專(zhuān)利名稱(chēng)：2-芐基-多環(huán)鳥(niǎo)嘌呤衍生物以及制備它們的方法
背景本發(fā)明涉及用于治療心血管疾病和肺疾病的2-芐基-多環(huán)鳥(niǎo)嘌呤衍生物、以及涉及它們的藥物組合物、這些化合物的使用方法以及制備這些化合物的方法。大多數(shù)本發(fā)明化合物一般性地、但未具體地公開(kāi)于PCT出版物WO91/19717中，該出版物于1991年12月26日出版。本發(fā)明人已發(fā)現(xiàn)，與現(xiàn)有出版物中的化合物相比，本發(fā)明化合物顯示出未曾預(yù)料到的較高心血管活性和肺活性。
本發(fā)明的概要本發(fā)明涉及新的式I的2-芐基-多環(huán)鳥(niǎo)嘌呤衍生物或其或藥用鹽 其中R1、R2和R3獨(dú)立地選自氫、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、鹵素、羥基、(二低級(jí)烷基)氨基、4-嗎啉基、1-吡咯烷基、1-吡咯基、-CF3、-OCF3、苯基和甲氧基苯基；或者R1和R2一起為亞甲二氧基；或者R1和R2與它們各自所連的碳原子一起形成苯環(huán)；和Ra為氫，并且Rb和Rc與它們各自所連的碳原子一起形成含有5個(gè)碳原子的飽和環(huán)；或者Ra為低級(jí)烷基，Rb為氫或低級(jí)烷基，并且Rc為氫；或者Ra、Rb和它們所連的那個(gè)碳原子一起形成含有5-7個(gè)碳原子的飽和環(huán)，并且Rc為氫；或者Ra為氫，并且Rb和Rc與它們各自所連的碳原子一起形成四氫呋喃環(huán)；或者Ra和Rb與它們所連的那個(gè)碳原子一起、以及Rb和Rc與它們各自所連的碳原子一起分別形成含有5-7個(gè)碳原子的飽和環(huán)。
優(yōu)選的化合物是其中R1和R3均為氫的化合物。更優(yōu)選的化合物是其中R1和R3均為氫且R2為氫、-OCF3、甲基、甲氧基、氟、苯基、甲氧基苯基、二甲氨基、1-吡咯烷基或1-吡咯基的化合物，以及其中R1和R2一起為亞甲二氧基且R3為氫的化合物。
此外優(yōu)選的是其中Ra為氫且Rb和Rc與它們各自所連的碳原子一起形成含有5個(gè)碳原子的飽和環(huán)的化合物；其中Ra為低級(jí)烷基、Rb為氫或低級(jí)烷基、且Rc為氫的化合物；其中Ra和Rb與它們所連的那個(gè)碳原子一起形成含有5個(gè)碳原子的飽和環(huán)，且Rc為氫的化合物；其中Ra為氫且Rb和Rc與它們各自所連的碳原子一起形成四氫呋喃環(huán)的化合物；以及其中Ra和Rb與它們所連的那個(gè)碳原子一起、以及Rb和Rc與它們各自所連的碳原子一起分別形成含有5個(gè)碳原子的飽和環(huán)的化合物。更優(yōu)選的是其中Ra為氫且Rb和Rc與它們各自所連的碳原子一起形成含有5個(gè)碳原子的飽和環(huán)的化合物；其中Ra和Rb與它們所連的碳原子一起形成含有5個(gè)碳原子的飽和環(huán)且Rc為氫的化合物；以及其中Ra為低級(jí)烷基、Rb為氫或低級(jí)烷基、且Rc為氫的化合物。
在其中Ra為氫且Rb和Rc與它們各自所連的碳原子一起形成含有5個(gè)碳原子的飽和環(huán)的式I化合物中，最優(yōu)選的是其中R1、R2和R3為下表所列基團(tuán)的化合物 式I化合物可用作為抗高血壓劑、支氣管擴(kuò)張劑和血小板抑制劑。本發(fā)明化合物可用于抑制磷酸二酯酶；對(duì)血管磷酸二酯酶的抑制與血管舒張和血管松馳有關(guān)，因此可期望用于誘導(dǎo)抗高血壓活性和抗心絞痛活性。式I化合物也可用作平滑肌松馳藥，并且因此可用于治療支氣管收縮。這種化合物也可以抑制平滑肌增殖、血管生長(zhǎng)和血小板功能，并且可用于治療諸如血管成形術(shù)后的再狹窄、動(dòng)脈粥樣硬化等病癥、和受益于抑制血小板功能的病癥。通過(guò)一種或多種上述生理機(jī)制，式I化合物還可用于治療局部缺血及外周血管疾病。
本發(fā)明還涉及含有抑制磷酸二酯酶、平滑肌增殖、血管生長(zhǎng)或血小板功能或者松馳平滑肌有效量的式I化合物的藥物組合物。本發(fā)明也涉及含有抗高血壓、抗心絞痛、支氣管收縮、或抑制血小板有效量的式I化合物的藥物組合物。
本發(fā)明還涉及治療哺乳動(dòng)物的高血壓、心絞痛、支氣管收縮、血管成形術(shù)后的再狹窄、動(dòng)脈粥樣硬化、局部缺血、外周血管疾病、或受益于血小板抑制的疾病的方法，該方法包含給需要所述治療的哺乳動(dòng)物施用治療任何上述疾病有效量的式I化合物。本發(fā)明也涉及通過(guò)施用保持或提高3′∶5′-環(huán)-磷酸鳥(niǎo)苷(cGMP)水平有效量的式I化合物而在哺乳動(dòng)物中保持cGMP水平的方法。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式II的多環(huán)鳥(niǎo)嘌呤的制備， 其中R4為H、烷基、或被芳基或-OH取代的烷基；R5為H、鹵素、-CF3、烷氧基、烷硫基、烷基、環(huán)烷基、-SO2NH2、-NH2、單烷基氨基、二烷基氨基、羥基烷氨基、氨基烷氨基、-COOH、烷氧羰基、氨基羰基、芳基、取代的芳基，或者被芳基、取代的芳基、-OH、烷氧基、-NH2、單烷基氨基、或二烷基氨基取代的烷基；Ra1、Rb1、Rc1和Rd1獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基或芳基；或者(Ra1和Rb1)或(Ra1和Rd1)或(Rb1和Rc1)可以形成5-7個(gè)碳原子的飽和環(huán)，或者(Ra1和Rb1)一起、以及(Rb1和Rc1)一起各自形成5-7個(gè)碳原子的飽和環(huán)，其中各環(huán)可任選含有一個(gè)硫或氧原子，并且環(huán)中碳原子可任選被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代鏈烯基、炔基、-OH、-COOH、烷氧羰基、烷基、或被-OH、-COOH或烷氧羰基取代的烷基；或者所述飽和環(huán)可以具有與鄰接芳環(huán)共享的兩個(gè)相鄰碳原子；和n為0或1；其中所述方法包含a)還原亞硝基嘧啶(III)，并用?；瘎?IV)處理被還原的亞硝基嘧啶，反應(yīng)任選在?；呋瘎┖?或偶合劑和/或相轉(zhuǎn)移催化劑存在下進(jìn)行，得到酰氨基嘧啶(V)；b)使酰氨基嘧啶(V)與有效量的鹵化/環(huán)化試劑反應(yīng)，反應(yīng)任選在一種或多種附加鹵化物源的存在下，并且也任選在相轉(zhuǎn)移催化劑的存在下進(jìn)行，得到鹵代嘌呤(VI)；c)在堿的存在下，使鹵代嘌呤(VI)與下式(VII)的胺反應(yīng)，得到取代的氨基嘌呤(VIII)； 其中Ra1、Rb1、Rc1、Rd1和n如上所定義；
d)用適宜的脫水劑使取代的氨基嘌呤(VIII)閉環(huán)，得到多環(huán)的鳥(niǎo)嘌呤(II)。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及制備式V的氨基嘧啶類(lèi)化合物的方法，該方法包含還原式III的亞硝基嘧啶，并用酰化劑處理該還原后的亞硝基嘧啶，所述?；磻?yīng)任選在一種?；呋瘎┖?或偶合劑和/或相轉(zhuǎn)移催化劑存在下進(jìn)行。該方法相應(yīng)于上面步驟a)。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及制備式VI的鹵代嘌呤的方法，該方法包含使酰氨基嘧啶(V)與有效量的鹵化/環(huán)化試劑反應(yīng)，所述反應(yīng)任選在一種或多種附加的鹵化物源的存在下，并且也可任選在相轉(zhuǎn)移催化劑的存在下進(jìn)行。該方法相應(yīng)于上面步驟(b)。該步驟可進(jìn)一步包括下述的步驟c)和/或步驟d)。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及制備式VIII的取代的氨基嘌呤的方法，該方法包含，在堿的存在下，使鹵代嘌呤(VI)與式(VII)的胺反應(yīng)， 其中Ra1、Rb1、Rc1、Rd1和n如上所述。該方法相應(yīng)于上面步驟c)。該方法可以進(jìn)一步包含下述步驟d)。
本發(fā)明還涉及新的中間體酰氨基嘧啶V、鹵代嘌呤VI和氨基嘌呤VIII，條件是對(duì)于酰氨基嘧啶V，當(dāng)Z為＝O時(shí)，R4和R5不能均為甲基。
本發(fā)明所提供的制備多環(huán)鳥(niǎo)嘌呤衍生物及其中間體的方法具有比前面所述其他方法少或甚至更少的步驟的優(yōu)點(diǎn)，并且產(chǎn)率高，幾乎不形成不需要的副產(chǎn)物，具有較少的廢物要處理或循環(huán)。本發(fā)明具有的其他優(yōu)點(diǎn)是可提供能夠使上述方法達(dá)到這些優(yōu)點(diǎn)的新中間體。
本發(fā)明的詳細(xì)描述在描述本發(fā)明時(shí)，“低級(jí)烷基”代表具有1-6個(gè)碳原子的直鏈烷基鏈、或3-6個(gè)碳原子的支鏈烷基鏈，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基和己基。
“低級(jí)烷氧基”代表其中烷基部分如上所述的烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、戊氧基和己氧基。
“鹵素”代表氟、氯、溴或碘。
“芳基”代表含有至少一個(gè)苯型環(huán)、并且芳基部分具有6-14個(gè)碳原子、并且芳基部分的所有可被取代的碳原子均為作為可能的連接點(diǎn)的碳環(huán)部分，例如苯基、萘基、茚基、2，3-二氫化茚基等。
“取代的芳基”代表被1-3個(gè)選自下列基團(tuán)的取代基取代的如上所定義的芳基部分鹵素、低級(jí)烷基、-CF3、-OCF3、苯基、-OH、低級(jí)烷氧基、苯氧基、氨基、(單-低級(jí)烷基)氨基、(二-低級(jí)烷基)氨基、4-嗎啉基、1-吡咯烷基、1-吡咯基、和甲氧基苯基，或在相鄰碳原子上的取代基形成亞甲二氧基。
某些本發(fā)明化合物，例如帶有含有堿性氮部分的化合物，也可以與有機(jī)和無(wú)機(jī)酸形成可藥用鹽。用于形成所述鹽的適宜的酸的實(shí)例為鹽酸、硫酸、磷酸、乙酸、檸檬酸、草酸、丙二酸、水楊酸、蘋(píng)果酸、富馬酸、琥珀酸、抗壞血酸、馬來(lái)酸、甲磺酸和其他本領(lǐng)域的技術(shù)人員公知的無(wú)機(jī)酸和羧酸。所述鹽是通過(guò)使所述的游離堿形式與足夠量的所需酸以常規(guī)方法接觸，形成鹽。
