專利名稱：2-(吡唑-3-基)碳代青霉烯衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一類抗菌化合物，具體地說(shuō)涉及碳代青霉烯類，它們的制備方法，含這類化合物的藥物和獸醫(yī)用組合物，它們的中間體，以及它們用于抗菌治療的用途。
碳代青霉烯如伊米配能(imipenem)，式(A)化合物
具有強(qiáng)的，較廣的抗菌譜。(參見US 3 950 357和US 4 194 047；Merck和Co.)但是，這類碳代青霉烯對(duì)于腎臟脫氫肽酶-1(DHP-1)的水解作用很脆弱，因此限制了它在化學(xué)治療中的應(yīng)用。對(duì)于伊米配能來(lái)說(shuō)，可通過(guò)與DHP-1抑制劑聯(lián)合給藥來(lái)解決這個(gè)問(wèn)題。
也可以通過(guò)對(duì)碳代青霉烯核進(jìn)行化學(xué)改進(jìn)使它對(duì)于DHP-1具有穩(wěn)定性，例如引入1β-甲基取代基，如化合物麥羅派南(meropen-em)，式(B)化合物
(參見Shih D.H.et al..，Heterocycles，1984，21，29和Sun-agawa M.et al..，J.Antibiotics，1990，43，519)。近來(lái)，已發(fā)展為1β-氨基烷基取代基(參見EP 0433759，Bristol-Mey-ers Squibb)。
另一可選擇的使其對(duì)DHP-1的穩(wěn)定性增加的途徑是使用2-位碳取代的碳代青霉烯，例如，2-芳基，2-雜芳基(heteroaryl)和2-芳香雜環(huán)(heteroaromatic)碳代青霉烯(US 4543257，US4260627，US 4962101，US 4978659，EP 014493，EP0414489，EP0010316和EP 0030032 Merck & Co)和2-(取代的)甲基碳代青霉烯(Schmidt et al，J.Antibiotics，41，1988，780)。
英國(guó)專利1593524，Merck & Co.公開了一系列5-員芳雜環(huán)碳代青霉衍生物，包括二唑基和四唑基化合物。但是，當(dāng)是吡唑基衍生物時(shí)，雜環(huán)化合物連接到碳代青霉烯核的C-4位。
其它結(jié)構(gòu)改進(jìn)是在2-位引入取代的乙烯基-C(Ra)＝CHRb，其中，例如，Ra為氫，或甲基，且Rb為氫或低級(jí)烷基(EP 0330108；Fujisawa)或Ra和Rb選自氫，低級(jí)烷基，氨基羰基，低級(jí)烷氧基，氰基，硝基和低級(jí)烷氧羰基(EP 0430037，Banyu PharmaceuticalCo.)。在1β-甲基取代基存在下，這些改進(jìn)并不顯示有對(duì)DHP-1的穩(wěn)定性。
我們驚奇地發(fā)現(xiàn)在2-位的其它類型的結(jié)構(gòu)改進(jìn)具有很大的進(jìn)步。
依照本發(fā)明，提供了具有通式(I)結(jié)構(gòu)的化合物
其中R為
其中Rα為氫，任意取代的(C1-6)烷基或任意取代的芳基；其中Rβ為氫，任意取代的(C1-6)烷基或任意取代的芳基；或Rα和Rβ共同形成任意取代的5或6員雜環(huán)，具有或不具有附加雜原子；R1為(C1-6)烷基，可被氟，被任意易離去羥基保護(hù)基保護(hù)的羥基，或被任意易離去氨基保護(hù)基保護(hù)的氨基取代或未取代；R2為氫或甲基；-CO2R3為羧基或羧酸鹽陰離子或R3為易離去羧基保護(hù)基。
通式(I)化合物具有廣譜抗菌活性，并顯示出對(duì)DHP-1的良好的穩(wěn)定性。
對(duì)于Rα和Rβ來(lái)說(shuō)，適宜的(C1-6)烷基包括具有1至6個(gè)碳原子的直鏈和支鏈烷基，例如，甲基，乙基，正丙基和異丙基，優(yōu)選乙基和甲基。
Rα和Rβ為C1-6烷基的代表性例子是Rα和Rβ同時(shí)為甲基或乙基。特別優(yōu)選的例子是當(dāng)Rα為乙基時(shí)Rβ為甲基。
對(duì)于Rα和Rβ來(lái)說(shuō)，適宜的(C1-6)烷基的取代基包括，例如，鹵素，羥基，(C1-6)烷氧基，羧基及其鹽，(C1-6)烷氧羰基，氨基甲?；?，單-或二(C1-6)烷基氨基甲?；被酋；瑔?或二(C1-6)烷基氨基磺?；?，氨基，單-或二(C1-6)烷基氨基，(C1-6)?；被?，脲基，(C1-6)烷氧羰基氨基，氨基羰氧和單-或二(C1-6)烷基氨基羰氧，2，2，2-三氯乙氧羰氨基，芳基，雜環(huán)基，氧代，酰基，雜芳基，(C1-6)烷硫基，芳硫基，雜環(huán)硫基，(C1-6)烷烴-亞磺?；蓟鶃喕酋；?，(C1-6)烷烴-磺酰基，芳基磺酰基，(C1-6)烷氧亞氨基，肟基，亞肼基，benzohydroxyimoyl，和2-硫代苯carbohydro-xyimoyl。優(yōu)選的取代基包括，氨基甲?；?，芳基。特別是苯基，和雜芳基。
對(duì)于R1來(lái)說(shuō)，適宜的(C1-6)烷基包括具有1至6個(gè)碳原子的直鏈和支鏈烷基。優(yōu)選的烷基包括，甲基，乙基，異丙基，其中，特別優(yōu)選乙基。
對(duì)于R1來(lái)說(shuō)，優(yōu)選的(C1-6)烷基是一般在烷基的l-位具有羥基，氟或氨基取代基的烷基。特別優(yōu)選的R1是(R)-1-羥乙基。
適宜的R2是氫。
這里所述的“芳基”包括苯基和萘基。
適宜的芳基，包括苯基和萘基，可被最多為5個(gè)，優(yōu)選最多為3個(gè)取代基任意取代。
Rα或Rβ為芳基的代表例是苯基。
芳基上適宜的任意取代基包括鹵素，(C1-6)烷基，芳基(C1-4)烷基，(C1-6)烷氧基，(C1-6)烷氧(C1-6)烷基，鹵代(C1-6)烷基，羥基，氨基，單-和二-N-(C1-6)烷基氨基，?；被?，羧基，羧酸鹽，羧酸酯，氨基甲?；?，單-和二-N-(C1-6)烷基氨基甲?；?，(C1-6)烷氧羰基，(C1-6)烷氧羧酸酯，芳氧羰基，(C1-6)烷氧羰基-(C1-6)烷基芳基，氧基，脲基，胍基，磺酰氨基，氨基磺?；?，(C1-6)烷硫基，(C1-6)烷基亞磺?；?，(C1-6)烷基磺酰基，雜環(huán)基和雜環(huán)基(C1-4)烷基。另外，兩個(gè)相鄰環(huán)上的碳原子可通過(guò)(C3-5)亞烷基相連，形成一碳環(huán)。
這里所說(shuō)的“雜原子”包括一個(gè)或多個(gè)氧，氮，硫原子。
這里所說(shuō)的“雜芳基”包括每個(gè)環(huán)中最多含有4個(gè)雜原子的單個(gè)和稠合芳香環(huán)。雜原子選自氧，氮，硫。環(huán)可以是未取代的或取代的，例如，最多3個(gè)取代基。每個(gè)雜芳環(huán)一般具有5或6個(gè)環(huán)原子。稠合雜芳環(huán)可以包括碳環(huán)且必須包括僅一個(gè)雜芳環(huán)。
這里所說(shuō)的“雜環(huán)基”和“雜環(huán)的”，除非另外定義，包括芳香的或非芳香的單環(huán)和稠環(huán)。每個(gè)環(huán)中最多含有4個(gè)雜原子，雜原子選自氧，氮，硫。環(huán)可以是未取代的或取代的，例如，最多3個(gè)取代基。每個(gè)雜環(huán)一般具有4至7個(gè)，優(yōu)選5或6個(gè)環(huán)原子。稠合雜環(huán)可以包括碳環(huán)且必須包括僅一個(gè)雜環(huán)。
優(yōu)選的雜芳基或雜環(huán)上的取代基選自鹵素，(C1-6)烷基，芳基(C1-4)烷基(C1-6)烷氧基，(C1-6)烷氧(C1-6)烷基，鹵代(C1-6)烷基，羥基，氨基，單-和二-N-(C1-6)烷基氨基，?；被人猁}，羧酸酯，氨基甲酰基，單-和二-N-(C1-6)烷基羰基，(C1-6)烷氧羧酸酯，芳氧羰基，(C1-6)烷氧羰基(C1-6)烷基，芳基，氧基，脲基，胍基，磺酰氨基，氨基磺?；?，(C1-6)烷硫基，(C1-6)烷基亞磺酰基，(C1-6)烷基磺?；s環(huán)基和雜環(huán)基(C1-4)烷基。
R1中合適的羥基和氨基保護(hù)基是現(xiàn)有技術(shù)中已知的，它們可在常規(guī)條件下除去，且不破壞分子的剩余部分。例如在“有機(jī)化學(xué)中的保護(hù)基”(T.W.Greene，Wiley-Interscience，New York，2ndedition，1991)中，已詳細(xì)討論了如何保護(hù)羥基和氨基的方法以及分裂所得被保護(hù)的衍生物的方法。特別適合的羥基保護(hù)基包括，例如，三有機(jī)硅烷基如，三烷基甲硅烷基和有機(jī)氧羰基，如烯丙氧羰基，三氯乙氧羰基，4-甲氧芐氧羰基和4-硝基芐氧羰基。特別適合的氨基保護(hù)基包括烷氧羰基，4-甲氧芐氧羰基和4-硝基芐氧羰基。
由于本發(fā)明的碳代青霉烯要用于藥物組合物，應(yīng)理解在通式(I)中的優(yōu)選化合物是藥學(xué)上可接受的，即通式(Ia)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的在體內(nèi)可水解的酯
其中R，R1和R2定義如上。
通式(I)化合物中R3為氫時(shí)，是非藥學(xué)上可接受的鹽，它主要用作中間體制備通式(I)中R3為氫的化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽。通式(I)化合物中的鹽可通過(guò)常規(guī)鹽交換反應(yīng)制備。
同樣地，通式(I)的羧基保護(hù)衍生物，即通式(I)中R3為離去的羧基保護(hù)基的化合物，可用于制備通式(I)中R3為氫的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。包括在R3范圍內(nèi)的易離去的羧基保護(hù)基是酯基包括藥學(xué)上可接受的在體內(nèi)可水解的酯基。
適用于基團(tuán)-CO2R3的易離去的羧基保護(hù)基包括形成羧酸酯衍生物的基團(tuán)，包括在體內(nèi)可水解的酯。優(yōu)選易分裂保護(hù)基的衍生物。
適合的形成酯的羧基保護(hù)基是那些在常規(guī)條件下易離去的基團(tuán)。對(duì)于R3來(lái)說(shuō)，這些基團(tuán)包括芐基，4-甲氧芐基，苯甲酰甲基，4-硝基芐基，4-吡啶基甲基，2，2，2-三氯乙基，2，2，2-三溴乙基，叔丁基，叔戊基，烯丙基，二苯基甲基，三苯基甲基，金剛烷基，二芐氧苯基，4-甲基硫代苯基，四氫呋喃-2-基，四氫吡喃-2-基，五氯苯基，丙酮基，對(duì)甲苯磺酰乙基，甲氧甲基，甲硅烷基，甲錫烷基，或含磷基團(tuán)，通式-N＝CHRx的肟基，其中Rx為芳基或雜環(huán)基，或如下定義的在體內(nèi)可水解的酯基。
可從上述任意酯中根據(jù)特定的R3基團(tuán)采用相應(yīng)的常規(guī)方法再生羧基，例如，酸或堿催化的水解，酶催化的水解或光化學(xué)方法，反應(yīng)條件應(yīng)保證分子的剩余部分基本不受影響。
優(yōu)選的形成酯的羧基保護(hù)基是4-甲氧芐基，它可通過(guò)使用氯化鋁和苯甲醚除去；4-硝基芐基，它可通過(guò)使用鐵粉和氯化銨(1M溶液)或使用鈀-炭催化劑氫化或鋅粉和磷酸鹽緩沖液除去，如在Heterocycles，1993，36(2)，1727；或烯丙基，它可通過(guò)使用三苯基膦鈀和三苯基膦除去。
優(yōu)選地，當(dāng)使用羥基，氨基和羧基保護(hù)基時(shí)，選擇可在同樣條件下，在一步簡(jiǎn)單反應(yīng)中可除去的保護(hù)基；例如，烯丙氧羰基(羥基保護(hù)基)和烯丙基(羧基保護(hù)基)在使用三苯基膦鈀和三苯基膦時(shí)可同時(shí)除去。另一適合的組合是三烷基甲硅烷基(羥基保護(hù)基)和4-甲氧芐基(羧基保護(hù)基)，在使用氯化鋁和苯甲醚時(shí)可同時(shí)除去。
藥學(xué)上可接受的在體內(nèi)可水解的酯基的例子包括那些在體內(nèi)易斷裂并留下母體酸或其鹽的基團(tuán)。合適的酯基包括通式(a)，(b)，(c)和(d)的酯基-C02CH(Ra)O.CO.Rb(a)-CO2RcNRdRe(b)-CO2CH2ORf(c)-CO2CH(Ra)O.CO.C6H4YCOCH(Rg)NH2(d)其中Ra是氫，(C1-6)烷基，(C3-7)環(huán)烷基，甲基，或苯基；Rb是(C1-6)烷基，(C1-6)烷氧基，(C3-7)環(huán)烷基氧，苯基，芐基，(C3-7)環(huán)烷基，(C1-6)烷基(C3-7)環(huán)烷基，1-氨基(C1-6)烷基，1-(C1-6烷基)氨基(C1-6)烷基；或Ra和Rb一起形成由一個(gè)或兩個(gè)甲氧基任意取代的1，2-亞苯基；Rc是任意被甲基或乙基取代的(C1-6)亞烷基；Rd和Re可相同或不同，為(C1-6)烷基；Rf為(C1-6)烷基；Rg為氫或最多被三個(gè)取代基任意取代的苯基，取代基選自鹵素，(C1-6)烷基，或(C1-6)烷氧基；且Y為氧或NH。
合適的藥學(xué)上可接受的在體內(nèi)可水解的酯基的例子包括，例如，酰氧烷基如乙酰氧甲基，新戊酰氧甲基，α-乙酰氧乙基，α-新戊酰氧乙基，1-(環(huán)己基氧羰氧)乙基，和(1-氨基乙基)-羰氧甲基；烷氧羰氧烷基，如乙氧羰氧甲基和α-乙氧羰氧乙基；環(huán)烷氧羰氧烷基，如環(huán)己基氧羰氧甲基(hexmetil)和1-(壞己基氧羰氧)乙基(hexetil)；二烷基氨基烷基，特別是二低級(jí)烷基氨基烷基如二甲基氨基甲基，二甲基氨基乙基，二乙基氨基甲基或二乙基氨基乙基；內(nèi)酯基如2-苯并[c]呋喃酮基和二甲氧2-苯并[c]呋喃酮基；和連接于第二個(gè)β-內(nèi)酰胺抗生素或β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的酯基。
另一個(gè)藥學(xué)上可接受的在體內(nèi)可水解的酯基具有下列通式結(jié)構(gòu)
其中Rh是氫，(C1-6)烷基或苯基。
合適的藥學(xué)上可接受的通式(I)化合物的羧酸鹽包括金屬鹽，例如鋁，堿金屬鹽如鈉或鉀，堿土金屬鹽如鈣或鎂；和銨鹽或取代的銨鹽，例如那些與低級(jí)烷胺如三乙胺，羥基-低級(jí)烷胺如2-羥基乙胺，雙-(2-羥乙基)-胺或三-(2-羥乙基)-胺，環(huán)烷基胺如二環(huán)己基胺，或與普魯卡因，二芐胺，N，N-二芐基亞乙基二胺，1-ephenamine，N-甲基嗎啉，N-乙基哌啶，N-芐基-b-苯乙胺，脫氫樅胺，N，N′-雙-脫氫樅胺，亞乙基二胺或N-甲基葡糖胺；或堿性氨基酸如賴氨酸、精氨酸、或吡啶型堿如吡啶，可力丁或喹啉；或其它已知可與青霉素和頭孢菌素成鹽的胺。其它可用的鹽包括鋰鹽和銀鹽。
由于本發(fā)明的碳代青霉烯化合物要用于藥物組合物，應(yīng)理解所提供的化合物為基本純的形式。例如，至少50％純度，優(yōu)選75％純度，更優(yōu)選95％純度(％為重量比)。制備的不純的化合物可制備其更純的形式用于藥物組合物。盡管對(duì)本發(fā)明中間體化合物的純度無(wú)苛刻要求，但應(yīng)理解為使用基本純的形式制備碳代青霉烯化合物。優(yōu)選地，只要可能，本發(fā)明化合物以晶體形式獲得。
當(dāng)本發(fā)明的化合物從有機(jī)溶劑中結(jié)晶或重結(jié)晶時(shí)，結(jié)晶用的溶劑可能留在結(jié)晶產(chǎn)物中。本發(fā)明包括這些溶劑化物。同樣地，本發(fā)明的一些化合物可能從含水溶劑中結(jié)晶或重結(jié)晶，在這種情況下，結(jié)晶產(chǎn)物中可能有水合水。本發(fā)明包括化學(xué)計(jì)量的水合物以及制備方法如冷凍干燥所得的含水量不同的化合物。
本發(fā)明范圍內(nèi)的特定化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽和體內(nèi)可水解的酯如下(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-(1，5-二甲基吡唑-3-基)-碳代青霉-2-烯-3-羧酸，(5R，6S)-6-[(1R)-羥乙基]-2-(1-苯基吡唑-3-基)-碳代青霉-2-烯-3-羧酸，(5R，6S)-6-[(1R)-羥乙基]-2-(1-甲基吡唑-3-基)-碳代青霉-2-烯-3-羧酸，(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-(5-甲基-1-苯乙基吡唑-3-基)-碳代青霉-2-烯-3-羧酸，(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-[1-(2-苯乙基)吡唑-3-基]-碳代青霉-2-烯-3-羧酸，(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-[4，5，6，7-四氫吡啶并-(1，2-b)-吡唑-2-基]-碳代青霉-2-烯-3-羧酸，(5R，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-(5-甲基-1-苯基吡唑-3-基)-碳代青霉-2-烯-3-羧酸，(5R，6S)-2-[5，6-二氫-4H-吡咯并(1，2-b)-吡唑-2-基]-6-[(R)-1-羥乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸，(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-(1，5-二乙基吡唑-3-基)-碳代青霉-2-烯-3-羧酸，(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-(1-乙基-5-甲基吡唑-3-基)-碳代青霉-2-烯-3-羧酸，(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-[1-(2-羥乙基)-5-甲基吡唑-3-基]-碳代青霉-2-烯-3-羧酸，(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-[1-甲氧乙基)-5-甲基吡唑-3-基]-碳代青霉-2-烯-3-羧酸，(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-(5-芐基-1-甲基吡唑-3-基)-碳代青霉-2-烯-3-羧酸，(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-{[5-甲基-1-[2-(1-甲基-四唑-5-基硫代)乙基]-吡唑-3-基]}-碳代青霉-2-烯-3-羧酸，(5R，6S)-2-[1-(2-乙酰氨基乙基)-5-甲基吡唑-3-基)-6-[(IR)-1-羥乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸，(5R，6S)-2-[1-(2-甲基硫代乙基)-5-甲基吡唑-3-基)-6-[(1R)-1-羥乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸，(5R，6S)-6-[1(R)-1-羥乙基]-2-(1-甲基-5-乙基吡唑-3-基)-碳代青霉-2-烯-3-羧酸，(5R，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[5-甲基-1-(2-甲基磺酰基乙基)吡唑-3-基)-碳代青霉-2-烯-3-羧酸，和(5R，6S)-2-[1-(2-(N，N-二甲基氨基羰基氧)乙基]-5-甲基吡唑-3-基]-6-[(1R)-1-羥乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸。
本發(fā)明的碳代青霉烯化合物可按現(xiàn)有技術(shù)中關(guān)于抗生素的制備技術(shù)將其制成各種制劑以傳統(tǒng)方式對(duì)人體給藥或作為獸醫(yī)用藥，因而發(fā)明本身也包括了含有本發(fā)明的抗菌化合物的藥物組合物，例如，通式(Ia)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或其體內(nèi)可水解的酯，與藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑形成的藥物組合物?？蓪⒔M合物制成適于任何途徑給藥的形式，例如，口服，胃腸外給藥或局部施用。可將組合物制成片劑，膠囊，粉劑，顆粒，錠劑，乳液或液體制劑，如口服或無(wú)菌的胃腸道外給藥溶液或懸浮液。用于口服給藥的片劑和膠囊可制成單元?jiǎng)┝啃问讲⒖珊谐Ｒ?guī)賦形劑，例如，阿拉伯膠糖漿，明膠，山梨醇，黃蓍膠，或聚乙烯吡咯烷酮；填充物，例如，乳糖，庶糖，玉米淀粉，磷酸鈣，山梨醇或甘氨酸；成片潤(rùn)滑劑，例如，硬脂酸鎂，滑石，聚乙二醇或硅膠；崩解劑，例如馬鈴薯淀粉；或可接受的潤(rùn)濕劑如十二烷基硫酸鈉。片劑可按常規(guī)藥學(xué)實(shí)踐中的熟知方法進(jìn)行包衣?？诜后w制劑可制成例如，水劑或油狀懸浮液，溶液劑，乳劑，糖漿劑或酏劑，或制成干燥產(chǎn)品使用前再與水或其它合適的賦形劑混合再生。這些液體制劑可含有常規(guī)添加劑如懸浮劑，例如，山梨醇，甲基纖維素，葡糖漿，明膠，羥甲基纖維素，羧甲基纖維素，硬脂酸鋁膠或氫化可食用脂肪；乳化劑，例如，卵磷脂，脫水山梨醇單油酸酯，或阿拉伯膠；非水賦形劑(可含有可食用油)，例如，杏仁油，油酸，甘油，丙二醇或乙醇；防腐劑，例如對(duì)羥基苯甲酸甲酯或乙酯或山梨酸；如果需要可加入常規(guī)矯味劑或著色劑。栓劑含有常規(guī)栓劑基質(zhì)，例如，可可脂或其它甘油酯。
對(duì)于非腸道給藥而言，可使用本發(fā)明化合物的無(wú)菌賦形劑(優(yōu)選水)制成液體單位劑量形式。根據(jù)所使用的賦形劑和濃度，可將化合物懸浮或溶于賦形劑。制備溶液時(shí)可將化合物溶于注射用水并在裝入藥瓶或安瓿封閉之前過(guò)濾滅菌。優(yōu)選地，試劑如局麻劑，防腐劑和緩沖劑可溶于賦性劑中。為了增加穩(wěn)定性，可將組合物裝入藥瓶冷凍，真空除水。然后將冷凍干燥的干粉封入藥瓶并同時(shí)提供一瓶注射用水以便在使用前再配為液體。制造非腸道給藥的懸浮液基本上采用相同的方法，只是將化合物懸浮于賦形劑代替溶于賦形劑，而且不能使用過(guò)濾滅菌的方法?？蓪⒒衔飸腋∮跓o(wú)菌賦形劑之前暴露于環(huán)氧乙烷中滅菌。優(yōu)選地，組合物中還包括表面活性劑和潤(rùn)濕劑，以便于化合物的均勻分布。
按照給藥方法的不同，組合物可含有0.1％-99.5％重量的，優(yōu)選10-60％重量的活性組分。含有劑量單位的藥物組合物，每單位優(yōu)選含有50-500mg的活性組分。根據(jù)給藥途徑和頻率的不同，對(duì)成人治療使用的劑量?jī)?yōu)選范圍為100mg-12g每天/平均成人患者(體重70kg)，例如，每天1500mg。相應(yīng)的劑量約1.5-170mg/kg每天。優(yōu)選的劑量為每天1-6g。
本發(fā)明化合物的給藥日劑量適于在24小時(shí)內(nèi)分幾次給藥。一般地，(每次)250mg一天給藥4次，但是，最適用于個(gè)體患者的給藥劑量和頻率隨患者的年齡，體重和反應(yīng)不同而不同，個(gè)別情況下，醫(yī)生可選擇較高或較低的劑量和不同的給藥頻率。這些給藥方案包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
當(dāng)本發(fā)明通式(Ia)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或體內(nèi)可水解的酯在上述劑量范圍內(nèi)給藥時(shí)，無(wú)毒性效果。
本發(fā)明還包括治療人體和動(dòng)物細(xì)菌感染的方法，該方法包括給予治療有效劑量的本發(fā)明抗菌通式(Ia)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或體內(nèi)可水解的酯。
另一方面，本發(fā)明也提供了將通式(Ia)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或體內(nèi)可水解的酯用于生產(chǎn)治療細(xì)菌感染藥物的用途。
本發(fā)明的通式(Ia)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或體內(nèi)可水解的酯對(duì)較大范圍的革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌具有抗菌活性，它可用于治療較大范圍的細(xì)菌感染，包括免疫損傷患者。
