經(jīng)硅膠閃層析純化，用乙酸乙酯洗脫，合并適宜的級(jí)份，蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物(0.35g，72%)，m.p.128℃。
元素分析實(shí)測(cè)值C，51.68;H，3.89;N，18.58;C16H14ClF2N50.0.3H2O計(jì)算值C，51.76;H，3.94;N，18.87%.
實(shí)施例113-(5-氯嘧啶-4-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇對(duì)映異構(gòu)對(duì)A
采用3-(4，5-二氯嘧啶-6-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇對(duì)映異構(gòu)對(duì)A(參見(jiàn)制備6(ⅲ))作為起始原料，按類似于實(shí)施例10采用的方法，制得了標(biāo)題化合物。該產(chǎn)物為膠狀物，并經(jīng)1H-NMR譜定性。
1H-NMR(CDCl3)δ＝1.50(d，3H)，4.4(q，1H)，4.67和4.82(AB q，2H)，6.35(s，1H(OH))，6.45(m，1H)，6.62(m，1H)，7.07(m，1H)，7.6(s，1H)，8.05(s，1H)，8.5(s，1H)，8.8(s，1H)ppm.

(1)硅膠柱層析純化，用96∶4乙酸乙酯/甲醇洗脫。
(2)硅膠柱層析純化，用異丁基甲基酮洗脫。
(3)起始原料參見(jiàn)制備3。
(4)起始原料參見(jiàn)制備4。
(5)起始原料參見(jiàn)制備5。
(6)采用類似于實(shí)施例2所述方法，通過(guò)H.P.L.C.拆分所得對(duì)映異構(gòu)對(duì)。
實(shí)施例172R、3S-2-(2，4-二氟苯基)-3-(5-氟嘧啶-4-基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇和羥丙基-β-環(huán)糊精的鹽水溶液。
將羥丙基-β-環(huán)糊精(摩爾取代＝0.41，1g)放在體積為10ml的燒瓶中，并將其溶解在蒸餾水(約7ml)中。加入氯化鈉(90mg)，并將其溶解在該溶液中，加入蒸餾水使總體積達(dá)10ml。將所得溶液加到在一玻璃瓶中的2R、3S-2-(2，4-二氟苯基)-3-(5-氟嘧啶-4-基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇(100mg)(參見(jiàn)實(shí)施例7)中，將該混合物超聲振蕩處理15分鐘，然后在該瓶中再機(jī)械攪拌混合兩天，然后再加入羥丙基-β-環(huán)糊精(200mg)，在該瓶中將該混合物機(jī)械攪拌1小時(shí)，得到標(biāo)題溶液。
下列制備說(shuō)明用于實(shí)施例的某些新的起始原料的制備方法。
制備14-乙基-3-氟吡啶
將LDA(200mmol)溶解在無(wú)水THF(400ml)中(按類似于實(shí)施例1采用的方法制備LDA)，在氮?dú)夥罩?，?70℃，攪拌下，向該溶液中滴加3-氟吡啶(20g，200mmol)。在該溫度下反應(yīng)30分鐘后，向反應(yīng)物滴加碘乙烷(60g，370mmol)，使該混合物緩慢地溫?zé)岬?10℃至-5℃之間，出現(xiàn)放熱現(xiàn)象，反應(yīng)溫度升至15至20℃。將該混合物再攪拌30分鐘，然后加入水(50ml)使反應(yīng)驟停，分離有機(jī)相，用乙醚(3×50ml)提取水相，合并有機(jī)層，用硫酸鎂干燥，減壓濃縮。將所得液體進(jìn)行常壓蒸餾，得到標(biāo)題化合物(13g)，b.p.154-158℃，后者經(jīng)1H-NMR譜定性。
1H-NMR(CDCl3)δ＝1.25(t，3H，J＝10Hz)，2.65(q，2H，J＝10Hz)，7.1(t，1H，J＝8Hz)，8.3(d，1H，J＝8Hz)，8.33(s，1H)ppm.
