專利名稱：紫杉烷衍生物的膦酰氧甲醚的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抗腫瘤化合物。具體地講，本發(fā)明提供了新穎的紫杉烷衍生物，它的藥物組合物，以及作為抗腫瘤藥物的應(yīng)用。
紫杉醇(TaxolR，paclitaxel)是從太平洋紫杉樹(shù)(Pacific yewtrees，Taxus brevifolia)的樹(shù)皮中提取出來(lái)的天然產(chǎn)物。它在動(dòng)物體內(nèi)模型中顯示出良好的抗腫瘤活性，并且在近期的研究中發(fā)現(xiàn)了它特有的作用方式，即，包括異常性的微管蛋白的聚合和破壞有絲分裂。最近它已被批準(zhǔn)用于治療卵巢癌;并且，涉及乳腺癌，結(jié)腸癌和肺癌的研究已取得肯定性的結(jié)果。紫杉醇臨床研究的結(jié)果見(jiàn)Rowinsky和Donehower的綜述“The clinical Pharmacology and Use of Antimicrotubule Agents in Cancer Chemotherapeutics”P(pán)harmac Ther.，5235-84，1991。
最近，一個(gè)紫杉醇的半合成類似物TaxotereR被發(fā)現(xiàn)在動(dòng)物模型中具有優(yōu)良的抗腫瘤活性。在歐洲和美國(guó)，TaxotereR正在進(jìn)行臨床試驗(yàn)。紫杉醇和TaxotereR的結(jié)構(gòu)式如下所示;采用常規(guī)的紫杉醇分子的位次編排系統(tǒng)。
TaxolR(紫杉醇) R＝Ph;R’＝乙?；鵗axotereRR＝叔-丁氧基;R’＝氫紫杉醇的缺點(diǎn)之一是其水溶性十分有限，因而需要與非水性藥物賦形劑配伍。一種常用的載體是Cremophor EL，其自身可能有對(duì)人體不利的副作用。因此許多研究小組制備了水溶性的紫杉醇的衍生物，詳見(jiàn)如下文獻(xiàn)(a)Haugwitz et al，U.S.Patent NO.4，942，184;
(b)Kingston et al，U.S.Patent NO.5.059.699(c)Stella et al，U.S.Patent NO.4，960，790(d)European Patent Application 0.558，959A11993年9月8日出版
(e)Vyas et al.Bioorganic& Medicinal Chemistry Letters，1993，3，1357-1360(f)Nicolaou et al，Nature，1993，364，464-466本發(fā)明化合物為紫杉烷衍生物的膦酰氧甲醚及其藥物學(xué)上可耐受的鹽。鹽的水溶性有助于藥物劑型的制備。
本發(fā)明涉及具有式(A)的紫杉烷衍生物或其藥物學(xué)上可耐受的鹽。
其中，T是C13碳上取代有3-氨基-2-羥丙酰氧基的紫杉烷片斷;n是1，2或3;m是0或1至6的整數(shù)。
另一方面，本發(fā)明提供了具有式(B)的紫杉烷衍生物
其中T’是非反應(yīng)性羥基被阻斷的T，m和n的定義同式(A)中的定義。
另方面，本發(fā)明還提供了具式(C)的中間體
其中T’，m和n定義同式(A)中的定義，且RY是膦?；Ｗo(hù)基。
另方面，本發(fā)明還提供了具式(D)的中間體或其C13金屬醇鹽。
其中m和n定義同上，且txn為紫杉烷片斷。
另方面，本發(fā)明還提供了在哺乳類宿主中抑制腫瘤的方法，該方法包括給所述的哺乳類宿主服用抗腫瘤有效劑量的式(A)化合物。
再一方面，本發(fā)明還提供了在哺乳類宿主中抑制腫瘤的方法，該方法包括所述的哺乳類宿主服用抗腫瘤有效劑量的式(B’)化合物 其中R1b'是羥基，-OC(O)Rx或-OC(O)ORx;R3b'是氫，羥基，-OC(O)ORx，C1-6烷氧基或-OC(O)Rx，R6b'或R7b'之一為氫，且另一個(gè)為羥基或C1-6烷酰氧基;或者是R6b'和R7b'一同構(gòu)成氧代基;R4和R5獨(dú)立地表示C1-6烷基，C2-6烯基，C2-6炔基，或-Z-R6;Z是直接的鍵，C1-6烷基或C2-6烯基;R6是芳基，取代的芳基，C3-6環(huán)烷基或雜芳基;P是0或1;Rx是C1-6烷基，任意地被1-6個(gè)相同或不同的鹵原子所取代，C3-6烷基，C2-6鏈烯基或羥基;或者Rx為下式所表示的基團(tuán) 其中D是鍵或C1-6烷基;且Ra，Rb和Rc分別獨(dú)立地代表氫，氨基，C1-6烷氨基，二-C1-6烷氨基，鹵素，C1-6烷基，或C1-6烷氧基。
因而，本發(fā)明還提供了一種由抗腫瘤有效量的式(B’)或(A)化合物與制藥學(xué)上可耐受的載體一起構(gòu)成的藥物組合物。
在本申請(qǐng)書(shū)中，除非特別指明或有關(guān)聯(lián)，將采用下列定義。
“烷基(Alkyl)”表示一個(gè)直鏈或支鏈的具有一至六個(gè)碳原子的碳鏈，例如甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，仲丁基，異丁基，叔丁基，正戊基，仲戊基，異戊基和正己基?！版溝┗?Alkenyl)”表示至少有一個(gè)碳-碳雙鍵的，直鏈或支鏈的，含有2-6個(gè)碳原子的碳鏈;例如，乙烯基，丙烯基，異丙烯基，丁烯基，異丁烯基，戊烯基和己烯基?！叭不?Alkynyl)”表示直鏈或支鏈的，至少有一個(gè)碳-碳叁鍵的，具有2-6個(gè)碳原子的碳鏈;例如，乙炔基，丙炔基，丁炔基及己炔基。
“芳基(Aryl)”表示具有6-10個(gè)碳原子的芳烴;例如，苯和萘?！叭〈姆蓟北硎痉蓟恢辽僖粋€(gè)如下基團(tuán)所取代C1-6烷酰氧基，羥基，鹵素，C1-6烷基，三氟甲基，C1-6烷氧基，芳基，C2-6鏈烯基，C1-6烷?；?，硝基，氨基及酰氨基?！胞u素(Halogen)”表示氟，氯，溴和碘。
“膦?；北硎净鶊F(tuán)-P(O)(OH)2，且“膦酰氧甲氧基”或“膦酰氧甲醚”一般表示基團(tuán)-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2“(甲硫基)硫代羰基”表示基團(tuán)-C(S)SCH3?！凹琢蚣谆?也常縮寫(xiě)為MTM)一般表示基團(tuán)-CH2SCH3。
“紫杉烷片斷”(也縮寫(xiě)為txn)表示含有20個(gè)碳的，由下列結(jié)構(gòu)式所表示的，具有如下絕對(duì)構(gòu)型的紫杉烷核骨架的片斷。
上述所示位次編排系統(tǒng)為紫杉烷命名中常用的一種，本申請(qǐng)書(shū)全部沿用此排序系統(tǒng)。例如，標(biāo)志C1指標(biāo)有“1”的碳原子;C5-C20 oxetane系指由標(biāo)號(hào)為4，5和20的碳原子與氧原子構(gòu)成的oxetane環(huán);且C9氧系指與標(biāo)號(hào)為9的碳原子相連的氧原子，所謂的氧原子可能是氧代基，α-或β-羥基，或α-或β-酰氧基。
“取代的3-氨基-2-羥基丙酰氧基”表示由下式所表示的殘基
(X為非氫基團(tuán)且X1是氫或非氫基團(tuán))。該殘基的立體化學(xué)與紫杉醇側(cè)鏈的相同。在本申請(qǐng)書(shū)中，有時(shí)將此基團(tuán)稱為“C13側(cè)鏈”。
“紫杉烷衍生物”(縮寫(xiě)為T(mén))是指帶有C13側(cè)鏈的紫杉烷片斷。
“雜芳基”是指最少含有一個(gè)，最多有四個(gè)選自氧，硫和氮等非碳原子的五元或六元芳環(huán)。雜芳基的例子有噻吩基，呋喃基，吡咯基，咪唑基，吡唑基，噻唑基，異噻唑基，惡唑基，異惡唑基，三唑基，噻二唑基，惡二唑基，四唑基，噻三唑基，惡三唑基，吡啶基，嘧啶基，吡嗪基，噠嗪基，三嗪基，四嗪基，等雜環(huán)基。
“膦?；Ｗo(hù)基”指能用于阻斷或保護(hù)膦酰功能基的片斷，較可取的該類保護(hù)基是那些能用不影響分子中其它部分的方法來(lái)除掉的基團(tuán)。合適的膦?；Ｗo(hù)基對(duì)熟悉本領(lǐng)域技術(shù)的人士而言，是很熟悉的，例如，芐基和烯丙基。
“羥基保護(hù)基”包括，但并不局限于醚，如甲基，叔丁基，芐基，對(duì)甲氧芐基，對(duì)硝基芐基，烯丙基，三苯甲基，甲氧甲基，甲氧乙氧甲基，乙氧乙基，四氫吡喃基，四氫硫代吡喃等，以及三烷基甲硅烷醚，如三甲基甲硅烷醚，三乙基甲硅烷醚，及叔丁基二甲基甲硅烷醚;酯如苯甲?；?，乙?；?，苯乙?；柞；?，單，二或三鹵乙酰基，如氯乙?；纫阴；?，三氯乙酰基，三氟乙?；?及碳酸酯，如甲基，乙基，2，2，2-三氯乙基，丙基，芐基，和對(duì)硝基苯基。
羥基和膦?；Ｗo(hù)基的其它例子見(jiàn)常規(guī)參考文獻(xiàn)，像Greene及Wuts著Protective Groups in Organic Synthesis，2nd Ed.，1991，John Wiley & Sons，及Mcomie，Protective Groups in Organic Chemistry.1975，Plenum Press。保護(hù)基的引入和除去的方法也參見(jiàn)這些教科書(shū)。
“制藥學(xué)上的耐受鹽”表示酸性膦?；慕饘冫}或銨鹽，其中的陽(yáng)離子對(duì)活性化合物的毒性或生物活性均不構(gòu)成顯著的影響。合適的金屬鹽包括鋰，鈉，鉀，鈣，鋇，鎂，鋅及鋁鹽。較可取的金屬鹽是鈉和鉀鹽。合適的銨鹽有如，氨，氨基丁三醇(TRIS)，三乙胺，普魯卡因，benzathine，二芐胺，氯普魯卡因，膽堿，二乙醇胺，三乙醇胺，乙二胺，葡糖胺，N-甲基葡糖胺，賴氨酸，精氨酸，乙醇胺，僅舉數(shù)例。較可取的銨鹽為賴氨酸，精氨酸，三乙醇胺及N-甲基葡糖胺的鹽。更可取為N-甲基葡糖胺或三乙醇胺。
在本文中，術(shù)語(yǔ)-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2包括游離酸及其制藥學(xué)上可耐受的鹽，在相關(guān)段落中特指游離酸時(shí)除外。
本發(fā)明提供了式(A)的紫杉烷衍生物或其制藥學(xué)上可耐受的鹽。
T-[OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2]m(A)其中T為C13碳原上帶有取代的3-氨基-2-羥基丙酰氧基的紫杉烷片段;n是1，2或3;m為0，或1至6的整數(shù)，本發(fā)明還提供了可用于制備式(A)紫杉烷衍生物的，具式(B)的紫杉烷衍生物
在紫杉烷片斷的實(shí)例中至少含有以下功能基C1-羥基，C2-苯甲酰氧基，C4-乙酰氧基，C5-C20 oxetane，C9-氧，及C11-C12雙鍵。
一個(gè)較可取的紫杉烷片斷衍生自如下結(jié)構(gòu)的殘基 其中R2a'是氫且R2e是氫，羥基，-OC(O)RX，或-OC(O)ORX;R3e為氫，羥基，OC(O)RX，-OC(O)ORX或C1-6烷氧基;R6e或R7e之一為氫，且另一個(gè)為羥基或-OC(O)Rx，或者R6e與R7e一起構(gòu)成氧代基;Rx定義同下。
在另一個(gè)實(shí)例中，C13側(cè)鏈來(lái)自如下結(jié)構(gòu)的殘基
其中R1e為氫或-C(O)Rx，-C(O)ORX，R4和R5獨(dú)立地表示C1-6烷基，C2-6鏈烯基，C2-6炔基，或-Z-R6;Z為直接的鍵，C1-6烷基或C2-6鏈烯基;R6為芳基，取代的芳基，C3-6環(huán)烷基，或雜環(huán)芳基;且RX為C1-6烷基(任意地被1-6個(gè)相同或不同的鹵原子取代)，C3-6環(huán)烷基，C2-6鏈烯基或羥基;或者RX為下式的殘基
其中D是鍵或C1-6烷基;且Ra，Rb及Rc分別獨(dú)立地為氫，氨基，C1-6烷氨基，二-C1-6烷氨基，鹵素，C1-6烷基，或C1-6烷氧基;P為0或1。
在可取的實(shí)例中，R4為C1-6烷基且P為1，或R4為-Z-R6，且P為0。更可取的為R4(O)，為叔丁氧基，苯基，異丙氧基，正丙氧基，或正丁氧基。
在另一個(gè)可取的實(shí)例中，R5為C2-6鏈烯基或-Z-R6，且Z和R6定義同前所述。更可取的為R5是苯基，α-呋喃基，α-噻吩基，異丁烯基，α-丙烯基，或C3-6環(huán)烷基。
在另一個(gè)實(shí)例中，可用式(Ⅰ)來(lái)特指式(A)化合物或其制藥學(xué)上可耐受的鹽。

其中R1為羥基，-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2，-OC(O)RX或-OC(O)ORX;R2'為氫，且R2為氫，羥基，-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2，-OC(O)Rx或-OC(O)ORX;R3為氫，羥基，C1-6烷氧基，-OC(O)RX，-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2，或-OC(O)ORX;R6或R7之一為氫，且另一個(gè)為羥基，C1-6烷酰氧基，或-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2;或R6及R7一起構(gòu)成氧代基;附加條件是R1，R2，R3，R6或R7中至少有一個(gè)為-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2;R4，R5，RX，m和P定義同前。
在式(Ⅰ)化合物中，RX的實(shí)例包括甲基，羥甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，異丁基，氯甲基，2，2，2-三氯乙基，環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)己基，乙烯基，2-丙烯基，苯基，芐基，溴苯基，4-氨基苯基，4-甲基氨基苯基，4-甲基苯基，4-甲氧苯基等等。R4和R5的實(shí)例包括2-丙烯基，異丁烯基，3-呋喃基，3-噻吩基，苯基，萘基，4-羥基苯基，4-甲氧基苯基，4-氟苯基，4-三氟甲基苯基，甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，異丁基，叔丁基，乙烯基，2-丙烯基，2-丙炔基，芐基，苯乙基，苯乙烯基，3，4-二甲氧苯基，2-呋喃基，2-噻吩基，2-(2-呋喃)乙烯基，2-甲基丙基，環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)己基，環(huán)己甲基，環(huán)己乙基等等。
在一個(gè)實(shí)例中，本發(fā)明提供了式(Ⅰ)化合物中較可取的基團(tuán)，其中R5為C2-6烯基或-Z-R6，且Z和R6定義同前所述。更可取的R5為苯基，3-呋喃基，3-噻吩基，2-丙烯基，異丁烯基，2-呋喃基，2-噻吩基或C3-6環(huán)烷基。
在另一個(gè)可取的實(shí)例中，化合物式(Ⅰ)的R4為C1-6烷基其中P為1;或R4是-Z-R6，且Z和R6的定義同前所述，且此時(shí)P為0。較可取的R4(O)，為叔丁氧基，苯基，異丙氧基，正丙氧基，正丁氧基。
在另一個(gè)可取的實(shí)例中，本發(fā)明提供了式(Ⅰ)化合物，其中R1為-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2。在較可取的實(shí)例中，R2為羥基，-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2，-OC(O)ORX或-OC(O)RX，且RX較可取的是C1-6烷基，在另一個(gè)較可取的實(shí)例中，R3為羥基或乙酰氧基。
在另一個(gè)可取的實(shí)例中，本發(fā)明提供了式(Ⅰ)化合物，其中R2為-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2;R1為羥基，-OC(O)RX或-OC(O)ORX;且R3為氫，羥基，乙酰氧基，-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2或-OC(O)ORX;且RX定義同前。在較可取的實(shí)例中，R1為羥基或-OC(O)ORX且RX較可取的C1-6烷基;且R3為羥基或乙酰氧基。
在另一個(gè)可取的實(shí)例中，本發(fā)明提供了式(Ⅰ)化合物，其中R3為-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2;R1為羥基或-OC(O)ORX;R2’為氫，且R2為氫，羥基，或-OC(O)ORX;且RX的定義同前。在更可取的例子中，R1為羥基或-OC(O)ORX，且RX較可取的為C1-6烷基。在另一個(gè)較可取的實(shí)例中R2為羥基。
在另一個(gè)可取的實(shí)例中，m是0，1或2，且膦酰氧甲氧基位于紫杉烷片斷的C7位上。
式(A)化合物的較可取的制藥學(xué)上可耐受的鹽是堿金屬鹽，包括鋰，鈉和鉀鹽;以及銨鹽包括三乙銨鹽，三乙醇銨鹽，乙醇銨鹽，精氨酸鹽，賴氨酸鹽和N-甲基葡糖銨鹽。最可取的鹽是鈉，三乙醇銨及N-甲基葡糖銨鹽。
式(A)紫杉烷衍生物的較可取的實(shí)例有如下化合物(1)7-O-膦酰氧甲基紫杉醇，(2)2’-O-(乙氧基羰基)-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇;
(3)2’-O-膦酰氧甲基紫杉醇;
(4)2’-7-雙-O-(膦酰氧甲基)紫杉醇;
(5)3’-N-脫苯甲?；?3’-脫苯基-3’-N-(叔丁氧羰基)-3’-(2-呋喃基)-2’-O-乙氧羰基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇;
(6)3’-N-脫苯甲?；?3’-脫苯基-3’-N-(叔丁氧羰基)-3’-(2-噻吩基)-2’-O-乙氧羰基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇;
(7)10-脫乙?；?3’-N-脫苯甲?；?3’-N-(叔丁氧羰基)-10-O-(膦酰氧甲基)紫杉醇;
(8)2’-O-膦酰氧甲氧甲基紫杉醇;
(9)2’-O-正丙基羰基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇;
(10)2’-O-甲基羰基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇;
(11)2’-O-甲氧羰基-7-O-膦酰氧基紫杉醇;
(12)2’-O-膦酰氧甲氧甲基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇;以及它們各自的制藥學(xué)上可耐受的鹽，特別是鈉，鉀，精氨酸，賴氨酸，N-甲基葡糖胺，乙醇胺，三乙胺及三乙醇胺的鹽。
可從紫杉烷衍生的起始物T-[OH]n(其中T、n同前定義)來(lái)制備式(A)化合物。T-[OH]n的特征并無(wú)特別的限制，只要在紫杉烷片斷或C13側(cè)鏈上至少有一個(gè)活性的羥基來(lái)連接形成膦酰氧甲醚?？蛇@樣理解，即，活性羥基可以直接連在C13丙酰氧鏈上(如，2’-羥基紫杉醇)或連在紫杉烷環(huán)上(如7-羥基紫杉醇);或它也可在C13側(cè)鏈的取代基上，或在紫杉烷環(huán)的取代基上。圖示I所例反應(yīng)步驟可用于式(A)化合物的制備圖示Ⅰ 在圖示Ⅰ中，T’是被保護(hù)的非反應(yīng)性羥基的紫杉烷衍生物;RY是膦酰保護(hù)基;n和m定義同前所述。因而，一個(gè)合適的被保護(hù)的并具有一或多個(gè)反應(yīng)性羥基的T’被首先轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式(B)甲硫甲醚。以紫杉醇為例，T’可以是紫杉醇本身(進(jìn)行2’，7-雙甲硫甲基化)，7-O-三乙基甲硅烷基紫杉醇，7-O-芐氧羰基紫杉醇，或2’-O-乙氧羰基紫杉醇。式(B)化合物(其中m為O)可按如下方法制備用二甲基亞砜/醋酐，或用二甲硫醚和有機(jī)過(guò)氧化物處理T’-[OH]n。這些將在下列章節(jié)中更全面地討論。
可用幾種可能的途徑來(lái)制備具有一個(gè)插入的亞甲氧基單元(即，m＝1的式(B)化合物)MTM醚(甲硫甲基醚)。在一條途徑中，將m＝0的式(B)化合物與N-碘代琥珀酰亞胺(NIS)和甲基硫代甲醇反應(yīng)，將側(cè)鏈延長(zhǎng)一個(gè)亞甲氧基單元，
一個(gè)類似的醇與甲硫甲氧基團(tuán)在NIS存在下進(jìn)行的反應(yīng)見(jiàn)Veeneman等人在Tetrahedron，1991，v.47，pp.1547-1562的報(bào)道，在此將其有關(guān)部分通過(guò)參考文獻(xiàn)結(jié)合在一起。較可取的是采用三氟甲磺酸銀(triflate)作為催化劑。甲硫甲醇化合物及其制備見(jiàn)syn.comm.，1986，16(13)1607-1610。
在另一個(gè)方法中，用式(Aa)化合物與堿，如正丁基鋰，二異丙基酰銨鋰或六甲基二硅疊氮化鋰等進(jìn)行反應(yīng)生成T-烷氧化物(Ad)，將(Ad)與氯甲基甲硫甲基醚進(jìn)行反應(yīng)生成m＝1的式(B)化合物。[Ae]化合物(Ae)是用甲硫醇鹽(用堿如正丁基鋰，二異丙基酰胺鋰或六甲基二硅疊氮化鋰等處理甲硫甲醇得來(lái)的)與氯碘甲烷反應(yīng)而制得的。也可從1，1’-二氯二甲醚(ClCH2OCH2Cl)與化學(xué)計(jì)算量或少量(如，約0.8當(dāng)量的)的碘化鈉進(jìn)行反應(yīng)，而后用硫代甲醇鈉處理制得化合物(Ae)。1，1’-二氯二甲醚見(jiàn)Ind.J.Chem.，1989，PP.454-456中的報(bào)導(dǎo)。
在另一方法中，式(Aa)化合物與雙(MTM)醚，CH3SCH2OCH2SCH3及NIS反應(yīng)給出m＝1的式(B)化合物。
雙(MTM)醚是用1，1’二氯二甲醚與碘化鈉反應(yīng)，而后用硫代甲醇鈉處理而制備的。
上述采用甲硫甲醇和NIS的方法可應(yīng)用于任何含有MTM基的試劑，在每次反應(yīng)中給側(cè)鏈上增加一個(gè)亞甲氧基單元。例如，m＝1的式(B)化合物與甲硫甲醇和NIS反應(yīng)，給出m＝2的式(B)化合物。該步驟可重復(fù)進(jìn)行，從而給出m＝3，4，5或6的式(B)化合物。
在圖示Ⅰ的第二步中，甲硫甲醚轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的被保護(hù)的膦酰氧甲醚。用MTM醚與NIS反應(yīng)，并保護(hù)磷酸酯HOP(O)(ORY)2來(lái)完成該轉(zhuǎn)化。在第三步中，除去膦酰保護(hù)基及任何羥基保護(hù)基給出式(A)化合物。例如，合適的膦?；Ｗo(hù)基是芐基，可經(jīng)催化氫化被除去;羥基保護(hù)基像三烷基甲硅烷基可經(jīng)氟離子除去，可用鋅除去三氯乙氧羰基。除去保護(hù)基的方法參見(jiàn)如下教科書(shū)如Green及Wuts著Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley & Sons，1991;及Mcomie著，Protective in Organic Chemistry，Plenum Press，1973。這兩個(gè)步驟在說(shuō)明書(shū)的后面章節(jié)中將被詳細(xì)地討論。
圖示Ⅱ給出圖示Ⅰ反應(yīng)步驟的變型。
圖示Ⅱ 在圖示Ⅱ中，式(Aa)化合物與式(Ca)化合物及NIS反應(yīng)給出式(C)化合物，式(C)經(jīng)去保護(hù)給出式(A)化合物。m＝0的式(Ca)化合物可經(jīng)下列步驟制備首先用六甲基二硅疊氫化鈉，鋰或鉀等堿處理甲硫甲醇，給出甲硫甲醇鹽;然后將甲醇鹽與保護(hù)的氯磷酸酯，如二芐基氯磷酸酯反應(yīng)，給出所需的化合物。m為1的式(Ca)化合物可用如下步驟制備用雙保護(hù)的磷酸鹽處理CH3SCH2OCH2Cl，如用二芐基磷酸鈉，鉀，四正丁基銨鹽;或首先將CH3SCH2OCH2Cl轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的碘化合物(如用碘化鈉)，然后與磷酸鹽反應(yīng)。另一個(gè)制備式(Ca)化合物(m＝1)的方法為用碘化鈉處理ClCH2OCH2Cl，然后再用硫代甲醇鈉處理，給出CH3SCH2OCH2SCH3;而后用NIS和一個(gè)雙保護(hù)的磷酸酯如二芐基磷酸酯處理該產(chǎn)物，給出所需的產(chǎn)物。可用上述任意含有MTM基團(tuán)的試劑，同時(shí)與甲硫甲醇和NIS一起反應(yīng)以延長(zhǎng)一個(gè)亞甲氧基單元。
在另一個(gè)制備式(A)化合物的方法中，T-醇鹽(Ad)與碘磷酸酯進(jìn)行反應(yīng)，見(jiàn)圖示Ⅲ，圖示Ⅲ 在圖示Ⅲ中，將ClCH2(OCH2)mCl與雙保護(hù)的磷酸鹽反應(yīng)，給出ClCH2(OCH2)mOP(O)(ORY)2，然后用碘化鈉處理，給出所需的碘磷酸鹽化合物。
另一適于制備式A化合物(其中至少有一個(gè)膦酰氧甲氧基與紫杉烷片斷相連)的方法見(jiàn)下列圖示Ⅳ。
圖示Ⅳ 在圖示Ⅳ中，m和n的定義同前所述;X是非氫基團(tuán)，P為羥基保護(hù)基;txn為紫杉烷片斷。式(D)化合物為具有13α-羥基，且一或多個(gè)甲硫甲醚間接或直接地連在紫杉烷核上的紫杉烷;也包括式(D)C13金屬醇鹽。式(D)化合物的實(shí)例是7-O-甲硫甲基漿果赤霉素Ⅲ
紫杉醇(D)為氮雜環(huán)丁酮的結(jié)合類似于后面的圖示Ⅵ中所示;因此那里所述的制備式(Ⅰd)的方法也可應(yīng)用于制備式(Ba)化合物，[即式(B)化合物，其中至少有一個(gè)MTM基團(tuán)直接或間接地與紫杉烷片斷相連]，如在圖示Ⅵ中，采用式(D)化合物代替式(Ⅱ)化合物。最好首先將紫杉烷(D)轉(zhuǎn)化為C13金屬醇鹽，如醇鈉，醇鉀或醇鋰;較可取的為醇鋰。氮雜環(huán)丁酮作為C13側(cè)鏈的前體。在與紫杉烷結(jié)合后，將羥基保護(hù)基P除去，如果需要的話，可將側(cè)鏈上游離的羥基按本文所述方式轉(zhuǎn)化為MTM醚或衍生為酯或碳酸酯。
可按本文后面所述方法(也是已知的常規(guī)方法)制備氮雜環(huán)丁酮?？砂瓷鲜鲋苽涫?B)化合物的通法，采用合適的被保護(hù)的紫杉烷來(lái)制備式(D)化合物。然而，更為方便的是，可采用硼氫化物如硼氫化鈉或四丁基銨硼氫化物將13一側(cè)鏈切斷;從而從式(Ba)化合物來(lái)制備它們;例如，用四丁基銨硼氫化物處理7-O-MTM紫杉醇，給出7-O-MTM漿果赤霉素Ⅲ。
圖示Ⅰ中制備式(A)化合物的通法在圖示V中得到進(jìn)一步具體化，圖示V給出了式(Ⅰ’)(即m為0的式(Ⅰ)化合物)化合物的制備方法。在該合成步驟中所用的方法一般應(yīng)用于式(Ⅰ)以外的，其它的紫杉烷衍生物。更一步的，本領(lǐng)域技術(shù)熟練的人士也可按照本文的精神，對(duì)圖示(Ⅴ)中的方法進(jìn)行修改;從而制備出m為1，2或3的式(A)紫杉烷衍生物。
可以理解的是，在圖示Ⅴ及本文的其它部分中，術(shù)語(yǔ)“羥基保護(hù)基”可包括合適的碳酸酯(例如，-OC(O)ORX其中RX不含有羥基);因而當(dāng)采用碳酸酯作為羥基保護(hù)基時(shí)，目的是在后面的步驟中除去保護(hù)，給出游離的羥基，除非是將碳酸醋片斷保留而作為最終產(chǎn)物中的一部分。
圖示Ⅴ
在圖示Ⅴ中，R1a是羥基，保護(hù)的羥基，-OC(O)RX或-OC(O)ORX;R2’為氫，且R2a為氫，羥基，保護(hù)的羥基，-OC(O)RX或-OC(O)ORX;R3a為氫，羥基，保護(hù)的羥基，C1-6烷氧基，-OC(O)RX或-OC(O)ORX，R6a或R7a之一為氫，且另一個(gè)為羥基，保護(hù)的羥基或C1-6烷酰氧基;或者R6a與R7a一起構(gòu)成氧代基;前提條件是R1a，R2a或R3a，R6a或R7a至少有一個(gè)為羥基。R1b為羥基，保護(hù)的羥基，-OCH2SCH3，-OC(O)RX或-OC(O)ORX;R2′是氫，且R2b為氫，羥基，保護(hù)的羥基，-OCH2SCH3，-OC(O)RX或-OC(O)ORX;R3b為氫，羥基，保護(hù)的羥基，C1-6烷氧基，-OC(O)RX，-OCH2SCH3或-OC(O)ORX;R6b或R7b之一為氫且另一個(gè)為羥基，保護(hù)的羥基，C1-6烷酰氧基或-OCH2SCH3;或R6b和R7b一起構(gòu)成氧代基;前提條件是R1b，R2b，R3b，R6b和R7b一起構(gòu)成氧代基;前提條件是R1b，R2b，R3b，R6b和R7b中至少有一個(gè)為-OCH2SCH3。R1c為羥基，保護(hù)的羥基，-OCH2OP(O)(ORY)2，-OC(O)RX或-OC(O)ORX;R2′為氫，且R2c為氫，羥基，保護(hù)的羥基，-OCH2OP(O)(ORY)2，-OC(O)RX或-OC(O)ORX;R3c為氫，羥基，保護(hù)的羥基，C1-6烷氧基，-OC(O)RX，-OCH2OP(O)(ORY)2或-OC(O)ORX;R6c或R7c之一為氫，且另一個(gè)為羥基，保護(hù)的羥基，C1-6烷酰氧基或-OCH2OP(O)(ORY)2;前提條件是R1c，R2c，R3c，R6c或R7c中至少有一個(gè)為-OCH2OP(O)(ORY)2。R1’是羥基，-OCH2OP(O)(OH)2，-OC(O)Rx或-OC(O)ORX;R2是氫，且R2″是氫，羥基，-OCH2OP(O)(OH)2，-OC(O)RX或-OC(O)ORX;R3′是氫，羥基，C1-6烷氧基，-OC(O)RX，-OCH2OP(O)(OH)2或-OC(O)ORX;R6′或R7′之一為氫，且另一個(gè)為羥基，C1-6烷酰氧基或-OCH2OP(O)(OH)2;前提條件是R1'，R2″，R3'，R6'或R7'中至少有一個(gè)是-OCH2OP(O)(OH)2。R4，R5，RX及P定義同前所述，且RY是膦?；Ｗo(hù)基。
在第一步中，將式(Ⅰa)化合物的游離羥基轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的甲硫甲醚(-OCH2SCH3)基。該轉(zhuǎn)化可按下列2個(gè)方法之一來(lái)進(jìn)行(1a-二甲基硫醚方法)及(1b-二甲基亞砜方法)。用二甲基硫醚將醇轉(zhuǎn)化為甲硫甲基醚的方法參見(jiàn)Medina等人在Tet.Lett.，1988 PP.3773-3776中的報(bào)道，在此將其有關(guān)部分通過(guò)參考文獻(xiàn)結(jié)合在一起。二甲基亞砜方法是已知的被稱為Pummerer反應(yīng)的方法。
應(yīng)注意的是羥基反應(yīng)活性的差異取決于其在式(Ia)紫杉烷衍生起始物上的位置。盡管一般來(lái)講，在?；磻?yīng)中，2’-羥基活性高于7-羥基，而7-羥基活性又高于10-羥基。但在二甲硫醚方法中，驚奇地發(fā)現(xiàn)7-羥基比2’-羥基更易轉(zhuǎn)化為甲硫甲基醚。位于C-1上的叔羥基一般反應(yīng)性最低。羥基反應(yīng)性的差異可被用來(lái)控制甲硫甲基化的位置及程度。
因而，對(duì)R1a和R2a均為羥基的式(Ⅰa)化合物而言，采用二甲硫醚方法時(shí)，主要的甲硫甲基化產(chǎn)物為相應(yīng)的7-O-甲硫甲基醚。為了得到式(Ⅰb)化合物，其中R1b為甲硫甲氧基，而不將可能存在的7-羥基轉(zhuǎn)化為甲硫甲醚，可用常規(guī)的羥基保護(hù)基將7-羥基保護(hù)起來(lái)，例如用三乙基甲硅烷基或芐氧羰基。相類似地，也無(wú)須將7-和/或2’-羥基轉(zhuǎn)化(假如其存在，可用相同或不同的羥基保護(hù)基將它們保護(hù))，以得到10-甲硫甲醚化的產(chǎn)物。雖然在二甲硫醚方法中，7-羥基是較可取的甲硫甲基化的位置，如果7-單甲硫甲醚是所需產(chǎn)物時(shí)，最好還是先將2’-羥基保護(hù)起來(lái)。
另外，可以控制反應(yīng)條件，從而生成雙或三甲硫甲醚紫杉烷衍生物。例如，對(duì)紫杉醇而言，增加反應(yīng)時(shí)間或采用大大過(guò)量的甲硫甲基化試劑可在反應(yīng)產(chǎn)物中得到較高比例的2’，7-雙(甲硫甲基)醚紫杉醇。
現(xiàn)在回到圖示Ⅴ，在步驟(1a)中，用二甲硫醚及有機(jī)過(guò)氧化物，如苯甲酰過(guò)氧化物處理式(Ⅰa)化合物。該反應(yīng)在惰性有機(jī)溶劑進(jìn)行，如，乙腈，二氯甲烷等，在有助于產(chǎn)物生成的溫度下反應(yīng);典型的反應(yīng)溫度為約-40℃至約環(huán)境溫度。采用相對(duì)紫杉烷衍生起始物(Ⅰa)過(guò)量的二甲硫醚及相對(duì)于苯甲酰過(guò)氧化物，且二甲硫醚相對(duì)于苯甲酰過(guò)氧化物是過(guò)量的。
所用的起始物的相對(duì)數(shù)量取決于要達(dá)到的甲硫甲基化反應(yīng)的程度。因此當(dāng)紫杉烷衍生起始物(Ⅰa)的一游離羥基轉(zhuǎn)化為甲硫甲醚時(shí)，可以采用相對(duì)于紫杉烷衍生物(Ⅰa)最大過(guò)量10倍的二甲硫醚和苯甲酰過(guò)氧化物;且較可取的為，二甲硫醚的用量約2-3倍過(guò)量于苯甲酰過(guò)氧化物。當(dāng)起始物(Ⅰa)有2’-及7-羥基時(shí)，增加二甲硫醚和苯甲酰過(guò)氧化物的相對(duì)量將得到2’，7-雙(甲硫甲基)醚。當(dāng)2’7-雙(甲硫甲基)醚為所需產(chǎn)物時(shí)，二甲硫醚的用量較可取的為大約15至約20倍過(guò)量于紫杉烷衍生起始物;且采用約5-10倍過(guò)量于紫杉烷衍生起始物的苯甲酰過(guò)氧化物。
另外，將式(Ⅰa)化合物與二甲基亞砜和醋酐(方法1b)反應(yīng)，也可制備出式(Ⅰb)化合物。該方法適于將一非-2’-羥基衍生化為它的甲硫甲醚。在方法(Ⅰb)中，將式(Ⅰa)化合物溶于二甲基亞砜中并將醋酐加入該溶液中。該反應(yīng)通常在室溫下進(jìn)行18至24小時(shí)，生成單甲硫甲醚。
在反應(yīng)過(guò)程的第二步驟中，將甲硫甲醚轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的保護(hù)的膦酰氧甲醚。從甲硫甲基轉(zhuǎn)化為膦酰氧甲基的反應(yīng)可按Veeneman等人Tetrahedron 1991.v47 pp1547-1562報(bào)道的方法進(jìn)行。在此將其有關(guān)部分通過(guò)參考文獻(xiàn)結(jié)合在一起。因此，將至少有一個(gè)甲硫甲醚基團(tuán)的式(Ⅰb)化合物用N-碘琥珀酰亞胺和一個(gè)經(jīng)保護(hù)的磷酸，如磷酸二芐酯處理，該反應(yīng)在惰性有機(jī)溶劑中進(jìn)行，如四氫呋喃或鹵代烴如1，2-二氯乙烷或二氯甲烷，且可任意地存在有脫水劑，如分子篩。也可加入三氟甲磺酸銀之類的催化劑加快反應(yīng)的進(jìn)行。該反應(yīng)在0℃左右至室溫的范圍內(nèi)進(jìn)行，較可取的為在室溫下。N-碘琥珀胺亞胺及經(jīng)保護(hù)的磷酸用量與甲硫甲醚(Ⅰb)相比約為等摩爾量，但較可取的是略微過(guò)量，例如相對(duì)式(Ⅰb)化合物而言，約為1.3-1.5左右當(dāng)量。
在反應(yīng)過(guò)程的第三步驟中，除去可能存在的膦酰保護(hù)基和羥基保護(hù)基。采用熟知本專業(yè)技術(shù)的常規(guī)方法進(jìn)行去保護(hù)，像酸或堿催化水解，氫解，還原等等。例如，可采用催化氫解法除去作為羥基保護(hù)基的芐基膦酰保護(hù)基以及芐氧羰基羥基。去保護(hù)的方法可參見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)著作Greene和Wutz或McOmie等人的專著。無(wú)須再說(shuō)，假如式(Ⅰa)化合物在基團(tuán)RX上含有羥基時(shí)，該羥基最好被羥基保護(hù)基保護(hù)起來(lái)，直到最后的去保護(hù)步驟。
