專利名稱：新的多拉抑放素衍生物及其制備方法和用途的制作方法
已知象多拉抑放素(Dolastatin)-10(US 4,816,444)和多拉抑放素-15(EP-A-398558)之類的從海洋源分離的肽顯示出有效的細(xì)胞生長抑制活性(參見生物化學(xué)藥理學(xué)40，8，1859-64，1990；J.Natl.CancerInst.85，48 3-88，1993以及其中引用的參考文獻(xiàn)。基于體內(nèi)實驗?zāi)[瘤系統(tǒng)中令人感興趣的結(jié)果，目前正在進(jìn)行這些天然產(chǎn)物的進(jìn)一步臨床前評價，以便在癌癥患者中開始臨床研究。
然而，天然產(chǎn)物具有缺點，例如在含水溶劑中溶解性差以及合成需要昂貴的原材料。
本文描述的本發(fā)明提供了新肽及其衍生物，這些新肽及其衍生物與多拉抑放素-1 5相比具有提高的治療贅生性疾病的潛力。而且，本發(fā)明的化合物可以如下面的詳細(xì)描述方便地合成。
本發(fā)明的化合物包括式I的新肽以及它們與生理上可耐受的酸的鹽R1R2N-CHX-CO-A-B-D-E-(F)t-KI其中R1是甲基、乙基或異丙基；R2是氫、甲基或乙基；R1N-R2一起可以是吡咯烷環(huán)；A是纈氨酰、異亮氨酰、亮氨酰、2-叔-丁基甘氨酰、2-乙基甘氨酰、正亮氨酰或正纈氨酰殘基；B是N-甲基-纈氨酰、-亮氨酰、-異亮氨酰、-正纈氨酰、-正亮氨酰、-2-叔-丁基甘氨酰、-3-叔-丁基丙氨?；?2-乙基甘氨酰殘基；D是脯氨酰、3，4-脫氫脯氨酰、4-氟脯氨酰、4，4-二氟脯氨酰、氮雜環(huán)丁烷-2-碳酰、高脯氨酰、3-甲基脯氨酰、4-甲基脯氨酰、5-甲基脯氨?；蜞邕蛲?4-碳酰殘基；E是3，4-脫氫脯氨酰、4-氟脯氨酰、3-甲基脯氨酰、4-甲基脯氨酰、氮雜環(huán)丁烷-2-碳?；?，4-二氟脯氨酰殘基；F是纈氨酰、2-叔-丁基甘氨酰、異亮氨酰、亮氨酰、2-環(huán)己基甘氨酰、正亮氨酰、正纈氨酰、新戊基甘氨酰、丙氨酰、β-丙氨酰或氨基異丁酰殘基；X是烷基(優(yōu)選地是C2-5)、環(huán)丙基或環(huán)戊基；t是0或1；并且K是烷氧基(優(yōu)選地是C1-4)、芐氧基或取代的或非取代的氨基部分。
本發(fā)明也提供了制備式I的化合物的方法、包含這樣的化合物以及藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物、使用該藥物組合物治療哺乳動物中的癌癥的方法。
具體地說，K可以是C1-4-烷氧基、芐氧基或式R5-N-R6的氨基部分，在式R5-N-R6中，R5是氫、或羥基、或C1-4烷氧基、或或芐氧基(其可以是由多達(dá)兩個取代基取代的，所說取代基可以獨立地是CF3、硝基、C1-4-烷基磺?；?、C1-4-烷氧基、鹵素、C1-4-烷基、氰基、羥基、N(CH3)2、COOMe、COOEt、COOiPr、或COONH2)、或苯氧基(其可以是由多達(dá)兩個取代基取代的，所說取代基可以獨立地是CF3、硝基、C1-4-烷基磺?；?、C1-4烷氧基、鹵素、C1-4-烷基、氰基、羥基、N(CH3)2、COOMe、COOEt、COOiPr、或COONH2)；R6是氫、或C1-12-烷基(其可以是由一個或多個氟原子取代的)、或-C(CH3)2CN、或-C(CH3)2CCH、或-C(CH3)2C＝CH2、或-C(CH3)2CH2OH、或-C(CH3)2CH2CH2OH、或-(CH2)vC3-7-環(huán)烷基(v＝0，1或2)(其可以被甲基取代)、或降麻黃堿基(norephedryl)、或降假麻黃堿基(norpseudoephedryl)、或喹啉基、或吡嗪基(pyrazyl)、或金剛烷基(adamantyl)、或-CH2-苯并咪唑基、或-CH2-金剛烷基、或α-甲基-芐基、或α-二甲基芐S 、或-(CH2)v-苯基(v＝0，1，2或3；其可以是由多達(dá)兩個取代基取代的，所說取代基可以獨立地是CF3、硝基、C1-4-烷基磺?；1-4-烷氧基、鹵素、可以形成環(huán)狀系統(tǒng)的C1-4-烷基、氰基、羥基、N(CH3)2、COOMe、COOEt、COOiPr、或COONH2)、或-(CH2)m-萘基(m＝0或1；其可以是由多達(dá)兩個取代基取代的，所說取代基可以獨立地是CF3、硝基、C1-4-烷基磺酰基、C1-4-烷氧基、鹵素、可以形成環(huán)狀系統(tǒng)的C1-4-烷基、氰基、羥基、N(CH3)2、COOMe、COOEt、COOiPr、或COONH2)、或-(CH2)w-二苯甲基(w＝0，1或2；其可以是由多達(dá)兩個取代基取代的，所說取代基可以獨立地是CF3、硝基、C1-4-烷基磺?；?C1-4-烷氧基、鹵素、可以形成環(huán)狀系統(tǒng)的C1-4-烷基、氰基、羥基、N(CH3)2、COOMe、COOEt、COOiPr、或COONH2)、或聯(lián)苯基(其可以是由多達(dá)兩個取代基取代的，所說取代基可以獨立地是CF3、硝基、C1-4-烷基磺?；?、C1-4-烷氧基、鹵素、可以形成環(huán)狀系統(tǒng)的C1-4-烷基、氰基、羥基、N(CH3)2、COOMe、COOEt、COOiPr、或COONH2)、或吡啶基(其可以是由多達(dá)兩個取代基取代的，所說取代基可以獨立地是CF3、硝基、C1-4-烷基磺?；1-4-烷氧基、鹵素、可以形成環(huán)狀系統(tǒng)的C1-4-烷基、氰基、羥基、COOMe、COOEt、COOiPr、或COONH2)、或吡啶甲基(其可以是由多達(dá)兩個取代基取代的，所說取代基可以獨立地是CF3、硝基、C1-4-烷基磺酰基、C1-4-烷氧基、鹵素、可以形成環(huán)狀系統(tǒng)的C1-4-烷基、氰基、羥基、COOMe、COOEt、COOiPr、或COONH2)、或-CH2-CH2-吡啶基(其可以是由多達(dá)兩個取代基取代的，所說取代基可以獨立地是CF3、硝基、C1-4-烷基磺酰基、C1-4-烷氧基、鹵素、可以形成環(huán)狀系統(tǒng)的C1-4-烷基、氰基、羥基、COOMe、COOEt、COOiPr、或COONH2)、或苯并噻唑基(其可以是由多達(dá)兩個取代基取代的，所說取代基可以獨立地是CF3、硝基、C1-4-烷基磺?