專(zhuān)利名稱：新的β-內(nèi)酰胺類(lèi)、制備紫杉烷的方法及帶側(cè)鏈紫杉烷類(lèi)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的β-內(nèi)酰胺類(lèi)。本發(fā)明β-內(nèi)酰胺類(lèi)在制備帶側(cè)鏈紫杉烷類(lèi)(taxanes)如紫杉酚和紫杉酚衍生物中發(fā)現(xiàn)可用作中間體。本發(fā)明還涉及偶合β-內(nèi)酰胺類(lèi)以形成此類(lèi)帶側(cè)鏈紫杉烷類(lèi)的新的方法以及涉及新的帶側(cè)鏈紫杉烷類(lèi)。
紫杉烷類(lèi)是在醫(yī)藥領(lǐng)域具有應(yīng)用價(jià)值的雙萜類(lèi)化合物。例如，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)紫杉酚，一種具有如下結(jié)構(gòu)的紫杉烷，是有效的抗癌劑， 其中Ph為苯基，Ac為乙?；⑶褺z為苯甲?；?br> 天然存在的紫杉烷類(lèi)如紫杉酚可以在植物原料中發(fā)現(xiàn)，并已經(jīng)由其中分離得到。但是，此類(lèi)紫杉烷類(lèi)在植物原物中的含量相當(dāng)少，例如對(duì)于紫杉酚來(lái)講，作為此化合物的來(lái)源，需要大量生長(zhǎng)緩慢的紫杉屬樹(shù)。因此，現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)于其合成進(jìn)行了大量研究，其中包括制備天然存在的紫杉烷類(lèi)如紫杉酚的半合成路線以及合成制備醫(yī)藥上適用的其類(lèi)似物的制備路線。
本發(fā)明提供了下列式Ⅰ新的β-內(nèi)酰胺類(lèi)化合物及其鹽 其中R1和R2(ⅰ)兩者同時(shí)為相同的烷基;
(ⅱ)一起形成環(huán)烷基;
(ⅲ)一起形成環(huán)烯基;或(ⅳ)一起形成雜環(huán)基;
R3為烷基;
R4為芳基;
R5為氫、芳基羰基或烷氧羰基。
本發(fā)明β-內(nèi)酰胺類(lèi)在制備帶側(cè)鏈的紫杉烷類(lèi)如紫杉酚和紫杉酚衍生物中可用作中間體，特別是此化合物可以與紫杉烷部分偶合從而形成上述側(cè)鏈。
由于紫杉烷類(lèi)的立體化學(xué)結(jié)構(gòu)可影響它們的藥物活性，因此較理想的是使用可得到具有所需立體化學(xué)紫杉烷最終產(chǎn)物的β-內(nèi)酰胺類(lèi)中間體。在本發(fā)明β-內(nèi)酰胺類(lèi)中，上述式Ⅰ中用星號(hào)標(biāo)記的碳原子為非不對(duì)稱碳原子。當(dāng)此碳原子中心為不對(duì)稱中心時(shí)，則可形成非對(duì)映異構(gòu)體混合物。本發(fā)明β-內(nèi)酰胺類(lèi)相對(duì)于其中在相應(yīng)位置上含有不對(duì)稱碳原子的β-內(nèi)酰胺類(lèi)，提供了許多優(yōu)異之處，因?yàn)楫?dāng)在制備后一化合物時(shí)，或者當(dāng)它們與紫杉烷部分偶合時(shí)，所得產(chǎn)物是立體構(gòu)型混合物形式。此立體異構(gòu)體混合物導(dǎo)致原料的無(wú)效使用，并使分離和純化過(guò)程復(fù)雜化。
本發(fā)明式Ⅰ的β-內(nèi)酰胺類(lèi)的優(yōu)點(diǎn)還在于可以良好的產(chǎn)率和純度制得紫杉烷最終產(chǎn)物。特別是，當(dāng)本發(fā)明β-內(nèi)酰胺類(lèi)在制備帶側(cè)鏈的紫杉烷類(lèi)中用作中間體時(shí)，可使得原料有效轉(zhuǎn)化，因而只使用相對(duì)少量的原料，并且可簡(jiǎn)化分離和純化過(guò)程。
本發(fā)明還提供了利用上述式Ⅰ的β-內(nèi)酰胺類(lèi)制備帶側(cè)鏈的紫杉烷類(lèi)的新方法以及涉及如此制備的新的帶側(cè)鏈的紫杉烷類(lèi)。
本發(fā)明詳述如下在此單獨(dú)或作為其它基團(tuán)部分使用的術(shù)語(yǔ)“烷基”或“烷”表示可任意取代的直鏈和支鏈的飽和烴基，優(yōu)選正鏈中具有1～10個(gè)碳原子。未取代的此類(lèi)基團(tuán)的實(shí)例包括甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、異丁基、戊基、己基、異己基、庚基、4，4-二甲基戊基、辛基、2，2，4-三甲基戊基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基等。取代基的實(shí)例可包括下列一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)鹵素、烷氧基、烷硫基、烯基、炔基、芳基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、羥基、或被保護(hù)的羥基、羧基(-COOH)、烷氧羰基、烷羰氧基、氨基甲?；?NH2-CO-)、氨基(-NH2)、一烷基氨基或二烷基氨基、或巰基(-SH)。
此處所用術(shù)語(yǔ)“低級(jí)烷”或“低級(jí)烷基”表示如上所述烷基在其正鏈上有1～4個(gè)碳原子的、可任意取代的基團(tuán)。
此處所用術(shù)語(yǔ)“烷氧基”或“烷硫基”表示分別經(jīng)氧鍵(-O-)或硫鍵(-S-)成鍵連接的如上所述的烷基。此處所用術(shù)語(yǔ)“烷氧羰基”表示經(jīng)羰基成鍵連接的烷氧基。此處所用術(shù)語(yǔ)“烷羰氧基”表示依次經(jīng)羰基和經(jīng)氧鍵成鍵連接的烷基。術(shù)語(yǔ)“一烷基氨基”或“二烷基氨基”分別表示被上述一或兩個(gè)烷基取代的氨基。
在此單獨(dú)或作為其它基團(tuán)部分使用的術(shù)語(yǔ)“烯基”表示進(jìn)一步含有至少一個(gè)碳-碳雙鍵的可任意取代的上述烷基。取代基的實(shí)例包括一個(gè)或多個(gè)上述烷基，或者一個(gè)或多個(gè)上述烷基的取代基。
在此單獨(dú)或作為其它基團(tuán)部分使用的術(shù)語(yǔ)“炔基”表示進(jìn)一步含有至少一個(gè)碳-碳三鍵的可任意取代的上述烷基。取代基的實(shí)例包括一個(gè)或多個(gè)上述烷基，或者一個(gè)或多個(gè)上述烷基的取代基。
在此單獨(dú)或作為其它基團(tuán)部分使用的術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”表示可任意取代的、飽和的環(huán)烴環(huán)，優(yōu)選含有1～3個(gè)環(huán)并且每個(gè)環(huán)含有3～7個(gè)碳原子。未取代的此類(lèi)基團(tuán)的實(shí)例包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基、環(huán)癸基、環(huán)十二烷基和金鋼烷基，取代基的實(shí)例包括一個(gè)或多個(gè)上述烷基，或者一個(gè)或多個(gè)上述烷基的取代基。
在此單獨(dú)或作為其它基團(tuán)部分使用的術(shù)語(yǔ)“環(huán)烯基”表示上述環(huán)烷基中進(jìn)一步含有至少一個(gè)碳-碳雙鍵從而形成一個(gè)部分不飽和環(huán)的可任意取代的基團(tuán)。取代基的實(shí)例包括一個(gè)或多個(gè)上述烷基，或者一個(gè)或多個(gè)上述烷基的取代基。
在此單獨(dú)或作為其它基團(tuán)部分使用的術(shù)語(yǔ)“芳”或“芳基”表示可任意取代的芳香族碳環(huán)基團(tuán)，優(yōu)選含有1或2個(gè)環(huán)并含有6～12個(gè)環(huán)碳原子。未取代的此類(lèi)基團(tuán)的實(shí)例包括苯基、聯(lián)苯基和萘基。取代基的實(shí)例包括一個(gè)或多個(gè)、優(yōu)選三個(gè)或少于三個(gè)下述基團(tuán)硝基、上述烷基、或者上述烷基的取代基。
在此單獨(dú)或作為其它基團(tuán)部分使用的術(shù)語(yǔ)“芳基羰基”表示經(jīng)羰基成鍵連接的上述芳基。
在此單獨(dú)或作為其它基團(tuán)部分使用的術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)基”或“雜環(huán)”表示可任意取代的、完全飽和的或不飽和的、在至少一個(gè)環(huán)中具有至少一個(gè)雜原子的芳族或非芳族環(huán)基，優(yōu)選每個(gè)環(huán)中具有5或6個(gè)原子的單環(huán)或雙環(huán)基。雜環(huán)基可以例如在環(huán)中含有1或2個(gè)氧原子、1或2個(gè)硫原子、和/或1～4個(gè)氮原子。每個(gè)雜環(huán)基可經(jīng)環(huán)系中的任一碳原子或雜原子成鍵連接。雜環(huán)基的實(shí)例包括噻吩基、呋喃基、吡咯基、吡啶基、咪唑基、吡咯烷基、哌啶基、吖庚因基、吲哚基、異氮雜茚基、喹啉基、異喹啉基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、苯并噁二唑基、苯并呋咱基，特別是四氫吡喃基(如4-四氫吡喃基)。取代基的實(shí)例包括一個(gè)或多個(gè)上述烷基，或者一個(gè)或多個(gè)上述烷基的取代基。