某些本發(fā)明化合物本質(zhì)上可能是酸性的，例如具有羧基或酚羥基的那些化合物。這些化合物可以形成可藥用鹽。所述鹽的實(shí)例為鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鋁鹽、金鹽和銀鹽。此外所考慮的鹽是與可藥用鹽例如氨、烷基胺類(lèi)、羥基烷基胺類(lèi)、N-甲基葡糖胺等形成的鹽。
式I化合物形成對(duì)映體，優(yōu)選(+)對(duì)映體形式，例如，其中Ra為氫、且Rb和Rc與它們各自所連的碳原子一起形成5個(gè)碳原子的飽和環(huán)的化合物的優(yōu)選立體化學(xué)構(gòu)型示于下列的部分結(jié)構(gòu)式中 本發(fā)明的方法及其各種實(shí)施方案說(shuō)明如下 其中R4、R5、Ra1、Rb1、Rc1、Rd1和n如上所述；L為離去基團(tuán)；X為鹵素；Z為＝O，或-OR6，其中R6為烷基；和虛線“----”表示一任選的雙鍵，即當(dāng)Z為＝O時(shí)，1位含有氫，并且在環(huán)上1和2位之間存在一單鍵，或者當(dāng)Z為-OR6，其中R6為烷基時(shí)，在環(huán)上1和2位之間存在一雙鍵。
式V的酰氨基嘧啶類(lèi)化合物可以通過(guò)還原式III的亞硝基嘧啶類(lèi)化合物，接著用酰化劑處理來(lái)制備。適宜的還原劑包括氫與金屬催化劑，例如周期表中第VIII族的金屬或其鹽或絡(luò)合物，或者第VIII族的金屬與碳的混合物。適宜的金屬包括鉑、鈀、鎳、銠、釕或其混合物。被還原的亞硝基嘧啶然后用?；瘎┨幚?，任選在?；呋瘎┖?或偶合劑和/或相轉(zhuǎn)移催化劑存在下進(jìn)行。在還原亞硝基嘧啶類(lèi)化合物時(shí)，金屬催化劑可以以有效地制得被還原的亞硝基嘧啶的量使用。所述用量可以為約1至約200mol％金屬催化劑，優(yōu)選約1至約50mol％，更優(yōu)選約1至約20mol％金屬催化劑。所述還原可以在有效地制得被還原的亞硝基嘧啶的溫度下進(jìn)行，并且該溫度可為約-40℃至約100℃，更優(yōu)選約0℃至約50℃，更優(yōu)選10°至30℃。式III的亞硝基嘧啶是在約環(huán)境壓力至約400磅/平方英寸(psi)(20千托)、優(yōu)選約35psi(1.8千托)至100psi(5.1千托)、更優(yōu)選約50psi(2.6千托)至70psi(3.6千托)的壓力下進(jìn)行的。亞硝基嘧啶(III)可以被還原，還原的時(shí)間是足以使所需反應(yīng)完全所需的時(shí)間，例如10分鐘至一周或一周以上，優(yōu)選約5-48小時(shí)。
適宜的?；瘎┌ㄋ狒?lèi)、有機(jī)酸的酰鹵、混合酐類(lèi)、活化的酯類(lèi)、式R5COL(IV)的有機(jī)酸或其混合物，其中R5如以前所定義，且L代表離去基團(tuán)，例如酸酐、鹵化物、或活化的酯基。代表性的酰化劑包括乙酸(HOAC)、乙酰氯、乙酰溴、乙酐、苯甲酰氯、被芳基取代的芳基乙酸或衍生物(例如對(duì)三氟苯基乙酰氯、對(duì)二甲氨基苯基乙酰氯和對(duì)三氟苯基乙酸)。其他?；瘎┛梢园ǚ蓟〈姆蓟宜岬孽Ｂ阮?lèi)和酸酐類(lèi)；或者可以包括在反應(yīng)途徑1中所述的式2的乙酸衍生物。?；瘎┛梢砸杂行У仵；贿€原的亞硝基嘧啶的量使用，并且每摩爾被還原的亞硝基嘧啶可以用約1至約10mol?；瘎?，優(yōu)選約1～4mol酰化劑。酰化反應(yīng)可以在有效地制得酰氨基嘧啶(V)的溫度下進(jìn)行，并且所述溫度可以為約-40℃至約50℃，更優(yōu)選約0℃至約40℃。被還原的亞硝基嘧啶的酰化反應(yīng)可以在約環(huán)境壓力至約400磅/平方英寸(psi)的壓力下進(jìn)行足夠時(shí)間以使所需反應(yīng)完全，例如10分鐘至48小時(shí)或更多的時(shí)間。
適宜的酰化催化劑包括二甲基苯胺、二甲氨基吡啶(DMAP)和咪唑。該酰化催化劑可以以有效地催化被還原的亞硝基嘧啶酰化的量使用。所述用量可以為約1至約20mol％?；呋瘎瑑?yōu)選約1～10mol％。
適宜的偶合劑包括碳化二亞胺類(lèi)，例如二環(huán)己基碳化二亞胺或1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(DEC)。后者偶合劑可以包括其本身的催化劑或多種催化劑，例如苯并三唑類(lèi)、咪唑類(lèi)、N-羥基琥珀酰亞胺和DMAP。偶合劑可以以有效地輔助被還原的亞硝基嘧啶酰化的量使用。所述用量可以為約1至約5mol偶合劑，優(yōu)選約1-4mol。
所述還原和酰化步驟可以在與反應(yīng)物相配伍的溶劑中進(jìn)行。所述溶劑包括醚類(lèi)、水、堿、酸、二甲基甲酰胺(DMF)或其混合物。醚類(lèi)包括二乙醚(Et2O)、四氫呋喃(THF)、叔丁基甲基醚((CH3)3COCH3)和二甲氧基乙烷。堿包括堿金屬和堿土金屬例如鋰、鈉、鉀、鎂、鈣或鋇的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽。優(yōu)選的堿是以含水形式存在的。酸包括式R5COL(IV)的化合物，其中R5如前所定義，例如HOAC、丙酸、丁酸、或任何上述酸的酐類(lèi)。此外，所述酸可以包括在途徑1中所述的式2酸的酸性衍生物。任何上述溶劑的混合物均可以使用。溶劑的量應(yīng)足以能提供反應(yīng)物的可混合的漿狀物。
用于促進(jìn)在水或有機(jī)介質(zhì)存在下的被還原的亞硝基嘧啶的?；倪m宜的相轉(zhuǎn)移催化劑包括四取代的鏻鹽、季銨鹽(例如四丁基銨、四甲基銨、芐基三丁基銨)，及互補(bǔ)的抗衡離子，例如硫酸根、氫氧根、或氯離子。適于與相轉(zhuǎn)移催化劑一起使用的溶劑包括脂肪烴類(lèi)，例如C-5至C-20烷烴(包括庚烷)，或芳香烴類(lèi)，例如甲苯、苯和二甲苯類(lèi)；以及氯化烴類(lèi)，例如二氯甲烷(CH2Cl2)、二氯乙烷、氯苯；或醚類(lèi)，例如上述醚類(lèi)。
其中Z為＝O、且R4和R5均為甲基的酰氨基嘧啶V描述于A.Branfman等人，Drug Metabolism and Disposition，(1983)，Vol，11，pp.206-210和V.I.Khmelevskii等人，J.Gen.Chem.U.S.S.R.(1958)，Vol，28，pp.2016-2020中。
式VI的鹵代嘌呤可以通過(guò)使酰氨基嘧啶(V)與有效量的鹵化/環(huán)化劑反應(yīng)來(lái)制備，任選在一種或多種另加的鹵化物源存在下，并且也任選在相轉(zhuǎn)移催化劑存在下進(jìn)行反應(yīng)。適宜的鹵化/環(huán)化劑包括三鹵化磷、五鹵化磷、有機(jī)磷鹵化物、三鹵氧化磷、亞硫酰鹵、磺酰鹵或其混合物。鹵化/環(huán)化劑可以以每摩爾酰氨基嘧啶約等摩爾至過(guò)量的摩爾量使用，優(yōu)選約1至約50mol鹵化/環(huán)化劑。該反應(yīng)可以在約環(huán)境溫度至所用溶劑(或多種溶劑)的沸點(diǎn)的溫度，更優(yōu)選約50℃至約150℃的溫度下進(jìn)行。此外，優(yōu)選的是反應(yīng)物在環(huán)境壓力下進(jìn)行接觸，盡管可以使用大于環(huán)境壓力的壓力。反應(yīng)物可以反應(yīng)足以使所需反應(yīng)完全所需的時(shí)間，例如10分鐘至約1周或更多的時(shí)間。
適宜的另加鹵化物源包括鹵化銨，例如NH4Cl、NH4Br或NH4I；堿金屬鹵化物，例如LiCl、LiBr或LiI；鹵素氣體，例如氯、溴或碘；以及鹵化氫，例如HCl、HBr或HI。所述鹵化物源與鹵化/環(huán)化劑一起可以促進(jìn)酰氨基嘧啶(V)轉(zhuǎn)化為鹵代嘌呤(VI)。鹵化物源可以以每摩爾酰氨基嘧啶約0.1mol至過(guò)量摩爾的量使用，優(yōu)選約0.1mol至約5mol。
用于使酰氨基嘧啶(V)轉(zhuǎn)化成鹵代嘌呤(VI)的適宜的相轉(zhuǎn)移催化劑可以包括上面對(duì)被還原的亞硝基嘧啶轉(zhuǎn)化成酰氨基嘧啶所述的那些相轉(zhuǎn)移催化劑。對(duì)于每摩爾酰氨基嘧啶可以使用的相轉(zhuǎn)移催化劑的量為約0.1至約10mol，優(yōu)選約0.1至約5mol。
用于制備鹵代嘌呤VI的方法可以以純樣或加入任何與反應(yīng)物相配伍的溶劑來(lái)進(jìn)行。適宜的溶劑包括脂族烴類(lèi)，例如C-5至C-20烷烴，優(yōu)選庚烷；芳香烴類(lèi)，例如甲苯、苯或二甲苯類(lèi)；鹵代烴類(lèi)，例如CH2Cl2、二氯乙烷或氯代苯類(lèi)；或者上述任何溶劑的混合物。當(dāng)該方法以純樣進(jìn)行時(shí)，可以使用過(guò)量的鹵化/環(huán)化劑。溶劑的量應(yīng)該足以提供反應(yīng)物的可混合的漿狀物。
式VIII的取代的氨基嘌呤可以通過(guò)使鹵代嘌呤VI與適宜的胺反應(yīng)來(lái)制備，任選在所加入的堿的存在下，任選在相轉(zhuǎn)移催化劑例如對(duì)促進(jìn)?；磻?yīng)所述的相轉(zhuǎn)移催化劑的存在下進(jìn)行。適宜的胺可以是式VII的胺，它描述于PCT/US91/04154中 其中Ra1、Rb1、Rc1、Rd1和n如上所述。此外，可以使用胺的鹽，例如HCl鹽，胺可以以有效地制得化合物VIII的量使用，并且對(duì)于每摩爾鹵代嘌呤VI可以為約等摩爾至約20摩爾，優(yōu)選約1至約4摩爾胺。適宜的所加入的堿可以為有機(jī)堿、無(wú)機(jī)堿或其混合物。有機(jī)堿可以包括含氮堿，例如N-甲基吡咯烷酮(NMP)、三乙胺(Et3N)、二異丙基乙基胺(iPr2NEt)、苯胺、吡啶、1，8-二(二甲氨基)萘、聚乙烯基吡啶、DMAP、二甲基苯胺、二甲基吡啶(leutidine)、叔丁醇鈉等。應(yīng)注意的是，在PCT/US91/04154中所述的胺反應(yīng)物也可用作為堿。適宜的無(wú)機(jī)堿可以包括元素周期表中第IA和第IIA族的堿金屬和堿土金屬的氫氧化物、碳酸鹽和碳酸氫鹽。該方法可以在有效地制得適宜的氨基嘌呤(VIII)的溫度下進(jìn)行，并可以在約-20℃～200℃進(jìn)行，更優(yōu)選約環(huán)境溫度至約150℃。此外優(yōu)選的是反應(yīng)物在環(huán)境壓力下接觸，盡管可以使用大于環(huán)境壓力的壓力。任選，該方法可以在與反應(yīng)物相配伍的溶劑中進(jìn)行。所述溶劑可以包括任何上述有機(jī)堿；乙腈(CH3CN)；醚類(lèi)例如THF、(CH3)3COCH3、二甲氧基乙烷；酰胺類(lèi)例如DMF和乙酰胺；脂族烴類(lèi)，例如C-5至C-20烷烴；和上述鹵代烴；或者任何上述溶劑的混合物。溶劑的用量應(yīng)足以提供反應(yīng)物的可混合的漿狀物。任選，該方法可以在相轉(zhuǎn)移催化劑例如上述相轉(zhuǎn)移催化劑中進(jìn)行。