正如前面所提到，本領(lǐng)域技術(shù)熟練的人員可按照本文內(nèi)容對(duì)圖示Ⅴ的方法進(jìn)行改良，從而獲得m為1，2或3的式A紫杉烷衍生物。例如，圖示Va及Vb特別闡明了本門(mén)技術(shù)熟練人員如何對(duì)本文內(nèi)容作改良，從而獲得特定的式A化合物，其中至少有一個(gè)取代基為-OCH2(OCH2)2OP(O)(OH)2。類似地，m為3的其它式A化合物，也能很容易地制得。
圖示Ⅴa
圖示Ⅴb
可用常規(guī)技術(shù)制備式(Ⅰ)化合物的堿性鹽類，即，將式Ⅰ化合物游離酸與金屬堿或與胺反應(yīng)。合適的金屬堿包括鈉，鉀，鋰，鈣，鋇，鎂，鋅及鋁的氫氧化物，碳酸鹽及碳酸氫鹽;合適的胺包括有三乙胺，氨，賴氨酸，精氨酸，N-甲基葡糖胺，乙醇胺，普魯卡因，雙芐基乙二胺，二芐胺，TRIS(tromethamine)，氯普魯卡因，膽堿，二乙醇胺，三乙醇胺等等。在用冷凍干燥或結(jié)晶之后，可進(jìn)一步用層析法純制該堿鹽。
紫杉烷衍生物起始物上述方法可用于將任意的式T-[OH]n紫杉烷衍生物轉(zhuǎn)化為式(A)化合物。許多T-[OH]n的實(shí)例已被報(bào)道于文獻(xiàn)中，并在下面列出幾種(a)紫杉醇;(b)TaxotereR;(c)10-脫乙?；仙即?(d)PCT申請(qǐng)93/06079(1993年4月1日出版)中公開(kāi)的具有下式的紫杉烷衍生物
其中R1為-OR6，-SR7或-NR8R9;R2為氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基，或雜芳基;R3和R4獨(dú)立地為氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基，雜芳基，或酰基，然而，條件為R3和R4不能同時(shí)為?；?R5為-COR10，-COOR10，-COSR10，-CONR8R10，-SO2R11，或-POR12R13;R6為氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基，雜芳基，羥基保護(hù)基，或能增加該紫杉烷衍生物水溶性的功能團(tuán);R7是烷基，鏈烯基，炔基，芳基，雜芳基，或硫氫基保護(hù)基;R8為氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基，雜芳基;R9為氨基保護(hù)基;R10為烷基，鏈烯基，炔基，芳基基雜芳基;R11為烷基，鏈烯基，炔基，芳基，雜芳基，-OR10，或-NR8R14;R12和R13獨(dú)立地為烷基，鏈烯基，炔基，芳基，雜芳基，-OR10，或-NR8R14;R14為氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基，雜芳基，R15和R16獨(dú)立地為氫，羥基，低級(jí)烷酰氧基，鏈烯酰氧基，炔酰氧基，芳酰氧基或R15和R16一起構(gòu)成氧代基;R17和R18獨(dú)立地為氫，羥基，低級(jí)烷酰氧基，鏈酰氧基，炔酰氧基，芳酰氧基或R17和R18一起構(gòu)成氧代基;R19和R20獨(dú)立地為氫或羥基或低級(jí)烷酰氧基，鏈烯酰氧基，炔酰氧基，或芳酰氧基;R21和R22獨(dú)立地為氫，或低級(jí)烷酰氧基，鏈烯酰氧基，炔酰氧基，或芳酰氧基或R21和R22一起構(gòu)成氧代基;R24為氫或羥基或低級(jí)烷酰氧基，鏈烯酰氧基，炔酰氧基，或芳酰氧基;或R23和R24一起構(gòu)成氧代基或亞甲基或R23和R24與它們所連的碳原子一起構(gòu)成環(huán)氧乙烷環(huán)或者R23和R22與它們所連的碳原子一起構(gòu)成環(huán)氧乙烷環(huán);R25為氫，羥基，或低級(jí)烷酰氧基，鏈烯酰氧基，炔酰氧基，或芳酰氧基;或R26為氫，羥基，低級(jí)烷酰氧基，鏈烯酰氧基，炔酰氧基，或芳酰氧基;或R26和R25一起構(gòu)成氧代基;且R27為氫，羥基或低級(jí)烷氧基，烷酰氧基，鏈烯酰氧基，炔酰氧基，或芳酰氧基;(e)U.S.Patent 5.227，400中公開(kāi)的紫杉烷衍生物3’-脫苯基-3’-(2-呋喃基)或3’-(2-噻吩基)紫杉醇衍生物，Taxotere\R;(f)EP 534，709，1993年3月31日公開(kāi)的紫杉烷衍生物(紫杉醇衍生物，其中側(cè)鏈苯基獨(dú)立地被萘基，苯乙烯基或取代的苯基所代替)，另見(jiàn)1992年6月11日公開(kāi)的PCT92/09589;(g)1993年3月31日公開(kāi)的EP534，707中公開(kāi)的紫杉烷衍生物(紫杉醇衍生物，其中3’-N-苯甲?；灰已豸驶蚣籽豸驶?;(h)1993年4月1日公開(kāi)的PCT Application 93/06093(10-脫乙酰氧基紫杉醇衍生物及TaxotereR衍生物);(i)1993年1月20日公開(kāi)的EP524，093(10-，7-或7，10-雙-O-(N-取代的氨甲酰基)紫杉烷衍生物);(j)紫杉醇的9-α-羥基類似物，公開(kāi)于Klein著，“Synthesis of 9-DihydrotaxolA New Bioactive Taxane”Tetrahedron Letters，1993，34(13)2047-2050;(k)紫杉醇和TaxotereR的14-β-羥基類物，它是從14β-羥基-10-脫乙?；鶟{果赤霉素Ⅲ制備而得，在205th ACS National Meeting in Colorado 1993(Med.Chem.Division Abstract No.28)中公開(kāi)的，及(l)其它的紫杉烷，像C7-氟紫杉烷及各種C10-取代的紫杉烷，見(jiàn)1994年1月5日公開(kāi)的European Patent Application 577，082A1，其在此通過(guò)參考文獻(xiàn)結(jié)合在一起，作為一個(gè)整體。
游離羥基或紫杉烷衍生物類的基團(tuán)，可經(jīng)常規(guī)方法轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的酯或碳酸酯，例如，在式(Ⅰa)化合物中，R1a，R2a或R3a之一為-OC(O)RX或-OC(O)ORX且RX同前定義。因此，紫杉烷衍生物T-OH可與式L-C(O)ORX(L為離去基團(tuán))化合物，像氯甲酯，在堿的存在(如叔銨)下反應(yīng)，給出相應(yīng)的碳酸酯;例如，在二異丙基乙基胺存在下，紫杉醇與氯甲酸乙酯反應(yīng)，給出2’-O-乙氧羰基紫杉醇。T-OH也可與羧酸RXCO2H或其相應(yīng)的?；瘎?如，酸酐，活性酯或酰鹵)反應(yīng)，給出相應(yīng)的酯。當(dāng)L-C(O)ORX或RXCO2H或其相應(yīng)的?；瘎┲械腞X含有羥基時(shí)，最好用合適的羥基保護(hù)基將其保護(hù)，這是無(wú)須指出的常規(guī)做法。
另外，還可用合適的取代3-氨基-2-羥基丙酸，其相應(yīng)的酰化劑，或其前體，?；哂蠧13羥基的紫杉烷片斷來(lái)制備紫杉烷衍生物T-[OH]n。合適的取代3-氨基-2-羥基丙酸前體是，例如，式(Ⅲ)氮雜環(huán)丁酮。該?；磻?yīng)實(shí)例有羥基保護(hù)的漿果赤霉素Ⅲ或羥基保護(hù)的10-脫乙酰基漿果赤霉素Ⅲ和苯基異色氨酸衍生物反應(yīng)給出紫杉醇衍生物(公開(kāi)于，例如，Denis等人，U.S.Patents 4，924，011及4，924，012);以及保護(hù)的漿果赤霉素Ⅲ與氮雜環(huán)丁酮反應(yīng)，給出紫杉醇及其衍生物(公開(kāi)于1990年12月5日出版的EP Published Application 400，971，(現(xiàn)在是U.S.Patent 5，175，315及U.S.Patent 5.229.526)。
EP400，971(Holton方法)中公開(kāi)的方法涉及1-苯甲?；?3-(1-乙氧基)乙氧基-4-苯基-2-氮雜環(huán)丁酮與7-O-三乙硅烷基漿果赤霉素Ⅲ的反應(yīng)，反應(yīng)條件為有N，N-二甲氨基吡啶和吡啶存在，在25℃時(shí)進(jìn)行反應(yīng)12小時(shí);除去各種羥基保護(hù)基后得到紫杉醇。一個(gè)改良的Holton方法見(jiàn)Ojima等人報(bào)道“采用β-內(nèi)酰胺合成纖維方法作為對(duì)紫杉醇及其C-13側(cè)鏈類物半合成的新穎和有效的方法”，Tetrahedron 1992，48(34)6985-7012。Ojima方法包括首先將7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ與氫化鈉反應(yīng)生成相應(yīng)的鈉鹽;然后，將該鹽與手性的1-苯甲?；?3-(1-乙氧基)乙氧基-4-苯基-2-氮雜環(huán)丁酮反應(yīng)，除去羥基保護(hù)基后得到紫杉醇。在U.S.5，229，526中，Holton公開(kāi)了漿果赤霉素Ⅲ的金屬醇鹽或其衍生物與2-氮雜環(huán)丁酮偶合，給出帶C-13側(cè)鏈的紫杉烷。據(jù)說(shuō)該方法具有高度的立體選擇性。因此，可以采用消旋的側(cè)鏈前體2-氮雜環(huán)丁酮混合物。最近，Ojima等人報(bào)道了如下反應(yīng)途徑“通過(guò)β-內(nèi)酰胺合成纖維方法合成TaxotereR的高度有效的途徑”(Tetrahedron Letters，1993，34(26)4149-4152)。7，10-雙-O-(三氯乙氧羰基)-10-脫乙酰基漿果赤霉素Ⅲ的金屬醇鹽與手性的1-(叔丁氧羰基)-4-苯基-3-(保護(hù)的羥基)-2-氮雜環(huán)丁酮反應(yīng)，脫保護(hù)基后給出TaxotereR。參見(jiàn)上述所有文獻(xiàn)的相關(guān)部分。
漿果赤霉素/氮雜環(huán)丁酮方法延伸到式(Ⅰa)化合物的制備，在圖示Ⅵ中作了闡明。再者，其他未專門(mén)包括在式(Ⅰa)中的紫杉烷衍生物，也能利用此法，使用適宜的起始物加以制備。
圖示Ⅵ
在圖示Ⅵ中，R2’為氫，且R2d為氫，保護(hù)的羥基，-OC(O)RX或-OC(O)ORX;R3d是氫，-OC(O)RX，C1-6烷氧基，保護(hù)的羥基或OC(O)ORX;R6d或R7d之一為氫，且另一個(gè)為羥基，保護(hù)的羥基或C1-6烷酰氧基;或R6d及R7d一起構(gòu)成氧代基;P為羥基保護(hù)基;M為氫或ⅠA族金屬，如鋰，鈉或鉀;且P，R4，R5和RX同前定義。該反應(yīng)可按EP400，971中的方法進(jìn)行，其中具式(Ⅱ)漿果赤霉素Ⅲ衍生物(其中M為氫)與式(Ⅲ)氮雜環(huán)丁酮，在有機(jī)堿如N，N-二甲基氨基吡啶存在下進(jìn)行反應(yīng)。然而，較可取的是首先用強(qiáng)堿，如堿金屬氫化物，烷基氨化物類及ⅠA族金屬的雙-(三烷基甲硅烷基)氨化物類，使?jié){果赤霉素Ⅲ衍生物轉(zhuǎn)化為13-醇鹽(公開(kāi)于U.S.Patent 5，229，526及上文中Ojima的文獻(xiàn))。更可取的是13-醇鹽為醇鋰。鋰鹽的形成方法如下將式(Ⅱ)化合物(其中M為氫)與強(qiáng)金屬堿反應(yīng)即得，強(qiáng)堿有二異丙基氨化鋰，C1-6烷基鋰，雙-(三甲基甲硅烷基)氨化鋰，苯基鋰，氫化鋰或類似的堿。無(wú)須指出，當(dāng)式(Ⅱ)化合物在RX基上含有羥基時(shí)，最好用合適的保護(hù)基將其保護(hù)起來(lái)。
式(Ⅱ)紫杉烷與式(Ⅲ)氮雜環(huán)丁酮之間的偶合反應(yīng)是在惰性有機(jī)溶劑，如四氫呋喃中進(jìn)行的，反應(yīng)溫度在約0℃至-78℃低溫。可以用式(Ⅲ)氮雜環(huán)丁酮作為消旋混合物與式(Ⅱ)紫杉烷金屬醇鹽(其中M為ⅠA族金屬)偶合;在此情況下，最好用至少2當(dāng)量于紫杉烷反應(yīng)物的氮雜環(huán)丁酮反應(yīng)物，更可取的是用其約3-6當(dāng)量。也可用手性的氮雜環(huán)丁酮類，并在此情況下，對(duì)于紫杉烷，用一個(gè)當(dāng)量的氮雜環(huán)丁酮已足夠，但是，最好用稍微過(guò)量，例如高達(dá)1.5當(dāng)量。
羥基保護(hù)基可以是相同的，也可是不同的從而達(dá)到選擇性地除一或多個(gè)保護(hù)基而基本上不影響其它的保護(hù)基的目的;例如，在式(Ⅰd)化合物中，R2d和PO可以都是三乙基甲硅烷氧基，且R3d可以是芐氧羰基;在鈀炭存在下，催化氫化可除去芐氧羰基保護(hù)基而不除去三乙基甲硅烷基。因而，式(Ⅰd)化合物的羥基保護(hù)基可被選擇性地除去，給出式(Ⅰa)化合物。
式(Ⅱ)化合物既可是文獻(xiàn)中已知的，如漿果赤霉素Ⅲ，10-脫乙?；鶟{果赤霉素Ⅲ及它們的羥基保護(hù)的衍生物，也可從已知物開(kāi)始經(jīng)常規(guī)方法制得，例如，將羥基轉(zhuǎn)化為碳酸酯。另外，也可按下列“起始物的制備”中所述方法制備式(Ⅱ)化合物。
根據(jù)EP400，971及Ojima等人Tetrahedron 48;6985-7012，1992中所述的通用方法，可從式(Ⅲa)化合物制備式(Ⅲ)化合物。

因此，首先用堿，如正丁基鋰或三乙胺處理式(Ⅲa)化合物，然后用式R4(O)PCO-L(其中L為離去基團(tuán))處理之，給出式(Ⅲ)化合物。
可按EP400，971中所述的通用方法制備式(Ⅲa)化合物，其中經(jīng)過(guò)一個(gè)中間化合物3-乙酰氧基-4-取代的-2-氮雜環(huán)丁酮(Ⅲb);或用US 5，229，526中所公開(kāi)的方法，經(jīng)過(guò)中間化合物3-三乙基甲硅烷氧基-4-取代-2-氮雜環(huán)丁酮來(lái)制備式(Ⅲa)化合物。在改進(jìn)的方法中，可經(jīng)下列步驟制備式(Ⅲb)化合物將乙酰氧乙酰氯與雙亞氨縮合，氫解或酸解除去N-亞氨基，該方法見(jiàn)下列反應(yīng)圖示，其中R5'是任意地被取代的芳基或雜芳基，如呋喃或噻吩。該方法公開(kāi)同期申請(qǐng)U.S.S.N 08/165，610(1993年12月13日)在此可用作參考。

從這些環(huán)合加成反應(yīng)中得到的產(chǎn)物(Ⅲb)通常為兩個(gè)順一氮雜環(huán)丁酮的外消旋混合物。可用常規(guī)方法對(duì)該外消旋混合物進(jìn)行拆分，例如，轉(zhuǎn)變?yōu)榉菍?duì)映異構(gòu)體方法，在填充手性吸附劑的層析柱上的差示吸附或酶催法。例如，可用水解酶處理式(Ⅲb)化合物的外消旋混合物，如用酯酶或脂肪酶，選擇性地?cái)嚅_(kāi)一個(gè)對(duì)映異構(gòu)體的3-酰基而不影響其它的基團(tuán)(參見(jiàn)Brieva等，J.Org.Chem.1993，581068-1075;同期申請(qǐng)U.S.S.N.092，170(1993年7月14日)，European Patent Application No.552041，1993年7月21日出版)。另外，可先將外消旋混合物進(jìn)行堿催化水解，除去3-乙?；?，并生成一個(gè)相應(yīng)的3-羥基-β-內(nèi)酰胺的外消旋混合物;然后用酶化法酰化該混合物，將其中一個(gè)對(duì)映體的羥基選擇性酰經(jīng)，而不影響其它的基團(tuán)?；蛴靡粋€(gè)手性羧酸對(duì)該外消旋混合物進(jìn)行?；?，并得到一個(gè)非對(duì)映異構(gòu)混合物，而后用常規(guī)已知方法分離之。除去手性助劑，得到所需的對(duì)映異構(gòu)體。
Ojima等在J.Org.Chem.561681-1683，1991;Tet.Lett.，335737-5740，1992;及Tetrahedron，486985-7012中報(bào)道了幾種手性式(Ⅲa)氮雜環(huán)丁酮和/或相應(yīng)的N-(對(duì)-甲氧苯基)類似物的合成方法;其中P是作為羥基保護(hù)基的三異丙基甲硅烷基;且R5是4-甲氧苯基，3，4-二甲氧苯基，苯基，4-氟苯基，4-三氟甲基苯基，2-呋喃基，2-苯乙烯基，2-(2-呋喃基)乙烯基，2-甲基丙基，環(huán)己甲基，異丙基，苯乙基，2-環(huán)己乙基，或正丙基。有關(guān)制備式(Ⅲa)和/或(Ⅲ)氮雜環(huán)丁酮的其它文獻(xiàn)如下European Patent Applications 0，534，709 A1，0，534，708 A1，and 0，534，707 A1，all three published on March 31，1993;in PCT application WO 93/06079 published on April 1，1993;in Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters，3，No.11，pp 2475-2478(1993);also in Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters，3，No.11，pp 2479-2482(1993);in J.Org.Chem.，58，pp 1068-1075;in Tetrahedron Letters，31，No.44，pp 6429-6432(1990);in Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters，3，No.11，pp 2467-2470(1993);European Application 552，041 published on July 21，1993;and in our copending U.S.Application Serial No.092，170 filed on July 14，1993.
上述文獻(xiàn)的相關(guān)部分可供參考。其他的式(Ⅲ)定義下的，但未特別指明的氮雜環(huán)丁酮，可按本專業(yè)技術(shù)熟練的人士所已知的方法來(lái)制備。
生物學(xué)評(píng)價(jià)本發(fā)明中的式(B)化合物可用作式(A)新穎抗腫瘤劑的中間體。另外發(fā)現(xiàn)某些式(B)范圍內(nèi)的化合物，即化合物式(B’)本身被發(fā)現(xiàn)就是抗腫瘤劑。下列生物學(xué)部分Ⅰ說(shuō)明了式(A)化合物的抗腫瘤活性。另一方面，生物學(xué)部分Ⅱ闡述了式(B’)化合物的抗腫瘤活性。
生物學(xué)部分Ⅰ體外細(xì)胞毒性數(shù)據(jù)式(A)化合物在體外試驗(yàn)中顯示出對(duì)人體結(jié)腸癌細(xì)胞HCT-116及HCT-116/VM46的細(xì)胞毒活性。HCT-116/VM46細(xì)胞是先前選擇的對(duì)抗腫瘤藥鬼臼噻吩甙有抗藥性的細(xì)胞，并表現(xiàn)出多種藥物的抗性表型，包括對(duì)紫杉醇的抗藥性。用XTT(2，3-雙(2-甲氧基-4-硝基-5-硫苯基)-5-[(苯氨基)羰基]2H-四唑翁氫氧化物)測(cè)定法來(lái)評(píng)價(jià)HCT-116人體結(jié)腸癌細(xì)胞上的細(xì)胞毒性，參見(jiàn)D.A.Scudiero的報(bào)道“用人體及其他腫瘤細(xì)胞系，對(duì)在培養(yǎng)基中細(xì)胞生長(zhǎng)和藥物靈敏度的，可溶性四唑翁/甲替測(cè)定法的評(píng)價(jià)”Cancer Res.484827-4833，1988。將細(xì)胞植于96孔微滴平皿，4000細(xì)胞/孔。24小時(shí)后加進(jìn)藥物并稀釋。細(xì)胞于37℃培養(yǎng)72小時(shí)，然后加入四唑翁染料XTT。在活細(xì)胞中的脫氫酶將XTT還原為其吸收光為450mm的形式，其可在此波長(zhǎng)時(shí)用分光光度法作定量測(cè)定。吸光度愈大，活細(xì)胞數(shù)愈大。結(jié)果以IC50表示，IC50是抑制細(xì)胞增殖為對(duì)照組細(xì)胞的50%時(shí)所需的藥物的濃度。在本測(cè)定中的代表性化合物的IC50值見(jiàn)表Ⅰ。

＊實(shí)例1及4為游離酸;實(shí)例3為鈉鹽。
化合物7-O-甲基硫甲基紫杉醇(實(shí)例1(a)也進(jìn)行了細(xì)胞毒性測(cè)定;并且顯示出0.003μm對(duì)HCT-116的IC50值以及0.025μm對(duì)HCT-116/VM46的IC50值。)體內(nèi)抗腫瘤活性給Balb/C×DBA2F1(CDF1)雜交小鼠皮下植入0.1ml2%(W/VM10%肺癌漿(參見(jiàn)W.Rose在“Madison 109肺癌作為篩選抗腫瘤藥物的模型的評(píng)價(jià)”Cancer Treatment Reports 65，No.3-4 pp.299-312(1981)一文中的描述)。將試驗(yàn)化合物及對(duì)照藥物紫杉醇經(jīng)靜脈注射方式注入到小鼠體內(nèi)，給每組小鼠注射不同劑量化合物，并用3或4個(gè)不同劑量水平來(lái)評(píng)價(jià)每個(gè)化合物，然后每日注視其存活，直至死亡或直至首次植入腫瘤后75天，無(wú)論哪個(gè)情況首先發(fā)生，每個(gè)實(shí)驗(yàn)保留一組小鼠不給藥，作為對(duì)照組。每一或兩周測(cè)一個(gè)腫瘤的大小，以mm為單位，估計(jì)其重量。按照文獻(xiàn)提供的方法(文獻(xiàn)同上)。
將化合物處理過(guò)的(T)小鼠與對(duì)照小鼠(C)的平均存活時(shí)間進(jìn)行比較，將每個(gè)化合物處理組小鼠的2個(gè)值的比率乘上100，以百分?jǐn)?shù)表示(即%T/C)，結(jié)果見(jiàn)表Ⅱ中代表性化合物的情況。另外，給藥組與對(duì)照組有關(guān)腫瘤生長(zhǎng)至18mm時(shí)平均時(shí)間的差異，以T-C值按天數(shù)表示(見(jiàn)表Ⅱ所示)，T-C值愈大，初級(jí)腫瘤生長(zhǎng)的延遲性愈大。化合物顯示出%T/C≥125%和/或T-C≥4.0天，就認(rèn)為其在M109皮下模型上是有活性的。

a.化合物每日靜脈給藥一次，在植入腫瘤后4，5，6和8天。
b.化合物每日靜脈給藥一次，在植入腫瘤后5，6，7，8和9天。
c.高劑量的結(jié)果是達(dá)到了壽命延長(zhǎng)最大增加值;低劑量結(jié)果與引起腫瘤生長(zhǎng)的最大延遲值有關(guān)。
d.鈉鹽。
在鼠和人體異種移植腫瘤模型上(對(duì)氯氨鉑有抗藥性的M109，A2780/cDDP-人體卵巢及HCT-116-人體結(jié)腸癌)，以紫杉醇為陽(yáng)性對(duì)照物對(duì)實(shí)例3化合物(作為三乙醇胺鹽)進(jìn)一步評(píng)價(jià)。A2780/cDDP模型參見(jiàn)Rose和Basler在In Vivo 1990，4391-396中的敘述。HCT-116模型參見(jiàn)Rose和Basler，在In Vivo，1989，3249-254中所述。在Balb/c小鼠每雙周一次皮下注射M109，并將其皮下植入至CDF1小鼠體內(nèi)進(jìn)行抗腫瘤評(píng)價(jià)。A2780/cDDp及HCT-116在無(wú)胸腺小鼠體內(nèi)生長(zhǎng)2個(gè)階段(每階段2-3周)，并進(jìn)行治療實(shí)驗(yàn)。將實(shí)例3化合物溶于水中經(jīng)靜脈注射給藥，或溶于水中并加入幾滴吐溫80后經(jīng)口服給藥，紫杉醇或懸浮于水中(并加入吐溫80)，或溶于cremophore/乙醇(50%/50%)中并用鹽水稀釋。皮下植入M109腫瘤試驗(yàn)的治療方案為植入腫瘤4天后開(kāi)始給藥，每天一次，連續(xù)給藥5天。在人體腫瘤異種移植試驗(yàn)中，在引入腫瘤后開(kāi)始服用化合物，每隔一日一次，當(dāng)腫瘤出現(xiàn)時(shí)給藥五次，劑量為50-100mg。
在M109實(shí)驗(yàn)中，實(shí)例3化合物經(jīng)靜脈注射給藥后，可以達(dá)到最大值155%T/C(19天的T-C)，劑量為36mg/kg/每次注射。(比較紫杉醇在以36或18mg/kg/每次注射時(shí)，最大值為132%T/C(13天的T-C))。在同樣實(shí)驗(yàn)中，經(jīng)口服給藥時(shí)，實(shí)例3化合物劑量為160mg/kg/每次服用時(shí)，T/C最大值為158%(22.8天的T-C)。在同樣劑量下，紫杉醇(高劑量，懸浮于水和吐溫80中)未顯示活性。在另一個(gè)M109實(shí)驗(yàn)中，實(shí)例3化合物在以48mg/kg/每次注射時(shí)，%T/C最大值為170(17天的T-C)。(比較紫杉醇在48或36mg/kg/每次注射時(shí)，%T/C最大值為167(14天的T-C))。在同樣實(shí)驗(yàn)中，經(jīng)口服給藥，在以200mg/kg/每次服用時(shí)，實(shí)例3化合物%T/C最大值為172(17天的T-C)，同時(shí)，將紫杉醇溶于cremophore/乙醇/鹽水中，在以60mg/kg/每次注射時(shí)未顯示活性。在該實(shí)驗(yàn)中，由于溶解度和毒性的因素，溶于cremophore/乙醇/鹽水的紫杉醇不能以大于60mg/kg/每次注射的劑量給藥。
在A2780/cDDP實(shí)驗(yàn)中，靜脈注射實(shí)例3化合物以36mg/kg/每次注射時(shí)，顯示T-C最大值為29.8天，(比較紫杉醇在以36mg/kg/每次注射時(shí)，T-C最大值為26.3天)。實(shí)例3化合物以160mg/kg/口服給藥時(shí)T-C最大值為20天。在HCT-116實(shí)驗(yàn)中，靜脈注射24或36mg/kg/次紫杉醇時(shí)，分別地為7只經(jīng)處理的小鼠有6只治愈或8只經(jīng)處理的小鼠中有6只治愈。且口服160或240mg/kg/次實(shí)例3化合物時(shí)，分別有6或7只小鼠被治愈(經(jīng)處理的小鼠每組為8只)。治愈系指在植入腫瘤80天后，無(wú)腫瘤存在。
實(shí)例1化合物的三乙醇胺鹽在M109及HCT-116模型的實(shí)驗(yàn)中，也被發(fā)現(xiàn)具有口服活性。
在本領(lǐng)域中普遍比較欣賞這樣的情況，即當(dāng)化合物采用特定鹽形式時(shí)，其在抗腫瘤活性方面可以顯示出某些(通常是較小的)變化。
式(A)紫杉烷衍生物的膦酰氧甲基醚的藥物學(xué)上可接受的鹽，與紫杉醇相比具有更好的水溶解性，因此更便利于藥物配方。不受理論約束，可以相信本發(fā)明化合物的膦酰氧甲基醚是紫杉醇或其衍生物的前藥;當(dāng)與體內(nèi)的磷酸酯結(jié)合生成母體化合物時(shí)，膦酰氧甲基基團(tuán)即離去。
生物學(xué)部分Ⅱ小鼠M109模型給Balb/c×DBA/2F1雜交小鼠皮下植入0.5ml2%(W/V)的M109肺癌漿)(見(jiàn)William Rose在“對(duì)Madison 109肺癌作為篩選抗腫瘤藥物模型的評(píng)價(jià)”，Cancer Treatment Reports，65，No.3-4(1981)中的描述。
在研究中通過(guò)腹膜內(nèi)給予小鼠不同劑量的受試化合物，給藥時(shí)間為腫瘤植入后1，5和9天，或在腫瘤植入后5和8天。然后每天注視小鼠存活至瘤植入后75天-90天。每個(gè)實(shí)驗(yàn)保留一組小鼠不給藥作為對(duì)照組。
將化合物處理(T)小鼠與對(duì)照(c)小鼠的平均存活時(shí)間進(jìn)行比較，每個(gè)化合物處理組小鼠的上述兩值比率乘以100，且以百分?jǐn)?shù)(即%T/C)來(lái)表示，見(jiàn)表Ⅲ中式(B’)的代表性化合物。

如上所示，該即時(shí)的發(fā)明中式(A)和(B’)化合物為有效的抗腫瘤劑，因而可用作人類和/或獸用藥物。因此，本發(fā)明的另一個(gè)方面的內(nèi)容涉及用其來(lái)抑制人類和/或其它哺乳動(dòng)物腫瘤的方法，包括給予腫瘤宿主有效抗腫瘤劑量的式(A)或(B’)化合物。
本發(fā)明中式(A)和(B’)化合物可以與紫杉醇相類似的方式來(lái)使用;因此，熟悉腫瘤治療領(lǐng)域的腫瘤學(xué)家無(wú)需作過(guò)分的實(shí)驗(yàn)即可拿出服用本發(fā)明化合物的合適的治療方案。本發(fā)明化合物的給藥劑量、方式和時(shí)間并沒(méi)有特殊限制，可以根據(jù)所給化合物而變化。因此本發(fā)明化合物可經(jīng)任何合適的途徑給藥，較好的是非腸道途徑，例如，劑量可以是約1-100mg/kg體重，或約20-500mg/m2的范圍內(nèi)。式(A)和(B’)化合物也可經(jīng)口服給藥，口服劑量可以在約5-500mg/kg體重的范圍內(nèi)。所用的實(shí)際劑量可根據(jù)特定組合物配方，給藥途徑，特定部位，宿主和待治腫瘤的類型來(lái)變化。在決定劑量時(shí)，許多影響藥物作用的因素如年齡，體重，性別，飲食和患者的生理?xiàng)l件均需加以考慮。
本發(fā)明還提供了含有抗腫瘤劑量的式(A)或(B’)化合物與一種或多種藥物學(xué)上可接受的載體，賦形劑，稀釋劑或輔助劑相配伍的藥物組合物(配方)。例如，紫杉醇或其衍生物配方實(shí)例可從美國(guó)專利申請(qǐng)No.4，960，790及4，814，470中找到，這些實(shí)例提供的方法可用于配制本發(fā)明化合物。例如，本發(fā)明化合物可以配制成片劑，丸劑，粉末混合物，膠囊，注射液，溶液，栓劑，乳化劑，分散劑，食品預(yù)混物和其它合適的形式。它們也可加工成無(wú)菌固體組合物，例如冷凍干燥，如有所需可配入其它藥物學(xué)上可接受的賦形劑。在用于非腸道給藥之前，這類固體組合物可用無(wú)菌水，生理鹽水或水與有機(jī)溶液的混合物，如丙二醇，乙醇等配制，或在非腸道給藥使用之前，即時(shí)配入某些其它無(wú)菌可注射介質(zhì)。
典型的藥物學(xué)上可接受的載體有，甘露糖醇，尿素，葡聚糖，乳糖，馬鈴薯或玉米淀粉，硬脂酸鎂，滑石，植物油，聚亞烷基甘醇，乙基纖維素，聚乙烯吡咯烷酮，碳酸鈣，油酸乙酯，肉豆蔻酸異丙酯，苯甲酸芐酯，NaCO3，明膠，K2CO3，硅酸。藥物制劑還可以含有無(wú)毒性的輔助物質(zhì)，如乳化劑，防腐劑，加濕劑等，例如單月桂酸脫水山梨醇酯，三乙醇胺油酸鹽，聚氧乙烯單硬脂酸酯，三棕櫚酸甘油三酯，硫代琥珀酸二辛酯鈉鹽等等。
在下列實(shí)驗(yàn)操作中，如無(wú)特別說(shuō)所有的溫度均以攝氏(C)來(lái)表示。核磁共振(NMR)光譜特征參考化學(xué)位移(δ)，其單位為ppm，以四甲基甲硅烷(TMS)作參比標(biāo)準(zhǔn)。在質(zhì)子NMR光譜數(shù)據(jù)中各種化學(xué)位移的相對(duì)面積是與分子中特定功能團(tuán)類型的氫原子數(shù)目相對(duì)應(yīng)的。對(duì)于多樣性的化學(xué)位移特征，分別報(bào)告為寬的單峰(bs)，寬的雙重峰(bd)，寬的三重峰(bt)，寬的四重峰(bq)，單峰(s)，多重峰(m)，雙重峰(d)，四重峰(q)，三重峰(t)，雙重雙峰(dd)，雙重三峰(dt)及雙重四峰(dq)，用于進(jìn)行NMR光譜分析的溶劑是丙酮-d6(氘化丙酮)。DMSO-d6(過(guò)氘化二甲基亞砜)，D2O(氘化水)，CDCl3(氘化氯仿)和其它常用的氘化溶劑。紅外光譜(IR)描述僅包括具有功能基鑒定價(jià)值的吸收波數(shù)(cm-1)。
硅藻土(Celite)是Johns-Manville產(chǎn)品公司的注冊(cè)商標(biāo)。
此處所用的縮寫(xiě)是本領(lǐng)域中廣泛使用的常規(guī)縮寫(xiě)。其中的某些縮寫(xiě)是MS(質(zhì)譜);HRMS(高分辨質(zhì)譜);Ac(乙酰基);Ph(苯基);V/V(體積/體積);FAB(快原子轟擊);NOBA(間硝基芐基醇);min(分鐘);h或hr(s)小時(shí);NIS(N-碘代琥珀酰亞胺;BOC(叔丁氧羰基);CBZ或Cbz(芐氧羰基);Bn(芐基);Bz(苯甲?；?;TES(三乙基甲硅烷基);DMSO(二甲基亞砜);THF(四氫呋喃);HMDS(六甲基二硅氮烷)。
起始物質(zhì)的制備用于制備式(A)化合物的幾種特殊起始物的制備方法舉例說(shuō)明如下。
制備1.10-去乙酸基紫杉醇
(a)2’，7-O雙(2，2，2-三氯乙氧羰基)-10-去乙酰基紫杉醇。
0℃下用吡啶(0.028ml，0.346mmol)和氯代甲酸三氯乙酯(0.0724ml，0.260mmol)對(duì)溶于干燥CH2Cl2(3.5ml)中的10-去乙?；仙即?140mg，0.173mmol)進(jìn)行處理。在此溫度下保持1小時(shí)后，除去冷浴，混合物于室溫下攪拌過(guò)夜，蒸除溶劑，殘?jiān)?jīng)硅膠(30-50%溶于己烷中的乙酸乙酯)柱層析純化，得標(biāo)題化合物，其為泡沫狀(92.3mg，46%)。進(jìn)一步洗脫，得未反應(yīng)的起始物(35mg，46%)。進(jìn)一步洗脫，得未反應(yīng)的起始物(35mg，25%)，以及2’，10-O-雙(2，2，2-三氯乙氧羰基)-10-去乙?；仙即?，產(chǎn)率16%。
(b)2’，7-O-雙(2，2，2-三氯乙氧基羰基)-10-去乙酸基-11，12-二氫紫杉醇-10，12(18)-二烯室溫下，用1，1，-三氟-2-氯代三乙胺(0.0384ml，0.238mmol)處理溶于干燥CH2Cl2(2ml)中的得自步驟(a)的產(chǎn)品(92.3mg，0.079mmol)。溶液攪拌過(guò)夜，蒸除溶劑，殘?jiān)?jīng)柱層析純化(25%的乙酸乙酯己烷溶液)，得標(biāo)題化合物，其為白色粉末(42.8mg，47.3%)。
(c)10-去乙酸基-11，12-二氫紫杉醇-10，12(18)-二烯將步驟(b)中的產(chǎn)品(39mg，0.034mmol)，溶于甲醇(0.5ml)和乙酸(0.5ml)中，然后用酸洗過(guò)的鋅粉末(66.4mg，1.020mmol)處理之。此漿狀物在40℃下加熱1小時(shí)，過(guò)濾，濾液蒸發(fā)。殘?jiān)M(jìn)行層析，洗脫液為60%的乙酸乙酯己烷溶液，得標(biāo)題化合物，其為泡沫狀(22mg，81%)。
(d)10-去乙酸基紫杉醇常壓且有Pd/C存在下(10%，14.7mg，0.014mmol Pd)，對(duì)溶于乙酸乙酯(0.7ml)中的步驟(c)中的產(chǎn)品(22mg，0.028mmol)進(jìn)行氫化。室溫放置5.5小時(shí)后，過(guò)濾(用乙酸乙酯淋洗)，蒸發(fā)，層析(60%的乙酸乙酯己烷溶液)，得標(biāo)題化合物(15.0mg，68%)，其為白色泡沫狀。
制備2.7-去氧-7α-氟代紫杉醇
(a)2’-O-芐氧基羰基-7-去氧-7α-氟代紫杉醇將二乙氨基硫三氟化物(DAST，18.7μl，0.141mmol)溶于干燥的CH2Cl2(0.5ml)中，將此溶液冷卻至0℃，向其中加入2’-O-(芐氧羰基)紫杉醇(71mg，0.072mmol)的CH2Cl2溶液(1ml)，溶液在0℃下保持30分鐘，并在室溫下保持4小時(shí)。加水(0.15ml)使反應(yīng)終止，濃縮反應(yīng)液至剩殘?jiān)?。殘?jiān)?jīng)硅膠柱層析(以40%的乙酸乙酯己烷溶液做洗脫液)純化，得61mg(產(chǎn)率85.7%)1∶1的標(biāo)題化合物和2’-O-芐氧羰基-8-去甲基-7，8-環(huán)丙紫杉醇的混合物。
(b)7-去氧-7α-氟代紫杉醇將步驟(a)中得到的產(chǎn)品混合物(89mg)溶于乙酸乙酯中(3ml)，混合物在一個(gè)大氣壓的氫氣且有Pd/C存在下(10%Pd，29mg，0.027mmol)溫和攪拌。12小時(shí)后，去除溶劑，殘?jiān)?jīng)硅膠柱層析(以40%的乙酸乙酯己烷溶液作洗脫液)純化，得67.7mg標(biāo)題化合物，并隨之生成8-去甲基-7，8-環(huán)丙紫杉醇。
下列HPLC方法用來(lái)分離7-去氧-7α-氟代紫杉醇和8-去甲基-7，8-環(huán)丙紫杉醇。
