專(zhuān)利名稱(chēng)：：從西藏紅豆杉提取紫杉醇的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種從西藏紅豆杉葉或枝葉中提取紫杉醇的方法，特別是一種從西藏紅豆杉葉或枝葉中提取紫杉醇粗產(chǎn)品的方法。紫杉醇是目前世界上發(fā)現(xiàn)的最有效的抗癌物質(zhì)之一。國(guó)外人工合成紫杉醇的價(jià)格是從天然提取的數(shù)百倍，目前國(guó)內(nèi)外主要是從紅豆杉屬植物中提取及組織培養(yǎng)來(lái)獲得紫杉醇。在天然提取的方法中，關(guān)鍵是提取分離方法，但由于紫杉醇在植物中化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，在植物中含量低，因此較中草藥成分的提取分離難度大。據(jù)報(bào)道，我國(guó)主要有紅豆杉屬紅豆杉4個(gè)種一個(gè)變種，它們是西藏紅豆杉(TasuswallichiannZucc)，云南紅豆杉(T、yumaneusischengetL.k.Fu)紅豆杉(T.chinensis(Pilger)(ehd)，東北紅豆杉(T.cuspidataSiehetzucc)和南方紅豆杉(美麗紅豆杉)(T.cbinensisvarmairer(Lemeeetlevl)chengetL.K.Fu)。上述種屬珍貴植物，為了不破壞成樹(shù)，保護(hù)資源，一般都是從葉或枝葉中提取，但枝葉中紫杉醇含量比樹(shù)皮低。已有的從紅豆杉莖葉中提取紫杉醇的方法是粉碎，溶劑浸提，浸出液濃縮得深綠色膏狀物，溶劑提取，硅膠柱層析后得粗產(chǎn)品。再經(jīng)重結(jié)晶純化和柱層析分離獲紫杉醇。上述方法中，在柱層分離時(shí)，至少要1-2個(gè)柱分離用梯度洗脫，梯度洗脫所用溶劑量較大，而樣品被分離成分含量越低，分離也麻煩，在柱分離的每個(gè)流分均要用薄層層析監(jiān)測(cè)成分后，待合并再分離。因此，有必要提高過(guò)柱前被分離成分含量，減少過(guò)柱次數(shù)，提高過(guò)柱質(zhì)量。另外，用已有的提取方法所獲得的紫杉醇總量較低。本發(fā)明目的是提供一種從西藏紅豆杉提取紫杉醇粗產(chǎn)品的方法，該方法工藝簡(jiǎn)單，操作方便，粗產(chǎn)品的得率高。為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案，提取紫杉醇粗產(chǎn)品的方法包括原料粉粹，滲浸，減壓濃縮，提取，所述的減壓濃縮得到的深綠色浸膏經(jīng)水稀釋后以石灰水調(diào)PH值到7.5-8.0，沉淀過(guò)濾后，濾液以溶劑提取，減壓濃縮干燥得到含紫杉醇干膏。上述稀釋用水的量與浸膏量比為0.5-1.5∶1，最好控制在1∶1(體積比)，所述的提取用溶劑可以是混合多氯代烷、氯仿。以下結(jié)合流程框圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作詳細(xì)說(shuō)明圖1本發(fā)明流程框1中，以紅豆杉的莖皮或葉為原料，原料經(jīng)粉碎1得粗粉，粗粉經(jīng)滲浸2，滲浸采用混合溶劑，可采用95％乙醇與氯仿的混合液，滲浸液經(jīng)減壓濃縮3得到深綠色浸膏，加水稀釋后加石灰水調(diào)PH值到7.5-8.0，經(jīng)沉淀過(guò)濾4，并洗滌沉淀至無(wú)色，以氯仿提取5，經(jīng)減壓濃縮、干燥6，得到含紫杉醇干膏。實(shí)施例1取西藏紅豆杉干葉5kg，粉碎，用95％乙醇與氯仿(85∶15)滲浸，滲浸液重量為樣品重量的5倍，減壓濃縮得深綠色濃滲液，加水約1倍量(體積/體積)，加石灰水調(diào)PH值到7.5-8.0，待沉淀后，過(guò)濾，洗滌沉淀至無(wú)色，氯仿提取，減壓濃縮、干燥，得100g淺黃綠色干膏，HPLC(高效液相色譜儀)測(cè)定含紫杉醇1.6％。含10-去乙酰巴卡丁III28％。實(shí)施例2取西藏紅豆杉莖皮，采用實(shí)施例1的方法，制得紫杉醇干膏。HPLC測(cè)定紫杉醇含量3.3％。實(shí)施例1與實(shí)施例2提取紫杉醇結(jié)果比較見(jiàn)表1表1</tables>本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)用簡(jiǎn)單的沉淀除雜質(zhì)方法事先除去大部分雜質(zhì)，提高過(guò)柱前被分離成分的含量，減少過(guò)柱次數(shù)，也不受過(guò)柱分離量的限制。經(jīng)試驗(yàn)此步沉淀可除去約80％的雜質(zhì)，而紫杉醇及相關(guān)成分如巴卡丁III(baccatinIII)、10-去乙酰巴卡丁III(10-deacetlybaccatinIII)等不受影響，本工藝簡(jiǎn)單方便，而且紫杉醇粗品中的紫杉醇含量較其他方法高，例如可達(dá)1.6％(以干葉原料)，莖皮原料其紫杉醇含量3.3％。權(quán)利要求1.一種從西藏紅豆杉提取紫杉醇的方法，它包括原料粉碎、滲浸、減壓濃縮提取，其特征在于由減壓濃縮得到的深綠色浸膏經(jīng)水稀釋后以石灰水調(diào)PH值至7.5-8.0，沉淀、過(guò)濾，濾液以溶劑提取，減壓濃縮干燥得到含紫杉醇干膏。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從西藏紅豆杉提取紫杉醇的方法，其特征在于所述深綠色浸膏以水稀釋時(shí)，加水量∶浸膏量＝0.5-1.5∶1(體積比)。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從西藏紅豆杉提取紫杉醇的方法，其特征在于以水稀釋時(shí)，加水量∶浸膏量＝1∶1。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從西藏紅豆杉提取紫杉醇的方法，其特征在于所述濾液的提取溶劑為氯仿。全文摘要一種從西藏紅豆杉提取紫杉醇的方法,特別是提取紫杉醇粗產(chǎn)品的方法,它包括:原料粉碎、滲浸、減壓濃縮、提取,其中,經(jīng)減壓濃縮得到的深綠色浸膏經(jīng)水稀釋后,以石灰水調(diào)pH值7.5—8.0,沉淀過(guò)濾,濾液以溶劑提取,減壓濃縮干燥得到含紫杉醇干膏(粗品)。本方法以簡(jiǎn)單沉淀去除雜質(zhì)80%,而紫杉醇及相關(guān)成分不受影響,提高過(guò)柱前被分離成分的含量和過(guò)柱質(zhì)量,減少過(guò)柱次數(shù),粗產(chǎn)品中紫杉醇含量高。文檔編號(hào)C07D305/00GK1182740SQ96120678公開(kāi)日1998年5月27日申請(qǐng)日期1996年11月19日優(yōu)先權(quán)日1996年11月19日發(fā)明者土登申請(qǐng)人:西藏自治區(qū)衛(wèi)生廳