；?、C1- 4-烷氧基、鹵素、可以形成環(huán)狀系統(tǒng)的C1-4烷基、氰基、羥基、N(CH3)2、COOMe、COOEt、COOiPr、或COONH2)、或苯并異噻唑基(其可以是由多達(dá)兩個取代基取代的，所說取代基可以獨立地是CF3、硝基、C1-4-烷基磺酰基、C1-4-烷氧基、鹵素、可以形成環(huán)狀系統(tǒng)的C1-4-烷基、氰基、羥基、N(CH3)2、COOMe、COOEt、COOiPr、或COONH2)、或苯并吡唑基(其可以是由多達(dá)兩個取代基取代的，所說取代基可以獨立地是CF3、硝基、C1-7-烷基磺?；?、C1-4-烷氧基、鹵素、可以形成環(huán)狀系統(tǒng)的C1-4-烷基、氰基、羥基、N(CH3)2、COOMe、COOEt、COOiPr、或COONH2)、或苯并噁唑基(其可以是由多達(dá)兩個取代基取代的，所說取代基可以獨立地是CF3、硝基、C1-4-烷基磺酰基、C1-4-烷氧基、鹵素、可以形成環(huán)狀系統(tǒng)的C1-4-烷基、氰基、羥基、N(CH3)2、COOMe、COOEt、COOiPr、或COONH2)、或-(CH2)m-芴基(m＝0或1；其可以是由多達(dá)兩個取代的，所說取代基可以獨立地是CF3、硝基、C1-4-烷基磺酰基、C1-4烷氧基、鹵素、可以形成環(huán)狀系統(tǒng)的C1-4-烷基、氰基、羥基、N(CH3)2、COOMe、COOEt、COOiPr、或COONH2)、或嘧啶基(其可以是由多達(dá)兩個取代基取代的，所說取代基可以獨立地是CF3、硝基、C1-4-烷基磺酰基、C1-4-烷氧基、鹵素、可以形成環(huán)狀系統(tǒng)的C1-4烷基、氰基、羥基、N(CH3)2、COOMe、COOEt、COOiPr、或COONH2)、-(CH2)m-2，3-二氫化茚基(m＝0或1；其可以是由多達(dá)兩個取代基取代的，所說取代基可以獨立地是CF3、硝基、C1-4-烷基磺酰基、C1-4-烷氧基、鹵素、可以形成環(huán)狀系統(tǒng)的C1-4-烷基、氰基、羥基、N(CH3)2、COOMe、COOEt、COOiPr、或COONH2)、或-(CH2CH2O)Y-CH3(y＝0，1，2，3，4或5)、或-(CH2CH2O)Y-CH2CH3(y＝0，1，2，3，4或5)、或-NH-C6H5(其可以是由多達(dá)兩個取代基取代的，所說取代基可以獨立地是CF3、硝基、C1-4烷基磺?；?、C1-4-烷氧基、鹵素、可以形成環(huán)狀系統(tǒng)的C1-4-烷基、氰基、羥基、COOMe、COOEt、COOiPr、或COONH2)、-NCH3-C6H5(其可以是由多達(dá)兩個取代基取代的，所說取代基可以獨立地是CF3硝基、C1-4-烷基磺?；1-4-烷氧基、鹵素、能形式一個循環(huán)的系統(tǒng)的C1-4-烷基、氰基、羥基、COOMe、COOEt、COOiPr、或COONH2)、或-NH-CH2-C6H5(其可以是由多達(dá)兩個取代基取代的，所說取代基可以獨立地是CF3、硝基、C1-4-烷基磺酰基、C1-4-烷氧基、鹵素、可以形成環(huán)狀系統(tǒng)的C1-4-烷基、氰基、羥基、COOMe、COOEt、COOiPr、或COONH2)、-NCH3-CH2-C6H5(其可以是由多達(dá)兩個取代基取代的，所說取代基可以獨立地是CF3、硝基、C1-4-烷基磺?；?、C1-4-烷氧基、鹵素、可以形成環(huán)狀系統(tǒng)的C1-4-烷基、氰基、羥基、COOMe、COOEt、COOiPr、或COONH2)、或5-員雜芳基(其可以是由多達(dá)兩個取代基取代的，所說取代基可以獨立地是CF3、硝基、C1-4-烷基磺?；1-4-烷氧基、甲硫基、乙硫基、吡啶甲基、乙?；?、C3-6-環(huán)烷基、苯硫基、-CH2-COOEt、形成帶有雜環(huán)的二環(huán)系統(tǒng)的C3-4-亞烷基、苯基(其可以是由多達(dá)兩個取代基取代的，所說取代基可以獨立地是硝基、CF3、鹵素、或C1-4-烷基)、芐基(其可以是由多達(dá)兩個取代基取代的，所說取代基可以獨立地是硝基、CF3、鹵素、C1-4-烷基、C1-4-烷基磺?；⑶杌?、羥基、C1-4-二烷基氨基)、或-CHR7-5-員雜芳基(其可以是由多達(dá)兩個取代基取代的，所說取代基可以獨立地是CF3、硝基、氰基、鹵素、COOMe、COOEt、COOiPr、CONH2、C1-4-烷基、C1-4烷氧基、苯基、芐表、萘基、或C1-4-烷基磺?；鵞R7＝氫、線性或支鏈C1-5烷基、芐基])。例如，-CHR7-5-員雜芳基可以由例如下列殘基之一代表
5-員雜芳基可以由例如下列殘基之一代表
R5-N-R6一起也可以形成選自由下列基團(tuán)組成的組的結(jié)構(gòu)
優(yōu)選的是這樣的式I的化合物，其中的取代基R1、R2、A、B、D、E、X、F和t具有下列含義R1是甲基或乙基；R2是氫、甲基或乙基；A是纈氨酰、異亮氨酰、2-叔-丁基甘氨酰殘基；B是N-甲基纈氨酰、-異亮氨酰或-2-叔-丁基甘氨酰殘基；D是脯氨酰、3，4-脫氫脯氨酰、4-氟脯氨酰、3-甲基脯氨?；蜞邕蛲?4-碳酰殘基；E是3，4-脫氫脯氨酰、4-氟脯氨酰、3-甲基脯氨?；虻s環(huán)丁烷-2-碳酰殘基；F是D-纈氨酰、2-叔丁基甘氨酰、D-異亮氨酰、D-亮氨酰、或氨基異丁酰殘基；X是-CH(CH3)2、-C(CH3)3或-CH(CH3)CH2CH3；t是0或1；K優(yōu)選地是-OC(CH3)3、-NH2、-NH-C1-12-烷基、-NH-C3-8-環(huán)烷基、-NH-[3，3，0]-二環(huán)辛基、降麻黃堿基、降假麻黃堿基、-NH-喹啉基、-NH-吡嗪基、-NH-CH2-苯并咪唑基、-NH-金剛烷基、-NH-CH2-金剛烷基、-NH-CH(CH3)-苯基、-NH-C(CH3)2-苯基、-N(C1-4烷氧基)C1-4-烷基、-N(C1-4-烷氧基)-CH2-苯基、-N(C1-4烷氧基)-苯基、-N(CH3)OBzl、-NH-(CH2)v-苯基(v＝0，1，2或3)、-NH-(CH2)m-萘基(m＝0或1)、-NH-(CH2)w-二苯甲基(w＝0，1或2)、-NH-二苯基、-NH-吡啶基、-NH-CH2-吡啶基、-NH-CH2-CH2-吡啶基、-NH-苯并噻唑基、-NH-苯并異噻唑基、-NH-苯并吡唑基、-NH-苯并噁唑基、-NH-(CH2)m-芴基(m＝0或1)、-NH-嘧啶基、-NH-(CH2)m-2，3-二氫茚基(m＝0或1)、-NH-(CH2CH2O)y-CH3(y＝0，1，2，3，4或5)、-NH-(CH2CH2O)y-CH2CH3(y＝0，1，2，3，4或5)、-NH-(5-員雜芳基)(如7-9頁所示)、-NH-CHR7-5-員雜芳基[R7＝氫、線性或支鏈C1-5烷基、芐基](如第5頁所示)；或K是