設(shè)備泵PE泵列4柱Shandon Hypercarb(石墨碳)，7μ，100×4.6mm，#59864750(有關(guān)制備型柱子的信息可從Keystone Scientific，Bellefonte，PA中得到)進(jìn)樣器PE ISS-100檢測(cè)器HP-1040M條件流動(dòng)相85∶15＝CH2Cl2∶己烷在80∶19∶1＝CH2Cl2∶己烷∶異丙醇的條件下，分離不會(huì)失敗。
流速2.5ml/min檢測(cè)器254nm
稀釋劑樣品溶于CH2Cl2制備3.7-去氧-7α-氟代漿果赤霉素Ⅲ 在惰性氣體下，將2’-O-(芐氧羰基)紫杉醇(4g，4mmol)及干燥的甲苯(80ml)加到一個(gè)干燥燒瓶中。常溫并攪拌下，將干燥四氫呋喃(16ml)滴加到其中直至生成無(wú)色溶液。將上述溶液在干冰/丙酮浴中冷卻至-78℃，然后用二乙氨基硫三氟化物(DAST，1.2ml，2.5當(dāng)量)處理之。攪拌混合物16小時(shí)，使之逐漸升至室溫，過(guò)濾生成的懸浮液，濾液(用30ml乙酸乙酯稀釋)用飽和NaHCO3水溶液，鹽水洗滌，有機(jī)層用MgSO4干燥，濃縮得白色泡沫狀粗品。粗品部分經(jīng)硅膠柱層析(10%CH3CN/CH2Cl2)純化，得1.45g2’-O-(芐氧羰基)-7-去氧-7α-氟代紫杉醇和2’-O-(芐氧羰基)-8-去甲基-7，8-環(huán)丙紫杉醇的混合物(82∶18混合物，1H-NMR鑒定)。
將上述混合物(1.45g，溶于乙酸乙酯(60ml)，用Pd/C(300mg)處理，在每平方英寸50磅(psi)的氫氣下振蕩4小時(shí)。反應(yīng)完畢后反應(yīng)液經(jīng)一短硅膠塞過(guò)濾并濃縮，得所需產(chǎn)品混合物，7-去氧-7α-氟代紫杉醇和8-去甲基-7，8-環(huán)丙紫杉醇，為白色泡沫狀(1.24g，Y99%，9010的混合物，1H-NMR鑒定)。將此混合物溶于干燥CH2Cl2(30ml)中，用四丁基銨硼氫化物(745mg，2.9mmol，2當(dāng)量)進(jìn)行處理，攪拌6小時(shí)。用乙酸(1ml)終止反應(yīng)，再加CH2Cl2(30ml)稀釋，用飽和NaHCO3洗滌，有機(jī)層用MgSO4干燥并濃縮，粗品(取代的紫杉烷混合物)部分經(jīng)硅膠柱層析(10%CH3CN/CH2Cl2)純化，得90∶10 7-去氧-7-α-氟代漿果赤霉素Ⅲ和8-去甲基-7，8-環(huán)丙漿果赤霉素Ⅲ的混合物(510mg，60%)(1H-NMR鑒定)，其為白色泡沫狀，生成的泡沫物用熱的異丙醇重結(jié)晶，得7-去氧-7α-氟代漿果赤霉素Ⅲ(白色小針狀結(jié)晶)，產(chǎn)量410mg;m.P 234-236℃(分解)。
制備4.10-去乙酸基-7-去氧-7α-氟代紫杉醇
(a)α’-O-芐氧羰基-10-去乙酸基紫杉醇依次用氯甲酸芐酯(0.0146ml，0.102mmol)及二異丙基乙基胺(0.0177ml，0.102mmol)處理溶于CH2Cl2(1ml)中的10-去乙酸基紫杉醇(27mg，0.034mmol)。反應(yīng)混合物于0℃下攪拌45分鐘，并于室溫下攪拌12小時(shí)。蒸發(fā)，硅膠層析(40%乙酸乙酯/己烷)，得25.5mg(產(chǎn)率81%)標(biāo)題化合物，其為泡沫狀。
(b)10-去乙酸基-7-去氧-7α-氟代紫杉醇0℃下用DAST(0.007ml，0.055mmol)對(duì)溶于CH2Cl2(0.8ml)中的步驟(a)中的產(chǎn)品(25.5mg，0.028mmol)進(jìn)行處理，0℃下反應(yīng)45min，室溫下再反應(yīng)5小時(shí)。蒸除溶劑，層析，得2’-O-芐氧羰基-7-去氧-7α-氟代紫杉醇，其為粗泡沫狀。將此化合物溶于乙酸乙酯(1ml)中，室溫下，在Pd/c(10%，8.9mg)存在且氫氣壓力1大氣壓下溫和攪拌12小時(shí)。過(guò)濾除去催化劑，產(chǎn)品經(jīng)硅膠柱層析，得10mg(產(chǎn)率兩步共40%)標(biāo)題化合物，其為泡沫狀。
制備5.10-去乙?；?7-去氧-7α-氟代紫杉醇 將2’，10-O-雙(2，2，2-三氯乙氧羰基)-10-去乙?；仙即?120mg，0.103mmol)的CH2Cl2(2ml)溶液冷卻至0℃，用DAST(0.0266ml，0.207mmol)處理之。溶液于0℃下攪拌30分鐘，室溫?cái)嚢?小時(shí)。加水(0.05ml)終止反應(yīng)，濃縮，殘?jiān)?jīng)硅膠柱層析(30%乙酸乙酯/己烷)純化，得81mg(產(chǎn)率68%)2’，10-O-雙(2，2，2-三氯乙氧羰基)-7-去氧-7α-氟代紫杉醇，其為泡沫狀。將此化合物(63mg，0.054mmol)溶于甲醇(0.5ml)和乙酸(0.5ml)中，45℃下，用鋅粉(104mg，1.62mmol)處理90分鐘。過(guò)濾，濾液濃縮，殘?jiān)M(jìn)行硅膠柱層析(40%己烷/60%乙酸乙酯)，得38mg(產(chǎn)率86%)標(biāo)題化合物，其為白色固體。
制備6.7-去氧漿果赤霉素Ⅲ (a)7-O-[(甲硫基)硫代羰基]漿果赤霉素Ⅲ將漿果赤霉素Ⅲ(750mg，1.278mmol)溶于干燥四氫呋喃(20ml)中，一次加入咪唑(8.7mg，0.128mmol)。室溫下，向其中加入氫化鈉(溶于50%礦物油中，77mg，1.597mmol)。當(dāng)出氣泡停止后(10分鐘)，立即加入二硫化碳(4.6ml)，室溫3小時(shí)后，用碘甲烷(0.238ml，3.835mmol)處理此黃色溶液，并攪拌過(guò)夜。用乙酸乙酯和水提取，得標(biāo)題化合物，其為粗品油。
替代操作將漿果赤霉素Ⅲ(394mg，0.672mmol)溶于四氫呋喃(5ml)和二硫化碳(1ml)中，向其中加入氫化鈉(40.3mg，60%，1.009mmol)，然后加入催化劑量的咪唑。反應(yīng)物于室溫下攪拌1.5小時(shí)，加入碘甲烷(122.8μl，2.016mmol)，40分鐘后，真空蒸除溶劑，殘?jiān)?jīng)硅膠柱層析(20%-50%-60%乙酸乙酯/己烷)純化，得標(biāo)題化合物(260mg，產(chǎn)率57.2%)，隨這有7-表漿果赤霉素(98.5mg，25%)產(chǎn)生。
(b)7-O-[(甲硫基)硫代羰基]-13-O-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ將步驟(a)中的粗品油狀物溶于干燥的二甲基甲酰胺(5ml)中，室溫下用咪唑(870mg，12.78mmol)和三乙基甲硅烷基氯化物(2.10ml，12.78mmol)處理15小時(shí)，加水，然后用乙酸乙酯提取。有機(jī)層用水充分洗滌，干燥，硅膠閃式層析(20%乙酸乙酯/己烷)，得標(biāo)題化合物，其為玻璃狀固體(產(chǎn)量209mg，兩步合計(jì)產(chǎn)率20%)。
替代操作將步驟(a)中得到的產(chǎn)品(193.4mg，0.286mmol)溶于干燥二甲基甲酰(2.86ml)，向此溶液中加入咪唑(77.9mg，1.14mmol)，然后加三乙基甲硅烷氯化物(192μl，1.14mmol)，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜，12小時(shí)后，用乙酸乙酯(150ml)稀釋混合物，有機(jī)層用水洗滌(3×10ml)，再用鹽水(1×10ml)洗滌，干燥，真空濃縮，殘?jiān)?jīng)硅膠柱層析(20%乙酸乙酯/己烷)得標(biāo)題產(chǎn)品(163mg，產(chǎn)率72.0%)。
(c)7-去氧-13-O-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ在三丁基錫氫化物(0.310ml，1.150mmol)和2，2’-偶氮雙異丁腈(AIBN，10mg)的存在下，將步驟(b)中產(chǎn)品(182mg，0.230mmol)的干燥苯溶液(5ml)加熱至80℃。3小時(shí)后，冷卻，真空蒸除溶劑，殘?jiān)枘z柱層析(20%乙酸乙酯/己烷)得標(biāo)題化合物，其為油狀。
(d)7-去氧漿果赤霉素Ⅲ將步驟(c)中產(chǎn)品溶于四氫呋喃中(5ml)，室溫下用四丁基銨氟化物(1M，溶于四氫呋喃，0.50ml，0.50mmol)對(duì)其進(jìn)行處理2小時(shí)，乙酸乙酯稀釋，水及鹽水洗滌，硅膠柱層析(1∶1＝乙酸乙酯∶己烷)，得標(biāo)題化合物，其為玻璃狀固體(63mg，Y兩步合并收率58%)。
制備7.10-去乙酸漿果赤霉素Ⅲ (a)10-去乙酰基-10-O-(五氟苯氧基)硫代羰基-7-O-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ將7-O-三乙基甲硅烷基-10-去乙?；鶟{果赤霉素Ⅲ(參見(jiàn)Greene等人J.Am.Chem.Soc.，110，p.5917，1988)(319mg，0.485mmol)溶于干燥的四氫呋喃(5ml)中，冷卻至-40℃，用正丁基鋰(1.58M的己烷溶液0.384ml，0.606mmol)處理之。此溫度下保持40分鐘后，通過(guò)注射加入氯硫代羰基甲酸五氟代苯酯(0.086ml，0.536mmol)，混合物于-20℃下攪拌90分鐘，加入飽和NH4Cl溶液終止反應(yīng)，乙酸乙酯提取，乙酸乙酯層干燥，濃縮，殘?jiān)?jīng)硅膠柱層析(40%乙酸乙酯/己烷)純化，得標(biāo)題化合物(320mg，產(chǎn)率74%)。
(b)10-去乙酸基-7-O-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ將步驟(a)中的產(chǎn)品(119mg，0.135mmol)溶于干燥甲苯(3ml)中，用AIBN(2mg)，溶液用干燥氮?dú)饷摎?，然后加入三丁基錫氫化物(0.055ml，0.202mmol)。隨后，加熱至90℃，維持1小時(shí)。蒸除溶劑，殘?jiān)?jīng)硅膠柱層析純化(40%乙酸乙酯/己烷)，得標(biāo)題化合物(87mg，y99%)，其為無(wú)色泡沫狀。
(c)10-去乙酸基漿果赤霉素Ⅲ將步驟(b)中的產(chǎn)品(120mg，0.187mmol)溶于乙腈(3.5ml)中，冷卻至-10℃。加入濃HCl(36%，0.060ml)，溶液攪拌30分鐘，用乙酸乙酯稀釋(75ml)，飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥，濃縮，殘?jiān)?jīng)閃式硅膠層析(70%乙酸乙酯/己烷)純化，得10-去乙酸基漿果赤霉素Ⅲ，其為泡沫狀(75mg，產(chǎn)率76%)。
制備8.10-去乙酸基-7-去氧漿果赤霉素Ⅲ
(a)7-O-[(甲硫基)硫代羰基]-10-去乙酸基漿果赤霉素Ⅲ將10-去乙酸基漿果赤霉素Ⅲ(75mg，0.142mmol)溶于干燥THF(2ml)和二硫化碳(0.5ml)中。加入氫化鈉(60%礦物油溶液，8.5mg，0.213mmol)，混合物于室溫下攪拌2小時(shí)，加入碘甲烷(0.026ml，0.426mmol)，放置過(guò)夜，蒸除溶劑，殘?jiān)?jīng)硅膠柱層析純化(50-70%乙酸乙酯/己烷)，得標(biāo)題化合物，其為泡沫狀(46.4mg，y53%)。
(b)10-去乙酸基-7-去氧-漿果赤霉素Ⅲ在AIBN(2mg)和三丁基錫氫化物(0.079ml，0.290mmol)，且有氬氣存在下，使步驟(a)中的產(chǎn)品(36mg，0.058mmol)在苯(1ml)中回流3小時(shí)。濃縮，殘?jiān)?jīng)閃式柱層析(40%乙酸乙酯/己烷)純化，再經(jīng)HPLC(高壓液相層析)分離，得標(biāo)題化合物，其為泡沫狀(16.8mg，Y56%)。
替代操作向7-O-[(甲硫基)硫代羰基]-13-O-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ(制備Ⅰ步驟(b)中的產(chǎn)品，416.3mg，0.527mmol)的干燥甲苯(10.5ml)溶液中加入催化劑量的AIBN，反應(yīng)溶液用干燥N2脫氣5分鐘，加入三丁基錫氫化物(708.7μl，2.63mmol)，加熱至100℃，維持2小時(shí)，再加入另一部分三丁基錫氫化物(425.3μl，1.581mmol)，混合物于100℃下加熱5.5小時(shí)，冷卻至室溫，硅膠柱層析(20%乙酸乙酯/己烷)得7-去氧-10-去乙酸基-13-O-(三乙基甲硅烷基)漿果赤霉素Ⅲ(320mg，Y97%)。
室溫下，向上述步驟中得到的產(chǎn)品(160mg，0.255mmol)的THF(2ml)溶液中加入四丁基銨氟化物(766μl，1M，0.766mmol)，混合物于室溫下攪拌1小時(shí)，蒸除溶劑，殘?jiān)?jīng)硅膠柱層析(50-70%乙酸乙酯/己烷)純化，得標(biāo)題化合物(115mg，Y87.9%)制備9.(3R，4S)-1-t-丁氧羰基-4-苯基-3-三乙基甲硅烷氧基-2-氮雜環(huán)丁酮
攪拌，0℃且有氬氣存在下，向(3R，4S)-4-苯基-3-三乙基甲硅烷氧基-2-氮雜環(huán)丁酮(2.200g，7.92mmol)的干燥THF(25ml)溶液中加入N，N-二異丙基乙基胺(1.65ml，9.510mmol，1.2當(dāng)量)。攪拌5分鐘，加入二碳酸二叔丁酯(2.080g，9.510mmol，1.2當(dāng)量)和4-二甲基氨基吡啶(193.6mg，1.581mmol，0.20當(dāng)量)。0℃下混合物攪拌60分鐘，用乙酸乙酯(25ml)稀釋，生成的溶液依次用鹽水，10%NaHCO3，10%HCl洗滌，MgSO4干燥，濃縮，得粗品油狀化合物，化合物進(jìn)一步經(jīng)硅膠閃式層析(15%乙酸乙酯/己烷)純化，得標(biāo)題化合物，其為白色固體(2.4g，Y83%)。
制備10.(±)-順-3-乙酸基-4-苯基氮雜環(huán)丁-2-酮
(a)向一個(gè)配有溫度針，磁力攪拌器和滴液漏斗的1L三頸瓶(圓底)中加入三苯甲醛縮二氨(30.00g，100.5mmol)和乙酸乙酯(150ml)。攪拌并有氬氣層下，反應(yīng)物冷卻至5℃，加入三乙胺(16.8ml，121mmol)。然后在90分鐘內(nèi)向其中滴加乙酸基乙酰氯(12.4ml，116mmol)的乙酸乙酯(300ml)溶液。此溫度下保持16小時(shí)后，反應(yīng)混合物加熱至20℃(1.5小時(shí))，然后轉(zhuǎn)入一個(gè)分液漏斗中，有機(jī)層依次用NH4Cl(飽和)(150ml，100ml)，NaHCO3(飽和)(120ml)和鹽水(120ml)洗滌。為了鑒定，標(biāo)題化合物可在此步分離出來(lái)，具體操作是有機(jī)層MgSO4干燥，過(guò)濾，真空蒸除溶劑，定量得到(±)-順-3-乙酸基-1-[(苯基)(亞芐基亞氨基)甲基]-4-苯基氮雜環(huán)丁-2-酮粗品，其為紅色玻璃狀。
(b)在氬氣流存在下，將步驟(a)中得到的化合物的乙酸乙酯(500ml)溶液小心地轉(zhuǎn)移至2.0L Parr燒瓶中，該燒瓶含有10%Pd/C(活性)(6.00g)?；旌衔镉脷錃?4atm)處理20小時(shí)，然后用硅藻土墊板過(guò)濾，除去催化劑。濾餅溶于乙酸乙酯(200ml)，攪拌(10分鐘)，過(guò)濾。濾餅用乙酸乙酯淋洗(100ml)，濾液合并。有機(jī)層用10%HCl(300ml)洗滌，兩層均通過(guò)燒結(jié)玻璃漏斗過(guò)濾，除去白色沉淀(二芐胺-HCl)，后者用乙酸乙酯淋洗(100ml)。分出有機(jī)層，再用10%HCl(200ml)洗滌，合并上述兩次10%HCl洗滌液，用乙酸乙酯(200ml)提取，然后合并有機(jī)層，用NaHCO3(飽和)(300ml)和鹽水(250ml)洗滌，MgSO4干燥，過(guò)濾，真空濃縮至體積為75ml，將此混合物冷卻至4℃，過(guò)濾分出沉淀的產(chǎn)品，濾餅用己烷(200ml)洗滌得16.12g標(biāo)題化合物(從三苯甲醛縮二氨起計(jì)全部產(chǎn)率78.1%)，其為白色針狀，mp＝150-151℃。
制備11.(±)-順-3-三乙基甲硅烷氧基-4-(2-呋喃基)-N-叔丁氧羰基氮雜環(huán)丁-2-酮
(a)按照制備10，部分(a)中所描述的方法，除了用糖醛胺[即，2-呋喃基-CH-(N＝CH-2-呋喃基)2]代替三苯甲醛縮二氨，反應(yīng)物用量為18.6mmol(與100mmol比較)，因此糖醛胺(5.00g，18.6mmol)，三乙胺(3.11ml，22.3mmol)及乙酸基乙酰氯(2.30ml，21.4mmol)得到6.192g(Y90.4%)(±)順-3-乙酸基-1-[(2-呋喃基)(2-呋喃基亞甲基亞氨基)甲基]-4-(2-呋喃基)氮雜環(huán)丁-2-酮，其為灰紅色漿狀。
(b)按照制備10部分(b)中所描述的方法，除了產(chǎn)品用制備TLC分離，反應(yīng)物的用量為2.7mmol(以糖醛胺最初的量為基礎(chǔ))。因此，將上述步驟(a)中得到粗品重新溶于乙酸乙酯(50ml)，然后加入10%Pd/C(活性炭(150mg)。通過(guò)制備TLC(2mm硅膠，1∶1乙酸乙酯/己烷)純化粗品固體，得386mg(從糠醛胺開(kāi)始全部收率計(jì)65.8%)(±)-順-3-(乙酸基)-4-(2-呋喃基)氮雜環(huán)丁-2-酮，其為黃色固體，然后用乙酸乙酯/■和櫓亟峋■m.p＝118-119℃(c)將上述步驟(b)中得到的化合物(3.78g，19.4mmol)溶于60ml甲醇，然后與K2CO3(20mg，0.14mmol)一起攪拌90分鐘，溶液用Dowex 50W-X8中和并過(guò)濾，濃縮濾液，殘?jiān)苡?0ml無(wú)水THF中，在0℃下與咪唑(1.44g，21.2mmol)和TESCl(3.4ml，20.2mmol)一起攪拌30分鐘，溶液用乙酸乙酯稀釋，鹽水洗滌，MgSO4干燥，濃縮。殘?jiān)?jīng)硅膠柱層析(3∶1己烷/乙酸乙酯)純化，得4.47g(Y86%)(±)-順-3-三乙基甲硅烷氧基-4-(2-呋喃基)-氮雜環(huán)丁-2-酮，其為無(wú)色油狀物。
(d)將步驟(c)中的產(chǎn)品(2.05g，7.7mmol)溶于30ml CH2Cl2中，在0℃下與二異丙基乙基胺(1.5ml，8.6mmol)和二碳酸二叔丁酯(2.0g，9.2mmol)以及催化劑量的二甲氨基吡啶(DMAP)一起攪拌。溶液用CH2Cl2稀釋，鹽水洗滌，MgSO4干燥并濃縮。殘?jiān)?jīng)硅膠柱層析(8∶1己烷/乙酸乙酯)純化，得2.0g(Y70%)標(biāo)題化合物，其為蠟狀固體。
使用脂酶，如PS-30(得自Pseudomonas sp.)(Amano國(guó)際公司)，以步驟(b)中得到的外消旋混合物作酶催化水解底物，可以得到(3R，4R)-3-羥基-4-(2-呋喃基)-氮雜環(huán)丁-2-酮。用脂酶PD-30和其他酶進(jìn)行酶拆分的方法在我們同期專利申請(qǐng)U.S.S.N 092，170，Jul.14，1993中已公開(kāi)發(fā)表，在此可用作參考。
按照步驟(c)和(d)的方法，使用(3R，4R)-3-羥基-4-(2-呋喃基)-氮雜環(huán)丁-2-酮，得到(3R，4R)-N-(叔丁氧羰基)-3-三乙基甲硅烷氧基-4-(2-呋喃基)氮雜環(huán)丁-2-酮。制備12(±)-順-3-三乙基甲硅烷氧基-4-(2-噻吩基)-N-叔丁氧羰基氮雜環(huán)丁-2-酮 (a)按照制備10步驟(a)的操作，除了用氫化噻吩酰胺[即2-噻吩基-CH-(N＝CH-2-噻吩基)2]代替三苯甲縮醛二氨。因此以氫化噻吩酰胺(30g，94.7mmol)，三乙胺(15.84ml，114mmol)和乙酸基乙酰氯(11.6ml，108mmol)作起始物，得到(±)順-3-乙酸基-1-[(2-噻吩基)(2-三烯基亞甲基亞氨基)甲基]-4-(2-噻吩基)氮雜環(huán)丁-2-酮，其為粘稠油狀物。
(b)于25℃，攪拌下向步驟(a)中產(chǎn)品(0.431g，1.03mmol)的CH2Cl2(2.93ml)溶液中加入乙酸(0.35ml冰醋酸和0.15ml水)的70%水溶液。反應(yīng)混合物回流攪拌2.5小時(shí)，用50mlCH2Cl2稀釋，用2份飽和NaHCO3(各75ml)及1份飽和鹽水(50ml)洗滌，有機(jī)提取物真空濃縮至一棕色油狀物，將其溶于極少量的CH2Cl2中，然后放置在一個(gè)4″×0.5″的硅膠柱上，以10-60%乙酸乙酯/己烷溶液進(jìn)行梯度洗脫，先得少量極性副產(chǎn)品，然后得(±)順-3-乙酸基-4-(2-噻吩基)氮雜環(huán)丁-2-酮(0.154g，Y75%)，其為白色固體。
(c)將步驟(b)中得到的產(chǎn)品(2.5g，11.8mmol)溶于甲醇(10ml)中，用飽和NaHCO3(10ml)處理，生成物在室溫下攪拌3小時(shí)。乙酸乙酯(20ml)稀釋，水(15ml)洗滌，水層用乙酸乙酯反復(fù)提取幾次，合并有機(jī)層，MgSO4干燥，濃縮得黃色固體(Y1.7g)。將粗品溶于干燥THF(20ml)中，用冰/水浴冷卻至5℃，加入咪唑(752mg，1.1當(dāng)量)，攪拌5分鐘后，滴加三乙基氯硅烷(1.85ml，1.1當(dāng)量)。生成的懸浮液在該溫度下攪拌3小時(shí)，過(guò)濾除去固體，有機(jī)層水洗(2×20ml)，MgSO4干燥，濃縮，粗品經(jīng)硅膠柱層析(己烷/乙酸乙酯7∶3)純化，得(±)-順-3-三乙基甲硅烷氧基-4-(2-噻吩基)-氮雜環(huán)丁-2-酮，其為無(wú)色固體(1.5g，Y45%)，m.p.70-71℃。
替代操作將步驟(b)得到的產(chǎn)品(2.0g，9.37mmol)的40ml甲醇溶液與K2CO3(60mg，0.43mmol)一起攪拌30分鐘，然后用Dowex 50W-X8中和并過(guò)濾。濃縮濾液，殘?jiān)苡?0ml無(wú)水THF中，并與咪唑(0.85g，11.3mmol)和TESCl(1.9ml，12.5mmol)在0℃下攪拌30分鐘。乙酸乙酯稀釋，鹽水洗滌，MgSO4干燥，濃縮，殘?jiān)?jīng)硅膠層析(3∶1＝己烷/乙酸乙酯)純化，得2.13g(Y86%)標(biāo)題化合物，其為無(wú)色油狀物。
(d)將步驟(c)中產(chǎn)品(425.7mg，1.48mmol)溶于CH2Cl2(10ml)中，用冰/水浴冷卻至5℃，用催化劑量的DMAP處理溶液，然后再先后用二異丙基乙基胺(TESCl，0.25ml，1.0當(dāng)量)和二碳酸二叔丁酯(388.4mg，1.2當(dāng)量)處理。此溫度下攪拌2小時(shí)后，加飽和NaHCO3溶液終止反應(yīng)(5ml)，有機(jī)層用水(5ml)洗滌，MgSO4干燥，溶液通過(guò)一個(gè)短硅膠填充塞，濃縮，得所需產(chǎn)品，其為無(wú)色油狀物(525.3mg，Y93%)。
制備13.(3R，4R)-3-三乙基甲硅烷氧基-4-(2-呋喃基)-N-正丁氧羰基氮雜環(huán)丁-2-酮
將(3R，4R)-3-三乙基甲硅烷氧基-4-(2-呋喃基)氮雜環(huán)丁-2-酮(0.58g，2.17mmol)的30ml CH2Cl2溶液與二異丙基乙基胺(0.4ml，2.30mmol)和氯代甲酸丁酯(0.3ml，2.36mmol)以及催化劑量的DMAP一起攪拌1小時(shí)，用CH2Cl2稀釋，鹽水洗滌，MgSO4干燥，濃縮，殘?jiān)?jīng)硅膠柱層析純化(3∶1＝己烷/乙酸乙酯)，得523mg產(chǎn)品(Y65%);
IR(KBr)1820，1734，1318，1018，734cm-1;1H-NMR(CDCl3，300 MHz)δ7.38(m，1H)，6.35(m，2H)，5.09(ABq，J＝15.5，5.6Hz，2H)，4.14(m，2H)，1.56(m，2H)，1.28(s，2H)，0.87(t，J＝8.7Hz，3H)，0.82(t，J＝7.9，9H)，0.50(m，6H);13C-NMR(CDCl3，75.5Hz)δ165.4，149.1，147.6，142.9，110.5，109.9，77.7，66.6，55.9，30.5，18.8，13.6，6.3，4.3;
C18H29NO5Si的DCIMS M+H理論值，368;實(shí)測(cè)值368。
制備14.(3R，4R)-3-三乙基甲硅烷氧基-4-(2-呋喃基)-N-異丙氧基羰基氮雜環(huán)丁-2-酮
將(3R，4R)-3-三乙基甲硅烷氧基-4-(2-呋喃基)氮雜環(huán)丁-2-酮(0.51g，1.91mmol)的25ml CH2Cl2溶液與二異丙基乙基胺(0.78ml，4.4mmol)及氯代甲酸異丙酯(4.0ml，1.0M的甲苯溶液，4.0mmol)以及催化劑量的DMAP一起攪拌1小時(shí)，CH2Cl2稀釋，鹽水洗滌，MgSO4干燥并濃縮。殘?jiān)?jīng)硅膠柱層析(5∶1＝己烷/乙酸乙酯)純化，得649mg標(biāo)題化合物(Y96%);C17H28NO5Si的DCIMS M+H理論值354;實(shí)測(cè)值354。
IR(KBr)1822，1812，1716，1374，1314，1186，1018，1004，746 cm-1;1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ7.39(m，1H)，6.35(m，2H)，5.08(ABq，J＝15.6，5.6Hz，2H)，4.96(d，J＝10.0Hz，1H)，1.25(d，J＝6.3Hz，3H)，1.17(d，J＝6.3Hz，3H))，0.83(t，J＝7.8，9H)，0.50(m，6H);13C-NMR(CDCl3，75.5Hz)δ165.5，148.6，147.8，142.9，110.5，109.9，77.6，71.1，55.9，21.7，21.6，6.3，4.4;
制備15.(±)-順-3-三乙基甲硅烷氧基-4-異丁烯基-N-叔丁氧羰基氮雜環(huán)丁-2-酮
(a)N-4-甲氧基-N-(3-甲基-2-丁烯基)苯胺 將對(duì)茴香胺(5.7g，46.3mmol)溶于二乙醚(100ml)中，用催化劑量的對(duì)甲苯磺酸(10mg)進(jìn)行處理，向其中一次加入3-甲基-2-丁烯醛(2.67ml，50.9mmol)，反應(yīng)物在室溫下攪拌16小時(shí)，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器蒸除溶劑(壓力0.5torr)，得所需亞胺(8.7g，100%)，其為棕色油狀物;
1H NMR 300 MHz，CDCl3)δ8.38(d，1H，J＝9.5Hz)，7.11(dd，2H，J＝2.2，6.7Hz)，6.88(dd，2H，J＝2.2，6.7Hz)，6.22-6.18(m，1H)，3.81(s，3H)，2.01(s，3H)，1.95(s，3H).
(b)(±)-順-N-(4-甲氧苯基)-3-乙酸基-4-異丁烯基氮雜環(huán)丁-2-酮 將乙酸基乙?；然?6.9g，50.5mmol)溶于乙酸乙酯(100ml)中，在氮?dú)夥障吕鋮s至-30℃。5分鐘內(nèi)向溶液中加入三乙胺(7.0ml，50.5mmol)。生成的白色漿狀物用N-4-甲氧基-N-(3-甲基-2-丁烯基)苯胺(8.7g，40ml)的乙酸乙酯溶液處理(在20分鐘內(nèi)將后者滴加進(jìn)前者中)。生成的綠-棕色漿狀物在4小時(shí)內(nèi)逐漸升至室溫，經(jīng)硅藻土墊板過(guò)濾，依次用水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥濃縮，得棕色油。粗產(chǎn)品小心地經(jīng)硅膠層析(己烷/乙酸乙酯8∶2)純化，得橙色油狀物，放置后固化，用CH2Cl2/乙烷重結(jié)晶得所需產(chǎn)品，其為灰黃色固體(4.4g，32%);
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ7.32(d，2H，J＝9.1Hz)，6.86(d，2H，J＝9.1Hz)，5.59(dd，1H，J＝3.0，7.8Hz)，5.14-5.10(m，1H)，4.96(dd，1H，J＝4.8，9.3Hz)，3.77(s，3H)，2.11(s，3H)，1.81(s，3H)，1.78(s，3H).
(c)(±)-順-3-酸基-4-異丁烯基氮雜環(huán)丁-2-酮 將(±)-順-N-(4-甲氧苯基)-3-乙酸基-4-異丁烯基氮雜環(huán)丁-2-酮(4.88g，16.2mmol)溶于乙腈(50ml)中，用冰浴冷卻至0-5℃。向此溶液中一次加入硝酸銨高鈰(26.6g，48.6mmol 50ml)的冷溶液。將此深紅色反應(yīng)物攪拌10分鐘，在此期間其顏色逐漸變淺至橙色，將冷溶液轉(zhuǎn)入分液漏斗，水稀釋，乙酸乙酯提取，有機(jī)層用10%Na2S水溶液分幾次洗滌，然后用飽和NaHCO3洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，濃縮，得所需產(chǎn)品(2.71g，91%)，其為黃橙色固體，直接可用于下一步反應(yīng);
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ6.11(bs，1H)，5.73(dd，1H，J＝2.2，4.7Hz)，5.12-5.08(m，1H)，4.63(dd，1H，4.7，9.1Hz)，2.09(s，3H)，1.75(s，3H)，1.67(s，3H).
(d)(±)-順-3-三乙基甲硅烷氧基-4-異丁烯氮雜環(huán)丁-2-酮 (±)-順-3- 乙酰氧基-4-異丁烯基氮雜環(huán)丁-2-酮(1.47g，8.0mmol)溶于甲醇(15ml)中，然后在室溫下與K2CO3(110.5mg，0.8mmol)一起攪拌3小時(shí)。用Dowex 50W-X8樹(shù)脂中和反應(yīng)溶液，過(guò)濾。濾液濃縮，將粗品固體溶于THF(25ml)中，冰浴冷卻至5℃，加入咪唑(544.0mg，8.0mmol)，一旦溶解后，通過(guò)注射方法滴加三乙基甲硅烷基氯化物(1.34ml，8.0mmol)。生成的漿狀物逐漸升溫至室溫并攪拌過(guò)夜。過(guò)濾，濾液用水和鹽水洗滌，有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，濃縮。粗品固體經(jīng)硅膠柱層析(己烷/乙酸乙酯3∶1)純化，得所需產(chǎn)品(612mg，30%)，其為灰黃色固體;
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ5.87(bs，1H)，5.31-5.26(m，1H)，4.90(dd，1H，J＝2.2，4.7Hz)，4.42(dd，1H，J＝4.7，9.3Hz)，1.74(s，3H)，1.28(s，3H)，0.98-0.91(m，9H)，0.71-0.55(m，6H).
(e)(±)-順-3-三乙基甲硅烷氧基-4-異丁烯基-N-叔丁氧羰基氮雜環(huán)丁-2-酮 將(±)-順-3-三乙基甲硅烷氧基-4-異丁烯基氮雜環(huán)丁-2-酮(1.01g，3.95mmol)溶于CH2Cl2(20ml)中，然后用二異丙基乙基胺(0.68ml，3.95mmol)和催化劑量的二甲基氨基吡啶處理之。向此溶液中加入二碳酸二叔丁酯(1.02g，4.68mmol)，使之在室溫下攪拌24小時(shí)。再用CH2Cl2稀釋，水和鹽水洗滌，有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥并濃縮，殘?jiān)?jīng)硅膠柱層析(8∶2＝己烷/乙酸乙酯)純化，得所需產(chǎn)品(1.26g，90%)，其為無(wú)色油狀物;
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ5.24(d，1H，J＝9.6Hz)，4.86(d，1H，J＝5.7Hz)，4.72(dd，1H，J＝6.0，9.9Hz)，1.78(d，3H，J＝1.1Hz)，1.75(d，3H，J＝1.1Hz)，1.47(s，9H)，0.96-0.91(m，9H)，0.64-0.55(m，6H).
上述制備9.11(d)，12(d)，13，14和15(e)所描述的方法可以用來(lái)制備其它N-取代的氮雜環(huán)丁酮類化合物(其對(duì)于制備本發(fā)明化合物是有用的)。
這類氮雜環(huán)丁酮列于下表中;P代表羥基保護(hù)基，如三乙基甲硅烷基，三異丙基甲硅烷基和乙氧基乙基。


制備16.10-去氧taxotere 在氬氣存在下，將10-去乙酸基-7-O-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ(100mg，0.156mmol)置于燒瓶中，然后溶于干燥的THF(1.5ml)中。冷卻至-40℃后，滴加正丁基鋰(1.45M己烷溶液，0.119ml，0.17mmol)，再在2分鐘內(nèi)加入(3R，4S)-1-叔丁氧羰基-4-苯基-3-三乙基甲硅烷氧基-2-氮雜環(huán)丁酮(94.2mg，0.25mmol)的THF溶液(0.5ml)?；旌衔锪⒓瓷郎刂?℃，攪拌45分鐘，然后用飽和NH4Cl(3ml)終止反應(yīng)。用乙酸乙酯提取混合物，干燥，濃縮，硅膠柱層析(30%乙酸乙酯/己烷)得10-去氧-2，7-O-(三乙基甲硅烷基)taxotere，其為泡沫狀(125mg，Y76%)。-5℃下，此化合物(100mg，0.098mmol)立即溶于乙腈(2ml)中，用HCl(0.037ml，36%，12M)處理，混合物在-5℃下攪拌2小時(shí)，用飽和NaHCO3終止反應(yīng)，乙酸乙酯提取并干燥。蒸除溶劑，硅膠柱層析(75%乙酸乙酯/己烷)，得標(biāo)題化合物，其為泡沫狀(80.5mg，Y80%)。
以其它合適的漿果赤霉素Ⅲ和氮雜環(huán)丁酮成份作起始物，按照實(shí)例16提供的一般操作方法，可以制備其它式(Ⅰa)化合物;式(Ⅰa)化合物的其它例子列于下表中。應(yīng)該認(rèn)識(shí)到，盡管下列所示化合物帶有游離羥基基團(tuán)，或帶有各種明智選擇的羥基保護(hù)基團(tuán)，在2’-，7-或10-位上的任一保護(hù)基團(tuán)可被選擇性地除去且不影響其它保護(hù)基的存在。




制備17.雙(甲基硫甲基)醚CH3SCH2OCH2SCH30℃下，將NaI(8.23g，55.23mmol)加到1，1’-二氯二甲基醚(3.0g，26.3mmol)的丙酮(100ml)溶液中，混合物在此溫度下攪拌20分鐘，將硫代甲醇鈉(1.84g，5.23mmol)分四份加入其中，再攪拌1小時(shí)。生成的均勻溶液經(jīng)硅藻土墊板過(guò)濾，濾液真空濃縮，殘余油狀物在乙酸乙酯和飽和NaHCO3之間分配，除去水層，再用乙酸乙酯提取。合并有機(jī)層，用1∶1的飽和NaHCO3和5%硫代硫酸鈉混合物處理之。用鹽水洗滌有機(jī)層，Na2SO4干燥，真空濃縮，殘?jiān)?jīng)閃式層析(30∶1＝己烷/乙酸乙酯)純化，得1.9g黃色油狀物，后者用Kugelrhor儀器(120-130℃，20mmHg)進(jìn)行蒸餾，得1.5g(45%)標(biāo)題化合物，其為無(wú)色油狀物1H NMR(300MHZ，CDCl3)δ4.73(4H，S)，2.15(6H，S)制備18.二芐基甲基硫代甲基磷酸酯CH3SCH2OP(O)(OBz)2室溫下，向雙(甲基硫代甲基)醚(30mg，2.34mmol)和分子篩(300mg)的THF(100ml)溶液中加入二芐基磷酸酯(2.74g，9.85mmol)，再加一碘代琥珀酰亞胺(608mg，2.71mmol)，溶液攪拌4小時(shí)。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，經(jīng)硅藻土墊報(bào)過(guò)濾，濾液用1∶1(V∶V)飽和NaHCO3和5%硫代硫酸鈉的混合物處理，無(wú)色有機(jī)提取物用鹽水洗滌，Na2SO4干燥，真空濃縮，得600mg(69%)的標(biāo)題化合物1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ7.35(10H，s)，5.29(2H，d，J＝12.2Hz)，5.08(4H，dd，J＝8.0，1.0Hz)，4.68(2H，s)，2.10(3H，s).