在此單獨(dú)或者作為其它基團(tuán)部分使用的術(shù)語(yǔ)“鹵素”或“鹵”表示氯、溴、氟和碘。
此處所用術(shù)語(yǔ)“紫杉烷部分”表示含有下列主結(jié)構(gòu)的基團(tuán)
其中主結(jié)構(gòu)可以被取代并且在其環(huán)系中可含有不飽和烯鍵。
在此所用術(shù)語(yǔ)“紫杉烷”表示含有上述紫杉烷部分的化合物。在此所用術(shù)語(yǔ)“帶側(cè)鏈的紫杉烷”表示含有上述紫杉烷部分、且進(jìn)一步含有側(cè)鏈成鍵連接至所述部分的C-13位上的化合物。
在此所用術(shù)語(yǔ)“羥基保護(hù)基”表示任一可保護(hù)游離羥基的基團(tuán)，其應(yīng)在參加反應(yīng)后在不破壞分子的其它部分的情況下脫除。此類(lèi)基團(tuán)及其合成可參見(jiàn)“Protective Groups in Orgunic Synthesis”，T.W.Greene，John Wiley and Sons，1981，或Fieser ＆ Fieser。羥基保護(hù)基的實(shí)例包括甲氧甲基、1-乙氧乙基、1-甲氧基-1-甲基乙基、芐氧甲基、(β-三甲基甲硅烷基乙氧基)甲基、四氫吡喃基、2，2，2-三氯乙氧羰基、叔丁基(二苯基)甲硅烷基、三烷基甲硅烷基、三氯甲氧羰基和2，2，2-三氯乙氧甲基。
此處所用術(shù)語(yǔ)“鹽”包括與有機(jī)和/或無(wú)機(jī)酸和/或堿形成的鹽。
此處所用術(shù)語(yǔ)“堿金屬甲硅烷基氨化物堿”表示含有下列部分的堿
其中M為堿金屬例如鋰、鈉或鉀。
本發(fā)明優(yōu)選的β-內(nèi)酰胺類(lèi)為在室溫為結(jié)晶化合物而非液體(油狀物)的式Ⅰ化合物。此結(jié)晶化合物比液體化合物有利，因?yàn)榇私Y(jié)晶化合物特別是在大規(guī)模生產(chǎn)時(shí)更容易制備并可以較純的形式獲得，因而在隨后制備帶側(cè)鏈的紫杉烷類(lèi)如紫杉酚和紫杉酚衍生物時(shí)更適于用作中間體。
特別優(yōu)選的式Ⅰ化合物為其中R1和R2兩者均為相同的未取代的低級(jí)烷基，特別是R1和R2均為甲基;R3為未取代的低級(jí)烷基，特別是為甲基;R4為苯基;以及R5為氫、苯甲?；蚴宥⊙豸驶氖舰窕衔?。
式Ⅰ的β-內(nèi)酰胺類(lèi)可用下列制備式Ⅰ順式β-內(nèi)酰胺類(lèi)的反應(yīng)路線中所示方法制備。
反應(yīng)路線
式Ⅱ原料化合物可用在此用作參考文獻(xiàn)的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?7/822，015(Patel等人1992年1月15日(代理人登記號(hào)LD47))中所述方法制備，特別優(yōu)選的是使用立體異構(gòu)體(即對(duì)映體)純的β-內(nèi)酰胺類(lèi)。
在酸催化劑存在下通過(guò)將式Ⅱ化合物與式Ⅲ或Ⅳ化合物反應(yīng)可將式Ⅱ化合物轉(zhuǎn)變成式Ⅰ化合物。
其中R1、R2和R3如上定義，并且R1a(ⅰ)當(dāng)R2為烷基時(shí)可使R1a-CH2-是與R2相同的基團(tuán)或者(ⅱ)與R2和與R1a及R2成鍵連接的原子一起形成一個(gè)均含有至少一個(gè)碳-碳雙鍵的環(huán)烯基或雜環(huán)基。
式Ⅲ化合物的實(shí)例包括化合物二甲氧基丙烷、 式Ⅳ化合物的實(shí)例包括化合物
制備其中R1和R2兩者均為相同的烷基的式1化合物，特別優(yōu)選的方法是在酸催化劑，例如有機(jī)磺酸如對(duì)甲苯磺酸吡啶嗡(PPTS)、甲苯磺酸或樟腦磺酸存在下，將式Ⅱ化合物與式Ⅳ化合物反應(yīng)，其中R3如上定義而R1a為可使R1a-CH2-與R2相同的基團(tuán)。優(yōu)選的式Ⅳ化合物為2-甲氧基丙烷。
上述反應(yīng)優(yōu)選在約-30℃～約30℃，特別是在約0℃和常壓下進(jìn)行。反應(yīng)可在例如約0.5小時(shí)～約10小時(shí)內(nèi)完成，并優(yōu)選在惰性氣體如氬氣氛下進(jìn)行。
式Ⅲ或Ⅳ化合物對(duì)式Ⅱ化合物的優(yōu)選摩爾比為約6∶1至約1∶1，所用酸的量為催化反應(yīng)的有效量。
優(yōu)選使用對(duì)反應(yīng)呈惰性的有機(jī)溶劑，特別優(yōu)選的溶劑為丙酮、二甲基甲酰胺、四氫呋喃、二氯甲烷、乙腈和甲苯。溶劑的優(yōu)選量為使得式Ⅱ化合物對(duì)溶劑的比率為約1∶5至約1∶40(重量∶體積)。
可任意地將其中R5為氫的如此所得的式Ⅰ的β-內(nèi)酰胺轉(zhuǎn)變成其中R5為芳基羰基或烷氧羰基的式Ⅰ的β-內(nèi)酰胺，其方法為在預(yù)選分離或不分離其中R5為氫的β-內(nèi)酰胺的情況下，通過(guò)將其中R5為氫的β-內(nèi)酰胺與式Ⅴ或Ⅵ化合物反應(yīng)，
其中R6為芳基或烷氧基;和X為鹵素，特別是氯。
上述反應(yīng)優(yōu)選在叔胺如二異丙基(乙基)胺、三乙胺和4-二甲氨基吡啶存在下進(jìn)行。式Ⅴ化合物優(yōu)選為苯甲酰氯，用于制備紫杉酚時(shí)更是這樣。式Ⅵ化合物優(yōu)選為BOC酸酐(其中R6為叔丁氧基的化合物Ⅵ)，特別是用于制備taxotere時(shí)。
在上述反應(yīng)中，優(yōu)選采用約-30℃至約30℃，特別是約0℃的溫度和常壓下進(jìn)行反應(yīng)。例如，反應(yīng)可在約2小時(shí)至約10小時(shí)內(nèi)完成，并優(yōu)選在惰性氣體如氬氣氛下進(jìn)行。
式Ⅴ或Ⅵ化合物對(duì)其中R5為氫的式Ⅰ的β-內(nèi)酰胺的優(yōu)選摩爾比為約1∶1至約5∶1。叔胺對(duì)其中R5為氫的式Ⅰ的β-內(nèi)酰胺的優(yōu)選摩爾比為約1∶1至約5∶1。
優(yōu)選使用對(duì)反應(yīng)呈惰性的有機(jī)溶劑，特別優(yōu)選的溶劑為二氯甲烷、四氫呋喃、乙腈、丙酮、二甲基甲酰胺和甲苯。溶劑的優(yōu)選使用量為，以溶劑和原料β-內(nèi)酰胺的總重量計(jì)，原料β-內(nèi)酰胺為約15%至約80%重量比。
在下述偶合方法中優(yōu)選使用其中R5不為氫的β-內(nèi)酰胺。
紫杉烷類(lèi)為含有如上所述的下式紫杉烷部分的二萜類(lèi)化合物 特別令人感興趣的是含有其中11，12-位通過(guò)烯鍵成鍵連接，并且其中13-位含有側(cè)鏈的紫杉烷部分的紫杉烷類(lèi)化合物，此紫杉烷類(lèi)化合物的實(shí)例如紫杉酚。具有藥物活性的紫杉烷類(lèi)化合物如紫杉酚可用作抗癌劑用來(lái)治療癌癥患者，所述癌癥如乳腺癌、卵巢癌、結(jié)腸癌或肺癌、黑素瘤和白血病。
本發(fā)明提供了一種制備帶側(cè)鏈的紫杉烷的新方法，該方法為偶合本發(fā)明β-內(nèi)酰胺以形成所述的側(cè)鏈。特別是，本發(fā)明提供了一種制備下列式Ⅶ帶側(cè)鏈的紫杉烷或其鹽的新方法 其中R1、R2、R3、R4和R5如上定義，T為直接在所述紫杉烷C-13位上成鍵連接的紫杉烷部分;
其包括的步驟為在偶合劑存在下，將本發(fā)明式Ⅰ的β-內(nèi)酰胺或其鹽與下列式Ⅷ紫杉烷化合物或其鹽反應(yīng)HO-T(Ⅷ)其中T如上定義;并可任意地將所述式Ⅶ化合物的-OC(R1)(R2)(OR3)基團(tuán)轉(zhuǎn)變成羥基，從而形成下列式Ⅸ的帶側(cè)鏈的紫杉烷或其鹽 加上如上所述的側(cè)鏈，其本身和自行地可使紫杉烷產(chǎn)物提高或產(chǎn)生更理想的藥物活性，或者與原料化合物相比可使紫杉烷產(chǎn)物更易于轉(zhuǎn)變成具有更強(qiáng)或更理想的藥物活性的紫杉烷，可利用本發(fā)明制備帶側(cè)鏈的紫杉烷的方法制備的紫杉烷類(lèi)化合物的實(shí)例包括歐洲專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)400，971、美國(guó)專(zhuān)利號(hào)4，876，399、美國(guó)專(zhuān)利號(hào)4，857，653、美國(guó)專(zhuān)利號(hào)4，814，470、美國(guó)專(zhuān)利號(hào)4，924，012和美國(guó)專(zhuān)利號(hào)4，924，011中所述化合物，上述所有文獻(xiàn)在此均作為參考文獻(xiàn)。優(yōu)選制得具有如下結(jié)構(gòu)式的taxotere 或者，最優(yōu)選的是如式Ⅸ化合物的紫杉酚。
可用于本發(fā)明方法中的在其中C-13位上直接鍵合有OH基團(tuán)的式Ⅷ化合物的實(shí)例如上述參考文獻(xiàn)中所述，特別是如歐洲專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)400，971中所述，最優(yōu)選地，式Ⅷ化合物為式X化合物
其中R7為氫、烷基羰基或羥基保護(hù)基，特別是乙?；?