在其它用途中，本發(fā)明的通式(Ia)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或體內(nèi)可水解的酯可用于治療人體的皮膚，軟組織，呼吸道和尿道感染，還可用于治療牛的乳腺炎。
本發(fā)明的抗菌活性化合物的特殊優(yōu)點(diǎn)是它們對(duì)β-內(nèi)酰胺酶的穩(wěn)定性，因此它們可有效地抵抗產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶的生物體。
本發(fā)明進(jìn)一步提供制備通式(I)化合物的方法，它包括在形成碳代青霉烯環(huán)的條件下處理通式(II)化合物
其中，R，R1和R2定義如上，R3是易離去的羧基保護(hù)基，X是氧或基團(tuán)PR4R5R6，R4，R5和R6可相同或不同，分別是任意取代的(C1-6)烷基或任意取代的芳基，優(yōu)選正丁基或苯基；然后，如果需要，進(jìn)行下面步驟中的幾步或全部除去任意保護(hù)基；將含有羥基取代基的R1轉(zhuǎn)化為含有氨基或氟取代基的R1；和/或?qū)a(chǎn)物轉(zhuǎn)化為鹽。
合適的碳代青霉烯環(huán)形成條件是本領(lǐng)域熟知的。
當(dāng)X為氧時(shí)，合適的環(huán)形成條件包括用通式(III)的三價(jià)有機(jī)磷化合物處理通式(II)化合物PR7(OR8)(OR9) (III)其中R7是(C1-4)烷基，(C1-3)烷氧基或任意被(C1-3)烷基取代的苯基；R8和R9可相同或不同，分別為(C1-4)烷基，烯丙基，芐基，或任意被(C1-3)烷基或(C1-3)烷氧基取代的苯基；可類比在EP 0476649-A(Hoe-chst AG)中描述的方法。通式(III)的合適試劑包括亞磷酸三甲酯，亞磷酸三乙酯，二甲基甲基膦和二乙基甲基膦。一般地，反應(yīng)在有機(jī)溶劑如四氫呋喃，乙酸乙酯，芳香溶劑如苯，甲苯，二甲苯或或鹵代烴溶劑如二氯甲烷，三氯甲烷，或1，1，2-三氯乙烷，溫度在50-180℃之間，優(yōu)選70-165℃之間進(jìn)行。
當(dāng)X為基團(tuán)PR4R5R6，可接照熟知的Wittig環(huán)化路線制備碳代青霉烯(Gunthikonda et al，J.Med.Chem.，1987，30，871)的方法獲得通式(I)化合物。例如，當(dāng)R4，R5和R6分別為苯基時(shí)，該過(guò)程包括閉環(huán)消除三苯基氧化膦。閉環(huán)優(yōu)選的反應(yīng)條件是在40-145℃，更優(yōu)選80-140℃，在惰性溶劑中如苯，甲苯或二甲苯條件下加熱通式(II，X＝PR4R5R6)化合物，優(yōu)選在干燥，并在惰性氣體氛圍下和任意存在自由基消除劑如氫醌的條件下進(jìn)行。當(dāng)R4，R5和R6分別為正丁基時(shí)，環(huán)化反應(yīng)適宜在低溫，例如高于50℃進(jìn)行，可參比在WO92/01695(Beecham Group，用于青霉烯類似物)中描述的方法。
在取代基R1中，如果存在羥基或氨基，可任意被保護(hù)。合適的羥基保護(hù)基包括有機(jī)甲硅烷基，例如，三烷基甲硅烷基，如，三甲基甲硅烷基或叔丁基二甲基甲硅烷基，或三氯乙氧羰基，4-硝基芐氧羰基，4-甲氧芐氧羰基和烯丙氧羰基。合適的氨基保護(hù)基包括烷氧羰基，4-甲氧芐氧羰基和4-硝基芐氧羰基。
對(duì)于保護(hù)基R3合適的選擇包括烯丙基，4-甲氧芐基和4-硝基芐基。當(dāng)然，除去保護(hù)基所需的條件依賴于保護(hù)基的精確屬性。例如，當(dāng)R3為4-甲氧芐基時(shí)，所用條件是三氯化鋁和苯甲醚在二氯甲烷中，溫度為-30至-70℃，當(dāng)R3為烯丙基(丙-2-烯-1-基)時(shí)，可在乙酸乙酯/MDC中結(jié)合使用三苯基膦，2-乙基己醇鈉以及使用四-(三苯基膦)鈀(0)，當(dāng)R3為對(duì)硝基芐基時(shí)，可使用在含水溶劑中如含水的1，4二噁烷，THF，乙醇等，在鈀-炭催化劑存在下氫化。
通式(II)化合物為新化合物，可作為制備通式(I)化合物的中間體。
因此，本發(fā)明的另一方面提供了通式(II)化合物，定義如上。
通式(II)化合物中，X為氧時(shí)，可通過(guò)在?；瘲l件下使通式(IV)化合物
其中，R，R1和R2定義如上，與通式(V)化合物反應(yīng)獲得ClCOCO2R3(V)其中R3為易離去的羧基保護(hù)基；可參比Tetrahedron Letters，25，1984，2395中描述的方法進(jìn)行。
通式(IV)化合物為新化合物，可作為制備通式(II)化合物的中間體。
因此，本發(fā)明的另一方面提供了通式(IV)化合物，定義如上。
通式(II)化合物中，X為PR4R5R6時(shí)，可通過(guò)通式(IV)化合物從下列步驟反應(yīng)獲得(a)在脫水條件下，例如共沸除水條件下，與合適的保護(hù)的通式(VI)的二羥乙酸衍生物或其官能等價(jià)體如水合物反應(yīng)；(OHC)CO2R3(VI)其中，R3為易離去的羧基保護(hù)基；(b)在合適的堿如2，6-二甲基吡啶存在下，用鹵化試劑如亞硫酰氯處理步驟(a)中得到的中間體；且(c)在合適的堿如2，6-二甲基吡啶存在下，用通式(VII)的磷化試劑處理步驟(b)中得到的中間體PR4R5R6(VII)其中，R4，R5和R6定義如上。
通式(IV)化合物可按Tetrahedron lett.，1987，28，507和Can.J.Chem，1988，66，1537中描述的方法制備。在堿如六甲基二硅氮鋰(Lithium hexamethyldisilazide，LHMDS)存在下，用通式(IX)化合物處理通式(VIII)化合物
其中R和R2定義如上；通式(IX)化合物
其中，R1定義如上，且R11為?；?，如乙?；?；通式(IV)化合物也可通過(guò)在路易斯酸如氯化鋅或三甲基甲硅烷基三氟甲烷磺酸鹽存在下，在惰性有機(jī)溶劑如鹵代烴溶劑，例如二氯甲烷中，在室溫用通式(IXa)化合物處理通式(VIIIa)化合物制備。通式(VIIIa)化合物
其中，R和R2定義如上且SiR314為三烷基甲硅烷基，如三甲基甲硅烷基或叔丁基二甲基甲硅烷基，通式(IXa)化合物
其中R1和R11定義如上，且R13可以是氫或氨基保護(hù)基，例如三烷基甲硅烷基如三甲基甲硅烷基；通式(VIIIa)化合物可通過(guò)用三烷基甲硅烷基氯或三烷基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(triflate)和三乙胺在MDC中處理通式(VIII)化合物制備。
如果通式(IXa)中的氨基保護(hù)基R13需要在以后的步驟中除去，可通過(guò)常規(guī)方法做到，如弱酸處理，例如當(dāng)R13為三甲基甲硅烷基時(shí)，使用甲醇和鹽酸或?qū)妆交撬徇拎ゆf。通式(VIII)化合物是本領(lǐng)域內(nèi)熟知的，可通過(guò)下列實(shí)施例中的標(biāo)準(zhǔn)合成方法獲得。通式(IX)化合物是本領(lǐng)域內(nèi)熟知的，可通過(guò)下列例子中的標(biāo)準(zhǔn)合成方法獲得。例如，Het.，1982，17，201(IX，R1為1-羥基乙基)和EP 0234484(IX，R1為1-氟乙基)。
R1為氨基取代的烷基或環(huán)烷基的通式(I)化合物可通過(guò)常規(guī)方法將相應(yīng)的R1含羥基的通式(I)化合物使用Mitsunobu型疊氮置換其羥基，接著催化還原，如J Chem Soc.Perkin I.1982，3011.中描述的方法來(lái)制備。
通式(I)化合物還可通過(guò)下述方法制備，該方法包括通式(X)化合物
其中，R1和R2定義如上，R3為易離去的羧基保護(hù)基，且X2為離去基團(tuán)，與通式(XI)化合物反應(yīng)M-R (XI)其中，M為金屬且R定義如上；反應(yīng)條件是在根據(jù)金屬的特性選擇的交叉-偶合反應(yīng)催化劑存在下的交叉-偶合反應(yīng)條件下進(jìn)行的，反應(yīng)后，如需要可除去保護(hù)基和/或?qū)a(chǎn)物轉(zhuǎn)化為鹽。
合適的保護(hù)基R3包括4-甲氧芐基，4-硝基芐基。
合適的離去基團(tuán)X2的例子包括例如，三氟甲烷磺酰氧，甲烷磺酰氧，4-甲苯磺酰氧，氟磺酰氧，氯，溴，碘和二苯氧磷酰氧。
對(duì)于金屬基團(tuán)M合適的金屬是本領(lǐng)域內(nèi)公知的，包括錫，鋁，鋅，硼，汞和鋯。
金屬基團(tuán)M優(yōu)選的例子包括例如R14R15R16Sn，B(OR)2和ZnCl，其中R14，R15和R16可相同或不同，分別是(C1-6)烷基。優(yōu)選地，金屬基團(tuán)M為有機(jī)錫烷R14R15R16Sn，且R14＝R15＝R16＝甲基或正丁基。
合適的交叉-偶合催化劑是本領(lǐng)域內(nèi)公知的，包括鈀化合物，特別是鈀(0)和鈀(II)化合物，如在“Palladium Reagents in Or-ganic Synthesis”，RF Heck Academic Press Ltd.1985。其中的例子包括三(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0)，四(三苯基膦)鈀(0)，反式二甲基雙(三苯基膦)鈀(II)，和乙酸鈀(II)，芐基雙(三苯基膦)鈀(II)氯化物，雙(三苯基膦)鈀(II)二氯化物。這些鈀試劑優(yōu)選與鹵化物如氯化鋅或氯化鋰結(jié)合使用，并可任意存在鈀的膦配體，例如化合物三芳基膦，如三(4-甲氧苯基)膦或三(2，4，6-三甲氧苯基)膦；三雜芳基膦，如三呋喃基膦，或三芳基胂，如三苯基胂。
當(dāng)M是有機(jī)錫烷R14R15R16Sn-時(shí)，優(yōu)選的催化劑系統(tǒng)是三(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0)，并在氯化鋅和膦化合物存在下。當(dāng)M是ZnCl，優(yōu)選的催化劑是三(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0)，并在膦化合物存在下。
反應(yīng)適宜在惰性非質(zhì)子傳遞極性配位溶劑如四氫呋喃，乙醚，二噁烷，2-二甲氧乙烷，乙腈，二甲基甲酰胺，二甲基亞砜等中，在干燥，情性氣體如氬氣氛圍下進(jìn)行。一般地，反應(yīng)起始溫度較低，如約-78℃，反應(yīng)的最后相在室溫。
在EP 0444889(Merck & Co.)和EP 0430037(Banyu Ph-armaceutical Co.)中有類似方法的描述，其中M為有機(jī)錫烷。
通式(X)的化合物是本領(lǐng)域內(nèi)公知的，可按照在EP 0444889(Merck & Co.)和EP 0430037(Banyu Pharmaceutical Co.)和Tet.Letters，1990，31，2853，Rano等描述的方法獲得。
通式(XI)的化合物是本領(lǐng)域內(nèi)公知的，可按照在heterocycles，1992，33(2)，813中描述的方法獲得。
下列實(shí)施例舉例說(shuō)明本發(fā)明，并不以任何方式限制本發(fā)明的范圍。一般說(shuō)明溶液使用無(wú)水硫酸鎂干燥，且溶劑在減壓下使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去。硅膠柱色譜使用Merck硅膠60，顆粒度＜0.063mm。另注Me，Et，tBu，Ac，Ph分別為甲基，乙基，叔丁基，乙?；交?。實(shí)施例1(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-(1，5-二甲基吡唑-3-基)-碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉制備11，5-二甲基吡唑-3-羧酸乙酯
將2，4-二氧代戊酸乙酯(5.6ml，40mM)溶于預(yù)冷至反應(yīng)溫度8-10℃的冰醋酸(35ml)中。滴加入甲肼(2.0ml，38mM)以使反應(yīng)溫度不高于15℃。在室溫?cái)嚢?0分鐘后，將反應(yīng)液倒入乙酸乙酯和水中。有機(jī)相用飽和碳酸氫鈉溶液，水和鹽水洗滌，用MgSO4干燥。用硅膠柱色譜純化(10×4.5cm)，用二氯甲烷裝柱，50％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫。蒸發(fā)溶劑得到帶色油狀標(biāo)題化合物，靜置結(jié)晶(4.69g)；νmax(CH2Cl2)1717和1223cm-1；δH(CDCl3)1.39(3H，t，J7.13Hz)，2.30(3H，s)，3.85(3H，s)，4.39(2H，q，J7.21Hz)，6.57(1H，s)；E.I.m/e 168(25％)。制備23-乙酰基-1，5-二甲基吡唑
將1，5-二甲基吡唑-3-羧酸乙酯(3.59g，21.4mM)溶于無(wú)水四氫呋喃(70ml)中并冷卻到-100℃在氬氣氛圍下吹氣。然后快速滴加入三甲基甲硅烷基氯(13.5ml，107mM)。然后滴加入甲基鋰(77.7ml，1.1M的乙醚溶液，85.5mM)，使中間反應(yīng)溫度不超過(guò)-85℃。滴加完畢后多相反應(yīng)允許升溫至室溫。真空除去大部分溶劑，然后用乙醇(6ml)再用水(6ml)處理。劇烈攪拌5分鐘后，混合物用乙酸乙酯和水稀釋。用飽和碳酸氫鈉溶液將pH調(diào)到7。分出有機(jī)相用鹽水洗滌用MgSO4干燥。用硅膠柱色譜純化(12×4.25cm)，用二氯甲烷裝柱，先用40％再用60％的乙酸乙酯的己烷溶液洗脫。除去溶劑得到帶色油狀標(biāo)題化合物，室溫靜置固化(1.42g)νmax(CH2Cl2)1679，1551，1448和1373cm-1；δH(CDCl3)2.30(3H，s)，2.54(3H，s)，3.84(3H，s)，6.53(1H，d，J0.55Hz)；E.I.m/e 138(95％)，NH3DCI m/e 139(100％)。制備3(3S，4R)-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧乙基]-4-[(1，5-二甲基吡唑-3-基羰基)甲基]氮雜環(huán)丁-2-酮
在氬氣氛圍下，將3-乙酰基-1，5-二甲基吡唑(0.770g，5.1mM)溶于無(wú)水四氫呋喃(10ml)中。將溶液冷卻至-78℃并快速滴加入六甲基二硅氮鋰(1M己烷溶液，5.1ml；5.1mM)。在-78℃攪拌30分鐘后加入4-乙酰氧-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧乙基]-氮雜環(huán)丁-2-酮的THF(10ml)溶液。在-78℃繼續(xù)攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)液用飽和氯化銨溶液和乙酸乙酯處理。升溫至室溫后，有機(jī)相用水和鹽水處理，用MgSO4干燥。用硅膠柱色譜純化(10×3cm)，用二氯甲烷裝柱，用70％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫。分離出膠狀標(biāo)題化合物(0.539g)。νmax(CH2Cl2)3411，1761，和1679cm-1；δH(CDCl3)0.08(6H，s)，0.86(9H，s)，1.21(3H，d，J6.28Hz)，2.31(3H，s)，2.89(1H，dd，J4.84，2.37Hz)，3.13(1H，dd，J17.12，10.05Hz)，和3.48(1H，dd J17.10，3.41Hz)(ABX)，3.84(3H，s)，4.09(1H，dt，J9.13，2.46Hz)4.13-4.25(1H，m)，6.09(1H，bs)，和6.54(1H，s)；m/e365.2134(C18H3N3O3S，理論值365.2135)。制備4{(3S，4R)-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧乙基]-4-[(1，5-二甲基吡唑-3-基羰基)甲基]-2-氮雜環(huán)丁烷-1-基}三苯基-正膦亞基乙酸烯丙酯
在氬氣氛圍下，共沸除水條件下，將(3S，4R)-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧乙基]-4-[(1，5-二甲基吡唑-3-基羰基)甲基]氮雜環(huán)丁-2-酮(0.736mg，2.0mM)和乙醛酸烯丙酯一水合物(0.662g，5.0mM)溶于苯(25ml)中，并將混合物加熱回流。反應(yīng)回流1小時(shí)后冷卻至室溫。加入三乙胺(約4滴)并將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?6小時(shí)。減壓蒸除溶劑，剩余物溶于70％乙酸乙酯的己烷溶液。用硅膠柱色譜純化(12×3cm)，用70％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫。分離得到1∶1的非對(duì)映的hemiaminals，為黃色油狀物(0.983g)；νmax(CH2Cl2)3683，3517(broad)，1757，1677，和1375cm-1。
在氬氣氛圍下，-10℃，用2，6-二甲基吡啶(0.357ml，3.0mM)和亞硫酰氯(0.225ml，3.0mM)處理THF(15ml)中的非對(duì)映的hemiaminals混合物(0.983g，2.0mM)?；旌衔?10℃攪拌1小時(shí)，所得多相溶液用甲苯處理，并通過(guò)Keiselguhr過(guò)濾。減壓蒸除溶劑。所得剩余物用甲苯研制，并通過(guò)Keiselguhr過(guò)濾。減壓蒸除溶劑得到黃色油狀的非對(duì)映的氯化物混合物(1.064g)。
將上述產(chǎn)物溶于二噁烷(6ml)，并在氬氣氛圍下，用三苯膦(2.15g，8mM)和2，6-二甲基吡啶(0.262ml，2.2mM)處理。反應(yīng)液在室溫?cái)嚢?小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入乙酸乙酯，所得有機(jī)相連續(xù)用5％檸檬酸(a.q.)，飽和碳酸氫鈉(a.q.)和鹽水洗滌。用MgSO4干燥后除去溶劑，粗產(chǎn)物用硅膠柱色譜純化(10×4.5cm)，用二氯甲烷裝柱，70％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫。分離出泡沫狀標(biāo)題化合物(1.01g)。νmax(CH2Cl2)1736，1678，和1610cm-1；m/e(NH3DCI)724(MH+)，(EI)723(M+)。制備5{(5R，6S)-6-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧乙基]-2-[(1，5-二甲基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸烯丙酯
在氬氣氛圍下，將制備2獲得的正膦(0.75g)和氫醌(1mg)溶于無(wú)水甲苯(75ml)中。將反應(yīng)物加熱至回流并攪拌5小時(shí)。冷卻后，蒸除溶劑，產(chǎn)物用硅膠柱色譜純化(7×3cm)，用二氯甲烷裝柱，用50％乙酸乙酯的己烷溶液，再用乙酸乙酯洗脫。分離出結(jié)晶固體標(biāo)題化合物(0.314g)；m.p.(乙酸乙酯/己烷)119℃。νmax(CH2Cl2)2931，1773，1716，1600，和1548cm-1；δH(CDCl3)0.09(6H，s)，0.08(9H，s)，1.27(3H，d，J6.2Hz)2.27(3H，s)，3.12(1H，dd，J6.68，2.74Hz)，3.23(1H，dd，J18.44，9.06Hz)和3.54(1H，dd，J18.37，9.98Hz)(ABX)，3.77(3H，s)，4.11-4.27(2H，m)，4.67-4.86(2H，m)5.25(1H，dd，J10.54，1.21Hz)，5.45(1H，dd，J17.25，1.58Hz)，5.91-6.07(1H，m)7.02(1H，s)； m/e 445.2395(C23H35N3O4Si理論值445.2397)。制備6(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-[(1，5-二甲基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸烯丙酯
將制備3獲得的叔丁基二甲基甲硅烷基醚(0.355g，0.68mM)溶于無(wú)水THF(40ml)中，并用冰醋酸(0.411mg)和四正丁基氟化銨(2.05ml，1.0M的THF溶液)處理，然后室溫?cái)嚢?4小時(shí)。將混合物用乙酸乙酯稀釋，并用飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌。有機(jī)層用MgSO4干燥并減壓蒸餾。剩余物用硅膠柱色譜純化(4×2.5cm)，用乙酸乙酯，再用2％甲醇的乙酸乙酯溶液裝柱和洗脫。除去溶劑，得到結(jié)晶固體標(biāo)題化合物(0.071g)。νmax(CH2Cl2)3603，3506，2973，1774，1719(shoulder)，和1702cm-1；δH(d6-丙酮)1.28(3H，d，J6.3Hz)，2.22(3H，s)，2.94-3.34(2H，m)，3.52(1H，dd，J18.5，10.1Hz)，3.78(3H，s)，4.05-4.25(2H，m)，4.64-4.83(2H，m)5.18-5.24(1H，m)，5.43-5.52(1H，m)，5.92-6.05(1H，m)，6.96(1H，s)；m/e 331.1534(C17H21N3O4理論值331.1532)。制備7(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-[(1，5-二甲基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉
將制備4得到的烯丙酯(0.017g，0.21mM)，三苯膦(0.006g，0.021mM)，2-乙基己醇鈉(0.428ml，0.5M乙酸乙酯溶液)和四(三苯膦)鈀(0)(0.008mg，0.006mM)在二氯甲烷/乙酸乙酯(1∶1，8ml)中的溶液在氬氣氛圍下攪拌1小時(shí)。真空除去溶劑直至出現(xiàn)沉淀，將此多相混合物轉(zhuǎn)入離心管中，離心前加入醚研制，離心后除去上清液。再用醚研制固體，離心并傾析收集固體。將固體在氬氣流下干燥，再將固體溶于水并過(guò)濾(GF/F，0.7μm)。冷凍干燥后分離得到白色松散的固體標(biāo)題化合物(0.044g)；λmax(H2O)297.5nm(ε8769)； νmax(KBr disc)1795，1771，1612，和1586cm-1；δH(D2O)1.28(3H，d，J6.42Hz)，2.23(3H，s)，3.16-3.21(2H，m)，3.47(1H，dd，J5.93，2.85Hz)3.70(3H，s)，4.21-4.28(2H，m)，6.43(1H，s)；m/e(硫甘油，F(xiàn)AB)314(MH+)，336(MNa+)。實(shí)施例2(5R，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-(1-苯基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉制備1(5R，6S)-6-[(1R)-羥乙基]-2-(1-苯基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸對(duì)硝基芐酯在氬氣氛圍下，將(3R，5R，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-氧代-碳代青霉烯-3-羧酸對(duì)硝基芐酯(460mg，1.32mmol)在THF(14ml)中的溶液在丙酮/干冰浴中冷卻，向其中加入二異丙胺(215μl，1.53mmol)，過(guò)5分鐘后再加入三氟甲烷磺酸酐(255μl，1.52mmol)。所得黃色溶液在冷卻下攪拌30分鐘。同時(shí)，在氬氣氛圍下，將三苯胂(42mg，0.14mmol)加入到pd2(dba)3(63mg，0.07mmol)的THF(5ml)溶液中。室溫?cái)嚢?分鐘后，將此深紅色溶液加入到粗的三氟甲磺酸酯溶液中，且燒瓶用THF(2ml)漂洗。將氯化鋅(2.76ml，1.0M的乙醚溶液，2.76mmol)和氯化鋰固體(117mg，2.76mmol)加入混合物，然后再加入1-苯基-3-三丁基甲錫烷基-吡唑(600mg，1.38mmol)的THF(10ml)溶液(使用T.Sakamoto，F(xiàn).Shiga，D.Uchiyama，Y.Kondoand H.Yamanaka，Heterocycles，1992，33，813中描述的方法制備)。將反應(yīng)混合物從冷浴中移開并攪拌3小時(shí)。然后將混合物濃縮，色譜純化(硅膠，乙酸乙酯/己烷)，部分純化的產(chǎn)物用醚研制，得到標(biāo)題化合物(417mg，67％)。υmax(CH2Cl2)1776，1722cm-1；δH(CDCl3)8.24(2H，d，J＝8.8Hz)，7.92(1H，d，J＝2.7Hz)，7.70(4H，m)，7.47(3H，m)，7.32(1H，t，J＝7.3Hz)，5.56(1H，d，J＝13.9Hz)，5.30(1H，d，J＝13.9Hz)，4.31(2H，m)，3.78(1H，dd，J＝18.8，10.0Hz)，3.45(1H，dd，J＝18.8，9.0Hz)，3.28(1H，dd，J＝6.4，2.8Hz)，1.74(1H，d，J＝4.9Hz)，1.41(3H，d，J＝6.3Hz)；m/z474.1545(M+)，計(jì)算值C25H22N4O6474.1538。制備2(5R，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-(1-苯基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉將制備1得到的產(chǎn)物(260mg，0.43mmol)懸浮于THF(1ml)中，用(1∶3)THF/0.35M磷酸鹽緩沖液(pH6)，接著用鋅粉(2g，0.03mol)處理。將混合物在室溫快速攪拌2小時(shí)。過(guò)濾混合物，剩余物用水徹底洗滌。將濾液的pH調(diào)至7，然后用乙酸乙酯洗滌。將水相濃縮至約10ml，粗產(chǎn)物用反相色譜純化(HP 20SS，THF/水混合物)。將含有產(chǎn)物的部分濃縮并冷凍干燥，得到標(biāo)題化合物(72mg，46％)。UV(H2O)λmax307nm(16027)；υmax(KBr disc)1750cm-1；δH(D20)8.02(1H，d，J＝2.5Hz)，7.61(2H，d，J＝8.3Hz)，7.49(2H，t，J＝7.6Hz)，7.36(1H，t，J＝6.9Hz)，6.82(1H，d，J＝2.5Hz)，4.23(2H，m)，3.48(1H，dd，J＝5.4，2.4Hz)，3.27(2H，d，J＝9.0Hz)，1.27(3H，d，J＝6.3Hz)；m/z(硫甘油)384(MNa+)，362(MH+)。實(shí)施例3(5R，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-(1-甲基吡唑-3-基)-碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉制備1(5R，6S)-6-[(1R)-羥乙基]-2-(1-甲基吡唑-3-基)-碳代青霉-2-烯-3-羧酸對(duì)硝基芐酯按照實(shí)施例2制備1的方法得到標(biāo)題化合物(185mg，65％)。υmax(CH2Cl2)1775，1713cm-1；δH(d6丙酮)8.26(2H，d，J＝8.7Hz)，7.85(2H，d，J＝8.7Hz，7.61(1H，d，J＝2.3Hz)，7.22(1H，d，J＝2.3Hz)，5.58(1H，d，J＝14.2Hz)，5.37(1H，d，J＝14.2Hz)，4.28(1H，td，J＝9.6，2.6Hz)，4.19(1H，quintet，J＝6.1Hz)，3.92(3H，s)，3.60(1H，dd，J＝18.7，9.9Hz)，3.39(1H，dd，J＝18.7，9.0Hz)，3.36(1H，dd，J＝6.3，3.0Hz)，1.47(1H，d，J＝6.1Hz)，1.31(3H，d，J＝6.2Hz)；m/z412.1389(M+)，計(jì)算值C20H20N4O6，412.1384。制備2(5R，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-(1-甲基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉將制備1得到的化合物按照實(shí)施例2制備2的方法脫保護(hù)，得到標(biāo)題化合物(16.7mg，13％)。UV(H2O)λmax296nm(7413)；υmax(KBr disc) 1761cm-1；δH(D2O)7.54(1H，d，J＝2.4Hz)，6.65(1H，d，J＝2.4Hz)，4.28(2H，m)3.86(3H，s)，3.50(1H，m)，3.28(1H，dd，J＝17.0，8.6Hz)，3.18(1H，dd，J＝17.0，9.7Hz，)，1.31(3H，d，J＝6.5Hz)。實(shí)施例4(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-(5-甲基-1-苯基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉制備15-甲基-1-苯基吡唑-3-羧酸乙酯
按照實(shí)施例1制備1的方法，從苯乙基肼(3.92g，0.029M)(從J.H.Biel US專利3,000,903中描述的方法獲得)和2，4-二氧代戊酸乙酯(4.55g，0.029M)制備得到黃色油狀標(biāo)題化合物(3.84g，52％)。υmax(CH2Cl2)1720cm-1；δH(CDCl3)1.40(3H，t，J7Hz)，1.90(3H，s)，3.14(2H，t，J7Hz)，4.30(2H，t，J7Hz)，4.41(2H，q，J7Hz)，6.48(1H，s)，6.97-7.09(2H，m)，和7.20-7.37(3H，m)；E.I.m/e 258。制備25-甲基-1-苯基吡唑-3-羧酸
將5-甲基-1-苯基吡唑-3-羧酸乙酯(3.84g，14.9mM)的乙醇(30ml)溶液與氫氧化鈉(0.6g，14.9mM)在室溫?cái)嚢?天。然后用乙酸乙酯和水稀釋混合物并分層。有機(jī)相進(jìn)一步用水萃取。合并水萃取物并用5M鹽酸酸化至pH2.0，再用二氯甲烷萃取。有機(jī)萃取物用MgSO4干燥，蒸發(fā)得到標(biāo)題化合物(3.24g，95％)。νmax(CH2Cl2)1759和1699cm-1；δH(CDCl3)1.91(3H，s)，3.16(2H，t，J7Hz)，4.31(2H，t，J7Hz)，6.54(1H，s)，6.98-7.10(2H，m)，和7.20-7.37(3H，m)。制備35-甲基-1-苯基吡唑基-(N-甲氧-N-甲基)甲酰胺
用草酰氯(1.4ml，16.9mM)處理5-甲基-1-苯基吡唑-3-羧酸酯(3.24g，14.1mM)的二氯甲烷(50ml)和二甲基甲酰胺(1滴)溶液?；旌衔飻嚢?.5小時(shí)得到澄清溶液，將其蒸發(fā)至于。剩余物溶于甲苯并蒸發(fā)。將?；热苡诼确?75ml)并加入N，O-二甲基羥胺(1.5g，15.4mM)。將混合物冷卻至低于5℃，并保持此溫度同時(shí)加入吡啶(2.5ml，30.8mM)。加完后，將混合物在室溫?cái)嚢?.5小時(shí)，然后蒸發(fā)。剩余物溶于1∶1的二氯甲烷，乙醚和鹽水中。分出有機(jī)相，用MgSO4干燥并蒸發(fā)。用硅膠純化，50-67％的乙酸乙酯己烷溶液洗脫，得到灰白色固體(3.37g，88％)。υmax(CH2Cl2)1641cm-1；δH(CDCl3)1.93(3H，s)，3.14(2H，t，J7Hz)，3.44(3H，s)，3.76(3H，s)，4.28(2H，t，J7Hz)，6.43(1H，s)，7.00-7.10(2H，m)，和7.15-7.35(3H，m)；NH3DCI m/e 274(100％)。制備43-乙?；?5-甲基-1-苯乙基吡唑
將5-甲基-1-苯基吡唑基-3-基-(N-甲氧-N-甲基)甲酰胺(3.37g，12.3mM)的THF(30ml)溶液冷卻至低于0℃，保持此溫度同時(shí)滴加入3.0M甲基溴化鎂的THF(8.6ml，25.9mM)溶液?；旌衔镌?℃攪拌1.75小時(shí)然后倒入用冰冷卻的5％鹽酸乙醇溶液。用1∶1的二氯甲烷，乙醚和鹽水稀釋混合物。水相再用1∶1的二氯甲烷，乙醚萃取，合并有機(jī)萃取物，用MgSO4干燥并蒸發(fā)。用硅膠純化，得到標(biāo)題化合物(2.65g，94％)。υmax(CH2Cl2)1680cm-1；δH(CDCl3)1.91(3H，s)，2.58(3H，s)，3.15(2H，t，J7Hz)，4.28(2H，t，J7Hz)，6.44(1H，s)，6.96-7.07(2H，m)，和7.18-7.37(3H，m)；E.I.m/e 228(93％)。制備5(3S，4R)-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧乙基]-4-[(5-甲基-1-苯乙基吡唑-3-基羰基)甲基]氮雜環(huán)丁-2-酮
3-乙?；?5-甲基-1-苯乙基吡唑(2.65g，11.6mM)的THF(80ml)溶液冷卻至-70℃，用1M六甲基二硅氮鋰的己烷(11.6ml)溶液處理。混合物在-70℃攪拌0.5小時(shí)，然后用4-乙酰氧-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧乙基]氮雜環(huán)丁-2-酮的THF(20ml)溶液處理?；旌衔镌?70℃再攪拌3小時(shí)。加入飽和氯化銨溶液，再加入乙酸乙酯。將混合物升溫至室溫，分出有機(jī)相，用水和鹽水洗滌，MgSO4干燥，并蒸發(fā)。用硅膠純化，50％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫，得到淺黃色固體標(biāo)題化合物(2.11g，80％)。υmax(KBr)1734和1680cm-1；δH(CDCl3)0.08(6H，s)，0.88(9H，s)，1.23(3H，d，J7Hz)，1.91(3H，s)，2.92(1H，dd，J5.2Hz)，3.08-3.29(3H，m)，3.53(1H，dd，J3.17Hz)，4.05-4.34(4H，m)，6.13(1H，brs)，6.45(1H，s)，6.95-7.07(2H，m)，和7.13-7.38(3H，m)；NH3DCI m/e 456(84％)。制備6{(3S，4R)-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧乙基]-4-[(5-甲基-1-苯乙基吡唑-3-基羰基)甲基]-2-氮雜環(huán)丁烷-1-基}三丁基正膦亞基乙酸烯丙酯
在氬氣氛圍下，其沸除水條件下，將(3S，4R)-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧乙基]-4-[(5-甲基-1-苯乙基吡唑-3-基羰基)甲基]氮雜環(huán)丁-2-酮(2.11g，4.64mM)和乙醛酸烯丙酯一水合物(1.2g，9.1mM)合并于甲苯(175ml)中，并將混合物加熱回流。14小時(shí)后冷卻至室溫，蒸發(fā)至少量并用硅膠純化，用50％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫，得到黃色油狀物(1.47g，56％)；NH3DCI m/e456(50％)。
在氬氣氛圍下，將非對(duì)映異構(gòu)的hemiaminals混合物(1.1g，1.93mM)的THF(50ml)溶液冷卻至-10℃，連續(xù)用2，6-二甲基吡啶(0.33ml，2.8mM)和亞硫酰氯(0.22ml，2.5mM)處理。所得混合物在-5至-10℃攪拌0.75小時(shí)，然后用甲苯稀釋，并通過(guò)硅藻土過(guò)濾并蒸發(fā)。將上述產(chǎn)物溶于二噁烷(10ml)，并在氬氣氛圍下，用三丁基膦(1.1ml，5.5mM)處理。攪拌1.5小時(shí)后，用乙酸乙酯稀釋，并用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，用MgSO4干燥并蒸發(fā)。用硅膠純化，33-50％的乙酸乙酯的己烷溶液洗脫得到無(wú)色油狀物(1.016g，70％)。υmax(CH2Cl2)1737，1677，和1604cm-1。制備7{(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-[(5-甲基-1-苯乙基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸烯丙酯
用2M鹽酸(8.1ml)處理{(3S，4R)-[(R)-1-叔丁基二甲基硅烷氧乙基]-4-[(5-甲基-1-苯乙基吡唑-3-基羰基)甲基]-2-氮雜環(huán)丁烷-1-基}三丁基正膦亞基乙酸烯丙酯(0.7g，0.9mM)的甲醇(30ml)溶液并攪拌2小時(shí)。將溶液蒸發(fā)至少量并用乙酸乙酯萃取兩次。合并有機(jī)萃取物，用鹽水洗滌，MgSO4干燥并蒸發(fā)。剩余物用甲苯(5ml)稀釋并蒸發(fā)。剩余物溶于甲苯(30ml)并加熱回流2小時(shí)，然后冷卻并蒸發(fā)至少量。用硅膠純化，乙酸乙酯洗脫，得到油狀物(0.164g，42％)；υmax(CH2Cl2)1774和1717cm-1；δH(CDCl3)1.37(3H，d，J6Hz)，1.93(3H，s)，3.09(3H，t，J7Hz)，3.22(1H，m)，3.32(1H，dd，J9，19Hz)，3.64(1H，dd，J10，19Hz)，4.12-4.37(4H，m)，4.64-4.90(2H，m)，5.29(1H，dd，J1，9Hz)，5.47(1H，dt，J1.5，16Hz)，5.90-6.10(1H，m)，6.94(1H，s)，6.97-7.09(2H，m)，和7.15-7.35(3H，m)； m/e 421.2001(C24H27N3O4理論值421.2002)。制備8{(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-[(5-甲基-1-苯乙基吡唑-3-基)}碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉
連續(xù)用三苯基膦(0.014g，0.05mM)，2-乙基己醇鈉(0.073g，0.04mM)的乙酸乙酯(1.5ml)溶液，四(三苯膦)鈀(0.022g，0.019mM)處理{(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-[(5-甲基-1-苯乙基吡唑-3-基)}碳代青霉-2-烯-3-羧酸烯丙酯(0.21g，0.48mM)在1∶1的二氯甲烷，乙酸乙酯中的溶液。將混合物室溫?cái)嚢?0分鐘，然后蒸發(fā)至較小體積并移入離心管。使氬氣流通過(guò)混合物表面除去剩余溶劑。剩余物用乙醚研制，然后離心除去上清液。重復(fù)此過(guò)程兩次，剩余有機(jī)固體在Diaion HP 20SS樹脂上純化，用水，THF混合溶劑洗脫。冷凍干燥后得到淺黃色松散固體標(biāo)題化合物(0.087g，45％)；λmax(H2O)298.5nm(e 8611)；υmax(KBr)1752cm-1；δH(D2O)1.28(3H，d，J6.4Hz)，1.77(3H，s)，3.04(2H，t，J6.5Hz)，3.17(2H，m)，3.45(1H，m)，4.22(4H，m)，6.28(1H，s)，6.90-7.08(2H，m)，和7.23(3H，m)；m/e(甘油，F(xiàn)AB)404(MH+)，426(MNa+)。實(shí)施例5(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-[1-(2-苯乙基)吡唑-3-基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉制備14-硝基芐基-2-苯乙基甘氨酸將4-硝基芐基溴代乙酸酯(9.9g，36mM)的二氯甲烷(50ml)溶液滴加處理用冰冷卻的苯乙胺(4.51ml，36mM)的二氯甲烷(100ml)和三乙胺(5.5ml，39.6mM)的溶液中。混合物在室溫?cái)嚢?.5小時(shí)，然后用飽和碳酸氫鈉水溶液，鹽水洗滌，MgSO4干燥并蒸發(fā)。用硅膠純化，30-100％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫，得到橙色油狀物(7.23g，64％)；Umax(CH2Cl2)1766，1608，和1526cm-1；dH(CDCl3)2.78-2.95(4H，m)，3.52(2H，s)，5.24(2H，s)，7.16-7.39(5H，m)，7.50(2H，d，J8Hz)，和8.22(2H，d，J8Hz)；EI m/e 315(MH+)。制備23-(2-苯乙基)-1，2，3-二噁唑-5-酮將4-硝基芐基-2-苯乙基甘氨酸(7.23g，23mM)的乙醇(50ml)溶液與飽和碳酸氫鈉水溶液(20ml)在10％鈀-炭(0.4g)存在下氫化。1.25小時(shí)后，將混合物用飽和碳酸氫鈉溶液(20ml)稀釋，并通過(guò)硅藻土過(guò)濾。減壓除去乙醇，含水混合物用二氯甲烷洗滌，并蒸發(fā)至干。剩余物用5M鹽酸處理。過(guò)濾白色固體沉淀用1MHCl洗滌。將上述獲得的酸懸浮于12％鹽酸(200ml)并用亞硝酸鈉(3.6g，52mM)處理。將混合物加熱到60℃過(guò)夜然后蒸發(fā)至干。剩余物用丙酮研制然后過(guò)濾除去不溶固體。濾液蒸發(fā)得到N-亞硝基-2-苯乙基甘氨酸(2.6g，54％)。Umax(CH2Cl2)1726和1461cm-1；dH(CDCl3)3.04(2H，t，J7.5Hz)4.28(2H，s)，4.40(2H，t，J7.5Hz)，7.29(5H，m)，和1290(1H，brs)。將N-亞硝基-2-苯乙基甘氨酸(2.6g，12.4mM)d的二氯甲烷(25ml)溶液用冰冷卻，向其中滴加入三氟乙酸酐(2.6ml，18.4mM)。冷卻下攪拌25分鐘，混合物用碳酸氫鈉固體和少量水中和。分層，水相用二氯甲烷萃取。合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，MgSO4干燥，蒸發(fā)得到油狀標(biāo)題化合物(1.79g，76％)。Umax(CH2Cl2)1752和1424cm-1；dH(CDCl3)3.25(2H，t，J7Hz)，4.49(3H，t，J7Hz)，6.12(1H，s)，和7.10-7.42(5H，m)；EI m/e 190(83％)。制備31-(2-苯乙基)-3-(三丁基甲錫烷基)吡唑?qū)?-(2-苯乙基)-1，2，3-噁二唑-5-酮(1.79g，9.4mM)的二甲苯(20ml)溶液與乙炔基三丁基錫(5.56ml，19.2mM)加熱回流18小時(shí)。然后將混合物冷卻，用硅膠純化，0-20％乙醚的己烷溶液洗脫，得到標(biāo)題化合物(2.0g，46％)；Umax(CH2Cl2)1425cm-1；dH(CDCl3)0.89(9H，t，J7Hz)，1.03-1.16(6H，m)，1.25-1.42(6H，m)，1.52-1.71(6H，m)，3.16(2H，t，J7Hz)，4.41(2H，t，J7Hz)，6.25(1H，d，J2Hz)，7.01-7.08(2H，m)，和7.16-7.35(4H，m)；NH3DCI m/e 463(25％)。制備4(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-[1-(2-苯乙基)吡唑-3-基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸4-硝基芐酯按照實(shí)施例2制備1的方法，從1-(2-苯乙基)-3-(三丁基甲錫烷基)吡唑(2.0g，4.3mM)制備標(biāo)題化合物(1.57g，73％)；Umax(KBr)1769，1740，1604和1523cm-1；dH(CDCl3)1.40(3H，d，J6.5Hz)，3.15(3H，t，J7Hz)，3.26(1H，m)，3.36(1H，dd，J9.19Hz)，3.68(1H，dd，J10，19Hz)，4.20-4.41(4H，m)，5.28，5.54(2H，ABq，J14Hz)，7.03-7.39(5H，m)，7.69(2H，d，J8.5Hz)，和8.23(2H，d，J8.5Hz)；m/e 502.1858(C27H26N4O6理論值502.1852)。制備5(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-[1-(2-苯乙基)吡唑-3-基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉將(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-[1-(2-苯乙基)吡唑-3-基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸4-硝基芐酯(0.20g，0.4mM)的THF(15ml)溶液和0.2M pH7.0的磷酸鹽緩沖液(15ml)和碳酸氫鈉(0.066g，0.79mM)在10％鈀-炭(0.10g)存在下氫化。3.5分鐘后，通過(guò)硅藻土過(guò)濾，用水和碳酸氫鈉溶液洗滌固體，濾液用乙醚洗滌，然后蒸發(fā)至較小體積，用Diaion HP20SS樹脂純化，0-2％四氫呋喃的水溶液洗脫，得到白色冷凍干燥的固體標(biāo)題化合物(0.051g，33％)；λmax(H2O)297.5(ε9961)；υmax1753，1603和1591cm-1；δH(D2O)1.36(3H，d，J6.5Hz)，3.17(2H，t，J6.5Hz)，3.20-3.35(2H，m)，3.55(1H，m)，4.25-4.40(2H，m)，4.43(2H，t，J6.5Hz)，6.57(1H，d，J2.5Hz)，7.12-7.21(2H，m)，和7.25-7.41(4H，m)；m/e(硫甘油，F(xiàn)AB)390(MH+)。實(shí)施例6(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-[4，5，6，7-四氫吡啶并-(1，2-b)-吡唑-2-基]-碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉制備14，5，6，7-四氫吡啶并-(1，2-c)(1，2，3)噁二唑酮用冰冷卻N-亞硝基2-哌啶酸(按W.Lijinsky，L.Keefer and J.Loo Tetrahedron 1970，26，5137描述的方法制備)(1.82g，11.5mM)的二氯甲烷(15 ml)溶液，向其中滴加入三氟乙酸(1.62ml，11.5mM)?；旌衔锢鋮s下攪拌6小時(shí)，然后用二氯甲烷稀釋，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗至中性。有機(jī)相用MgSO4干燥并蒸發(fā)，得到黃色油狀標(biāo)題化合物(1.12g，76％)。υmax(CH2Cl2)1732cm-1；δH(CDCl3)1.90-2.02(2H，m)，2.04-2.19(2H，m)，2.63(2H，t，J6Hz)和4.25(2H，t，J6Hz)EI m/e 140(93％)。制備24，5，6，7-四氫吡啶并-2-三丁基甲錫烷基(1，2-b)-吡唑按照實(shí)施例5制備3的方法，從4，5，6，7-四氫吡啶并-(1，2-c)(1，2，3)噁二唑(1.12g，8.8mM)制得標(biāo)題化合物(0.458g，13％)。υmax(CH2Cl2)1526和1485cm-1；δH(CDCl3)0.84-1.01(9H，m)，1.02-1.12(6H，m)，1.25-1.41(6H，m)，1.50-1.72(6H，m)，1.79-1.90(2H，m)，1.96-2.09(2H，m)，2.80(2H，t，J6Hz)4.21(2H，t，J6Hz)，和6.05(1H，s)；NH3DCI m/e MH+413(100％)。制備3(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-[4，5，6，7-四氫吡啶并-(1，2-b)-吡唑-2-基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸4-硝基芐酯按照實(shí)施例2制備1的方法，從4，5，6，7-四氫吡啶鎓-2-三丁基甲錫烷基(1，2-b)-吡唑(0.458g，1.11mM)制得標(biāo)題化合物(0.38g，76％)。