制備23-(4-氯-5-氟嘧啶-6-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇

(ⅰ)6-乙基-5-氟嘧啶-4(3H)-酮在0℃下，將α-氟代丙?；宜嵋阴?參見(jiàn)E.D.Bergmann et al.，J.Chem.Soc.，1959，3278和D.J.Burton et al.，Tet.Lett.，30，6113(1989))(12.96g，80mmol)和甲脒乙酸鹽(8.32g，80mmol)的甲醇(50ml)溶液加到甲醇鈉(8.64g，160mmol)的甲醇(50ml)溶液中，將所得混合物在0℃攪拌1小時(shí)，在室溫?cái)嚢柽^(guò)夜，最后回流反應(yīng)30分鐘。將該混合物冷卻，加入冰乙酸(10g)中和過(guò)量的甲醇鈉。將反應(yīng)物減壓濃縮，并將殘留物溶解在熱乙酸乙酯中，濾除不溶的乙酸鈉，將濾液減壓濃縮，殘留物經(jīng)硅膠閃層析純化，用乙酸乙酯洗脫，合并、蒸發(fā)適宜的級(jí)份，用乙醚研制，得到標(biāo)題化合物(5.5g，48%)。m.p.105-106℃。
元素分析實(shí)測(cè)值C，50.38;H，4.85;N，19.63;C6H7FN2O計(jì)算值C，50.70;H，4.93;N，19.72%.
按制備7所述也可以制得標(biāo)題化合物。
(ⅱ)4-氯-6-乙基-5-氟嘧啶將(ⅰ)的產(chǎn)物(6.4g，45mmol)和三氯氧磷(30ml)的混合物加熱回流3小時(shí)，減壓蒸餾除去過(guò)量的三氯氧磷，并將殘留物倒入冰-水中，用二氯甲烷(3×50ml)抽提所得混合物，合并有機(jī)提取液，用硫酸鎂干燥，減壓除去溶劑，將所得油進(jìn)行減壓蒸餾，得到標(biāo)題化合物(4.81g，66%)，b.p.74℃/22mmHg，并經(jīng)1H-NMR 譜定性。
1H-NMR(CDCl3)δ＝1.3(t，3H，J＝10Hz)，2.9(q，2H，J＝10Hz)，8.68(s，1H)ppm.
(ⅲ)3-(4-氯-5-氟嘧啶-6-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇在氮?dú)夥障拢?70℃，用15分鐘，將(ⅱ)的產(chǎn)物(3.2g，20mmol)的THF1(30ml)溶液滴加到LDA(20mmol)的THF1(50ml)溶液中(按類似于實(shí)施例1采用的方法制備LDA)。將所得混合物在該溫度下攪拌3小時(shí)，然后向該溶液中加入1-(2，4-二氟苯基)-2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)乙酮(4.46g，20mmol)的THF(50ml)溶液，將該混合物在-70℃維持反應(yīng)1小時(shí)，然后在-50℃再反應(yīng)1小時(shí)，加入冰乙酸(1.2g)的水(10ml)溶液使反應(yīng)驟停，使該混合物溫?zé)嶂潦覝?，分離有機(jī)層，用乙酸乙酯(20ml)抽提水相，合并有機(jī)層，用硫酸鎂干燥，減壓濃縮，殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化，用3∶2乙酸乙酯/乙醚洗脫，合并、蒸發(fā)適宜的級(jí)份，用乙醚研制，得到標(biāo)題化合物，對(duì)映異構(gòu)對(duì)B(0.94g，12%)，m.p.92℃。
元素分析實(shí)測(cè)值C，49.93;H，3.57;N，18.17;C16H13ClF3N5O計(jì)算值C，50.06;H，3.39;N，18.25%.
進(jìn)一步洗脫，合并、蒸發(fā)適宜的級(jí)份，得到標(biāo)題化合物，對(duì)映異構(gòu)對(duì)A(被起始原料酮污染)。經(jīng)幾次用乙醚重結(jié)晶純化，得到產(chǎn)物，m.p.132℃。
元素分析實(shí)測(cè)值C，49.93;H，3.58;N，18.23;C16H13ClF3N5O計(jì)算值C，50.06;H，3.39;N，18.25%.