并且R8為氫或羥基保護(hù)基;特別是為7-0-三烷基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ如7-0-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ或7-0-三甲基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ(baccatin Ⅲ)。例如，7-0-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ可如本文參考文獻(xiàn)(Dents等人，J.Am.Chem.Soc.，110，5917(1988))所述由10-去乙?；鶟{果赤霉素Ⅲ得到。優(yōu)選將7-0-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ按本申請(qǐng)實(shí)施例的方法制備。例如，最一般的情況是在偶合側(cè)鏈之前可就地將其中R7為氫的化合物(X)酰化。
本發(fā)明方法中所用偶合劑可以是任何有利于偶合形成式Ⅶ帶側(cè)鏈的紫杉烷的偶合試劑，實(shí)例有叔胺類(lèi)如三乙胺、二異丙基(乙基)胺、吡啶、N-甲基咪唑和4-二甲氨基吡啶(DMAP)，以及可在式Ⅷ紫杉烷C-13位上形成金屬醇鹽的金屬堿如二異丙基氨化鋰(LDA)、未取代的低級(jí)烷基鋰化合物或苯基鋰。
本發(fā)明方法的偶合劑優(yōu)選為堿金屬甲硅烷基氨化物堿或位阻的堿金屬甲硅烷基氨化物堿。此類(lèi)堿的實(shí)例為下列式Ⅺ化合物 其中R9和R10為三烷基甲硅烷基、環(huán)烷基、或者與和它們成鍵連接的氮原子一起形成一個(gè)雜環(huán)基，并且M為堿金屬如鋰、鈉或鉀。
優(yōu)選的堿，特別是式Ⅺ的堿金屬甲硅烷基氨化物堿為于所用反應(yīng)介質(zhì)中可溶性堿，最優(yōu)選的是堿金屬六甲基二甲硅烷基氨化物(R9和R10為三甲基甲硅烷基而M為鈉、鋰或鉀)，具體地是六甲基二甲硅烷基氨化鋰(LHMDS)?！拔蛔璧膲A金屬氨化物堿”包括含有基團(tuán)-N(M)-(其中M如上定義)的堿，并且在β-內(nèi)酰胺與含C-13羥基紫杉烷的偶合反應(yīng)中，此堿與六甲基二甲硅烷基氨化鋰具有基本上相同、或者更大的位阻作用。此類(lèi)位阻堿的實(shí)例包括堿金屬四甲基哌啶類(lèi)化合物和堿金屬二環(huán)己基氨化物。
本發(fā)明方法中上述堿金屬堿，特別是甲硅烷基氨化物的優(yōu)點(diǎn)在于它們不是強(qiáng)的親核試劑，因而可減低或消除式Ⅷ紫杉烷原料的降解，并可以較高的產(chǎn)率(優(yōu)選大于或等于約90%)和純度(優(yōu)選大于或等于約98%)得到紫杉烷產(chǎn)物。本發(fā)明還提供了一種方法，在該方法中，用堿金屬甲硅烷基氨化物或位阻的金屬氨化物堿用作偶合劑，將式Ⅷ紫杉烷與任何能在所述紫杉烷C-13位上提供側(cè)鏈的合適的β-內(nèi)酰胺(包括但不限于本發(fā)明的β-內(nèi)酰胺類(lèi))進(jìn)行偶合反應(yīng)。
本發(fā)明上述偶合方法優(yōu)選在約-70℃至約25℃，特別是在約-30℃至約0℃，并且于常壓下進(jìn)行。例如，反應(yīng)可于約一個(gè)半小時(shí)至約4小時(shí)內(nèi)完成，并優(yōu)選在惰性氣體如氬氣氛下進(jìn)行。
式Ⅷ紫杉烷原料化合物對(duì)β-內(nèi)酰胺的優(yōu)選摩爾比為大于約1∶1.6，最優(yōu)選為約1∶1至約1∶1.3，特別是約1∶1.2。式Ⅷ紫杉烷原料化合物對(duì)堿金屬堿如甲硅烷基氨化物堿的優(yōu)選摩爾比為約1∶1.1至約1∶1.5，特別是約1∶1.1。
優(yōu)選使用對(duì)反應(yīng)呈惰性的有機(jī)溶劑。特別優(yōu)選的溶劑是四氫呋喃(THF)、甲苯和乙醚。優(yōu)選使用的溶劑量為使式Ⅷ紫杉烷原料對(duì)溶劑的比率為約1∶1至約1∶5，優(yōu)選1∶2.5(重量∶體積)。
本發(fā)明方法進(jìn)一步包括，在形成式Ⅶ帶側(cè)的鏈紫杉烷后，可任意地將基團(tuán)-OC(R1)(R2)(OR3)轉(zhuǎn)變成羥基。通過(guò)適宜的方法，如通過(guò)與酸例如無(wú)機(jī)酸(如HCl或HF)或有機(jī)酸(如乙酸等)反應(yīng)，可任意地將此基團(tuán)與其它羥基保護(hù)基(如紫杉烷部分上的那些)相繼或同時(shí)轉(zhuǎn)變成羥基。
脫保護(hù)反應(yīng)優(yōu)選在約-30℃至約60℃，特別是在約0～25℃的溫度并于常壓下進(jìn)行。例如，反應(yīng)可在約2小時(shí)至約72小時(shí)內(nèi)完成，并優(yōu)選在惰性氣體如氬氣氛下進(jìn)行。
脫保護(hù)反應(yīng)所用酸對(duì)紫杉烷的優(yōu)選摩爾比為約1∶1至約20∶1(體積∶重量)。優(yōu)選使用對(duì)反應(yīng)呈惰性的有機(jī)溶劑，特別優(yōu)選的溶劑為乙醇/四氫呋喃混合液或乙腈、丙酮和水。溶劑量?jī)?yōu)選為使得紫杉烷∶溶劑總量(重量∶體積)為約1∶10至約1∶50，優(yōu)選1∶30(特別是四氫呋喃/乙醇和HCl/水)時(shí)的溶劑量)。
本發(fā)明還提供了本文所述式Ⅶ新的帶側(cè)鏈的紫杉烷類(lèi)及其鹽。
紫杉酚一般優(yōu)選利用本發(fā)明方法作為帶側(cè)鏈的紫杉烷化合物而制備。例如，優(yōu)選在堿金屬甲硅烷基氨化物堿存在下，將作為式Ⅷ化合物的7-0-三烷基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ如7-0-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ與作為β-內(nèi)酰胺的(3R-順式)-1-苯甲酰基-3-(1-甲氧基-1-甲基乙氧基)-4-苯基-2-氮雜環(huán)丁酮反應(yīng)，可制備紫杉酚。為了得到紫杉酚，在側(cè)鏈生成后可用例如上述脫保護(hù)方法將三乙基甲硅烷氧基和1-甲氧基-1-甲基乙氧基轉(zhuǎn)變成羥基。
在本發(fā)明任一方法中，必要時(shí)可使用或制備反應(yīng)物或產(chǎn)物的鹽或溶劑化物如水合物。
可以理解，本文所述β-內(nèi)酰胺類(lèi)和紫杉烷類(lèi)化合物可以以一種以上的立體異構(gòu)體形式存在，所述化合物的所有立體異構(gòu)體應(yīng)為單一一種立體異構(gòu)體(即基本上無(wú)其它異構(gòu)體)，或者是經(jīng)選擇的與其它立體異構(gòu)體的混合物(如外消旋體)，或是與所有其它立體異構(gòu)體的混合物。優(yōu)選的是這些化合物基本上不含有其它異構(gòu)體，也就是說(shuō)是純對(duì)映體。
式Ⅰ化合物的優(yōu)選立體構(gòu)型是基團(tuán)-OC(R1)(R2)(OR3)和R4為順式構(gòu)型，亦即 特別地式Ⅰ化合物具有與化合物(3R-順式)-1-苯甲?；?3-(1-甲氧基-1-甲基乙氧基)-4-苯基-2-氮雜環(huán)丁酮相同的絕對(duì)立體構(gòu)型。
式Ⅶ和Ⅸ化合物C-13側(cè)鏈的優(yōu)選立體構(gòu)型與上述順式β-內(nèi)酰胺類(lèi)的立體構(gòu)型相一致，亦即
其中側(cè)鏈具有與紫杉酚相同的絕對(duì)立體構(gòu)型。
下列實(shí)施例進(jìn)一步描述了本發(fā)明，但這些實(shí)施例僅限于說(shuō)明，而對(duì)本發(fā)明權(quán)利要求的范圍無(wú)任何限制作用。
實(shí)施例1(3R-順式)-3-(1-甲氧基-1-甲基乙氧基)-4-苯基-2-氮雜環(huán)丁酮的制備(a)(3R-順式)-3-羥基-4-苯基-2-氮雜環(huán)丁酮
按下述方法制得標(biāo)題化合物酶促水解外消旋3-乙酰氧基-4-苯基-2-氮雜環(huán)丁酮(參見(jiàn)美國(guó)申請(qǐng)?zhí)?7/822，015，Patel等人于1992年1月15日申請(qǐng))生成(3R-順式)-3-乙酰氧基-4-苯基-2-氮雜環(huán)丁酮，隨后用堿水解生成旋光的標(biāo)題化合物。
(b)(3R-順式)-3-(1-甲氧基-1-甲基乙氧基)-4-苯基-2-氮雜環(huán)丁酮 將上述步驟(a)的產(chǎn)物(8.49g，52.0mmol)加入500ml干燥的三頸瓶(于120℃烘箱中干燥約12小時(shí)并裝上磁性攪拌棒和數(shù)控溫度計(jì))中，用氬氣清洗并溶于丙酮(300ml新開(kāi)瓶的HPLC級(jí)丙酮;重量%H2O(K.F.)<0.001)。將黃色溶液冷至0℃(內(nèi)部溫度為1℃)，于30秒鐘內(nèi)滴加2-甲氧基丙烯(15.0ml，156mmol)(重量%H2O(K.F.)<0.001)，在加入2-甲氧基丙烯期間內(nèi)部溫度升至約2℃。在加入對(duì)甲苯磺酸吡啶鎓(PPTS)(1.3g，5.2mmol)(重量%H2O(K.F.)＝0.001)之前將所得溶液于0℃攪拌5分鐘。于0℃攪拌30分鐘后，TLC(薄層色譜法)分析表明反應(yīng)已完全。(反應(yīng)粗產(chǎn)物TLC分析(硅膠，溶劑乙酸乙酯，顯色劑磷鉬酸/乙醇)顯示出產(chǎn)物的一個(gè)點(diǎn)(Rf＝0.50)而無(wú)原料存在(Rf＝0.31)。