υmax(KBr)1773，1714，1597，1539，和1519cm-1；δH(CDCl3)2.39(3H，d，J6Hz)，1.58(3H，s)，1.78-1.92(2H，m)，1.99-2.12(2H，m)，2.79(2H，t，J6Hz)，3.21-3.25(1H，m)，3.31(1H，dd，J9，18.5Hz)，3.63(1H，dd，J10，18.5Hz)，4.13(2H，t，J6Hz)，4.17-4.36(1H，m)，5.27，5.54(2H，ABq，J14Hz)，6.97(1H，s)，7.69(2H，d，J9Hz)和8.23(2H，d，J9Hz)；m/e 452.1699(C23H24N4O6理論值452.1696)。制備4(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-[4，5，6，7-四氫吡啶并-(1，2-b)-吡唑-2-基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉按照實(shí)施例5制備5的方法，從(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-[4，5，6，7-四氫吡啶并-(1，2-b)-吡唑-2-基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸4-硝基芐酯(0.20g，0.44mM)制得灰白色冷凍干燥固體標(biāo)題化合物(0.099g，66％)。λmax(H2O)298nm(ε7241)；υmax(KBr)1752，1603，和1575cm-1；δH(D2O)1.26(3H，d，J6.5Hz)，1.77(2H，m)，1.98(2H，m)，2.73(2H，t，J6Hz)，3.08-3.22(2H，m)，3.36-3.48(1H，m)，4.00(2H，t，J6Hz)，4.12-4.28(2H，m)，和6.39(1H，s)；m/e 318(MH+)。實(shí)施例7(5R，6S)-6-[(1R)-1-羥基乙基]-2-(5-甲基-1-苯基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉制備15-甲基-2-苯基-3-(三-正丁基甲錫烷基)吡唑用亞硝酸正丁基酯(0.64ml)處理N-苯基丙氨酸(825mg)的1，2-二甲氧基乙烷(20ml)溶液并攪拌混合物2.5小時(shí)，然后除去溶劑得到N-亞硝基-N-苯基丙氨酸粗產(chǎn)物，將其溶于二氯甲烷(10ml)中，在冰浴中冷卻并用三氟乙酸酐(1.06ml)處理。攪拌所得的混合物1小時(shí)，然后除去溶劑，加入甲苯并通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器除去。所得的殘留物通過(guò)硅膠色譜純化，以乙醇/氯仿混合物洗脫，得到斯德酮(1g)，νmax(CH2Cl2)1803(sh)，1763(sh)，1734，1485，1243，和1065cm-1；δ(CDCl3)2.16(3H，s)，7.51-7.73(5H，m)；實(shí)測(cè)值m/z 176.0590；C9H8N2O2理論值176.0586。用乙炔基三丁基錫烷處理斯德酮的二甲苯(8ml)溶液并加熱回流混合物8小時(shí)，在室溫靜置16小時(shí)后，用己烷(15ml)稀釋所得的混合物，將其置于硅膠上并用己烷(100ml)，接著用己烷/乙酸乙酯混合物洗脫，得到5-甲基-2-苯基-3-(三-正丁基甲錫烷基)吡唑(602 mg)，δH(CDCl3)0.87-1.76(27H，m)，2.35(3H，s)，6.25(1H，s)，7.26-7.47(5H，m)；實(shí)測(cè)值m/z 448.1900。C22H36N2Sn理論值448.1900。制備2(5R，6S)-6-[(1R)-1-羥基乙基]-2-(5-甲基-1-苯基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸對(duì)硝基芐基酯氬氣氣氛中，將(5R，6S)-6-[(1R)-1-羥基乙基]-2-氧代碳代青霉烯-3-羧酸對(duì)硝基芐基酯(250mg)的無(wú)水四氫呋喃(10mL)溶液冷卻到-78℃并加入N，N-二異丙基胺(0.11ml)。攪拌所得的混合物5分鐘，然后加入三氟甲磺酸酐(0.13ml)并繼續(xù)攪拌30分鐘，得到(5R，6S)-6-[(1R)-1-羥基乙基]-2-三氟甲基磺酰氧基-碳代青霉-2-烯-3-羧酸對(duì)硝基芐基酯，加入三苯胂(22mg)和三(二亞芐基丙酮)鈀(0)(33mg)以及氯化鋰(60mg)的固體混合物，用氬氣流覆蓋反應(yīng)混合物。加入5-甲基-2-苯基-3-(三-正丁基甲錫烷基)吡唑(322mg)并用無(wú)水四氫呋喃(3ml)洗滌。然后，加入1M氯化鋅的乙醚(1.44ml)溶液，并采用微溫的水浴使混合物溫?zé)岬绞覝?。攪拌混合?7小時(shí)，然后用乙酸乙酯/水處理，并在加入少量鹽水后分離各層。用乙酸乙酯再次提取水層，用水，鹽水洗滌合并的乙酸乙酯層，然后干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。通過(guò)硅膠色譜純化殘留物，二氯甲烷裝柱，以乙酸乙酯/己烷混合物洗脫。合并含有產(chǎn)物的餾份得到被錫殘留物污染的產(chǎn)物。再次通過(guò)色譜純化，接著用乙醚研制并過(guò)濾，得到(5R，6S)-6-[(1R)-1-羥基乙基]-2-(5-甲基-1-苯基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸對(duì)硝基芐基酯(247mg)，υmax(CH2Cl2)/cm-13603，1775，1724，1600，1525，1501，1350，1315，1267，和1184；δ(CDCl3)1.37(3H，d，J6.3Hz)，1.82(1H，d，J4.9Hz)，2.33(3H，s)，3.25(1H，dd，J2.7&6.3Hz)，3.38(1H，dd，J5.9&18.8Hz)，3.70(1H，dd，J9.9&18.8Hz)，4.22-4.33(2H，m)，5.30(1H，d，J13.9Hz)，5.56(1H，d，J13.9Hz)，7.19(1H，s)，7.37-7.52(5H，m)，7.71(2H，d，J8.7Hz)，和8.24(2H，d，J8.8Hz)；λmax(乙醇)/nm 326.5(ε/dm3mol-1cm-117，137)，260.5(ε12.621)；實(shí)測(cè)值C63.75，H5.1，N11.1，m/z 488.1698.C26H24N2O6理論值C63.9，H4.95，N11.5，m/z 488.1696。制備3(5R，6S)-6[(1R)-1-羥乙基]-2-(5-甲基-1-苯基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉用碳酸氫鈉(42mg)(10ml)和3％Pd-C催化劑(50mg)處理溶于四氫呋喃(THF)(10ml)溶液和水(10ml)中的(5R，6S)-6[(1R)-1-羥乙基]-2-(5-甲基-1-苯基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸對(duì)硝基芐基酯(122mg)，并在大氣壓氫化所得的混合物5-10分鐘。通過(guò)硅藻土過(guò)濾混合物，用水和乙酸乙酯洗滌濾餅。采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器使合并的濾液和洗液的體積減少，加入少量的氯化鈉，在Diaion HP20SS(2×10cm)柱上色譜純化所得的混合物，用水(200ml)洗脫，再用水/THF混合物2％THF(100ml)；接著用3％THF(100ml)，再接著用4％THF，再用6％THF洗脫。通過(guò)紫外(uv)和高壓液相(hplc)監(jiān)測(cè)餾份，合并含有產(chǎn)物的餾份并蒸發(fā)得到較小的體積，然后冷凍-干燥得到(5R，6S)-6[(1R)-1-羥乙基]-2-(5-甲基-1-苯基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉(80mg)。υmax(KBr)/cm-11786，1756，1588，1501，1412，1383，1359，1288，1246，1223，和1145；λmax(H2O)/nm 300.0(ε/dm3mol-1cm-113，232)，236.5(ε7，027)；δ(D2O)1.26(3H，d，J6.4 Hz)，2.20(3H，s)，3.1-3.29(2H，m)，3.46(1H，dd，J2.9&5.9Hz)，4.16-4.28(2H，m)，6.61(1H，s)，7.39-7.57(5H，m)。實(shí)施例8(5R，6S)-2-[5，6-二氫-4H-吡咯并(1，2-b)吡唑-2-基]-6-[(R)-1-羥基乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉制備12-三丁基甲錫烷基-5，6-二氫-4H-吡咯并[1，2-b]吡唑從5，6-二氫-4H-吡咯并[1，2-c][1，2，3]噁二唑酮(根據(jù)Tet Letters，24，(10)，1067，1983所述方法制備)和根據(jù)實(shí)施例5制備3所述的步驟得到的乙炔基三丁基錫，可以制備標(biāo)題化合物；δH(CDCl3)0.8-1.7(27H，m)，2.62(2H，q)，2.85(2H，t)，4.17(2H，t)，6.02(1H，s)。制備22-[5，6-二氫-4H-吡咯并(1，2-b)吡唑-2-基]-6-[(R)-1-羥基乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸對(duì)硝基芐基酯從2-三丁基甲錫烷基-5，6-二氫-4H-吡咯并[1，2-b]吡唑和根據(jù)實(shí)施例2制備1所述的方法制備的(3R，5R，6S)-6-[(1R)-羥基乙基]-2-氧代碳代青霉烯-3-羧酸對(duì)硝基芐基酯，可以制備標(biāo)題化合物；mp 187-190℃(乙酸乙酯)，λmax(乙醇)325nm(16.262)，266(12，654)；υmax(KBr)3286，1790，1706，1608，1583和1522cm-1；δH(d-6 DMSO))1.16(3H，d，J，6.2Hz)，2.45-2.6(3H，m)，2.82(2H，t)，3.23-3.52(3H，m)，3.92-4.25(4H，m)，5.06(1H，d，J3.9Hz)，5.41(2H，q)，6.79(1H，s)，7.73(2H，d，J8.5Hz)，8.23(2H，d，J8.5Hz)；(實(shí)測(cè)值C，60.0；H，5.0；N，12.7％C22H22N4O6理論值C，60.25；H，5.05；N，12.8％)。制備3(5R，6S)-2-[5，6-二氫-4H-吡咯并(1，2-b)吡唑-2-基]-6-[(R)-1-羥基乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉可以根據(jù)實(shí)施例5制備5所述的方法，從2-[5，6-二氫-4H-吡咯并(1，2-b)吡唑-2-基]-6-[(R)-1-羥基乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸對(duì)硝基芐基酯制備標(biāo)題化合物。λmax(H2O)300nm(8.753)；υmax(KBr)3420，1748，1602和1573cm-1；δH(D2O)1.29(3H，d，J6.5Hz)，2.48-2.63(2H，m)，2.85(2H，t)，3.1-3.3(2H，m)，3.48(1H，dd，J5.9，2.8Hz)4.05(2H，t)4.15-4.3(2H，m)，6.41(1H，s)。實(shí)施例9(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-(1，5-二乙基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉制備11，5-二乙基吡唑-3-羧酸乙酯將2，4-二氧代己酸乙酯(21.5g)的冰醋酸(125ml)溶液在冰浴下冷卻并用N-乙基肼草酸酯(18.75g)處理15分鐘。添加完成后，在室溫?cái)嚢杌旌衔?小時(shí)，然后通過(guò)真空蒸發(fā)除去乙酸。將所得的橙色油狀殘留物溶于乙酸乙酯(EtOAc)中，并用飽和碳酸氫鈉(NaHCO3)水溶液重復(fù)洗滌所得的溶液并用鹽水洗滌一次。然后用硫酸鎂干燥，并真空蒸發(fā)溶劑得到1，5-二乙基吡唑-3-羧酸乙酯(20.7g)，為油狀物。δ(CDCl3)1.25-1.45(9H，3x3h，t，J7Hz)，2.62(2H，q，J7Hz)，4.17(2H，q，J7Hz)，4.38(2H，q，J7Hz)，6.57(1H，s)ppm。制備21，5-二乙基吡唑-3-羧酸用2.5 M氫氧化鈉水溶液(50.6ml)處理1，5-二乙基吡唑-3-羧酸乙酯(20.7g)的乙醇(250ml)溶液并攪拌混合物過(guò)夜。再加入4.2ml 2.5M的氫氧化鈉并繼續(xù)攪拌1小時(shí)，然后將混合物傾入乙酸乙酯/水中，劇烈振蕩所得的混合物并除去水相。用1M的鹽酸水溶液將水相的PH調(diào)至2.0并用氯化鈉飽和溶液，然后用20％甲苯/80％THF(5×100ml)提取水層，用硫酸鎂干燥合并的有機(jī)提取物并真空蒸發(fā)，用己烷/二乙醚研制所得的殘留物得到酸，為固體(14.69g)；υmax(CH2Cl2)3450，2750，2596，1697，cm-1；δ(CDCl3)1.31(3H，t，J7Hz)，1.44(3H，t，J7Hz)，2.64(2H，q，J7Hz)，4.20(2H，q，J7Hz)，6.64(1H，s)ppm。制備3N-甲氧基-N-甲基-1，5-二乙基吡唑-3-甲酰胺用草酰氯(8.38ml)處理含有N，N-二甲基甲酰胺(7滴)的1，5-二乙基吡唑-3-羧酸(14.69g)的無(wú)水二氯甲烷(180ml)溶液，在氬氣氣氛中攪拌所得的混合物2.25小時(shí)。真空蒸除溶劑并殘留物溶于新制無(wú)水二氯甲烷中，并再真空蒸發(fā)以確保除去了殘留的HCl和草酰氯。將所得的酰氯溶于氯仿中并用N，O-二甲基羥基胺鹽酸鹽(9.37g)處理。在氬氣氣氛中冰浴冷卻所得的混合物并滴加入吡啶(15.6ml)處理，將混合物攪拌1小時(shí)，然后用乙酸乙酯稀釋，并用飽和碳酸氫鈉水溶液，0.5M鹽酸水溶液和鹽水洗滌。用硫酸鎂(MgSO4)干燥有機(jī)層并蒸發(fā)得到油狀物。使所得的油狀物通過(guò)硅膠色譜純化，溶入二氯甲烷中，并用乙酸乙酯/己烷混合物洗脫，在蒸發(fā)所需的餾份后，得到hydroxamate(標(biāo)題化合物)(10.1g)；νmax(CH2Cl2)1641，1487，1461，1444，和1381cm-1；δ(CDCl3)1.28(3H，t，J7Hz)，1.43，(3H，t，J7Hz)，2，62(2H，q，J7Hz)，3.43(3H，s)，3.76(3H，s)，4.12(2H，q，J7Hz)，6.52(1H，s)ppm。制備43-乙?；?1，5-二乙基吡唑在冰浴中冷卻N-甲氧基-N-甲基-1，5-二乙基吡唑-3-甲酰胺(10.1g)的無(wú)水四氫呋喃(180ml)溶液并在10分鐘內(nèi)滴加入3.0M甲基溴化鎂的乙醚(20.68ml)溶液處理。攪拌1小時(shí)后，用乙醇(5ml)和5M鹽酸水溶液(1ml)的混合物處理上面得到的混合物，然后用乙酸乙酯和水稀釋所得的混合物。分離有機(jī)相，并用乙酸乙酯提取水相兩次，用硫酸鎂干燥合并的有機(jī)提取物并真空蒸發(fā)，得到油狀殘留物，將其通過(guò)硅膠色譜純化，溶于二氯甲烷中，以乙酸乙酯/己烷混合物洗脫，在蒸發(fā)所需的餾份后，得到油狀產(chǎn)物(8.08g)。δ(CDCl3)1.29(3H，t，J7Hz)，1.45(3H，t，J7Hz)，2.55(3H，s)，2.64(2H，q，J7Hz)，4.14(2H，q，J7Hz)，6.55(1H，s)ppm。制備5(3S，4R)-4-[(1，5-二乙基吡唑-3-基)羰基甲基]-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]氮雜環(huán)丁烷-2-酮在氬氣氣氛中，將3-乙酰基-1，5-二乙基吡唑(1.65g)的無(wú)水四氫呋喃(THF)(50ml)溶液在丙酮/固體二氧化碳浴中冷卻，并用1M的二(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰(19.8ml)溶液處理。攪拌混合物45分鐘，然后通過(guò)注射器在約1分鐘內(nèi)加入(3R，4R)-4-乙酰氧基-3-[(R)-1-叔丁氧基二甲基甲硅烷氧基乙基]氮雜環(huán)丁酮(2.84g)的無(wú)水THF(10ml)溶液。在冷卻下攪拌混合物5小時(shí)，然后加入飽和氯化銨水溶液，接著加入乙酸乙酯。分離各層并用乙酸乙酯再提取水層。用飽和鹽水洗滌合并的乙酸乙酯層，干燥并蒸發(fā)。在硅膠上色譜純化，以乙酸乙酯/己烷混合物洗脫，得到標(biāo)題化合物(1.82g)；νmax(CH2Cl2)3412，2957，2885，2857，1761，1677，1473，和1376cm-1；δ(CDCl3)0.078(6H，s)，0.88(9H，s)，1.21(3H，d，J6.3Hz)，1.29(3H，t，J7.6Hz)，1.45(3H，t，J7.3Hz)，2.63(2H，q，J7.3Hz)，2.90(1H，dd，J1.6&4.9Hz)，3.15(1H，dd，J10.0&17.0Hz)，3.50(1H，dd，J3.6&17.0Hz)，4.06-4.25(4H，m)，6.09(1H，s)，6.56(1H，s)。(實(shí)測(cè)值m/z 393.2445。C20H35N3O3Si理論值m/z393.2448)。制備6(2R和2S)-2-{(3S，4R)-4-[(1，5-二乙基吡唑-3-基)羰基甲基]-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-2-氧代氮雜環(huán)丁烷基}-2-羥基乙酸烯丙基酯在氬氣氣氛下迪安-斯達(dá)克裝置中，加熱回流(3S，4R)-4-[(1，5-二乙基吡唑-3-基)羰基甲基]-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]氮雜環(huán)丁-2-酮(1.7g)和乙醛酸烯丙基酯水合物(585mg)的甲苯(50ml)溶液16小時(shí)。冷卻混合物，用己烷(50ml)稀釋，并在硅膠上色譜純化，以乙酸乙酯/己烷混合物洗脫。這樣得到標(biāo)題化合物的兩種非對(duì)映體(共1.91g)；異構(gòu)體1，δ(CDCl3)0.064(6H，s)，0.87(9H，s)，1.21(3H，d，J6.3Hz)，1.29(3H，t，J7.5Hz)，1.45(3H，t，J7.3Hz)，2.63(2H，q，J7.3Hz)，2.98(1H，dd，J2.7&9.4Hz)，3.39(1H，dd，J9.6&18.8Hz)，3.54(1H，dd，J3.1&18.3Hz)，4.0-4.71(6H，m)，4.97(1H，d，J10.7Hz)，5.13-5.28(2H，m)，5.54(1H，d，J10.7Hz)，5.72-5.88(2H，m)，6.57(1H，s)，異構(gòu)體2，δ(CDCl3)0.036(3H，s)，0.061(3H，s)，0.85(9H，s)，1.20-1.33(6H，m)，1.45(3H，t，J7.3Hz)，2.63(2H，q，J7.5 Hz)，2.98(1H，dd，J2.5&16.3Hz)，3.31(1H，dd，J8.5&4.0Hz)，3.61(1H，dd，J3.2&16.1Hz)，4.08-4.26(4H，m)，4.71(2H，d，J5.6Hz)，4.81(1H，d，J8.2Hz)，5.24-5.39(2H，m)，5.56(1H，d，J8.2Hz)，5.84-6.00(1H，m)，6.60(1H，s)。制備72-{(3S，4R)-4-[(1，5-二乙基吡唑-3-基)羰基甲基]-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-2-氧代氮雜環(huán)丁烷基}-2-(三-正丁基正膦亞基)乙酸烯丙基酯在氬氣氣氛中，將(2R和2S)-2-{(3S，4R)-4-[(1，5-二乙基吡唑-3-基)羰基甲基]-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-2-氧代氮雜環(huán)丁烷基}-2-羥基乙酸烯丙基酯(1.83g)的無(wú)水THF(50ml)溶液冷卻到-20C并用2，6-二甲基吡啶(0.63ml)處理，接著用亞硫酰氯(0.39ml)處理。在-20℃攪拌混合物30分鐘，然后溫?zé)岬绞覝夭⑦^(guò)濾，用THF洗滌殘留物。真空蒸發(fā)濾液，加入甲苯(20ml)并真空除去，真空干燥殘余的油狀物。在氬氣氣氛中將所得的油狀物溶于1，4-二噁烷(20ml)中并用三-正丁基膦(1.0ml)處理。攪拌混合物1小時(shí)，然后加入2，6-二甲基吡啶(0.50ml)并再攪拌混合物10分鐘。用乙酸乙酯稀釋混合物，用水，然后用鹽水洗滌，并干燥(MgSO4)。除去乙酸乙酯后得到的粗產(chǎn)物通過(guò)硅膠色譜純化，以乙酸乙酯/己烷混合物洗脫，得到正膦；υmax(二氯甲烷)1737，1676，1605，1465，1374，1090和835cm-1。制備82-{(3S，4R)-4-[(1，5-二乙基吡唑-3-基)羰基甲基]-3-[(R)-1-羥基乙基]-2-氧代氮雜環(huán)丁烷基}-2-(三-正丁基正膦亞基)乙酸烯丙基酯將上述制備的正膦溶于1，4-二噁烷(30ml)中并用5M鹽酸(10ml)處理。30分鐘后，用過(guò)量的飽和碳酸氫鈉水溶液，接著用飽和鹽水小心處理所得的混合物，用乙酸乙酯提取混合物兩次，干燥(MgSO4)合并的提取物并蒸發(fā)。使殘留物通過(guò)硅膠色譜純化，以乙酸乙酯/己烷混合物洗脫，得到羥基化合物(1.2g)；νmax(CH2Cl2)3452，1737，1666，1606，1465，1374，1086，和1047cm-1。制備9(5R，6S)-6-[(1R)-1-羥基乙基]-2-(1，5-二乙基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸烯丙基酯在氬氣氣氛中，將含有氫醌(20mg)的2-{(3S，4R)-4-[(1，5-二乙基吡唑-3-基)羰基甲基]-3-[(R)-1-羥基乙基]-2-氧代氮雜環(huán)丁烷基}-2-(三-正丁基正膦亞基)乙酸烯丙基酯(1.2g)的甲苯(60ml)溶液加熱回流6.5小時(shí)。將混合物冷卻，然后置于硅膠(粒徑0.040-0.063mm)柱(4×15cm)上，以乙酸乙酯洗脫，再用乙酸乙酯/乙醇(9∶1)洗脫，這樣得到碳代青霉烯(406mg)；νmax(CH2Cl2)3604，3424，2977，1773，1716，1311，1186cm-1；δ(CDCl3)1.29(t，J7.4Hz)，1.36(d，J6.3Hz)，1.40(t，J7.3Hz)(共9H)，1.86(1H，d，J，5.0Hz)，2.62(2H，q，Jca.7.4Hz)，3.19(1H，dd，J，2.8&6.7Hz)，3.29(1H，dd，J9.0&18.5Hz)，3.62(1H，dd，J9.9&18.5Hz)，4.08(2H，q，J7.2Hz)，4.16-4.30(2H，m)，4.68-4.90(2H，m)，5.27(1H，m，接近d，J約13Hz)，5.46(m，接近d，J約17Hz)，5.93-6.06(1H，m)，7.01(1H，s)ppm；(實(shí)測(cè)值m/z 359.1840。C19H25N3O4理論值m/z 359.1485)。制備10(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-(1，5-二乙基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉在氬氣氣氛中，用2-乙基己酸鈉(135mg)處理(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-(1，5-二乙基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸烯丙基酯(267mg)的二氯甲烷(2ml)溶液和乙酸乙酯(2ml)，接著用三苯膦(17.5mg)，四(三苯膦)鈀(0)(28.3mg)處理，并攪拌混合物45分鐘。然后加入二乙醚(100ml)，并且在攪拌30分鐘后，將混合物離心。用乙醚洗滌固體殘留物，并在氬氣氣流中干燥。將所得的固體溶于少量的水中并在DIAION HP20SS樹脂上色譜純化，用水洗脫，接著用水/THF混合物，2％，3％，4％，6％THF洗脫。