反應(yīng)物可以接觸足夠時(shí)間以使所需反應(yīng)完全，例如1至96小時(shí)或更多的時(shí)間，優(yōu)選約24至約72小時(shí)。
所需的多環(huán)鳥(niǎo)嘌呤(II)可以用已知方法，例如，PCT/US91/04154中所述方法來(lái)制備。一般地，被取代的氨基嘌呤VIII可以按已知方法或與已知方法類(lèi)似的方法、通過(guò)與適宜的脫水劑例如亞硫酰氯(SOCl2)或二溴化三苯膦進(jìn)行閉環(huán)而被轉(zhuǎn)化為多環(huán)鳥(niǎo)嘌呤XI。
從反應(yīng)混合物中回收化合物II、V、VI和VIII可以用常規(guī)回收方法，例如通過(guò)萃取、結(jié)晶、過(guò)濾和/或除去任何存在的溶劑來(lái)進(jìn)行。
除了使用上述新方法，本發(fā)明化合物可以按幾種下述途徑來(lái)制備?？梢允褂眠@些途徑的變體、以及本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其他途徑，例如WO91/19717中所述途徑，該文獻(xiàn)并入本文作為參考。
對(duì)于其中Ra為氫、且Rb和Rc與它們各自所連的碳原子一起形成5個(gè)碳原子的飽和環(huán)的式Ia化合物，可以使用下列途徑1-3途徑1 其中R1、R2和R3如上所述。途徑1涉及使式1的尿嘧啶衍生物與式2的乙酸衍生物、按標(biāo)準(zhǔn)的肽偶合技術(shù)、例如使用偶合劑例如DEC和活化劑例如DMAP在適宜的惰性溶劑例如DMF中進(jìn)行偶合。然后式3的取代的尿嘧啶衍生物用形成鹵化物的試劑(例如POCl3)處理，所得的式4化合物通過(guò)與反式-2-羥基環(huán)戊胺(式5)在高溫(100-150℃)下在i-Pr2NEt存在下在溶劑(例如NMP)中進(jìn)行胺化。然后所得式6化合物用脫水劑(例如SOCl2)處理，生成式7的多環(huán)結(jié)構(gòu)。然后式I化合物通過(guò)例如用適宜的鈀催化劑和氫氣或HCO2NH4氫化除去保護(hù)氨基的芐基而得到。
起始原料式1的尿嘧啶衍生物可以按本領(lǐng)域已知方法、例如按WO91/19717中所公開(kāi)的方法來(lái)制備。式5的氨基醇可以按本領(lǐng)域已知方法并按下列步驟來(lái)制備 其中Bn為芐基。在該反應(yīng)途徑中，環(huán)氧環(huán)戊烷(8)通過(guò)與芐胺回流而轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的式9的N-芐基反式-羥基環(huán)烷基胺，并例如用氫化作用除去芐基保護(hù)基團(tuán)，得到式5的反式-羥基環(huán)烷基胺。
途徑2 在途徑2中，已知的原料式10的四環(huán)化合物與堿例如二異丙基氨基化鋰(LDA)在適宜的溶劑例如THF中進(jìn)行反應(yīng)，然后與式11的苯甲醛反應(yīng)。然后所得的式12化合物例如用鈀催化劑和氫氣在HCl存在下進(jìn)行氫化，得到式Ia化合物。
途徑3 在途徑3中，已知的式13的原料例如通過(guò)與溴和乙酸鈉在HOAc中反應(yīng)來(lái)溴化。式16的試劑通過(guò)用鋅處理式15的溴甲基芳基化合物(其中Ar任選被苯基或萘基取代)來(lái)制備。然后式16的試劑與式14化合物在催化劑例如四-(三苯膦)鈀(Pd(PPh3)4)和三苯膦(PPh3)存在下、在極性溶劑例如NMP存在下、在惰性氣氛中反應(yīng)。
其他的式I化合物可以按下列途徑4-6制備途徑4 其中R1、R2和R3如上所定義。途徑4包括使式17的取代的咪唑羧酸酯與CH3NCO在堿例如吡啶的存在下反應(yīng)。然后生成的式18化合物與堿例如NaOH的水溶液一起加熱，形成式19的二環(huán)化合物，然后將其用形成鹵化物的試劑例如POCl3處理，得到式VIa化合物(即式VI化合物，其中R4為甲基、X為氯、且R5為任選被取代的芐基)。式VIa化合物按所保護(hù)的方法進(jìn)行處理，得到式I化合物。
途徑5 途徑5的第一個(gè)步驟涉及使式VII的氨基醇與式20的氯代嘌呤在與所保護(hù)的方法步驟C相同的條件下反應(yīng)，制得式21化合物。使用途徑1和2所述方法，式21化合物可以用SOCl2或二溴化三苯膦脫水，形成多環(huán)化合物，然后將其與堿例如LDA在無(wú)水溶劑例如THF中、在低溫下反應(yīng)，用親電子試劑例如式11的芳基醛處理，得到式I化合物。
其中Ra為氫且Rb和Rc形成一四氫呋喃環(huán)的式Ib化合物可按下列方法制備途徑6 在上面的方法中，式4的氯代嘌呤與式22的氨基醇在高溫下、在堿例如Et3N的存在下、在溶劑例如NMP中進(jìn)行反應(yīng)，然后所得中間產(chǎn)物與CH3SO2Cl在堿例如Et3N存在下反應(yīng)，制得式23中間體。然后式23中間體進(jìn)行氫解反應(yīng)，例如通過(guò)用NH4HCO2和鈀催化劑處理來(lái)進(jìn)行，得到式Ib化合物。
式22的中間體氨基醇類(lèi)可以按本領(lǐng)域已知方法、例如按下列方法來(lái)制備 其中1，4-二氫呋喃與間氯過(guò)氧苯甲酸(m-CPBA)反應(yīng)，得到式24化合物，然后將其與(R)-(+)-α-甲基芐胺反應(yīng)，制得式25的取代的氨基醇。式25的非對(duì)映體中間體在此階段通過(guò)用CH2Cl2和己烷重結(jié)晶來(lái)分離。然后化合物25通過(guò)與NH4HCO2在CH3OH中回流用Pd/C氫化，得到式22的反式-取代的氨基醇。
式1、2、5、8、10、11、13、15和17的起始原料易于獲得，或可按本領(lǐng)域公知的方法制備。
提供下列實(shí)施例來(lái)說(shuō)明本發(fā)明的典型的中間體化合物，但是本發(fā)明的范圍并不限于這些實(shí)施例。在化學(xué)式中，Me為甲基。
制備例1N-(6-氨基-1，2，3，4-四氫-3-甲基-2，4-二氧代-5-嘧啶基)乙酰胺 方法1在帕爾搖動(dòng)器中，將100g 6-氨基-3-甲基-5-亞硝基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮和20g 5％Pd/C催化劑在1.0L冰醋酸中的混合物氫化過(guò)夜。反應(yīng)混合物用10g硅藻土(稱(chēng)為Celite，Johns-Manville Products Corporation，Celite Division，Manville，NJ的商標(biāo))過(guò)濾。硅藻土濾餅用125ml冰醋酸洗滌，并保存濾餅。向?yàn)V液中加入45ml乙酐，并任選加入痕量DMAP作為催化劑。將混合物在40℃攪拌過(guò)夜，然后真空濃縮至干。向所得固體中加入125ml水，并將混合物在0℃在冰水浴中攪拌1小時(shí)。過(guò)濾所得固體，并在40～50℃于通風(fēng)爐中干燥，得到26.3g產(chǎn)物。硅藻土濾餅用八份每份250ml的熱HOAc萃取。濃縮萃取液，得到褐色固體，將其于300ml水中制成漿狀物，然后按上述方法處理，得到85.4g產(chǎn)物。合并固體，得到111.7g(粗產(chǎn)率95％)標(biāo)題化合物，樣品用熱CH3OH/HOAc/C重結(jié)晶，得到純化的標(biāo)題化合物，為白色固體，熔點(diǎn)(m.p.)大于(＞)250℃。MS(EI)198(M+)。方法2在帕爾搖動(dòng)器中，將1g 6-氨基-3-甲基-5-亞硝基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮和0.1g 5％ Pd/C催化劑在12.2ml 1NNaOH中的懸浮液氫化過(guò)夜。過(guò)濾催化劑，用少量1N NaOH洗滌，將濾液冷卻至0℃，攪拌，加入2ml乙酐。攪拌2小時(shí)，期間將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝兀^(guò)濾，用水接著用己烷洗滌，在45℃在通風(fēng)爐中干燥過(guò)夜，得到0.82g(產(chǎn)率70％)標(biāo)題化合物，為淺褐色固體。
制備例2N-(6-氨基-1，2，3，4-四氫-3-甲基-2，4-二氧代-5-嘧啶基)-苯甲酰胺 在帕爾搖動(dòng)器中，將1g 6-氨基-3-甲基-5-亞硝基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮和0.1g5％Pd/C催化劑在6.2ml 1NNaOH中的懸浮液氫化過(guò)夜。過(guò)濾催化劑，用少量1N NaOH洗滌，將濾液冷卻至0℃，攪拌并加入0.75ml苯甲酰氯。攪拌1小時(shí)，過(guò)濾(保存濾液)，用水接著用己烷洗滌產(chǎn)物，在45℃于通風(fēng)爐中干燥，得到1.06g淺黃色固體狀產(chǎn)物。濾液在0℃攪拌，加入0.375ml苯甲酰氯。從其中按上述方法收集到0.31g產(chǎn)物，得到1.36g(總產(chǎn)率89％)標(biāo)題化合物，MS(Cl/CH4)261(M+H)，m.p.＞250℃。
制備例3N-(4-氨基-1，6-二氫-2-甲氧基-1-甲基-6-氧代-5-嘧啶基)-乙酰胺 在帕爾搖動(dòng)器中，將4.5g 6-氨基-2-甲氧基-3-甲基-5-亞硝基-4(3H)-嘧啶二酮和0.45g 5％ Pd/C催化劑在45ml冰醋酸中的混合物氫化過(guò)夜。用1.1g硅藻土過(guò)濾反應(yīng)混合物。硅藻土濾餅用1.2ml冰醋酸洗滌。向?yàn)V液中加入2.8ml乙酐，并任選加入痕量DMAP作催化劑。在室溫下將混合物攪拌1小時(shí)，然后過(guò)濾，收集第一批粗產(chǎn)物(0.86g)。濃縮母液，并過(guò)濾，收集另外2.5g產(chǎn)物。最后，濃縮母液，得到1.2g附加的產(chǎn)物，共得到4.56g(產(chǎn)率90％)標(biāo)題化合物，為淺褐色固體，MS(FAB)213(M+H)。
制備例3.1N-(6-氨基-1，2，3，4-四氫-3-甲基-2，4-二氧代-5-嘧啶基)-4-(三氟甲基)-苯乙酰胺 在帕爾搖動(dòng)器中，將2.3g 6-氨基-3-甲基-5-亞硝基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮和0.23g 5％Pd/C在13ml 1N NaOH中的懸浮液氫化過(guò)夜。過(guò)濾催化劑，用少量1N NaOH洗滌，冷卻濾液至0℃，攪拌并加入4.6g三氟甲基苯基乙酰氯。攪拌2小時(shí)，同時(shí)使其達(dá)到室溫，過(guò)濾，用水洗滌，接著用己烷洗滌，在45℃于通風(fēng)爐中干燥過(guò)夜，得到5.2g標(biāo)題化合物，為淺褐色固體。將該固體懸浮于CH2Cl2中，攪拌1小時(shí)，過(guò)濾，并干燥，得到4.0g(87％)標(biāo)題化合物，為灰白色固體，它適于進(jìn)一步的反應(yīng)，m.p.＞300℃，MS(EI)342(M+)、Cl(CH4)343(M+H)。