于分液漏頭中將溶液與乙酸乙酯(250ml)、飽和NaHCO3水溶液(200ml)和H2O(100ml)混合，將混合物振蕩后分離，水層用乙酸乙酯(3×100ml)萃取。合并的有機(jī)相用飽和NaCl水溶液(200ml)洗滌，用Na2SO4干燥，過(guò)濾并于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮，得到灰白色固體，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上的所有濃縮過(guò)程均于35℃水浴溫度進(jìn)行。
將粗產(chǎn)物溶于乙酸乙酯(200ml)中并加入中性活性炭(2g)，混合物溫和沸騰5分鐘，冷至室溫，經(jīng)一層硅藻土吸濾，如上所述于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上除去溶劑，隨后暴露于高真空下(約1mmHg，45分鐘)，得到11.9g灰白色固體。將固體溶于沸騰的乙酸乙酯(75ml)中，并以每份50ml加入沸騰的己烷(400ml)。使所得渾濁溶液冷至室溫。移去熱源后約1分鐘內(nèi)溶液開(kāi)始析晶，于室溫靜置45分鐘后，將混合物于4℃冷室中冷卻15小時(shí)。將結(jié)晶于吸濾器上過(guò)濾，用1∶19乙酸乙酯/己烷(3×100ml)洗滌，高真空干燥(約0.15mmHg，20小時(shí))，得到9.55g(78%)灰白色針狀結(jié)晶的標(biāo)題產(chǎn)物。
將上述母液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮，暴露于高真空下(約1mmHg，0.5小時(shí))，然后于乙酸乙酯/己烷中析晶，得到1.48g(12%)少量灰白色結(jié)晶的標(biāo)題化合物。(析晶過(guò)程如上述第一批產(chǎn)物所述相似方式進(jìn)行。將固體溶于5ml沸騰的乙酸乙酯中，以每份約5ml加入沸騰的己烷(約40ml)直至有少量結(jié)晶出現(xiàn)，冷至室溫立即開(kāi)始析晶。使混合物于室溫靜置1.5小時(shí)，然后于4℃靜置16小時(shí)。將結(jié)晶于吸濾器上過(guò)濾，用3×25ml 1∶19乙酸乙酯/己烷洗滌，高真空下干燥(約0.2mmHg，24小時(shí))。
標(biāo)題產(chǎn)物元素分析(%)
C13H17NO3計(jì)算值 實(shí)測(cè)值:
C 66.36 66.30H 7.28 7.40N 5.95 6.04H2O(KF) 0.00 0.00m.p.136-137℃[α]22D+6.7°(c 1.0，CHCl3)[α]22365+93.3°(c 1.0，CHCl3)TLCRf＝0.47(硅膠，乙酸乙酯)，經(jīng)磷鉬酸/乙醇顯色目測(cè)。
實(shí)施例2(3R-順式)-3-(1-甲氧基-1-甲基乙氧基)-4-苯基-2-氮雜環(huán)丁酮的制備將上述實(shí)施例1步驟(a)的標(biāo)題產(chǎn)物(30.1g，184mmol，帶褐色)加到經(jīng)火焰干燥、氬氣清洗的500ml燒瓶(燒瓶于120℃烘箱中干燥約12小時(shí)，并裝上磁性攪拌棒和數(shù)控溫度計(jì))中，并溶于二甲基甲酰胺(300ml，重量%H2O(K.F.)＝0.05)。將紅棕色溶液冷至0℃，內(nèi)部溫度為2℃，于2分鐘內(nèi)滴加2-甲氧基丙烯(53.0ml，553mmol)(在加入2-甲氧基丙烯期間內(nèi)部溫度升至約2℃)，在加入對(duì)甲苯磺酸吡啶鎓(PPTS，4.6g，18.4mmol)之前，將所得溶液于0℃攪拌5分鐘，加入PPTS后約5分鐘，反應(yīng)溫度升至最高4.8℃。反應(yīng)進(jìn)行中溶液顏色逐漸變淺，于0℃攪拌1小時(shí)后，TLC分析表明反應(yīng)已完全(乙酸乙酯和水之間分配的等分試樣的TLC分析(硅膠，溶劑乙酸乙酯，顯色劑磷鉬酸/乙醇)表明有一個(gè)產(chǎn)物點(diǎn)(Rf＝0.51)而無(wú)原料(Rf＝0.33)存在)。
將溶液用3∶1乙酸乙酯/己烷混合液(600ml)稀釋并用半飽和NaHCO3水溶液(500ml)洗滌，在用NaHCO3洗滌期間，大部分有色雜質(zhì)被萃取到水相中，但有機(jī)相仍呈紅棕色。水相用乙酸乙酯(2×150ml)萃取，合并的有機(jī)相用H2O(500ml)洗滌(H2O洗液經(jīng)TLC分析表明無(wú)產(chǎn)物損失到水層中)，用飽和NaCl水溶液(200ml)洗滌，用Na2SO4干燥，過(guò)濾并于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮得灰白色固體。于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上的全部濃縮過(guò)程均于40℃水浴溫度進(jìn)行。將固體溶于沸騰的乙酸乙酯(180ml)中，然后以每份約20ml加入己烷(250ml)直至有少量結(jié)晶出現(xiàn)。除去所得溶液的熱源并使其冷至室溫，在溶液離開(kāi)熱源后約1分鐘內(nèi)開(kāi)始大量析晶。室溫靜置1小時(shí)后，混合物于4℃冷室中冷卻17小時(shí)。將結(jié)晶于吸濾器上過(guò)濾，用1∶19乙酸乙酯/己烷(3×150ml)洗滌并高真空下干燥(約0.5mmHg，22小時(shí))，得到32.6g(75.4%)蓬松的白色針狀結(jié)晶的標(biāo)題產(chǎn)物。
如上所述將母液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮，然后于乙酸乙酯/己烷中結(jié)晶，得到6.25g(14.4%)蓬松的白色結(jié)晶狀標(biāo)題產(chǎn)物。結(jié)晶過(guò)程如上述第一批產(chǎn)物相似的方式進(jìn)行。將固體溶于25ml沸騰的乙酸乙酯，以每份約5ml加入己烷(約60ml)直至有少量結(jié)晶出現(xiàn)，冷卻至室溫后立即開(kāi)始析晶。使混合物于室溫靜置1小時(shí)，然后于4℃靜置14小時(shí)。將結(jié)晶于吸濾器上過(guò)濾，用3×100ml 1∶19乙酸乙酯/己烷洗滌，并高真空(約0.6mmHg)干燥16小時(shí)。(產(chǎn)率＝90%)。
元素分析(%)C13H17NO3計(jì)算值 實(shí)測(cè)值:
C 66.36 66.40
H 7.28 7.20N 5.95 5.68H2O(KF) 0.00 0.00m.p.＝141℃[α]22D+6.5°(c 1.0，CHCl3)[α]22365+95.0°(c 1.0，CHCl3)TLCRf＝0.47(硅膠，乙酸乙酯)，經(jīng)磷鉬酸/乙醇顯色目測(cè)下述方法可供選擇用于制備標(biāo)題產(chǎn)物(1)于氬氣氛下，在0℃將實(shí)施例1步驟(a)的標(biāo)題產(chǎn)物(79.7mg，0.488mmol)、二甲氧基丙烷(0.3ml，2.44mmol)、PPTS(約12mg，0.049mmol)和二甲基甲酰胺(2ml)的混合物攪拌3小時(shí)，然后于約4℃攪拌24小時(shí)。所得產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取并進(jìn)行處理(用10ml乙酸乙酯稀釋?zhuān)?.5ml飽和NaHCO3水溶液洗滌;水相用2×5ml乙酸乙酯萃取;合并的有機(jī)相用1×10ml水、10ml飽和NaHCO3水溶液洗滌，用Na2SO4干燥，過(guò)濾并濃縮)得到定量產(chǎn)率的產(chǎn)物，其為原料和標(biāo)題產(chǎn)物的1∶1.7混合物(TLC分析測(cè)定)。
(2)按下法制備標(biāo)題產(chǎn)物將實(shí)施例1步驟(a)的標(biāo)題產(chǎn)物(92.5mg)加到烘干的5ml燒瓶中，用氬氣清洗，二甲基甲酰胺(1.5ml)稀釋并冷至0℃。加入二甲氧基丙烷(0.18g)，隨后加入PPTS(14mg)，將溶液于0℃攪拌5小時(shí)并如上所述處理(產(chǎn)生約1∶1.1原料和標(biāo)題產(chǎn)物的混合物)。
(3)按下法制備標(biāo)題產(chǎn)物將實(shí)施例1步驟(a)的標(biāo)題產(chǎn)物(89.4mg)加到經(jīng)火焰干燥、氬氣清洗的燒瓶中，將其溶于丙酮(3.5ml)并冷至0℃，加入二甲氧基丙烷(0.17g)，隨后加入PPTS(14mg)。溶液于0℃攪拌3小時(shí)，轉(zhuǎn)移至4℃冷室中冷卻24小時(shí)，處理后得到原料標(biāo)題產(chǎn)物雜質(zhì)之比為8∶2∶1的標(biāo)題產(chǎn)物。
實(shí)施例3(3R-順式)-1-苯甲?；?3-(1-甲氧基-1-甲基乙氧基)-4-苯基-2-氮雜環(huán)丁酮的制備 將上述實(shí)施例1步驟(b)的標(biāo)題產(chǎn)物(8.69g，36.9mmol)加到干燥的250ml三頸瓶(于120℃烘箱中干燥24小時(shí)并裝有磁性攪拌棒和數(shù)控溫度計(jì))中，用氬氣清洗并溶于CH2Cl2(90ml)(重量%H2O(K.F.)<0.05)。于30秒鐘內(nèi)加入二異丙基(乙基)胺(i-Pr2NEt，7.10ml，40.6mmol)(重量%H2O(K.F.)＝0.016)，然后一次性加入4-二甲氨基吡啶(0.90g，7.4mmol)(重量% H2O (K.F.)<0.05)。將所得溶液冷卻至0℃(測(cè)得內(nèi)部溫度為1℃)，然后于7分鐘內(nèi)滴加苯甲酰氯(4.70ml，40.6mmol)。在加入過(guò)程中，內(nèi)部溫度升至8℃，加入后得到輕微渾濁溶液，于0℃攪拌下變成透明黃色溶液。然后將溶液于0℃攪拌1.5小時(shí)，此時(shí)TLC分析表明反應(yīng)已完全。(反應(yīng)粗產(chǎn)物的TLC分析(硅膠，溶劑乙酸乙酯)顯色劑磷鉬酸/乙醇)表明有一個(gè)產(chǎn)物點(diǎn)(Rf＝0.61)而無(wú)原料存在(Rf＝0.49)。