通過(guò)HPLC監(jiān)測(cè)餾份，合并含產(chǎn)物的餾份，濃縮并冷凍干燥，得到固體(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-(1，5-二乙基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉(169mg)；νmax(KBr)1752，1593，1433，1382，1288，和1258cm-1；λmax(H2O)/nm298(ε/dm3mol-1cm-19，031)，260(sh)(ε5853)；δ(D2O)1.19(t，J7.6Hz)，1.27(d，Jca.6.8Hz)，1.28(d，Jca.7.3Hz)(共9H)，2.60(2H，q，J7.5Hz)，3.18(2H，d，J9.8Hz)，3.46(1H，dd，J2.7&5.9Hz)，4.05(2H，q，J7.2Hz)，4.14-4.26(2H，m)，6.48(1H，s)ppm；[實(shí)測(cè)值(電子轟擊ms)m/z 342(MH)+]。實(shí)施例10(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-(1-乙基-5-甲基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉制備11-乙基-5-甲基吡唑-3-羧酸乙酯在冰浴中冷卻N-乙基肼草酸酯(12g)的冰醋酸(100ml)溶液并用2，4-二氧代戊酸乙基酯(11.24ml)處理。添加完成后在室溫?cái)嚢杷玫幕旌衔铮淮蠹s45分鐘后，溫?zé)峄旌衔镆匀芙獠蝗艿囊一虏菟狨ァＴ贁嚢杌旌衔?小時(shí)，然后將其傾入水(約300ml)/乙酸乙酯(約700ml)中，并在攪拌下小心地加入固體碳酸鉀直到PH是中性。分離水層后用乙酸乙酯再次提取，干燥(MgSO4)合并的乙酸乙酯提取物，除去溶劑得到油狀物。通過(guò)硅膠色譜純化，將其溶于二氯甲烷/己烷中，以乙酸乙酯/己烷混合物(2∶8-1∶1)梯度洗脫，得到1-乙基-5-甲基吡唑-3-羧酸乙酯(13.2g)為油狀物；νmax(CH2Cl2)1717，1446，1389和1219cm-1；δ(CDCl3)1.38(3H，t，J7.2Hz)，1.42(3H，t，J7.3Hz)，2.30(3H，s)，4.17(2H，q，J7.3Hz)，4.38(2H，q，J7.1Hz)，6.55(1H，s)；(實(shí)測(cè)值m/z 182.1055。C9H14N2O2理論值m/z 182.1055)。制備21-乙基-5-甲基吡唑-3-羧酸用KOH(3.69g)，接著用水(30ml)處理1-乙基-5-甲基吡唑-3-羧酸乙酯(10.93g)，并攪拌和加熱回流混合物6小時(shí)。采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器除去乙醇并加入乙酸乙酯/水。將混合物的PH值調(diào)至3.0并分離各層。用乙酸乙酯再次提取水層，用過(guò)量的碳酸氫鈉水溶液提取合并的乙酸乙酯層。將碳酸氫鈉提取物傾入過(guò)量的酸中，然后將PH調(diào)至3，并向溶液中加入氯化鈉。然后用乙酸乙酯重復(fù)提取混合物，干燥(MgSO4)合并的提取物并蒸發(fā)，用乙醚研制殘留物得到酸(5.65g)，為固體；νmax(CH2Cl2)2754，2598，1698，1498，1464，1387和1233cm-1；δ(CDCl3)1.40(3H，t，J7.3Hz)，2.32(3H，s)，4.19(2H，q，J 7.3Hz)，6.61(1H，s)ppm；(實(shí)測(cè)值m/z 154.0740，C7H10N2O2理論值m/z 154.0742)。制備3N-甲氧基-N-甲基-1-乙基-5-甲基吡唑-3-甲酰胺在冰浴中冷卻含有N，N-二甲基甲酰胺(0.26ml)的1-乙基-5-甲基吡唑-3-羧酸(5.25g)的無(wú)水二氯甲烷(100ml)溶液，并滴加入草酰氯(3.27ml)的二氯甲烷25ml溶液處理。在冷卻條件下攪拌混合物25分鐘，當(dāng)觀察到氣體釋放后，使其溫?zé)岬绞覝亍?0分鐘后，真空除去溶劑，并加入甲苯再除去(×2)以確保除去了殘余的HCl和草酰氯。將得到的酰氯再溶于無(wú)水二氯甲烷中，并用N，O-二甲基羥基胺鹽酸鹽(3.61g)處理。冰浴冷卻所得的混合物并用吡啶(6.0ml)處理，使混合物在室溫?cái)嚢?.5小時(shí)，然后用乙醚(100ml)稀釋并用鹽水洗滌。接著干燥(MgSO4)有機(jī)層并蒸發(fā)得到油狀物，通過(guò)硅膠色譜純化，將其溶于二氯甲烷中，并用乙酸乙酯/己烷混合物洗脫，在蒸發(fā)所需的餾份后得到固體hydroxamate(5.2g)；νmax(CH2Cl2)2982，2937，1641，1489，1445，1379，和975cm-1；δ(CDCl3)1.43(3H，t，J7.3Hz)，2.29(3H，s)，3.42(3H，s)，3.76(3H，s)，4.13(2H，q，J，7.3Hz)，6.49(1H，s)；(實(shí)測(cè)值m/z 197.1164，C9H15N3O2理論值m/z 197.1164)。制備43-乙酰基-1-乙基-5-甲基吡唑在冰浴中冷卻N-甲氧基-N-甲基-1-乙基-5-甲基吡唑-3-甲酰胺(3.12g)的無(wú)水四氫呋喃(60ml)溶液并用3.0M甲基溴化鎂的乙醚(11.08ml)溶液處理。在冰浴冷卻下攪拌1.5小時(shí)，將混合物傾入甲醇(100ml)和5M鹽酸水溶液(10ml)中。然后蒸發(fā)混合物使體積減少并用二氯甲烷，水和飽和鹽水的混合物處理。分離水層后用二氯甲烷再次提取水層，干燥(MgSO4)合并的二氯甲烷提取物并蒸發(fā)得到油狀物(2.26g)，可以將其靜置固化；νmax(CH2Cl2)1680，1446，1425，1380，1324，1208，和945cm-1；δ(CDCl3)1.44(3H，t，J7.3Hz)，2.30(3H，s)，2.53(3H，s)，4.13(2H，q，J7.3Hz)，6.51(1H，s)；(實(shí)測(cè)值m/z 152.0949。C8H12N2O理論值m/z 152.090)。制備5(3S，4R)-4-[(1-乙基-5-甲基吡唑-3-基)羰基甲基]-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲基硅烷氧基乙基]氮雜環(huán)丁-2-酮在氬氣氣氛中，將3-乙酰基-1-乙基-5-甲基吡唑(3.51g)的無(wú)水四氫呋喃(THF)(150ml)溶液在丙酮/固體二氧化碳浴中冷卻，并用1 M的二(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰(50ml)溶液處理。攪拌混合物45分鐘，然后在氬氣氣氛覆蓋下加入固體(3R，4R)-4-乙酰氧基-3-[(1R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]氮雜環(huán)丁酮(6.6g)。在冷卻下攪拌混合物3.5小時(shí)，然后加入飽和氯化銨水溶液，接著加入乙酸乙酯，并使混合物溫?zé)岬绞覝?。加入少量的水，分離各層并用乙酸乙酯再次提取水層。用飽和鹽水洗滌合并的乙酸乙酯提取物，干燥并蒸發(fā)。在硅膠上色譜純化，以乙酸乙酯/己烷混合物洗脫，得到標(biāo)題化合物(3.65g)；νmax(CH2Cl2)3411，1761，1678，1376，1151，和838cm-1；δ(CDCl3)0.064(6H，s)，0.86(9H，s)，1.20(3H，d，J6.3Hz)，1.44(3H，t，J7.3Hz)，2.31(3H，s)，2.89(1H，dd，J1.8&4.9Hz)，3.15(1H，dd，J10.0&17.1Hz)，3.50(1H，dd，J3.5&17.0Hz)，4.06-4.25(4H，m)，6.11(1H，s)，6.53(1H，s)。(實(shí)測(cè)值m/z 379.2296.C19H33N3O3Si理論值m/z 379.2291)。制備6(2R和2S)-2-{(3S，4R)-4-[(1-乙基-5-甲基吡唑-3-基)羰基甲基]-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-2-氧代氮雜環(huán)丁烷基}-2-羥基乙酸烯丙基酯在氬氣氣氛下迪安-斯達(dá)克裝置中，加熱回流(3S，4R)-4-[(1-乙基-5-甲基吡唑-3-基)羰基甲基]-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]氮雜環(huán)丁-2-酮(3.6g)和乙醛酸烯丙基酯水合物(1.66g)的甲苯(100ml)溶液3.5小時(shí)。反應(yīng)混合物的薄層色譜(T.l.c)表明反應(yīng)基本進(jìn)行完全時(shí)，加入更多的乙醛酸烯丙基酯水合物(190mg)并再加熱回流混合物45分鐘。冷卻混合物，除去甲苯得到(2R和2S)-2-{(3S，4R)-4-[(1-乙基-5-甲基吡唑-3-基)羰基甲基]-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-2-氧代氮雜環(huán)丁烷基}-2-羥基乙酸烯丙基酯粗產(chǎn)物，它可用于下一步驟；νmax(CH2Cl2)3681，3518，1758，1676，1448，1376，1326，1209，1148，1092，954和836cm-1；δ(CDCl3)特別0.035(s)，0.061(s)(共6H)，0.858(s)，0.865(s)(共9H)，1.21(d，J6.2Hz)，1.24(d，J6.2Hz)，(共3H)，1.44(3H，t，J7.2Hz)，2.31(3H，s)，2.95-3.00(1H，m)，3.25-3.64(2H，m)，6.53(s)，6.56(s)ppm。制備72-{(3S，4R)-4-[(1-乙基-5-甲基吡唑-3-基)羰基甲基]-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-2-氧代氮雜環(huán)丁烷基}-2-(三-正丁基正膦亞基)乙酸烯丙基酯在氬氣氣氛中，將(2R和2S)-2-{3S，4R)-4-[(1-乙基-5-甲基吡唑-3-基)羰基甲基]-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-2-氧代氮雜環(huán)丁烷基}-2-羥基乙酸烯丙基酯(前面制備的粗產(chǎn)物)的無(wú)水THF(125ml)溶液冷卻到-20℃并且2，6-二甲基吡啶(1.98ml)處理，接著用亞硫酰氯(1.24ml)處理。在-20℃攪拌混合物30分鐘，然后溫?zé)岬绞覝夭⑦^(guò)濾，用THF(20ml)洗滌殘留物。真空蒸發(fā)濾液，加入甲苯(70ml)并真空除去，真空干燥油狀殘留物。在氬氣氣氛中將所得的油狀物溶于1，4-二噁烷(40ml)中并用三-正丁基膦(3.11ml)處理。攪拌混合物1小時(shí)，然后加入2，6-二甲基吡啶(1.59ml)并再攪拌混合物30分鐘。用乙酸乙酯稀釋混合物，用水，然后用鹽水洗滌，并干燥(MgSO4)。除去乙酸乙酯后得到的粗產(chǎn)物通過(guò)硅膠色譜純化，以乙酸乙酯/己烷混合物洗脫，得到正膦，它可用于下一步驟。制備82-{(3S，4R)-4-[(1-乙基-5-甲基吡唑-3-基)羰基甲基]-3-[(R)-1-羥基乙基]-2-氧代氮雜環(huán)丁烷基}-2-(三-正丁基正膦亞基)乙酸烯丙基酯將上述制備的正膦溶于1，4-二噁烷(60ml)中并用5M鹽酸(20ml)處理。1小時(shí)后，用約40ml飽和碳酸氫鈉水溶液，接著用固體碳酸氫鈉小心處理所得的混合物直到PH略顯堿性。加入飽和鹽水，混和物用乙酸乙酯萃取兩次。干燥(MgSO4)合并的提取物并蒸發(fā)。使殘留物通過(guò)硅膠色譜純化，以乙酸乙酯/己烷混合物洗脫，得到羥基化合物(2.60g)；νmax(CH2Cl2)3454，1741，1667，1606，1448，1403，1379，1155，1087，953和811cm-1。制備9(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-(1-乙基-5-甲基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸烯丙基酯在氬氣氣氛中，將含有氫醌(20ml)的2-{(3S，4R)-4-[(1-乙基-5-甲基吡唑-3-基)羰基甲基]-3-[(R)-1-羥基乙基]-2-氧代氮雜環(huán)丁烷基}-2-(三-正丁基正膦亞基)乙酸烯丙基酯(2.6g)的甲苯(120ml)溶液加熱回流4小時(shí)，將其靜置64小時(shí)，并再加熱回流2小時(shí)。將混合物冷卻，然后置于硅膠(粒徑0.040-0.063mm)柱(4.5×12cm)上，以乙酸乙酯/己烷混合物洗脫；比例為1∶1；6∶4；7∶3；8∶2；9∶1(各250ml)，接著用乙酸乙酯洗脫，這樣得到碳代青霉烯(436mg)；νmax(CH2Cl2)3604，2976，1774，1716，1600，1546，1311，1189cm-1；λmax(乙醇)/m 321.5(ε/dm3mol-1cm-114，856)，δ(CDCl3)1.36(d，J6.3Hz)，1.39(t，J7.3Hz)(共5H)，1.80(1H，d，J5.0Hz)，2.28(3H，s)，3.19(1H，dd，J2.7&6.7Hz)，3.28(1H，dd，J9.0&18.6Hz)，3.60(1H，dd，J9.9&18.5Hz)，4.08(2H，q，J7.3Hz)，4.16-4.30(2H，m)，4.68-4.90(2H，m)，5.27(1H，m，接近d，Jca.12Hz)，5.46(m，接近d，Jca.17Hz)，5.93-6.08(1H，m)，7.00(1H，s)ppm；[實(shí)測(cè)值m/z 345.1693。C18H23N3O4理論值m/z 345.1689]。制備10(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-(1-乙基-5-甲基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉在氬氣氣氛中，用2-乙基己酸鈉(183mg)處理(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-(1-乙基-5-甲基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸烯丙基酯(267mg)的二氯甲烷(3ml)溶液和乙酸乙酯(3ml)中的溶液，接著用三苯膦(24mg)，四(三苯膦)鈀(0)(35mg)處理，并攪拌混合物45分鐘。然后加入乙醚(100ml)，并且在攪拌90分鐘后，將混合物離心。在氬氣氣流中干燥固體殘留物，然后在干燥器中干燥。將所得的固體溶于含有氯化鈉的水中并在DIAION HP20SS樹脂上色譜純化，用水洗脫，接著用水/THF混合物，1％，2％和3％THF洗脫。通過(guò)HPLC監(jiān)測(cè)餾份，合并含產(chǎn)物的餾份，濃縮并冷凍干燥，得到固體(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-(1-乙基-5-甲基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉(168mg)；νmax(KBr)1761，1608，1577，1381，1225cm-1；λmax(H2O)/nm 298(ε/dm3mol-1cm-18.531)；δ(D2O)1.26(d，J約6Hz)，1.27(d，J約7Hz)(共5H)，2.23(3H，s)，3.17(2H，接近d，J約9Hz)3.44(1H，dd，J2.9&6.0Hz)，4.04(2H，q，J7.3Hz)，4.15-4.25(2H，m)，6.41(1H，s)ppm。實(shí)施例11(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-[1-(2-羥基乙基)-5-甲基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉制備11-(2-羥基乙基)-5-甲基吡唑-3-羧酸乙酯根據(jù)實(shí)施例1制備1所述的方法，從羥基乙基肼(3.64g，50mM)和2，4-二氧代戊酸乙酯(8.5g，50mM)可以制備標(biāo)題化合物，為無(wú)色油(9.39g，95％)；υmax(CH2Cl2)1700 cm-1；δH(CDCl3)1.39(3H，t，J7Hz)，2.40(3H，s)，2.98(2H，t，J7Hz)，4.33-4.48(4H，m)，和6.39(1H，s)；E.I.m/e 198(95％)。制備21-(2-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基)-5-甲基吡唑-3-羧酸乙酯將1-(2-羥基乙基)-5-甲基吡唑-3-羧酸乙酯(9.39g，47.4mM)的二氯甲烷(150ml)溶液冷卻到0℃以下并用三乙胺(7.19ml，52mM)，接著用叔丁基二甲基甲硅烷基氯(7.85g，52mM)處理，在室溫?cái)嚢杷玫幕旌衔?天，用鹽水洗滌反應(yīng)混合物，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)，在硅膠上純化，以50％的乙酸乙酯/己烷洗脫，定量得到標(biāo)題化合物，為淺黃色固體；υmax(薄膜)1719，1472和1388cm-1；δH(CDCl3)-0.08(6H，s)，0.81(9H，s)，1.38(3H，t，J7Hz)，2.33(3H，s)，3.98(2H，t，J5Hz)，4.21(2H，t，J5Hz)，4.39(2H，q，J7Hz)和6.53(1H，s)；NH3DCI m/e313(100％)。制備31-(2-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基)-5-甲基吡唑-3-羧酸根據(jù)實(shí)施例4制備2所述的方法，從1-(2-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基)-5-甲基吡唑-3-羧酸乙酯(16.08g，51.5mM)可以制備標(biāo)題化合物，為白色固體(10.5g，72％)；υmax(KBr)1688，1648，1533和1505cm-1；δH(CDCl3)-0.10(6H，s)，0.81(9H，s)，2.35(3H，s)，4.00(2H，t，J5Hz)，4.24(2H，t，J5Hz)，6.60(1H，s)；NH3DCI m/e 285(100％)。制備43-乙?；?1-(2-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基)-5-甲基吡唑?qū)?-(2-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基)-5-甲基吡唑-3-羧酸(5.6g，19.7mM)的乙醚(100ml)溶液冷卻到0-5℃。加入三乙胺(3.3ml，23.6mM)，接著加入氯代甲酸異丁基酯(2.8ml，21.7mM)。冷卻下攪拌所得的混合物0.5小時(shí)，然后過(guò)濾。用10％氫氧化鈉溶液處理二甲基羥基胺鹽酸鹽(3.84g，39.4mM)并攪拌15分鐘。然后用二氯甲烷提取混合物兩次并干燥(MgSO4)提取物。將溶液加到含混合酸酐的混合物中并攪拌2小時(shí)，用鹽水洗滌反應(yīng)混合物，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。通過(guò)硅膠純化，以乙酸乙酯洗脫，得到1-(2-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基)-5-甲基吡唑-3-基-(N-甲氧基-N-甲基)甲酰胺(1.87g，29％)，為無(wú)色油狀物；υmax(CH2Cl2)1721，1703，和1640cm-1；NH3DCI m/e 328(100％)。
將1-(2-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基)-5-甲基吡唑-3-基-(N-甲氧基-N-甲基)甲酰胺(1.87g，5.7mM)的THF(50ml)溶液冷卻到-10℃并用3M的甲基溴化鎂(4.0ml，12mM)溶液處理，在0℃攪拌所得的混合物1.5小時(shí)，然后再用冰冷的5％鹽酸的甲醇(30ml)溶液處理。蒸發(fā)混合物以除去甲醇，然后用二氯甲烷提取，用鹽水洗滌提取物，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)得到標(biāo)題化合物，為油狀物(1.61g，100％)；υmax(CH2Cl2)1681和1422cm-1；δH(CDCl3)-0.10(6H，s)，0.80(9H，s)，2.33(3H，d，J0.7Hz)，2.54(3H，s)，4.00(2H，t，J5Hz)，4.19(2H，t，J5Hz)和6.50(1H，s)；NH3DCI m/e 283(100％)。制備5(3S，4R)-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-4-{[1-(2-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基)-5-甲基吡唑-3-基羰基]甲基]氮雜環(huán)丁-2-酮使3-乙?；?1-(2-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基)-5-甲基吡唑(1.42g，5.04mM)按實(shí)施例4制備5所述的方式進(jìn)行反應(yīng)，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(1.02g，80％)；νmax(KBr)1736和1679cm-1；δH(CDCl3)-0.01(6H，s)，0.07(6H，s)，0.81(9H，s)，0.87(9H，s)，1.22(3H，d，J6Hz)，2.33(3H，s)，2.88-2.93(1H，m)，3.13(1H，dd，J10，17Hz)，3.50(1H，dd，J3.5，17Hz)，3.94-4.26(6H，m)，6.08(1H，s)和6.51(1H，s)；m/e 509.3099(C25H47N3O4Si2理論值509.3105)。制備6{(3S，4R)-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-4-{[1-(2-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基)-5-甲基吡唑-3-基羰基]甲基}-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基}三丁基正膦亞基乙酸烯丙基酯根據(jù)實(shí)施例4制備6所述的方法，從(3S，4R)-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-4-{[1-(2-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基)-5-甲基吡唑-3-基羰基]甲基}氮雜環(huán)丁-2-酮(1.02g，2.0mM)可以制備標(biāo)題化合物，為黃色油狀物(1.05g，65％)；υmax(二氯甲烷)1736，1678和1605cm-1。制備7{(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-[1-(2-羥基乙基)-5-甲基吡唑-3-基}碳代青霉2-烯-3-羧酸烯丙基酯根據(jù)實(shí)施例4制備7所述的方法，從{(3S，4R)-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-4-{[1-(2-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基)-5-甲基吡唑-3-基羰基]甲基}-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基}三丁基正膦亞基乙酸烯丙基酯可以制備標(biāo)題化合物，為黃色油狀物(0.246g，52％)；υmax(CH2Cl2)1774cm-1；δH(CDCl3)1.36(3H，d，J6Hz)，2.29(3H，s)，3.18-3.40(2H，m)，3.48-3.70(1H，m)，3.95-4.40(6H，m)，4.67-4.95(2H，m)，5.21-5.54(2H，m)，5.90-6.10(1H，m)，和7.00(1H，s)；NH3DCI m/e 362(70％)。