實(shí)例下列實(shí)例將說(shuō)明本發(fā)明中有代表性化合物的合成方法，且不以任何方式限制本發(fā)明的范圍。熟知本領(lǐng)域的可以采用這些方法(不用再做實(shí)驗(yàn))合成本發(fā)明范圍內(nèi)的化合物，而這些化合物在本專利申請(qǐng)范圍內(nèi)但并沒(méi)有特地提及。
實(shí)例17-O-膦酰氧基甲基紫杉醇和其單鈉鹽(a)7-O-甲基硫甲基紫杉醇的制備
0℃下，將過(guò)氧化苯甲酰(0.98g，4mmol)加到劇烈攪拌下的紫杉醇(0.85g，1mmol)和二甲硫醚(0.72ml，8mmol)的干燥乙腈(10ml)溶液的混合物中，0℃下繼續(xù)攪拌2.5小時(shí)。反應(yīng)的進(jìn)展情況用硅膠TLC(甲苯∶丙酮＝2∶1(V∶V))監(jiān)測(cè)(Rftax＝0.38，Rfprod＝0.64)，當(dāng)觀察到有高流動(dòng)性的產(chǎn)品形成后，蒸除溶劑終止反應(yīng)，(用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，30℃)。TLC分析顯示反應(yīng)混合物中有部分未反應(yīng)的紫杉醇存在，另有2’，7-O-雙(甲基硫代甲基)紫杉醇。用閃式柱層析(硅膠60(40-63μm)EM Science(100ml)，柱直徑2英寸，洗脫液乙酸乙酯/己烷＝1∶1(V∶V)(Rfprod＝0.34))從混合物中分離出標(biāo)題化合物。產(chǎn)品(552mg，60%產(chǎn)率，從組份12-18(每份20ml)回收得到。
元素分析C64.28(calc.64.39)，H5.85(calc.6.07)，N1.46(calc.1.53)MS(FAB/matrix NOBA，NaI，KI)[M+H]+，m/z 914;[M+Na]+，m/z 936;[M+K]+，m/z 952
UV (MeOH)λmax＝226nm，E(1%/1cm)＝150，A＝0.2653IR (KBr)342，3066，2940，1726，1668，1602，1582，1514，1484，1452，1372，1242，1178，1142，1108，1068，1026，990，916，884，852，802，774，710，608，570，538，482 cm-1.
1H-NMR (CDCl3)δ1.15(3H，s)，1.19(3H，s)，1.73(3H，s)，1.79(H，s)，1.90(3H，d)，2.09(3H，s)，2.16(3H，s)，2.29(2H，d)，2.35(3H，s)，2.77(H，m)，3.70(H，d)，3.83(H，d)，4.17(H，d)，4.26(H，m，overlaps with H，d)，4.63(2H，t)，4.77(H，dd)，4.91(H，d)，5.65(H，d)，5.77(H，dd)，6.16(H，dd)，6.48(H，s)，7.07(H，d)，7.29-7.50(10H，m)，7.57(H，m)，7.73(2H，d)，8.08(2H，d).
(b)7-O-二芐基膦酰氧基甲基紫杉醇的制備
將N-碘代琥珀酰亞胺(45mg，0.2mM)和二芐基磷酸酯(55mg，0.2mM)的干燥THF(4ml)溶液加到7-O-甲基硫代甲基紫杉醇(119mg，0.13mM)和粉末狀分子篩4A(ca.120mg)的干燥1，2-二氯乙烷(5ml)溶液的混合物中，室溫?cái)嚢?6小時(shí)，反應(yīng)進(jìn)展情況用TLC(甲苯∶丙酮＝2∶1(V∶V))監(jiān)測(cè)(Rfprod＝0.48)，經(jīng)硅藻土545過(guò)濾，除去分子篩，濾液用CH2Cl2(100ml)提取，有機(jī)層經(jīng)1%的硫代硫酸鈉(ca.100ml)和0.5M NaHCO3(100ml)以及鹽水洗滌，提取液經(jīng)Whatman相分離器過(guò)濾，蒸除溶劑，經(jīng)閃式柱層析(硅膠60，CH2Cl2∶乙酸乙酯＝2∶1(V∶V))純化，得7-O-二芐基膦酰氧基甲基紫杉醇(41.5mg)。
(c)7-O-膦酰氧基甲基紫杉醇及其單鈉鹽的制備
將7-O-二芐基膦酰氧基甲基紫杉醇(41.5mg)溶于乙酸乙酯中(5ml)，加入10%Pd/C(20mg)。在室溫40PSI(275KPa)下氫化1小時(shí)，用TLC(氯仿∶甲醇∶水＝120∶45∶8(V∶V))監(jiān)測(cè)反應(yīng)的進(jìn)展情況，經(jīng)制備TLC(20×20×0.05cm硅膠板，屬于分析系統(tǒng))純化，得7-O-膦酰氧甲基紫杉醇(26mg，75%產(chǎn)率)。
由于在硅膠純化過(guò)程中觀察到7-O-二芐基膦酰氧甲基紫杉醇的分解，氫化反應(yīng)被加以修飾，因此，7-O-二芐基膦酰氧甲基紫杉醇的粗品提取物不經(jīng)純化即進(jìn)行氫化反應(yīng)，該反應(yīng)在60PSI(400KPa)下進(jìn)行24小時(shí)。
將7-O-膦酰氧甲基紫杉醇(70mg)溶于5ml丙酮-水(1∶1)溶液中，用水稀釋至50ml，加入干燥NaHCO3(18mg，1.2當(dāng)量)，室溫下用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器蒸除丙酮，殘留水溶液進(jìn)行冷凍干燥。粗品7-O-膦酰氧甲基紫杉醇單鈉鹽經(jīng)C18反相柱層析(水∶乙腈＝70∶30(V∶V))純化。洗脫液用分析HPLC(15cm，Jones C18柱，1ml/min，波長(zhǎng)＝230/270nm，乙腈∶0.05M乙酸銨緩沖液＝45∶55，(V∶V)，pH＝7，Rt＝2.09min)監(jiān)測(cè)。含有所需組份的部分合并，蒸除乙腈，殘留水溶液進(jìn)行冷凍干燥，得7-O-膦酰氧甲基紫杉醇單鈉鹽(112mg)。
MS (FAB)[M+H]+，m/z 986;[M+Na]+，m/z 1008UV (MeOH)λmax＝230nm，E(1%/1cm)＝248IR(KBr)3430，3066，2948，1724，1652，1602，1580，1518，1486，1452，1372，1316，1246，1178，1154，1108，1070，1000，982，946，856，802，776，710，628，538 cm-1.
1H-NMR(acetone-d6/D2O)δ8.05(2H，d)，7.92(2H，d)，7.65(1H，dd)，7.58-7.35(9H，m，overlap)，7.23(1H，dd)，6.38(1H，s)，6.08(1H，t)，5.65(1H，d)，5.60(1H，d)，5.10(1H，br.s)，4.99(1H，d)，4.97(1H，br.s)，4.80(1H，d)，4.28(1H，dd)，4.11(2H，s)，3.79(1H，d)，2.94(1H，m)，2.35(3H，s)，2.35-2.10(1H，m)，2.13(3H，s)，1.95(3H，s)，1.84(1H，m)，1.67(3H，s)，1.13(6H，s，overlap).
實(shí)例2制備7-O-膦酰氧甲基紫杉醇的替代方法(a)2’-O(芐氧羰基)紫杉醇的制備 室溫下，向攪拌著的紫杉醇(150mg，0.176mmol)和N，N-二異丙基乙基胺(93μl，0.534mmol，3當(dāng)量)的無(wú)水CH2Cl2(4ml)溶液中加入氯代甲酸芐酯(75μl，0.525mmol，3當(dāng)量)。反應(yīng)物在室溫下攪拌3小時(shí)，濃縮至2ml，硅膠柱層析純化，以1∶1的乙酸乙酯/己烷作洗脫液，得標(biāo)題化合物，其為白色粉末(150mg，Y86%)，mp.140-150℃(分鐘)。
(b)2’-O-(芐氧羰基)-7-O-甲基硫代甲基紫杉醇的制備
向冷卻的(干冰-CCl4;-30℃浴溫)2’-O-(芐氧羰基)紫杉醇(4.935g;5.0mmol)的干燥乙腈(80ml)溶液中，依次加入二甲硫醚(3.6ml;40mmol)和過(guò)氧化苯甲酰(4.9g;20.247mmol)。10分鐘后，-30℃下，去除冷浴，反應(yīng)混合物在室溫下劇烈攪拌2小時(shí)。然后用乙酸乙酯稀釋至體積為200ml，水和鹽水洗滌，有機(jī)層用MgSO4干燥，蒸除溶劑，得一殘?jiān)?，其在真空下保?8小時(shí)去除二甲基亞砜(其作為反應(yīng)付產(chǎn)物存在)。殘?jiān)?jīng)硅膠層析(先用乙酸乙酯∶己烷＝1∶2，然后用乙酸乙酯∶己烷＝1∶1)純化，得所需產(chǎn)物，其為泡沫狀，將其溶于干燥乙醚中，過(guò)濾，得標(biāo)題化合物，其為松散的固體(5.0g，95%)，m.p.120-122℃。
MS (FAB)[MH]+，m/z 1048;[M+Na]+，m/z 1070;[M+K]+，m/z 108IR (KBr)3440，3066，1750，1722，1664，1602，1583，1538 cm-1NMR (CDCl3)δ1.177(3H，s)1.236(3H，s)1.745(3H，s)2.023(3H，s)2.121(3H s)2.162(3H，s)2.436(3H，s)3.887(H，d)4.134(H，d)4.197(H，d)4.295(H，m)4.964(H，d)5.161(2H，d)5.450(H，d)5.703(H，d)5.981(H，dd)6.257(H，t)6.541(H，s)6.920(H，d，NH)7.322-8.22(15H，m).
標(biāo)題化合物亦可彤下列替代方法制備向2’-O-(芐氧基羰基)紫杉醇(2.0g;2.0263mmol)的干燥二甲基亞砜(10ml)溶液中滴加乙酸酐(10ml)?；旌衔镌谑覝叵虏⒂械?dú)獯嬖跁r(shí)攪拌18小時(shí)，乙酸乙酯稀釋(100ml)，小心地用冷的6%NaHCO3溶液(6×30ml)，冷水(6×30ml)和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，蒸除溶劑，得一殘?jiān)?。將其?jīng)硅膠柱層析(CH2Cl2，CH2Cl2-5%乙腈，CH2Cl2-10%乙腈梯度洗脫)純化，得所需化合物(1.86g，87.7%)。此方法得出的化合物與經(jīng)前述的二甲硫醚/苯甲酰過(guò)氧化物方法得到的化合物是一致的。
(c)2’-O-(芐氧羰基)-7-O-二芐基膦酰氧基甲基紫杉醇的制備 向2’-O-(芐氧羰基)-7-O-甲基甲硫基紫杉醇(5.0g，5.596mmol)的干燥1，2-二氯乙烷(120ml)溶液中加入粉末狀的活化4A分子篩(5.0g)。室溫下，向其中滴加N-碘代琥珀酰亞胺(1.61g;7.1632mmol)和磷酸二芐酯(1.97g;7.1632mmol)的干燥THF(90ml)混合物。室溫下劇烈攪拌30分鐘后，混合物經(jīng)硅藻土過(guò)濾，蒸發(fā)濾液至干，得一紅色殘?jiān)?。將殘?jiān)苡谝宜嵋阴?100ml)中，用冷的6%NaHSO3(2×50ml)，冷60%NaHCO3(2×50ml)和水(1×50ml)洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，蒸除溶劑，得固體物，將其溶于干燥乙醚中，過(guò)濾，得標(biāo)題化合物，其為象牙色固體(5.9g，97%)，MP 124-127℃MS(FAB)[MH]+，m/z 1278;[M+Na]+，m/z 1301;[M+K]+，m/z 1316IR (KBr)3430，3066，3032，1750，1726，1664，1582，1532 cm-1NMR (CDCl3)δ1.160(3H，s)1.703(3H，s)1.985(3H，s)2.164(3H，s)2.420(3H，s)3.854(H，d)4.151(H，d)4.216(H，m)4.298(H，d)4.873(H，d)5.043(6H，m)5.140(2H，d)5.417(H，d)5.670(H，d)5.971(H，dd)6.241(H，t)6.317(H，s)6.912(H，d，NH)7.280-8.115(25H，m).
(d)7-O-膦酰氧基甲基紫杉醇的制備向2’-O-(芐氧羰基)-7-O-二芐基膦酰氧甲基紫杉醇(6.0g;4.7095mmol)的乙酸乙酯(120ml)溶液中加入10%Pd/c(6.0g)，混合物在60Psi(400KPa)下氫化24小時(shí)。經(jīng)硅藻土過(guò)濾反應(yīng)混合物，蒸發(fā)，得4.07粗品殘?jiān)浣?jīng)短硅膠柱層析純化(依次用CHCl310%，20%和40%甲醇)，得標(biāo)題化合物，其為白色固體(3.2g，71%)，mp155-158℃。
此產(chǎn)品與標(biāo)準(zhǔn)樣品具有相同的Rf(TLC)值和保留時(shí)間(HPhC)。
MS (FAB)[MH]+，m/z 964;[M+Na]+，m/z 986;[M+K]+，m/z 1002;[M+K++Na+-H]+，m/z 1024;[M+2K-H]+，m/z 1040UV (MeOH)λmax＝230nm，E(1%/1cm)＝252.5IR (KBr)3432，3066，2992，1722，1648，1602，1580，1522，1488，1452，1372，1316，1246，1178，1154，1110，1070，1000，980，946，854，802，776，710，628，538 cm-1.
1NMR(acetone-d6/D2O)，δ1.08(3H，s)，1.10(3H，s)，1.63(3H，s)，1.88(3H，s)，1.96(H，m)，2.13(3H，s)，2.32(3H，s)，2.89(H，m)，3.76(H，d)，4.19(H，m)，4.89(H，dd)，5.09(H，dd)，5.55-5.60(2H，overlapping d′s)，6.04(H，t)，6.32(H，s)，720(H，t)，7.34-7.67(10H，overlapping m′s)，7.87(2H，dd)，8.02(2H，dd).
實(shí)例3.2'-O(乙氧羰基)-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇(a)2’-O-(乙氧羰基)紫杉醇的制備 向紫杉醇(4.35g，5.1mmol)的干燥CH2Cl2(51ml)溶液中加入N，N-二異丙基乙基胺(2.67ml，15.3mmol)，然后再加氯代乙酸乙酯(1.46ml，15.3mmol)。反應(yīng)混合物在0℃下攪拌2小時(shí)，室溫下再攪拌1小時(shí)。用乙酸乙酯(400ml)稀釋，有機(jī)層用飽和NaHCO3(2×30ml)和鹽水(30ml)洗滌，MgSO4干燥，得標(biāo)題化合物粗品(93%)，其無(wú)需純化即可用于下一步反應(yīng)。
MS (FAB/NOBA，NaI，KI)[M+H]+，m/z 926;[M+Na]+，m/z 948;[M+K]+，m/z 964HRMS (FAB/NOBA，CsI/Gly external reference)[M+H]+m/z 926.3588 observed，C50H56NO16，calculated value926.3599(deviation △＝1.2ppm)1HNMR (CDCl3)δ1.13(3H，s)，1.23(3H，s)，1.30(3H，t)，1.67(3H，s)，1.92(3H，s)，2.21(3H，s)，2.37(H，d)，2.45(3H，s)，2.54(H，m)，3.80(H，d)，4.15-4.32(4H，m′s overlapping)，4.43(H，dd)，4.96(H，d)，5.42(H，d)，5.68(H，d)，5.98(H，dd)，6.28(2H，m′s，overlapping)，7.00(H，d)，7.34-7.59(11H，m′s overlapping)，7.74(2H，d)，8.12(2H，d).
替代操作將紫杉醇(5.40g，6.324mmol)的干燥CH2Cl2(63ml)溶液冷卻至0℃，用純N，N-二異丙乙基胺(3.30ml，3當(dāng)量)處理之，然后在5分鐘內(nèi)向其中滴加純氯代甲酸乙酯(1.81ml，3當(dāng)量)，反應(yīng)用TLC(50%乙酸乙酯/己烷)監(jiān)測(cè)，2小時(shí)0℃下，且16小時(shí)室溫下反應(yīng)后，生成的黃橙色溶液用乙酸乙酯(300ml)稀釋，飽和NaHCO3(3×75ml)和鹽水(75ml)洗滌，MgSO4干燥，蒸發(fā)，得標(biāo)題化合物粗品，其經(jīng)沉淀純化，CH2Cl2(大約100ml)加入后冷卻下再加己烷(Ca60ml)至出現(xiàn)渾濁。放置冰中冷卻數(shù)小時(shí)后，過(guò)濾收集固體，產(chǎn)量5.17g(88%)。
替代操作在氬氣氛下，將紫杉醇(99.0g，115.9mmol)溶于盛有1.350ml干燥CH2Cl2的經(jīng)火焰干燥、單頸3L燒瓶中。將溶液冷卻至-10℃，慢慢加入N，N-二異丙基乙基胺(52.4g，405.7mmol)(加入時(shí)間約3分鐘)，然后再加ClCO2Et(31.45g，289.8mmol;加入時(shí)間約15分鐘)。生成的溶液在-4℃下攪拌過(guò)夜(16小時(shí))。通過(guò)TLC判斷反應(yīng)完全與否。再加一批N，N-二異丙基乙基胺(2.62g，20.28mmol)及ClCO2Et(2.20g，20.28mmol)，在-4℃下再攪拌3小時(shí)，直至TLC檢測(cè)結(jié)果沒(méi)有起始物存在。用乙酸乙酯(1.5L)稀釋冷混合物，將其轉(zhuǎn)移至分液漏斗中。依次用5%KHSO4(2×500ml)，水(1×500ml)，5%(KHSO4(1×500ml)，水(1×500ml)，飽和NaHCO3(2×500ml)及鹽水(2×500ml)洗滌，MgSO4干燥，真空蒸除溶劑，得147g粗品，將殘?jiān)苡跓岬腃H2Cl2(800ml，浴溫42℃)中，攪拌下并保持上述溫度時(shí)滴加己烷(530ml)。將此結(jié)晶性混合物于室溫下放置3小時(shí)，然后在0℃的冷房間內(nèi)放置過(guò)夜。過(guò)濾收集重的白色結(jié)晶，用己烷/CH2Cl2＝1∶1(V∶V)洗滌(2×200ml)，抽濾干燥1小時(shí)后，真空干燥(約1.0mmHg)過(guò)夜，得95.7g(89%產(chǎn)率)標(biāo)題化合物(均勻性指數(shù)用HPLC測(cè)量為98.5%)(b)2’-O-(乙氧羰基)-7-O-甲基甲硫基紫杉醇的制備
向2’-O-(乙氧羰基)紫杉醇(4.38g，4.7mmol)的干燥二甲亞砜(12.5ml)溶液中加入乙酸酐(12.5ml)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌24小時(shí)，用乙酸乙酯稀釋(500ml)，NaHCO3(3×40ml)，水(2×40ml)洗滌，有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，真空蒸除溶劑。殘?jiān)?jīng)硅膠柱層析(40%乙酸乙酯/己烷)純化，得所需標(biāo)題化合物(4.39g，94%)。
MS (FAB/NOBA，NaI，KI)[M+H]+，m/z 986;[M+Na]+，m/z 1008;[M+K]+，m/z 1024HRMS (FAB/NOBA，CsI/Gly external reference)[M+H]+m/z 986.3646(calculated value986.3633，deviation △＝1.3ppm)1HNMR (CDCl3)δ1.18(3H，s)，1.20(3H，s)，1.30(3H，s)，1.75(3H，s)，1.84(H，m)，2.09(3H，s)，2.11(3H，s)，2.16(3H，s)，2.24(H，d)，2.37(H，d)，2.45(3H，s)，2.80(H，m)，3.68(H，d)，4.08-4.33(5H，m，overlapping)，4.65(2H，s)，4.96(H，d)，5.43(H，d)，5.69(H，d)，5.98(H，dd)，6.26(H，t)，6.55(H，s)，7.00(H，d)，7.32-7.61(11H，m，overlapping)，7.73(2H，dd)，8.11(2H，dd).
替代操作將2’-O-(乙氧羰基)紫杉醇(2.260g，2.4406mmol)溶于無(wú)水二甲亞砜(6ml)中，室溫下一次加入乙酸酐(6ml)。反應(yīng)用HPLC(C18分析柱;60%乙腈-40%10mM磷酸銨緩沖液，PH＝6)監(jiān)測(cè)。30小時(shí)后，用乙酸乙酯(250ml)稀釋，飽和NaHCO3(3次)洗滌，然后用水和鹽水洗滌，MgSO4干燥并過(guò)濾，粗品經(jīng)硅膠層析(40%乙酸乙酯/己烷)純化，得標(biāo)題化合物，其為白色泡沫狀(2.030g，91%)，HPLC分析純度為90%，組份用第二根柱(5%乙腈/CH2Cl2)進(jìn)一步純化，得所需物質(zhì)，HPLC分析純度大約97%。
制備2’-O-(乙氧羰基)-7-O-甲基硫代甲基紫杉醇的替代方法。
-40℃下，將2’-O-(乙氧羰基)紫杉醇(4.170g，4.503mmol)溶于無(wú)水乙腈(68ml)中，加入二甲硫醚(3.2ml，44.10mmol)，然后再加過(guò)氧化苯甲酰(4.400g，18.24mmol)?；旌衔镏糜?℃水浴下攪拌，反應(yīng)過(guò)程用TLC(40%乙酸乙酯/己烷)監(jiān)測(cè)。3小時(shí)后，無(wú)起始物檢出，加乙酸乙酯(250ml)以及飽和NaHCO3(100ml)。有機(jī)層進(jìn)一步用碳酸氫鈉，水，鹽水洗滌，MgSO4干燥并過(guò)濾。殘?jiān)?jīng)硅膠閃式柱層析(4%乙腈/CH2Cl2)純化，得標(biāo)題化合物，其為白色泡沫狀(2.571g，58%收率)，HPLC分析顯示產(chǎn)品純度為＞97%。NMR光譜數(shù)據(jù)同前報(bào)告的一致。
制備2’-O-(乙氧羰基)-7-O-甲基硫代甲基紫杉醇的替代方法。
將2’-O(乙氧羰基)紫杉醇(49.3g，53.2mmol)置于一個(gè)火焰干燥的1L單頸燒瓶中，室溫下溶于干燥乙腈(500ml)中。通過(guò)注射方法迅速將二甲硫(39.1ml，0.532mol)加入其中，將此攪拌的混合物在冰鹽浴中冷卻至-16℃，然后一次加入固體過(guò)氧化苯甲酰(51.6g，0.213mol)，(欲使反應(yīng)進(jìn)行完全需將全部4當(dāng)量反應(yīng)物均加入其中)。繼續(xù)攪拌30分鐘，在此期間將溫度升至-10℃，反應(yīng)介質(zhì)在此過(guò)程中不均勻(過(guò)氧化苯甲酰未完全溶解)。將冷卻變成冰/水浴，升溫至0℃，升溫后使剩余的過(guò)氧化苯甲酰再溶解約5分鐘。0℃下攪拌2.5小時(shí)后用TLC檢測(cè)判斷反應(yīng)是否完全。于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸除溶劑至約200ml，然后轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，用庚烷(5×500ml)洗滌。乙腈層用乙酸乙酯(1.5L)稀釋，用3∶1的飽和NaHCO3/5%K2CO3(V∶V)(2×500ml)，飽和NaHCO3(2×500ml)，半飽和鹽水(1×500ml)和鹽水(1×500ml)洗滌，MgSO4干燥，真空蒸除溶劑，得67.0g粗品。將其溶于丙酮(200ml)中，在水浴上加熱至40℃，攪拌下滴加己烷直至有渾濁物出現(xiàn)(400ml)。將此結(jié)晶性混合物室溫放置3小時(shí)，轉(zhuǎn)移至0℃的冷房中過(guò)夜(16小時(shí))。形成一塊厚餅狀物，濾集固體，用己烷/丙酮3∶1(V/V)(2×50ml)洗滌，生成的白色結(jié)晶抽濾干燥1小時(shí)，然后真空(約0.5mmHg)過(guò)夜，得47.5g(91%收率)標(biāo)題化合物(HPLC分析均勻性指數(shù)為94.8%)。
(c)2’-O-(乙氧羰基)-7-O-二芐基膦酰氧甲基紫杉醇的制備 室溫下將N-碘代琥珀酰亞胺(1.953g，8.65mmol)和磷酸二芐酯(2.41g，8.65mmol)的THF溶液加到2’-O-(乙氧羰基)-7-O-甲硫代甲基紫杉醇(5.677g，5.76mmol)和4A分子篩(5.7g)的CH2Cl2(100ml)溶液組成的混合物中。室溫?cái)嚢?0分鐘，用TLC判斷反應(yīng)完全與否，經(jīng)硅藻土過(guò)濾，濾液真空濃縮，得淺棕色殘?jiān)靡宜嵋阴?800ml)稀釋之，有機(jī)層用1%Na2SO3(2×80ml)，5%鹽水(2×50ml洗滌，真空濃縮并干燥，殘?jiān)鼘游?50-60%乙酸乙酯/己烷)得標(biāo)題化合物(6.23g，89%)。
MS (FAB/NOBA，NaI，KI)[M+Na]+，m/z 1238;[M+K]+，m/z 1254HRMS (FAB/NOBA，CsI/Gly external reference)[M+Na]+m/z 1216.4291(C65H71NO20P calculated value1216.4307;deviation △＝1.3ppm)1HNMR (CDCl3)，δ1.18(3H，s)，1.21(3H，s)，1.30(3H，t)，1.67(6H，s)，1.80(H，s)，1.93(H，m)，1.99(3H，d)，2.18(3H，s)，2.23(H，m)，2.38(H，m)，2.45(3H，s)，2.80(H，m)，3.86(H，d)，4.14-4.32(5H，m′s，overlapping)，4.88(H，d)，5.00-5.07(4H，m′s，overlapping)，5.42(H，d)，5.68(H，d)，5.96(H，dd)，6.26(H，t)，6.33(H，s)，6.95(H，d)，7.30-7.61(11H，m′s overlapping)，7.75(2H，dd)，8.12(2H，dd).
替代操作向2’-O-(乙氧羰基)-7-O-甲基硫代甲基紫杉醇(350mg，0.355mmol)的無(wú)水THF(8ml)溶液中加入N-碘代琥珀酰亞胺(120mg，0.532mmol)和磷酸二芐酯(148mg，0.532mmol)的THF(5ml)溶液。用HPLC(C18柱，70%乙腈，30%10mM磷酸銨，pH＝6)監(jiān)測(cè)反應(yīng)，2小時(shí)后僅有少于5%的起始原料被檢出，溶液用乙酸乙酯(75ml)稀釋，1%二硫化鈉(2×50ml)和鹽水(50ml)洗滌，MgSO4快速干燥后，過(guò)濾，蒸除溶劑，硅膠閃柱層析(45%乙酸乙酯/己烷)，得標(biāo)題化合物，其為白色泡沫狀(281mg，65%)，HPLC分析顯示純度約為95%。
替代操作粉碎的4A分子篩置于火焰干燥的1L單頸燒瓶中，抽真空(約0.5mmHg)，用空氣加熱槍加熱10分鐘，其間用手振搖。冷卻后減壓下將氬氣導(dǎo)入燒瓶中，加入2’-O-(乙氧羰基)-7-O-甲基硫代甲基紫杉醇(37.5g，38.03mmol)，再加磷酸二芐酯(14.88，53.24mmol)和THF(400ml)。室溫下用磁力攪拌器將不均勻的混合物劇烈攪拌15分鐘。在另一個(gè)火焰干燥的燒瓶中，在氬氣氛下將N-碘代琥珀酸亞胺(10.7g，47.54mmol)溶于THF(50ml)中，(在制備NIS溶液過(guò)程中，液體轉(zhuǎn)移及反應(yīng)過(guò)程中為了避光均用鋁箔蓋住容器)。然后經(jīng)注射慢慢(10分鐘)加入。含NIS的燒瓶用5mlTHF洗滌，轉(zhuǎn)移至反應(yīng)混合物中，將其在室溫下攪拌2小時(shí)。TLC顯示無(wú)起始物，通過(guò)硅藻土墊板過(guò)濾生成的深紅色溶液，濾液直接流進(jìn)劇烈攪拌著的含有乙酸乙酯(500ml)，10%硫代硫酸鈉(300ml)和飽和NaHCO3(200ml)的雙相混合物中。幾秒鐘后紅色消失得一無(wú)色溶液。硅藻土墊板用EtOAC(約100ml)洗滌，將兩液相均轉(zhuǎn)入分液漏斗中，有機(jī)層用1L EtOAC稀釋，分層，有機(jī)層依次用飽和NaHCO3和5%K2CO3(3∶1＝V∶V，2×500ml)，飽和NaHCO3(2×500ml)，半飽和鹽水(1×500ml)和鹽水(1×500ml)洗滌。提取液用MgSO4干燥，過(guò)濾。室溫?cái)嚢柘掠?.0g中性Norit(焦炭)對(duì)其處理15分鐘，再經(jīng)硅藻土板過(guò)濾，減壓蒸除溶劑，得52g粗品。將其溶于甲苯/CH2Cl2(280ml/25ml)中，向其中滴加己烷(20ml)，室溫放置3小時(shí)后，此結(jié)晶性混合物于0℃下放置過(guò)夜。在燒瓶壁上形成灰黃色固體。傾出母液，殘?jiān)眉妆?50ml)處理，過(guò)濾，甲苯洗滌，抽濾干燥30分鐘。將其轉(zhuǎn)移至帶有DrieriteR的干燥器中，真空下(約0.5mmHg)進(jìn)一步干燥4小時(shí)，得24.4g(53%產(chǎn)率)標(biāo)題化合物(均勻性指數(shù)經(jīng)HPLC檢測(cè)為95.9%)。母液蒸發(fā)至干，用甲苯處理(100ml)，過(guò)濾，甲苯洗滌，抽濾干燥30分鐘，在上述干燥器中干燥后，得12.5g(27%收率)同樣產(chǎn)品(HPLC柱測(cè)均勻性指數(shù)為97.1%)。
(d)2’-O-(乙氧羰基)-7-O-膦酰氧基甲基紫杉醇的制備，其單鈉，單鉀，三乙胺，精氨酸，賴氨酸，乙醇胺，N-甲基葡糖胺以及三乙醇胺鹽的制備
向2’-O-(乙氧羰基)-7-O-二芐基膦酰氧甲基紫杉醇(1.23g，1.01mmol)的干燥乙酸乙酯(40ml)溶液中加10%Pd/c(428mg，10%，0.404mmol)。反應(yīng)混合物在連續(xù)振搖24小時(shí)下進(jìn)行氫化(60PSI＝400KPa)。經(jīng)硅藻土過(guò)濾，硅藻土用乙酸乙酯淋洗幾遍。濃縮濾液，得標(biāo)題化合物的游離酸形式(1.01g，HPLC檢測(cè)為80%純度)。其雜質(zhì)部分可在下一步反應(yīng)中經(jīng)C18柱層析除去。
MS (FAB/NOBA，NaI，KI)[M+Na]+，m/z 1058;[M+K]+，m/z 1074;[M+2Na-H]+，m/z 1080;[M+Na+K-H]+，m/z 1096;[M+2K-H]+，m/z 1112HR-MS(FAB/NOBA，CsI/Gly，external reference)[M+Na]+，m/z 1058.3163(C51H58NO20PNa calculated value1058.3188;deviation △＝2.3ppm)1H NMR(acetone-d6/D20)δ1.13(3H，s)，1.21(3H，s)，1.66(3H，s);1.87(H，m)，1.93(3H，s)，2.14(3H，s)，2.18(H，m)，2.44(3H，s)，2.95(H，m)，3.81(H，d)，4.12(2H，s)，4.15-4.27(3H，m′s overlapping)，4.92-4.99(2H，br.m′s overlapping)，5.15(H，br.s)，5.48(H，d)，5.61(H，d)，5.84(H，dd)，6.07(H，t)，6.36(H，s)，7.25(H，t)，7.28-7.69(10H，m′s overlapping)，7.89(2H，dd)，8.08(2H，dd)，8.86(H，d).
替代操作在Pd/c(10%W/V，150mg)存在下，于60psi(400KPa)的壓力下，使2’-O-(乙氧羰基)-7-O-(二芐基膦酰氧基甲基)紫杉醇(490mg，0.402mmol)的乙酸乙酯(20ml)溶液在一個(gè)Parr振蕩器中進(jìn)行氫化。用TLC和HPLC檢測(cè)反應(yīng)，當(dāng)既無(wú)起始物又無(wú)中間體(假設(shè)是磷酸單芐酯)被檢測(cè)到(26小時(shí))后，經(jīng)硅藻土過(guò)濾懸浮液，蒸發(fā)至干，HPLC分析顯示純度為88-92%。
替代操作0℃下，使下列所述的2’-O-(乙氧羰基)-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇三乙胺鹽(5.4g，4.75mmole)在劇烈攪拌下于EtOAC(100ml)和5%NaHSO4(45ml)之間分配30分鐘。分出水層，用乙酸乙酯(20ml)提取。合并乙酸乙酯層用半飽和鹽水(25ml)，鹽水(25ml×2)洗滌，Na2SO4干燥，過(guò)濾，得酸(約4.75mmole)的乙酸乙酯溶液(約150ml)。此溶液濃縮至干(用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器)，得3.75g標(biāo)題化合物的游離酸形式，產(chǎn)率95%，HPLC分析結(jié)果顯示均勻性指數(shù)為96.1%。
單鈉鹽的制備如下通過(guò)超聲作用將2’-O-(乙氧羰基)-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇(1.6g，1.55mmol)溶于乙腈(30ml)中。用水稀釋(30ml)，加1.1M的NaHCO3(2.11ml，2.32mmol)。通過(guò)振蕩或超聲得一溶液(5-20min)。將此類似于牛奶狀溶液上C-18柱，用2倍于柱體積的水洗滌，用25%的乙腈/水洗脫單鈉鹽。將合適的組份合并，蒸除乙腈，水相冷凍干燥，得標(biāo)題化合物的單鈉鹽(850mg，大約50%)，HPLC純度為97%。
MS (FAB/NOBA，NaI，KI)[M+Na]+，m/z 1180HR-MS (FAB/NOBA，CsI/Gly external reference)[M+Na]+，m/z 1080.2968(C51H57NO20PNa2calculated value1080.3007;deviation D＝3.6ppm)Elemental analysisC52.65(calc.56.72)，H5.06(calc.5.23)，N1.20(calc.1.30)，Na2.74(calc.2.12)IR (KBr)3430，3066，2988，1746，1722，1660，1602，1582，1526，1488，1452，1374，1246，1178，1150，1108，1070，1052，1026，1002，966，912，834，792，776，710，628，538 cm-1.
1H-NMR (DMSO-d6，D2O，acetone-d6)δ1.10(6H，s)，1.23(3H，t)，1.64(3H，s)，1.70(H，m)，1.90(3H，s)，1.99(H，m)，2.14(3H，s)，2.37(3H，s)，2.98(H，m)，3.74(H，d)，4.07(2H，s)，4.13-4.26(3H，m，overlapping)，4.80(H，br.dd)，4.97(H，d)，5.09(H，br.t)，5.44(H，d)，5.55(H，d)，5.99(H，t)，6.34(H，s)，7.22(H，t)，7.43-7.69(10H，m，overlapping)，7.92(2H，dd)，8.06(2H，dd).