溶液用CH2Cl2(150ml)稀釋?zhuān)蔑柡蚇aHCO3水溶液洗滌，并分離兩層，水層用CH2Cl2(75ml)萃取。合并的有機(jī)層用5.7%NaH2PO4水溶液(300ml，測(cè)得5.7% NaH2PO4水溶液的pH＝4.25±0.05;測(cè)得所得洗液的pH＝5.57±0.05)、飽和NaCl水溶液(100ml)洗滌，用Na2SO4干燥，過(guò)濾并于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮，得到灰白色泡沫狀物。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上的全部濃縮過(guò)程均于35℃水浴溫度進(jìn)行。將粗產(chǎn)物溶于乙酸乙酯(150ml)中并加入中性活性炭(2g)，所得混合物溫和沸騰5分鐘，冷卻至室溫，并經(jīng)一層硅藻土吸濾。溶液比用活性炭處理前顏色明顯變淺。如上所述于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上除去溶劑隨后所得泡沫狀物用己烷(50ml)研制，得到漿狀固體產(chǎn)物。
如上所述將漿狀物于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮并暴露于真空下(約2mmHg，15分鐘)，得到12.2g灰白色固體。將固體溶于熱乙酸乙酯(7ml)中并以每份約2ml加入熱己烷(約45ml)，小心進(jìn)行此結(jié)晶過(guò)程，避免有油狀產(chǎn)物出現(xiàn)。將所得渾濁溶液脫離熱源，冷卻數(shù)分鐘后，加入晶種并于10分鐘內(nèi)開(kāi)始析晶。于室溫1小時(shí)后，將混合物置于4℃冷室中保持4小時(shí)。然后將結(jié)晶于吸濾器上過(guò)濾，用1∶19乙酸乙酯/己烷(3×50ml)洗滌并高真空下干燥(約0.2mmHg，16小時(shí))，得到9.23g(73.7%)灰白色結(jié)晶狀標(biāo)題產(chǎn)物。母液中還含有產(chǎn)物(經(jīng)TLC分析)，但第二批產(chǎn)物未進(jìn)行結(jié)晶。
元素分析(%)C20H21NO4·H2O計(jì)算值 實(shí)測(cè)值C 70.41 70.14
H 6.26 6.10N 4.11 4.13H2O(KF) 0.53 0.55m.p.89-94℃[α]22D+173.1°(c 1.0，CHCl3)TLCRf＝0.58(硅膠，乙酸乙酯)，經(jīng)磷鉬酸/乙醇顯色目測(cè)。
實(shí)施例4[2aR-[2aα，4β，4aβ，6β，9α(αR＊，βS＊)，11α，12α，12aα，12bα]]-β-(苯甲酰氨基)-α-(1-甲氧苯-1-甲基乙氧基)羥基苯丙酸，6，12b-雙(乙酰氧基)-12-(苯甲酰氧基)-2a，3，4，4a，5，6，9，10，11，12，12a，12b-十二氫-4-三乙基甲硅烷氧基-11-羥基-4a，8，13，13-四甲基-5-氧代-7，11-亞甲基-1H-環(huán)癸并[3，4]苯并[1，2-b]氧雜環(huán)丁烷-9-基-酯。
(a)7-TES漿果赤霉素Ⅲ 其中Ac為乙?；珺z為苯甲酰基和TES為三乙基甲硅烷基。
(ⅰ)[2aR-[2aα，4β，6β，9α，11β，12α，12aα，12bα)]]-苯甲酸，12b-乙酰氧基-2a，3，4，4a，5，6，9，10，11，12，12a，12b-十二氫-6，9，11-三羥基-4a，8，13，13-四甲基-5-氧代-4-[(三乙基甲硅烷基)氧基]-7，11-亞甲基-1H-環(huán)癸并[3，4]苯并[1，2-b]氧雜環(huán)丁烷-12-基酯(7-0-TES-10-去乙?；鶟{果赤霉素Ⅲ) 將10-去乙酰基漿果赤霉素Ⅲ(27.4g，50.3mmol)(經(jīng)測(cè)(兩次)未校正雜質(zhì)量為H2O1.0%(1.57%)，CH3OH1.49%(1.6%)，乙酸乙酯0.1%(0.09%)，己烷(0.03%))和4-二甲氨基吡啶(2.62g，21.4mmol)(重量%H2O(K.F.)＝0.09)加到經(jīng)火焰干燥的、氬氣清洗的1L三頸瓶(裝有機(jī)械攪拌器和數(shù)控溫度計(jì))中并溶于無(wú)水二甲基甲酰胺(122ml)(重量%H2O(K.F.)＝<0.01)中。加入CH2Cl2(256ml)(重量%H2O(K.F.)＝<0.01)并將所得均勻溶液冷卻至-50℃(在加入CH2Cl2過(guò)程中反應(yīng)溶液的溫度由23℃升至25℃)。于3分鐘內(nèi)滴加三乙胺(NEt3，16ml，120mmol)(重量% H2O(K.F.)＝0.08)并在滴加純?nèi)一坠柰榛?Et3SiCl，18.6ml，111mmol)之前將所得溶液于-50℃攪拌5分鐘，于10分鐘內(nèi)加入Et3SiCl，反應(yīng)溫度不超過(guò)-50℃，在加入Et3SiCl期間反應(yīng)物變得十分混濁。于約-50℃將所得混合物攪拌1小時(shí)，然后使其于-48℃冷凍箱中靜置22小時(shí)(無(wú)需攪拌)。(對(duì)照試驗(yàn)表明于-48℃攪拌反應(yīng)8小時(shí)導(dǎo)致約60%轉(zhuǎn)化。)然后由冷凍箱中取出混合物并溫?zé)嶂良s-10℃。(混合物TLC分析(溶劑乙酸乙酯，顯色劑磷鉬酸/乙醇)表明無(wú)原料存在并只有一個(gè)產(chǎn)物點(diǎn)(Rf＝0.60)。)將冷混合物與EtOAc(1L)混合并用H2O(890ml)洗滌。分離出所得水層并EtOAc(250ml)萃取。合并的有機(jī)層用5.7% NaH2PO4水溶液(2×250ml)(測(cè)得5.7% NaH2PO4水溶液的pH＝4.30±0.05;測(cè)得合并的NaH2PO4洗液的pH＝5.75±0.05)、半飽和NaCl水溶液(250ml)、飽和NaCl水溶液(250ml)洗滌，用Na2SO4干燥，過(guò)濾并于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮。(全部濃縮過(guò)程均于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上在35℃水浴溫度進(jìn)行。)所得半固體狀物經(jīng)暴露于高真空下進(jìn)一步干燥(約1mmHg，20分鐘)，得到41.5g白色固體。將粗產(chǎn)物溶于CH2Cl2(400ml)(需于35℃水浴中加熱溶解固體)并于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上將所得溶液的體積減至約150ml。立即開(kāi)始析晶并使混合物于室溫靜置1小時(shí)。加入己烷(100ml)并將混合物輕微攪拌，使混合物于4℃冷室中靜置16.5小時(shí)。將固體于吸濾器上過(guò)濾，并用1∶9CH2Cl2/己烷(3×250ml)洗滌，并在高真空下干燥(約0.2mmHg，42小時(shí))，得到26.1g(79%)白色粉末狀標(biāo)題產(chǎn)物。將母液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮，殘余物于CH2Cl2中結(jié)晶，得到4.5g(14%)白色結(jié)晶狀標(biāo)題產(chǎn)物。以與第一批產(chǎn)物相似的方式進(jìn)行重結(jié)晶不加熱下將固體溶于CH2Cl2(100ml)中并于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上將所得溶液的體積減至約7ml，于5分鐘內(nèi)開(kāi)始析晶。使混合物于室溫靜置1小時(shí)，然后于4℃冷室中靜置42小時(shí)。將結(jié)晶于吸濾器上過(guò)濾，用1∶9 CH2Cl2/己烷(3×50ml)洗滌，并在高真空下干燥(約0.2mmHg，18小時(shí))。此批產(chǎn)物的1H NMR與第一批產(chǎn)物的1H NMR相同。
兩批產(chǎn)物的總產(chǎn)率為93%(未校正)。
元素分析(%)
C35H50O10Si計(jì)算值 實(shí)測(cè)值C 63.80 63.43H 7.65 7.66KF(H2O) 0.00 0.00mp239-242℃(分解)[α]22D-53.6°(c 1.0，CHCl3)TLCRf＝0.60(硅膠，EtOAc);經(jīng)磷鉬酸/乙醇顯色目測(cè)。