制備例42-氯-1，7-二氫-1，8-二甲基-6H-嘌呤-6-酮 方法1將20g制備例1的產(chǎn)物在300ml POCl3中的懸浮液回流2-4天，直到用薄層色譜法(TLC)測(cè)定反應(yīng)完全為止。減壓除去POCl3，向所得暗色膠狀固體中加入少量冰冷的水。劇烈攪拌該混合物，然后在0-5℃通過(guò)緩緩加入冰冷的NH4OH而使混合物呈中性pH。過(guò)濾所得橙褐色固體，用少量冰冷的水洗滌，并在40℃于通風(fēng)爐中干燥，得到16.5g(粗產(chǎn)率82％)標(biāo)題化合物。MS(Cl/CH4)199201，比例為～3∶1(M+H)，m.p.＞250℃。方法2將2g制備例1的產(chǎn)物與0.76g NH4Cl在30ml POCl3中的混合物溫和回流1-2天，直到用TLC測(cè)定反應(yīng)完全為止。減壓除去POCl3，加入少量冰冷的水至所得膠狀物中。劇烈攪拌該混合物，然后在0～5℃通過(guò)緩慢加入冰冷的NH4OH而使混合物呈中性pH。過(guò)濾所得橙褐色固體，用少量冰冷的水洗滌，并在40℃于通風(fēng)爐中干燥，得到1.7g(粗產(chǎn)率83.5％)標(biāo)題化合物。方法3將0.55g制備例3的產(chǎn)物于12ml POCl3中的懸浮液溫和回流2-4天，直至用TLC測(cè)定反應(yīng)完全為止。除去POCl3，并按方法1中所述方式中和混合物。過(guò)濾所得淺褐色固體產(chǎn)物，并在40℃于通風(fēng)爐中干燥，得到0.3g產(chǎn)物。母液用乙酸乙酯萃取，用無(wú)水Na2SO4干燥有機(jī)層，并減壓濃縮，得到0.05g附加的產(chǎn)物。最后濃縮母液至干，用10％甲醇的乙酸乙酯(EtOAc)溶液萃取。過(guò)濾，除去溶劑，得到另外0.56g產(chǎn)物，總共得到0.41g(產(chǎn)率80％)標(biāo)題化合物。
制備例4.12-氯-1，7-二氫-1-甲基-8-[[(4-三氟甲基)苯基]甲基]-6H-嘌呤-6-酮 將5g N-(6-氨基-1，2，3，4-四氫-3-甲基-2，4-二氧代-5-嘧啶基)-(4′-三氟甲基)苯基乙酰胺和1.25gNH4Cl于75ml POCl3的混合物在70℃加熱24小時(shí)(直到用TLC鑒定起始原料消耗盡為止)。將反應(yīng)混合物溫和回流(～110℃)3天。減壓除去POCl3，加入少量冰冷的CH2Cl2至所得膠狀物中。將該混合物劇烈攪拌，然后在0～5℃通過(guò)緩慢加入冰冷的NH4OH使其pH為9-10。除去CH2Cl2，加入少量水(若必要，加入NH4OH，以保持中性至堿性pH)，過(guò)濾所得的暗褐色固體，用少量冰冷的水洗滌，于40℃于通風(fēng)爐中干燥，得到5.3g標(biāo)題化合物。將其于CH2Cl2中成漿，過(guò)濾，并干燥，得到4.6g(90％物料衡算)標(biāo)題化合物，為淺褐色固體，它適用于進(jìn)一步的反應(yīng)。MS(Cl/CH4)343∶345(M+H)，比例為～3∶1；EI342∶344(M+)，比例為～3∶1。
制備例51，7-二氫-2-[(2R-羥基-R-環(huán)戊基)氨基]-1，8-二甲基-6H-嘌呤-6-酮 將12.5g制備例4的產(chǎn)物、8g 2R-羥基-R-環(huán)戊胺和31.5mlEt3N于83ml CH3CN中的混合物回流2-3天，直到用TLC測(cè)定反應(yīng)完全為止。真空下除去反應(yīng)混合物中的揮發(fā)性物質(zhì)，然后用冰冷的水處理反應(yīng)混合物。將該懸浮液在0～5℃攪拌，并過(guò)濾。固體用冰冷的水洗滌，于40℃于通風(fēng)爐中干燥，得到14.4g(粗產(chǎn)率為87％)標(biāo)題化合物，為淺褐色固體，m.p.235-245℃(分解)。MS(Cl/CH4)264(M+H)；EI263。該化合物使用本文中所述的或WO91/19717中所述閉環(huán)的方法可以轉(zhuǎn)化為2-甲基-多環(huán)鳥(niǎo)嘌呤衍生物。
制備例5.11，7-二氫-2-[(2R-羥基-R-環(huán)戊基)氨基]-1-甲基-8-[[(4-三氟甲基)苯基]甲基]-6H-嘌呤-6-酮 將90g制備例4.1的產(chǎn)物、36.3g 2R-羥基-R-環(huán)戊胺、和151ml iPr2NEt(Hunig′s堿)于151ml NMP中的混合物回流(～110℃)24小時(shí)(直至用TLC鑒定反應(yīng)完全為止)。使混合物達(dá)到室溫，加入1L冰冷的水，劇烈攪拌1小時(shí)，然后將其傾入到3.5L水中。攪拌18小時(shí)，過(guò)濾，并在40℃于通風(fēng)爐中干燥，得到87g(81％物料衡算)標(biāo)題化合物，為淺褐色固體，它適用于進(jìn)一步的反應(yīng)。MS(Cl/CH4)408(M+H)；EI407(M)；m.p.285℃(分解)。
下面舉例制備2-芐基-多環(huán)鳥(niǎo)嘌呤衍生物。
實(shí)施例1 步驟1將6-氨基-3-甲基-5-(苯基甲基氨基)嘧啶-2，4-二酮(12.3g)、苯乙酸(6.80g)、DEC(9.55g)及DMAP(1.0g)溶于無(wú)水DMF中，將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物傾入到冰上，過(guò)濾產(chǎn)物，用Et2O洗滌，得到 使用適宜的起始原料，和基本上相同的方法，也可以制備下列化合物 步驟2將化合物1.1(5.0g)溶于150ml POCl3中，并回流8小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻，并傾入到300ml己烷中。使反應(yīng)混合物放置0.5小時(shí)。潷析去溶劑，冷卻剩余的殘余物，用3N NaOH將其調(diào)至pH8，用3×200ml CH2Cl2萃取，干燥并蒸發(fā)溶劑。殘余物經(jīng)柱色譜法純化(2∶98MeOH∶CH2Cl2)，得到產(chǎn)物 使用適宜的起始原料和基本上相同的方法，也可制備下列化合物 步驟3將化合物1.2(2.70g)、反式-2-羥基環(huán)戊胺(1.40g)和i-Pr2NEt(5.20ml)懸浮于10ml NMP中，并密封反應(yīng)容器。將混合物在120～125℃保持6-8小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，加入20ml冰水，并過(guò)濾沉淀。用冷水洗滌沉淀，干燥，得到產(chǎn)物 使用適宜的起始原料和基本上相同的方法，也可制備下列化合物 步驟4向化合物1.3(2.75g，6.45mmol)的CH2Cl2溶液中加入2.30g SOCl2(19.35mmol)，并將反應(yīng)混合物攪拌過(guò)夜。反應(yīng)混合物用冷的2N NaOH洗滌、干燥，蒸發(fā)溶劑。殘余物經(jīng)硅膠色譜法純化，用CH2Cl2/CH3OH(98∶2)洗脫，得到產(chǎn)物 使用適宜的起始原料和基本上相同的方法，也可制備下列化合物 步驟5將化合物1.4(4.00g)和10％ Pd/C(4.00g)懸浮于100mlCH3OH中，加入NH4HCO2并回流6小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，過(guò)濾，并蒸發(fā)溶劑。向所得殘余物中20ml水，調(diào)pH至8，用CH2Cl2萃取，干燥并蒸發(fā)溶劑，得到標(biāo)題化合物(1)1H NMR(CDCl3+drop ofCD3OD，200MHz)δ1.50(1H，m)，1.65-2.00(5H，m)，2.28(1H，J＝7.50&12.50Hz)，3.28(3H，s，NCH3)，4.18(2H，s，CH2Ph)，4.75(1H，t，J＝7.00Hz)，4.90(1H，t，J＝7.00Hz)，7.30(5H，m，C6H5).
使用相同的方法，氫化步驟4的化合物1.4a-1.4c，得到下列化合物
實(shí)施例2 將化合物1.4d(2.0g)溶于100ml無(wú)水EtOH中。加入用HCl氣飽和的5ml EtOH，和20％Pd(OH)2(2.0g)。將反應(yīng)混合物在60psi氫化24小時(shí)。用NH4OH堿化反應(yīng)混合物，過(guò)濾，并蒸發(fā)溶劑。再將殘余物溶于CH2Cl2中，用水洗滌，干燥，蒸發(fā)溶劑。殘余物經(jīng)柱色譜法純化(95∶5CH2Cl2∶MeOH)，得到標(biāo)題化合物1H NMR(CDCl3+drop of CD3OD，300MHz)δ1.50-2.00(5H，m)，2.25(1H，dd，J＝13.50和5.20Hz)，2.95(6H，s，N(CH3)2)，3.35(3H，s，NCH3)，4.05(2H，s，CH2C6H4NMe2)，4.72(1H，t，J＝7.00Hz)，4.88(1H，t，J＝7.00Hz)，6.70和7.15(4H，2d，J＝8.0Hz，C6H4NMe2).
使用相同的方法，處理化合物1.4e和1.4f，分別得到化合物2A和2B 實(shí)施例3 在THF(15ml)中制備LDA(1.2mmol)，并冷卻至-78℃。加入(+)-順式-5，6a，7，8，9，9a-六氫-5-甲基-3-(苯基甲基)-環(huán)戊二烯并[4.5]咪唑并[2，1-b]嘌呤-4-酮(1.0mmol)的THF溶液，并將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌0.5小時(shí)。加入4-芐氧基苯甲醛(1.0mmol)的THF溶液，將反應(yīng)混合物緩慢溫?zé)嶂?40℃，并在-40℃攪拌0.5小時(shí)。反應(yīng)用飽和NH4Cl溶液停止，蒸發(fā)溶劑。按實(shí)施例2所述方法進(jìn)行操作，得到標(biāo)題化合物1H NMR(CDCl3＋drop of CD3OD，300MHz)δ1.60(1H，m)，1.70-2.00(4H，m)，2.20(1H，dd，J＝10.00和4.00Hz)，3.30(3H，s，NCH3)，4.20(2H，s，CH2C6H4OH)，4.72(1H，t，J＝7.00Hz)，4.88(1H，t，J＝7.00Hz)，6.75和7.12(4H，2d，J＝8.0Hz，C6H4OH).