(1)可用甲苯代替THF。
制備3至5按照類似于制備2(ⅲ)所述方法，采用4-氯-6-乙基-5-氟嘧啶和適宜的1-芳基-2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)乙酮為起始原料，制得了下列表中給出的下述通式化合物

制備63-(4，5-二氯嘧啶-6-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇

(ⅰ)6-乙基嘧啶-4(3H)-酮將甲醇鈉(4.19kg，77.6mol)和甲脒乙酸鹽(3.0kg，28.8mol)溶解在甲醇(45L)中，然后在5-10℃緩慢地加入丙?；宜峒柞?2.5kg，19.2mol)的甲醇(10L)溶液，在整個(gè)滴加過(guò)程中將溫度維持在20℃以下，將所得混合物在室溫下攪拌過(guò)夜，然后加入濃鹽酸將pH調(diào)至7，將該反應(yīng)混合物減壓濃縮至大約10升體積，用水(10L)稀釋，用2-丁酮(2×30L)提取，合并有機(jī)提取液，減壓濃縮至約2升體積，用乙酸乙酯(4L)稀釋，所期產(chǎn)物從該溶液中結(jié)晶(2.4kg，70%)，用異丙醇重結(jié)晶，得到產(chǎn)物，m.p.132-134℃。
元素分析實(shí)測(cè)值C，58.45;H，6.37;N，22.41;C6H8N2O計(jì)算值C，58.05;H，6.50;N，22.57%.
(ⅱ)4，5-二氯-6-乙基嘧啶將6-乙基嘧啶-4-(3H-酮〔(ⅰ)的產(chǎn)物〕(18.6g，150mmol)溶于濃鹽酸(120ml)中，在30-40℃，用30分鐘滴加濃度為30wt.%的過(guò)氧化氫水溶液(18ml)(出現(xiàn)輕微的放熱現(xiàn)象)，將所得混合物在40℃下攪拌過(guò)夜。將該混合物減壓濃縮，將殘留物混懸/溶解在甲苯中，減壓除去甲苯。將殘留物溶解在三氯氧磷(150ml)中，加熱回流3小時(shí)，然后減壓除去過(guò)量的三氯氧磷。將殘留物倒入冰/水中，用二氯甲烷(3×50ml)提取之，合并有機(jī)提取液，用水(30ml)洗滌，用硫酸鎂干燥，減壓除去溶劑，將所得油狀物進(jìn)行減壓蒸餾，得到標(biāo)題化合物(5.4g，20%)，b.p.104℃/22mmHg，經(jīng)1H-NMR 譜定性。
1H-NMR(CDCl3)δ＝1.3(t，3H，J＝10Hz)，3.04(q，2H，J＝10Hz)，8.75(s，1H)ppm.
(ⅲ)3-(4，5-二氯嘧啶-6-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇將按類似于實(shí)施例1所采用的方法制備的LDA(13.6mmol)溶解在THF(50ml)中，于-70℃，滴加4，5-二氯-6-乙基嘧啶〔(ⅱ)的產(chǎn)物〕(2.37g，13.3mmol)，在該溫度下將所得溶液攪拌10分鐘，然后，將1-(2，4-二氟苯基)-2-(1H-1，2，4-三唑-1-基)乙酮(2.97g，13.3mmol)的THF(50ml)溶液加到上述混合物中，加入速度應(yīng)將反應(yīng)溫度維持在-50℃以下。于-70℃攪拌1小時(shí)后，再在-50℃攪拌1小時(shí)，加入濃度為10%的乙酸水溶液(11ml)使反應(yīng)驟停，分離有機(jī)相，用乙酸乙酯(2×20ml)提取水相，合并有機(jī)層，用MgSO4干燥，減壓除去溶劑后，用乙醚(25ml)研制殘留物，過(guò)濾除去未反應(yīng)的起始原料酮(1.7g)，將濾液減壓蒸餾，殘留物經(jīng)硅膠閃層析純化，用65∶35乙酸乙酯/乙醚洗脫，合并、蒸發(fā)適宜的級(jí)份，用乙醚研制，得到固體狀標(biāo)題化合物，對(duì)映異構(gòu)對(duì)B(670mg，13%)，m.p.124℃。
元素分析實(shí)測(cè)值C，47.78;H，3.33;N，17.13;C16H13Cl2F2N5O計(jì)算值C，48.00;H，3.25;N，17.50%.
進(jìn)一步洗脫，合并、蒸發(fā)適宜的級(jí)份，用乙醚研制，得到標(biāo)題化合物(固體)，對(duì)映異構(gòu)對(duì)A(527mg，10%)，m.p.137℃。
元素分析實(shí)測(cè)值C，48.02;H，3.30;N，17.39;C16H13Cl2F2N5O計(jì)算值C，48.00;H，3.25;N，17.50%.