另一方法如下于配備有氬氣入口的經(jīng)火焰干燥的250ml三頸瓶中加入10-去乙?；?漿果赤霉素Ⅲ(5.44g，10mmol，水含量為1.56重量%，甲醇含量為1.6重量%)、4-二甲氨基吡啶(0.49g，4mmol)和N，N-二甲基甲酰胺(24ml，4A分子篩干燥)。于室溫?cái)嚢杌旌衔镏敝辆鶆?。加入二氯甲?50ml，HPLC級(jí)，無(wú)需純化)并將溫度降至-50℃。于5分鐘內(nèi)滴加三乙胺(2.9ml，21mmol)，隨后于10分鐘內(nèi)滴加三乙基甲硅烷基氯(3.4ml，20mmol)。使混合物于-48℃靜至21小時(shí)，用200ml乙酸乙酯和175ml水稀釋。(反應(yīng)經(jīng)TLC(用EtOAc作洗脫劑)監(jiān)測(cè)原料的Rf＝0.56，產(chǎn)物的Rf＝0.83，UV和PMA目測(cè))分出水層并用乙酸乙酯(50ml×1)萃取，將有機(jī)層合并并用5%磷酸二氫鉀水溶液(50ml×2)(5%KH2PO4水溶液的pH值為4.3)、半飽和氯化鈉溶液(50ml×1)，鹽水(50ml×1)洗滌，用硫酸鈉干燥并真空濃縮，得到固體狀標(biāo)題產(chǎn)物粗品(7.45g)。將粗產(chǎn)物溶于75ml熱二氯甲烷中并經(jīng)加熱將總體積減少至30ml，開(kāi)始析晶。將其于室溫靜置2小時(shí)，于4℃靜置16小時(shí)。于布氏漏斗將結(jié)晶過(guò)濾，用冷的10%二氯甲烷的己烷液(25ml)洗滌并真空干燥，得到5.38g標(biāo)題產(chǎn)物。將母液和洗液真空濃縮，通過(guò)溶于8ml二氯甲烷使固體殘余物析晶，按照上述析晶方法，得到0.72g第二批產(chǎn)物。標(biāo)題產(chǎn)物7-TES-10-去乙酰基漿果赤霉素Ⅲ的總產(chǎn)量為6.10g(93%)，其為白色固體，m.p.238～240℃。
元素分析(%)C35H50O10Si計(jì)算值 實(shí)測(cè)值C 63.80 63.76H 7.65 7.66mp239-242℃[α]D-53.7(c 1.0，CHCl3)TLCRf＝0.53(硅膠，50% EtOAc的己烷液);UV和PMA目測(cè)。
HI＝98.9%。
(ⅱ)[2aR-[2aα，4β，4aβ，6β，9α，11β，12α，12aα，12bα)]-6，12b-雙(乙酰氧基)-12-(苯甲酰氧基)-2a，3，4，4a，5，6，9，10，11，12，12a，12b-十二氫-9，11-二羥基-4a，8，13，13-四甲基-4-[(三乙基甲硅烷基)氧基]-7，11-亞甲基-1H-環(huán)癸并[3，4]苯并[1，2-b]氧雜環(huán)丁烷-5-酮。
(7-0-TES-漿果赤霉素Ⅲ)
將上述步驟(ⅰ)中制備的7-0-TES-10-去乙酰基漿果赤霉素Ⅲ(21.4g，32.4mmol)加到經(jīng)火焰干燥的氬氣清洗的1L三頸瓶(裝備有機(jī)械攪拌器和數(shù)控溫度計(jì))中并溶于THF(350ml，與鈉和二苯酮新鮮蒸餾得到)。將所得溶液冷卻至-70℃，于23分鐘內(nèi)滴加正丁基鋰溶液(n-BuLi，14.6ml的2.56M己烷溶液，37.3mmol，于0℃用二苯基乙酸滴定三份)，在滴加期間反應(yīng)溫度不高于-68℃。在加入n-BuLi時(shí)有固體生成且于-70℃溶解不明顯。將所得混合物于-70℃攪拌20分鐘，然后溫?zé)嶂?48℃。(熱至-48℃時(shí)得到一透明均相溶液)于-48℃攪拌1/2小時(shí)后，于7分鐘內(nèi)滴加乙酸酐(4.6ml，49mmol，使用前于氬氣氛下(137-138℃，1大氣壓)蒸餾)，在滴加期間反應(yīng)溫度不高于-45℃。將所得溶液于-48℃攪拌20分鐘，然后于0℃攪拌1小時(shí)，溶液用乙酸乙酯(350ml)稀釋?zhuān)蔑柡蚇H4Cl水溶液(250ml)洗滌，分層。水層用乙酸乙酯(200ml)萃取。合并的有機(jī)層用飽和NaCl水溶液洗滌，用Na2SO4干燥，過(guò)濾并于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮。(所有濃縮過(guò)程均于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上于35℃水浴溫度進(jìn)行)，將半固體狀物暴露于高真空下(約1.5mmHg，1/2小時(shí))，得到24.7g白色固體。將粗品產(chǎn)物溶于CH2Cl2(300ml)中并于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上將所得溶液的體積減少至約70ml，1分鐘內(nèi)開(kāi)始析晶，使混合物于室溫靜置45分鐘，然后于4℃冷室中靜置18小時(shí)。將結(jié)晶于吸濾器上過(guò)濾，用1∶9CH2Cl2/己烷(3×100ml)洗滌，并高真空下干燥(約0.2mmHg，19小時(shí))，得到20.9g(92.0%)精細(xì)白色針狀結(jié)晶的標(biāo)題產(chǎn)物。將母液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮，殘余物于CH2Cl2/己烷中結(jié)晶，得到0.82g(3.6%)少量白色結(jié)晶狀標(biāo)題產(chǎn)物。結(jié)晶過(guò)程如下進(jìn)行將殘余物溶于CH2Cl2(10ml)，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上將所得溶液的體積減少至約5ml。于室溫靜置1/2小時(shí)后，無(wú)結(jié)晶生成。以每份1ml加入己烷(5ml)并攪蕩溶液，此時(shí)有少量結(jié)晶出現(xiàn)，使混合物于室溫靜置1/2小時(shí)(有更多結(jié)晶生成)，然后于4℃冷室中靜置18小時(shí)。將結(jié)晶于吸濾器上過(guò)濾，用1∶9CH2Cl2/己烷洗滌，高真空下干燥(約0.15mmHg，21小時(shí))。
兩批產(chǎn)物的總產(chǎn)率為95.6%。
mp218～219℃(分解)[α]22D-78.4°(c 1.0，CHCl3)TLCRf＝0.37(硅膠，1∶9丙酮/CH2Cl2);經(jīng)磷鉬酸/乙醇顯色目測(cè)。
(b)[2aR-[2aα，4β，4aβ，6β，9α(αR＊，βS＊)，11α，12α，12aα，12bα]]-β-苯甲酰氨基)-α-(1-甲氧基-1-甲基乙氧基)羥基苯丙酸，6，12b-雙(乙酰氧基)-12-(苯甲酰氧基)-2a，3，4，4a，5，6，9，10，11，12，12a，12b-十二氫-4-三乙基甲硅烷氧基-11-羥基-4a，8，13，13-四甲基-5-氧代-7，11-亞甲基-1H-環(huán)癸并[3，4]苯并[1，2-b]氧雜環(huán)丁烷-9-基酯 其中Ph為苯基，MOP為1-甲氧基-1-甲基乙基，并且THF為四氫呋喃。
20分鐘內(nèi)劇烈攪拌下向上述步驟(a)制備的化合物(50.00g，71.33mmol)的THF(與鈉和二苯酮新蒸得的，125ml)溶液中于-50℃(只在化合物完全溶解于THF中后冷卻)滴加六甲基二甲硅烷基氨化鋰(LHMDS，55.1ml，1.36M THF溶液，74.90mmol;試劑用1，3-二苯丙酮對(duì)甲苯磺酰腙滴定)，并使得內(nèi)部溫度不高于-48℃。加完后將反應(yīng)混合物熱至-35℃并于室溫?cái)嚢?分鐘。
于7分鐘內(nèi)將新制備的實(shí)施例3所制化合物(“化合物3”)(27.85g，82.03mmol)的THF(35ml)溶液滴加到反應(yīng)混合物中，未觀察到有明顯的放熱。將含有化合物3的燒瓶用5ml THF洗滌并將洗液轉(zhuǎn)移至反應(yīng)混合物中，用冰水浴代替干冰浴使所得溶液升至0℃并再攪拌90分鐘。反應(yīng)經(jīng)反相硅膠(EM Science RP-18 WF254s)TLC監(jiān)測(cè)，用乙腈/水(70/30)作展開(kāi)劑，標(biāo)題產(chǎn)物的Rf為0.31，7-TES-紫杉酚(即在紫杉酚結(jié)構(gòu)中7-位羥基被TES-O-取代)的Rf為0.41，7-TES-漿果赤霉素Ⅲ的Rf為0.47，化合物3的Rf為0.63。
反應(yīng)用pH7的磷酸鹽緩沖液(50ml)、隨后立即用飽和NaHCO3溶液(150ml)驟停，將其用乙酸乙酯(EtOAc，600ml)稀釋并分層。有機(jī)層用無(wú)水Na2SO4干燥，過(guò)濾并真空濃縮，得到淺黃色固體狀標(biāo)題產(chǎn)物粗品(82.3g)。將固體溶于熱EtOAc(200ml)中并于回流溫度下滴加己烷(110ml)。將結(jié)晶混合物于室溫靜置2小時(shí)(冷卻下迅速有沉淀生成)，然后于冷室中靜置7小時(shí)。將固體過(guò)濾并用冷己烷/EtOAc，5/1混合液(2×80ml)洗滌，將所得白色結(jié)晶于吸濾器上干燥1小時(shí)，然后真空(約0.6mmHg)干燥過(guò)夜，得到67.37g標(biāo)題產(chǎn)物(以7-TES-漿果赤霉素Ⅲ為基準(zhǔn)產(chǎn)率為91%;1H NMR表明有0.4mol EtOAc，其校正產(chǎn)率為87%)，其有效純度(homogeneity index，HI)為99.25%(標(biāo)題產(chǎn)物為95.73%，而7-TES-紫杉酚為3.52%)。
將母液和洗液合并并蒸發(fā)至干。殘余物溶于熱EtOAc(25ml)中并于回流溫度滴加己烷(40ml)，冷卻至室溫后，將混合物于室溫靜置1小時(shí)，隨后于冷室中靜置7小時(shí)。于吸濾器上過(guò)濾收集固體、干燥、然后真空(0.7mmHg)干燥過(guò)夜，得到6.06g(8%)標(biāo)題產(chǎn)物，其有效純度(HI)為96.6%(標(biāo)題產(chǎn)物為92.6%而7-TES-紫杉酚為4.0%)。