使用適宜的起始原料和基本上相同的方法，也可制備下列化合物 實(shí)施例4 步驟1按與實(shí)施例3所述類(lèi)似的方式，使(+)-順式-5，6a，7，8，9，9a-六氫-5-甲基-3-(苯基甲基)-環(huán)戊二烯并[4，5]-咪唑并[2，1-b]嘌呤-4-酮與LDA反應(yīng)，然后與4-(1H-吡咯-1-基)苯甲醛反應(yīng)。步驟2在-78℃，向步驟1產(chǎn)物(54mg，0.11mmol)的無(wú)水THF(15ml)和液態(tài)氨(35ml)溶液中加入鈉片(24mg，1.0mmol)。將混合物在-78℃攪拌5分鐘，然后加入固體NH4Cl以停止反應(yīng)。室溫蒸發(fā)液態(tài)氨。殘余物用CH2Cl2/CH3OH(9∶1)研制、過(guò)濾，用MgSO4干燥，并濃縮。殘余物進(jìn)行色譜法純化，用CHCl3/MeOH(95∶5)洗脫，得到9.8mg(23％)標(biāo)題化合物。Cl MS387(M+1，100％)；1H-NMR(300MHz，CDCl3)d1.50-2.67(m，6H)，3.36(s，3H)，4.15(s，2H)，4.70(t，1H，J＝6Hz)，4.87(t，1H，J＝8Hz)，6.28-6.30(m，2H)，7.00-7.02(m，2H)，7.23-7.38(m，4H)實(shí)施例5 步驟1將實(shí)施例1.4b化合物(4.40g)和鹽酸吡啶(5.8g)的混合物加熱到170℃，并在此溫度下維持4.5小時(shí)。冷卻至室溫，加入飽和NaHCO3的冰冷的溶液，用CH2Cl2萃取，用鹽水洗滌有機(jī)層，用MgSO4干燥，過(guò)濾，并濃縮，得到一種固體，F(xiàn)AB MS428(M+H)。步驟2將步驟1的一部分產(chǎn)物(0.62g)懸浮于DMF(80ml)中，冷卻至0℃，加入N-苯基三氟甲磺酰胺(0.57g)和K2CO3(0.39g)。使反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，并在此溫度下維持過(guò)夜，然后將反應(yīng)混合物傾入到冰水(0.7L)中，用EtOAc萃取，用鹽水洗滌有機(jī)層，用MgSO4干燥，過(guò)濾并濃縮至干。步驟3將一部分步驟2的殘余物(0.52g)溶于二噁烷(13ml)中，加入4-甲氧基苯基三甲基錫(0.5g)(由4-溴苯甲醚與叔丁基鋰和氯化三甲基錫反應(yīng)制備)、LiCl(0.125g)、Pd(PPh3)4(0.04g)和催化量的BHT。在氮?dú)夥障?，將反?yīng)混合物加熱回流15小時(shí)，冷卻至室溫，用10％NH4OH堿化，用EtOAc萃取。用鹽水洗滌有機(jī)層，用MgSO4干燥，過(guò)濾，濃縮至干。殘余物用硅膠色譜法純化，用CH2Cl2/CH3OH(90∶10)洗脫，得到淺黃色固體，EI MS(70ev)517(m+，100％)。步驟4將步驟3的固體(0.36g)溶于CH3OH(50ml)中，加入NH4NCO2(0.66g)，和10％Pd/C(0.3g)。將混合物加熱回流43小時(shí)，然后加入更多的NH4HCO2(0.66g)，并繼續(xù)加熱8小時(shí)，冷卻至室溫，用硅藻土過(guò)濾，濃縮至干，并將殘余物分配于10％NaHCO3和CH2Cl2中。有機(jī)層用MgSO4干燥，濃縮至干，殘余物用硅膠色譜法純化，用CH2Cl2/EtOH/NH4OH(90∶10∶1)洗脫，得到標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體[α]D21＝+113.9°(MeOH)；EV MS(70ev)427(m+，60％)，398(100％).
實(shí)施例6 步驟1在室溫和N2氣氛下，向順式-5，6a，7，8，9，9a-六氫-5-甲基環(huán)戊二烯并[4，5]-咪唑并[2，1－b]嘌呤-4(3H)-酮(3.38g，14.6mmol)和NaOAc(1.44g，17.5mmol)的HOAc(70ml)溶液中加入溴(0.91ml，17.5mmol)。反應(yīng)混合物在50℃攪拌16小時(shí)，過(guò)濾固體，用CHCl3洗滌，空氣中曬干，得到2-溴衍生物，為白色固體(3.75g，83％)。
1H-NMR(400MHz，DMSO－d6)δ1.68－2.24(m，6H)，3，32(s，3H)，4.81(t，1H，J＝7Hz)，5.19(t，1H，J＝7Hz)，10.18(brs，1H)；ClMS232(100％)，310(27％)，312(25％)；[α]D19.8＝+100.6°(c0.63，CH3OH).步驟2在室溫下，在N2氣氛中，向鋅粉(1.70g，26mmol)和無(wú)水THF溶液中加入1，2-二溴乙烷(0.086ml，1.0mmol)，并在65℃攪拌1分鐘。在0℃下滴加2-溴甲基萘(4.75g，21.5mmol)的無(wú)水THF(11ml)溶液，并在0℃攪拌1小時(shí)，然后在室溫?cái)嚢?小時(shí)。將一部分上清液(3.3ml，約5.4mmol)與步驟1的產(chǎn)物(0.166g，0.535mmol)、Pd(PPh3)4(0.062g，0.0544mmol)和PPh3(0.028g，0.11mmol)在NMP(2ml)中在100℃于氬氣氛中加熱20小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，將所得殘余物溶于CHCl3－CH3OH(9－1)中，用飽和NaHCO3洗滌，有MgSO4干燥，并濃縮。有快速色譜法分離，用CHCl3－CH3OH(97－3)洗脫，得到標(biāo)題化合物(0.079g，40％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.47-2.28(m，6H)，3.30(s，3H)，4.27-4.35(ABq，2H)，4.68(t，1H，J＝7Hz)，4.81(t，1H，J＝7Hz)，7.40-7.80(m，7H)；ClMS372(M+1，100％)；[α]D21.7＝+78.5°(c0.41，CHCl3).
實(shí)施例7 按與實(shí)施例6類(lèi)似的方法，使用適宜的起始原料，制備標(biāo)題化合物1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.49-2.28(m，6H)，3.36(s，3H)，4.13(s，2H)，4.73(t，1H，J＝7Hz)，4.87(t，1H，J＝7Hz)，7.26-7.27(m，4H)；ClMS356(100％)，358(33％)；[α]D21.8＝+101.0°(c0.41，CHCl3).
實(shí)施例8 步驟1將2-芐基-4-氨基-5-咪唑甲酸乙酯(0.89g，3.63mmol)和CH3NCO(8ml)和吡啶(15ml)溶液回流2小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，蒸發(fā)溶劑，用EtOAc萃取殘余物，用水洗滌，干燥并蒸發(fā)。殘余物經(jīng)柱色譜法純化，用2％MeOH的CH2Cl2溶液洗脫。TLC Rf＝0.3(5％MeOHin CH2Cl2)；MS303(M+1)；1H NMR(CDCl3，200MHz)δ1.32(3H，t，CH3CH2O)，2.90(3H，d，NHCH3)，4.05(2H，s，CH2Ph)，4.30(2H，q，OCH2Me)，7.35(5H，m，C6H5).步驟2將步驟1產(chǎn)物(0.85g)在10％(重量)NaOH(15ml)中的溶液回流0.5小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，用HOAc將反應(yīng)混合物調(diào)節(jié)至pH6，并過(guò)濾。在高真空下將固體干燥過(guò)夜。1H NM(DMSO，200MHz)δ3.15(3H，s，NCH3)，3.95(2H，s，CH2Ph)，7.28(5H，m，C6H5).步驟3將步驟2的產(chǎn)物(0.84g)在POCl3(30ml)中的溶液回流24小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，傾入到己烷(100ml)中，并于室溫下放置0.5小時(shí)。潷析溶劑，所得膠狀物用冰冷的水處理，將其用2N NaOH中和，用CH2Cl2(2×100ml)萃取，干燥，并蒸發(fā)溶劑。殘余物用柱色譜法純化，用5％MeOH的CH2Cl2溶液洗脫。TLCRf＝0.45(5％MeOHin CH2Cl2)；1H NMR(CDCl3，200MHz)δ3.80(3H，s，NCH3)，4.30(2H，s，CH2Ph)，7.35(5H，m，C6H5).步驟4將步驟3產(chǎn)物(0.2g，0.73mmol)、1-氨基-1-環(huán)戊烷基甲醇(0.17g，1.45mmol)和(i-Pr2NEt)(0.25ml，1.45mmol)懸浮在NMP(2ml)中，并將反應(yīng)混合物在130℃保持6小時(shí)。將反應(yīng)混合物傾入到冰/水上，以沉淀出產(chǎn)物。過(guò)濾出產(chǎn)物，將其在高真空中干燥。TLC Rf＝0.28(5％CH3OHinCH2Cl2)；MS354(M+1)Fab；1H NMR(CDCl3+drop of CD3OD，200MHz)δ1.60-2.00(8H，m)，3.45(3H，s，NCH3)，3.80(2H，s，CH2OH)，4.26(2H，s，CH2Ph)，7.32(5H，m，C6H5).步驟5在室溫下用SOCl2(0.05ml)處理步驟4產(chǎn)物(0.08g，0.22mmol)的CH2Cl2(10ml)懸浮液過(guò)夜。反應(yīng)混合物用CH2Cl2稀釋?zhuān)美涞?N NaOH洗滌，干燥并蒸發(fā)。粗標(biāo)題化合物用柱色譜法純化，用5％MeOH的CH2Cl2溶液洗脫，得到標(biāo)題化合物。MS336(M+1)；1HNMR(CDCl3＋drop of CD3OD，200MHz)δ1.60-2.00(8H，m)，3.56(3H，s，NCH3)，4.18(2H，bs，CH2)，4.22(2H，s，CH2Ph)，7.30(5H，m，C6H5).
實(shí)施例9 步驟1按與實(shí)施例8步驟4中所述方法處理實(shí)施例8步驟3產(chǎn)物(0.16g，0.58mmol)和2-氨基-2-甲基丙醇(0.13g，1.45mmol)的溶液。MS328(M＋1)FAB；1H NMR(CDCl3＋drop of CD3OD，200MHz)δ1.45(6H，s，(CH3)2C)，3.45(3H，s，NCH3)，3.75(2H，s，CH2OH)，4.20(2H，s，CH2Ph)，7.30(5H，m，C6H5).步驟2按實(shí)施例8步驟5中的方法，處理步驟1產(chǎn)物，制得標(biāo)題化合物粗品。粗產(chǎn)物經(jīng)柱色譜法純化，用7％CH3OH的CH2Cl2溶液洗脫，得到標(biāo)題化合物。TLC Rf＝0.60(7％CH3OH－in CH2Cl2)；MS310(M＋1)；1HNMR(CDCl3＋drop of CD3OD，200MHz)δ1.45(6H，s，(CH3)2C)，3.40(3H，s，NCH3)，3.90(2H，s，CH2)，4.16(2H，s，CH2Ph)，7.35(5H，m，C6H5).
實(shí)施例10 步驟1使用實(shí)施例8步驟4的方法，處理實(shí)施例8步驟3產(chǎn)物(0.20g，0.73mmol)和(R)-2-氨基-3-甲基-1-丁醇(0.15g，1.45mmol)。MS341；TLC Rf＝0.40(10％MeOHin CH2Cl2)；1H NMR(CDCl3＋drop of CD3OD，200MHz)δ0.96和0.98(6H，2d，(CH3)2CH)，2.00(1H，dt，CH(Me)2)，3.45(3H，s，NCH3)，3.65和3.75(2H，2dd，J＝15.00and 6.5Hz，CH2OH)，4.12(2H，s，CH2Ph)，7.28(5H，m，C6H5).步驟2按實(shí)施例8步驟5所述方法，用SOCl2(0.14g，0.08ml)處理步驟1產(chǎn)物(0.11g，0.32mmol)。粗產(chǎn)物用柱色譜法純化，用7％CH3OH-CH2Cl2洗脫，得到標(biāo)題化合物。TLC Rf＝0.45(10％CH3OHin CH2Cl2)；MS324(M＋1)；1HNMR(CDCl3＋drop of CD3OD，200MHz)δ1.00and1.05(6H，2d，(CH3)2CH)，2.10(1H，m)，3.62(3H，s，NCH3)，4.25(2H，s，CH2Ph)，4.15(1H，m)，4.40(2H，m)，7.28(5H，m，C6H5).