更優(yōu)選的K是-NHCH3、-NHCH2CH3、-NH(CH2)2CH3、-NH(CH2)3CH3、-NH(CH2)4CH3、-NH(CH2)5NHCH3、-NH(CH2)6CH3、-NH(CH2)7CH3、-NHCH(CH3)2、-NHCH(CH3)CH2CH3、-NHCH(CH3)CH2CH2CH3、-NHCH(CH2CH3)2、-NH(CH2CH2CH3)2、-NHC(CH3)3、NHCH(CH2CH3)CH2CH2CH3、-NHCH(CH3)CH(CH3)2、-NHCH(CH2CH3)CH(CH3)2、-NHCH(CH3)C(CH3)3、-NH-環(huán)丙基、-NH-環(huán)丁基、-NH-環(huán)戊基、-NH-環(huán)己基、-NH-環(huán)庚基、-NH-環(huán)辛基、-NH-二環(huán)[3，3，0]辛基、-N(CH3)OCH3、-N(CH3)OCH2CH3、-N(CH3)OCH2CH2CH3、-N(CH3)OCH(CH3)2、-N(CH2CH3)OCH3、-N(CH2CH3)OCH2CH3、-N(CH(CH3)2)OCH3、-N(CH3)OCH2C6H5、-N(OCH3)CH2-C6H5、-N(CH3)OC6H5、-NH-CH2-C6H5、-NH(CH2)2C6H5、NH(CH2)3C6H5、-NHCH(CH3)C6H5、-NHC(CH3)2C6H5、-NHC(CH3)2CH2CH3、-NHC(CH3)(CH2CH3)2、-NHCH(CH3)CH(OH)C6H5、-NHCH2-環(huán)己基、-NH-CH2CF3、-NHCH(CH2F)2、-NHC(CH3)2CH2CH2OH、-NH(CH2CH2O)2CH2CH3、-NHC(CH3)2CH(CH3)2、-NHC(CH3)2CN、-NHC(CH3)2CCH、-NHC(CH3)2C＝CH2、降麻黃堿基、降假麻黃堿基、-NH-喹啉基、-NH-吡嗪基、-NH-金剛烷基(1)、-NH-金剛烷基(2)、-NH-CH2-金剛烷基、-NH-CH2-萘基、-NH-二苯甲基、-NH-聯(lián)苯基、-NH-吡啶基、-NH-吡啶甲基、-NH-CH2-CH2-吡啶基、-NH-苯并噻唑基、-NH-苯并異噻唑基、-NH-苯并-吡唑基、-NH-苯并噁唑基、-NH-芴基、-NH-嘧啶基、-NH-噻唑基(2)、-NH-異噁唑基(3)、-NH-CH2-呋喃基(2)、-NH-(3-甲基)異噁唑基(5)、-NH-(3-甲基)異噻唑基(5)、-NH-(2-三氟甲基)-噻二唑基、-OC(CH3)3、-NH-CH2-(4-甲基)噻唑基(2)、-NH-CH2-噻吩基(2)、-NH-CH2-噻吩基(5-甲基)、-NH-(2-甲基)-噻二唑基(5)、-NH-(2-環(huán)丙基)噻二唑基、或者K是
這些例子說明但不限制本發(fā)明的范圍。
式I的肽是由L-氨基酸組成的，但F也可以是D-氨基酸。
所述新化合物可以以與生理上可耐受的酸的鹽存在，所述酸如鹽酸、檸檬酸、酒石酸、乳酸、磷酸、甲磺酸、醋酸、甲酸、馬來酸、富馬酸、蘋果酸、琥珀酸、丙二酸、硫酸、L-谷氨酸、L-天冬氨酸、丙酮酸、粘酸、苯甲酸、葡糖醛酸、草酸、抗壞血酸和N-乙酰甘氨酸。
可以用肽化學(xué)的已知方法制備新化合物。這樣，所述肽可以從氨基酸依次裝配或通過連接適當(dāng)?shù)男‰钠窝b配。在依次裝配中，肽鏈從C末端開始以每次一個氨基酸逐步延長。在片段偶聯(lián)中，把不同長度的片段連接在一起是可能的，所述片段同樣可以通過從氨基酸依次裝配或通過片段自身偶聯(lián)獲得。
在依次裝配和片段偶聯(lián)中，通過形成酰胺鍵連接所述單位是必需的。酶促和化學(xué)方法適合于這種連接。
用于形成酰胺鍵的化學(xué)方法在Mueller，Methoden der organischenChemie第XV卷/2，第1-364頁，Thieme Verlag Stuttgart，1974；Stewart，Young，固相肽合成，第31-34頁，第71-82頁，Pierce化學(xué)公司，Rockford，1984；Bodanszky，Klausner，Ondetti，肽合成，第85-128頁，John Wiley&Sons，紐約，1976以及其它肽化學(xué)的權(quán)威著作中有詳盡描述。尤其優(yōu)選的是疊氮化物方法、對稱的和混合的酸酐方法、原位產(chǎn)生的或預(yù)先形成的活性酯、利用尿烷保護(hù)的氨基酸的N-羧基酸酐以及使用偶聯(lián)試劑/活化劑形成酰胺鍵，所述偶聯(lián)試劑/活化劑尤其是二環(huán)己基碳二酰亞胺(DCC)、二異丙基碳二亞胺(DIC)、1-乙氧羰基-2-乙氧基-1，2-二氫喹啉(EEDQ)、1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亞胺氫氯化物(EDCI)、正丙烷膦酸酐(PPA)、N，N-雙(2-氧代-3-噁唑烷基(oxazolldinyl))-酰胺磷酰氯化物(BOP-C1)、溴代-三-吡咯烷磷鎓六氟磷酸酯(PyBrop)、二苯磷酰疊氮化物(DPPA)、Castro試劑(BOP，PyBop)、鄰苯并三唑基-N，N，N′，N′-四甲基脲鹽(HBTU)、鄰氮雜苯并三唑基-N，N，N′，N′-四甲基脲鹽(HATU)、二乙基磷酰氰化物(DEPCN)、2，5-二苯基-2，3-二氫-3-氧代-4-羥基噻吩二氧化物(Steglich試劑；HOTDO)以及1，1′-羰基二咪唑(CDI)。偶聯(lián)試劑可以單獨使用或與添加劑一起使用，所述添加劑例如N，N-二甲基-4-氨基吡啶(DMAP)、N-羥基-苯并三唑(HOBt)、N-羥基-苯并三嗪(HOOBt)、氮雜苯并三唑(HOAt)、N-羥基-琥珀酰亞胺(HOSu)或2-羥基吡啶。