單鈉鹽也可以如下制備室溫并攪拌下，用乙基己酸鈉(87.5mM的EtOAC溶液，1.0ml，0.0875mmol)溶液處理2’-O-(乙氧羰基)-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇(89%;70mg，0.060mmol)的EtOAC(2ml)溶液。室溫下攪拌1小時(shí)后，向其中加入己烷(1.2ml)直至有渾濁出現(xiàn)。-20℃下放置2小時(shí)后，通過(guò)細(xì)濾紙過(guò)濾細(xì)的無(wú)定形粉末(較困難，很慢)，得45mg(70%)鈉鹽。HPLC檢測(cè)純度為95.2%，并含有少量乙基己酸(NMR)。
三乙醇胺鹽的制備如下將得自氫化反應(yīng)的2’-O-(乙氧羰基)-7-O-膦酰氧基甲基紫杉醇的粗品(0.69g，0.593mmol在校正掉雜質(zhì)后)(89%HPLC檢測(cè))溶于乙酸乙酯(10ml)中，慢慢攪拌，其間滴加入三乙醇胺(0.11M的EtOAC溶液，5.1ml，0.95當(dāng)量)。所得的牛奶狀溶液在0℃下消化2小時(shí)。經(jīng)細(xì)濾低過(guò)濾，冷EtOAC淋洗，產(chǎn)量499mg(80%)，其為無(wú)定形，細(xì)的，不帶靜電的粉末，真空干燥過(guò)夜。HPLC顯示96.6%純度(C-18，45% 5mM Q12+10mM磷酸銨，pH＝6，55%乙腈)。NMR光譜(D2O/丙酮/DMSO)顯示痕量的EtOAC，沒(méi)有其它明顯的雜質(zhì)。分析結(jié)果其帶2-3個(gè)水分子。
從另外一個(gè)實(shí)驗(yàn)中得到的三乙醇胺鹽(不優(yōu)選)可用下法進(jìn)一步純化，將三乙醇胺鹽(大約2g)溶于約30%乙腈/水中，在微有氮?dú)鈮毫ο陆?jīng)C-18柱(Bakerbond)洗脫，洗脫液為梯度變化的20%-40%乙腈/水，收集含有三乙醇胺鹽的部分，減壓下用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器去除乙腈，水溶液冷凍并冷凍干燥過(guò)夜，得1.4g三乙醇胺鹽，純度為97.5%。
三乙醇胺鹽也可按下法制備0℃并劇烈攪拌下，使2’-O-(乙氧羰基)-7-O膦酰氧甲基紫杉醇三乙胺鹽(3.0g，2.64mmole)在EtOAC(60ml)和5%NaHSO4(30ml)中進(jìn)行分配15分鐘。分出水層，用乙酸乙酯(10ml)提取，合并的乙酸乙酯層用鹽水(15ml)洗滌，Na2SO4干燥，過(guò)濾，得一酸(約2.64mmole)的EtOAC(約70ml)溶液。5分鐘內(nèi)，室溫并劇烈攪拌下向其中滴加N(CH2CH2OH)3(0.35ml，2.64mmol)生成的懸浮液再攪拌1小時(shí)，過(guò)濾，EtOAC(15ml×2)洗滌，真空干燥，得2.8g三乙醇胺鹽，產(chǎn)率89%。HPLC分析顯示均勻性指數(shù)為98.7%;mp.＞157℃(分解)。
元素分析C56H73N2O23P·2.0H2O·0.3EtOACC，55，60;H，6.48;N，2.27;KF(H2O)，2.92實(shí)測(cè)值C，55，94;H，6.59;N，2.43;KF(H2O)，3.50。
三乙胺鹽的制備如下室溫下向2’-O-(乙氧羰基)-7-O-二芐基膦酰氧甲基紫杉醇(10g，8.23mmole)的EtOAC(350ml)溶液中加入10%Pd/C(2g，20%填裝)。生成的懸浮液經(jīng)抽空空氣脫氣，并用氬氣清洗，此過(guò)程重復(fù)兩次，然后用氫氣置換氬氣。室溫并劇烈攪拌下，反應(yīng)溶液在氫氣球壓力下(每平方英寸2-3磅壓力)反應(yīng)16小時(shí)。抽空氫氣脫氣后，用氬氣置換清洗3次。生成的懸浮液經(jīng)硅藻土墊板過(guò)濾，5分鐘內(nèi)于劇烈攪拌下向此均勻的濾液中慢慢加入Et2N(8.23mmole，1.14ml)，生成的細(xì)白懸浮液再攪拌30分鐘，經(jīng)多孔漏斗過(guò)濾，濾餅在真空下干燥(1mmHg)16小時(shí)，得8.22g標(biāo)題三乙胺鹽，收率88%，HPLC分析顯示均勻性指數(shù)為97.4%，mp.＞178℃(分解)。
元素分析C57H73N2O20P，4.5H2O;
理論值C，56.19;H，6.79;N，2.30;KF(H2O)，6.65;
實(shí)測(cè)值C，56.33;H，6.87;N，2.32;KF(H2O)，7.96。
制備三乙胺鹽的替代方法將2’-O-(乙氧羰基)-7-O二芐基膦酰氧甲基紫杉醇(5.67g，4.66mmol)加到250ml瓶中并溶于乙酸乙酯(150ml)中。此燒瓶帶有一個(gè)三通閥，其中一端與室真空相連，另一端與氬氣管相連。使用這個(gè)閥，可使燒瓶部分抽氣排空并用氬氣清洗。此過(guò)程再重復(fù)兩次。向其中加入Pd/活性C(10%Pd)(0.85g)，然后調(diào)節(jié)三通閥，用氫氣球置換氬氣。使用此閥，可使燒瓶部分排空并用氫氣清洗，此過(guò)程再重復(fù)兩次。生成的混合物在室溫和氫氣球壓力下放置過(guò)夜。對(duì)氫氣暴露17小時(shí)后用TLC分析，結(jié)果起始物消失。再調(diào)節(jié)三通閥用氬氣管置換氫氣球。使用此閥，可使燒瓶部分排空并用氬氣清洗，此過(guò)程再重復(fù)兩遍。真空下燒瓶中的物品經(jīng)硅藻土墊板過(guò)濾，用EtOAC(2×10ml)淋洗硅藻土。向攪拌著的濾液中加入NEt3(0.650ml，4.66mmol)。生成的懸浮液在室溫下攪拌2小時(shí)，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器使之體積減為約150ml，濾集固體，乙酸乙酯(2×10ml)洗滌，真空干燥，得4.76g(90%產(chǎn)率)標(biāo)題三乙胺鹽，其為白色粉末(HPLC檢測(cè)均勻性指數(shù)為96.6%)。
制備三乙胺鹽的替代方法將2’-O-(乙氧羰基)-7-O-二芐基膦酰氧甲基紫杉醇(5.17g，4.25mmol)加入250ml燒瓶中，并將其溶于EtOAC(150ml)中。此瓶帶有一個(gè)三能閥，其中一端與室真空相連，另一端與氬氣管相連，使用這個(gè)閥，可使燒瓶部分抽氣排空，并用氬氣清洗，此過(guò)程再重復(fù)兩次。向其中加入Pd/活性C(10%Pd)(0.86g)。然后調(diào)節(jié)三通閥，用氫氣球置換氬氣管，使用此閥，可使燒瓶部分排空并用氫氣清洗，此過(guò)程再重復(fù)兩次，生成的混合物在室溫和氫氣球壓力下放置過(guò)夜。對(duì)氫氣暴露16小時(shí)后，用TLC分析，結(jié)果起始物消失，調(diào)節(jié)三通閥，用氬氣管置換氫氣球。使用此閥，可使燒瓶部分排空并用氬氣清洗，此過(guò)程再重復(fù)兩次。真空下燒瓶中的物品經(jīng)硅藻土墊板過(guò)濾，用EtOAC(4×10ml)洗滌硅藻土。向攪拌著的濾液中加入NEt3(0.590ml，4.25mmol)。生成的懸浮液在室溫下攪拌1小時(shí)，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器使之體積減至約140ml。濾集固體，EtOAC(10ml)洗滌，真空干燥，得4.46g(92%收率)標(biāo)題三乙胺鹽，其為白色粉末(HPLC檢測(cè)均勻性指數(shù)為96.7%)。
賴氨酸鹽的制備如下0℃下，將2’-O-(乙氧羰基)-7-O-二芐基膦酰氧甲基紫杉醇(15.0g，12.34mmol)分份滴加到10%Pd/C(20%裝填，3g)的乙醇(600ml，2000標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)度)懸浮液中。生成的懸浮液用抽空空氣脫氣并用氬氣清洗。此過(guò)程再重復(fù)兩次，然后用氫氣置換掉氬氣，并在劇烈攪拌下再進(jìn)行同樣的脫氣操作。生成的混合物在0℃下攪拌2小時(shí)，除去冷浴，再在室溫下攪拌41/2小時(shí)。反應(yīng)混合物用抽空空氣脫氣并用氬氣清洗三次。在氬氣氛下通過(guò)硅藻土墊板過(guò)濾。在劇烈攪拌下于5分鐘內(nèi)，向生成的濾液中慢慢加入賴氨酸(1.63g，0.94當(dāng)量)的1∶1＝水∶乙醇混合溶液(200標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)度)(20ml)。向生成的白色懸浮液中加蒸餾水(110ml)，攪拌30分鐘。使之升溫至55℃，然后將生成的均勻溶液置于50℃的油浴上，在16小時(shí)內(nèi)慢慢冷卻至室溫，并在4℃下再放置3小時(shí)。過(guò)濾，抽濾干燥16小時(shí)，得11.8g(約80%產(chǎn)率)的賴氨酸鹽，HPLC測(cè)定的均勻性指數(shù)為99%，mp.＞170℃分解。元素分析計(jì)算值(C57H72N3O22P.8.0 H2O)C51，62;H，6.69;N，3.17;KF(H2O，10.87，實(shí)測(cè)值51.76;H，6.57;N，3.48;KF(H2O)，11.42。
乙醇胺鹽的制備方法如下0℃劇烈攪拌下，使2’-O-(乙氧羰基)-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇三乙胺鹽(3.0g，2.64mmole)在EtOAC(60ml)和5%的NaHSO4(30ml)之間分配15分鐘。分出水層，用EtOAC(15ml)提取，合并EtOAC層，用鹽水(15ml)洗滌，Na2SO4干燥，過(guò)濾得游離酸(約2.64mmole)的EtOAC(約70ml)溶液。室溫下并劇烈攪拌時(shí)于5分鐘內(nèi)向此溶液中滴加H2NCH2CH2OH(0.15ml，2.64mmole)的EtOAC(5ml)溶液，生成的懸浮液再攪拌1小時(shí)，過(guò)濾，用EtOAC(15ml×2)洗滌，真空干燥，得2.6g標(biāo)題乙醇胺鹽產(chǎn)率89%，HPLC分析顯示均勻性指數(shù)為97.8%;mp.＞130°分解。
元素分析C53H65N2O11P·2.5H2O;
理論值C，55.73;H，6.18;N，2.45;KF(H2O)，3.94;
實(shí)測(cè)值C，55.76;H，6.39;N，2.45;KF(H2O)，6.00。
精氨酸鹽的制備如下0℃下，將2’-O-(乙氧羰基)-7-O-二芐基膦酰氧甲基紫杉醇(30.0g，24.69mmole)分份滴加到10%Pd/C(20%裝填，6g)的乙醇(900ml，200標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)度)溶液中，生成的懸浮液通過(guò)抽空空氣脫氣，并用氬氣清洗，此過(guò)程重復(fù)兩遍，隨后在劇烈攪拌下用氫氣置換氬氣。生成的混合物在0℃下攪拌2小時(shí)。除去冷浴，室溫下再攪拌24小時(shí)，抽空空氣脫氣，并用氬氣清洗3次。在氬氣氛下通過(guò)硅藻土墊板過(guò)濾，濾液等分成兩份，每份中加EtOH(190ml，200標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)度)，于5分鐘內(nèi)且劇烈攪拌下，向其中一份中(約630ml)慢慢加精氨酸(2.0g，0.94當(dāng)量)的2∶1＝水∶EtOH(200標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)度)混合溶液(20ml)。生成的白色懸浮液中加蒸餾水(100ml)，攪拌30分鐘，然后加溫至60℃，趁熱過(guò)濾，濾液置于50℃的油浴上，慢慢冷卻至室溫，并在室溫下保持2小時(shí)，再在4℃下保持2小時(shí)。過(guò)濾，用冷的3%H2O/乙醇(100ml)洗滌，抽濾干燥16小時(shí)，得2.95g(產(chǎn)率約86%)的標(biāo)題精氨酸鹽，均勻性指數(shù)為96.7%。
55℃下，將此物質(zhì)(12.95g)溶于15%H2O/乙醇(約700ml)混合物中，冷卻后在30℃下保持3 1/2小時(shí)，再在室溫下保持16小時(shí)，4℃下保持3小時(shí)。過(guò)濾生成的結(jié)晶，用冷的2%H2O/乙醇(50ml×2)洗滌，抽濾干燥4小時(shí)，真空干燥(1mmHg)16小時(shí)，得10.2gs(約80%產(chǎn)率)的標(biāo)題精氨酸鹽(均勻性指數(shù)為98.5%);m.p＞176℃分解。
元素分析C57H72N5O22P·6.4H20;
理論值C，51.65;H，6.45;N，5.28;KF(H2O)，8.7實(shí)測(cè)值C，51.86;H，6.65;N，5.53;KF(H2O)，8.72。
N-甲基葡糖胺鹽的制備如下0℃下將2’-O-(乙氧羰基)-7-O-二芐基膦酰氧甲基紫杉醇(30.0g，24.69mmole)分份加到10%Pd/c(20%填裝，6g)的乙醇(900ml，200標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)度)的懸浮液中。生成的懸浮液經(jīng)抽空空氣脫氣，然后用氬氣清洗。此過(guò)程重復(fù)兩次后，在劇烈攪拌下用氫氣置換氬氣。溶液在0℃下攪拌2小時(shí)，除去冷卻浴，再在室溫下反應(yīng)24小時(shí)，反應(yīng)物用抽空空氣脫氣然后用氬氣清洗3次。在氬氣氛下經(jīng)硅藻土墊板過(guò)濾，濾液分成兩等分，向每份中加入EtOH(190ml，200標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)度)，在劇烈攪拌下于5分鐘內(nèi)向其中的一份(約630ml)中慢慢加入N-甲基葡糖胺(2.24g，0.94當(dāng)量)約1∶1＝H2O∶EtOH(200標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)度)(20ml)的混合溶液。生成的白色懸浮液中加蒸餾水(100ml)，攪拌30分鐘，升溫至49℃澄清的均勻溶液放置于50℃的油浴上，使之冷卻至室溫，室溫下放置2小時(shí)，然后在4℃下保持1 1/2小時(shí)。過(guò)濾，3%H2O/乙醇(100ml)洗滌，室溫下抽濾16小時(shí)，得9.65g(收率約64%)標(biāo)題N-甲基葡糖胺鹽，其均勻性指數(shù)為96.4%。
52℃下，將此物質(zhì)(9.65g)溶于15%水/乙醇(約450ml)混合物中，將其冷卻至28℃，保持3 1/2小時(shí)，室溫下16小時(shí)，再于4℃下保持3小時(shí)。濾集生成的結(jié)晶，用冷2%H2O/乙醇(50ml×2)洗滌，抽濾干燥4小時(shí)，真空干燥(1mmHg)16小時(shí)，得7.5g(約80%收率)的標(biāo)題N-甲基葡糖胺鹽(均勻性指數(shù)經(jīng)HPLC柱測(cè)為98.6%);mp.＞154℃分解。
元素分析C58H75N2O25P·E5.0H2O;
理論值C，52.72;H，6.48;N，2.12;KF(H2O)，6.28實(shí)測(cè)值C，53.09;H，6.50;N，2.08;KF(H2O)，7.12。
實(shí)例42’-O-(膦酸氧甲基)紫杉醇(a)2’-O-(甲基硫代甲基)-7-O-(三乙基甲硅烷基)紫杉醇的制備
向冷的(0～-5℃)7-O-(三乙基甲硅烷基)紫杉醇(2.46g;2.543mmol)的干燥乙腈(100ml)溶液中加入二甲硫醚(1.348g;1.59ml;21.6976mmol)。均勻的混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，5℃下保持18小時(shí)，有黃色溶液生成。蒸發(fā)至干，硅膠柱層析(乙酸乙酯/己烷＝1∶4;1∶3和1∶2)純化，得標(biāo)題化合物(1.0g，38%)，此可以直接用于下步反應(yīng)。MS[M+H]+，1028;[M+Na]+，1050;[M+K]+，1066(b)2’-O-(甲基硫代甲基)紫杉醇的制備
向步驟(a)中產(chǎn)品(1.0g;0.9737mmol)的干燥乙腈(30ml)的冷溶液(-15℃)中滴加0.5NHCl(3ml)，生成的溶液在-15℃下攪拌1小時(shí)，5℃下18小時(shí)。乙酸乙酯稀釋(20ml)，用冷的6%NaHCO3和鹽水洗滌，MgSO4干燥，蒸發(fā)至干，此物以硅膠板(CH2Cl215%乙腈)純化，得純標(biāo)題化合物(280mg，31.4%)。
IR(KBr)3446，3064，2940，1726，1666，1582，1516，1486.
NMR (CDCl3)δ1.118(s，3H)，1.229(s，3H)，1.662(s，3H)，1.689(s，3H)，1.871(s，3H)，2.209(s，3H)，2.450(s，3H)，3.800(d，H)，4.119(d，H)，4.305(d，H)，4.413(m，H)，4.563(d，H)，4.703(d，H)，4.940(d，H)，4.958(dd，H)，5.667(d，H)，5.822(dd，H)，6.263(m，2H)，7.019(d，NH)，7.293-8.127(m，15H).
MS [M+H]+，914;[M+Na]+，936;[M+K]+，952HRMSMH+914.3394(calculated＝914.3422)
(c)2’-O-(二芐基膦酰氧甲基)紫杉醇的制備 向攪拌著的步驟(b)中產(chǎn)品(0.89g;0.9748mmol)的干燥1，2-二氯乙烷(12ml)溶液中加入粉末狀的4A分子篩(1.0g)，然后滴加N-碘代琥珀酰亞胺(0.33g;1.4622mmol)和磷酸二芐酯(0.41g;1.4622mmol)的干燥THF(8ml)溶液的混合物。將其于室溫下攪拌1小時(shí)，經(jīng)硅藻土過(guò)濾，蒸發(fā)至干，得到的紅色殘?jiān)靡宜嵋阴?50ml)溶解，用冷的6%NaHSO3，冷的6%NaHCO3和鹽水洗滌，MgSO4干燥，蒸發(fā)，得一泡沫狀物，其經(jīng)硅膠板純化(CH2Cl220%乙腈)，得純產(chǎn)品(0.77g，69%)。
IR(KBr)3854，3744，3362，3066，1960，1722，1602，1580.
NMR(CDCl3)δ1.075(s，3H)，1.167(s，3H)，1.651(s，3H)，1.799(s，3H)，2.209(s，3H)，2.296(s，3H)，2.464(m，H)，3.686(d，H)，4.121(d，H)，4.240(d，H)，4.293(m，H)，4.808-4.957，(m，6H)，5.006(m，H)，5.565-5.649(m，2H)，6.034(t，H)，6.194(3，H)，7.100-8.132，(m，26H).
MS [M+H]+，1144;[M+Na]+，1166;[M+K]+，1182(d)2’-O-(膦酰氧甲基)紫杉醇的制備 60psi(400KPa)下，使步驟(c)(0.9g;0.7874mmol)中產(chǎn)品和10%Pd/C(1.0g)的乙酸乙酯(20ml)溶液進(jìn)行氫化24小時(shí)。反應(yīng)物經(jīng)硅藻土過(guò)濾，濾液蒸發(fā)至干，殘?jiān)?jīng)硅膠板層析(CH2Cl240%甲醇)純化，得標(biāo)題產(chǎn)品(0.254g，33.4%)，mp.202-205℃(分解)。
IR(KBr)3438，3066，2942，1722，1652，1602 cm-1.
NMR (acetone-d6/D2O)δ1.081(s，6H)，1.571(s，3H)，1.847(s，3H)，2.115(s，3H)，2.357(s，3H)，3.707(d，H)，4.08(m，2H)，4.275(m，H)，4.941-5.085(m，4H)，5.231(t，H)，5.430(d，H)，5.544(d，H)，5.970(t，H)，6.376(s，H)，6.961-8.017(m，16H).
MS [M+Na]+，986;[M+K]+，1002;[M+2Na-H]+，1008;[M+Na+K-H]+，1024;[M+2K-H]+，1040HRMS MNa+，986.2955(Calculated＝986.2976)實(shí)例5.2’，7-O-雙(膦酰氧甲基)紫杉醇鈉鹽(a)2’，7-O-雙(甲基硫代甲基)紫杉醇的制備
0℃下，向攪拌的紫杉醇(0.853g，1mmol)和二甲硫醚(1.465g，20mmol)乙腈溶液(20ml)中加入固體過(guò)氧化苯甲酰(1.905g，8mmol)?；旌衔镌?℃下劇烈攪拌3小時(shí)，用TLC(己烷∶乙酸乙酯＝1∶1(V∶V)，Rf紫杉醇＝0.24，Rf產(chǎn)品＝0.60)監(jiān)測(cè)反應(yīng)。待起始物消失后(約3小時(shí))，25℃下，室真空蒸除溶劑至干，終止反應(yīng)，干殘?jiān)?jīng)硅膠柱(EM Science，40-63μm)分離(100ml干硅膠，柱體積φ＝3/4英寸，溶劑系統(tǒng)己烷∶乙酸乙酯＝3∶2，(V/V))，每份體積大約25ml，從餾份15-19中收集標(biāo)題化合物(0.515g，53%產(chǎn)率)。
MS (FAB/matrix NOBA，NaI KI)[M+H]+，m/z 974;[M+Na]+，m/z 996;[M+K]+，m/z 1012
UV (MeOH)λmax＝204nm，E(1%/1cm)＝243.45;λmax＝228 nm，E(1%/1cm)＝313.99IR (KBr)3440，3064，2926，1724，1668，1602，1582，1514，1484，1452，1372，1314，1266，1242，1178，1142，1068，1026，990，916，886，848，800，774，710，646，606，570，540，480 cm-11H-NMR (CDCl3)δ1.17(3H，s)，1.20(3H，s)，1.68(3H，s)，1.74(3H，s)，1.84(H，dd)，2.04(3H，d)，2.09(3H，s)，2.15(3H，s)overlaps with(H，m)，2.37(H，dd)，2.51(3H，s)，2.79(H，ddd)，3.78(H，d)，4.18(H，d)，4.28(H，m)，4.31(H，d)，4.53-4.74(4H，two overlapping AB m)，4.93(H，d)，4.95(H，d)，5.68(H，d)，5.82(H，dd)，6.24(H，dd)，6.54(H，s)，7.05(H，d)，7.28-7.59(10H，overlapping m)，7.57(H，m)，7.76(2H，d)，8.09(2H，d).
(b)2’-7-O-雙(二芐基膦酰氧甲基)紫杉醇的制備
室溫下，將N-碘代琥珀酰亞胺(135mg，0.5mmol)和磷酸二芐酯(167mg，0.5mmol)的干燥THF(8ml)溶液加到2’，7-O-雙(甲基硫代甲基)紫杉醇(198mg，0.2mmol)和5A分子篩(大約200mg)的CH2Cl2溶液(12ml)中。反應(yīng)混合物攪拌1.5小時(shí)，在硅藻土上濾除分子篩，用CH2Cl2洗滌(10ml)，室溫室真空下將溶劑蒸發(fā)至干。殘?jiān)苡谝宜嵋阴?100ml)，在分液漏斗中用1%硫代硫酸鈉(50ml)，0.5mNaHCO3(50ml)，水(2×50mm)洗滌，有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，蒸發(fā)至干，再重新溶于乙酸乙酯(1ml)中，用50ml乙酸乙酯∶己烷(1∶1)使之沉淀，同樣的溶劑系統(tǒng)洗滌兩次(2×500ml)。得218mg精品，收率74%。將此產(chǎn)品的CH2Cl2(3ml)溶液置于硅膠柱(φ＝3/4英寸×L＝1英寸)上進(jìn)行層析純化，用50ml CH2Cl2∶EtOAC＝3∶1洗脫產(chǎn)品，得標(biāo)題化合物(172.7mg)，收率59.3%。
MS (FAB，matrix NOBA/NaI，KI)[M+Na]+，m/z 1456;[M+K]+，m/z 1472UV (MeCN)λmax＝194 nm，E(1%/1cm)＝1078.36;λmax＝228 nm，E(1%/1cm)＝311.95IR (KBr)3430，3066，3032，2958，1744，1726，1664，1602，1582，1532，1488，1456，1372，1270，1244，1158，1108，1068，1016，1000，952，886，800，776，738，698，604，498 cm-1.
1H-NMR (CDCl3)δ1.12(3H，s)，1.14(3H，s)，1.56(H，m)，1.67(3H，s)，1.84(3H，d)，1.90(H，m)，2.17(3H，s)，2.29(3H，s)，2.73(H，m)，3.73(H，d)，4.08(H，d)，4.15(H，m)，4.20(H，d)，4.77(H，m)，4.79(H，d)，4.91-5.04(10H overlapping m)，5.25(H，dd)，5.38(H，dd)，5.54-5.64(2H，overlapping m)，5.99(H，br.dd)，6.25(H，s)，7.11-7.14(2H，m)，7.24-7.64(28H，overlapping m)，7.94(2H，dd)，8.04(2H，dd)，8.30(H，d).
(c)2’，7-O-雙(膦酰氧甲基)紫杉醇鈉鹽的制備
將2’，7-O-雙(二芐基膦酰氧甲基)紫杉醇(112mg，0.078mmol)溶于乙酸乙酯(7ml)中，在室溫，壓力為60PSI(400KPa)下，于10%Pd/c)(50g)上進(jìn)行氫化反應(yīng)2小時(shí)，經(jīng)硅藻土濾除催化劑。用乙酸乙酯(10ml)淋洗硅藻土。濾液用固體NaHCO3(200mg，3當(dāng)量)處理，蒸發(fā)溶劑至干。將干殘?jiān)匦氯苡?ml水∶丙酮(4∶1，V/V)中，用C-18反相柱層析(55-105μC-18，Waters公司，50ml于C-18，φ＝3/4英寸，水∶丙酮＝4∶1(V/V)中)純化。洗脫液用分析HPLC Jones C-18柱(15cm，1ml/min，λ＝230nm)進(jìn)行檢測(cè)，流動(dòng)相為乙腈磷酸鹽緩沖液，pH＝6(50/50，V/V)且?guī)в蠶12離子對(duì)試劑(Regis)，Rt＝4.7min。合并含有標(biāo)題化合物的流出物。20℃，室真空下蒸除丙酮，溶液冷凍干燥，得標(biāo)題化合物(44.2mg)，收率58.8%。
MS (FAB，matrix NOBA/NaI，KI)[M+H]+，m/z 1118;[M+Na]+，m/z 1140UV (MeCN)λmax＝192 nm，E(1%/1cm)＝129.73;λmax＝230 nm，E(1%/1cm)＝26.43IR(KBr)3430，3066，2956，1724，1658，1604，1582，1520，1486，1452，1374，1316，1256，1152，1110，1070，1026，966，914，802，772，710，538 cm-1.
1H-NMR (acetone-d6/D2O)δ0.97(3H，s)，1.02(3H，s)，1.47(H，m)，1.54(3H，s)，1.70(H，m)，1.75(3H，s)，1.85(H，m)，2.11(3H，s)，2.30(3H，s)，2.88(H，m)，3.64(H，d)，4.03(H，m)，4.06(H，d)，4.16(H，d)，4.74(H，m)，4.86(H，m)，5.11(H，br.t)，5.22(H，d)，5.42(H，d)，5.90(H，br.t)，6.21(H，s)，7.06(H，br.t)，7.32-7.69(10H，ovelapping m)，7.80(2H，d)，7.93(2H，d).
實(shí)例67-O-甲基硫代甲基漿果赤霉素Ⅲ(7-MTM漿果赤霉素Ⅲ)
向2’-O-乙氧羰基-7-O-甲基硫代甲基紫杉醇(實(shí)例3(b)化合物，27g，27.4mmol)的100mlTHF和500ml甲醇溶液中加入新粉碎的K2CO3(2.7g，19mmol)，溶液攪拌30分鐘，用IR-120(H+)樹(shù)脂中和，過(guò)濾，濃縮。粗品濾液溶于200ml CH2Cl2中，與四丁基銨硼氫化物(10g)攪拌24小時(shí)。用CH2Cl2稀釋溶液，水洗，飽和NaHCO3和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥并濃縮，殘?jiān)?jīng)硅膠(1∶1＝己烷/乙酸乙酯)層析純化，得9.4g標(biāo)題化合物(53%)，熔點(diǎn)269℃。
FABMS (NOBA)M+H calcd for C33H43SO11647.Found647.
IR(KBr) 3474，1746，1724，1712，1270，1240，1070 cm-11H NMR (CDCl3，300 MHz)δ8.08(d，J＝7.1 Hz，2H)，7.58(t，J＝7.5Hz，1H)，7.45(t，J＝7.8Hz，2H)，6.55(s，1H)，4.94(d，J＝8.1 Hz，1H)，4.83(bq，J＝5.1 Hz，1H)，4.66(ABq，J＝14.7，12.3 Hz，2H)，4.30(m，2H)，4.13(d，J＝8.4 Hz，1H)，3.91(d，J＝6.6 Hz，1H)，2.79(m，1H)，2.27(s，3H)，2.25(m，2H)，2.19(s，3H)，2.16(s，3H)，2.10(s，4H)，1.81(m，1H)，1.72(s，3H)，1.61(m，2H)，1.16(s，3H)，1.03(s，3H).
13C NMR(CDCl3，75.5 Hz)δ202.3，170.8，169.3，167.0，144.2，132.6，132.1，130.1，129.4，128.6，83.9，80.9，78.7，75.7，74.5，73.9，67.9，57.6，47.6，42.7，38.3，26.7，22.6，21.0，20.1，15.2，15.0，10.8.
實(shí)例73’-N-脫苯甲?；?3’-脫苯基-3’-N-(叔丁氧羰基)-3’-(2-呋喃基)-2’-O-乙氧羰基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇三乙醇胺鹽(a)3’-N-脫苯甲酰基-3’-脫苯基-3’-N-(叔丁氧羰基)-3’-(2-呋喃基)-7-O-甲基硫代甲基紫杉醇的制備
向HMDS(0.40ml，1.90mmol)的15ml THF溶液中加入正丁基鋰溶液(0.75ml，2.5M的己烷溶液，1.88mmol)，-55℃下攪拌5分鐘，向此溶液中加入7-MTM漿果赤霉素Ⅲ(實(shí)例6化合物，1.03g，1.59mmol)的10ml THF溶液，攪拌10分鐘后，加入10ml(3R，4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-(2-呋喃基)-3-(三乙基甲硅烷氧基)-2-氮雜環(huán)丁酮(883mg，2.40mmol)溶液。除去冷浴，換成0℃的浴，反應(yīng)混合物再攪拌30分鐘。用EtOAC稀釋，飽和NH4Cl溶液洗滌，MgSO4干燥并濃縮。殘?jiān)?jīng)硅膠層析(2.5∶1己烷/EtOAC)純化，得1.5g偶合產(chǎn)品3’-N-脫苯甲?；?3’-脫苯基-3’-N-(叔丁氧羰基)-3’-(2-呋喃基)-7-O-甲基硫代甲基-2’-O-三乙基甲硅烷基紫杉醇(93%)。
FABMS(NOBA)M+Na calcd for C50H71NSSiO161036.Found1036.
IR(film)3446(s)，1720，1368，1242，1166，1144，1124，1066 cm-11H NMR(CDCl3，300 MHz)δ8.07(d，J＝7.2 Hz，2H)，7.56(m，1H)，7.46(t，J＝7.5 Hz，2H)，7.36(m，1H)，6.56(s，1H)，6.33(m，1H)，6.20(m，2H)，5.67(d，J＝6.9 Hz，1H)，5.29(bs，2H)，4.94(d，J＝7.8 Hz，1H)，4.75(s，1H)，4.65(s，2H)，4.28(m，2H)，4.16(d，J＝8.1 Hz，1H)，3.89(d，J＝6.9 Hz，1H)，2.80(m，1H)，2.46(s，3H)，2.37(m，1H)，2.22(m，1H)，2.16(s，3H)，2.10(s，3H)，2.04(s，3H)，1.84(m，1H)，1.74(s，3H)，1.65(m，1H)，1.33(s，9H)，1.20(s，3H)，1.19(s，3H)，0.81(t，J＝7.8 Hz，9H)，0.47(m，6H).
13C NMR(CDCl3，75.5 Hz)δ202.0，171.2，170.3，169.3，167.1，155.3，152.0，141.9，141.0，133.6，132.9，130.2，129.2，128.7，110.7，107.3，84.0，81.1，80.2，78.7，76.1，75.7，74.7，74.1，72.4，71.1，57.4，52.8，47.1，43.3，35.2，33.0，28.1，26.3，22.9，21.2，21.0，15.0，14.5，10.9，6.5，4.3.
向上述得到的2’-三乙基甲硅烷基醚(330mg，0.32mmol)的7ml THF溶液中加入四丁基銨氟化物(0.35ml，1.0M的THF溶液，0.35mmol)，攪拌10分鐘。溶液用EtOAC稀釋，鹽水洗滌，MgSO4干燥，濃縮。殘?jiān)?jīng)硅膠層析(2∶1己烷/乙酸乙酯)純化，F(xiàn)ABMS(NOBA)M+H calcd for C45H58NO16S900.Found900.
IR(film)3442，1720，1242，1066，1026 cm-11H NMR(CDCl3，300 MHz)δ8.07(d，J＝7.3 Hz，2H)，7.57(t，J＝7.3 Hz，1H)，7.45(t，J＝7.8 Hz，2H)，7.38(s，1H)，6.53(s，1H)，6.34(d，J＝3.2 Hz，1H)，6.29(d，J＝3.2 Hz，1H)，6.17(t，J＝8.1 Hz，1H)，5.65(d，J＝6.9 Hz，1H)，5.29(m，2H)，4.92(d，J＝8.0 Hz，1H)，4.70(m，1H)，4.64(d，J＝4.6 Hz，2H)，4.29(m，2H)，4.14(d，J＝8.3 Hz，1H)，3.86(d，J＝6.8 Hz，1H)，3.37(d，J＝5.8 Hz，1H)，2.77(m，1H)，2.38(s，3H)，2.32(m，2H)，2.16(s，3H)，2.10(s，3H)，2.02(s，3H)，1.77(m，3H)，1.73(s，3H)，1.33(s，9H)，1.17(s，3H)，1.12(s，3H).
13C NMR(CDCl3，75.5 Hz)δ202.0，172.6，170.3，169.2，167.0，155.2，151.3，142.4，140.4，133.7，133.2，130.2，129.1，128.7，110.7，107.4，83.9，81.2，80.5，78.6，76.5，76.1，75.4，74.6，74.0，72.5，71.8，57.4，51.7，47.2，43.2，35.2，32.8，28.1，26.4，22.6，20.9，15.2，14.6，10.9，8.3.
(b)3'-N-脫苯甲?；?3’-脫苯基-3’-N-(叔丁氧羰基)-3’-(2-呋喃基)-2’-O-乙氧羰基-7-O-甲基硫代甲基紫杉醇的制備
0℃下，向步驟(a)中所得產(chǎn)品(864mg，0.96mmol)的50mlCH2Cl2溶液中加入二異丙基乙基胺(2.0ml，11.5mmol)和氯代甲酸乙酯(0.50ml，5.25mmol)，攪拌4小時(shí)。用CH2Cl2稀釋溶液，飽和NaHCO3洗滌，MgSO4干燥并濃縮，殘?jiān)?jīng)硅膠柱層析(1∶1＝己烷/EtOAC)純化，得884mg標(biāo)題化合物的2’-碳酸乙酯(95%)。
FABMS(NOBA)M+H calcd for C48H62NO18S 972.3688.Found972.3654.
IR(film)1752，1720，1370，1244，1196，1176，1064 cm-11H NMR(CDCl3，300 MHz)δ8.09(d，J＝7.8 Hz，2H)，7.57(t，J＝7.5 Hz，1H)，7.46(t，J＝7.8 Hz，2H)，7.38(s，1H)，6.55(s，1H)，6.35(m，1H)，6.27(m，1H)，6.22(t，J＝7.8 Hz，1H)，5.67(d，J＝7.2 Hz，1H)，5.51(d，J＝9.9 Hz，1H)，5.34(d，J＝2.4 Hz，1H)，5.25(d，J＝10.2 Hz，1H)，4.95(d，J＝8.1 Hz，1H)，4.65(s，2H)，4.30(m，2H)，4.22(m，2H)，3.88(d，J＝7.2 Hz，1H)，2.81(m，1H)，2.41(s，3H)，2.36-2.21(m，2H)，2.16(s，3H)，2.11(s，3H)，2.09(s，3H)，1.83(m，1H)，1.74(s，3H)，1.67(s，1H)，1.59(s，1H)，1.34(s，9H)，1.29(t，J＝7.2 Hz，3H)，1.20(s，3H)，1.18(s，3H).
13C NMR(CDCl3，75.5 Hz)δ202.1，169.9，169.1，167.6，167.0，154.0，150.1，142.6，141.0，133.6，132.9，130.2，129.2，128.7，110.7，107.5，83.9，81.1，80.7，78.7，76.0，75.7，75.1，74.7，74.2，71.8，65.1，57.4，49.7，47.1，43.2，35.0，33.0，28.1，26.3，22.6，21.1，20.9，15.1，14.5，14.1，10.9.
(c)3’-N-脫苯甲?；?3’-脫苯基-3’-N-(叔丁氧羰基)-3’-(2-呋喃基)-2’-O-乙氧羰基-7-O-二芐基膦酰氧甲基紫杉醇的制備 向步驟(b)中產(chǎn)品(230mg，0.236mmol)的10ml無(wú)水THF中加入300mg4A分子篩，磷酸二芐酯(270mg，0.98mmol)以及結(jié)晶性NIS(62mg，0.28mmol)。向此溶液中加入三氟甲磺酸銀鹽(45mg，0.17mmol)，溶液攪拌3小時(shí)。經(jīng)硅藻土過(guò)濾，EtOAC稀釋，10%Na2S2O3洗滌，再用飽和NaHCO3和鹽水洗滌，MgSO4干燥并濃縮。殘?jiān)?jīng)硅膠層析(15%乙腈/氯仿)得219mg標(biāo)題化合物的磷酸二芐酯(77%)。
FABMS(NOBA) M+Na calcd for C61H72NPO22Na 1224.Found1224.
IR(film)3422(br)，1750，1722，1370，1244，1160，1036，1016，1000，976，944 cm-11H NMR (CDCl3，300 MHz)δ8.08(d，J＝6.9 Hz，2H)，7.58(t，J＝7.2 Hz，1H)，7.46(t，J＝7.8 Hz，2H)，7.39(s，1H)，7.31(m，10)，6.35(m，2H)，6.28(s，1H)，6.21(t，J＝7.8 Hz，1H)，5.64(d，J＝6.9 Hz，1H)，5.50(d，J＝10.5 Hz，1H)，5.39(d，J＝6.6 Hz，1H)，5.32(d，J＝2.4 Hz，1H)，5.25(d，J＝9.9 Hz，1H)，5.01(dd，J＝8.1，6.3 Hz，5H)，4.86(d，J＝8.4 Hz，1H)，4.29-4.09(m，4H)，3.85(d，J＝6.9 Hz，1H)，2.77(m，1H)，2.40(s，3H)，2.30(m，2H)，2.16(s，3H)，1.99(s，3H)，1.94(m，1H)，1.70(s，3H)，1.67(s，1H)，1.54(s，1H)，1.34(s，9H)，1.28(t，J＝7.2 Hz，3H)，1.20(s，3H)，1.17(s，3H).
13C NMR (CDCl3，75.5 Hz)δ201.8，169.9，169.2，167.7，167.0，155.1，154.0，150.0，142.74，141.1，133.7，132.9，130.2，129.1，128.7，128.5，128.4，128.0，110.7，107.6，93.8，84.1，81.6，80.8，80.7，78.8，76.3，75.1，74.6，71.8，69.3，69.2，65.1，57.0，49.7，46.7，43.2，35.0，28.1，26.4，22.6，21.2，20.8，14.6，14.1，10.5.
(d)3’-N-脫苯甲酰基-3’-脫苯基-3’-N-(叔丁氧羰基)-3’-(2-呋喃基)-2’-O-乙氧羰基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇三乙醇胺鹽的制備 向步驟(c)中產(chǎn)品(311mg，0.259mmol)的25mlEtOAC溶液中加入60mg Pd/C(10%)，溶液在常壓和H2存在下攪拌30分鐘，經(jīng)硅藻土濾除催化劑，濾液真空濃縮。將殘?jiān)苡?ml EtOAC中，加入三乙醇胺(2.3ml，0.1M EtOAC溶液，0.23mmol)。溶液經(jīng)濃縮，經(jīng)C18進(jìn)行層析(40%乙腈/水)，然后再進(jìn)行冷凍干燥，得205mg 磷酸三乙醇胺鹽(67%)。
FABMS(NOBA) M+Na calcd for C47H60HPO22Na 1044.Found1044.
IR(film) 3432(br)，1752，1722，1372，1246，1158，1108，1096，1070，1002 cm-11H NMR (d6acetone/D2O，300 MHz)δ8.09(d，J＝7.2 Hz，2H)，7.62(m，2H)，7.52(t，J＝7.5 Hz，2H)，6.48(d，J＝3.3 Hz，1H)，6.42(m，2H)，6.16(t，J＝8.7 Hz，1H)，5.65(d，J＝6.9 Hz，1H)，5.46(d，J＝3.6 Hz，1H)，5.30(d，J＝3.6 Hz，1H)，5.17(bs，1H)，5.01(bd，J＝9.0 Hz，1H)，4.19(bs，1H)，4.18(m，5H)，3.95(m，4H)，3.87(d，J＝6.9 Hz，1H)，3.68(s，10H)，3.50(bt，J＝4.8 Hz，4H)，2.95(m，1H)，2.44(s，3H)，2.41(m，2H)，2.16(s，3H)，1.99(s，3H)，1.94(m，1H)，1.68(s，3H)，1.34(s，9H)，1.24(t，J＝6.9 Hz，3H)，1.17(s，6H).