制備76-乙基-5-氟嘧啶-4(3H)-酮
(ⅰ)2，4-二氯-5-氟嘧啶在25℃，將粉狀5-氟尿嘧啶(20g)加到三氯氧磷(141.4g)中，將所得漿液加熱至90℃，用1小時(shí)加入N，N-二甲基苯胺(37.3g)。然后將反應(yīng)物加熱回流5小時(shí)，蒸餾除去70g三氯氧磷，將該混合物冷卻至25℃，在0℃用1小時(shí)分次加入到3N HCl(200ml)中使反應(yīng)驟停，用二氯甲烷(2×70ml)從該混合物中提取標(biāo)題化合物，合并二氯甲烷層，用水(50ml)洗滌，減壓濃縮，得到油狀物(24g)，后者經(jīng)1H-NMR和質(zhì)譜定性。
1H-NMR(CDCl3)δ＝8.5(s，1H)ppm.
質(zhì)譜m/e＝166.
(ⅱ)2，4-二氯-1，6-二氫-6-乙基-5-氟嘧啶將鎂屑(4.27g)置于四氫呋喃(56ml)中，用5小時(shí)加入溴乙烷(19g)的THF(19ml)溶液。在0℃，用1小時(shí)向該漿液中加入(ⅰ)的產(chǎn)物(24g)的1，2-二甲氧基乙烷(70ml)溶液。在10℃，采用冰乙酸(10g)使反應(yīng)驟停，得到標(biāo)題化合物的溶液，直接用于下一步反應(yīng)。
(ⅲ)2，4-二氯-6-乙基-5-氟嘧啶將高錳酸鉀(23g)的水(260ml)溶液用2小時(shí)加到前述所得(ⅱ)的產(chǎn)物的溶液中，加入速度應(yīng)將反應(yīng)溫度維持在20℃以下，繼之加入5N鹽酸(30ml)，最后加入保險(xiǎn)粉(14g)的水(42ml)溶液。將該混合物脫色后，將產(chǎn)物提入乙酸乙酯(250ml)，然后減壓濃縮有機(jī)層，得到油狀物。將該油狀物在二氯甲烷(50ml)和2N氫氧化鈉(105ml)之間分配，用5%鹽水(100ml)洗滌有機(jī)層，將有機(jī)層減壓濃縮，得到標(biāo)題化合物的溶液，直接用于下一步反應(yīng)。
(ⅳ)2-氯-6-乙基-5-氟嘧啶-4(3H)-酮在前述所得(ⅲ)的產(chǎn)物溶液中加入水(6ml)。在80℃攪拌該混合物，用2小時(shí)慢慢地加入4N氫氧化鈉(45ml)。然后將該反應(yīng)物冷卻，用二氯甲烷(15ml)洗滌，然后將水層加到二氯甲烷(60ml)中，用濃鹽酸將pH調(diào)至1，分離有機(jī)層，用濃氨水將pH調(diào)至3。濾除氯化銨沉淀，然后將濾液濃縮至15ml體積，用乙酸乙酯(150ml)稀釋，將該溶液濃縮至30ml體積，過(guò)濾收集形成的標(biāo)題化合物結(jié)晶，干燥(8g)，然后用1H-NMR和質(zhì)譜定性。
1H-NMR(dmso-d6)δ＝7.3(可交換的)，2.4(m，2H)，1.1(t，3H)ppm.
質(zhì)譜m/e＝176.
(ⅴ)6-乙基-5-氟嘧啶-4(3H)-酮將前述(ⅳ)的產(chǎn)物(6g)溶于乙醇(60ml)中，加入乙酸鈉(5.5g)和5%鈀-炭(0.6g)，在3個(gè)大氣壓下將該混合物氫化8小時(shí)，濾除催化劑，將濾液濃縮至10ml體積，然后與水(2ml)和二氯甲烷(80ml)混合，加入甲苯(32ml)，將該溶液濃縮至5-6ml體積，然后再次與甲苯(8ml)混合，過(guò)濾分離結(jié)晶出的標(biāo)題化合物，用1H-NMR和質(zhì)譜定性(產(chǎn)量＝3.9g)。
1H-NMR(dmso-d6)δ＝8.0(s，1H)，2.5(m，2H)，1.15(t，3H)ppm.
質(zhì)譜m/e＝142.