實(shí)施例11 步驟1 將2-氯-1-甲基-7-(苯基甲基)嘌呤-6-酮(1g)、1-氨基-7-羥基二環(huán)[3.3.0]辛烷鹽酸鹽(0.65g)、(i-Pr2NEt)(1.25ml)和NMP(3ml)的混合物在封閉管中在140℃加熱60小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并傾入水中。過(guò)濾收集固體，將其溶于CH2Cl2中，并用硅膠色譜法純化，用CH2Cl2/CH3OH(95/5)洗脫，得到固體。FAB MS380(M＋H，100％)。將該固體的一部分(0.82g)溶于CH2Cl2(5ml)中，加入SOCl2(0.5ml)。將反應(yīng)混合物攪拌2小時(shí)，分配于NaHCO3和CH2Cl2中。有機(jī)層用鹽水洗滌，用MgSO4干燥，過(guò)濾并濃縮至干，得到一種固體。EI MS(70ev)361(M+，100％)。步驟2 在-78℃將步驟1產(chǎn)物(0.36g)加入到LDA(1.2mmol)的THF(2ml)溶液中。將反應(yīng)混合物攪拌0.5小時(shí)，然后加入胡椒醛(0.18g)的THF溶液，并在-78℃繼續(xù)攪拌1小時(shí)。反應(yīng)用HOAc(0.1ml)停止，并將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，然后分配于EtOAc與NaHCO3之間。有機(jī)層用鹽水洗滌，用MgSO4干燥，過(guò)濾，并濃縮至干，得到一種固體。EI MS(70ev)511(M+，100％)。步驟3將步驟2產(chǎn)物(0.37g)、20％氫氧化鈀/炭(0.15g)、EtOH(75ml)和濃HCl(0.6ml)的混合物置于H2氣氛(60psi)中達(dá)60小時(shí)。通過(guò)硅藻土過(guò)濾除去催化劑，濃縮濾液至干，并將殘余物分配于NaHCO3和CH2Cl2之間。有機(jī)層用鹽水洗滌，用MgSO4干燥，過(guò)濾，并濃縮至干。該殘余物經(jīng)硅膠色譜法純化，用CH2Cl2/CH3OH(95/5)洗脫，得到標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體。mp.239-240℃，El HRMS計(jì)算值C22H23N5O3405.1801，實(shí)測(cè)值405.1806。
實(shí)施例12 步驟1A在室溫下，將m－CPBA(9.5g，0.55mol)加入到1，4-二氫呋喃(3.8ml，0.050mol)的CH2Cl2(100ml)溶液中，并攪拌16小時(shí)。過(guò)濾固體，用NaHCO3(飽和)洗滌濾液。用MgSO4干燥，濃縮，得到澄清油狀物(2.2g，51％)。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ3.65(d，2H，J＝10.5Hz)，3.79(s，2H)，4.02(d，2H，J＝10.6Hz).B將R-(+)-α-甲基芐胺(14ml，0.011mol)與步驟A產(chǎn)物(10g)和水(2ml)在100℃加熱24小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，固體用CH2Cl2-己烷重結(jié)晶兩次(1.2g)。HPLC顯示純度＞91％。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ1.37(d，3H，J＝6.7Hz)，1.90(brs，2H)，3.03-3.07(m，1H)，3.36(dd，1H，J＝9.3，4.1Hz)，3.66(dd，1H，J＝9.8，2.4Hz)，3.86-3.92(m，2H)，3.98(dd，1H，J＝9.8，4.7Hz)，4.22-4.25(m，1H)，7.26-7.37(m，5H).C將步驟B產(chǎn)物(750mg)與NH4HCO2(820mg)在回流的CH3OH(30ml)中在Pd/C(700mg)存在下加熱1小時(shí)。冷卻、過(guò)濾并濃縮該混合物(300mg，95％)。[α]D25＝-11°(c0.2，MeOH)；1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ2.40(brs，3H)，3.74-3.96(m，3H)，4.26-4.34(m，2H)，4.44-4.48(m，1H).步驟2A將6-氨基-3-甲基-5-(苯基亞甲基氨基)嘧啶-2，4-二酮(2，46g)、4-三氟甲基苯乙酸(5.1g)和DEC(4.8g)在無(wú)水DMF中在室溫下攪拌4小時(shí)。將反應(yīng)混合物傾入到冰上，過(guò)濾固體，用Et2O洗滌(3.80g，88％)。1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ3.00(s，3H)，3.58(s，2H)，4.51(d，1H，J＝14Hz)，4.59(d，1H，J＝14Hz)，6.27(brs，2H)，7.22-7.32(m，5H)，7.38(d，2H，J＝8Hz)，4.59(d，2H，J＝8Hz)，10.45(brs，1H).B將步驟2A產(chǎn)物(1.8g)在POCl3(30ml)中回流16小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，用己烷(600ml)稀釋。4小時(shí)后，從油狀殘余物中潷析出液體層，將殘余物溶于CH2Cl2-CH3OH(9-1)，用NaHCO3(飽和)洗滌，干燥(MgSO4)，并濃縮。殘余物用快速色譜法純化，用CHCl3-CH3OH(97-3)洗脫(700mg，36％)。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ3.72(s，3H)，4.15(s，2H)，5.54(s，2H)，6.99(d，2H，J＝7.9Hz)，7.19-7.34(m，5H)，7.49(d，2H，J＝7.9Hz).步驟3將步驟2B產(chǎn)物(0.68g，1.57mmol)、步驟1C產(chǎn)物(0.28g)和Et3N(0.9ml)于20ml NMP中在120℃加熱16小時(shí)。濃縮混合物，除去NMP。將殘余物溶于CH2Cl2中，用NaHCO3(飽和)洗滌，用MgSO4干燥，并濃縮。殘余物用快速色譜法純化，用CHCl3-CH3OH(95-5)洗脫(320mg，54％)。向所得化合物(320mg)和Et3N(0.6ml)的CH2Cl2(25ml)溶液中滴加CH3SO2Cl(0.12ml)，并攪拌16小時(shí)。溶液用NaHCO3(飽和)洗滌，干燥(MgSO4)，并濃縮。所得殘余物用快速色譜法純化，用CHCl3-CH3OH(97-3)洗脫(250mg，78％)。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ3.50(s，3H)，3.72-3.78(m，2H)，4.10(s，2H)，4.29(d，1H，J＝9.2Hz)，4.47(d，1H，J＝11Hz)，4.96-5.00(m，1H)，5.12-5.17(m，1H)，5.40(d，1H，J＝16Hz)，5.48(d，1H，J＝16Hz)，7.02-7.05(m，2H)，7.15(d，2H，J＝8.3Hz)，7.26-7.30(m，3H)，7.51(d，2H，J＝8.4Hz).步驟4將步驟3產(chǎn)物(190mg)、NH4HCO2(200mg)和10％Pd/C(150mg)在CH3OH(25ml)中回流1.5小時(shí)。過(guò)濾該化合物，用CH2Cl2-CH3OH(9-1)洗滌固體。合并濾液和洗滌物，用NaHCO3(飽和)洗滌，干燥(MgSO4)，并濃縮。所得殘余物用快速色譜法純化，用CHCl3-CH3OH(95-5)洗脫得到標(biāo)題化合物(100mg)，為白色固體。[α]D25＝+125°(c0.4，EtOH)；1H NMR(CDCl3，300MHz)δ3.48(s，3H)，3.69-3.76(m，2H)，4.19(d，1H，J＝10.5Hz)，4.24(s，2H)，4.42(d，1H，J＝11.3Hz)，4.92-4.96(m，1H)，5.10-5.14(m，1H)，7.46(d，2H，J＝8.0Hz)，7.58(d，2H.J＝8.0Hz).
實(shí)施例13 在室溫下，在N2氣氛下，向1.5g制備例5產(chǎn)物在45ml CH2Cl2中的懸浮液中加入1.7ml SOCl2。攪拌該懸浮液，直至反應(yīng)完全。約攪拌18小時(shí)。真空除去揮發(fā)性物質(zhì)，將殘余物溶于CH3OH中，并用過(guò)量Na2CO3+NaHCO3處理。攪拌30分鐘并過(guò)濾，從濾液中除去CH3OH，將殘余物溶于CH3CN中，過(guò)濾，并減壓除去CH3CN。所得泡沫體溶于水中，與陰離子交換樹(shù)脂例如IRA401S OH樹(shù)脂(Rohmand Haas Chemical Company，Philadelphia，Pennsylvania的商標(biāo))一起攪拌20分鐘。過(guò)濾，并濃縮該水溶液，將所得殘余物溶于CH2Cl2中，并將其通過(guò)硅膠管塞，用5％CH3OH的CH2Cl2溶液作洗脫劑。濃縮洗脫液，用CH3CN結(jié)晶所得泡沫體，得到0.9g標(biāo)題化合物，為固體。[α]D26＝+155°；MS(FAB)246(M+H).