然而，在酶促肽合成中省去保護(hù)基通常是可能的，在化學(xué)合成中，不參與酰胺鍵形成的反應(yīng)基團(tuán)的可逆保護(hù)對兩種反應(yīng)物來說是必要的。對化學(xué)肽合成而言，優(yōu)選的是三種常規(guī)的保護(hù)基技術(shù)芐氧羰基(Z)、叔丁氧羰基(Boc)以及9-芴基甲氧羰基(Fmoc)技術(shù)。在每種情況下識別的是鏈延長單位的α-氨基基團(tuán)上的保護(hù)基團(tuán)。有關(guān)氨基酸保護(hù)基的詳盡綜述由Mueller，Methoden der organischen Chemie第XV卷/1，第20-906頁，ThiemeVerlag，Stuttgart，1974給出。用于裝配肽鏈的單位可以在溶液、懸浮液中反應(yīng)或通過類似于由Merrifield在美國化學(xué)學(xué)會雜志85(1963)2149中描述的方法反應(yīng)。尤其優(yōu)選的方法是其中肽依次裝配或通過Z、Boc或Fmoc保護(hù)基技術(shù)進(jìn)行片段偶聯(lián)的方法。在所說的Merrifield技術(shù)中，把一種反應(yīng)物結(jié)合到不溶性聚合支持物(下文也稱為樹脂)上。這典型地使所述肽在聚合支持物上依次裝配，在此過程中使用了Boc或Fmoc保護(hù)基技術(shù)，加長的肽鏈以C末端共價結(jié)合到不溶性樹脂顆粒上(參見

圖1和2)。該方法使通過過濾除去試劑和副產(chǎn)物成為可能，這樣就不需要進(jìn)行中間體的再結(jié)晶。
被保護(hù)的氨基酸可以與任何適合的聚合物連接，該聚合物僅僅必須是在所使用的溶劑中不溶性的并具有使過濾容易的穩(wěn)定的物理形式。聚合物必須包含使第一個被保護(hù)的氨基酸可以通過共價鍵牢固連接到其上的功能基團(tuán)。適合于此目的的聚合物有多種，例如纖維素、聚乙烯醇、聚甲基丙烯酸酯、磺化聚苯乙烯、氯甲基化的苯乙烯/二乙烯基苯共聚物(Merrifield樹脂)、4-甲基二苯甲基胺樹脂(MBHA-樹脂)、苯乙酰胺甲基樹脂(Pam-樹脂)、對芐氧基-芐基-醇-樹脂、二苯甲基-胺-樹脂(BHA-樹脂)、4-(羥甲基)-苯甲基-甲基-樹脂、Breipohl等的樹脂(Tetrahedron Letters 28(1987)565；由BACHEM提供)、4-(2，4-二甲氧苯氨甲基)苯氧基-樹脂(由Novabiochem提供)或鄰氯三苯甲基-樹脂(由Biohellas供應(yīng))。
適合在溶液中的肽合成的是在反應(yīng)條件下為惰性的所有溶劑，尤其是水、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亞砜(DMSO)、乙腈、二氯甲烷(DCM)、1，4-二噁烷、四氫呋喃(THF)、N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)以及所說的溶劑的混合物。在聚合支持物上的肽合成可以在所有惰性有機(jī)溶劑中(其中所使用的氨基酸衍生物是可溶性的)進(jìn)行。然而，優(yōu)選的溶劑還具有樹脂-膨脹性質(zhì)，如DMF、DCM、NMP、乙腈和DMSO以及這些溶劑的混合物。在合成完全后，把肽從聚合支持物上裂解下來。在文獻(xiàn)中公開了可以從各種樹脂類型上裂解下來的條件。最常用的裂解反應(yīng)是酸和鈀催化的，具體來說是在液態(tài)無水氟化氫、無水三氟甲磺酸、稀釋的或濃縮的三氟醋酸中的裂解、在弱堿(如嗎啉)存在下，在THF或THF-DCM混合物中的鈀催化的裂解或在醋酸-二氯甲烷-三氟乙醇混合物中的裂解。依賴于所選擇的保護(hù)基，在裂解條件下它們可以保持下來或同樣地裂解掉。
當(dāng)要進(jìn)行某些衍生反應(yīng)時，肽的部分去保護(hù)也是值得的?？梢酝ㄟ^下列方法制備在N-末端二烷基化的肽a)通過在溶液中或在聚合支持物上偶聯(lián)適當(dāng)?shù)腘，N-二-烷基氨基酸，b)通過在DMF/1％乙酸中用NaCNBH3和適當(dāng)?shù)娜┗蛲€原性烷基化樹脂-結(jié)合的肽，c)通過在醛或酮和鈀/C存在下在溶液中氫化所述肽。
本文公開的各種非天然存在的氨基酸可以從商業(yè)來源獲得或使用本領(lǐng)域已知的方法從市售的物料合成。氮雜環(huán)丁烷-2-羧酸、3-甲基-L-脯氨酸、5-甲基-L-脯氨酸和Boc-或Fmoc-保護(hù)的3，4-脫水脯氨酸是市售的起始原料(ACROS，NOVABIOCHEM，BACHEM)。順式-和反式-4-氟脯氨酸可以通過由Panas ik等描述的方法(N.Panasik，E.S.Eberhardt，A.S.Edison，D.R.Powell，R.T.Raines，國際肽蛋白質(zhì)研究雜志44，1994，262-269)從羥脯氨酸制備。
通過對哺乳動物施用本發(fā)明的化合物，可以將本發(fā)明的化合物用于抑制或者治療固體腫瘤(例如肺臟、胸部、結(jié)腸、前列腺、膀胱、直腸或子宮內(nèi)膜腫瘤)或血液腫瘤(例如白血病，淋巴瘤)。
新的化合物的特殊的優(yōu)點是這些化合物與多拉抑放素-15相比對酶促降解具有更大的抗性。
施用可以通過任何用于藥劑(優(yōu)選地是腫瘤藥劑)的常規(guī)的方式進(jìn)行，這些方式包括口服和腸胃外方式，如皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)和腹膜內(nèi)。
所述化合物可以單獨施用或以藥物組合物的形式施用，所述藥物組合物包含式I的化合物與適用于所需的給藥途徑的藥學(xué)上可接受的載體。這樣的藥物組合物可以是組合產(chǎn)物，即也可以包含其它治療活性成分。