實(shí)例8 3’-N-脫苯甲?；?3’-脫苯基-3’-N-(叔丁氧羰基)-3’-(2-噻吩基)-2’-O-乙氧羰基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇三乙醇胺鹽(a)3’-N-脫苯甲酰基-3’-脫苯基-3’-N-(叔丁氧羰基)-3’-(2-噻吩基)-7-O-甲基硫代甲基紫杉醇的制備 -55℃下向HMDS(0.5ml，2.4mmol)的18ml THF溶液中加入正丁基鋰(0.85ml，2.5M的己烷溶液，2.1mmol)。10分鐘后，滴加入7-MTM漿果赤霉素Ⅲ(1.15g，1.78mmol)的18ml THF溶液，在冷浴下攪拌10分鐘。向其中加入(±)順-1-(叔丁氧羰基)-4-(2-噻吩基)-3-(三乙基甲硅烷氧基)-2-氮雜環(huán)丁酮(2.80g，7.3mmol)的18ml THF溶液，在30分鐘內(nèi)，使冷浴的溫度漸升至0℃。用EtOAC稀釋溶液，飽和NH4Cl洗滌，MgSO4干燥并濃縮。殘?jiān)?jīng)硅膠層析(5∶1＝己烷/乙酸乙酯)純化，得1.87g回收的內(nèi)酰胺，(3∶1己烷/乙酸乙酯)純化得1.44g偶合產(chǎn)品3’-N-脫苯甲基-3’-脫苯?；?3’-N-(叔丁氧羰基)-3’-(2-噻吩基)-7-O-甲基硫代甲基-2’-O-三乙基甲硅烷基紫杉醇(78%)。
FABMS (NOBA) M+Na calcd for C51H71NO15S2SiNa 1052.Found1052.
IR(film)3442(br)，1720，1490，1368，1270，1242，1162，1110，1064，1024，984，754 cm-11H NMR (CDCl3，300 MHz)δ8.09(d，J＝7.2 Hz，2H)，7.57(t，J＝7.6 Hz，1H)，7.47(t，J＝7.8 Hz，2H)，7.22(m，1H)，6.95(m，2H)，6.55(s，1H)，6.21(t，J＝9.3 Hz，1H)，5.68(d，J＝6.9 Hz，1H)，5.49(bd，1H)，5.39(bd，J＝9.6 Hz，1H)，4.94(d，J＝7.8 Hz，1H)，4.65(s，2H)，4.57(s，1H)，4.28(m，2H)，4.17(d，J＝8.4 Hz，1H)，3.88(d，J＝6.9 Hz，1H)，2.80(m，1H)，2.46(s，3H)，2.37(m，1H)，2.20(m，1H)，2.17(s，3H)，2.10(s，3H)，2.03(s，3H)，1.84(m，1H)，1.74(s，3H)，1.68(s，1H)，1.62(s，1H)，1.31(s，9H)，1.20(s，6H)，0.84(t，J＝7.8 Hz，9H)，0.50(m，6H).
13C NMR (CDCl3，75.5 Hz)δ201.9，171.1，170.7，170.1，169.3，167.0，155.1，142.8，140.9，133.6，132.9，130.2，129.2，128.7，126.9，124.6，83.9，81.2，80.1，78.8，77.4，76.0，75.7，75.2，74.8，74.1，71.3，57.4，53.8，47.0，43.3，35.3，33.3，28.1，26.3，23.0，21.3，20.9，14.9，14.4，10.9，6.6，4.5.
向上述所得的2’-三乙基甲硅烷基醚(1.41g，1.37mmol)的14ml THF溶液中加入四丁基銨氟化物(1.4ml，1.0M的THF溶液，1.4mmol)。溶液攪拌30分鐘，EtOAC稀釋，鹽水洗滌，Mg-SO4干燥并濃縮。殘?jiān)?jīng)硅膠層析(1∶1己烷/EtOAC)純化，得1.16g標(biāo)題化合物(92%)。
FABMS (NOBA) M+Na calcd for C45H57NO15S2Na 938.Found938.
IR(film)3440(br)，1720，1368，1242，1168，1106，1066，710 cm-11H NMR(CDCl3，300 MHz)δ8.08(d，J＝7.2 Hz，2H)，7.59(m，1H)，7.47(t，J＝7.8 Hz，2H)，7.24(m，1H)，7.07(m，1H)，6.99(m，1H)，6.53(s，1H)，6.18(t，J＝8.1 Hz，1H)，5.66(d，J＝6.9 Hz，1H)，5.49(d，J＝9.6 Hz，1H)，5.32(d，J＝9.6 Hz，1H)，4.92(d，J＝7.8 Hz，1H)，4.63(m，3H)，4.28(m，2H)，4.15(d，J＝8.4 Hz，1H)，3.86(d，J＝6.9 Hz，1H)，3.47(d，J＝5.4 Hz，1H)，2.78(m，1H)，2.36(s，3H)，2.34(，2H)，2.17(s，3H)，2.10(s，3H)，2.00(s，3H)，1.83(m，1H)，1.74(s，3H)，1.72(s，1H)，1.61(s，1H)，1.33(s，9H)，1.21(s，3H)，1.18(s，3H).
13C NMR (CDCl3，75.5 Hz)δ201.9，172.3，170.3，169.2，167.0，154.0，141.5，140.2，133.7，133.3，130.2，129.1，128.7，127.0，125.4，125.4，83.9，81.3，80.4，78.6，76.1，75.4，74.5，74.0，73.4，72.5，57.5，52.8，47.2，43.2，35.3，32.9，28.2，26.4，22.6，20.9，15.1，14.7，10.8.
(b)3’-N-脫苯甲?；?3’-脫苯基-3’-N-(叔丁氧羰基)-3’-(2-噻吩基)-2’-O-乙氧羰基-7-O-甲基硫代甲基紫杉醇的制備
0℃下向步驟(a)中所得產(chǎn)品(621mg，0.677mmol)的35mlCH2Cl2溶液中加入二異丙基乙基胺(1.20ml，6.89mmol)和氯代甲酸乙酯(0.35ml，3.7mmol)，攪拌1小時(shí)。除去冷浴，溶液攪拌2小時(shí)，用CH2Cl2稀釋，飽和NaHCO3洗滌，MgSO4干燥并濃縮。殘?jiān)?jīng)硅膠層析(1∶1＝己烷/EtOAC)純化，得528g標(biāo)題化合物(79%)。
FABMS (NOBA) M+Na calcd for C48H61NO17S2Na 1010.Found1010.
IR(film)3510，3440，1752，1720，1370，1244，1198，1170，1026，988，756 cm-11H NMR(CDCl3，300 MHz)δ8.09(d，J＝7.2 Hz，2H)，7.58(m，1H)，7.48(t，J＝7.8 Hz，2H)，7.26(m，1H)，6.99(，2H)，6.55(s，1H)，6.23(t，J＝9.0 Hz，1H)，5.68(d，J＝2.4 Hz，1H)，4.94(d，J＝7.8 Hz，1H)，4.65(s，2H)，4.33-4.08(m，5H)，3.88(d，J＝6.9 Hz，1H)，2.80(m，1H)，2.40(s，3H)，2.40-2.20(m，2H)，2.16(s，3H)，2.11(s，3H)，2.07(s，3H)，1.83(m，1H)，1.74(s，3H)，1.69(s，1H)，1.60(s，1H)，1.33(s，9H)，1.31(t，J＝7.2 Hz，9H)，1.20(s，3H)，1.19(s，3H).
13C NMR (CDCl3，75.5 Hz)δ202.0，169.7，169.1，167.5，167.1，154.0，140.9，133.6，132.9，130.2，129.2，128.7，127.2，125.4，125.3，83.9，81.2，80.6，78.8，76.9，76.0，75.7，74.7，74.2，72.8，72.0，65.2，57.4，50.9，47.1，43.3，35.1，33.0，28.1，26.4，22.7，21.2，20.9，15.1，14.5，14.1，10.9.
(c)3’-N-脫苯甲?；?3’-脫苯基-3’-N-(叔丁氧羰基)-3’-(2-噻吩基)-2’-O-乙氧羰基-7-O-二芐基膦酰氧甲基紫杉醇的制備
向步驟(b)中產(chǎn)品(516mg，0.522mmol)的15ml無(wú)水THF溶液中加入530mg 4A分子篩，磷酸二芐酯(576mg，2.09mmol)和結(jié)晶性NIS(136mg，0.604mmol)。向此溶液中加入三氟甲磺酸銀鹽(50mg.0.194mmol)，溶液攪拌1小時(shí)，經(jīng)硅藻土過(guò)濾，EtOAC稀釋，10%Na2S2O3，飽和NaHCO3和鹽水洗滌，MgSO4干燥并濃縮。殘?jiān)?jīng)硅膠層析(15%乙腈/CHCl3)純化，得535mg標(biāo)題化合物(84%)。
FABMS (NOBA)M+Na calcd for C61H72NO21PSNa 1240.Found1240.
IR(film)3424(br)，1750，1722，1370，1244，1016，1000，944 cm-11H NMR (CDCl3，300 MHz)δ8.08(d，J＝7.0 Hz，2H)，7.58(m，1H)，7.47(t，J＝7.5 Hz，2H)，7.28(m，11H)，6.99(m，2H)，6.33(s，1H)，6.22(t，J＝7.8 Hz，1H)，5.66(m，2H)，5.39(t，J＝6.6 Hz，1H)，5.34(d，J＝12 Hz，1H)，5.22(d，J＝2.4 Hz，1H)，5.01(dd，J＝8.1，6.0 Hz，5H)，4.86(d，J＝7.8 Hz，1H)，4.29-4.08(m，5H)，3.85(d，J＝6.6 Hz，1H)，2.76(m，1H)，2.39(s，3H)，2.35-2.18(m，2H)，2.16(s，3H)，1.97(s，4H)，1.69(s，4H)，1.33(s，9H)，1.30(t，J＝7.2 Hz，3H)，1.20(s，3H)，1.17(s，3H).
13C NMR (CDCl3，75.5 Hz)δ197.4，165.4，164.9，163.3，162.7，150.6，149.7，136.7，136.0，129.4，128.6，125.9，124.7，124.3，124.2，124.1，123.6，122.9，121.1，121.0，89.4，79.8，77.3，76.5，76.3，74.4，72.0，70.7，70.3，67.7，64.9，64.9，60.9，52.7，46.5，42.3，38.9，30.7，23.8，22.0，18.3，17.0，16.4，10.3，9.8，6.2.
(d)3’-N-脫苯甲?；?3’-脫苯基-3’-N-(叔丁氧羰基)-3’-(2-噻吩基)-2’-O-乙氧羰基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇三乙醇胺鹽的制備 向步驟(c)中產(chǎn)品(512mg，0.42mmol)的30ml EtOAC溶液中加入53mg Pd/C(10%)，溶液在常壓且有H2氣下攪拌3小時(shí)，經(jīng)硅藻土濾除催化劑，真空下濃縮濾液。將殘?jiān)苡?ml EtOAC中，加入三乙醇胺(4.0ml，0.1M的EtOAC溶液，0.4mmol)。濃縮溶液，殘?jiān)?jīng)C18層析(40%乙腈/水)，冷凍干燥，得280mg磷酸三乙醇胺鹽(56%)。HPLC分析顯示該鹽純度為96%。
FABMS (NOBA) M+Na calcd for C47H60NO21PS 1060.Found1060.
IR(KBr) 3422(br)，1750，1720，1372，1246，1162，1096，1068，1000 cm-11H NMR (d6acetone/D2O，300 MHz)δ8.06(d，J＝7.2 Hz，2H)，7.63(t，J＝7.2 Hz，1H)，7.52(t，J＝7.8 Hz，2H)，7.38(d，J＝4.2 Hz，1H)，7.16(d，J＝3.5 Hz，1H)，7.01(dd，J＝5.1，3.6 Hz，1H)，6.37(s，1H)，6.11(t，J＝8.7 Hz，1H)，5.61(d，J＝6.9 Hz，1H)，5.60(s，1H)，5.26(d，J＝4.5 Hz，1H)，5.14(t，J＝6.6 Hz，1H)，5.00(d，J＝8.4 Hz，1H)，4.86(dd，J＝12.0，6.3 Hz，1H)，4.17(m，5H)，4.00(s，7H)，3.92(t，J＝4.8 Hz，6H)，3.84(d，J＝6.9 Hz，1H)，3.48(t，J＝5.4 Hz，6H)，2.94(m，1H)，2.42(s，3H)，2.36(m，1H)，2.27(m，1H)，2.15(s，3H)，1.95(s，4H)，1.66(s，3H)，1.30(s，9H)，1.23(t，J＝7.2 Hz，3H)，1.14(s，6H).
實(shí)例910-脫乙酰基-3’-N-脫苯甲?；?3’-N-(叔丁氧羰基)-10-O-(膦酰氧甲基)紫杉醇(a)10-脫乙?；?10-O-芐氧羰基-7-O-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ的制備 氬氣氛下，向干燥的含有7-O-三乙基甲硅烷基-10-脫乙?；鶟{果赤霉素Ⅲ(2.093g，3.177mmol)的燒瓶中加入干燥THF(30ml)，冷卻至-70℃。向其中滴加1.6M正丁基鋰(2.38ml，3.81mmol)。攪拌15分鐘后，滴加氯代甲酸芐酯(0.91ml，6.35mmol)。攪拌15分鐘后，滴加氯代甲酸芐酯(0.91ml，6.35mmol)。生成的混合物攪拌3小時(shí)，在此期間使之溫度逐漸升至室溫。加入25mlNH4Cl終止反應(yīng)，鹽水洗滌，MgSO4干燥，閃柱層析(硅膠，30-45%EtOAC/己烷)，得2.24g(89%)標(biāo)題化合物，其為白色泡沫狀。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.10(d，J＝8.0，2H);7.63-7.58(m，1H)7.47(t，J＝8.0，2H);7.41-7.26(m，5H);6.29(s，1H);5.61(d，J＝7.0，1H);5.20(q，J＝12.2，2H);4.96(d，J＝9.0，1H);4.87-4.84(m，1H);4.48(dd，J＝6.7，J＝10.4，1H);4.30(d，J＝8.5，1H);4.14(d，J＝8.5，1H);3.84(d，J＝7.0，1H);2.58-2.48(m，1H);2.29(m，4H);2.20(s，3H);2.03(d，J＝5.0，1H);1.92-1.83(m，1H);1.68(s，3H);1.17(s，3H);1.04(s，3H);0.91(t，J＝7.5，9H);0.57(q，J＝7.4，6H).
(b)10-脫乙?；?10-O-芐氧羰基-3’-N-脫苯甲?；?3’-N-(叔丁氧羰基)-2’，7-雙-O-三乙基甲硅烷基紫杉醇的制備
向含有步驟(a)中產(chǎn)品(3.50g，4.42mmol)的燒瓶中加入少量甲苯，真空下濃縮溶液。將此燒瓶置于氬氣氛下，加入100ml干燥THF。將燒瓶冷卻至-70℃，滴加1.0M六甲基二硅氮化鋰(6.19ml，6.19mmol)。攪拌20分鐘，向其中滴加(3R，4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-苯基-3-三乙基甲硅烷氧基-2-氮雜環(huán)丁酮(2.58g，7.07mmol)的10ml干燥THF溶液。反應(yīng)混合物攪拌3.5小時(shí)，在此期間，使之逐漸升溫至室溫。加70ml飽和NH4Cl終止反應(yīng)，鹽水洗滌，MgSO4干燥，閃柱層析(硅膠，5-15%，EtOAC/己烷)，得5.12g(99%)標(biāo)題化合物，其為白色泡沫狀。
1H NMR (300MHz，CDCL3)δ8.11(d，J＝8.0，2H);7.60-7.58(m，1H);7.48(t，J＝8.0，2H);7.24-7.26(m，10H);6.32-6.26(m，2H);5.69(d，J＝7.0，1H);5.47(bd，J＝9.7，1H);5.31-5.10(m，3H);4.94(d，J＝8.5，1H);4.56(s，1H);4.46(dd，J＝6.9，J＝10.6，1H);4.31(d，J＝8.3，1H);4.17(d，J＝8.3，1H);3.81(d，J＝7.0，1H);2.53(s，3H);2.48-2.33(m，1H);2.22-2.17(m，1H);2.09(s，3H);1.95-1.86(m，1H);1.70(s，3H);1.65(s，1H);1.52(s，1H);1.30(s，9H);1.26-1.19(m，6H);0.94-0.87(m.9H);0.80-0.75(m，9H);0.61-0.53(m，6H);0.48-0.30(m，6H).
(c)10-脫乙?；?3’-N-脫苯甲?；?3’-N-(叔丁氧羰基)-7-O-三乙基甲硅烷基紫杉醇的制備
將步驟(b)中產(chǎn)品(5.12g，4.40mmol)溶于100ml EtOAC中，轉(zhuǎn)移至Parr瓶中，并且氬氣覆蓋。向其中加入10%Pd/C(2.4g)，反應(yīng)混合物置于Parr氫化器(55psi)中反應(yīng)8小時(shí)，經(jīng)硅藻土塞過(guò)濾反應(yīng)混合物并濃縮。閃柱層析(硅膠，15-20%乙酸乙酯/己烷)得3.24g(79%)標(biāo)題化合物，其為白色泡沫狀。在Parr設(shè)備中有痕量酸殘余物是由于步驟(b)中產(chǎn)品的2’-三乙基甲硅烷基基團(tuán)水解所致。
1H NMR (300MHz，CDCl3)δ8.10(d，J＝8.0，2H);7.63-7.58(m，1H);7.49(d，J＝8.0，2H);7.39-7.26(m，5H);6.27-6.17(m，1H);5.64(d，J＝7.2);5.42(d，J＝9.4，1H);5.28-5.25(m，1H);5.12(s，1H);4.92(d，J＝8.6，1H);4.62(bs，1H);4.38-4.28(m，3H);4.17(d，J＝8.5，1H);3.85(d，J＝6.7，1H);3.36(d，J＝5.3，1H);2.49-2.40(m，1H);2.36(s，3H);
2.25(bd，J＝8.7，2H);1.99-1.91(m，1H);1.85(s，3H);1.74(s，3H);1.69(s，1H)，1.67(s，1H);1.35(s，9H);1.22(s，3H);1.11(s，3H);0.93(t，J＝7.5 9H);0.61-0.49(m.6H).
(d)10-脫乙?；?2’-O-芐氧羰基-3’-N-脫苯甲酰基-3’-N-(叔丁氧羰基)-7-O-三乙基甲硅烷基紫杉醇的制備 向有步驟(c)產(chǎn)品(3.24g，3.51mmol)的燒瓶中加入30ml干燥CH2Cl2，將燒瓶置于氬氣下，并冷卻至0℃。向其中加入N，N-二異丙基乙基胺(1.22ml，7.02mmol)，再滴加氯代甲酸芐酯(1.00ml，7.02mmol)。15分鐘后，除去冷卻浴，反應(yīng)物于室溫下攪拌7小時(shí)。加30ml飽和NH4Cl終止反應(yīng)，鹽水洗滌，MgSO4干燥，閃柱層析(硅膠，7-20%乙酸乙酯/己烷)，得3.24g89%標(biāo)題化合物，其為白色固體。
1H NMR (300MHz，CDCl3)δ8.10(d，J＝8.0，2H);7.62-7.57(m，1H);7.48(t，J＝8.0，2H);7.40-7.26(m，10H);6.33-6.27(m，1H);5.66(d，J＝7.0，1H);5.49-5.42(m，2H);5.31(s，1H);5.22-5.13(m，3H);4.93(d，J-9.4，1H);4.38(dd，J＝6.5，J＝10.7，1H);4.34-4.28(m，2H);4.18(d J＝8.3，1H);3.90(d，J＝6.7，1H);2.52-2.30(m，4H);2.24-2.20(m，1H);1.97-1.87(m，3H);1.74(s，3H);1.59(s，3H);1.32(s，9H);1.26(s，3H);1.11(s，3H);0.96-0.88(m，9H);0.61-0.48(m，6H).
(e)10-脫乙?；?2’-O-芐氧羰基-3’-N-脫苯甲?；?3’-N-(叔丁氧羰基)-10-O-(二芐基膦酰氧甲基)-7-O-三乙基甲硅烷基紫杉醇的制備 將步驟(d)產(chǎn)品溶于13.5ml(54%)DMSO，8.7ml(35%)乙酸酐和2.75ml(11%)冰醋酸中，將其置于氬氣氛下?；旌衔飻嚢?6小時(shí)，EtOAC稀釋至體積為60ml，用飽和NaHCO3洗滌，直至pH試紙呈中性，然后用鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥并濃縮。門(mén)式柱層析(15-20%EtOAC/己烷)得3.12g白色泡沫狀粗器，其為所需的硫甲基乙縮醛產(chǎn)品(即10-脫乙酰基-2’-O-芐氧羰基-3’-N-脫苯甲?；?3’-N-(叔丁氧羰基)-10-O-(甲基硫代甲基)-7-O-三乙基甲硅烷基紫杉醇，占總重量的70%(NMR檢測(cè))。
將上述粗品混合物(3.12g)溶于1，2-二氯乙烷(61ml)中，覆蓋氬氣層。加入4A分子篩(3.12g)，生成的不均勻混合物劇烈攪拌，經(jīng)套管向其中加入結(jié)晶性的N-碘代琥珀酰亞胺(0.830g，3.69mmol)和磷酸二芐酯(1.027g，3.69mmol)的干燥THF(46ml)溶液。生成的混合物攪拌5小時(shí)，經(jīng)硅藻土塞過(guò)濾，用EtOAC將其體積稀釋至250ml。用冷2%NaHSO3(2×125ml)，冷6%NaHCO3(2×125ml)和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥并濃縮，閃柱層析(硅膠，25-35%EtOAC/己烷)，得1.52g(40%)標(biāo)題化合物，其為白色固體。
1H NMR (CDCl3，300 MHz)δ8.08(d，J＝7.0，2H);7.59-7.55(m，1H);7.46(t，J＝7.2，2H);7.38-7.25(m，20H);6.30(t，J＝8.5，1H);5.65(d，J＝6.8，1H);5.49-5.39(m，4H);5.32(s，1H);5.18-4.19(m，4H);4.93(d，J＝9.2，1H);4.44(dd，J＝6.6，J＝10.2，1H);4.31(d，J＝8.4，1H);4.16(d，J＝8.5，1H);3.80(d，J＝6.9，1H);2.69-2.39，(m，4H)，2.33-2.23(m，3H);2.03(s，3H);1.90(t，J＝12.6，1H);1.68-1.63(m，6H);1.28(s，9H);1.16-1.10(m，6H);0.93(t，J＝7.4，9H);0.55(q，J＝7.8，6H).
13C NMR(CDCl3，75.5 MHz)δ204.1，169.7，167.9，167.1，151.1，140.7，135.7，133.6，130.2，129.2，128.9，128.8，128.7，128.6，128.5，128.4，128.3，128.2，128.0，127.8，126.4，90.4，84.2，81.1，80.4，79.3，78.8，74.9，72.8，72.0，70.5，69.2，69.1，69.0，58.1，46.8，43.2，37.1，35.0.28.1，26.5，22.8，21.0，14.1，10.0，6.9，5.5.
M.S.(FAB) m/z+1345(f)10-脫乙?；?2’-O-芐氧羰基-3’-N-脫苯甲?；?3’-N-(叔丁氧羰基)-10-O-(二芐基膦酰氧甲基紫杉醇的制備
在氬氣氛下，將步驟(e)中產(chǎn)品(50.8mg，0.038mmole)的干燥THF(2.5ml)溶液冷卻至-40℃，向此溶液中滴加四丁基銨氟化物(0.057ml，0.057mmol)的THF(1.0M)溶液。反應(yīng)混合物攪拌1.5小時(shí)，其間使之溫度逐漸升至-20℃。加15ml飽和NH4Cl終止反應(yīng)，然后用30ml EtOAC稀釋。有機(jī)層用2×15ml NaHCO3和鹽水洗滌，MgSO4干燥并濃縮，經(jīng)制備層析(硅膠，50%EtOAC/己烷)，得36mg(77%)標(biāo)題化合物，其為白色粉末。
1H NMR (CDCl3，300 MHz)δ8.10(d，J＝8.5，2H);7.60-7.55(m，1H);7.49-7.44(m，2H);7.36-7.18(m，20H);6.27-6.22(m，1H);5.78(s，1H);5.67(d，J＝7.0，1H);5.44-5.34(m，3H);5.27(d，J＝2.2，1H);5.24-5.05(m，4H);5.01-4.91(m，4H);4.39-4.28(m，2H);4.17(d，J＝8.2，1H);3.87(d，J＝7.0，1H);2.58-2.51(m，1H);2.41(s，3H);2.40-2.18(m，2H)，2.00-1.87(m，5H);1.73-1.69(m，4H);1.30(s，9H);1.22-1.15(m，6H).
M.S.(FAB) m/z+ 1231(g)10-脫乙?；?3’-N-脫苯甲?；?3’-N-(叔丁氧羰基)-10-O-(膦酰氧甲基)紫杉醇三乙醇胺鹽
在一個(gè)500ml的Parr瓶中裝入10-脫乙酰-2’-O-芐氧羰基-3’-N-脫苯甲酰基-3’-N-(叔-丁氧羰基)-10-O-(二芐基膦酰氧甲基)紫杉醇(264.9mg，0.215mmol)和EtOAC(20ml)。用氬氣清洗瓶子，并加入10%Pd/C(318g)。生成的混合物置于Parr儀器上，氬氣壓力為每平方英寸55磅(psi)。反應(yīng)用HPLC(70∶30CH3CN/Q8緩沖液，pH＝6.0，1.00ml/min，Zorbax C-18柱，25.0cm，λ＝230nm)監(jiān)測(cè)直至沒(méi)有明顯的起始物存在(12.5小時(shí))為止?；旌衔锝?jīng)硅藻土塞過(guò)濾，EtOAC洗滌，再用少量CH2Cl2洗滌，濾液濃縮，殘?jiān)苡贑H2Cl2(5ml)中，加入己烷，引起白色沉淀形成。分離得140.3mg游離酸(HPLC檢測(cè)，純度80%)，其為白色固體，其可直接用于下一步反應(yīng)。
向含有上述游離酸(140mg，0.153mmol)的燒瓶中加入CH2Cl2(10ml)，生成的溶液用0.100M三乙醇胺的EtOAC(1.16ml，0.116mmol)溶液進(jìn)行處理，其使溶液變渾濁。加入約2ml己烷，將混合物于-20℃下放置過(guò)夜。生成的沉淀徑4.0-5.5μm燒結(jié)玻璃漏斗過(guò)濾。去除固體，置于真空下4小時(shí)，得69.9mg(42%)標(biāo)題三乙醇胺鹽，其為灰色粉末，HPLC檢測(cè)其純度為95-96%(TR＝2.05min，70∶30CH3CN/Q8緩沖液，pH＝6.0，1.00ml/min，Zorbax C-18，25.0cm，λ＝230nm)。
1H-NMR (d6-acetone/D2O，300 MHz)δ8.03(d，J＝7.4，2H);7.65(t，J＝7.3，1H);7.54(t，J＝7.6，2H);7.42-7.33(m，5H);7.21(t，J＝7.0，1H);6.09(t，J＝9.0，1H);5.81(s，1H);5.59(d，J＝7.0，1H);5.12(bs，2H);4.93(d，J＝8.4，2H);4.56(d，J＝4.9，1H);4.31-4.26(m，1H);4.11(s，2H);3.41-3.37(m，6H);2.42-2.32(m，5H);2.15(bs，1H);1.97(s，3H);1.77-1.64(m，2H);1.58(s，3H);1.13(s，9H);1.15-1.07(m，6H).
13C NMR (d6-acetone，D2O，75.6 MHz)δ171.6，166.9，156.6，141.8，135.1，134.2，131.0，130.7，129.4，129.3，128.4，128.1，88.3，85.4，81.9，79.7，78.6，78.1，76.8，76.0，74.8，71.9，71.2，47.4，44.0，37.1，36.3，28.5，27.0，23.1，22.0，14.7，10.4.
HRMS MNa+，940.3142(Calculated for C44H56NO18PNa＝940.3133)
實(shí)例10 2’-O-膦酰氧甲氧基甲基紫杉醇(a)2’-O-(甲基硫代甲氧基甲基)-7-O三乙基甲硅烷基紫杉醇 室溫下，向7-O-三乙基甲硅烷基紫杉醇(70.0mg，72.2mmol)，雙(甲基硫代甲基)醚(90mg，72.2mmol)，分子篩(70mg)和N-碘代琥珀酰亞胺(160mg，72.2mmol)的THF(2.0ml)溶液中加入三氟甲烷磺酸銀(5.0mg，19.5mmol)，生成的溶液攪拌2小時(shí)，用EtOAC稀釋反應(yīng)混合物，然后經(jīng)過(guò)硅藻土墊板過(guò)濾。濾液用飽和NaHCO3洗滌，然后依次用1∶1(V∶V)的飽和NaHCO3和5%Na2S2O3的混合物及鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，真空濃縮。殘?jiān)?jīng)閃式柱層析(3∶1＝己烷/己酸乙酯)純化，得22.0mg(29%)標(biāo)題化合物，其為白色固體。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.12-7.20(15H，m)，7.04(1H，d，J＝8.9 Hz)，6.41(1H，s)，6.25(1H，m)，5.81(1H，dd，J＝8.9，2.4 Hz)，5.68(1H，d，J＝7.0 Hz)，4.93(1H，d，8.0 Hz)，4.79(2H，m)，4.71(1H，d，2.4 Hz)，4.45(1H，dd，J＝10.5，6.6 Hz)，4.30(1H，d，J＝8.3 Hz)，4.28(1H，d，J＝11.7 Hz)，4.17(1H，d，J＝8.3 Hz)，4.04(1H，d，J＝11.7 Hz)，3.80(1H，d，J＝6.9 Hz)，2.48-1.13(25H，m，incl.singlets at 2.51，2.13，2.05，2.01，1.69，1.19，1.16)，0.98-0.85(9H，m)，0.65-0.50(6H，m).
(b)2’-O-(二芐基膦酰氧甲基)-7-三乙基甲硅烷基紫杉醇的制備
室溫下向步驟(a)中所得產(chǎn)品(15mg，0.0141mmol)和分子篩(15mg)的THF(0.5ml)溶液中加入磷酸二芐酯(20.0mg，0.089mmol)，再加N-碘代琥珀酰亞胺(4.2mg，0.0187mmol)，溶液攪拌1小時(shí)。此時(shí)用TLC分析結(jié)果顯示僅存在起始物質(zhì)。2小時(shí)內(nèi)分3份加入三氟甲烷磺酸銀(5.0mg，0.019mmol)，溶液再攪拌1小時(shí)。然后用EtOAC稀釋混合物，再經(jīng)硅藻土墊板過(guò)濾。濾液用1∶1(V∶V)飽和NaHCO3和5%Na2S2O3溶液處理，有機(jī)層用鹽水洗滌，Na2SO4干燥，真空濃縮。殘余油狀物經(jīng)閃式柱層析(1∶1＝己烷/EtOAC)純化，得5.0mg(33%)標(biāo)題化合物。
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ8.08-7.16(25H，m)，7.18(1H，d，J＝8.8 Hz)，6.41(1H，s)，6.21(1H，m)，5.82(1H，dd，J＝9.0，3.1 Hz)，5.66(1H，d，7.0 Hz)，5.01-4.65(10H，m)，4.56(1H，dd，J＝14.7，5.6 Hz)，4.43(1H，dd，J＝10.4，6.7 Hz)，4.29(1H，d，J＝8.3 Hz)，4.16(1H，d，J＝8.3 Hz)，3.78(1H，d，J＝7.0 Hz)，2.60-1.13(22H，m，incl.singlets at 2.49，2.15，1.93，1.66，1.15，1.13，3H each)，0.95-0.84(9H，m)，0.63-0.45(6H，m).
(c)2'-O-膦酰氧甲氧基甲基紫杉醇的制備
按照實(shí)例9(f)中所述方法，用四丁基銨氟化物處理步驟(b)中產(chǎn)品，以除去7-O-三乙基甲硅烷基保護(hù)基團(tuán)。按前述給出的方法對(duì)所得化合物進(jìn)行催化氫化，得標(biāo)題化合物。
實(shí)例112'-O-膦酰氧甲氧甲基紫杉醇(替代路線)(a)2'-O-三乙基甲硅烷基紫杉醇的制備 0℃下，20分鐘內(nèi)向紫杉醇(20.0g，0.0234mmol)和咪唑(3.59g，0.052mol)的150ml DMF(二甲基甲酰胺)溶液中加入三乙基甲硅烷氯化物(6.0ml，0.053mmol)2ml?；旌衔镉?℃下攪拌1小時(shí)。用EtOAC和飽和NH4Cl溶液的混合物稀釋，分出有機(jī)層，用鹽水洗滌，Na2SO4干燥，真空濃縮，得一黃色油狀物。粗品經(jīng)閃柱層析(己烷/EtOAC＝1∶3然后1∶1)得21.07g(收率98%)標(biāo)題化合物，其為白色固體。
1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ8.15(2H，m)，7.70(2H，m)，7.65-7.30(11H，m)，7.15(1H，d，J＝8.9 Hz)，6.30(1H，s)，6.25(1H，m)，6.70-6.10(2H，m)，4.94(1H，d，J＝7.9 Hz)，4.67(1H，d，2.0 Hz)，4.40(1H，m)，4.29(1H，d，J＝8.4 Hz)，4.18(1H，d，J＝8.4 Hz)，3.81(1H，d，J＝7.1 Hz)，2.65-1.10(22H，including singlets at 2.55，2.20，1.88，1.69，1.22，1.13，3H each).
(b)2'-O-三乙基甲硅烷基-7-O-芐氧羰基紫杉醇的制備
將2'-O-三乙基甲硅烷基紫杉醇(22.3g，24.1mmol)的THF(250ml)溶液冷卻至-50℃，10分鐘內(nèi)，向其中滴加入正丁基鋰(1.6M己烷溶液，12.9ml，8.06mmol)。生成的溶液攪拌20分鐘，溫度保持在-50℃～-35℃之間。然后將其冷至-50℃，5分鐘內(nèi)滴加氯代甲酸芐酯(5.08ml，29.8mmol)。將反應(yīng)物在-40℃下保持30分鐘，然后在30分鐘內(nèi)使之升溫至0℃?；旌衔镉靡宜嵋阴ズ惋柡蚇H4Cl溶液的混合物稀釋，有機(jī)層用鹽水洗滌，Na2SO4干燥，真空濃縮。1H-NMR分析顯示，粗品混合物中有所需的2'-O-三乙基甲硅烷基-)-O-芐氧羰基紫杉醇以及2'-O-三乙基甲硅烷基-7-表羥基紫杉醇(相應(yīng)為3∶1的比例)。此混合物無(wú)需純化可直接用于下一步反應(yīng)，異構(gòu)體隨之分離。用于分析的主產(chǎn)品2'-O-三乙基甲硅烷基-7-O-芐氧羰基紫杉醇經(jīng)閃柱層析純化。
1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ8.12(2H，m)，7.72(1H，m)，7.65-7.27(1H，d，J＝8.8 Hz)，6.41(1H，m)，6.20(1H，m)，5.72-5.65(2H，m)，5.52(1H，m)，5.24(1H，d，J＝12.3 Hz)，5.16(1H，d，J＝12.3 Hz)，4.95(1H，d，J＝8.7 Hz)，4.69(1H，s)，4.35(1H，d，J＝8.3 Hz)，4.25(1H，d，J＝8.3 Hz)，3.94(1H，d，J＝6.8 Hz)，2.70-1.12(22H，including singlets at 2.54，2.14，2.01，1.80，1.20，1.15，3H each)，0.81-0.73(9H，m)，0.55-0.31(6H，m).
(c)7-O-芐氧羰基紫杉醇的制備
將步驟(b)中產(chǎn)品(24.0g，22.6mmol)的乙腈(250ml)溶液冷卻至0℃，然后向其中加入鹽酸(6N，1.0ml，6.0mmol)。10分鐘后，TLC檢測(cè)結(jié)果(己烷/EtOAC＝1∶1)表明反應(yīng)進(jìn)行完全。用飽和NaHCO3稀釋反應(yīng)物，再用乙酸乙酯稀釋，分出有機(jī)層，鹽水洗滌，Na2SO4干燥，真空濃縮。殘余油狀物用閃柱層析純化(己烷∶EtOAC＝1∶3，然后1∶1)得11.4g(兩步合計(jì)48%)標(biāo)題化合物和4.8g(20%)7-表羥基紫杉醇。
1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ8.09(2H，m)，7.71(2H，m)，7.65-7.27(16H，m)，7.10(1H，d，8.9 Hz)，6.39(1H，s)，6.16(1H，m)，5.81(1H，d，J＝8.9，2.4 Hz)，5.65(1H，d，J＝6.9 Hz)，5.49(1H，dd，J＝10.6，7.2 Hz)，5.20(1H，d，J＝11.9 Hz)，5.12(1H，d，J＝11.9)，4.91(1H，d，J＝8.4 Hz)，4.78(1H，m)，4.30(1H，d，J＝8.4 Hz)，4.15(1H，d，J＝8.4 Hz)，3.91(1H，d，J＝6.8 Hz)，3.69(1H，d，J＝4.9 Hz)，2.65-1.10(22H，including singlets at 2.39，2.18，1.81，1.75，1.21，1.15，3H each).
(d)2'-O-(甲基硫代甲氧基甲基)-7-O-芐氧羰基紫杉醇的制備 室溫下，將三氟甲磺酸銀(300mg，1.17mmol)加到7-O-芐氧羰基紫杉醇(5.53g，5.71mmol)，1.1'-二硫甲基二甲基醚(7.8g，57.1mmol)，N-碘代琥珀酰亞胺(6.35g，28.3mmol)和經(jīng)烤箱干燥粉末狀的分子篩(5.0g)的THF(110ml)溶液中。20分鐘后，TLC分析(己烷∶EtOAC＝1∶1)顯示約40%的起始物轉(zhuǎn)化成更進(jìn)一步的產(chǎn)品。再加三氟甲磺酸銀(150mg，0.585mmol)，30分鐘后，TLC分析結(jié)果約65%的起始物進(jìn)行了反應(yīng)?；旌衔镉肊tOAC稀釋(100ml)，經(jīng)硅藻土墊板過(guò)濾，然后將濾液轉(zhuǎn)入含有200ml飽和NaHCO3和50ml5%Na2S2O3的分液漏斗中。分出有機(jī)層，鹽水洗滌，Na2SO4干燥，真空濃縮。殘余油狀物經(jīng)閃式柱層析(己烷∶乙酸乙酯＝4∶1至3∶2梯度洗脫)純化，得3.0g(54%收率)標(biāo)題化合物，其為淺黃色固體。
1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ8.10(2H，m)，7.74(2H，m)，7.66-7.25(18H，m)，7.05(1H，d，J＝8.9 Hz)，6.40(1H，s)，6.26(1H，m)，5.77(1H，dd，J＝8.8，2.5 Hz)，5.71(1H，d，J＝6.9 Hz)，5.51(1H，dd，J＝10.6，7.1 Hz)，5.21(1H，d，J＝11.9 Hz)，5.14(1H，d，J＝11.9 Hz)，4.92(1H，m)，4.79(2H，m)，4.68(1H，d，J＝2.5 Hz)，4.31(1H，d，J＝11.8 Hz)，4.30(1H，d，J＝8.5 Hz)，4.16(1H，d，J＝8.5 Hz)，4.10(1H，d，J＝11.8 Hz)，3.93(1H，d，J＝6.9 Hz)，2.65-1.10(25H including singlets at 2.50，2.15，2.05，1.74，1.72，1.20，1.15，3H each).