制備8{(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-[1-(2-羥基乙基)-5-甲基吡唑-3-基}碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉根據(jù)實(shí)施例4制備8所述的方法，從{(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-[1-(2-羥基乙基)-5-甲基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羰酸烯丙基酯(0.246g，0.68mM)可以制備標(biāo)題化合物，為淺黃色凍干的固體(0.05g，21％)；λmax(H2O)297(e8223)；υmax(KBr)1752，1590，和1389cm-1；δH(D2O)1.31(3H，d，J6.5Hz)，2.29(3H，s)，3.13-3.30(2H，m)，3.42-3.56(1H，m)，3.88(2H，d，J5Hz)，4.18(2H，t，J5Hz)，4.05-4.30(2H，m)和6.45(1H，s)；m/e 344(MH+)。實(shí)施例12{(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-[1-(2-甲氧基乙基)-5-甲基吡唑-3-基]}碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉制備13-乙?；?1-(2-羥基乙基)-5-甲基吡唑用2M鹽酸(10ml)處理3-乙酰基-1-(2-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基)-5-甲基吡唑(1.6g，5.7mM)的甲醇(50ml)溶液，攪拌0.5小時(shí)后，蒸發(fā)混合物以除去甲醇，用二氯甲烷和乙酸乙酯重復(fù)提取油狀殘留物，得到標(biāo)題化合物，為無(wú)色油狀物(0.633g，66％)；δH(CDCl3)2.30(3H，s)，2.48(3H，s)，3.98-4.09(2H，m)，4.12-4.21(2H，m)和6.49(1H，s)。制備23-乙?；?1-(2-甲氧基乙基)-5-甲基吡唑用氧化銀(0.87g，3.77mM)和甲基碘化物(0.28ml，4.5mM)處理3-乙?；?1-(2-羥基乙基)-5-甲基吡唑(0.63g，3.77mM)的乙二醇二甲醚(10ml)溶液，加入氫化鈉(0.17g，60％油懸浮液，4.14mM)并攪拌所得的混合物2小時(shí)，然后通過(guò)硅藻土過(guò)濾并蒸發(fā)。在硅膠上純化，以乙酸乙酯洗脫，得到標(biāo)題化合物(0.157g，22％)；υmax1681cm-1；δH(CDCl3)2.32(3H，s)，2.50(3H，s)，3.30(3H，s)，3.78(2H，t，J5.4Hz)，4.25(2H，t，J5.4Hz)，和6.51(1H，s)；EI m/e 182(65％)。制備3(3S，4R)-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-4-{[1-2-甲氧基乙基)-5-甲基吡唑-3-基羰基]甲基}氮雜環(huán)丁-2-酮使3-乙?；?1-(2-甲氧基乙基)-5-甲基吡唑(0.67g，3.73mM)按實(shí)施例4制備5所述的方式進(jìn)行反應(yīng)，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(0.58g，76％)；υmax(KBr)1761和1679cm-1；δH(CDCl3)0.07(6H，s)，0.87(9H，s)，1.21(3H，d，J6Hz)，2.33(3H，s)，2.89(1H，m)，3.12，3.19(1H，2d，J10Hz)，3.48(1H，dd，J3.5，17Hz)3.76(2H，t，J5Hz)，4.03-4.28(4H，m)，6.12(1H，s)和6.52(1H，s)；NH3DCI m/e 410(100％)。制備4{(3S，4R)-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-4-{[1-(2-甲氧基乙基)-5-甲基吡唑-3-基羰基]甲基}-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基}三丁基正膦亞基乙酸烯丙基酯根據(jù)實(shí)施例4制備5所述的方法，從(3S，4R)-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-4-{[1-(2-甲氧基乙基)-5-甲基吡唑-3-基羰基]甲基}氮雜環(huán)丁-2-酮(1.02g，2.0mM)可以制備標(biāo)題化合物，為黃色油狀物(0.51g，49％)，νmax(二氯甲烷)1739，1678和1605cm-1。制備5{(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-[1-(2-甲氧基乙基)-5-甲基吡唑-3-基}碳代青霉-2-烯-3-羧酸烯丙基酯根據(jù)實(shí)施例4制備6所述的方法，從{(3S，4R)-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-4-{[1-(2-甲氧基乙基)-5-甲基吡唑-3-基羰基]甲基}-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基}三丁基正膦亞基乙酸烯丙基酯可以制備標(biāo)題化合物，為黃色油狀物(0.83g，26％)；υmax(CH2Cl2)1773，1720cm-1；δH(CDCl3)1.36(3H，d，J6Hz)，2.30(3H，s)，3.14-3.23(1H，m)，3.30(4H，m)，3.59(1H，dd，J10，19Hz)，3.72(2H，t，J5.5Hz)，4.13-4.40(4H，m)，4.60-4.91(2H，m)，5.24-5.50(2H，m)，5.78-6.09(1H，m)，和6.99(1H，s)；m/e375.1793(C19H25N3O5理論值375.1794)。制備6{(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-[1-(2-甲氧基乙基)-5-甲基吡唑-3-基}碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉根據(jù)實(shí)施例4制備7所述的方法，從{(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-[1-(2-甲氧基乙基)-5-甲基吡唑-3-基}碳代青霉-2-烯-3-羧酸烯丙基酯(0.83g，0.22mM)可以制備標(biāo)題化合物，為黃色凍干燥體(0.037g，47％)；λmax(H2O)297.5nm(e 5931)；υmax(KBr)1750和1701cm-1；δH(D2O)1.29(3H，d，J6.5Hz)，2.26(3H，s)，3.28(5H，m)，3.44-3.50(1H，m)，3.78(2H，t，J5Hz)，4.05-4.38(4H，m)，和6.43(1H，s)；m/e 336(MH+)。實(shí)施例13(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-(5-芐基-1-甲基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉制備14-芐基-3-甲基-1，2，3-噁二唑-5-酮將N-甲基-L-苯基丙氨酸(2.5g)懸浮于水(25ml)中，并在攪拌下加入濃鹽酸(1ml)處理。將溶液冷卻到5℃并在攪拌下向溶液中加入固體亞硝酸鈉(1.35g)，在5℃攪拌1小時(shí)后，使反應(yīng)混合物在二氯甲烷和水之間分配，用鹽水洗滌有機(jī)溶液并干燥(MgSO4)，過(guò)濾后蒸發(fā)溶劑得到N-硝基-N-甲基-L-苯基丙氨酸，為白色固體。
將前面得到的固體溶于乙醚(250ml)中并與三氟乙酸酐(1.95ml)一起在室溫?cái)嚢?6小時(shí)，減壓蒸去溶劑，使殘留物在乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉溶液之間分配。用鹽水洗滌有機(jī)層，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)得到產(chǎn)物，為白色固體(0.610g)；dH(CDCl3)3.81(3H，s)，3.90(2H，s)，7.15-7.45(5H，m)。制備25-芐基-1-甲基-3-(三-正丁基甲錫烷基)吡唑?qū)?-芐基-3-甲基-1，2，3-二唑-5-酮(0.600g)和乙炔基三正丁基錫(2.5ml)溶于二甲苯(10ml)中，并在氬氣氣氛中于140℃加熱16小時(shí)，然后蒸除溶劑，并使殘留物通過(guò)硅膠色譜純化，用0-10％的丙酮/甲苯梯度洗脫得到產(chǎn)物，為黃色油狀物(0.189g)；dH(CDCl3)0.8-1.7(27H，m)，3.77(3H，s)，4.00(2H，s)，6.09(1H，s)，7.10-7.40(5H，m)。制備3(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-(5-芐基-1-甲基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸對(duì)硝基芐基酯使根據(jù)制備2得到的錫烷，與根據(jù)實(shí)施例2制備1得到的(3R，5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-氧代碳代青霉-3-羧酸對(duì)硝基芐基酯反應(yīng)，可以制備標(biāo)題化合物。通過(guò)硅膠柱色譜將其純化，以乙酸乙酯-甲苯混合物洗脫，得到純產(chǎn)物，為白色固體(產(chǎn)率8％)；Umax(CH2Cl23603，1773，1720，1603cm-1；dH(CDCl3)1.39(3H，d，J6.3Hz)，1.78(1H，d，J4.9Hz)，3.25(1H，dd，J2.8，6.5Hz)，3.32(1H，dd，J9.0和18.7Hz)，3.58-3.75(4H，dd+s，J9.7和18.6Hz)，3.99(2H，s)，4.15-4.38(2H，m)，5.28(1H，d，J13.8Hz)，5.53(1H，d，J13.8Hz)，7.05-7.4(6H，m)，7.68(2H，d，J8.8Hz)，8.21(2H，d，J8.8Hz)；m/z502.1863(M+)，理論值C27H26N4O6502.1852。制備4(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-(5-芐基-1-甲基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉根據(jù)實(shí)施例5制備5所述的方法，從(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-(5-芐基-1-甲基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸對(duì)硝基芐基酯可以制備標(biāo)題化合物；lmax(H2O)297nm(em6660)；Umax(KBr)3423(broad)，1750，1605cm-1；dH(D2O)1.39(3H，d，J6.3Hz)，3.22-3.38(2H，2xdd，J8.6，9.6，17Hz)，3.58(1H，dd，J2.8，5.9Hz)，3.76(3H，s)，4.15(2H，s)，4.28-4.39(2H，m)，6.63(1H，s)，7.31-7.52(5H，m)。實(shí)施例14(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-{[5-甲基-1-[2-(1-甲基-四唑-5-基硫代)乙基]吡唑-3-基}碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉制備13-乙?；?5-甲基-1-[2-(1-甲基四唑-5-基硫代)乙基]吡唑在氬氣氣氛中，將3-乙?；?5-甲基-1-(2-羥基乙基)吡唑(1.74g)，三苯膦(4.071g)和5-巰基-1-甲基四唑(3.605g)溶于無(wú)水THF(125ml)中并冷卻到5℃。滴加入偶氮二羧酸二乙酯(2.70g)的THF(25ml)溶液并攪拌，冷卻溶液，在5℃持續(xù)攪拌4小時(shí)。使反應(yīng)混合物在乙酸乙酯和水之間分配，用碳酸氫鈉溶液，鹽水洗滌有機(jī)溶液，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)，通過(guò)硅膠柱色譜純化得到標(biāo)題化合物(1.25g)。Umax(CH2Cl2)1683cm-1；dH(CDCl3)2.30(3H，s)，2.55(3H，s)，3.80(2H，t)，3.92(3H，s)，4.59(2H，t)，6.51(1H，s)；m/z 266.0953(M+)，理論值C10H14N6OS266.0950。制備2(3S，4R)3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-4-{(5-甲基-1-[2-(1-甲基四唑-5-基硫代)乙基]吡唑-3-基羰基)甲基}氮雜環(huán)丁-2-酮根據(jù)實(shí)施例1制備3所述的方法，從4-乙酰氧基-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]氮雜環(huán)丁-2-酮和制備1所得的產(chǎn)物，可以制備標(biāo)題化合物；Umax(CH2Cl2)3410，1761，1682cm-1；dH(CDCl3)0.09(6H，s)，0.88(9H，s)，1.27(3H，d，J，6.2Hz)，2.34(3H，s)，2.90(1H，dd)，3.15(1H，dd，J10.0和17.1Hz)，3.48(1H，dd，J2.5和17.1Hz)，3.75-3.84(2H，m)，3.93(3H，s)，4.05-4.29(2H，m)，4.60(2H，t)，6.10(1H，s)，6.57(1H，s)m/z 493.2290(M+)，理論值C21H35N7O3SSi493.2291。制備32-{(3S，4R)-4-[(5-甲基-1-[2-(1-甲基四唑-5-基硫代)乙基]吡唑-3-基羰基)甲基]-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-2-氧代氮雜環(huán)丁烷基}-2-(三-正丁基正膦亞基)乙酸烯丙基酯根據(jù)實(shí)施例10制備6和7所述的步驟，從制備2所得的產(chǎn)物可以制備標(biāo)題化合物(產(chǎn)率63％)；νmax(二氯甲烷)1736，1682，1605cm-1。制備4(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-{5-甲基-1-[2-(1-甲基-四唑-5-基硫代)乙基]吡唑-3-基}碳代青霉-2-烯-3-羧酸烯丙基酯根據(jù)實(shí)施例10制備8和9所述的步驟，從制備3所得的產(chǎn)物可以制備標(biāo)題化合物(產(chǎn)率60％)；νmax(CH2Cl2)3606，1774，1718cm-1；dH(CDCl3)1.39(3H，d，J6.3Hz)，1.78(1H，d，J4.9Hz)，2.29(3H，s)，3.22(1H，dd，J2.9和6.7Hz)，3.28(1H，dd，J9和18.6hz)，3.58(1H，dd，J9.8和18.5Hz)，3.78(2H，t)，3.91(3H，s)，4.17-4.35(2H，m)，4.52(2H，t)，4.68-4.92(2H，m)，5.24-5.52(2H，m)，5.92-6.1(1H，m)，7.01(1H，s)；m/z 459.1689(M+)，理論值C20H25N7O4S，459，1689。制備5(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-{5-甲基-1-[2-(1-甲基-四唑-5-基硫代)乙基]吡唑-3-基}碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉根據(jù)實(shí)施例9制備10所述的方法，從制備4所得的產(chǎn)物可以制備標(biāo)題化合物；lmax(H2O)299nm(em12，167)；Umax(KBr)3425(寬)，1760，1608(窄)，1577cm-1；dH(D2O)1.36(3H，d，J6.4Hz)，2.34(3H，s)，3.02-3.22(2H，m)，3.53(1H，dd，J2.85，5.95Hz)，3.78-3.87(2H，m)，3.93(3H，s)，4.25-4.38(2H，m)，4.4-4.55(2H，m)，6.42(1H，s)。實(shí)施例15(5R，6S)-2-[1-(2-乙酰氨基乙基)-5-甲基吡唑-3-基]-6-[(IR)-1-羥基乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉制備13-乙?；?1-(2-羥基乙基)-5-甲基吡唑在室溫下，將1M鹽酸水溶液(39ml)加到攪拌中的，如實(shí)施例11制備4所述預(yù)先制備的甲硅烷基醚(5.93g)的甲醇(100ml)溶液中，攪拌1.5小時(shí)后，向反應(yīng)混合物中加入碳酸氫鈉以將其中和。過(guò)濾所得的混合物并用甲醇洗滌，濃縮濾液和洗液得到油狀固體，在室溫將其真空干燥1小時(shí)。使所得的固體與丙酮(70ml)一起攪拌0.25小時(shí)，濾除不溶的固體并用丙酮(20ml)洗滌。濃縮濾液得到固體，在室溫真空干燥1小時(shí)，然后與己烷(100ml)一起攪拌，濾除不溶的固體確認(rèn)為標(biāo)題化合物(3.4g，95％)m.p.78-9C(實(shí)測(cè)值C，57.26；H，7.30N，16.26％。C8H12N2O2理論值C，57.13；H，7.19；16.66％)；dH(CDCl3)2.32(3H，s)，2.53(3H，s)，3.12(1H，t，J6.2)，4.05-4.11(2H，m)，4.16-4.20(2H，m)，6.55(1H，s)。制備23-乙?；?1-(2-甲磺酰氧基乙基)-甲基吡唑在0℃氬氣氣氛中，將甲磺氯(0.86ml)滴加入如實(shí)施例15制備1所述制備的醇(1.86g)的無(wú)水吡啶(19ml)溶液中，然后在3小時(shí)內(nèi)使溶液溫?zé)岬绞覝?，濃縮反應(yīng)混合物得到的固體通過(guò)硅膠色譜純化，以丙酮/甲苯混合物洗脫，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(2.25g，93％)；m.p.108-9℃(實(shí)測(cè)值C，44.02；H，5.85；N，11.47％。C9H14N2O4S理論值C，43.89；H，5.73；N，11.37％)；νmax(CHCl3)/cm-13021，1683，1367；δH(CDCl3)2.35(3H，s)，2.53(3H，s)，2.87(3H，s)，4.41(2H，t，J5.4)，4.66(2H，t，J5.4)，6.54(1H，s)m/z(EI)246(M+，88％)，231(M+-CH3，100)，167(M+-SO2CH3，95)。制備33-乙酰基-1-(2-疊氮基乙基)-5-甲基吡唑在氬氣氣氛中，將實(shí)施例15制備2所述的甲磺?；?2.54g)，疊氮化鈉(3.4g)，四丁基銨硫酸氫鹽(3.53g)混合物的N，N-二甲基甲酰胺(70ml)溶液在60℃攪拌并加熱9小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物得到油狀的固體，使其在二氯甲烷(100ml)和飽和鹽水(100ml)之間分配，用二氯甲烷(50ml)再次取餾份，干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)提取物并濃縮得到油狀物，將其通過(guò)硅膠色譜純化，以丙酮/甲苯混合物洗脫，得到標(biāo)題化合物，為無(wú)色油狀物(1.91g，96％)νmax(CHCl3)/cm-13014，2105，1682；δH(CDCl3)2.34(3H，s)，2.54(3H，s)，3.79(2H，t，J5.46)，4.21(2H，t，J5.5)，6.54(1H，s)；m/z(EI)193(M+，26％)，137(CH2N3，100)(實(shí)測(cè)值m/z 193.0963。C8H11N5O理論值193.0964)。制備4(3S，4R)-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-4-{[1-2疊氮基乙基-5-甲基吡唑-3-基羰基]甲基}氮雜環(huán)丁-2-酮在-78℃氬氣氣氛中，在5分鐘內(nèi)將二(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰(9.8ml，1M四氫呋喃溶液)加到攪拌下的，如實(shí)施例15制備3所述疊氮化物(1.9g)的無(wú)水四氫呋喃(30ml)溶液中，在這個(gè)溫度下攪拌溶液0.5小時(shí)，然后在10分鐘內(nèi)加入4-乙酰氧基-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]氮雜環(huán)丁-2-酮(283g)的無(wú)水四氫呋喃(15ml)溶液，在-78℃攪拌0.75小時(shí)，然后在-20℃放置15小時(shí)。通過(guò)加入飽和氯化銨溶液使混合物驟冷，然后在攪拌下5分鐘內(nèi)加入乙酸乙酯(300ml)。分離各層后，用乙酸乙酯(100ml)提取含水餾份，干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)餾份并濃縮得到油狀物，將其通過(guò)硅膠色譜純化，以丙酮/甲苯混合物洗脫，得到標(biāo)題化合物，為油狀物(1.79g，43％)；νmax(CHCl3)/cm-13411，3055，2956，2106，1761，1682；δH(CDCl3)0.08(6H，s)，0.87(9H，s)，1.21(3H，d，J6.3)，2.36(3H，s)2.89(1H，dd，J2.4，4.8)，3.15(1H，dd，J10.0，17.3)，3.50(1H，dd，J 3.4，17.3)，3.79(2H，t，J5.9)，4.10(1H，dt，J3.2，10.0)，4.21(3H，t，J5.9)，6.08(1H，s)，6.56(1H，s)；m/z(NH3DCI)421(MH+，48％)，91(100)(實(shí)測(cè)值m/z 420.2301。C19H32N6SiO3理論值420.2305)。制備5(3S，4R)-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-4-{[1-(2-乙酰氨基乙基-5-甲基吡唑-3-基羰基]甲基}氮雜環(huán)丁-2-酮使3％鈀-炭(500mg)懸浮于如實(shí)施例15制備4所述的疊氮化物(1.47g)的四氫呋喃(100ml)和乙酸酐(0.66ml)的溶液中，在氫氣大氣壓和室溫下攪拌所得的混合物3小時(shí)，然后通過(guò)硅藻土過(guò)濾。濃縮濾液得到油狀物，通過(guò)硅膠色譜純化，以丙酮/甲苯混合物洗脫，接著用甲醇/二氯甲烷混合物洗脫得到泡沫狀標(biāo)題化合物(681mg，45％)，νmax(CHCl3)/cm-13455，3417，3017，1757，1677；δH(CDCl3)0.07(6H，s)，0.87(9H，s)，1.22(3H，d，J6.2)，1.97(3H，s)，2.30(3H，s)，2.89(1H，dd，J3.0，5.1)，3.15(1H，dd，J17.1，10.1)，3.45(1H，dd，J，17.1，3.4)，3.71(2H，q，J5.8)，4.09(1H，dt，J3.1，10.1)，4.16-4.25(3H，m)，5.94(1H，br.s)，6.15(1H，s)，6.55(1H，s)；m/z(NH3DCI)437(MH+，73％)。制備6{(3S，4R)-3-[(R)-1-羥基乙基]-4-[(5-甲基-1-乙酰氨基乙基吡唑-3-基羰基)甲基]-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基}三丁基正膦亞基乙酸烯丙基酯在氬氣氣氛中，在共沸除去水的條件下，使實(shí)施例15制備5的吡唑化合物(675mg)和乙醛酸烯丙基酯一水合物(246mg)在甲苯(20ml)中混合，并在攪拌下加熱回流1小時(shí)。冷卻到室溫后，加入三乙胺(43μl)并攪拌溶液15小時(shí)，然后濃縮得到油狀物，將其再次溶于甲苯(50ml)中并再濃縮得到油狀半胺化物(hemiaminals)的非對(duì)映體的混合物(Rf＝0.19，0.26丙酮/甲苯1∶1)在氬氣氣氛中，向冷卻到-10℃的半胺化物混合物的四氫呋喃(15ml)溶液中，在2分鐘加入2，6-二甲基吡啶(270μl)，接著在5分鐘內(nèi)加入亞硫酰氯(136μl)，然后在-10℃攪拌混合物20分鐘，經(jīng)過(guò)這段時(shí)間后，用甲苯(15ml)稀釋混合物，過(guò)濾以除去不溶的固體并用甲苯洗滌。合并濾液和洗液并濃縮得到油狀物Rf＝0.35，丙酮/甲苯1∶1)，在室溫下將其真空干燥1小時(shí)。向懸浮于1，4-二烷(5ml)的該油狀物中，加入三正丁基膦(1.14ml)，并在室溫氬氣氣氛中攪拌所得的混合物1.5小時(shí)。然后加入2，6-二甲基吡啶(0.2ml)，并再攪拌混合物1小時(shí)，之后用乙酸乙酯(50ml)稀釋并用0.2M鹽酸水溶液(50ml)，飽和碳酸氫鈉溶液(50ml)和鹽水(50ml)洗滌所得的溶液。干燥(MgSO4)有機(jī)提取物并濃縮得到油狀物Rf＝0.16，丙酮/甲苯1∶1)，確認(rèn)為{(3S，4R)-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-4-[(5-甲基-1-乙酰氨基乙基吡唑-3-基羰基)甲基]-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基}三丁基正膦亞基乙酸烯丙基酯。