制備84-乙基-5-氟嘧啶 將2，4-二氯-6-乙基-5-氟嘧啶(10g)(參見(jiàn)制備7(ⅲ)，乙酸鈉(8.83g)，5%鈀-炭(“濕度”50%，2g)及甲醇(30ml)的混合物在50℃、3個(gè)大氣壓下氫化5小時(shí)。小心地將所得漿液通過(guò)纖維基質(zhì)濾墊過(guò)濾，用甲醇(5ml)進(jìn)一步洗滌該濾墊，將所得橙色濾液在64℃進(jìn)行常壓蒸餾，得到無(wú)色蒸餾液，使之在水(300ml)和乙醚(40ml)之間分配，分離兩相，用水(4×50ml)洗滌有機(jī)相，用MgSO4干燥，于室溫下減壓除去溶劑，得到淺黃色液體狀標(biāo)題化合物(2.2g)。
制備92-氯-4-乙基-5-氟嘧啶
(ⅰ)2-甲基-2-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-1，3-丙二酸二乙酯使氫化鈉(60%油分散體，2.8g)和甲基丙二酸二乙酯(6g)在-10℃，在THF(200ml)中進(jìn)行反應(yīng)。30分鐘后，在-10℃，用30分鐘時(shí)間加入2，4-二氯-5-氟嘧啶(5g)(見(jiàn)制備7)的THF(25ml)溶液，使該反應(yīng)物在二氯甲烷(200ml)和水(200ml)之間分配，用乙酸酸化，分層。減壓濃縮有機(jī)層，得到一油狀物，后者經(jīng)硅膠層析純化，用二氯甲烷洗脫，合并、蒸發(fā)適宜的級(jí)份，得到標(biāo)題化合物(9g)，并經(jīng)1H-NMR和質(zhì)譜定性。
1H-NMR(CDCl3)δ＝8.5(d，1H)，4.6(m，4H)，1.9(s，3H)，1.3(t，3H)ppm.
質(zhì)譜m/e＝304.
(ⅱ)2-氯-4-乙基-5-氟嘧啶將(ⅰ)的產(chǎn)物(3.2g)溶解在乙酸(25ml)中，用5N HCl(10ml)稀釋。先將該混合物在100℃加熱16小時(shí)，然后冷卻，使之在水(30ml)和二氯甲烷(45ml)之間分配，分離二氯甲烷層，干燥，減壓濃縮，得到一油狀物，采用硅膠層析分離標(biāo)題化合物，用二氯甲烷洗脫，產(chǎn)物經(jīng)1H-NMR和質(zhì)譜定性(產(chǎn)量＝350mg)。
1H-NMR(CDCl3)δ＝8.4(s，1H)，2.9(m，2H)，1.3(t，3H)ppm.
質(zhì)譜m/e＝160.
在小鼠身上評(píng)價(jià)對(duì)抗煙曲霉菌的體內(nèi)活性采用本說(shuō)明書(shū)第14頁(yè)歸納的一般試驗(yàn)法，給一組小鼠接種煙曲霉菌菌珠。然后按20mg/kg的標(biāo)準(zhǔn)劑量用受試化合物處理每只小鼠(b.i.d.)，連續(xù)給藥5天，在第10天評(píng)價(jià)小鼠。
按未治療組小鼠死亡后處理組小鼠的存活率，以及感染小鼠治愈數(shù)計(jì)算活性。
采用本說(shuō)明書(shū)具體實(shí)施例中所述的兩個(gè)化合物及歐洲專利申請(qǐng)NO.89307920.2(EP-A-0357241)中具體實(shí)施例所述的兩個(gè)化合物，通過(guò)比較實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果列于下表


權(quán)利要求
1.制備藥物組合物的方法，其特征在于先用下述方法制備式(Ⅰ)化合物或其可藥用的鹽，再將所說(shuō)化合物或其鹽與藥用稀釋劑或載體混合，式(Ⅰ)為 式中R是由1或2個(gè)鹵素取代的苯基；R1是C1-4烷基；R2是H；X是CH或N；和Y是F或Cl；所說(shuō)制備式(Ⅰ)化合物或其可藥用的鹽的方法包括(a)使1′-去質(zhì)子形式的式(Ⅱ)化合物與下式(Ⅲ)化合物反應(yīng)， 式中R1、R2、X和Y的定義如前述， 式中R的定義如前述，在該反應(yīng)之后，根據(jù)需要，可將式(Ⅰ)化合物轉(zhuǎn)化為它的可藥用鹽；(b)使下述式(Ⅳ)或(Ⅵ)化合物或者與1H-1，2，4-三唑的堿鹽或者在附加的堿存在下與1H-1，2，4-三唑反應(yīng)， 式中R、R1、R2、X和Y的定義如前述，Z是離去基團(tuán)；在該反應(yīng)之后，根據(jù)需要，可將式(Ⅰ)化合物轉(zhuǎn)化為它的可藥用鹽；或(c)將下式(Ⅺ)化合物還原 式中，R、R1、R2和Y的定認(rèn)如前述，Z2和Z3分別獨(dú)立地選自H和可通過(guò)還原反應(yīng)選擇性地除去的基團(tuán)，其前提是Z2和Z3不能同時(shí)為氫；在該反應(yīng)之后，根據(jù)需要，可將式(ⅠA)化合物轉(zhuǎn)化為它的可藥用鹽。