對哺乳動物施用的劑量包含抑制腫瘤有效量的活性成分，該活性成分取決于常規(guī)因素；這些因素包括所使用的特定化合物的生物活性；施用方式；接收者的年齡、健康狀況和體重；癥狀的性質(zhì)與程度；治療頻率；其它治療劑的施用；所需的作用。典型的每日劑量是口服施用時每公斤體重大約0.5至50mg，腸胃外施用時大約0.05至20mg。
新的化合物可以以常規(guī)的固體或液體藥物施用形式施用，所述形式例如未包衣的或(薄膜)包衣的片劑、膠囊、粉劑、顆粒劑、栓劑或溶液。它們以常規(guī)方式產(chǎn)生。為了這一目的，所述活性物質(zhì)可以與常規(guī)的藥學(xué)助劑加工，所述助劑例如片劑粘合劑、填充劑、防腐劑、片劑分解劑、流動調(diào)節(jié)劑、增塑劑、潤濕劑、分散劑、乳化劑、溶劑、緩釋組合物、抗氧化劑和/或推進(jìn)氣體(參見H.Sucker等Pharmazeuti sche Technologie，Thieme-Verlag，Stuttgart，1978)。以這種方式獲得的施用形式通常包含1-90％(重量比)的活性物質(zhì)。
下列實施例旨在用于說明本發(fā)明。在實施例中使用已知的三字母代碼縮寫產(chǎn)生蛋白質(zhì)的氨基酸。使用的其它縮寫為Me2Val＝N，N-二甲基纈氨酸，MeVal＝N-甲基纈氨酸。
A.一般步驟I.使用如上所述的標(biāo)準(zhǔn)Z-和Boc-方法通過經(jīng)典的溶液合成，或者使用Boc和Fmoc保護(hù)基技術(shù)通過固相合成的標(biāo)準(zhǔn)方法來合成權(quán)利要求1要求的肽。
a)Fmoc保護(hù)基技術(shù)的合成循環(huán)1.DMF洗滌 1×1分鐘2.在DMF中的20％哌啶1×4分鐘3.在DMF中的20％哌啶1×16分鐘4.DMF洗滌 5×1分鐘5.添加預(yù)活化的被保護(hù)的氨基酸(通過在DMF中的1當(dāng)量的TBTU和5當(dāng)量的DIPEA活化)；肽偶聯(lián) 1×61分鐘6.DMF洗滌 3×1分鐘7.如果轉(zhuǎn)化不完全，重復(fù)偶聯(lián)(返回至5)8.在DMF中的10％乙酐1×8鐘9.DMF洗滌 3×1分鐘9.返回至2。
使用BOP-C1和PyBrop作為N-甲基氨基酸之后的氨基酸偶聯(lián)試劑。包括雙偶聯(lián)的反應(yīng)時間相應(yīng)地增加。在溶液合成中，分別使用Boc-保護(hù)的氨基酸NCA′s(N-羧酸酐)、Z-保護(hù)的氨基酸NCA′s(N-羧酸酐)或使用氯化新戊酰氯作為縮合劑對這類偶聯(lián)是最有利的。
II.N-末端的還原性烷基化將如在AIa中制備的肽-樹脂在N-末端去保護(hù)(AIa中的步驟2-4)，然后在添加3當(dāng)量NaCNBH3后，與在DMF/1％乙酸中的3倍摩爾過量的醛或酮反應(yīng)。在反應(yīng)完成后(陰性Kaiser試驗)，樹脂以水、異丙醇、DMF和二氯甲烷洗滌幾次。
在溶液中的還原性烷基化可以通過，例如，使用NaCNBH3或氫-鈀/C使N-末端去保護(hù)的肽、肽片段或氨基酸與相應(yīng)的醛或酮反應(yīng)來完成。
III.如在Ib和II中的方法獲得的肽-樹脂的處理在減壓下干燥肽-樹脂，然后以TFA/水混合物(95∶5)處理1.5小時(Wade，Tregear，Howard Florey Fmoc Workshop手冊，墨爾本1985)。然后過濾除去樹脂并以TFA和DCM洗滌。濃縮濾液和洗滌液，通過添加乙基醚沉淀肽在冰浴中冷卻后，過濾除去沉淀，浸溶在30％醋酸中并凍干。
IV.當(dāng)使用鄰氯三苯甲基-樹脂(由Biohellas提供)時，在室溫下攪拌在醋酸/三氟乙醇/二氯甲烷混合物(1∶1∶3)中的肽-樹脂懸浮液1小時。然后抽吸過濾除去樹脂并以裂解溶液充分洗滌。在真空中濃縮合并的濾液并用乙醚處理。通過過濾或離心除去沉淀的固體，以乙醚洗滌并在減壓下干燥。
V.肽的純化和特征確定通過凝膠色譜(SEPHADEX G-10，0-15/10％HOAc，SEPHADEXLH20/MeOH)和/或中壓色譜(固定相HD-SIL C-8，20-45μm，100埃；流動相A＝0.1％TFA/水，B＝0.1％TFA/MeOH的梯度)或制備HPLC(固定相Waters Delta-Pak C-18，15μm，100埃；流動相A＝0.1％TFA/水，B＝0.1％TFA/MeOH的梯度)進(jìn)行純化。
通過分析型HPLC(固定相100 2.1mm VYDAC C-18，300埃；流動相以0.1％TFA緩沖的乙腈-水梯度，40℃)測定形成的產(chǎn)物的純度。
通過快速原子轟擊質(zhì)譜和核磁共振譜確定特征。
B.具體步驟實施例1(SEQ ID NO1)Me2Val-Va1-MeVal-Pro-L-氮雜環(huán)丁烷基-2-羧酰胺使相當(dāng)于0.25mmol批量(batch size)的0.53g Fmoc-RINK-樹脂(取代0.46mmol/g)如AIa所述與0.4mmol以下每種反應(yīng)Fmoc-L-氮雜環(huán)丁烷-2-羧酸Fmoc-Pro-OHFmoc-MeVal-OHFmoc-Val-OHFmoc-Val-OH用PyBrop作為偶聯(lián)劑進(jìn)行雙偶聯(lián)以偶聯(lián)N-甲基氨基酸后的氨基酸。在完成反復(fù)的合成循環(huán)后，對肽-樹脂進(jìn)行N-末端去保護(hù)(在AIa中的步驟2-4)，并如AII中所述進(jìn)一步與甲醛水溶液反應(yīng)，然后在減壓下干燥。使形成的樹脂進(jìn)行如AIII中所述的TFA裂解。通過制備型中壓色譜純化粗產(chǎn)物以產(chǎn)生5mg所需純度的肽(在10分鐘內(nèi)10-40％A；在200分鐘內(nèi)40-90％A)。用快速原子轟擊質(zhì)譜進(jìn)一步確定化合物的特征([M+H]+＝537.37)。