向上述油狀物的甲醇(20ml)溶液中加入2M鹽酸水溶液(5ml)并在室溫下攪拌1小時(shí)。通過(guò)加入飽和碳酸氫鈉溶液中和所得的混合物，然后用乙酸乙酯(3×20ml)提取。用飽和鹽水洗滌合并的有機(jī)提取物，干燥(MgSO4)并濃縮得到油狀物，使其通過(guò)硅膠色譜純化，以二氯甲烷/甲醇混合物洗脫，得到泡沫狀標(biāo)題化合物(共248mg，26％)(Rf＝0.38，甲醇/二氯甲烷1∶9)，νmax(CHCl3)/cm-13454(br)，3018，1739，1670；δH(CDCl3)0.9-0.96(9H，m)，1.24-1.46(21H，m)，1.94(3H，s)，2.27(3H，s)，2.83(1H，br.s)，3.5-3.7(4H，m)，4.05-4.20(4H，m)，4.4-4.5(2H，m)，5.1-5.34(1H，m)，5.8-6.1(2H，m)，6.52(1H，s)；m/z(NH3DCI)621(MH+，8％)，203(P(C4H9)3H+，100)。制備7{(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-(1-乙酰氨基-5-甲基吡唑-3-基)}碳代青霉-2-烯-3-羧酸烯丙基酯向?qū)嵤├?5制備6所述的攪拌下的氮雜環(huán)丁二酮(azetidinone)化合物(274mg)的二氯甲烷(2ml)溶液中，順序加入三乙胺(83μl)，4-二甲基氨基吡啶(5mg)，三甲基甲硅烷基氯(76μl)。在氬氣氣氛中攪拌所得的溶液0.75小時(shí)，然后用水和鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)并濃縮得到油狀物。將所得的油狀物溶于甲苯(50ml)中，所述的甲苯事先通過(guò)活化的堿性氧化鋁，向溶液中加入氫醌(5mg)。在氬氣氣氛中加熱回流所得的溶液2.5小時(shí)并濃縮得到油狀物，將所得的油狀物溶于四氫呋喃(10ml)中，并向溶液中加入0.05M鹽酸水溶液(5ml)。在室溫?cái)嚢杷萌芤?.5小時(shí)后，通過(guò)加入飽和碳酸氫鈉溶液中和，然后用二氯甲烷(2×20ml)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)提取物并濃縮得到油狀物，使其通過(guò)硅膠色譜純化，以丙酮/甲苯混合物洗脫，得到標(biāo)題化合物，為白色固體。m.p.149-51℃υmax(CHCl3)/cm-13452(br)，3375，3019，2963，1774，1718，1670；δH(CDCl3)1.38(3H，d，J6.3)，1.86(1H，d，J4.9)，1.98(3H，s)，2.26(3H，s)，3.21(1H，dd，J2.8，6.9)，3.25(1H，dd，J9.0，18.4)，3.53(1H，dd，J9.9，18.4)，3.69(2H，q，J5.9)，4.13(2H，t，J5.6)，4.19-4.31(2H，m)，4.69-4.90(2H，m)，5.25-5.50(2H，m)，5.93-6.06(1H，m)，6.21(1H，br.s)，6.90(1H，s)；m/z(NH3DCI)403(MH+，38％)，359(M+-COCH3，100)。制備8(5R，6S)-2-[1-(2-乙酰氨基乙基)-5-甲基吡唑-3-基]-6-[(1R)-1-羥基乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉在室溫氬氣氣氛中，順序用2-乙基己酸鈉(51mg)，三苯膦(7mg)和四(三苯膦)鈀(9.7mg)處理實(shí)施例15制備8的烯丙基酯(114mg)在乙酸乙酯/二氯甲烷(2ml，1∶1)中的溶液，攪拌1小時(shí)后，濃縮混合物得到固體，將其與無(wú)水乙醚(4ml)一起攪拌0.25小時(shí)。將不溶的固體濾除并溶于水(5ml)中，在Diaion HP20SS樹脂上通過(guò)色譜純化溶液，以四氫呋喃/水混合物洗脫，將沉淀的適當(dāng)?shù)酿s份凍干后，得到標(biāo)題化合物，為無(wú)定形固體(70mg，65％)；νmax(KBr)/cm-13439(br)，1766，1649；λmax(H2O)/nm 299(ε/dm3mol-1cm-18140)；δH(D2O)1.27(3H，d，J6.4)，1.88(3H，s)，2.20(3H，s)，3.15-3.21(2H，m)，3.46(1H，dd，J6.0，2.9)，3.50(2H，dd，J 6.1，5.0)，4.12(2H，dd，J 6.1，5.0)，4.19-4.28(2H，m)，6.39(1H，s)；m/z(電子轟擊)385(MNa+，100％)，363(MH+，10)。實(shí)施例16(5R，6S)-2-[1-(2-甲硫基乙基)-5-甲基吡唑-3-基]-6-[(1R)-1-羥基乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉制備13-乙?；?1-(2-甲硫基乙基)-5-甲基吡唑在0℃氬氣氣氛中，將甲硫醇鈉(480mg)分批加到攪拌中的、實(shí)施例15制備2所述甲磺酸酯(1.0g)的無(wú)水N，N-二甲基甲酰胺(10ml)溶液中，使反應(yīng)混合物溫?zé)岬绞覝兀缓髷嚢?.5小時(shí)。真空濃縮混合物，將得到的殘留物溶于乙酸乙酯(100ml)中并用水(3×50ml)，鹽水洗滌溶液，然后干燥(Na2SO4)并濃縮得到油狀物，使其通過(guò)硅膠色譜純化，以乙酸乙酯/己烷混合物洗脫，得到油狀標(biāo)題化合物(753mg，94％)νmax(CH2Cl2)/cm-11681，1605；dH(CDCl3)2.04(3H，s)，2.35(3H，s)，2.53(3H，s)，2.96(2H，t，J7.2)，4.27(2H，t，J7.2)和6.52(1H，s)；m/z(EI)198(M+， 55％)(實(shí)測(cè)值m/z 198.0833。C9H14N2OS理論值198.0827)。制備2(3S，4R)-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-4-{[1-(2-甲硫基乙基-5-甲基吡唑-3-基羰基]甲基}氮雜環(huán)丁-2-酮根據(jù)實(shí)施例15制備4所述的同樣的方法，用二(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰(2.99ml)和氮雜環(huán)丁二酮(430mg)的四氫呋喃(4ml)溶液，處理實(shí)施例16制備1所述硫醚化合物(590mg)的無(wú)水四氫呋喃(35ml)溶液，通過(guò)硅膠色譜除去雜質(zhì)(work-up)和純化后(乙酸乙酯/己烷溶劑的混合物洗脫)得到油狀標(biāo)題化合物(386mg，61％)νmax(CH2Cl2)/cm-13410，1760，1680；dH(CDCl3)0.06(6H，s)，0.86(9H，s)，1.21(3H，d，J，6.3)，2.05(3H，s)，2.36(3H，s)，2.89(1H，m)，2.96(3H，t，J7.1)，3.14(1H，dd，J17，10)，3.48(1H，dd，J3.5)，4.0-4.3(2H，m)，4.28(2H，t，J 7.1)，6.10(1H，s)，6.54(1H，s)。制備3{(3S，4R)-3-[(R)-1-羥基乙基]-4-[(5-甲基-1-甲硫基乙基吡唑-3-基羰基)-甲基]-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基}三丁基正膦亞基乙酸烯丙基酯根據(jù)實(shí)施例15制備6所述的類似的方法，用乙醛酸烯丙基酯(324mg)的甲苯(50ml)溶液處理實(shí)施例16制備2所述的氮雜環(huán)丁二酮(550mg)，得到產(chǎn)物的中間體(544mg)，用亞硫酰氯(108μl)和2，6-二甲基吡啶(176μl)的四氫呋喃(15ml)溶液將其處理，得到中間體氯化物的非對(duì)映體粗產(chǎn)物。用三正丁基膦(0.753ml)和1，4-二噁烷(7ml)處理得到的中間體，得到了三丁基正膦亞基中間體粗品，為油狀物，再用2M含水鹽酸(5ml)/甲醇(15ml)處理，通過(guò)硅膠色譜純化(乙酸乙酯/己烷溶劑的混合物洗脫)粗產(chǎn)物后，得到樹膠狀標(biāo)題化合物(共393mg，53％)νmax(CH2Cl2)/cm-13459，1741，1667，1636和1605；m/z(EI)609(M+)，m/z(NH3DCI)610(MH+)。制備4{(5R，6S)-6-[(R)-1-羥基乙基]-2-(5-甲基-1-甲硫基乙基吡唑-3-基)}碳代青霉-2-烯-3-羧酸烯丙基酯在氬氣氣氛中加熱回流實(shí)施例16制備3所述正膦亞基化合物(392mg)的甲苯(150ml)溶液4小時(shí)，濃縮溶液得到油狀物，使其通過(guò)硅膠色譜純化，以乙酸乙酯/己烷混合物洗脫，得到固體標(biāo)題化合物(168mg，67％)，νmax(CH2Cl2)/cm-11773，1716，1600；dH(CHCl3)1.36(3H，d，J6.3)，2.03(3H，s)，2.32(3H，s)，2.90(2H，t，J6.9)，3.2(1H，m)，3.26(1H，dd，J18.4，8.8)，3.58(1H，dd，J18.4，9.8)，4.1-4.3(4H，m)，4.6-4.9(2H，m)，5.26(1H，dd，J10.5，1.3)，5.46(1H，dd，J17.3，1.3)，6.0(1H，m)和7.00(1H，s)；m/z(EI)391(M+)，m/z(NH3DCI)392(MH+)。(實(shí)測(cè)值m/z 391.1565.C19H25N3O4S理論值391.1566)。制備5(5R，6S)-2-[1-(2-甲硫基乙基)-5-甲基吡唑-3-基]-6-[(1R)-1-羥基乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉根據(jù)實(shí)施例15制備8所述的類似方法，用三苯膦(4mg)，2-乙基己酸鈉(28mg)，和四(三苯膦)鈀(5.8mg)在二氯甲烷/乙酸乙酯(2ml，1∶1)中的溶液處理實(shí)施例16制備4所述的烯丙基酯(60mg)，在Diaion HP20SS樹脂上純化(以四氫呋喃/水溶劑的混合物洗脫)后，凍干得到無(wú)定形固體(38mg，66％)，νmax(KBr)/cm-13416(br)，1752，1608，1587；lmax(H2O)/nm 296(e/dm3mol-1cm-18950)；dH(D2O)1.26(3H，d，J6.3)，1.96(3H，s)，2.35(3H，s)，2.89(2H，t，J6.5)，3.12(1H，m)，3.19(1H，m)，3.44(1H，m)，4.23(4H，m)，6.42(1H，s)；m/z(電子轟擊)，374(MH+，70％)。實(shí)施例17(5R，6S)-6-[(1R)-1-羥基乙基]-2-(1-甲基-5-乙基吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉a)5-乙基-1-甲基吡唑-3-羧酸乙酯在冰浴中冷卻2，4-二氧代己酸乙酯(12g)的冰醋酸(75ml)溶液，并在5-10分鐘內(nèi)滴加入甲基肼(3.21g)處理。添加完成后移去冰浴，并在室溫下攪拌所得的黃色均勻溶液約2小時(shí)。然后真空除去乙酸并將殘余的油狀物再次溶解在乙酸乙酯(100ml)中，用飽和碳酸氫鈉(3×)和鹽水洗滌乙酸乙酯溶液，用無(wú)水硫酸鎂干燥后蒸發(fā)溶劑。通過(guò)硅膠色譜純化粗產(chǎn)物，以20-70％乙酸乙酯/己烷洗脫，得到標(biāo)題化合物，為淺黃色油狀物(6.656g，52％)；dH(CDCl3)1.28(3H，t，J7.6Hz)，1.38(3H，t，J7.1Hz)，2.61(2H，q，J7.6Hz)，3.84(3H，s)，4.38(2H，q，J7.1Hz)和6.58(1H，s)。b)5-乙基-1-甲基吡唑-3-羧酸用氫化鈉(1.58g)的水(30ml)溶液處理5-乙基-1-甲基吡唑-3-羧酸乙酯(6.86g)的乙醇(70ml)溶液并加熱回流6小時(shí)。濃縮溶液并用乙酸乙酯洗滌水相，之后加入二氯甲烷(50ml)。用5M的鹽酸酸化溶液，用二氯甲烷徹底提取所得的混合物，濾除懸浮于水中的不溶的固體，并用飽和碳酸氫鈉將PH調(diào)至6。再用二氯甲烷提取溶液，用無(wú)水硫酸鎂干燥合并的有機(jī)層并濃縮，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(2.72g，47％)；(實(shí)測(cè)值M+，154.0742。C7H10N2O2理論值M，154.0742)；nmax(CH2Cl2)3689和1760cm-1；dH(CDCl3)1.30(3H，t，J7.4Hz)，2.64(2H，q，J7.4Hz)，3.88(3H，s)和6.65(1H，s)。c)N-甲氧基-N-甲基-5-乙基-1-甲基吡唑-3-甲酰胺用DMF(0.12ml)處理5-乙基-1-甲基吡唑-3-羧酸(2.5g)的二氯甲烷(50ml)溶液，并在氬氣氣氛中冰浴冷卻，滴加入草酰氯(2.2g)的二氯甲烷(25ml)溶液處理上面所得的溶液。添加完成后，使反應(yīng)混合物在0℃保存25分鐘，然后使其溫?zé)岬绞覝?。蒸發(fā)溶液并將殘留物再次溶于甲苯(100ml)中，再次濃縮。將酰氯粗產(chǎn)物溶于二氯甲烷(50ml)中，并用N，O-二甲基羥基胺鹽酸鹽(1.72g)處理，在冰浴下冷卻并加入吡啶(2.86ml)。使所得的反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)，用鹽水洗滌反應(yīng)混合物，用無(wú)水硫酸鎂干燥并濃縮得到油狀物。使產(chǎn)物通過(guò)快速硅膠色譜純化得到黃色油狀標(biāo)題化合物(2.995g，94％)；(實(shí)測(cè)值M+，197.1167。C9H15N3O2理論值M，197.1164)；nmax(CH2Cl2)1640，1484和1374cm-1；dH(CDCl3)1.28(3H，t，J7.5Hz)，2.62(2H，q，J7.5Hz)，3.43(3H，s)，3.76(3H，s)，3.83(3H，s)和6.72(1H，s)。d)3-乙?；?5-甲基-1-甲基吡唑在氬氣氣氛中將N-甲氧基-N-甲基-5-乙基-1-甲基吡唑-3-甲酰胺(2.9g)的無(wú)水四氫呋喃(100ml)溶液冷卻到-20℃并用甲基溴化鎂(9.8ml，3M乙醚溶液)處理，開始生成的沉淀在添加完成時(shí)再溶解。在0℃攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí)，然后將其傾入飽和氯化銨中。用乙酸乙酯提取水相并用鹽水洗滌合并有機(jī)相，用無(wú)水硫酸鎂干燥并濃縮得到棕色油狀物。通過(guò)硅膠色譜純化粗產(chǎn)物，以50％乙酸乙酯/己烷洗脫，得到標(biāo)題化合物，為淺棕色油狀物(1.97g，88％)；(實(shí)測(cè)值M+，152.0950.C8H12N2O理論值M，152.0950)；nmax(CH2Cl2)1693，1472，1376和1352cm-1；dH(CDCl3)1.28(3H，t，J7.4Hz)，2.54(3H，s)，2.61(2H，q，J7.4Hz)，3.84(3H，s)和6.56(1H，s)。e)(3R，4S)-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-4-[2-(5-乙基-1-甲基吡唑-3-基)-2-氧代乙基]氮雜環(huán)丁-2-酮在氬氣氣氛中，將3-乙?；?5-乙基-1-甲基吡唑(1.96g)的THF(70mL)溶液冷卻到-78℃并滴加入二(三甲基甲硅烷基酰胺)鋰(12.9ml，1M己烷溶液)處理，在-78℃放置30分鐘后，以同樣的方式通過(guò)注射器加入(3R，4R)-4-乙酰氧基-3-[(1R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基)乙基]氮雜環(huán)丁-2-酮的無(wú)水四氫呋喃(20ML)溶液。使反應(yīng)混合物在這一溫度下保持4小時(shí)。加入5％檸檬酸(100ml)使反應(yīng)混合物驟冷，并使溶液溫?zé)岬绞覝?。分離水相并用乙酸乙酯提取，用鹽水洗滌合并的有機(jī)相，用無(wú)水硫酸鎂干燥并濃縮得到淺黃色樹膠。通過(guò)硅膠色譜純化，以50％，70％，然后90％的乙酸乙酯/己烷洗脫回收得到起始原料(0.484g，25％)，接著洗脫得到標(biāo)題化合物，為無(wú)色樹膠(2.24g，46％)；(實(shí)測(cè)值M+，379.2292.C19H37N3O3Si理論值M，379.2291)；nmax(CH2Cl2)3410，1760和1678cm-1；dH(CDCl3)0.06(6H，s)，0.86(9H，s)，1.20(3H，d，J6.2Hz)，2.62(2H，q，J6.2Hz)，2.89(1H，dd，J1.8，4.9Hz)，3.14(1H，dd，J10.0，17.1Hz)，3.48(1H，dd，J3.4，17.1Hz)，3.84(3H，s)，4.11(1H，m)，4.20(1H，m)，6.11(1H，br.s)和6.56(1H，s)；m/z(CI，+ve離子，氨)380(MH+)。f)2-{(3R，4S)-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-4-[2-(5-乙基-1-甲基吡唑-3-基)-2-氧代乙基]氮雜環(huán)丁-2-酮-1-基}-2-羥基乙酸烯丙基酯在氬氣氣氛下迪安-斯達(dá)克裝置中，加熱回流(3R，4S)-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-4-[2-(5-乙基-1-甲基吡唑-3-基)-2-氧代乙基]氮雜環(huán)丁-2-酮(2.19g)和乙醛酸烯丙基酯水合物(1.67g)的甲苯(70ml)溶液4小時(shí)，薄層色譜分析表明已不存在起始原料，蒸發(fā)溶液，并將殘留再溶于乙酸乙酯(70ml)中，用水(5×50ml)，鹽水洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥并濃縮得到樹膠，通過(guò)薄層色譜分析表明標(biāo)題化合物的純度足以用于下一步驟(定量2.994g)nmax(CH2Cl2)3523(w)，1759和1675cm-1；m/z(CI，+ve離子，氨)494(MH+)，511(MNH4+)。g)2-{(3R，4S)-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-4-[2-(5-乙基-1-甲基吡唑-3-基)-2-氧代乙基]氮雜環(huán)丁-2-酮-1-基}-2-(三-正丁基正膦亞基)乙酸烯丙基酯在氬氣氣氛中，將2-{(3R，4S)-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-4-[2-(5-乙基-1-甲基吡唑-3-基)-2-氧代乙基]氮雜環(huán)丁-2-酮-1-基}-2-羥基乙酸烯丙基酯(1.943g)的無(wú)水THF(70ml)溶液冷卻到-10℃并用2，6-二甲基吡啶(0.69ml)處理，接著用亞硫酰氯(0.43ml)處理得到白色沉淀。1小時(shí)后，用甲苯稀釋反應(yīng)混合物，通過(guò)硅藻土過(guò)濾并濃縮到干。再加入一部分甲苯并重新蒸發(fā)混合物。然后，將氯化物粗產(chǎn)物溶于二噁烷(15ml)中并加入三-正丁基膦(2.9ml)。2小時(shí)后，室溫下的薄層色譜分析表明已不存在起始原料。用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，用飽和碳酸氫鈉，鹽水洗滌并用無(wú)水硫酸鎂干燥，然后濃縮濾液得到黃色的油狀物。在室溫下，將正膦粗產(chǎn)物溶于甲醇(50ml)中并用2M鹽酸處理1小時(shí)，小心地加入飽和碳酸氫鈉至PH8并用乙酸乙酯(2×100ml)提取混合物，用鹽水洗滌，干燥并濃縮。通過(guò)硅膠色譜純化，以乙酸乙酯，2.5％乙醇/乙酸乙酯，然后5％乙醇/乙酸乙酯洗脫，得到標(biāo)題化合物，為黃色/橙色樹膠(1.94g，60％)；實(shí)測(cè)值M+，563.3493.C30H50N3O5P理論值M.563.3488)；nmax(CH2Cl2)3676，3599，1740，1668和1605cm-1。h)(5R，6S)-2-(5-乙基-1-甲基吡唑-3-基)-6-[(R)-1-羥基乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸烯丙基酯將2-{(3R，4S)-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-4-[2-(5-乙基-1-甲基吡唑-3-基}-2-氧代乙基]氮雜環(huán)丁-2-酮-1-基}-2-(三-正丁基正膦亞基)乙酸烯丙基酯(1.94g)的甲苯(650ml；3mg/ml)溶液共加熱回流7小時(shí)后，薄層色譜分析表明僅有少量未反應(yīng)的起始原料。濃縮溶液，并通過(guò)硅膠色譜純化，以5％，然后以10％丙酮/乙酸乙酯洗脫，得到灰白色固體結(jié)晶的產(chǎn)物。用乙醚研制，接著過(guò)濾得到標(biāo)題化合物，為無(wú)色固體結(jié)晶(356mg；30％)；(實(shí)測(cè)值M+，345.1689.C18H23N3O4理論值M，345.1689)；nmax(CH2Cl2)3603，1774，1716，1599(w)和1542(w)cm-1；dH(CDCl3)1.28(3H，t，J7.4Hz)，1.36(3H，d，J6.3Hz)，1.85(1H，d，J5.0Hz)，2.61(2H，d，J7.4Hz)，3.19(1H，dd，J2.8，6.7Hz)，3.27(1H，dd，J9.0，18.5Hz)，3.59(1H，dd，J9.8，18.5Hz)，3.84(3H，s)，4.24(2H，m)，4.79(2H，m)，5.27(1H，m)，5.46(1H，m)，6.01(1H，m)和7.02(1H，s)。i)(5R，6S)-2-(5-乙基-1-甲基吡唑-3-基)-6-[(R)-1-羥基乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉在氬氣氣氛中，順序用2-乙基己酸鈉(198mg)，三苯膦(27mg)和四(三苯膦)鈀(O)(38mg)處理(5R，6S)-2-(5-乙基-1-甲基吡唑-3-基)-6-[(R)-1-羥基乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸烯丙基酯(348mg)的1∶1乙酸乙酯/二氯甲烷(8ml)中的溶液，幾秒鐘后，生成了灰白色沉淀。在室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物30分鐘，薄層色譜分析(20％丙酮/乙酸乙酯)無(wú)剩余的起始原料存在。真空除去溶劑，殘余固體與乙醚(20ml)一起攪拌，濾除白色固體，用乙醚洗滌并干燥。將所得的固體溶于水(10ml)中，在HP20SS樹脂上色譜純化，以1-5％四氫呋喃/水(每份100ml)洗脫。