2.按權(quán)利要求1所述方法，其中，所述去質(zhì)子形式是式(Ⅱ)化合物的鋰鹽、鈉鹽鉀鹽。
3.按權(quán)利要求1所述方法，其中，Z是氯、溴或C1-4烷磺酰氧基。
4.按權(quán)利要求1所述方法，其中，使用的制備化合物的原料是式(Ⅳ)化合物。
5.按權(quán)利要求1、3和4中任一項(xiàng)所述方法，其中，所述1H-1，2，4-三唑的堿鹽既可以是鈉鹽、鉀鹽，也可以是四正丁銨鹽。
6.按權(quán)利要求1、3和4中任一項(xiàng)所述方法，其中，所述附加堿是碳酸鈉或碳酸鉀。
7.按權(quán)利要求1所述方法，其中，Z2是可以通過(guò)還原反應(yīng)選擇性地除去的基團(tuán)，Z3是H。
8.按權(quán)利要求7所述方法，其中，所述可通過(guò)還原反應(yīng)選擇性地除去的基團(tuán)是鹵素。
9.按權(quán)利要求8所述方法，其中，鹵素基團(tuán)是氯。
10.按權(quán)利要求1和7-9中任一項(xiàng)所述方法，其中，采用鈀-炭催化劑通過(guò)氫解法進(jìn)行所述還原反應(yīng)。
11.按權(quán)利要求10所述方法，其中，還存在有乙酸鈉。
12.按權(quán)利要求1所述方法，其中R是由1或2個(gè)分別獨(dú)立選自氟和氯的取代基取代的苯基。
13.按權(quán)利要求12所述方法，其中，R是2-氟苯基、4-氟苯基、2，4-二氟苯基、2-氯苯基或2，4-二氯苯基;R1是甲基;和R2是H。
14.按權(quán)利要求13所述方法，其中，R是2-氟苯基、2，4-二氟苯基、2-氯苯基或2，4-二氯苯基;R1是甲基;R2是H;和Y是F。
15.按權(quán)利要求1所述方法，其中由化合物制備方法制得的化合物是式中R2是H，而且其構(gòu)型為2R、3S的式(Ⅰ)化合物，即
16.按權(quán)利要求15所述方法，其中化合物制備方法制得的化合物或其可藥用鹽為2R、3S-2-(2，4-二氟苯基)-3-(3-氟吡啶-4-基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇，2R、3S-2-(2-氯苯基)-3-(3-氟吡啶-4-基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇，2R、3S-2-(2-氟苯基)-3-(3-氟吡啶-4-基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇，2R、3S-2-(2，4-二氟苯基)-3-(5-氟嘧啶-4-基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇，或2R、3S-2-(2，4-二氯苯基)-3-(5-氟嘧啶-4-基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇。
17.按權(quán)利要求1所述方法，其中，將式(Ⅰ)化合物與環(huán)糊精的羥烷基衍生物制成配合物。
18.按權(quán)利要求17所述方法，其中，所述羥烷基衍生物是羥丙基衍生物，所述環(huán)糊精是α-或β-環(huán)糊精。
全文摘要
本發(fā)明提供了含式(I)抗真菌化合物及其可藥用鹽的組合物的制備方法，式中R是由1至3個(gè)取代基取代的苯基，所述取代基分別獨(dú)立地選自鹵素、-CF
文檔編號(hào)C07D401/10GK1100421SQ9410235
公開(kāi)日1995年3月22日 申請(qǐng)日期1994年2月26日 優(yōu)先權(quán)日1990年2月2日
發(fā)明者史蒂文·J·雷, 肯尼思·理查德遜 申請(qǐng)人:美國(guó)輝瑞有限公司