實施例2(SEQ ID NO1)Me2Val-Val-MeVal-pro-3，4-脫氫脯氨酰芐酰胺a)Z-MeVal-Pro-OMe將66.25g(250mmol)Z-MeVal-OH溶解在250ml無水二氯甲烷中。在添加36.41ml(262.5mmol)三乙胺后，使反應(yīng)混合物冷卻至-25℃，加入32.27ml(262.5mmol)新戊酰氯。在攪拌2.5小時后，向反應(yīng)混合物中添加在250ml二氯甲烷中的41.89g(250mmol)H-Pro-OMe×HCl(在0℃用36.41ml(262.5mmol)三乙胺中和的)。在-25℃繼續(xù)攪拌2小時，并在室溫下攪拌一夜。用二氯甲烷稀釋混合物，并用飽和碳酸氫鈉水溶液(3x)、水(1x)、5％檸檬的酸(3x)和飽和NaCl溶液充分洗滌。在硫酸鈉上干燥有機(jī)相，并蒸發(fā)至干。將殘渣(91.24g)與石油醚一起攪拌一夜，過濾。獲得62.3g產(chǎn)物。b)H-MeVal-Pro-OMe將48.9g(130mmol)z-MeVal-Pro-OMe溶解在490ml甲醇中。在加入10.9ml(130mmol)濃鹽酸和2.43g 10％鈀/炭后，使反應(yīng)混合物氫化。過濾并蒸發(fā)至干，產(chǎn)生36.43g產(chǎn)物。c)Z-Val-MeVal-Pro-OMe在40℃下，將18.1g(65mmol)H-MeVal-Pro-OMe、21.6g(78mmol)Z-Val-N-羧酸酐和22.8ml(130mmol)二異丙基乙胺在110ml DMF中攪拌2天。在蒸發(fā)掉DMF后，添加二氯甲烷，有機(jī)相以飽和碳酸氫鈉水溶液(3x)、水(1x)、5％檸檬酸(3x)和飽和NaCl溶液洗滌。在硫酸鈉上干燥有機(jī)相，蒸發(fā)至干。獲得為粘性油狀物的產(chǎn)物(29.3g)。d)H-Val-Val-MeVal-Pro-OMe將29.3g(61.6mmol)Z-Val-MeVal-Pro-OMe溶解在230ml甲醇中。在加入1.15g 10％鈀/炭后，使反應(yīng)混合物氫化。過濾并蒸發(fā)，產(chǎn)生產(chǎn)物21.96g。e)Z-Val-Val-MeVal-Pro-OMe將15.29g(61mmol)Z-Val-OH和21.96g(61mmol)H-Val-MeVal-Pro-OMe溶解在610ml二氯甲烷中，冷卻至0℃。在加入8.16ml(73.2mmol)N-甲基嗎啉2.77g(20.3mmol)HOBt和11.74g(61mmol)EDCI后，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌一夜，用二氯甲烷稀釋，并用飽和碳酸氫鈉水溶液(3x)、水(1x)、5％的檸檬酸(3x)和飽和NaCl溶液充分洗滌。在硫酸鈉上干燥有機(jī)相，并蒸發(fā)至干，產(chǎn)生31.96g產(chǎn)物。f)Z-Val-Val-MeVal-Pro-OMe將31.96g(57mmol)Z-Val-Val-MeVal-Pro-Ome溶解在250ml甲醇中，加入在水中的102.6ml(102.6mmol)1M LiOH。在室溫下攪拌24小時后，添加水，減壓下蒸去甲醇。用乙酸乙酯抽提水相3次，在4℃下將pH值調(diào)節(jié)至2，用乙酸乙酯抽提3次。在硫酸鈉上干燥合并的有機(jī)抽提物，減壓下蒸去溶劑，產(chǎn)生30.6g白色固體。g)Me2Val-Val-MeVal-Pro-OH通過氫化Z保護(hù)基和接著向氫化混合物中添加甲醛水溶液，從Z-保護(hù)的四肽酸制備N，N-二甲基化的四肽酸，以便以幾乎定量的產(chǎn)率產(chǎn)生所需產(chǎn)物。h)Me2Val-Val-MeVal-Pro-3，4-脫氫脯氨酸甲酯將3.38g Me2Val-Val-MeVa-Pro-OH(7.27mmol)和0.925g 3，4-脫氫脯氨酸甲酯氫氯化物(7.27mmol)溶解在75ml無水二氯甲烷中。于4℃添加0.975mlN-甲基嗎啉(8.72 mmol)、0.332g HOBt(2.43mmol)和1.4gEDCI(7.27mmol)。在室溫下攪拌一夜后，加入二氯甲烷，用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌有機(jī)相3次，用水洗滌1次。以5％檸檬酸水溶液提取有機(jī)相。然后用1N氫氧化鈉將酸性水層的pH值調(diào)節(jié)至8，并用二氯甲烷提取4次。在硫酸鈉上干燥，并在減壓下蒸發(fā)，產(chǎn)生2.82g五肽甲酯。k)Me2Val-Val-MeVal-Pro-3，4-脫氫脯氨酸芐酰胺在室溫下用4.6ml 1N LiOH溶液處理在20ml甲醇中的包含五肽甲酯的2.0g脫氫脯氨酸的溶液。在反應(yīng)完成(tcl對照)后，添加水，蒸去甲醇，使化合物從水中冷凍干燥。將所獲得的白色粉末溶解在36ml二氯甲烷中，加入0.388ml(3.55mmol)芐胺。在4℃添加0.476ml N-甲基嗎啉(4.26mmol)，0.163g HOBt(1.19mmol)和0.684g EDCI(3.55mmol)后，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌一夜。加入二氯甲烷，用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌有機(jī)相3次，用水洗滌1次。以5％檸檬酸水溶液提取有機(jī)相2次。然后用5N氫氧化鈉將酸性水層的pH值調(diào)節(jié)至9，并用二氯甲烷提取4次。在硫酸鈉上干燥，并在減壓下蒸去溶劑，產(chǎn)生600毫克粗的五肽芐酰胺。采用中壓液相色譜(在5分鐘內(nèi)0-5％A，在10分鐘內(nèi)10-25％A，在450分鐘內(nèi)25-90％A)進(jìn)一步純化300 mg這一粗肽，產(chǎn)生92毫克分析純產(chǎn)物。經(jīng)快原子轟擊質(zhì)譜進(jìn)一步確定該化合物的特征([M+H]＝639.4)。