元素分析(%)C57H73NO15Si·0.4EtOAc計(jì)算值 實(shí)測(cè)值C 65.44 65.49H 7.14 7.44N 1.30 1.47m.p.153-155℃[α]D-59.6(c 1，CHCl3)TLCRf＝0.31反相HPTLC，乙腈/水，70∶30，UV目測(cè)。
制備2′-MOP-7-三乙基甲硅烷基紫杉酚的另一種方法是按如下所述將7-0-TES漿果赤霉素Ⅲ就地偶合將7-0-TES-10-去乙?；鶟{果赤霉素Ⅲ(1.5177mmol)溶于3.5ml無(wú)水四氫呋喃中并冷卻至-65～70℃。滴加六甲基二甲硅烷基氫化鋰(LHMDS)(0.5相當(dāng)量)并將混合物攪拌20分鐘，然后加入乙酸酐(0.5相當(dāng)量)并再攪拌20分鐘。脫保護(hù)/酰化過(guò)程重復(fù)三次(總共1.5相當(dāng)量LHMDS和2.0相當(dāng)量乙酸酐)，在陰離子形成過(guò)程中有沉淀產(chǎn)生(反應(yīng)混合物變稠)，并將混合物溫?zé)嶂?℃維持5分鐘。
隨后冷至-50℃并再滴加LHMDS處理，直接進(jìn)行與化合物3的偶合反應(yīng)(按照上述步驟(b)中所述方法)，由7-0-TES-10-去乙?；鶟{果赤霉素Ⅲ得到851mg(55%)所需化合物。
實(shí)施例5[2aR-[2aα，4β，4aβ，6β，9α(αR＊，βS＊)，11α，12α，12aα，12bα]]-β-(苯甲酰氨基)-α-(1-甲氧基-1-甲基乙氧基)羥基苯丙酸，6，12b-雙(乙酰氧基)-12-(苯甲酰氧基)-2a，3，4，4a，5，6，9，10，11，12，12a，12b-十二氫-4-三乙基甲硅烷氧基-11-羥基-4a，8，13，13-四甲基-5-氧代-7，11-亞甲基-1H-環(huán)癸并[3，4]苯并[1，2-b]氧雜環(huán)丁烷-9-基酯的制備(2′-MOT-7-三乙基甲硅烷基-紫杉酚) 于17分鐘內(nèi)劇烈攪拌下向7-TES-漿果赤霉素Ⅲ(5.00g，7.13mmol)的THF(與鈉和二苯酮新蒸的，12.5ml)溶液中于-50℃(僅于化合物完全溶于THF后冷卻)滴加入LHMDS(7.85ml，1.0M THF溶液，7.85mmol)，并使得內(nèi)部溫度不超過(guò)-48℃，在滴加近于完成時(shí)有沉淀生成，這使得攪拌十分困難。為了能夠進(jìn)行有效攪拌，再加入1.5ml THF。然后使反應(yīng)混合物熱至-35℃并在此溫度攪拌10分鐘。將所得混濁溶液由-35℃再冷至-42℃，然后用導(dǎo)管滴加到氮雜環(huán)丁酮，化合物3(3.03g，8.92mmol)的THF(2.5ml)溶液中，在滴加期間保持溫度在-19℃至-10℃之間，歷時(shí)7分鐘。燒瓶和導(dǎo)管用THF(0.5ml)洗滌并將洗液轉(zhuǎn)移到反應(yīng)中。滴加完成時(shí)，通過(guò)用冰水浴代替干冰浴將所得溶液升至0℃并再攪拌75分鐘。反應(yīng)經(jīng)反相硅膠(EM Science RP-18 WF254s)TLC監(jiān)測(cè)，用乙腈/水(70/30)作展開(kāi)劑，標(biāo)題產(chǎn)物的Rf為0.31，7-TES-紫杉酚的Rf為0.41，7-TES-漿果赤霉素Ⅲ的Rf為0.47。
反應(yīng)用pH7的磷酸鹽緩沖液(12ml)、隨后立即用飽和NaHCO3溶液(30ml)驟停。將其用EtOAc(100ml)稀釋并分層，有層用EtOAc(10ml)萃取。合并的有機(jī)層用無(wú)水Na2SO4干燥，過(guò)濾并真空濃縮，得到棕黃色固體狀標(biāo)題化合物粗品(9.13g)。將其溶于熱EtOAc(20ml)中并于回流溫度滴加己烷(13ml)。使溶液于室溫靜置36小時(shí)，然后于冷室中靜置2小時(shí)。將固體過(guò)濾并用冷的己烷/EtOAc，5/1混合液(2×10ml)洗滌。(分別收集母液(1.52g，有效HI為52.4)和洗液(0.32g，有效HI為53.4)并放置一邊)將所得白色結(jié)晶于吸濾器上干燥20分鐘，然后真空(約0.5mmHg)干燥過(guò)夜，得到6.59g標(biāo)題產(chǎn)物(以7-TES-漿果赤霉素Ⅲ為基準(zhǔn)產(chǎn)率為89%)，其有效HI為99.3%(標(biāo)題產(chǎn)物為96.0%和7-TES-紫杉酚為3.3%)。
元素分析(%)C57H73NO15Si計(jì)算值 實(shí)測(cè)值C 65.81 65.47H 7.07 7.12N 1.35 1.64m.p.153-155℃[α]D-59.6(c 1，CHCl3)TLCRf＝0.31 反相HPTLC，乙腈/水，70∶30，UV目測(cè)。
實(shí)施例6紫杉酚的制備[2aR-[2aα，4β，4aβ，6β，9α(αR＊，βS＊)，11α，12α，12aα，12bα]]-β-(苯甲酰氨基)-α-羥基-苯丙酸，6，12b-雙(乙酰氧基)-12-(苯甲酰氧基)-2a，3，4，4a，5，6，9，10，11，12，12a，12b-十二氫-4，11-二羥基-4a，8，13，13-四甲基-5-氧代-7，11-亞甲基-1H-環(huán)癸并[3，4]苯并[1，2-b]氧雜環(huán)丁烷-9-基酯 于12分鐘內(nèi)劇烈攪拌下向上述實(shí)施例5(“化合物5”，5.0g，4.81mmol;HI為99.3%，其中包括化合物5的HI為96.0和7-TES-紫杉酚的HI為3.3)的乙醇(EtOH，100ml)和THF(80ml)的溶液于0℃(在用冰浴冷卻至0℃前，將化合物5溶于EtOH/THF中)滴加預(yù)冷的(約5℃)1.5N HCl(水溶液，aq)，在滴加1.5N HCl時(shí)出現(xiàn)的渾濁立即消失。將所得澄清溶液于0℃攪拌15分鐘并于4℃靜置19.5小時(shí)，HPLC分析等分試樣(3μ Phenyl BD柱;35%CH3CN/65%H2O線性梯度洗脫26分鐘;100%CH3CN線性梯度洗脫7分鐘;35%CH3CN/65%H2O等效洗脫7分鐘)表明有紫杉酚(98.6%)、7-TES-紫杉酚(0.6%)和極性雜質(zhì)(0.3%)以及其它微量雜質(zhì)存在。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(EtOAc，200ml)稀釋?zhuān)美?約5℃)NaHCO3(500ml和2×200ml)洗滌，繼續(xù)洗滌直至洗液的pH為約8.5。
合并的水層用EtOAc(2×100ml)萃取，將有機(jī)層合并，用鹽水(300ml)洗滌，干燥(Na2SO4，100g)，過(guò)濾并濃縮，得到白色固體狀紫杉酚粗產(chǎn)物(4.44g;HPLC HI 97.7%)。經(jīng)溫?zé)?于水浴中溫?zé)嶂良s40～45℃)將其溶于25ml甲醇(MeOH)/異丙醇(IPA)(1∶5.8)中并用H2O(1.4ml)稀釋。于室溫將所得溶液于己烷氣氛下(于室溫密閉系統(tǒng)中將含有紫杉酚粗品的MeOH/IPA/H2O溶液的容器放于另一更大的含有己烷(20ml)的容器體系中)放置16小時(shí)。將白色結(jié)晶(顯微鏡下觀測(cè)到)固體過(guò)濾，用冷(5℃)己烷(25ml)洗滌并于高真空下干燥，得到3.8g(93.0%)紫杉酚，其HPLC HI為99.0%。將母液和洗液減壓濃縮，得到0.28g(7.0%)淺黃色固體(HPLC HI 80.6%)，將其放置一邊以待進(jìn)一步處理。
元素分析(%)C47H51NO14·1.0H2O計(jì)算值 實(shí)測(cè)值C 64.74 64.71H 6.13 6.48N 1.61 1.57KF(H2O) 2.07 1.90m.p.211-213℃[α]D-51.5(c 1，CHCl3)TLCRf＝0.22;MeOH∶AcOEt∶己烷;0.6∶4.0∶5.4;UV和PMA目測(cè)。
實(shí)施例7紫杉酚的制備于0℃，60分鐘內(nèi)向含有化合物5(2′-MOP-7-三乙基甲硅烷基紫杉酚，20g，19.1mmol)的乙腈(800ml)和吡啶(48ml)的溶液(在2L聚乙烯瓶中)滴加48%氫氟酸水溶液(HF)(104ml)，在滴加期間內(nèi)部溫度不超過(guò)5℃。不攪拌下將澄清溶液于4℃保持24小時(shí)，反應(yīng)用HPLC(Waters，Nova-Pak Phenyl，3.9×150mm柱;吸收峰227nm;流速2ml/分)監(jiān)測(cè);
色譜法條件0～26分鐘，35%CH3CN/65%H2O至100%CH3CN，線性梯度洗脫，26～28分鐘，100%CH3CN至35%CH3CN/65%H2O，線性梯度洗脫，28～35分鐘，35%CH3CN/65%H2O，等效洗脫。
Rt13.73，7-TES-紫杉酚Rt6.65，紫杉酚Rt4.96，10-去乙?；?紫杉酚反應(yīng)19小時(shí)后，此混合物中仍含有0.36%7-TES-紫杉酚。24小時(shí)后，反應(yīng)混合物中無(wú)7-TES-紫杉酚和10-去乙?；?紫杉酚存在(雜質(zhì)指數(shù)Ⅱ<0.04%)。然后將溶液用乙酸乙酯(1L)稀釋并用1N HCl(800ml×2)洗滌。合并的水層用乙酸乙酯(400ml×1)萃取，將有機(jī)層合并并用飽和碳酸氫鈉水溶液(800ml×5)、鹽水(300ml×1)洗滌，用硫酸鈉干燥，過(guò)濾并濃縮，得到17.46g(約100%)白色固體狀紫杉酚粗品，上述所得紫杉酚粗品的HPLCHI為98.7%，產(chǎn)率未校正。
元素分析(%)