實(shí)施例14
在N2氣氛下，向保持在～20℃(水浴)的86.5g制備例5.1的粗產(chǎn)物在1.3L CH3CN中的攪拌的溶液中，緩慢加入39ml SOCl2。撤去水浴，在室溫下劇烈攪拌直到用tlc鑒定反應(yīng)完全為止(約12-18小時(shí))。減壓濃縮，將所得膠狀物溶于1L CH2Cl2和700ml H2O的混合物中，攪拌該混合物，將其通過(guò)緩慢加入NH4OH而中和到pH9.5。過(guò)濾該混合物以除去固體，用CH2Cl2洗滌固體。合并濾液和洗滌液。分層，用～1g NaCl處理水層，然后用2×500ml CH2Cl2再萃取。干燥合并的有機(jī)層(無(wú)水MgSO4)，并真空濃縮，得到74g淺褐色固體，使該固體于225ml EtOAc中成漿，得到35.6g灰白色標(biāo)題化合物。濃縮EtOAc濾液和洗滌液，得到～37g棕黑色固體。將該固體進(jìn)行硅膠柱色譜法純化，得到另外3.6g產(chǎn)物。
上述產(chǎn)物用硅膠色譜法純化，得到淺褐色固體，為標(biāo)題化合物的分析樣品。M.p.235-237℃；MS(El)389(M+)Cl(NH4)390(M+H)[α]D25＝+104°(c1.0，MeOH)。藥物制劑式I化合物可以與適宜的藥物載體混合，以制備適用于腸胃外或口服給藥的藥物組合物。所述藥物組合物可用于治療心血管和肺疾病，例如哺乳動(dòng)物的高血壓和支氣管收縮。
本發(fā)明化合物的有效日抗高血壓劑量(ED50)一般為約1至約100mg/kg哺乳動(dòng)物體重，以單次劑量或分次劑量給藥。欲施用的準(zhǔn)確劑量可由主治臨床醫(yī)師來(lái)決定，并取決于具體化合物是否處于上述范圍內(nèi)、以及個(gè)體的年齡、體重和病癥。
一般地，在治療需要治療高血壓或支氣管收縮的人體時(shí)，本發(fā)明化合物可以以每個(gè)患者約10至約500mg的劑量范圍施用，一般每天給藥許多次，條件是每天全部的日劑量為約10至約2000mg。
本發(fā)明組合物可以口服或腸胃外施用。典型的可注射制劑包括溶液和懸浮液。典型的口服制劑包括片劑、膠囊劑、糖漿劑、懸浮液和酏劑。還可考慮用機(jī)械傳遞系統(tǒng)，例如經(jīng)皮劑型。
用于上述制劑中的一般可接受的藥物載體可列舉的有糖類(lèi)，例如乳糖、蔗糖、甘露糖醇和山梨糖醇；淀粉類(lèi)，例如玉米淀粉、木薯淀粉和馬鈴薯淀粉；纖維素及衍生物，例如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素和甲基纖維素；磷酸鈣，例如磷酸二鈣和磷酸三鈣；硫酸鈉；硫酸鈣；聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇；硬脂酸；堿土金屬硬脂酸鹽，例如硬脂酸鎂和硬脂酸鈣、硬脂酸、植物油，例如花生油、棉籽油、芝麻油、橄欖油和玉米油；非離子型、陽(yáng)離子型和陰離子型表面活性劑，乙二醇聚合物；β-環(huán)胡精；脂肪族醇和水解了的谷類(lèi)固體；以及其他無(wú)毒的配伍性填料、粘合劑、崩解劑、緩沖劑、防腐劑、抗氧化劑、潤(rùn)滑劑、調(diào)味劑等。
下面是口服和腸胃外制劑的典型實(shí)例，其中術(shù)語(yǔ)“活性成分”是指式I化合物。
膠囊用量(mg)活性成分 250.0125.0乳糖 173.086.5玉米淀粉 75.037.5硬脂酸鎂 2.01.0總計(jì) 500.0250.0
將活性成分、乳糖和玉米淀粉混合均勻；然后將硬脂酸鎂摻入到所得粉末中。
將該混合物裝入適合大小的兩段(two-piece)硬明膠膠囊中。
片劑 用量(mg)活性成分 250.0125.0乳糖 161.080.5玉米淀粉 12.06.0水(每千片)120ml60ml(蒸發(fā))(蒸發(fā))玉米淀粉 75.037.5硬脂酸鎂2.01.0總計(jì) 500.0250.0將活性成分與乳糖混合均勻。將少量玉米淀粉與水混合，并加入所得的玉米淀粉糊。然后混合，直到形成均勻的濕物料。將剩下的玉米淀粉加入到剩余的濕物料中，并混合直到得到均勻的顆粒。通過(guò)適宜的研磨機(jī)、使用3/4英寸不銹鋼篩來(lái)篩選顆粒。在適宜的干燥箱中干燥研磨過(guò)的顆粒，直到得到所需的含濕量。通過(guò)適宜的研磨機(jī)使用16目不銹鋼篩研磨干燥了的顆粒。摻入硬脂酸鎂，并將所得混合物壓成所需形狀、厚度、硬度和崩解度的片劑。
注射液 mg/ml活性成分 5.00對(duì)羥基苯甲酸甲酯0.80
對(duì)羥基苯甲酸丙酯 0.10乙二胺四乙酸二鈉 0.10檸檬酸一水合物 0.08葡萄糖 40.0注射用水加至1.0ml將對(duì)羥基苯甲酸酯類(lèi)在60～70℃溫度下溶于部分注射用水中，并將該溶液冷卻至20～30℃，加入并溶解所有其他賦形劑和活性成分。將溶液制成最終體積，用無(wú)菌膜過(guò)濾之，并裝入無(wú)菌容器中。
2-芐基多環(huán)鳥(niǎo)嘌呤類(lèi)化合物的生物學(xué)活性本發(fā)明化合物可用于抑制磷酸二酯酶。已知這些磷酸二酯酶水解平滑肌中的cGMP。cGMP含量高是與血管平滑肌的舒張有關(guān)的，結(jié)果隨后導(dǎo)致血壓降低。因此，據(jù)信通過(guò)抑制這些磷酸二酯酶，將使肌肉中的cGMP水平得到保持或升高，并使血壓隨后下降。體內(nèi)抗高血壓活性是在自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)中經(jīng)口服測(cè)定的。
磷酸二酯酶的體外抑制評(píng)估本發(fā)明化合物對(duì)于水解鳥(niǎo)苷一磷酸(cGMP)的兩種磷酸二酯酶的抑制。第一種酶，即鈣-calmodulin依賴性磷酸二酯酶(CaM-PDE)是不完全純的酶，它是從牛主動(dòng)脈勻漿中獲得的，并通過(guò)DEAE-纖維素和calmodulin-親合色譜法來(lái)純化的。所述酶被Ca-calmodulin活化了幾倍，并對(duì)cGMP具有選擇性，盡管該酶也水解cAMP。第二種酶，即cGMP磷酸二酯酶(cGMP-PDE)是一種均質(zhì)酶，它是從牛肺獲得的，并用離子交換色譜法、凝膠過(guò)濾法、和蔗糖梯度離心法純化的。cGMP-PDE對(duì)于cGMP具有高選擇性。牛主動(dòng)脈勻漿和牛主動(dòng)脈內(nèi)皮和血管平滑肌細(xì)胞的一次培養(yǎng)物均含有一種性質(zhì)上與肺同功酶非常類(lèi)似的酶。
酶的測(cè)定使用Biomek Automated Pipetting Station進(jìn)行的。將本發(fā)明化合物溶于蒸餾水中或DMSO中，并用10％DMSO稀釋。所述化合物是在幾個(gè)以對(duì)數(shù)間隔的濃度、一般為0.1、1.0、10和100μM最終濃度下試驗(yàn)的。
測(cè)定中含有下列組分1μM底物3H-cGMP50mM Tris-HCl，pH7.5，5mM MgCl20.5mg/ml蛇毒堿性磷酸酶0.1μM Calmodulin和1mM CaCl2(僅用于CaM-PDE)測(cè)定是通過(guò)加入酶開(kāi)始的，并通過(guò)加入10mM異丁基甲基黃嘌呤而終止，異丁基甲基黃嘌呤是一般的磷酸二酯酶抑制劑。所述測(cè)定在室溫下進(jìn)行25分鐘，以達(dá)到5-10％底物水解。然后，使帶負(fù)電荷的底物通過(guò)結(jié)合到陰離子交換樹(shù)脂(AG1-X8)中并經(jīng)離心或過(guò)濾而從鳥(niǎo)苷中分離出來(lái)，產(chǎn)物是通過(guò)對(duì)剩余的可溶性物質(zhì)進(jìn)行閃爍計(jì)數(shù)(以個(gè)數(shù)/分鐘)(cpm)表示)來(lái)定量的。百分抑制率按下式計(jì)算％抑制＝100-[(cpm化合物-空白樣)/(cpm對(duì)照組-空白樣)×100]活性以IC50值表示，即抑制酶活性的50％所需的濃度。
對(duì)大鼠的抗高血壓活性本發(fā)明化合物降低血壓的能力可以用清醒的自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)進(jìn)行體內(nèi)評(píng)估。雄性SHR購(gòu)自Taconic Farms，GermantownNew York，并且當(dāng)用乙醚麻醉時(shí)大約為16-18周齡。尾(腹側(cè)尾)動(dòng)脈用聚乙烯管(PE50)插管，并按Baum，T等人，J.Cardiovasc.Pharmacol.Vol5，pp.655-667，(1983)所述方法記錄血壓和心率。將大鼠置于塑料的圓筒形籠子中，在此它們迅速恢復(fù)知覺(jué)。在給藥化合物之前，使鼠的血壓和心率穩(wěn)定大約90分鐘。所述化合物作為在0.4％甲基纖維素載體水溶液中的溶液或懸浮液通過(guò)進(jìn)食針經(jīng)口給藥。所述化合物或0.4％甲基纖維素載體水溶液以4ml/kg的體積對(duì)已禁食過(guò)夜的SHR施用?；钚砸云骄獕?MBP)的降低(以毫米汞柱(mmHg)為單位)表示。由所述化合物誘發(fā)的變化與適合的安慰劑組中的變化比較?！癗T”表示所述化合物在該測(cè)定中沒(méi)有試驗(yàn)。
2-芐基-四環(huán)鳥(niǎo)嘌呤類(lèi)化合物的活性
順式-5，6a，7，8，9，9a-六氫-5-甲基-2-苯基-3-(苯基甲基)環(huán)戊二烯并[4，5]咪唑并[2，1-b]嘌呤-4(3H)-酮(化合物A)和順式-5，6a，7，8，9，9a-六氫-5-甲基環(huán)戊二烯并[4，5]咪唑并[2，1-b]-嘌呤-4(3H)-酮(化合物B)，即在WO91/19717中具體公開(kāi)的化合物的活性如下化合物 PDE IC50 SHRA CaM0.2μM MBP的降低，在25mpk6mmHgB CaM33μM MBP的降低，在25mpk32mmHgMBP的降低，在10mpk8mmHg
權(quán)利要求
1.具有下列結(jié)構(gòu)式的化合物或其可藥用鹽 其中R1、R2和R3獨(dú)立地選自氫、低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、鹵素、羥基、(二低級(jí)烷基)氨基、4-嗎啉基、1-吡咯烷基、1-吡咯基、-CF3、-OCF3、苯基和甲氧基苯基；或者R1和R2一起為亞甲二氧基；或者R1和R2與它們各自所連的碳原子一起形成苯環(huán)；和Ra為氫，并且Rb和Rc與它們各自所連的碳原子一起形成含有5個(gè)碳原子的飽和環(huán)；或者Ra為低級(jí)烷基，Rb為氫或低級(jí)烷基，并且Rc為氫；或者Ra、Rb和它們所連的那個(gè)碳原子一起形成含有5-7個(gè)碳原子的飽和環(huán)，并且Rc為氫；或者Ra為氫，并且Rb和Rc與它們各自所連的碳原子一起形成四氫呋喃環(huán)；或者Ra和Rb與它們所連的那個(gè)碳原子一起、以及Rb和Rc與它們各自所連的碳原子一起分別形成含有5-7個(gè)碳原子的飽和環(huán)。
2.權(quán)利要求1所述化合物，其中R1和R3各自為氫。
3.權(quán)利要求1所述化合物，其中R1和R3各自為氫，且R2為氫、-CF3、-OCF3、甲基、甲氧基、氟、苯基、甲氧基苯基、二甲氨基、1-吡咯烷基、或1-吡咯基；或者其中R1和R2一起形成亞甲二氧基且R3為氫。
4.權(quán)利要求1、2或3中任何一項(xiàng)所述化合物，其中Ra為氫且Rb和Rc與它們各自所連碳原子一起形成5個(gè)碳原子的飽和環(huán)；或者Ra為低級(jí)烷基，Rb為氫或低級(jí)烷基，且Rc為氫；或者Ra、Rb和它們所連的那個(gè)碳原子一起形成5個(gè)碳原子的飽和環(huán)，且Rc為氫；或者Ra為氫，且Rb、Rc和它們各自所連的碳原子一起形成一四氫呋喃環(huán)；或者Ra和Rb與它們所連的那個(gè)碳原子一起、以及Rb和Rc與它們各自所連的碳原子一起分別形成5個(gè)碳原子的飽和環(huán)。
5.權(quán)利要求1、2或3中任何一項(xiàng)所述的化合物，其中Ra為低級(jí)烷基、Rb為低級(jí)烷基或氫，且Rc為氫Ra和Rb與它們所連的那個(gè)碳原子一起形成5個(gè)碳原子的飽和環(huán)，且Rc為氫；或者Ra為氫，且Rb和Rc與它們各自所連的碳原子一起形成5個(gè)碳原子的飽和環(huán)。