制備了下列化合物，并且這些化合物可以按照實施例1和2的方法制備3. Xaa Val Xab pro Xac4. Xaa Val Xab Pro Xad5. Xaa Val Xab Pro Xae6. Xaa val Xab Pro Xaf7. Xaa val Xab Pro Xag8. Xaa Val Xab Pro Xah9. Xaa Val Xab Pro Xai10.Xaa Val Xab Pro Xak11.Xaa Val Xab Pro Xal12.Xaa Val Xab pro Xam13.Xaa Val Xab pro Xan14.Xaa Val Xab Pro Xao15.Xaa Val Xab Pro Xap16.Xaa Val Xab Pro Xaq17.Xaa Val Xab Pro Xar18.Xaa Val Xab pro Xas19.Xaa Val Xab Pro Xat20.Xaa Val Xab Pro Xau21.Xaa Val Xab Pro Xav22.Xaa Val Xab Pro Xaw23.Xaa Val Xab pro Xax24.Xaa Val Xab Pro Xay25.Xaa Val Xab pro Xaz26.Xaa Val Xab Pro Xba27.Xaa Val Xab pro Xbb28.Xaa Val Xab Pro Xbc29.Xbd Val Xab Pro Xar30.Xbe Val Xab Pro Xar31.Xaa Val Xab Pro Xcx32.Xaa Val Xab Pro Xcy33.Xaa Ile Xab Pro Xar34.Xaa Xbh Xab pro Xar35.Xaa Val Xbf Pro Xar36.Xaa Val Xbq pro Xar37.Xaa Val Xab pro Xbi38.Xaa Val Xab pro Xbk39.Xaa Val Xab Pro Xbl40.Xaa Val Xab Pro Xbm41.Xaa Val Xab Pro Xbn42.Xaa Val Xab pro Xbo43.Xaa Val Xab Pro Xbp44.Xaa Val Xab pro Xbq45.Xaa Val Xab pro Xbr46.Xaa Val Xab Pro Xbs47.Xaa Val Xab Pro Xbt48.Xaa Val Xab Pro Xbu49.Xaa Val Xab Pro Xbv50.Xaa Val Xab Pro Xbw51.Xaa Val Xab Pro Xbx52.Xaa Val Xab Pro Xby53.Xaa Val Xab Pro Xbz54.Xaa Val Xab Pro Xca55.Xaa Val Xab Pro Xcb56.Xaa Val Xab Pro Xcc57.Xaa Val Xab Pro Xcd58.Xaa Val Xab Pro Xce59.Xaa Val Xab pro Xcf60.Xaa Val Xab Pro Xcg61.Xaa Val Xab Pro Xch62.Xaa Val Xab pro Xci63.Xaa Val Xab Pro Xck64.Xaa Val Xab Xcn Xco65.Xaa Val Xab Xcn Xak66.Xaa Val Xab Xcn Xaq67.Xaa Val Xab Xcn Xar68.Xaa Val Xab Xcn Xay69.Xaa Val Xab Xcp Xak70.Xaa Val Xab Xcp Xaq71.Xcw Val Xab Xcp Xar72.Xcx Val Xab Xcp Xay73.Xaa Val Xab Pro Xcn Xcr74.Xaa Val Xab Pro Xcn Xcs75.Xaa Val Xab Pro Xcn Xct76.Xaa Val Xab Pro Xcn Xcu77.Xaa Val Xab Pro Xcn Xcv78.Xaa Val Xab Pro Xcq Xcr79.Xaa Val Xab Pro Xcq Xcs80.Xaa Val Xab Pro Xcq Xct81.Xaa Val Xab Pro Xcq Xcu82.Xaa Val Xab Pro Xcq Xcv83.Xaa Val Xab Pro Xcw Xcr84.Xaa Val Xab Pro Xcw Xcs85.Xaa Val Xab Pro Xcw Xct86.Xaa Val Xab Pro Xcw Xcu87.Xaa Val Xab Pro Xcw Xcv88.Xaa Val Xab Pro Xcw OCH389.Xaa Val Xab Pro Xcl90.Xaa Val Xab pro Xcm91.Xaa Val Xab Pro Xcz92.Xaa Val Xab Pro Xda
下表中給出了合成的新化合物的MS-定性的實例。
實施例[編號]快速原子轟擊MS分析[分子量(測量值)]61. 62764. 54688. 55289. 655表I-按照實施例1和2的方法制備的化合物的序列識別號(SEQ ID NO)化合物編號 序列識別號1-32，35-63，88-92 133 234 364-72 473-87 5在概述中符號Xaa具有下述含義Xaa N，N-二甲基纈氨酸Xab N-甲基纈氨酸
XbdN，N-二甲基并亮氨酸XbeN，N-二甲基-2-叔丁基-甘氨酸XbfN-甲基異亮氨酸XbgN-甲基-2-叔丁基-甘氨酸Xbh2-叔丁基甘氨酸
Xck3，4-脫水脯氨酸-金剛烷基(1)-酰胺
Xcn3，4-脫氫脯氨酸Xco3，4-脫氫脯氨酸酰胺XcpL-噻唑烷4-碳酰Xcq4-氟代-脯氨酸
Xcw L-氮雜環(huán)丁烷-2-碳酰
可以通過常規(guī)方法(包括，例如，如下所述的方法)測定本發(fā)明的化合物的抗癌活性。
A.體外方法使用用于貼壁細(xì)胞系的標(biāo)準(zhǔn)方法(如微量培養(yǎng)四唑測定(MTT))測定細(xì)胞毒性。這種測定的細(xì)節(jié)已經(jīng)發(fā)表(Alley，MC等，癌癥研究，48589-601，1988)。使用腫瘤細(xì)胞(如，HT-29結(jié)腸癌或LX-1肺臟腫瘤)的指數(shù)生長培養(yǎng)物制作微滴定板培養(yǎng)物。細(xì)胞以96-孔平板上每孔5000-20,000個細(xì)胞接種(在150μl培養(yǎng)基中)，在37℃下培養(yǎng)過夜。以從10-4M到10-10M變化的10倍的稀釋倍數(shù)添加試驗化合物，然后培養(yǎng)細(xì)胞48小時。為了測定每個孔中存活的細(xì)胞的數(shù)量，添加MTT染料(50μl在鹽水中的3mg/ml的3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基溴化四唑)。將該混合物在37℃下培養(yǎng)5小時，然后向每個孔添加50μl的25％SDS(pH2)。培養(yǎng)過夜后，使用ELISA讀數(shù)儀讀出在550nm下各孔的吸光度。利用公式％T/C從重復(fù)孔計算數(shù)據(jù)的平均值+/-SD(％處理的存活細(xì)胞/對照)。