C47H51NO14·1.3H2O計(jì)算值 實(shí)測(cè)值C 64.34 64.32H 6.16 5.99N 1.60 2.00KF(H2O) 2.67 2.00m.p.207.5-212℃(w/分解)[α]D-52.5(c 1，CHCl3)TLCRf＝0.22;硅膠;MeOH∶AcOEt∶己烷;0.6∶4.0∶5.4;UV和TMA目測(cè)。
實(shí)施例8紫杉酚的制備于40分鐘內(nèi)劇烈攪拌下向2′-MOP-7-TES-紫杉酚(化合物5，5.0g，4.81mmol，HI99.2%(包括2′-MOP-7-TES-紫杉酚，HI 95.7%))的乙醇(EtOH，50ml)和THF(40ml)溶液于0℃(冰浴，在冷至0℃之前將2′-MOP-7-TES-紫杉酚溶于EtOH/THF)滴加預(yù)冷(約5℃)的1.5N HCl(aq.，50ml)，加入1.5N HCl時(shí)出現(xiàn)的渾濁立即消失。將所得澄清溶液于-2℃攪拌1小時(shí)并于4℃靜置22小時(shí)，此時(shí)沉淀出約100～200mg白色固體(紫杉酚)。(20小時(shí)后進(jìn)行等分試樣HPLC分析(3μ Phenyl BD柱)，35%CH3CN/65%H2O-線性梯度洗脫26分鐘;100%CH3CN-線性梯度洗脫7分鐘，35%CH3CN/65%H2O-等效洗脫7分鐘)表明此時(shí)含有紫杉酚(97.2%)、7-TES-紫杉酚(0.2%)、10-去乙?；仙挤?0.7%)和其它微量雜質(zhì)。)反應(yīng)混合物用EtOAc(200ml)稀釋并用冷(約5℃)NaHCO3(400ml和2×200ml)洗滌。(水洗液的pH值優(yōu)選應(yīng)為約8.5(否則，優(yōu)選應(yīng)繼續(xù)洗滌直至pH達(dá)到8.5))。合并的水層用EtOAc(2×80ml)萃取，將有機(jī)層合并，并用鹽水(200ml)洗滌，干燥(Na2SO4，100g)，過(guò)濾并濃縮，得到白色固體狀紫杉酚粗品(4.2g;HI 97.9%)。經(jīng)溫?zé)?水浴中溫?zé)嶂良s30～35℃)將其溶于31mlEtOH/庚烷(6∶4)并用H2O(0.15ml)稀釋。將所得均勻澄清溶液于4℃靜置約20小時(shí)，將白色結(jié)晶(顯微鏡下觀察)固體過(guò)濾，用冷(5℃)庚烷(20ml)洗滌并高真空下干燥，得到3.72g(90.6%)紫杉酚，其HI為98.6%。將母液和洗液減壓濃縮，得到紫杉酚粗品(0.45g)，將其結(jié)晶(溶于EtOH/庚烷(0.5∶0.3，4.6ml)和H2O(20μl)中并于4℃靜置20小時(shí))得到第二批白色結(jié)晶(顯微鏡下觀測(cè))固體(0.18g;4.0%;HI 92.0%)。
元素分析(%)C47N51NO14·2.55 H2O計(jì)算值 實(shí)測(cè)值C 62.73 62.35H 6.28 6.43N 1.56 1.94H2O 5.11 4.91mp＝207-208℃旋光度[α]0＝-52.3°(c 1，CHCl3)TLCRf＝0.22;硅膠;MeOH∶EtOAc∶己烷，0.6∶4.0∶5.4;UV和PMA目測(cè)。
HPLCHI＝98.6%。
權(quán)利要求
1.下列式Ⅰ的β-內(nèi)酰胺或其鹽 其中R1和R2(ⅰ)兩者同時(shí)為相同的烷基；(ⅱ)一起形成環(huán)烷基；(ⅲ)一起形成環(huán)烯基；或(ⅳ)一起形成雜環(huán)基；R3為烷基；R4為芳基；R5為氫、芳基羰基或烷氧羰基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的β-內(nèi)酰胺，其在環(huán)境條件下為晶體。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的β-內(nèi)酰胺，其基本上不含有其它異構(gòu)體并且其中基團(tuán)-OC(R1)(R2)(OR3)和R4彼此于順式位置上。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的β-內(nèi)酰胺，其中R1和R2兩者同時(shí)為相同的未取代的低級(jí)烷基，R3為未取代的低級(jí)烷基，R4為苯基以及R5為氫、苯甲?；蚴宥⊙豸驶?br> 5.根據(jù)權(quán)利要求3的β-內(nèi)酰胺，其為(3R-順式)-3-(1-甲氧基-1-甲基乙氧基)-4-苯基-2-氮雜環(huán)丁酮。
6.根據(jù)權(quán)利要求3的β-內(nèi)酰胺，其為(3R-順式)-1-苯甲?；?3-(1-甲氧基-1-甲基乙氧基)-4-苯基-2-氮雜環(huán)丁酮。
7.根據(jù)權(quán)利要求3的β-內(nèi)酰胺，其為(3R-順式)-1-叔丁氧羰基-3-(1-甲氧基-1-甲基乙氧基)-4-苯基-2-氮雜環(huán)丁酮。
8.一種制備下列式Ⅶ的帶側(cè)鏈紫杉烷或其鹽的方法 其中R1和R2(ⅰ)兩者同時(shí)為相同的烷基;(ⅱ)一起形成環(huán)烷基;(ⅲ)一起形成環(huán)烯基;或(ⅳ)一起形成雜環(huán)基;R3為烷基;R4為芳基;R5為氫、芳基羰基或烷氧羰基;和T為紫杉烷部分(在所述部分的C-13位上直接成鍵連接);該方法包括在偶合劑存在下將下列式Ⅰ的β-內(nèi)酰胺或其鹽與下列式Ⅷ紫杉烷化合物或其鹽反應(yīng) 其中R1、R2、R3、R4和R5如上所定義，其中T如上所定義;并且可任意地將所述式Ⅶ化合物中基團(tuán)-OC(R1)(R2)(OR3)轉(zhuǎn)變成羥基，從而生成下列式Ⅸ帶側(cè)鏈的紫杉烷或其鹽 其中R4、R5和T為上所定義。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中式Ⅷ紫杉烷為下列式X的紫杉烷 其中Bz為苯甲酰基;Ac為乙?；?R7為氫、烷基羰基或羥基保護(hù)基;和R8為氫或羥基保護(hù)基。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的方法，其中所述式X的紫杉烷為7-0-三烷基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ。
11.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中所述偶合劑為堿金屬甲硅烷基氨化物堿或位阻的堿金屬氨化物堿。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其中所述偶合劑具有下列式Ⅺ結(jié)構(gòu) 其中R9和R10為三烷基甲硅烷基、環(huán)烷基，或與和它們成鍵連接的氮原子一起形成雜環(huán)基;和M為堿金屬。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的方法，其中所述偶合劑為堿金屬六甲基二甲硅烷基氨化物。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的方法，其中所述堿金屬六甲基二甲硅烷基氨化物為六甲基二甲硅烷基氨化鋰。
15.根據(jù)權(quán)利要求9的方法，其中還包括脫除所得帶側(cè)鏈紫杉烷的紫杉烷部分上的一個(gè)或多個(gè)羥基保護(hù)基。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的方法，其中使用酸進(jìn)行脫保護(hù)反應(yīng)。
17.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中R1和R2兩者同時(shí)為相同的未取代的低級(jí)烷基，R3為未取代的低級(jí)烷基，R4為苯基，并且R5為苯甲?；蚴宥⊙豸驶?。
18.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中制得紫杉酚。
19.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中制得taxotere。
20.下列式Ⅶ的帶側(cè)鏈的紫杉烷或其鹽 其中R1和R2(ⅰ)兩者同時(shí)為相同的烷基;(ⅱ)一起形成環(huán)烷基;(ⅲ)一起形成環(huán)烯基;或(ⅳ)一起形成雜環(huán)基;R3為烷基;R4為芳基;R5為氫、芳基羰基或烷氧羰基;以及T為紫杉烷部分(在所說(shuō)部分的C-13位上直接成鍵連接)。
21.根據(jù)權(quán)利要求20的化合物，其中R1和R2兩者同時(shí)為相同的未取代的低級(jí)烷基，R3為未取代低級(jí)烷基，R4為苯基，并且R5為苯甲酰基或叔丁氧羰基。
22.根據(jù)權(quán)利要求20的化合物，其為2′-MOP-7-三乙基甲硅烷基紫杉酚。
23.一種制備在C-13位上帶側(cè)鏈的紫杉烷的方法，包括在堿金屬甲硅烷基氨化物堿或位阻的金屬氨化物堿存在下，將在C-13位上帶有羥基的紫杉烷與能夠形成所述側(cè)鏈的β-內(nèi)酰胺反應(yīng)。
全文摘要
本發(fā)明涉及在制備帶側(cè)鏈的紫杉烷如紫杉酚和紫杉酚衍生物中可用作中間體的新的β-內(nèi)酰胺。本發(fā)明還涉及偶合β-內(nèi)酰胺以形成此類(lèi)帶側(cè)鏈的紫杉烷的新的方法以及涉及新的帶側(cè)鏈的紫杉烷。
文檔編號(hào)C07F7/08GK1097416SQ9410289
公開(kāi)日1995年1月18日 申請(qǐng)日期1994年3月19日 優(yōu)先權(quán)日1993年3月19日
發(fā)明者J·K·托塔希爾, I·D·特里富諾維奇, D·J·庫(kù)塞拉, 李文森 申請(qǐng)人:布里斯托爾-邁爾斯斯奎布公司