(e)2’-O-(二芐基膦酰氧基甲氧基甲基)-7-O-芐氧羰基紫杉醇的制備
室溫下，向2'-O-(甲基硫甲氧基甲基)-7-O-芐氧羰基紫杉醇(1.06g，1.07mmol)和烤箱干燥的粉末狀分子篩(1.0g)的THF(20ml)溶液中加入磷酸二芐酯(1.49g，5.30mmol)，然后立即再加N-碘代琥珀酰亞胺(2.65g，1.18mmol)。2.5小時(shí)后TLC分析結(jié)果顯示反應(yīng)大約有60%完成。再加入N-碘代琥珀酰亞胺(175mg，0.78mmol)，攪拌30分鐘，此時(shí)再用TLC分析，結(jié)果顯示反應(yīng)已進(jìn)行完全。用EtOAC(50ml)稀釋反應(yīng)物，經(jīng)硅藻土墊板過(guò)濾。將濾液傾到含有100ml飽和NaHCO3和20ml5%Na2S2O3溶液的分液漏斗中。分出有機(jī)層，用鹽水洗滌，Na2SO4干燥，真空濃縮。殘余油狀物經(jīng)閃柱層析(己烷/EtOAC＝3∶1至1∶1梯度洗脫)純化，得750mg(62%收率)所需標(biāo)題化合物，其為白色固體。
1H-NMR(360 MHz，CDCl3)δ8.10(2H，m)，7.79(2H，m)，7.65-7.24(26H，m)，7.10(1H，m)，6.41(1H，s)，6.20(1H，m)，5.79(1H，dd，J＝8.8，3.6 Hz)，5.65(1H，d，J＝7.0 Hz)，5.52(1H，m)，5.20(1H，d，J＝11.8 Hz)，5.11(1H，d，J＝11.8 Hz)，5.04-4.85(6H，m)，4.75-4.60(4H，m)，4.30(1H，d，8.4 Hz)，4.15(1H，d，J＝8.4 Hz)，3.92(1H，d，J＝7.0 Hz)2.65-1.10(22H including singlets at 2.48，2.19，1.95，1.80，1.20，1.10，3H each).
(f)2’-O-膦酰氧甲氧基甲基紫杉醇三乙醇胺鹽的制備將2’-O-(二芐基膦酰氧基甲氧基甲基)-7-O-芐氧羰基紫杉醇(500mg，0.382mmol)的EtOAC(40ml)溶液置于Parr瓶中，向其中加入Pd/C(10%)。將此容器附加于Parr儀器上，反應(yīng)物在50psi下進(jìn)行氫化。振蕩6.5小時(shí)后，用燒結(jié)的玻璃漏斗過(guò)濾。向?yàn)V液中加入三乙醇胺(0.1N乙酸乙酯溶液，4.0ml)，生成的溶液真空濃縮。將粗品懸浮于約5.0mlEtOAC中，傾出溶劑，此過(guò)程重復(fù)3遍，生成標(biāo)題三乙醇胺鹽(300mg)，純度87%(HPLC檢驗(yàn))。此化合物經(jīng)C-18柱層析進(jìn)一步純化(水∶乙腈＝3∶1)，得所需標(biāo)題化合物(120mg，34%)，純度95%(HPLC分析)。
1H-NMR (300MHz CD3COCD3，D2O)δ9.05(1H，d，J＝8.7 Hz)，8.15-7.12(21H，m)，6.40(1H，m)，6.05(1H，m)，5.69-5.55(2H，m)，5.01-4.85(6H，m)，4.35(1H，m)，4.14(2H，m)，3.96-3.85(6H，m)，3.25(1H，d，J＝7.1 Hz)，3.30-3.15(6H，m)，2.50-1.04(22H，including singlets at 2.49，2.15，2.05，1.81，1.60，3H each).
實(shí)例123’-N-脫苯甲?；?3’-N-(異丙氧羰基)-7-O-甲基硫甲基紫杉醇 -60℃下，向7-O-甲基硫甲基漿果赤霉素Ⅲ(408mg，0.603mmol)的10ml THF溶液中加入正丁基鋰(0.30ml，2.5M，0.75mmol)，攪拌10分鐘。然后滴加(3R，4S)-3-三乙基甲硅烷氧基-4-苯基-N-異丙氧羰基氮雜環(huán)丁-2-酮(320mg，0.88mmol)的6ml THF溶液，30分鐘內(nèi)，使之升溫至0℃。用飽和NH4Cl終止反應(yīng)，用EtOAC提取，與Bu4NF(1.0ml，1.0M，1.0mmol)一起振蕩，鹽水洗滌，MgSO4干燥并濃縮。殘?jiān)?jīng)硅膠層析(1.5∶1己烷/乙酸乙酯)純化，得545mg產(chǎn)品，其經(jīng)丙酮/己烷重結(jié)晶，得476mg標(biāo)題化合物，其為白色固體(84%)。
IR(KBr) 3460，1720，1266，1244，1230 cm-1;1H-NMR(CDCl3，300 MHz)δ8.07(d，J＝7.2 Hz，2H)，7.59(t，J＝7.2 Hz，1H)，7.47(t，J＝7.5 Hz，2H)，7.32(m，5H)，6.51(s，1H)，6.18(t，J＝8.7 Hz，1H)，5.65(d，J＝6.6 Hz，1H)，5.50(d，J＝9.3 Hz，1H)，5.28(d J＝8.4 Hz，1H)，4.91(d，J＝8.1 Hz，1H)，4.77(m，1H)，4.64(bs，3H)，4.26(m，2H)，4.15(d，J＝8.4 Hz，1H)，3.83(d，J＝6.9 Hz，1H)，3.44(d，J＝5.1 Hz，1H)，2.78(m，1H)，2.34(s，3H)，2.25(d，J＝9.0 Hz，2H)，2.17(s，3H)，2.14(s，1H)，2.10(s，3H)，1.96(s，3H)，1.83(m，1H)，1.73(s，3H)，1.15(m，12H);13C NMR (CDCl3，75.5 Hz)δ201.8，170.4，169.2，167.0，156.3，140.1，138.3，133.7，133.3，130.2，129.1，128.8，128.6，128.1，126.8，83.8，81.4，78.7，76.0，75.5，74.5，74.0，73.6，72.2，68.9，57.5，56.4，47.1，43.2，35.3，32.9，26.6，22.6，22.0，21.9，20.9，15.1，14.6，10.9
FABMS (NOBA) M+Na calcd for C46H57NSO15918.Found918.
Anal.calcd for C46H57NSO15C，61.66;H，6.41;N，1.56.FoundC，61.63;H，6.36;N，1.68.
實(shí)例13.3’-N-脫苯甲?；?3’-N-(正丁氧基羰基)-7-O-甲基硫甲基紫杉醇
-60℃下，向7-O-甲基硫甲基漿果赤霉素Ⅲ(425mG，0.66mmol)的10ml THF溶液中加入正丁基鋰(0.30ml，2.5M，0.75mmol)，攪拌10分鐘，然后滴加入(3R，4S)-3-三乙基甲硅烷氧基-4-苯基-N-(正丁氧羰基)氮雜環(huán)丁-2-酮(350mg，0.93mmol)的6ml THF溶液，30分鐘內(nèi)將其升溫至0℃。加飽和NH4Cl終止反應(yīng)，EtOAC提取，與Bu4NF(1.0ml，1.0M，1.0mmol)一起振蕩，鹽水洗滌，MgSO4干燥并濃縮，殘?jiān)?jīng)硅膠層析(1.5∶1＝己烷/EtOAC)純化，得581mg標(biāo)題產(chǎn)品，其徑甲苯/己烷重結(jié)晶得464mg白色固體(77%);
IR(KBr) 3444，1722，1372，1242，1108，1066，1026，988 cm-1;1H-NMR(CDCl3，300 MHz)δ8.08(d，J＝7.2 Hz，2H)，7.59(t，J＝7.5 Hz，1H)，7.47(t，J＝7.2 Hz，2H)，7.39-7.11(m，5H)，6.51(s，1H)，6.20(t，J＝8.7 Hz，1H)，5.65(d，J＝6.9 Hz，1H)，5.56(d，J＝9.3 Hz，1H)，5.29(d J＝8.4Hz，1H)，4.91(d，J＝8.1 Hz，1H)，4.65(bs，3H)，4.27(m，2H)，4.15(d，J＝8.4 Hz，1H)，3.97(m，2H)，3.84(d，J＝6.9 Hz，1H)，3.45(d，J＝4.8 Hz，1H)，2.78(m，1H)，2.33(s，6H)，2.25(d，J＝8.7 Hz，2H)，2.17(s，3H)，2.10(s，3H)，1.96(s，3H)，1.83(m，1H)，1.74(s，3H)，1.62(s，1H)，1.48(m，2H)，1.19(m，5H)，0.83(t，J＝7.2 Hz，3H);13C NMR(CDCl3，75.5 Hz)δ201.9，172.3，170.5，169.2，167.0，156.3，140.1，138.4，133.8，133.4，130.2，129.2，129.0，128.9，128.7，128.2，126.8，125.3，83.9，81.4，78.8，77.3，76.0，75.6，74.6，74.1，73.7，72.2，65.4，57.5，56.5，47.2，43.2，35.4，26.6，22.6，21.5，21.0，18.9，15.1，14.7，13.7，10.9.
FABMS (NOBA) M+H calcd for C47H60NSO15910.Found910.
Anal.calcd for C47H59NSO15C，62.03;H，6.53;N，1.54.FoundC，62.16;H，6.45;N，1.57.
實(shí)例14 3’-N-脫苯甲酰基-3’-N-(叔丁氧羰基)-7-O-甲基硫甲基紫杉醇(a)3’-N-脫苯甲?；?3’-N-(叔丁氧羰基)-2-O-三乙基甲硅烷基-7-O-甲基硫甲基紫杉醇的制備
將正丁基鋰(0.48ml，2.5M的己烷溶液，1.20mmol)加到HMDS(0.275ml，1.30mmol)的8ml THF溶液中，在-55℃下攪拌5分鐘。向此溶液中加入7-O-甲基硫甲基漿果赤霉素Ⅲ(639mg，0.99mmol)的8ml THF溶液，攪拌10分鐘后，再加8ml(3R，4S)-3-三乙基甲硅烷氧基-4-苯基-N-(叔丁氧羰基)氮雜環(huán)丁-2-酮(575mg，1.52mmol)。除去冷浴，用0℃的浴置換，反應(yīng)液再攪拌30分鐘。EtOAC稀釋，飽和NH4Cl洗滌，MgSO4干燥并濃縮，殘?jiān)?jīng)硅膠層析純化(3∶1己烷/EtOAC)得1.0g標(biāo)題產(chǎn)品(98%);
1H-NMR (CDCl3，300 MHz)δ8.09(d，J＝6.9 Hz，2H)，7.57(m，1H)，7.46(t，J＝7.8 Hz，2H)，7.35(m，2H)，7.26(m，3H)，6.55(s，1H)，6.25(t，J＝9.6 Hz，1H)，5.68(d，J＝6.9 Hz，1H)，5.45(bd，J＝9.3 Hz，1H)，5.27(bd，1H)，4.95(d，J＝7.8 Hz，1H)，4.65(s，2H)，4.53(s，1H)，4.29(m，2H)，4.17(d，J＝8.4 Hz，1H)，3.89(d，J＝6.9 Hz，1H)，2.81(m，1H)，2.51(s，3H)，2.37(dd，J＝15.3，9.6 Hz，1H)，2.17(s，3H)，2.10(s，3H)，2.03(s，3H)，1.85(m，1H)，1.74(s，3H)，1.63(d，J＝14.1 Hz，1H)，1.29(s，9H)，1.21(s，6H)，0.76(t，J＝7.8 Hz，9H)，0.36(m，6H);13C-NMR(CDCl3，75.5 Hz)δ202.0，171.6，170.1，169.3，167.1，155.2，141.0，139.0，133.6，132.8，130.2，129.2，128.7，128.5，127.7，126.4，83.9，81.2，79.9，78.9，76.0，75.7，75.2，74.8，74.2，71.3，57.3，56.7，47.0，43.3，35.3，33.0，28.2，26.4，23.0，21.5，21.0，15.0，14.4，10.9，6.5，4.3;IR(film) 3448(s)，1720，1242，1120，1056 cm-1.
FABMS(NOBA) M+H calcd for C53H74NSSiO151024.4549.Found1024.4583.
(b)3’-N-脫苯甲?；?3’-N-(叔丁氧羰基)-7-O-甲基硫甲基紫杉醇的制備 向3’-N-脫苯甲?；?3’-N-(叔丁氧羰基)-2-O-三乙基甲硅烷基-7-O-甲基硫代甲基紫杉醇(269mg，0.26mmol)的6ml THF溶液中加入四丁基銨氟化物(0.3ml，1.0M的THF溶液，0.3mmol)，攪拌10分鐘。用EtOAC稀釋，鹽水洗滌，MgSO4干燥并濃縮，殘?jiān)?jīng)硅膠柱層析(1∶1＝己烷/EtOAC)純化，得240mg標(biāo)題產(chǎn)品(95%);
IR(film) 3440，1720，1370，1242，1170，1108，1066，756 cm-1;1H-NMR(CDCl3，300 MHz)δ8.06(d，J＝7.2 Hz，2H)，7.57(t，J＝7.2 Hz，1H)，7.46(t，J＝7.8 Hz，2H)，7.35(m，5H)，6.52(s，1H)，6.16(t，J＝8.7 Hz，1H)，5.64(d，J＝6.9Hz.1H)，5.43(bd，J＝9.3 Hz，1H)，5.24(bd，J＝8.1 Hz，1H)，4.91(d，J＝8.1 Hz，1H)，4.63(m，3H)，4.26(m，2H)，4.14(d，J＝8.4 Hz，1H)，3.83(d，J＝6.9 Hz，1H)，3.46(d，J＝5.4 Hz，1H)，2.77(m，1H)，2.34(s，3H)，2.27(d，J＝8.7 Hz，2H)，2.16(s，3H)，2.09(s，3H)，1.97(s，3H)，1.79(m，2H)，1.72(s，3H)，1.32(s，9H)，1.19(s，3H)，1.18(s，3H);13C-NMR (CDCl3，75.5 Hz)δ202.0，172.7，170.3，169.2，167.0，155.3，140.3，138.4，133.7，133.2，130.2，129.1，128.8，128.7，128.0，126.7，83.9，81.3，80.2，78.6，76.5，76.1，75.4，74.6，74.0，73.6，72.3，57.4，56.1，47.1，43.2，35.3，32.8，28.2，26.5，22.6，21.0，15.1，14.6，10.9.
FABMS (NOBA) M+H calcd for C47H60NO15S910.3684.Found910.3706.
實(shí)例15 3’-N-脫苯甲?；?3’-N-(叔丁氧羰基)-2’-O-乙氧羰基-7-O-甲基硫代甲基紫杉醇
向3’-N-脫苯甲?；?3’-N-(叔丁氧羰基)-7-O-甲基硫甲基紫杉醇(428mg，0.47mmol)的10ml CH2Cl2溶液中加入二異丙基乙基胺(0.85ml，4.8mmol)和DMAP(20mg)，并將其冷卻至0℃。然后向其中加入氯代甲酸乙酯(0.25ml，2.6mmol)，攪拌1小時(shí)，EtOAC稀釋，NaHCO3和鹽水洗滌，MgSO4干燥并濃縮，所得殘?jiān)?jīng)硅膠(1∶1＝己烷/EtOAC)純化，得428mg標(biāo)題化合物的碳酸乙酯(92%);
IR(film) 3448(w)，1750，1720，1370，1244，1064 cm-1;1H-NMR(CDCl3，300 MHz)δ8.09(d，J＝7.2 Hz，2H)，7.59(t，J＝7.2 Hz，1H)，7.48(t，J＝7.8 Hz，2H)，7.39(m，2H)，7.31(m，3H)，6.55(s，1H)，6.25(t，J＝9.0 Hz，1H)，5.68(d，J＝7.2 Hz，1H)，5.40(bm，2H)，5.25(s，1H)，4.95(d，J＝8.1 Hz，1H)，4.65(s，2H)，4.29(m，2H)，4.15(m，3H)，3.88(d，J＝6.9 Hz，1H)，2.81(m，1H)，2.43(s，3H)，2.32(m，1H)，2.21(m，1H)，2.16(s，3H)，2.11(s，3H)，2.08(s，3H)，1.84(m，1H)，1.74(s，3H)，1.62(s，1H)，1.32(s，9H)，1.28(t，J＝7.2 Hz，3H)，1.20(s，6H);13C-NMR(CDCl3，75.5Hz)δ202.0，169.7，169.1，168.1，167.0，155.1，154.1，141.0，137.2，133.6，132.9，130.2.，129.2，128.9，128.7，128.2，126.4，83.9，81.2，80.4，78.9，76.5，76.0，75.8，74.8，74.2，72.0，65.1，57.4，47.1，43.3，35.1，33.0，28.1，26.4，22.7，21.3，20.9，15.0，14.5，14.1，10.9..
FABMS(NOBA) M+H calcd for C50H64NSO17982.3895.Found982.3874.
實(shí)例16.3’-N-脫苯甲?；?3’-N-(叔丁氧羰基)-7-O-甲基硫甲基-10-脫乙?；?10-羥甲基羰基(紫杉醇)(a)7-O-三乙基甲硅烷基-10-脫乙?；?10-芐氧基甲基羰基漿果赤霉素Ⅲ
向-60℃下向7-O-三乙基甲硅烷基-10-去乙酰基漿果赤霉素Ⅲ(3.85g，5.85mmol)的40ml THF溶液中加入n-BuLi(2.6ml，2.5M己烷溶液，6.5mmol)，攪拌5分鐘后加芐氧乙酰基氯(1.0ml，6.5mmol)。-60℃下攪拌30分鐘后，升溫至室溫，溶液用EtOAC稀釋，NaHCO3洗滌，MgSO4干燥，濃縮，殘?jiān)?jīng)硅膠層析(2∶1然后1∶1＝己烷/EtOAC)純化，得4.36g產(chǎn)品(92%);
IR(film) 3478(br)，1724，1270，1244，1136，1110，1070 cm-1;1H-NMR(CDCl3，300 MHz)δ8.08(d，J＝7.2 Hz，2H)，7.60-7.23(m，8H)，6.54(s，1H)，5.60(d，J＝6.9 Hz，1H)，4.94(d，J＝7.8 Hz，1H)，4.79(bq，1H)，4.69(s，2H)，4.49(dd，J＝10.5，6.6 Hz，1H)，4.26(m，2H)，4.12(m，1H)，3.85(d，J＝6.9 Hz，1H)，2.52(m，1H)，2.26(s，3H)，2.23(m，2H)，2.18(s，3H)，2.10(m，1H)，1.86(m，1H)，1.66(s，3H)，1.14(s，3H)，0.99(s，3H)，0.91(t，J＝7.5 Hz，9H)，0.56(m，6H).
Anal.Calcd.for C44H58SiO12C，65.49;H，7.24.FoundC，65.33;H，7.27.
FABMS(NOBA) M+H calcd for C44H59SiO12807.Found807.
(b)3’-N-脫苯甲?；?3’-N-(叔丁氧羰基)-10-去乙?；?10-芐氧甲基(紫杉醇)
-60℃下向7-O-三乙基甲硅烷基-10-去乙酰基-10-芐氧甲基羰基漿果赤霉素Ⅲ(1.21g，1.66mmol)的50ml THF溶液中加入n-BuLi(0.7ml，2.5M己烷溶液，1.75mmol)，攪拌5分鐘后，加入(3R，4S)-3-三乙基甲硅烷氧基-4-苯基-N-(叔丁氧羰基)-氮雜環(huán)丁-2-酮(1.2g，3.2mmol)。-60℃下攪拌5分鐘后，再于0℃下攪拌30分鐘，EtOAC稀釋，飽和NH4Cl洗滌，MgSO4干燥并濃縮，殘?jiān)?jīng)硅膠層析(3∶1然后1∶1＝己烷/乙酸乙酯)純化，得980mg產(chǎn)品(53%)。將此產(chǎn)品溶于6ml乙腈中，冷至0℃，與0.60ml 6N HCl攪拌19小時(shí)。用EtOAC稀釋溶液，飽和NaHCO3洗滌，MgSO4干燥，硅膠層析(1∶1＝己烷/乙酸乙酯)，得570mg產(chǎn)品(35%);
IR(film)3448(br)，1716，1496，1368，1316，1270，1246，1176，1108，1070，1026 cm-1;1H-NMR(CDCl3，300 MHz)δ8.08(d，J＝7.5 Hz，2H)，7.59(t，J＝7.8 Hz，1H)，7.47(t，J＝7.8 Hz，2H)，7.36(m，10H)，6.38(s，1H)，6.20(t，J＝9.0 Hz，1H)，5.65(d，J＝6.9 Hz，1H)，5.39(bd，J＝9.3 Hz，1H)，4.93(d，J＝7.8 Hz，1H)，4.69(s，2H)，4.60(bs，1H)，4.39(m，1H)，4.28(m，3H)，4.15(d，J＝8.4 Hz，1H)，3.78(d，J＝6.9 Hz，1H)，3.40(bs，1H)，2.54(m，1H)，2.43(m，1H)，2.36(s，3H)，2.28(m，2H)，1.84(s，4H)，1.72(m，1H)，1.67(s，3H)，1.31(s，9H)，1.23(m，1H)，1.21(s，3H)，1.10(s，3H).
Anal.Calcd.for C52H61NO16C，65.33;H，6.43;N，1.46.FoundC，64.97;H，6.44;N，1.43.
FABMS (NOBA) M+Na calcd for C52H61NO16Na 978.Found978.
(c)3’-N-脫苯甲?；?3’-N-(叔丁氧羰基)-2-O-芐氧羰基-7-O-甲基硫代甲基-10-去乙酰基-10-芐氧甲基羰基(紫杉醇)的制備
0℃下，向3’-N-脫苯甲?；?3’-N-(叔丁氧羰基)-10-去乙?；?10-芐氧甲基羰基(紫杉醇)(570mg，0.59mmol)的10ml CH2Cl2溶液中加入二異丙基乙基胺(0.15ml，0.86mmol)和Cb2Cl(0.10ml，0.70mmol)。溶液攪拌1小時(shí)，并同時(shí)慢慢升溫至室溫。溶液用NaHCO3洗滌，MgSO4干燥并濃縮，將殘?jiān)苡?0ml乙腈中，0℃下與過(guò)氧苯甲酰(780mg，3.22mmol)及二甲硫醚(0.50ml，6.8mmol)一起攪拌，同時(shí)在75分鐘內(nèi)慢慢升溫至室溫。溶液用EtOAC稀釋，飽和NaHCO3洗滌，MgSO4干燥，硅膠層析(2∶1＝己烷/EtOAC)，得412mg標(biāo)題產(chǎn)品(65%);
IR(film) 3438，1754，1722，1368，1272，1244，1176，1110，1066，1028 cm-1;1H-NMR(CDCl3，300 MHz)δ8.11(d，J＝7.2 Hz，2H)，7.61(t，J＝7.2 Hz，1H)，7.49(t，J＝7.8 Hz，2H)，7.35(m，15H)，6.67(s，1H)，6.26(t，J＝8.7 Hz，1H)，5.69(d，J＝6.6 Hz，1H)，5.41(bm，2H)，5.29(s，1H)，5.14(ABq，J＝12，5.7 Hz，2H)，4.98(d，J＝8 Hz，1H)，4.72(m，4H)，4.32(m，3H)，4.19(m，2H)，3.90(d，J＝6.0 Hz，1H)，2.85(m，1H)，，2.45(m，1H)，2.44(s，3H)，2.34(m，1H)，2.24(m，1H)，2.15(s，3H)，2.12(s，3H)，1.87(m，1H)，1.77(s，3H)，1.33(s，9H)，1.19(s，6H);13C NMR (CDCl3，75.5 MHz)δ201.6，169.7，168.7，168.0，167.0，155.1，154.1，141.6，137.1，134.4，133.7，132.5，130.2，129.2，128.9，128.8，128.7，128.5，128.4，128.2，128.0，128.0，126.4，83.9，81.2，80.4，78.8，77.2，76.2，75.8，74.7，74.3，73.4，72.0，70.6，67.1，57.4，54.1，47.1，43.2，35.2，32.9，28.1，26.4，22.7，21.3，15.2，14.6，10.9.
FABMS (NOBA) M+Na calcd for C62H71NO18SNa 1172.Found1172.
(d)3’-N-脫苯甲?；?3’-N-(叔丁氧羰基)-7-O-甲基硫甲基-10-去乙?；?10-羥甲羰基(紫杉醇)的制備
向3’-N-脫苯甲?；?3’-N-(叔丁氧羰基)-2-O-芐氧甲羰基-7-O-甲基硫甲基-10-脫乙酰基-10-芐氧羰基(紫杉醇)(377mg，0.35mmol)的30ml乙醇溶液中加入總量為450mg 10%Pd/C催化劑，在氫大氣下攪拌120小時(shí)。經(jīng)硅藻土濾除催化劑，濃縮溶液。殘?jiān)?jīng)硅膠層析(20%CH3CN/79%CH2Cl2/1%MeOH)純化，得190mg標(biāo)題化合物(65%);
IR(film) 3444(br)，1724，1368，1246，1174，1096，1070，1026，988 cm-1;1H NMR (CDCl3，300 MHz)δ8.07(d，J＝7.2 Hz，2H)，7.59(t，J＝7.2 Hz，1H)，7.47(t，J＝7.8 Hz，2H)，7.35(m，5H)，6.65(s，1H)，6.17(t，J＝8.7 Hz，1H)，5.65(d，J＝6.6 Hz，1H)，5.39(bd，J＝9.6 Hz，1H)，5.26(bd，1H)，4.93(d，J＝8.4 Hz，1H)，4.67(m，3H)，4.28(m，5H)，3.83(d，J＝6.0 Hz，1H)，3.44(d，J＝5.1 Hz，1H)，2.77(m，1H)，，2.50(m，1H)，2.36(s，3H)，2.29(d，J＝8.4 Hz，2H)，2.13(bs，3H)，2.01(s，3H)，1.82(m，2H)，1.74(s，3H)，1.33(s，9H)，1.18(s，3H)，1.16(s，3H);13C NMR (CDCl3，75.5 MHz)δ201.5，171.7，170.3，167.0，155.4，141.3，133.7，132.7，130.2，129.0，128.8，128.7，128.1，126.8，83.8，81.3，80.2，78.6，75.0，74.4，74.0，73.6，72.3，60.6，57.4，56.2，47.2，43.2，35.3，32.6，28.2，26.5，22.6，21.0，15.5，14.7，10.8.
FABMS (NOBA) M+Na calcd for C47H59NO16SNa 948.Found948.
實(shí)例17.3’-N-脫苯甲酰基-3’-N-(叔丁氧羰基)-7-O-甲基硫甲基-3’-脫苯基-3’-異丁烯基紫杉醇
-60℃下向7-O-甲基硫甲基漿果赤霉素Ⅲ(1.5g，2.3mmol)的30ml THF中加入n-BuLi(1.0ml，2.5M的己烷溶液，2.5mmol)，攪拌10分鐘。然后向其中滴加(±)-順-3-三乙基甲硅烷氧基-4-異丁烯基-N-叔丁氧羰基氮雜環(huán)丁-2-酮(3.3g，9.3mmol)的10ml THF溶液。溶液于0℃下攪拌30分鐘后加飽和NH4Cl終止反應(yīng)，乙酸乙酯提取，溶液經(jīng)MgSO4干燥，濃縮，殘?jiān)?jīng)硅膠層析(3∶1＝己烷/EtOAC)純化，將所得產(chǎn)品溶于100ml THF中，與Bu4NF(2.3ml，1.0M的THF溶液，2.3mmol)振蕩，乙酸乙酯稀釋，鹽水洗滌，溶液經(jīng)MgSO4干燥，濃縮，殘?jiān)?jīng)硅膠層析(1.5∶1己烷/EtOAC)純化，得1.6g標(biāo)題化合物(78%);
IR(film) 3452(br)，1724，1370，1242，1096，1066 cm-1;1H-NMR (CDCl3，300 MHz)δ8.07(d，J＝7.2 Hz，2H)，7.59(t，J＝7.5 Hz，1H)，7.45(t，J＝7.8 Hz，2H)，6.54(s，1H)，6.11(t，J＝9.3 Hz，1H)，5.66(d，J＝6.0 Hz，1H)，5.29(d，J＝6.0 Hz，1H)，4.94(d，J＝8.1 Hz，1H)，4.75(m，2H)，4.64(ABq，J＝12.0，2.7 Hz，2H)，4.29(m，2H)，4.20(m，2H)，3.86(d，J＝6.0 Hz，1H)，3.37(bd，1H)，2.79(m，1H)，2.35(s，6H)，2.16(s，3H)，2.10(s，3H)，2.04(s，3H)，1.82(m，1H)，1.74(s，9H)，1.34(s，9H)，1.23(s，3H)，1.20(s，3H);13C NMR (CDCl3，75.5 Hz)δ202，170.2，169.2，166.9，155.4，140.6，138.0，133.7，133.1，130.1，129.2，128.6，120.6，83.8，81.2，79.9，78.7，77.2，76.1，75.5，74.6，74.0，73.7，72.2，57.4，51.5，47.1，43.2，35.4，32.9，28.2，26.4，25.8，22.4，21.0，18.6，15.1，14.8，10.9.
FABMS (NOBA) M+H calcd for C45H62NSO15888.Found888.
實(shí)例18.7-O-甲基硫甲基-3’-脫苯基-3’-異丁烯基紫杉醇按照實(shí)例17所述方法，從7-O-甲基硫甲基漿果赤霉素Ⅲ和(±)-順-3-三乙基甲硅烷基氧基-4-異丁烯基-N-苯甲?；s環(huán)丁-2-酮制備標(biāo)題化合物。
實(shí)例19.3’-脫苯基-3’-(2-呋喃基)-2’-O-乙氧基羰基-7-O-甲基硫甲基紫杉醇按照實(shí)例7(a)和7(b)所述方法從(3R，4R)-1-苯甲?；?4-(2-呋喃基)-3-三乙基甲硅烷基氧基-2-氮雜環(huán)丁酮和7-O-甲基硫甲基漿果赤霉素Ⅲ制備標(biāo)題化合物。
實(shí)例20.2’-O-正丙基羰基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇(a)2’-O-正丙基羰基紫杉醇的制備
將紫杉醇(15.0g，17.5mmol)和二異丙基乙基胺(18.3ml，105mmol)的CH2Cl2(175ml)溶液冷卻至0℃，2分鐘內(nèi)滴加丁酰氯(5.49ml，52.4mmol)。將混合物升溫至室溫，再攪拌16小時(shí)，使之在EtOAC/飽和NH4Cl之間進(jìn)行分配，有機(jī)層用飽和NaHCO3和鹽水洗滌，Na2SO4干燥，真空濃縮。殘?jiān)?jīng)閃柱層析(己烷/EtOAC)純化，得標(biāo)題酯化合物(15.9g，98%收率)，其為白色固體。
1H-NMR (CDCl3，300MHz)δ8.13-8.05(2H，m)，7.75-7.65(2H，m)，7.62-7.30(11H，m)，6.88(1H，d，J＝9.0 Hz)，6.26(1H，s)，6.23(1H，dd，J＝8.4 Hz)，5.92(1H，dd，J＝9.3，6.0 Hz)，5.65(1H，d，J＝7.1 Hz)，5.48(1H，d，J＝3.2 Hz)，4.94(1H，d，J＝7.9 Hz)，4.21(1H，dd，J＝10.4，6.5 Hz)，4.28(1H，d，J＝8.4 Hz)，4.17(1H，d，J＝8.4 Hz)，3.78(1H，d，J＝7.0 Hz)，2.64-1.02(26H，m，including singlets at 2.43，2.19，1.91，1.65，1.65，1.20，1.10，3H each)，0.87(3H，dd，J＝8.2 Hz).
(b)2’-O-正丙基羰基-7-O-甲基硫甲基紫杉醇的制備 將2’-O-正丙基羰基紫杉醇(14.4g，15.6mmol)和二甲硫醚(9.23ml，124.8mmol)的乙腈(312ml)溶液冷卻至-40℃，然后加入過(guò)氧苯甲酰(15.1g，62.3mmol)，反應(yīng)混合物在1小時(shí)內(nèi)升溫至室溫。用TLC(己烷/EtOAC，1∶1)檢測(cè)，顯示反應(yīng)完全。然后用EtOAC稀釋混合物，有機(jī)層用飽和NaHCO3及鹽水洗滌，然后經(jīng)MgSO4干燥，真空濃縮。殘?jiān)徒?jīng)閃式柱層析(己烷/EtOAC)純化，得標(biāo)題化合物(14.4g，93%)，其為白色固體;
1H-NMR(CDCl3，300 MHz)δ8.21-8.19(2H，m)，7.72-7.70(2H，m)，7.62-7.26(11H，m)，6.92(3H，s)，6.20(1H，dd，J＝8.4 Hz)，5.92(1H，dd，J＝9.0，3.1 Hz)，5.66(1H，d，J＝6.9 Hz)，5.51(1H，d，J＝3.2 Hz)，4.92(1H，d，J＝8.2 Hz)，4.68-4.59(2H，m)，4.32-4.26(2H，m)，4.15(1H，d，J＝8.3 Hz)，3.86(1H，d，J＝6.8 Hz)，2.77(1H，m)，2.50-1.05(25H，m)，0.87(3H，dd，J＝7.3 Hz).
(c)2’-O-正丙基羰基-7-O-(二芐基膦酰氧甲基)紫杉醇的制備 室溫下，將N-碘代琥珀酰亞胺(4.9g，21.8mmol)一次加到2’-O-正丙基羰基-7-O-甲基硫甲基紫杉醇(10.7g，11.0mmol)，磷酸二芐酯(15.3g，55.0mmol)和5g烤箱干燥的3A分子篩的THF(200ml)溶液中，混合物攪拌1小時(shí)，用TLC(己烷/乙酸乙酯＝1∶1)檢測(cè)，結(jié)果顯示反應(yīng)進(jìn)行完全。用EtOAC將反應(yīng)液稀釋至2倍原體積，經(jīng)硅藻土床過(guò)濾，將濾液傾入飽和NaHCO3中(含有1%Na2S2O3(重量比))。有機(jī)層用飽和NaHCO3洗滌4次，然后用鹽水洗滌。水層再用EtOAC反提，合并有機(jī)層，Na2SO4干燥，真空濃縮。殘?jiān)徒?jīng)閃式層析(己烷/EtOAC)純化，得標(biāo)題化合物的磷酸二芐酯(9.9g，76%收率)，其為白色固體;
1H-NMR (CDCl3，300 MHz)δ8.10-8.08(2H，m)，7.74-7.71(2H，m)，7.61-7.25(21H，m)，6.94(1H，d，J＝9.0 Hz)，6.31(1H，s)，6.20(1H，dd，J＝8.7 Hz)，5.91(1H，dd，J＝9.0，3.1 Hz)，5.64(1H，d，J＝6.9 Hz)，5.49(1H，d，J＝3.0 Hz)，5.39(1H，dd，J＝6.6 Hz)，5.05-4.98(5H，m)，4.86(1H，d，J＝8.4 Hz)，4.26-4.12(3H，m)，3.84(1H，d，J＝6.8 Hz)，2.82-2.71(1H，m)，2.52-1.05(26 H，m，including singlets at 2.43，2.18，1.97，1.69，1.22，1.20，3H each)0.90-0.85(3H，dd，J＝7.3 Hz).
(d)2’-O-正丙基羰基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇的制備 向用N2氣清洗過(guò)的Parr氫化容器中加和2.5g 10%Pd/C，然后再加純凈的EtOAC(150ml)和2’-O-正丙基羰基-7-O-(二芐基膦酰氧甲基)紫杉醇(4.9g，4.14mmol)的EtOAC(40ml)溶液。將反應(yīng)容器固定于Parr氫化器上，抽真空，然后加50psi的氫氣，此氫化混合物振蕩5小時(shí)后用TLC(己烷/EtOAC)檢測(cè)起始物質(zhì)的消耗情況。將反應(yīng)混合物置于真空下，再用N2氣清洗，用燒結(jié)的玻璃漏斗過(guò)濾，濾液真空下濃縮，得標(biāo)題化合物(3.7g，91%收率)，其經(jīng)1H-NMR分析為純品。
(e)，2’-O-正丙基羰基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇三乙醇胺鹽的制備向2’-O-正丙基羰基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇(1.18，1.09mmol)的CH2Cl2(59ml)溶液中加入0.1M三乙醇胺(10.9ml，1.09ml)的EtOAC溶液。生成的混合物在室溫下攪拌5分鐘。減壓下濃縮反應(yīng)物，生成的白色固體先溶于最小量的CH2Cl2EtOAC混合物中，然后向其中加入己烷，得所需胺鹽的沉淀，其為白色固體。傾出上清液，得白色固體胺鹽，HPLC分析顯示其純度＞95%;
1H-NMR (Acetone-d6，D2O，300MHz)δ8.09-8.07(2H，m)，7.86-7.84(2H)，7.69-7.24(11H，m)，7.24(1H，dd，J＝7.5 Hz)，6.36(1H，s)，6.05(1H，dd，J＝8.4 Hz)，5.85(1H，d，J＝6.7 Hz)，5.61(1H，d，J＝7.0 Hz)，5.49(1H，d，J＝6.9 Hz)，5.15-5.13(1H，m)，4.98(1H，d，J＝8.2 Hz)，4.87(1H，dd，J＝12.1 Hz，6.4 Hz)，4.12(bs，2H)，3.89-3.80(7H，m)，3.36-3.30(6H，m)，2.95-2.93(1H，m)，2.42-1.50(25H，m，including singlets at 2.42，2.22，1.93，1.66，3H each)，1.13(bs，6H)，0.86-0.81(2H，dd，J＝7.4 Hz).
實(shí)例21.2’-O-甲基羰基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇。
(a)2’-O-乙酸基紫杉醇的制備 將紫杉醇(8.0g，9.37mmol)和二異丙基乙基胺(4.8g，28.1mmol)的CH2CL2(140ml)溶液冷卻至0℃，2分鐘內(nèi)向其中滴入乙酰氯(1.0ml，14.1mmol)。將混合物升溫至室溫，攪拌10分鐘。然后使之在EtoAC和飽和NH4CL之間分配，有機(jī)層用飽和NaHCO3及鹽水洗滌，Na2SO4干燥，真空濃縮，殘?jiān)?jīng)閃式層析，(己烷/乙酸乙酯)純化，得2’-O-乙?；仙即?7.7g，92%)，其為白色固體;
1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ8.10-8.08(2H，m)，7.92-7.90(1H，m)，7.89-7.70(2H，m)，7.60-7.29(11H，m)，6.94(1H，d，J＝9.2 Hz)，6.26(1H，s)，6.23(1H，dd，J＝9.5 Hz)，5.93(1H，dd，J＝9.2，3.1 Hz)，5.65(1H，d，J＝7.0 Hz)，5.48(1H，d，J＝3.2 Hz)，4.94(1H，d，J＝7.8 Hz)，4.42(1H，dd，J＝10.8 Hz，6.6 Hz)，4.28(1H，d，J＝8.4 Hz)，4.16(1H，d，J＝8.4 Hz)，3.78(1H，d，J＝6.9 Hz)，2.60-1.02(25H，m，including singlets at 2.42，2.19，2.12，1.90，1.65，1.25，1.11，3H each).