濃縮合并的含產(chǎn)物的餾份(通過(guò)HPLC監(jiān)測(cè))并冷凍干燥，得到標(biāo)題化合物，為無(wú)定形淺黃色固體(314mg，95％)；nmax(KBr)1755，1614，1586和1386cm-1；dH(D2O)1.17(3H，t，J7.5Hz)，1.26(3H，d，J6.4Hz)，2.56(2H，q，J7.5Hz)，3.16(2H，m)，3.44(1H，dd，J2.8，6.0Hz)，3.68(3H，s)，4.21(2H，m)和6.47(1H，s)，m/z(電子轟擊)328(MH+)，350(MNa+)，633(2MNa+，游離酸)，655(2MH+)，677(2MNa+)。實(shí)施例18(5R，6S)-2-(1，5-二甲基吡唑-3-基)-6-[(R)-1-羥基乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸叔丁氧基羰氧基甲基酯在氬氣氣氛中，將實(shí)施例1的產(chǎn)物(270mg，0.86mmol)溶于N-甲基吡咯烷-2-酮(5ml)，加入叔丁氧基羰氧基甲基碘化物(560mg，1.72mmol)并在室溫?cái)嚢璺磻?yīng)15分鐘。用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物并用水洗滌(三次)。干燥(MgSO4)有機(jī)相，通過(guò)硅膠色譜純化，將其溶于乙酸乙酯并用乙酸乙酯洗脫。用己烷研制所得的棕色油狀物，將殘留物再次溶于二氯甲烷中并真空除去溶劑，得到泡沫狀標(biāo)題化合物(220mg，50％)；δH(CDCl3)1.36(3H，d，J6.3Hz)，1.50(9H，s)，2.10(1H，d，J4.8Hz)，2.28(3H，s)，3.23(1H，dd，J6.0，2.8Hz)，3.21-3.34(1H，m)，3.62(1H，dd，J18.8，9.8Hz)，3.78(3H，s)，3.93(3H，s)，4.11-4.33(2H，m)，5.88和5.92(2H，ABq，J5.9Hz)，7.04(1H，s)。實(shí)施例19(5R，6S)-2-(1，5-二甲基吡唑-3-基)-6-[(R)-1-羥基乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸環(huán)己氧基羰氧基甲基酯在氬氣氣氛中，將實(shí)施例1的產(chǎn)物(126mg，0.40mmol)溶于N-甲基吡咯烷-2-酮(2ml)，加入環(huán)己氧基羰氧基甲基碘化物(228mg，0.80mmol)并在室溫?cái)嚢璺磻?yīng)15分鐘。分離粗產(chǎn)物并根據(jù)實(shí)施例18所述的步驟進(jìn)行下一步純化，分離得到泡沫狀標(biāo)題化合物(108mg，54％)；m/z 447.2006(M+)，理論值C22H29N3O7，447.2006；νmax(CH2Cl2)2943，1773，1594和1549cm-1；δH(CDCl3)1.35(3H，d，J8.3Hz)，1.40-1.60(6H，m)，1.70-1.80(2H，m)，1.85-1.95(2H，m)，2.28(3H，s)，3.17(1H，dd，J6.5，2.7Hz)，3.28(1H，dd，J18.7，9.0Hz)，3.60(1H，dd，J18.7，9.9Hz)，3.78(3H，s)，4.17-4.26(2H，m)，4.65-4.71(1H，m)，5.92和5.94(2H，ABq，J5.7Hz)，7.05(1H，s)。實(shí)施例20(5R，6S)-2-(1-乙基-5-甲基吡唑-3-基)-6-[(R)-1-羥基乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸環(huán)己氧基羰氧基甲基酯在氬氣氣氛中，將實(shí)施例10的產(chǎn)物(174mg，0.53mmol)溶于(2ml)中，加入環(huán)己氧基羰氧基甲基碘化物(302mg，1.06mmol)的N-甲基吡咯烷-2-酮(0.5ml)溶液，并在室溫?cái)嚢璺磻?yīng)20分鐘。根據(jù)實(shí)施例18所述的步驟分離粗產(chǎn)物并進(jìn)行下一步純化，分離得到泡沫狀標(biāo)題化合物(176mg，72％)，并用乙醚重結(jié)晶得到無(wú)色棱晶(137mg，56％)，m.p.124-126℃，(實(shí)測(cè)值M+，461.2151。C23H31N3O7理論值M 461.2162)；υmax(CH2Cl2)3603(w)，1772，1735(窄)，1596和1546cm-1；δH(CDCl3)1.21-1.90(17H，m)，2.29(3H，s)，3.18(1H，dd，J2.7，6.5Hz)，3.29(1H，dd，J9.1，18.8Hz)，3.64(1H，dd，J，9.8，18.8Hz)，4.08(2H，q，J7.2Hz)，4.16-4.30(2H，m)，4.62-4.72(1H，m)，5.92和5.95(2H，ABq，J5.7Hz)和7.05(1H，s)。實(shí)施例21(5R，6S)-6-[(1R)-1-羥基乙基]-2-[5-甲基-1-(2-甲基磺?；一?吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉制備1{(5R，6S)-6-[(1R)-1-羥基乙基]-2-[5-甲基-1-(2-甲基磺?；一?吡唑-3-基]}碳代青霉-2-烯-3-羧酸烯丙基酯在0℃氬氣氣氛中，向?qū)嵤├?6制備4的產(chǎn)物(55mg)的二氯甲烷(2ml)溶液中加入間氯過(guò)氧苯甲酸(30mg，純度80％)，攪拌0.5小時(shí)后，以0.5小時(shí)的間隔進(jìn)一步加入間氯過(guò)氧苯甲酸(25mg和3mg)，共攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí)，然后過(guò)濾，用乙酸乙酯稀釋并用亞硫酸鈉溶液，碳酸氫鈉水溶液，水，鹽水洗滌，干燥并蒸發(fā)。使殘留物通過(guò)硅膠色譜純化，以乙酸乙酯/己烷混合物和乙醇/乙酸乙酯混合物洗脫，得到油狀標(biāo)題化合物(15mg，25％)；υmax(CH2Cl2)3606，1775，1719，1602，1314和1189cm-1；δH(CDCL3)ppm 1.36(3H，d，J6.3Hz)，2.34(3H，s)，2.50(3H，s)，3.15-3.30(2H，m)，3.56(1H，dd，J19和9.9Hz)，3.63(2H，t，J6Hz)，4.2-4.3(2H，m)，4.48(2H，t，J 6Hz)，4.64-4.9(2H，m)，5.26(1H，dd，J10.5和1.2Hz)，5.45(1H，dd，J17.3和1.5Hz)，5.9-6.1(1H，m)和6.99(1H，s)。制備2(5R，6S)-6-[(1R)-1-羥基乙基]-2-[5-甲基-1-(2-甲基磺?；一?吡唑-3-基)碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉根據(jù)實(shí)施例15制備8所述的類似的方法，將實(shí)施例21制備1所述的烯丙基酯(15mg)轉(zhuǎn)化為標(biāo)題化合物。實(shí)施例22(5R，6S)-2-[1-(2-(N，N-二甲基氨基羰氧基)乙基]-5-甲基吡唑-3-基)-6-[(1R)-1-羥基乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉制備13-乙酰基-1-[2-(氯代羰氧基)乙基]-5-甲基吡唑在氬氣氣氛中，用光氣的甲苯(12.5％w/w，5.22ml)溶液處理3-乙?；?1-(2-羥基乙基)-5-甲基吡唑(505 mg，如實(shí)施例12制備1所述制備)的無(wú)水二氯甲烷(5ml)溶液并攪拌混合物1.5小時(shí)。除去溶劑后，加入二氯甲烷并用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器除去得到3-乙?；?1-[2-(氯代羰氧基)乙基]-5-甲基吡唑；υmax(二氯甲烷)1777和1684cm-1。制備23-乙酰基-1-[2-(N，N-二甲基氨基羰氧基)乙基]-5-甲基吡唑用二甲胺鹽酸鹽(367mg)和吡啶(712mg)處理3-乙?；?1-[2-(氯代羰氧基)乙基]-5-甲基吡唑(實(shí)施例22制備1)的無(wú)水二氯甲烷(20ml)溶液并攪拌所得的混合物1.5小時(shí)。然后使所得的混合物在乙酸乙酯和1M鹽酸水溶液之間分配。分離有機(jī)相，用1 M鹽酸水溶液，飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，然后用硫酸鎂干燥并蒸發(fā)，使殘留物通過(guò)硅膠色譜純化，以乙酸乙酯/己烷混合物洗脫，得到3-乙?；?1-[2-(N，N-二甲基氨基羰氧基)乙基]-5-甲基吡唑(222 mg)；υmax(KBr)1697和1683cm-1；δH(CDCl3)2.31(3H，s)，2.53(3H，s)，2.82(3H，s)，2.91(3H，s)，4.4(4H，m)；實(shí)測(cè)值m/z239.1273 C11H17N3O3理論值239.127。制備3(3S，4R)-4-[1-[[2-(N，N-二甲基氨基羰氧基)乙基]-5-甲基吡唑-3-基]羰基甲基]-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]氮雜環(huán)丁-2-酮使3-乙酰基-1-[2-(N，N-二甲基氨基羰氧基)乙基]-5-甲基吡唑(478mg)如實(shí)施例4制備5所述的方式反應(yīng)，得到(3S，4R-4-[1-[[2-(N，N-二甲基氨基羰氧基)乙基]-5-甲基吡唑-3-基]羰基甲基]-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]氮雜環(huán)丁-2-酮(393mg，42％)；υmax(CH2Cl2)1761，1704，1259和1189cm-1；δH(CDCl3)0.05(6H，s)，0.87(9H，s)，1.20(3H，d，J 6.2Hz)，2.31(3H，s)，2.81(3H，s)，2.89(3H，s)，2.90(1H，m)，3.14(1H，dd，J9.9，17Hz)，3.48(1H，dd，J3.5，17Hz)，4.13(1H，m)，4.22(1H，m)，4.34(2H，t，J 5.2Hz)，4.45(2H，t，J 5.2Hz)，6.11(1h，s)，6.53(1H，s)。制備4[(3S，4R)-4-[1-[[2-(N，N-二甲基氨基羰氧基)乙基]-5-甲基吡唑-3-基]羰基甲基]-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]三苯基正膦亞基乙酸烯丙基酯使(3S，4R)-4-[1-[[2-(N，N-二甲基氨基羰氧基)乙基]-5-甲基吡唑-3-基]羰基甲基]-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]氮雜環(huán)丁-2-酮(2.39g)如實(shí)施例4制備6所述方法進(jìn)行反應(yīng)(以三苯膦取代了三丁基膦)，得到[(3S，4R)-4-[1-[[2-(N，N-二甲基氨基羰氧基)乙基]-5-甲基吡唑-3-基]羰基甲基]-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]三苯基正膦亞基乙酸烯丙基酯(2.69g，64％)；υmax(二氯甲烷)1736，1703，1275，1190cm-1。制備5[(5R，6S)-2-[1-[2-(N，N-二甲基氨基羰基氧)乙基]-5-甲基吡唑-3-基)-6-[(R)-1-羥基乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸烯丙基酯使[(3S，4R)-4-[1-[[2-(N，N-二甲基氨基羰氧基)乙基]-5-甲基吡唑-3-基]羰基甲基]-3-[(R)-1-叔丁基二甲基甲硅烷氧基乙基]-2-氧代氮雜環(huán)丁烷-1-基]三苯基正膦亞基乙酸烯丙基酯(2.64g)如實(shí)施例4制備7所述進(jìn)行反應(yīng)，得到(5R，6S)-2-[1-[2-(N，N-二甲基氨基羰氧基)乙基]-5-甲基吡唑-3-基]-6-[(R)-1-羥基乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸烯丙基酯(285mg，20％)；υmax(CH2Cl2)1774，1703，1311，1275，和1187cm-1；δH(CDCl3)1.36(3H，d，J 6.3Hz)，1.9(1H，d，J4.6Hz)，2.28(3H，s)，2.81(3H，s)，2.90(3H，s)，3.19(1H，dd，J2.8，6.7Hz)，3.27(1H，dd，J9，18Hz)，3.59(1H，dd，J10，18Hz)，4.2(1H，m)，4.28(2H，m)，4.40(2H，m)，4.43(1H，m)，4.80(2H，m)，5.27(1H，dd，J1.3，9.2Hz)，5.47(1H，m)，6.0(1H，m)，7.03(1H，s)；m/z(EI)432。制備6(5R，6S)-2-[1-[2-(N，N-二甲基氨基羰氧基)乙基]-5-甲基吡唑-3-基]-6-[(1R)-1-羥基乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉根據(jù)實(shí)施例4制備8所述的方法，從[(5R，6S)-2-[1-[2-(N，N-二甲基氨基羰氧基)乙基]-5-甲基吡唑-3-基]]-6-[(R)-1-羥基乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸烯丙基酯可以制備標(biāo)題化合物。
權(quán)利要求
1.通式(I)化合物
其中R為
其中Rα為氫，任意取代的(C1-6)烷基或任意取代的芳基；Rβ為氫，任意取代的(C1-6)烷基或任意取代的芳基；或Rα和Rβ共同形成任意取代的5或6員雜環(huán)，具有或不具有附加雜原子；R1為(C1-6)烷基，可被氟，被任意易離去羥基保護(hù)基保護(hù)的羥基，或被任意易離去氨基保護(hù)基保護(hù)的氨基取代或未取代；R2為氫或甲基；且-CO2R3為羧基或羧酸鹽陰離子或R3為易離去羧基保護(hù)基。
2.權(quán)利要求1的化合物，具有通式(Ia)結(jié)構(gòu)
其中R，R1和R2定義如上(權(quán)利要求1)或其藥學(xué)上可接受的鹽或其藥學(xué)上可接受的體內(nèi)可水解的酯。
3.權(quán)利要求1或2的化合物，其中對(duì)于Rα和Rβ而言的(C1-6)烷基包括具有1到6個(gè)碳原子的直鏈和支鏈烷基。
4.權(quán)利要求1，2或3的化合物，其中Rα和Rβ可分別或同時(shí)是甲基，乙基，正丙基和異丙基。
5.按照權(quán)利要求1-4的任一化合物，其中Rα是乙基且Rβ是甲基。
6.按照權(quán)利要求1-5的任一化合物，其中芳基包括任意最多被5個(gè)取代基取代的苯基和萘基。
7.按照上述任一權(quán)利要求的化合物，其中R1是(R)-1-羥乙基。
8.按照上述任一權(quán)利要求的化合物，其中R2是氫。
9.制備通式(I)化合物的方法
其中R為
其中Rα為氫，任意取代的(C1-6)烷基或任意取代的芳基；Rβ為氫，任意取代的(C1-6)烷基或任意取代的芳基；或Rα和Rβ共同形成任意取代的5或6員雜環(huán)，具有或不具有附加雜原子；R1為(C1-6)烷基，可被氟，被任意易離去羥基保護(hù)基保護(hù)的羥基，或被任意易離去氨基保護(hù)基保護(hù)的氨基取代或未取代；R2為氫或甲基；且-CO2R3為羧基或羧酸鹽陰離子或R3為易離去羧基保護(hù)基，該方法包括在形成碳代青霉烯環(huán)的條件下處理通式(II)化合物
其中，R，R1和R2定義如上，R3是易離去的羧基保護(hù)基，且X是氧或基團(tuán)PR4R5R6，其中R4，R5和R6可相同或不同，分別是任意取代的(C1-6)烷基或任意取代的芳基；然后，如果需要，進(jìn)行下面步驟中任意步驟或全部步驟除去任意保護(hù)基；將含有羥基取代基的R1轉(zhuǎn)化為含有氨基或氟的R1；和/或?qū)a(chǎn)物轉(zhuǎn)化為鹽。
10.權(quán)利要求9的方法，其中R4，R5和R6分別是苯基。
11.權(quán)利要求9的方法，其中R4，R5和R6分別是正丁基。
12.制備通式(I)化合物的方法
其中R為
其中Rα為氫，任意取代的(C1-6)烷基或任意取代的芳基；Rβ為氫，任意取代的(C1-6)烷基或任意取代的芳基；或Rα和Rβ共同形成任意取代的5或6員雜環(huán)，具有或不具有附加雜原子；R1為(C1-6)烷基，可被氟，被任意易離去羥基保護(hù)基保護(hù)的羥基，或被任意易離去氨基保護(hù)基保護(hù)的氨基取代或未取代；R2為氫或甲基；且-CO2R3為羧基或羧酸鹽陰離子或R3為易離去羧基保護(hù)基。該方法包括使通式(X)化合物
其中，R1和R2定義如上，R3為易離去的羧基保護(hù)基，且X1為離去基團(tuán)，與通式(XI)化合物反應(yīng)M-R (XI)其中，M為金屬基團(tuán)且R定義如上；反應(yīng)是在交叉-偶合反應(yīng)催化劑存在下的交叉-偶合反應(yīng)條件下進(jìn)行的，反應(yīng)后，如果需要可除去保護(hù)基和/或?qū)a(chǎn)物轉(zhuǎn)化為鹽。
13.權(quán)利要求12的方法，其中X1是三氟甲烷磺酰氧，甲烷磺酰氧，4-甲苯磺酰氧，氟磺酰氧，氯，溴，碘和二苯氧磷酰氧。
14.權(quán)利要求13的方法，其中M是R14R15R16Sn，B(OR)2和ZnCl，其中R14，R15和R16可相同或不同，分別是(C1-6)烷基。
15.權(quán)利要求14的方法，其中M是R14R15R16Sn，且R14＝R15＝R16＝甲基或正丁基。
16.權(quán)利要求12-15的任一方法，其中M是有機(jī)錫烷R14R15R16Sn，且R14＝R15＝R16＝甲基或正丁基。
17.權(quán)利要求12-16的任一方法，其中交叉偶合催化劑為鈀化合物。
18.化合物選自(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-(1，5-二甲基吡唑-3-基)-碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉，(5R，6S)-6-[(1R)-羥乙基]-2-(1-苯基吡唑-3-基)-碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉，(5R，6S)-6-[(1R)-羥乙基]-2-(1-甲基吡唑-3-基)-碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉，(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-(5-甲基-1-苯乙基吡唑-3-基)-碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉，(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-[1-(2-苯乙基)吡唑-3-基]-碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉，(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-[4，5，6，7-四氫吡啶并-(1，2-b)-吡唑-2-基]-碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉，(5R，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-(5-甲基-1-苯基吡唑-3-基)-碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉，(5R，6S)-2-[5，6-二氫-4H-吡咯并(1，2-b)-吡唑-2-基]-6-[(R)-1-羥乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉，(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-(1，5-二乙基吡唑-3-基)-碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉，(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-(1-乙基-5-甲基吡唑-3-基)-碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉，(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-[1-(2-羥乙基)-5-甲基吡唑-3-基]-碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉，(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-[-1-甲氧乙基)-5-甲基吡唑-3-基]}-碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉，(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-(5-芐基-1-甲基吡唑-3-基)-碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉，(5R，6S)-6-[(R)-1-羥乙基]-2-{[5-甲基-1-[2-(1-甲基-四唑-5-基硫代)乙基]-吡唑-3-基]}-碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉，(5R，6S)-2-[1-(2-乙酰氨基乙基)-5-甲基吡唑-3-基)-6-[(IR)-1-羥乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉，(5R，6S)-2-[1-(2-甲基硫代乙基)-5-甲基吡唑-3-基)-6-[(1R)-1-羥乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉，(5R，6S)-6-[1(R)-1-羥乙基]-2-(1-甲基-5-乙基吡唑-3-基)-碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉，(5R，6S)-2-(1，5-二甲基吡唑-3-基)-6-[(R)-1-羥乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸叔丁氧羰氧甲酯，(5R，6S)-2-(1，5-二甲基吡唑-3-基)-6-[(R)-1-羥乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸環(huán)己氧羰氧甲酯，(5R，6S)-2-(1-乙基-5-甲基吡唑-3-基)-6-[(R)-1-羥乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸環(huán)己氧羰氧甲酯，(5R，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[5-甲基-1-(2-甲基磺?；一?吡唑-3-基)-碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉，和(5R，6S)-2-[1-(2-(N，N-二甲基氨基羰基氧)乙基]-5-甲基吡唑-3-基]-6-[(1R)-1-羥乙基]碳代青霉-2-烯-3-羧酸鈉。
19.一種藥物組合物，含有通式(Ia)化合物(如權(quán)利要求2定義)和藥學(xué)上可接受的載體。
20.作為治療物質(zhì)的通式(Ia)的化合物(如權(quán)利要求2定義)。
21.用作制備治療細(xì)菌感染包括免疫損傷患者的藥物的通式(Ia)的化合物(如權(quán)利要求2定義)。
22.一種治療人體和動(dòng)物細(xì)菌感染的方法，該方法包括給予治療有效劑量的本發(fā)明通式(Ia)抗菌化合物(如權(quán)利要求2定義)或其藥學(xué)上可接受的鹽或其體內(nèi)可水解的酯。
全文摘要
通式(I)化合物，其中R為式(a)，其中R
文檔編號(hào)C07D487/04GK1167486SQ9419467
公開日1997年12月10日 申請(qǐng)日期1994年10月25日 優(yōu)先權(quán)日1993年10月29日
發(fā)明者斯蒂文·庫(kù)爾頓, 杰里米·D·欣克斯, 埃里克·亨特 申請(qǐng)人:史密斯克萊·比奇曼公司