產(chǎn)生50％生長抑制的T/C的試驗化合物的濃度指定為IC50值。
實施例的化合物IC50[M]1.6×10-62.1×10-961. 2×10-864. 2×10-8884×10-8896×10-8B.體內(nèi)方法在臨床前測定中也試驗了本發(fā)明的化合物的體內(nèi)活性，這種體內(nèi)活性表示臨床效用。用移植(異種移植)進(jìn)腫瘤組織(優(yōu)選地是人起源的)的裸鼠實施這樣的測定，這在本領(lǐng)域是熟知的。在把試驗化合物施用到進(jìn)行異種移植的小鼠中后評價其抗腫瘤功效。
更具體地說，利用大約50mg大小的腫瘤片段把在無胸腺的裸鼠中生長的人胸部腫瘤(MX-1)移植進(jìn)新的受體小鼠。把移植的日期指定為第0天。六至十天后，以靜脈內(nèi)注射的試驗化合物處理小鼠(各劑量下，以5-10只小鼠為一組)。每隔一天施用化合物，共施用3周，劑量為1-100mg/kg體重。每周測定兩次腫瘤直徑和體重。利用游標(biāo)卡尺測定的直徑和下式計算腫瘤體積(長度×寬度2)/2＝mm3腫瘤體積計算每個處理組的平均腫瘤體積，測定每組相對于未處理的對照腫瘤的T/C值。
新的化合物具有良好的抑制腫瘤性質(zhì)。序列表(1)一般信息(i)申請人(A)BASF Aktiengesel lschaft(B)街道Carl-Bosch-Strasse 38(C)城市Ludwigshafen(E)國家Bundesrepublik Deutschland(F)郵區(qū)代碼D-67056(G)電話0621/6048526(H)傳真0621/6043123(I)電傳1762175170(ii)發(fā)明名稱新的肽及其制備方法和用途(iii)序列數(shù)5(iv)計算機(jī)可讀形式(A)介質(zhì)類型軟盤，3.5英寸，2DD(B)計算機(jī)IBM AT-兼容機(jī)， 80286處理器(C)操作系統(tǒng)MS-DOS 5.0版(D)軟件WordPerfect(2)SEQ ID NO1的信息(i)序列特征(A)長度5個氨基酸(B)類型氨基酸(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型肽(xi)序列描述SEQ ID NO1Xaa Val Xaa Pro Xaa(2)SEQ ID NO2的信息(i)序列特征
(A)長度5個氨基酸(B)類型氨基酸(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型肽(xi)序列描述SEQ ID NO2Xaa Ile Xaa Pro Xaa(2)SEQ ID NO3的信息(i)序列特征(A)長度5個氨基酸(B)類型氨基酸(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型肽(xi)序列描述SEQ ID NO3Xaa Xaa Xaa Pro Xaa(2)SEQ ID NO4的信息(i)序列特征(A)長度5個氨基酸(B)類型氨基酸(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型肽(xi)序列描述SEQ ID NO4Xaa Val Xaa Xaa Xaa(2)SEQ ID NO5的信息(i)序列特征(A)長度6個氨基酸(B)類型氨基酸(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性
(ii)分子類型肽(xi)序列描述SEQ ID NO5Xaa Val Xaa Pro Xaa Xaa
權(quán)利要求
1.式I的新肽以及它們與生理上可耐受的酸的鹽R1R2N-CHX-CO-A-B-D-E-(F)t-K1其中R1是甲基、乙基或異丙基；R2是氫、甲基或乙基；R1-N-R2一起可以是吡咯烷環(huán)；A是纈氨酰、異亮氨酰、亮氨酰、2-叔-丁基甘氨酰、2-乙基甘氨酰、正亮氨?；蛘i氨酰殘基；B是N-甲基-纈氨酰、-亮氨酰、-異亮氨酰、-正纈氨酰、-正亮氨酰、-2-叔-丁基甘氨酰、-3-叔-丁基丙氨?；?2-乙基甘氨酰殘基；D是脯氨酰、3，4-脫氫脯氨酰、4-氟脯氨酰、4，4-二氟脯氨酰、氮雜環(huán)丁烷-2-碳酰、高脯氨酰、3-甲基脯氨酰、4-甲基脯氨酰、5-甲基脯氨酰或噻唑烷-4-碳酰殘基；E是3，4-脫氫脯氨酰、4-氟脯氨酰、3-甲基脯氨酰、4-甲基脯氨酰、氮雜環(huán)丁烷-2-碳酰或4，4-二氟脯氨酰殘基；F是纈氨酰、2-叔-丁基甘氨酰、異亮氨酰、亮氨酰、2-環(huán)己基甘氨酰、正亮氨酰、正纈氨酰、新戊基甘氨酰、丙氨酰、β-丙氨酰或氨基異丁酰殘基；X是烷基(優(yōu)選地是C2-5)、環(huán)丙基或環(huán)戊基；t是0或1；并且K是烷氧基(優(yōu)選地是C1-4)、芐氧基或取代的或非取代的氨基部分。
2.用于醫(yī)藥，尤其是治療腫瘤疾病的醫(yī)藥中的式I的化合物或其鹽。
3.一種藥物組合物，該藥物組合物包含藥學(xué)上可接受的載體和治療有效量的權(quán)利要求1的化合物。
4.一種治療哺乳動物腫瘤的方法，該方法包括對患有這樣的腫瘤的哺乳動物施用腫瘤-抑制量的如權(quán)利要求1所限定的式I的化合物。
5.制備按照權(quán)利要求1的式I化合物的方法，其特征在于按照肽化學(xué)的已知方法制備它們。
全文摘要
本文描述了式(Ⅰ):R
文檔編號C07K5/103GK1187199SQ96194468
公開日1998年7月8日 申請日期1996年6月3日 優(yōu)先權(quán)日1995年6月7日
發(fā)明者A·浩伯特, F·艾姆林, C·A·羅莫道 申請人:巴斯福股份公司