(b)2’-O?；?7-O-甲基硫甲基紫杉醇的制備 將2’-O-乙酰基紫杉醇(7.7g，8.60mmol)和二甲硫醚(5.1ml，68.8mmol)的乙腈(200ml)溶液冷卻至-40℃，向其中加入過(guò)氧苯甲酰(8.3g，34.4mmol)，然后在1小時(shí)之內(nèi)將反應(yīng)混合物的溫度升至室溫。用TLC(己烷/EtoAc稀釋反應(yīng)物，生成的有機(jī)層用飽和NaHCO3洗滌3次后再用鹽水洗滌。有機(jī)相經(jīng)Na2SO4干燥，真空濃縮。殘?jiān)蜖钗锝?jīng)閃柱層析(己烷/EtoAc)純化，得標(biāo)題中物的甲基硫甲基醚化物(7.39g，90%收率)，其為白色固體;
1H-NMR (CDCl3，300 MHz)δ8.10-8.08(2H，m)，7.77-7.73(2H，m)，7.65-7.26(11H，m)，6.53(3H，2)，6.20(1H，dd，J＝8.3 Hz)，5.92(1H，dd，J＝12.2，3.1 Hz)，5.67(1H，d，J＝7.0 Hz)，5.51(1H，d，J＝3.2 Hz)，4.94(1H，d，J＝8.2 Hz)，4.69-4.60(3H，m)，4.33-4.28(2H，m)，4.27(1H，d，J＝8.4 Hz)，3.86(1H，d，J＝6.9 Hz)，2.84-2.74(1H，m)，2.50-1.1(28H，m，including singlets at 2.41，2.15，2.13，2.11，2.06，1.73，1.18，1.15，3H each).
(C)2’-O-乙?；?7-O(二芐基膦酰氧甲基)紫杉醇的制備
室溫下，將N-碘代琥珀酰亞胺(1.75g，7.85mmol)一次加到2’-O-乙酰基-7-O-甲基硫甲基紫杉醇(5.0g，5.23mmol)，磷酸二芐酯(7.3g，26.1mmol)和5g烤箱干燥的3A分子篩的THF(104ml)溶液中，混合物攪拌1.5小時(shí)。TLC分析(己烷/EtoAc，1∶1)結(jié)果顯示反應(yīng)已進(jìn)行完全。用EtoAc稀釋混合物體積至2倍，經(jīng)硅藻土床過(guò)濾，將濾液傾入含有1%Na2S2O3(重量比)的飽和NaHCO3溶液中。有機(jī)層用飽和NaHCO3溶液洗滌4次，再用鹽水洗滌。水層用EtoAc反提取，合并有機(jī)層，Na2SO4干燥，真空濃縮，殘?jiān)蜖钗锝?jīng)閃柱層析(己烷/EtoAc)純化，得標(biāo)題化合物的磷酸二芐酯(4.9g，80%收率)其為白色固體。
(b)2’-O-乙?；?7-O-膦酰氧甲基紫杉醇的制備
向一個(gè)用N2氣清洗過(guò)的Parr氫化容器中加入700mg10%pd/c，然后再加純凈乙酸乙酯(130ml)和2’-O-乙?；?7-O-(二芐基膦酰氧甲基)紫杉醇(1.0g，0.84mmol)的乙酸乙酯(40ml)溶液。將反應(yīng)容器固定于Parr氫化器上，置于真空下，然后加50psi的氫氣。反應(yīng)混合物振蕩6小時(shí)后，用TLC分析(己烷/乙酸乙酯)測(cè)定起始物的消耗情況。然后將反應(yīng)液置于真空下，再次用N2氣清洗，此非均勻混合物用燒結(jié)的玻璃漏斗過(guò)濾，濃縮濾液，得白色固體(848mg)，1H-NMR分析顯示其為所需標(biāo)題化合物(50%)及2’-O-乙酰基紫杉醇的混合物。
(e)2’-O-乙?；?7-O-膦酰氧甲基紫杉醇三乙醇胺鹽的制備向2’-O-乙?；?7-O-膦酰氧甲基紫杉醇(424mg，0.42mmol)和前述的副產(chǎn)品2’-O-乙酰基紫杉醇的CH2Cl2(15ml)溶液中加入0.1M三乙醇胺(3.7ml，3.8mmol)的EtoAc溶液，混合物于室溫下攪拌10分鐘，真空濃縮，生成的白色固體經(jīng)C18柱層析(水/乙腈＝2.3∶1)純化，得所需胺鹽化物(310mg，72%)，HPLC觀測(cè)結(jié)果其純度＞96%;
1H-NMR (Acetone-d6，D2O，300 MHz)δ8.08-8.05(2H，m)，7.86-7.83(2H，m)，7.69-7.24(11H，m)，7.23(1H，dd，J＝7.4 Hz)，6.35(1H，s)，6.02(1H，dd，J＝8.3 Hz)，5.79(1H，d，J＝6.9 Hz)，5.59(1H，d，J＝7.1 Hz)，5.45(1H，d，J＝6.9 Hz)，5.12(1H，dd，J＝6.4 Hz)，4.95(1H，d，J＝8.4 Hz)，4.86(1H，dd，J＝11.5，6.5 Hz)，4.24-4.18(1H，m)，4.12(2H，bs)，3.92-3.89(6H，m)，3.80-3.77(1H，m)，3.46-3.43(6H，m)，3.00-2.89(1H，m)，2.39-1.65(21H including singlets at 2.39，2.14，2.12，1.92，1.65，1.11，3H each)1.11(6H，bs).
實(shí)例22，2’-O-甲氧羰基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇(a)2’-O-甲氧羰基紫杉醇的制備 2分鐘內(nèi)向冷卻至0℃的紫杉醇(8.9g，9.60mmol)和二異丙基胺(5.0ml，28.8mmol)的CH2CL2(96ml)溶液中滴入碳酸氯代甲酯(1.11ml，14.4mmol)。然后將其升溫至室溫并攪拌20小時(shí)。使混合物在EtoAc和飽和NH4Cl之間進(jìn)行分配，有機(jī)相用飽和NaHCO3洗滌，再用鹽水洗滌，Na2SO4干燥，真空濃縮，殘?jiān)蜖钗镉瞄W柱層析(己烷/EtOAc)純化，得標(biāo)題化合物(7.8g，91.3%)，其為無(wú)色固體;
1H-NMR (CDCl3，300MHz)δ8.12-8.09(2H，m)，7.72-7.70(2H，m)，7.62-7.30(11H，m)，6.96(1H，d，J＝9.3 Hz)，629-6.23(3H，m)，5.95(1H，dd，J＝9.3，2.5 Hz)，5.66(1H，d，J＝7.1 Hz)，5.38(1H，d，J＝2.6 Hz)，4.94(1H，d，J＝7.8 Hz)，4.41(1H，dd，J＝10.8，6.6 Hz)，4.28(1H，d，J＝8.4 Hz)，4.17(1H，d，J＝8.4 Hz)，3.79-3.78(3H，m)，2.60-1.04(22H，m，including singlets at 2.43，2.19，1.90，1.65，1.22，1.10，3H each).
(b)2’-O-甲氧羰基-7-O-甲基硫甲基紫杉醇的制備
向冷卻至-40℃的2’-O-甲氧羰基紫杉醇(7.4g，8.10mmol)和二甲硫醚(4.8ml，64.8mmol)的乙腈(162ml)溶液中加入過(guò)氧苯甲酰(7.48g，32.4mmol)，反應(yīng)混合物1小時(shí)內(nèi)升溫至室溫，用TLC檢測(cè)(己烷/EtoAc＝1∶1表示反應(yīng)進(jìn)行完全。用EtoAc稀釋之，有機(jī)層用飽和NaHCO3洗滌3次，然后用鹽水先滌，Na2SO4干燥，真空濃縮，殘?jiān)徒?jīng)閃柱層析(己烷/乙酸乙酯)純化，得標(biāo)題化合物(7.4g，95%)，其為白色固體;
1H-NMR(CDCl3，300 MHz)δ8.25-8.23(2H，m)，7.87-7.77(2H，m)，7.60-7.30(11H，m)，6.93(1H，d，J＝9.2 Hz)，6.53(1H，s)，6.25(1H，dd，J＝8.2 Hz)，5.95(1H，dd，J＝11.7，2.4 Hz)，5.68(1H，d，J＝6.9 Hz)，5.40(1H，d，J＝2.6 Hz)，4.95(1H，d，J＝8.1 Hz)，4.69-4.60(2H，m)，4.31-4.26(2H，m)，4.16(1H，d，J＝8.4 Hz)，3.86(1H，J＝6.9 Hz)，3.79(3H，s)，2.84-2.74(1H，m)，2.43-1.10(25H，including singlets at 2.44，2.15，2.10，2.08，1.73，1.19，1.16 3H).
(C)2’-O-甲氧羰基-7-O-(二芐基膦酰氧基甲基)紫杉醇的制備 室溫下，將N-碘代琥珀酰亞胺(1.74g，7.77mmol)一次加到2’-O-甲氧羰基紫杉醇(5.04g，5.18mmol)和5g烤箱干燥的3A分子篩的THF(100ml)溶液中，生成的混合物攪拌1.5小時(shí)。TLC分析(己烷/EtOAC＝1∶1)表示反應(yīng)已進(jìn)行完全。用EtOAC稀釋混合物至原體積的2倍，經(jīng)硅藻土床過(guò)濾，將濾液傾入飽和NaHCO3(含有1%Na2S2O3(重量比))中，有機(jī)層用飽和NaHCO3洗滌4次，然后用鹽水洗滌。水層用EtOAC反提取，合并有機(jī)層，Na2SO4干燥，真空濃縮。殘?jiān)徒?jīng)閃柱層析(己烷/EtOAC)純化，得標(biāo)題化合物(5.1g，96%)，其為白色固體;
1H-NMR (CDCl3，300 MHz)δ8.12-8.08(2H，m)，7.73-7.70(2H，m)，7.62-7.27(21H，m)，7.00(1H，d，J＝9.2 Hz)，6.31(1H，s)，6.24-6.21(1H，m)，5.96-5.92(1H，m)，5.66-5.64(1H，m)，5.40-5.36(2H，m)，5.05-4.93(5H，m)，4.87-4.84(1H，m)，4.29-4.05(3H，m)，3.85-3.83(1H，m)，3.77(3H，s)，2.81-2.71(1H，m)，2.62-1.05(22H，m，including singlets at 2.43，2.19，2.01，1.73，1.22，1.15，3H each).
(d)2’-O-甲氧羰基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇的制備 向N2氣清洗過(guò)的Parr氫化容器中加入1.3g10%Pd/c，然后再加純凈的EtoAc(140ml)和2’-O-甲氧羰基-7-O-(二芐基膦酰氧甲基)紫杉醇(3.4g，3.32mmol)的乙酸乙酯(40ml)溶液。將反應(yīng)容器固定于Parr氫化器上，置于真空下，向其中加入壓力為50PSi的氫氣?；旌衔镎袷?.5小時(shí)后，用TLC分析(己烷/EtoAc)起始物的消耗情況。然后將反應(yīng)物置于真空下，再用N2所清洗。此非均勻溶液經(jīng)燒結(jié)的玻璃漏斗過(guò)濾，真空濃縮濾液，得白色固體(2.9g)，其1HNMR分析結(jié)果顯示為所需標(biāo)題物(67%)和2’-O-甲氧羰基紫杉醇(33%)混合物。
(e)2’-O-甲氧羰基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇三乙醇胺鹽的制備向2’-O-甲氧羰基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇(1.91g，1.87mmol)和前述的副產(chǎn)品2’-O-甲氧羰基紫杉醇的CH2Cl2(11ml)溶液加入0.1M三乙醇胺(18.9ml，1.89mmol)的EtoAc溶液，混合物于室溫下攪拌5分鐘。真空濃縮，生成的白色固體經(jīng)C18層析(水/乙腈＝2.3∶1)純化，冷卻干燥后得三乙醇胺鹽，HPLC分析顯示其純度為＞97%;
1H-NMR (Acetone-d6，D2O，300 MHz)δ8.08-8.06(2H，m)，7.88-7.55(2H，m)，7.69-7.24(11H，m)，7.24(1H，dd，J＝7.3 Hz)，6.36(1H，m)，6.05(1H，dd，J＝8.8 Hz)，5.82(1H，d，J＝6.8 Hz)，5.60(1H，d，J＝7.1 Hz)，5.46(1H，d，J＝6.9 Hz)，5.13(1H，dd，J＝6.5 Hz)，5.98(1H，d，J＝8.1 Hz)，4.87(1H，dd，J＝11.8 Hz，6.3 Hz)，4.21(1H，dd，J＝10.3，6.9 Hz)，4.13(bs，6H)，3.92-3.89(6H，m)，3.81(1H，d，J＝7.02)，3.76(3H，s)，3.46-3.42(6H，m)，3.01-2.90(1H，m)，2.42(3H，s)，2.20-1.80(10H，including singlets at 2.20，1.93)，1.66(3H，s)，1.12(6H，bs).
實(shí)例23，2’-O-膦酰氧甲氧基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇的制備(a)2’-O-甲基硫甲氧基甲基紫杉醇的制備
將pd/c(10%)(3g)加到置于Parr瓶中的2’-O-甲基硫甲氧基甲基-7-O-芐氧羰基紫杉醇(1.2g，1.11mmol)的EtoAc(100ml)和乙醇(70ml)溶液中，將此容器固定于Parr設(shè)備上，向其中充入H2氣至50PSi?；旌衔镎袷?0.5小時(shí)，經(jīng)燒結(jié)玻璃漏斗過(guò)濾。濾液真空濃縮，殘?jiān)蜖钗锝?jīng)閃式柱層析(己烷/乙酸乙酯)純化，得所需化合物(0.98g，93%)，其為固體。
1H-NMR(CDCl3，300 MHz)，δ8.12-8.10(2H，m)，7.76-7.73(2H，m)，7.61-7.27(11H，m)，7.03(1H，d，J＝8.9 Hz)，6.40-6.27(1H，m)，6.25(1H，s)，5.80(1H，dd，J＝8.9，2.4 Hz)，5.66(1H，d，J＝7.1 Hz)，4.98-4.94(1H，m)，4.86-4.79(2H，m)，4.75-4.68(1H，m)，4.43-4.39(1H，m)，4.31-4.26(2H，m)，4.05(1H，d，J＝11.7 Hz)，3.78(1H，d，J＝7.1 Hz)，2.60-1.06(25H，M，including singlets at 2.45，2.21，2.02，1.85，1.66，1.22，1.11，3H each).
(b)2’-O-甲基硫甲氧基甲基-7-O-甲基硫甲基紫杉醇的制備
向冷卻至-40℃的2’-O-甲基硫甲氧甲基紫杉醇(0.98g，1.03mmol)和二甲硫醚(0.6ml，8.11mmol)的乙腈(20ml)溶液中加入過(guò)氧苯甲酰(1.09g，4.13mmol)，混合物在30分鐘內(nèi)升溫至室溫，用TLC分析(己烷/乙酸乙酯＝1∶1)表明反應(yīng)已進(jìn)行完全?；旌衔镉肊toAc稀釋，有機(jī)層用飽和NaHCO3洗滌3次，再用鹽水先滌。有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，真空濃縮，殘?jiān)徒?jīng)閃式柱層析(己烷/乙酸乙酯)純化，得標(biāo)題化合物(0.945g，91%)，其為白色固體;
1H-NMR (CDCl3，300 MHz)δ8.13-8.11(2H，m)，7.79-7.77(2H，m)，7.61-7.29(11H，m)，6.54(1H，s)，6.30-6.26(1H，m)，5.83-5.80(1H，m)，5.71-5.69(1H，m)，5.01-4.66(6H，m)，4.34-4.04(5H，m)，3.88(1H，d，J＝6.6 Hz)，2.90-2.80(1H，m)，2.55-1.05(27H，m，including singlets at 2.51，2.18，2.11，1.80，1.21，1.20，3H each).
(c)2’-O-二芐基膦酰氧甲氧甲基-7-O-(二芐基膦酰氧甲基)紫杉醇的制備 室溫下，將N-碘代琥珀酰亞胺(0.615g，2.74mmol)一次加到2’-O-甲基硫甲氧基甲基-7-O-甲基硫甲基紫杉醇(0.92g，0.916mmol)，磷酸二芐酯(2.03g，7.30mmol)和1g烤箱干燥的3A分子篩的THF(18ml)溶液中，溶液攪拌30分鐘。TLC分析表明(己烷/乙酸乙酯＝1∶2)反應(yīng)已進(jìn)行完全。用EtoAc稀釋混合物至原體積2倍，經(jīng)硅藻土床過(guò)濾。將濾液傾入含1%Na2S2O3(重量比)的飽和NaHCO3溶液中，有機(jī)層用飽和NaHCO3洗滌4次，然后用鹽水洗滌。水層用EtoAc反提取，合并有機(jī)層，Na2SO4干燥，真空干燥。殘?jiān)徒?jīng)閃式硅膠層析(己烷/EtoAc)純化，得標(biāo)題化合物(0.768g，58%)，其為白色固體。
1H-NMR (CDCl3，300 MHz)δ8.10-8.05(2H，m)，7.80-7.74(2H，m)，7.65-7.27(11H，m)，6.30(1H，s)，6.25-6.18(1H，m)，5.82(1H，dd，J＝9.1，3.4 Hz)，5.63(1H，dd，J＝6.9 Hz)，5.38(1H，dd，J＝6.6 Hz)，5.10-4.60(15H，m)，4.30-4.10(3H，m)，3.80(1H，d，J＝6.8 Hz)，2.85-2.65(1H，m)，2.50-1.60(22H，m，including singlets at 2.47，2.16，1.91，1.72，1.88，1.15，3H，each).
(d)2’-O膦酰氧甲氧甲基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇的制備
向用N2氣清洗過(guò)的Parr氫化容器中加入1.3g 10%pd/c、然后再加純凈的EtoAc(110ml)和2’-O-二芐基膦酰氧基甲氧甲基-7-O-(二芐基膦酰氧甲基)紫杉醇(0.721g，0.498mmol)的EtoAc(40ml)溶液。將反應(yīng)容器固定于Parr氫化器上，置于真空下，向其中加入壓力為50PSi的氫氣。混合物振蕩16小時(shí)后，用TLC分析(己烷/EtoAc)顯示起始物的消耗情況。然后將反應(yīng)物置于真空下，再用N2氣清洗。此混合物經(jīng)燒結(jié)的玻璃漏斗過(guò)濾，真空濃縮濾液，得標(biāo)題化合物(0.413g)，其純度經(jīng)HPLC分析純度為60%。
(e)，2’-O-膦酰氧甲氧甲基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇雙-三乙醇胺的制備，向粗的2’-O-膦酰氧甲氧甲基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇(413mg)的CH2Cl2(10ml)溶液中加入0.1M三乙醇胺(7.6ml，0.076mmol)的EtOAC溶液，生成的混合物于室溫下攪拌5分鐘。真空濃縮，生成的白色固體，經(jīng)C18層析(水/乙腈＝9∶1-5.6∶1)純化。用HPLC檢測(cè)，將含所需化合物純度＞96%的組份合并，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除去乙腈。生成的胺鹽水溶液經(jīng)冷凍干燥，得所需鹽(0.210g，兩步合計(jì)收率為30%)，其為白色固體。
1H-NMR (Acetone-d6，D2O，300 MHz)δ7.97-7.94(2H，m)，7.79-7.76(2H，m)，7.67-7.33(11H，m)，7.12-7.07(1H，m)，6.26(1H，s)，5.89(1H，dd，J＝8.6Hz)，5.48(1H，d，J＝7.9Hz)，5.00-4.79(8H，m)，4.70(1H，d，J＝8.1Hz)，4.15-4.03(3H，m)，3.74-3.66(7H，m)，3.14-2.86(8H，m)，2.33-1.00(20H，m，including singlets at 2.33，2.10，1.88，1.56，1.02，1.00，3H each).
附加實(shí)例按照前述的實(shí)例提供的一般方法和描述可以制備下列包含在式(A)范圍之內(nèi)的化合物。


























權(quán)利要求
1.具下列通式的化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽。其中T為C13原子上帶有取代的3-氨基-2-羥基丙酰氧基基團(tuán)的紫杉烷基團(tuán)；m為0或整數(shù)1-6；n為1，2或3；
2.權(quán)利要求1中的化合物，其中所述的紫杉烷基團(tuán)進(jìn)一步限定為含有至少一個(gè)C11-C12雙鍵，C1羥基，C2苯甲氧基，C4乙酰氧基，C9氧基及C5-C20oxetane。
3.權(quán)利要求1中所述的化合物，其中所述的紫杉烷基團(tuán)衍生自具下列式子的殘基 其中R2e′為氫且R2e為氫，羥基，-OC(O)Rx，或-OC(O)ORx;R3e為氫，羥基，-OC(O)Rx，-OC(O)ORx或C1-6烷氧基;R6e或R7e之一為氫，且其另一個(gè)為羥基或-C(O)ORx;或R6e和R7e一起構(gòu)成氧基;Rx為C1-6烷基，其可被1-6個(gè)相同的或不同的鹵原子任意取代，C3-C6環(huán)烷基，C2-C6鏈烯基或羥基;Rx為具下式的基團(tuán) 其中D為鍵或C1-C6烷基;且Ra，Rb和Rc分別為氫，氨基，C1-6烷氧基，二-C1-6烷氨基，鹵素，C1-6烷基或C1-6烷氧基。
4.權(quán)利要求1中化合物，其中所述的取代的3-氨基-2-羥基丙酰氧基基團(tuán)衍生自具下式的殘基 其中R1e為氫或-C(O)Rx，-C(O)ORx;R4和R5獨(dú)立地為C1-6烷基，C2-6鏈烯基，C26鏈塊基，或-Z-R6;Z為直接鍵或C1-6烷基或C1-6鏈烯基;R6為芳基，取代芳基，C3-6環(huán)烷基，或雜芳基;P為0或1;且Rx的定義同前。
5.權(quán)利要求1中化合物，其中所述的紫杉烷基團(tuán)進(jìn)一步限定為含有至少一個(gè)C11-C12雙鍵，C1羥基，C2苯甲酰氧基，C4乙酰氧基，C9氧基，和C5-C20 Oxetane;所述的取代的3-氨基-2-羥基丙酰氧基衍生自具下式的殘基 其中R1e，R4，R5和P的定義同前。
6.權(quán)利要求1中具下列通式的化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽， 其中R1為羥基，-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2，-OC(O)Rx或-OC(O)ORx;R21為氫，且R2為氫，羥基，-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2，-OC(O)Rx或-OC(O)ORx;R3為氫，羥基，C1-6烷氧基，-OC(O)Rx，-OCH2OCH2)mOP(O)(OH)2或-OC(O)ORx;R6和R7之一為氫，另一個(gè)為羥基，C1-6烷酰氧基，或-OCH2(OCH2)mOP(O)(CH2);或R6和R7一起構(gòu)成氧基;前提是R1，R2，R3，R6或R7中至少一個(gè)為-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2;m為0，1或2，R4，R5，Rx和P的定義同前;
7.權(quán)利要求6中化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽，其中R21為氫，且R2為-OCH2OP(O)(OH)2
8.權(quán)利要求7中化合物，其中R1為羥基，-OC(O)Rx或-OC(O)ORx;且Rx同前定義。
9.權(quán)利要求8中化合物，其中Rx為C1-6烷基。
10.權(quán)利要求8中化合物，其中R3為氫，羥基或乙酸基;
11.權(quán)利要求8中化合物，其中R4(O)p為苯基或叔丁氧基。
12.權(quán)利要求8中化合物，其中R5為苯基，2-呋喃基或2-噻吩基。
13.權(quán)利要求1中化合物，其為2-O-(乙氧羰基)-7-O-(膦酰氧甲基)紫杉醇或其藥物學(xué)上可接受的鹽。
14.權(quán)利要求13中化合物的鈉鹽。
15.權(quán)利要求13中化合物的三乙醇胺鹽。
16.權(quán)利要求13中化合物的三乙胺鹽。
17.權(quán)利要求13中化合物的精氨酸鹽。
18.權(quán)利要求13中化合物的賴氨酸鹽。
19.權(quán)利要求13中化合物的乙醇胺鹽。
20.權(quán)利要求13中化合物的N-甲基葡糖胺鹽。
21.權(quán)利要求1中化合物，其為7-O-(膦酰氧甲基)紫杉醇或其藥物學(xué)上可接受的鹽。
22.權(quán)利要求21中化合物的鈉鹽。
23.權(quán)利要求1中化合物，其為3′-N-脫苯甲?；?3′-脫苯基-3′-N-(叔丁氧羰基)-3′-(2-呋喃基)-2′-O-乙氧羰基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇或其藥物學(xué)上可接受的鹽。
24.權(quán)利要求23中化合物的三乙醇胺鹽。
25.權(quán)利要求1中化合物，其為3′-N-脫苯甲酰基3′-脫苯基-3′-N-(叔丁氧羰基)-3′-(2-噻吩基)-2′-O-乙氧羰基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇或其藥物學(xué)上可接受的鹽。
26.權(quán)利要求25中化合物的三乙醇胺鹽。
27.權(quán)利要求1中化合物，其為2′-O-乙氧羰基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇。
28.權(quán)利要求1中化合物，其為2′-O-甲基羰基-7-O-膦酸氧甲基紫杉醇。
29.權(quán)利要求1中化合物，其為2′-O-正丙基羰基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇。
30.權(quán)利要求6中化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽，其中R1為-OCH2OP(O)(OH)2。
31.權(quán)利要求30中化合物，其中R2′為氫，R2為氫，羥基或-OC(O)Rx，且Rx的定義同權(quán)利要求6。
32.權(quán)利要求31中化合物，其中R3為氫，羥基或乙酸基。
33.權(quán)利要求31中化合物，其中R4(O)p為苯基或叔丁氧基。
34.權(quán)利要求31中化合物，其中R5為苯基。
35.權(quán)利要求1中化合物，其為2′-O-(膦酰氧甲基)紫杉醇或其藥物學(xué)上可接受的鹽。
36.權(quán)利要求6中化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽其中R1和R2均為-OCH2OP(O)(OH)2。
37.權(quán)利要求1中化合物，其為2′-7-O-雙(膦酰氧甲基)紫杉醇或其藥物學(xué)上可接受的鹽。
38.權(quán)利要求37中化合物的鈉鹽。
39.權(quán)利要求6中化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽，其中R1為-OCH2OCH2OP(O)(OH)2)。
40.權(quán)利要求1中化合物，其為2′-O-膦酰氧甲氧甲基-7-O-膦酸氧甲基紫杉醇。
41.權(quán)利要求1中化合物，其為2′-O-膦酰氧甲氧甲基紫杉醇或其藥物學(xué)上可接受的鹽。
42.權(quán)利要求41中化合物的三乙醇胺鹽。
43.權(quán)利要求6中化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽，其中R3為-OCH2OP(O)(OH)2。
44.權(quán)利要求1中化合物，其為10-脫乙?；?3′-N-脫苯甲酰基-3′-N-(叔丁氧羰基)-10-O-(膦酰氧甲基)紫杉醇或其藥物學(xué)上可接受的鹽。
45.權(quán)利要求44中化合物的三乙醇胺鹽。
46.權(quán)利要求6中化合物，其中R1為-OCH2OCH2OCH2OP(O)(OH)2。
47.權(quán)利要求46中化合物，其為2′-O-[(膦酰氧甲氧基)甲氧甲基]紫杉醇。
48.權(quán)利要求46中化合物，其為2′-O-[(膦酰氧甲氧基)甲氧基]甲基-7-O-膦酰氧甲基紫杉醇。
49.具下式13-OH-txn-[OCH2(OHH2)mSCH3]n的化合物或其C13金屬烷氧化物其中txn為紫杉烷基團(tuán)，m和n的定義同前。
50.權(quán)利要求49中化合物，其中所述的紫杉烷基團(tuán)衍生自具下式的殘基 其中R2e，R2e，R3e，R6e和R7e的定義同前。
51.權(quán)利要求49中化合物或其C13金屬烷氧化物，其具有下式
52.具下式T′-[OCH2(OCH2)mSCH3]n的化合物，其T′為T(mén)，其中的非反應(yīng)羥基基團(tuán)被阻斷，m和n的定義同上。
53.具下式的權(quán)利要求52中化合物， 其中R16為羥基，保護(hù)的羥基，-OCH2SCH3，-OC(O)Rx或-OC(O)ORx;R2′為氫，且R2b為氫，羥基，保護(hù)的羥基，-OCH2SCH3，-OC(O)Rx或-OC(O)ORx;R3b為氫，羥基，保護(hù)的羥基，C1-6烷氧基，-OC(O)Rx，-OCH2SCH3或-OC(O)ORx;R6b或R7b之中的一個(gè)為氫，另一個(gè)為羥基，保護(hù)的羥基;C1-6烷酰氧基或-OCH2SCH3;或R6b和R7b一起構(gòu)成氧代基團(tuán);條件是R1b，R2b，R3b，R6b或R7b中至少有一個(gè)為-OCH2SCH3;P，R4，R5和Rx的定義同前。
54.權(quán)利要求53中化合物，其為7-O-甲基硫甲基紫杉醇。
55.權(quán)利要求53中化合物，其為2′-O-(芐氧羰基)-7-O-甲基硫甲基紫杉醇。
56.權(quán)利要求53中化合物，其為2′-O-(乙氧羰基)-7-O-甲基硫甲基紫杉醇。
57.權(quán)利要求53中化合物，其為2′-O-(甲基硫甲基)-7-O-(三乙基甲硅烷基)紫杉醇。
58.權(quán)利要求53中化合物，其為2′-O-(甲基硫甲基)紫杉醇。
59.權(quán)利要求53中化合物，其為2′-O-雙(甲基硫甲基)紫杉醇。
60.權(quán)利要求53中化合物，其為3′-N-脫苯甲?；?3′-脫苯基-3′-N-(叔丁氧羰基)-3′-(2-呋喃基)-7-O-甲基硫甲基紫杉醇。
61.權(quán)利要求53中化合物，其為3′-N-脫苯甲酰基-3′-脫苯基-3′-N-(叔丁氧羰基)-3′-(2-呋喃基)-2′-O-乙氧羰基-7-O-甲基硫甲基紫杉醇。
62.權(quán)利要求53中化合物，其為3′-N-脫苯甲?；?3′-脫苯基-3′-N-(叔丁氧羰基)-3′-(2-噻吩基)-7-O-甲基硫甲基紫杉醇。
63.權(quán)利要求53中化合物，其為3′-N-脫苯甲酰基-3′-脫苯基-3′-N-(叔丁氧羰基)-3′-(2-噻吩基)-2′-O-乙氧羰基-7-O-甲基硫甲基紫杉醇。
64.權(quán)利要求53中化合物，其為3′-N-脫苯甲?；?3′-N-(異丙氧羰基)-7-O-甲基硫甲基紫杉醇。
65.權(quán)利要求53中化合物，其為3′-N-脫苯甲?；?3′-N-(正丁氧羰基)-7-O-甲基硫甲基紫杉醇。
66.權(quán)利要求53中化合物，其為3′-N-脫苯甲?；?3′-N-(叔丁氧羰基)-2-O-三乙基甲硅烷基-7-O-甲基硫甲基紫杉醇。
67.權(quán)利要求53中化合物，其為3′-N-脫苯甲?；?3′-N-(叔丁氧羰基)-7-O-甲基硫甲基紫杉醇。
68.權(quán)利要求53中化合物，其為3′-N-脫苯甲?；?3′-N-(叔丁氧羰基)-7-O-甲基硫甲基-10-脫乙?；?10-羥甲基羰基(紫杉醇)
69.權(quán)利要求53中化合物，其為3′-N-脫苯甲?；?3′-N-(叔丁氧羰基)-7-O-甲基硫甲基-3′-脫苯基-3′-異丁烯基紫杉醇。
70.權(quán)利要求53中化合物，其為3′-N-脫苯甲?；?3′-N-(叔丁氧羰基)-2′-O-乙氧羰基-7-O-甲基硫甲基紫杉醇。
71.權(quán)利要求53中化合物，其為7-O-甲基硫甲基-3′-脫苯基-3′-異丁烯基紫杉醇。
72.權(quán)利要求53中化合物，其為3′-脫苯基-3′-(2-呋喃基)-2′-O-乙氧羰基-7-O-甲基硫代甲基紫杉醇。
73.具下式的權(quán)利要求52中化合物 其中R21，R2b，R3b，R4，R5，R6b，R7b和P的定義同前。
74.權(quán)利要求73中化合物，其為2′-O-(甲基硫甲氧基甲基)-7-O-三乙基甲硅烷基紫杉醇。
75.權(quán)利要求73中化合物，其為2′-O-(甲基硫甲氧甲基)-7-O-芐氧羰基紫杉醇。
76.具下式的化合物T′-[OCH2(OCH2)mOP(O)(ORy)2]n其中T′，m和n的定義同前，Ry為膦?；Ｗo(hù)基。
77.具下式的權(quán)利要求76中化合物 其中R1c為羥基，保護(hù)的羥基，-OCH2OP(O)(OCH2Ry)2，-OC(O)Rx或-OC(O)ORx;R2為氫，R2c為氫，羥基，保護(hù)的羥基，-OCH2OP(O)(OCH2Ry)2，-OC(O)ORx或-OC(O)Rx;R3c為氫，羥基，C1-6烷氧基，保護(hù)的羥基，-OC(O)Rx，-OCH2OP(O)(OCH2Ry)2或-OC(O)ORx;R6c或R7c之一為氫，且另一個(gè)為羥基，保護(hù)的羥基，C1-6烷酰氧基，或-OCH2OP(O)(OPy)2;或R6c和R7c一起構(gòu)成氧代基團(tuán)，條件是R1c，R2c，R3c，R6c或R7c中至少有一個(gè)為-OCH2OP(O)(OCH2Ry)2;p，R4，R5，Rx和Ry的定義同前。
78.具下式的權(quán)利要求76中化合物 其中R2′，R2c，R3c，R4，R5，R6c，R7c，Ry和p的定義同前。
79.一種藥物配方，包含有抗腫瘤劑量的權(quán)利要求1中化合物及藥物學(xué)上可接受的載體。
80.抑制以哺乳動(dòng)物為宿主的腫瘤生成的方法，包括給予哺乳動(dòng)物腫瘤生長(zhǎng)抑制量的權(quán)利要求1中的化合物。
81.抑制以哺乳動(dòng)物為宿主的腫瘤生長(zhǎng)的方法，包括經(jīng)口服途經(jīng)給予所述哺乳動(dòng)物腫瘤生長(zhǎng)抑制量的，權(quán)利要求1中的化合物。
82.抑制以哺乳動(dòng)物為宿主的腫瘤生長(zhǎng)的方法，包括給予所述哺乳動(dòng)物有效抗腫瘤劑量的具式(B′)化合物 其中R1b′為氫，-OC(O)Rx或-OC(O)ORx;R3b′為氫，羥基，-OC(O)ORx，C1-6烷氧基或-OC(O)Rx;R6b′或R7b′之一為氫，且另一個(gè)為羥基或C1-6烷酰氧基;或R6b′和R7b′一起構(gòu)成一個(gè)氧代基團(tuán);且R4，R5，P和Rx的定義同前;條件是通式化合物不能為3′-N-脫苯甲?；?3′-脫苯基-3′-N-(叔丁氧羰基)-3′-(2-呋喃基)-7-O-甲基硫甲基紫杉醇，或3′-N-脫苯甲酰基-3′-脫苯基-3′-N-(叔丁氧羰基)-3′-(2-呋喃基)-2′-O-乙氧羰基-7-O-甲基硫甲基紫杉醇。
83.權(quán)利要求82中所述的制備7-O-甲基硫甲基紫杉醇的方法。
84.權(quán)利要求82中所述制備2′-O-(芐氧羰基)-7-O-甲基硫甲基)紫杉醇的方法。
85.權(quán)利要求82中所述制備2′-O-(乙氧羰基)-7-O-甲基硫甲基紫杉醇的方法。
86.權(quán)利要求82中所述制備3′-N-脫苯甲酰基-3′-脫苯基-3′-N-(叔丁氧羰基)-3′-(2-噻吩基)-7-O-甲基硫甲基紫杉醇的方法。
87.權(quán)利要求82中所述制備3′-N-脫苯甲?；?3′-脫苯基-3′-N(叔丁氧羰基)-3′-(2-噻吩基)-2′-O-乙氧羰基-7-O-甲基硫甲基紫杉醇的方法。
88.權(quán)利要求82中所述制備3′-N-脫苯甲酰基-3′-N-(異丙氧基羰基)-7-O-甲基硫甲基紫杉醇的方法。
89.權(quán)利要求82中所述的制備3′-N-脫苯甲?；?3′-N-(正丁氧羰基)-7-O-甲基硫甲基紫杉醇的方法。
90.權(quán)利要求82中所述的制備3′-N-脫苯甲酰基-3′-N-(叔丁氧羰基)-7-O-甲基硫代甲基紫杉醇的方法。
91.權(quán)利要求82中所述的制備3′-N-脫苯甲酰基-3′-N-(叔丁氧羰基)-7-O-甲基硫甲基-10-脫乙?；?10-羥甲基羰基(紫杉醇)的方法。
92.權(quán)利要求82中所述的制備3′-N-脫苯甲酰基-3′-N-(叔丁氧羰基)-7-O-甲基硫甲基-3′-脫苯基-3′-異丁烯基紫杉醇的方法。
93.權(quán)利要求82中所述的制備3′-N-脫苯甲?；?3′-N-(叔丁氧羰基)-2′-O-乙氧羰基-7-O-甲基硫甲基紫杉醇的方法。
94.權(quán)利要求82中所述的制備7-O-甲基硫甲基-3′-脫苯基-3′-異丁烯基紫杉醇的方法。
95.權(quán)利要求82中所述的制備3′-脫苯基-3′-(2-呋喃基)-2′-O-乙氧羰基-7-O-甲基硫甲基紫杉醇的方法。
全文摘要
本發(fā)明涉及抗腫瘤化合物，具體地講，本發(fā)明提供了新穎的紫杉烷衍生物，它的藥物組合物和作為抗腫瘤藥物的用途。
文檔編號(hào)C07DGK1111637SQ94109468
公開(kāi)日1995年11月15日 申請(qǐng)日期1994年8月15日 優(yōu)先權(quán)日1993年8月17日
發(fā)明者J·格利克, J·F·卡多, M·A·卡普蘭, W·S·李, R·K·普羅恩, J·K·托塔希爾, D·夫耶斯, M·D·威特曼, H·旺格, J·J·懷特 申請(qǐng)人:布里斯托爾-米爾斯·斯奎布公司