6.具有下列結(jié)構(gòu)式的權(quán)利要求1所述的化合物， 其中Ra為氫且Rb和Rc與它們各自所連的碳原子一起形成5個(gè)碳原子的飽和環(huán)，并且其中R1、R2和R3如下表中所定義
7.選自下列化合物的權(quán)利要求1所述的化合物2′-芐基-螺[環(huán)戊烷]-1′，7′(8′H)-[3′H]-咪唑并[2，1-b]嘌呤-4′-(5′H)-酮；2′-芐基-5，7，7-三甲基-3 H-咪唑并[2，1-b]嘌呤-4-(5H)-酮；(+)-2-芐基-7，8-二氫-5-甲基-7-(1-甲基乙基)-1H-咪唑并[2，1-b]-嘌呤-4(5H)-酮；(+，-)-6a，7，8，9，9a，10，11，11a-八氫-5-甲基-2-(3，4-亞甲二氧基苯基甲基)-3H-環(huán)戊二烯并[6a，14，5]咪唑并[2，1-b]嘌呤-4(5H)-酮；和(+)-順式-6a，7，9，9a-四氫-5-甲基-2-[4-(三氟甲基)-苯基甲基]-3H-呋喃并[3′，4′∶4，5]咪唑并[2，1-b]嘌呤-4(5H)-酮。
8.一種藥物組合物，該藥物組合物包含在可藥用載體中的有效量的權(quán)利要求1中所述的化合物。
9.一種藥物組合物，該藥物組合物包含在可藥用載體中的有效量的權(quán)利要求6或7中任何一項(xiàng)中所述化合物。
10.權(quán)利要求1中所述化合物用于制備治療高血壓、心絞痛、支氣管收縮、血管成形術(shù)后的再狹窄、動(dòng)脈粥樣硬化、局部缺血、外周血管疾病、或受益于血小板抑制的疾病、或保持鳥(niǎo)苷3′∶5′-環(huán)狀一磷酸(cGMP)水平的藥物的用途。
11.制備權(quán)利要求8中所述藥物組合物的方法，該方法包含將權(quán)利要求1中所定義的化合物與可藥用載體混合。
12.治療高血壓、心絞痛、支氣管收縮、血管成形術(shù)后的再狹窄、動(dòng)脈粥樣硬化、局部缺血、外周血管疾病、或受益于血小板抑制的疾病，或者保持鳥(niǎo)苷3′∶5′-環(huán)狀一磷酸(cGMP)水平的方法，該方法包含對(duì)需要所述治療的哺乳動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求1所述的化合物。
13.制備式II的多環(huán)鳥(niǎo)嘌呤的方法 其中R4為H、烷基、或被芳基或-OH取代的烷基；R5為H、鹵素、-CF3、烷氧基、烷硫基、烷基、環(huán)烷基、-SO2NH2、-NH2、單烷基氨基、二烷基氨基、羥基烷氨基、氨基烷氨基、-COOH、烷氧羰基、氨基羰基、芳基、取代的芳基，或者被芳基、取代的芳基、-OH、烷氧基、-NH2、單烷基氨基、或二烷基氨基取代的烷基；Ra1、Rb1、Rc1和Rd1獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基或芳基；或者(Ra1和Rb1)或(Rc1和Rd1)或(Rb1和Rc1)可以形成5-7個(gè)碳原子的飽和環(huán)，或者(Ra1和Rb1)一起、以及(Rb1和Rc1)一起各自形成5-7個(gè)碳原子的飽和環(huán)，其中各環(huán)可任選含有一個(gè)硫或氧原子，并且環(huán)中碳原子可任選被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代鏈烯基、炔基、-OH、-COOH、烷氧羰基、烷基、或被-OH、-COOH或烷氧羰基取代的烷基；或者所述飽和環(huán)可以具有與鄰接的芳環(huán)共享的兩個(gè)相鄰碳原子；和n為0或1；該方法包含a)還原式III的亞硝基嘧啶，并且用式R5COL(IV)的酰化劑(其中R5如上所定義，且L代表離去基團(tuán))處理被還原的亞硝基嘧啶，得到酰氨基嘧啶V， 其中R4如上所定義，Z為＝O，或-OR6，其中R6為烷基；和虛線“----”表示一任選的雙鍵，即當(dāng)Z為＝O時(shí)，1位含有氫，并且在環(huán)上1和2位之間存在一單鍵，或者當(dāng)Z為-OR6，其中R6為烷基時(shí)，在環(huán)上1和2位之間存在一雙鍵， 其中R4、R5、虛線和Z如上所定義；b)使酰氨基嘧啶V與有效量的鹵化/環(huán)化劑反應(yīng)，生成式VI的鹵代嘌呤 其中R4和R5如上所定義，和X為鹵素；c)在堿存在下，使鹵代嘌呤與式VII的胺反應(yīng)，得到取代的氨基嘌呤VIII 其中Ra1、Rb1、Rc1、Rd1和n如上所定義， 其中R4、R5、Ra1、Rb1、Rc1、Rd1和n如上所定義，和d)用適宜的脫水劑使取代的氨基嘌呤閉環(huán)。
14.權(quán)利要求13所述的方法，其中在步驟a)中，用酰化劑在?；呋瘎┖?或偶合劑和/或相轉(zhuǎn)移催化劑的存在下處理被還原的亞硝基嘧啶。
15.用于制備式V的酰氨基嘧啶的方法 其中R4、R5、虛線和Z如權(quán)利要求13中所定義，該方法包含還原權(quán)利要求13中所定義的亞硝基嘧啶(III)，并用?；瘎┨幚肀贿€原的亞硝基嘧啶。
16.權(quán)利要求15中所述的方法，其中用?；瘎┰邗；呋瘎┖?或偶合劑和/或相轉(zhuǎn)移催化劑的存在下處理被還原的亞硝基嘧啶。
17.用于制備式VI的鹵代嘌呤的方法 其中R4為氫、烷基、或被芳基或羥基取代的烷基；R5為氫、鹵素、三氟甲基、烷氧基、烷硫基、烷基、環(huán)烷基、氨基磺?；?、氨基、單烷基氨基、二烷基氨基、羥基烷氨基、氨基烷氨基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、芳基、取代的芳基，或被芳基、取代的芳基、羥基、烷氧基、氨基、單烷基氨基或二烷基氨基取代的烷基；和X為鹵素；該方法包含使權(quán)利要求13中所定義的酰氨基嘧啶(V)與有效量的鹵化/環(huán)化劑反應(yīng)。
18.權(quán)利要求17所述的方法，其中使酰氨基嘧啶(V)與有效量的鹵化/環(huán)化劑在一種或多種另加的鹵化物源和/或相轉(zhuǎn)移催化劑存在下反應(yīng)，生成鹵代嘌呤(VI)。
19.權(quán)利要求17所述的方法，該方法進(jìn)一步包含下列步驟在堿的存在下，使鹵代嘌呤(VI)與式VII的胺反應(yīng)，生成權(quán)利要求13中所定義的取代的氨基嘌呤(VIII)， 其中Ra1、Rb1、Rc1、Rd1和n如權(quán)利要求13中所定義。
20.權(quán)利要求19中所述的方法，該方法進(jìn)一步包含下列步驟用適宜的脫水劑使取代的氨基嘌呤VIII閉環(huán)，得到如權(quán)利要求13中所定義的多環(huán)鳥(niǎo)嘌呤(II)。
21.用于制備式VIII的取代的氨基嘌呤的方法 其中R4為氫、烷基、或被芳基或羥基取代的烷基；R5為氫、鹵素、三氟甲基、烷氧基、烷硫基、烷基、環(huán)烷基、氨基磺?；?、氨基、單烷基氨基、二烷基氨基、羥基烷氨基、氨基烷氨基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、芳基、取代的芳基，或被芳基、取代的芳基、羥基、烷氧基、氨基、單烷基氨基或二烷基氨基取代的烷基；Ra1、Rb1、Rc1和Rd1獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基或芳基；或者(Ra1和Rb1)或(Rc1和Rd1)或(Rb1和Rc1)可以形成5-7個(gè)碳原子的飽和環(huán)，或者(Ra1和Rb1)一起、以及(Rb1和Rc1)一起各自形成5-7個(gè)碳原子的飽和環(huán)，其中各環(huán)可任選含有一個(gè)硫或氧原子，并且環(huán)中碳原子可任選被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代鏈烯基、炔基、-OH、-COOH、烷氧羰基、烷基、或被-OH、-COOH或烷氧羰基取代的烷基；或者所述飽和環(huán)可以具有與鄰接的芳環(huán)共享的兩個(gè)相鄰碳原子；和n為0或1該方法包含使權(quán)利要求13中的所定義的鹵代嘌呤(VI)與式VII的胺反應(yīng)， 其中Ra1、Rb1、Rc1、Rd1和n如上所定義。
22.權(quán)利要求21的方法，其中鹵代嘌呤VI與胺VII在所加入的堿的存在下進(jìn)行反應(yīng)，制得取代的氨基嘌呤VIII。
23.權(quán)利要求21的方法，該方法進(jìn)一步包含下列步驟用適宜的脫水劑使取代的氨基嘌呤VIII閉環(huán)，得到多環(huán)鳥(niǎo)嘌呤II。
24.酰氨基嘧啶V 其中R4為氫、烷基、或被芳基或羥基取代的烷基；R5為氫、鹵素、三氟甲基、烷氧基、烷硫基、烷基、環(huán)烷基、氨基磺?；?、氨基、單烷基氨基、二烷基氨基、羥基烷氨基、氨基烷氨基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、芳基、取代的芳基，或被芳基、取代的芳基、羥基、烷氧基、氨基、單烷基氨基或二烷基氨基取代的烷基；Z為＝O，或-OR6，其中R6為烷基；和虛線“----”表示一任選的雙鍵，即當(dāng)Z為＝O時(shí)，1位含有氫，并且在環(huán)上1和2位之間存在一單鍵，或者當(dāng)Z為-OR6，其中R6為烷基時(shí)，在環(huán)上1和2位之間存在一雙鍵，條件是若Z為＝O，則R4和R5不能均為甲基。
25.鹵代嘌呤VI 其中R4為氫、烷基、或被芳基或羥基取代的烷基；R5為氫、鹵素、三氟甲基、烷氧基、烷硫基、烷基、環(huán)烷基、氨基磺?；?、氨基、單烷基氨基、二烷基氨基、羥基烷氨基、氨基烷氨基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、芳基、取代的芳基，或被芳基、取代的芳基、羥基、烷氧基、氨基、單烷基氨基或二烷基氨基取代的烷基；和X為鹵素。
26.氨基嘌呤VIII 其中R4為氫、烷基、或被芳基或羥基取代的烷基；R5為氫、鹵素、三氟甲基、烷氧基、烷硫基、烷基、環(huán)烷基、氨基磺?；?、氨基、單烷基氨基、二烷基氨基、羥基烷氨基、氨基烷氨基、羧基、烷氧羰基、氨基羰基、芳基、取代的芳基，或被芳基、取代的芳基、羥基、烷氧基、氨基、單烷基氨基或二烷基氨基取代的烷基；Ra1、Rb1、Rc1和Rd1獨(dú)立地代表H、烷基、環(huán)烷基或芳基；或者(Ra1和Rb1)或(Rc1和Rd1)或(Rb1和Rc1)可以形成5-7個(gè)碳原子的飽和環(huán)，或者(Ra和Rb)一起、以及(Rb1和Rc1)一起各自形成5-7個(gè)碳原子的飽和環(huán)，其中各環(huán)可任選含有一個(gè)硫或氧原子，并且環(huán)中碳原子可任選被一個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代鏈烯基、炔基、-OH、-COOH、烷氧羰基、烷基、或被-OH、-COOH或烷氧羰基取代的烷基；或者所述飽和環(huán)可以具有與鄰接的芳環(huán)共享的兩個(gè)相鄰碳原子；和n為0或1。
27.用于制備如權(quán)利要求1中所定義的式I化合物的方法，該方法包含a)在脫水劑存在下，環(huán)化下式的氨基嘌呤 其中R1、R2、R3、Ra、Rb和Rc如權(quán)利要求1中所定義，且Q為氫或芐基，并且若Q為芐基時(shí)，則還原所得的1-芐基化合物，得到式I化合物；或b)還原下式的多環(huán)鳥(niǎo)嘌呤，得到式I化合物， 其中R1、R2、R3、Ra、Rb和Rc如權(quán)利要求1中所定義，或c)使下式的四環(huán)鳥(niǎo)嘌呤 與其中Ar為任選被取代的苯基或萘基的式Ar-CH2-ZnBr化合物反應(yīng)，得到式I化合物，其中Ra為氫、且Rb和Rc與它們各自所連的碳原子一起形成5個(gè)碳原子的飽和環(huán)。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了式I的抗高血壓和支氣管擴(kuò)張化合物或其可藥用鹽以及制備這些化合物的方法，其中R
文檔編號(hào)C07D473/40GK1118600SQ94191306
公開(kāi)日1996年3月13日 申請(qǐng)日期1994年2月24日 優(yōu)先權(quán)日1993年2月26日
發(fā)明者D·圖西安, B·A·麥基特里克, Y·夏, S·查卡拉曼尼爾, D·加卡, D·J·迪本尼迪托, M·庫(kù)格曼 申請(qǐng)人:先靈公司