專利名稱：(11β,16β)-21-(乙酰氧基)-11-羥基-2'甲基-5'H-孕甾-1,4-二烯并[17,16-D]噁唑-3,20 ...的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及制備化合物(11β，16β)-21-(乙酰氧基)-11-羥基-2’-甲基-5’H-孕甾-1，4-二烯并[17，16-D]噁唑-3，20-二酮，也已知為，后面稱為，INN名(國際非專有名)地夫可特(deflazacort)的新方法。地夫可特由下式Ⅰ表示
地夫可特從幾年前開始被作為鈣-缺乏的類皮質(zhì)激素劑用于治療。
此化合物屬于更一般類型的孕甾烯并-噁唑啉，對于這些化合物，已經(jīng)報道了其抗炎，糖皮質(zhì)激素和激素類藥理活性。上述化合物的例子，包括地夫可特，披露于US 3413286中，其中地夫可特被稱作11β-21-二羥基-2’-甲基-5’βH-孕甾-1，4-二烯并[17，16-d]噁唑-3，20-二酮21-乙酸酯。
根據(jù)US 3413286披露的方法，地夫可特從5-孕甾烷-3β-醇-11，20-二酮-2’-甲基噁唑啉通過用Br2-二惡烷2，4-二溴化而得到，在LiBr-LiCO3存在下加熱產(chǎn)物得到1，4-二烯，并將后者轉(zhuǎn)化為21-碘化合物，然后轉(zhuǎn)化為想要的21-乙酰氧基化合物。通過地夫可特的水解，得到式Ⅱ的11β-21-二羥基-2’-甲基-5’βH-孕甾-1，4-二烯并[17，16-d]噁唑-3，20-二酮
式Ⅱ的化合物優(yōu)選地根據(jù)在EP-B-322630中公開的發(fā)酵法得到；在所說的專利中，式Ⅱ化合物被稱為11β-21-二羥基-2’-甲基-5’βH-孕甾-1，4-二烯并[17，16-d-]噁唑啉-3，20-二酮。
本發(fā)明提供通過將式Ⅱ化合物乙?；糜诘玫降胤蚩商氐男碌膬?yōu)秀的一步法。
更具體地，本發(fā)明的方法包括式Ⅱ的化合物與乙酸酐在合適的有機溶劑中在堿性催化劑和水存在下反應。
式Ⅱ的原料根據(jù)本專業(yè)已知的方法得到，例如根據(jù)在上面引用的，本文引作參考的EP-B-322630中公開的發(fā)酵法。所說的專利公開了用于得到式Ⅱ化合物的發(fā)酵法，其中2’-甲基-4-孕甾烯-21-醇-[17α，16α-d-]噁唑啉基-3，20-二酮與Curvularia菌株和Arthrobacter菌株連續(xù)生長的混合培養(yǎng)物接觸。更具體地，根據(jù)優(yōu)選的方案，上述化合物在接種12-24小時之后被加入C．lunata NRRL 2380在合適的發(fā)酵培養(yǎng)基中的生長培養(yǎng)物中，并且，在接種48-72小時后，將18-36小時的A．simplex ATCC 6946的生長培養(yǎng)物加入混合物中并進一步溫育40-55小時；發(fā)酵在浸沒的條件下進行，溫度保持在27℃至32℃之間，pH在6至8之間；式Ⅱ的發(fā)酵產(chǎn)物根據(jù)本專業(yè)已知的工藝回收。
適合于本發(fā)明的方法的有機溶劑是那些能夠至少部分溶解原料，而對反應過程沒有負作用的溶劑。合適的有機溶劑的例子有鹵代(C1-C4)烴，(C1-C4)羧酸的(C1-C4)烷基酯，二甲基甲酰胺，乙腈，丙酮等等。優(yōu)選的溶劑是(C1-C4)羧酸的(C1-C4)烷基酯，如甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，2-甲基丙基或叔丁基甲酸酯；甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，2-甲基丙基或叔丁基乙酸酯；甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，2-甲基丙基或叔丁基丙酸酯；甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，2-甲基丙基或叔丁基丁酸酯；甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，2-甲基丙基或叔丁基異丁酸酯。特別優(yōu)選的是乙酸乙酯。
反應溫度可以根據(jù)其它反應參數(shù)在約-15℃至30℃變化；優(yōu)選地溫度被設定為-5℃至10℃，特別優(yōu)選地是約5℃。
乙酸酐優(yōu)選地以相對于化學計量摩爾過量的量與式Ⅱ化合物反應；優(yōu)選地，式Ⅱ化合物與乙酸酐之間的摩爾比為約1．0／1．2至約1．0／2，特別優(yōu)選地摩爾比約1．0／1．4。
用于本發(fā)明方法的堿性催化劑是三級有機脂肪或非環(huán)狀胺如三甲胺，三乙胺，N-甲基吡咯烷或雜環(huán)堿如吡啶，4-(N，N-二甲基氨基)吡啶，4-(N，N-二乙基氨基)吡啶，可力丁，甲基吡啶，等等。優(yōu)選地，使用4-(N，N-二甲基氨基)吡啶。催化量取決于所用的具體催化劑；一般為式Ⅱ化合物摩爾量的約0．05至約0．30倍。優(yōu)選地其摩爾量為式Ⅱ化合物摩爾量的約0．05至約0．10倍；具體地，當?shù)胤蚩商卮己鸵宜狒g的摩爾比為約1．0／1．4，而且4-(N，N-二甲基氨基)吡啶被選作催化劑時，其摩爾量為式Ⅱ化合物摩爾量的約0．06倍。
一般地，式Ⅱ化合物摩爾量3至20倍的水存在于反應混合物中，優(yōu)選地5至15倍。在上述優(yōu)選的條件下，即式Ⅱ化合物／乙酸酐／催化劑的比例為約1．0／1．4／0．06，相對于式Ⅱ化合物，水的摩爾過量將為約10倍。
反應時間將隨上述反應參數(shù)和條件而變化。一般情況下，反應在4至15小時內(nèi)完成。在任何情況下，反應進程都可以根據(jù)本專業(yè)已知的標準技術，如HPLC或TLC容易地跟蹤，通常跟蹤最終產(chǎn)物地夫可特的形成。因此，在這些分析結(jié)果的基礎上，熟練的人員可以估價何時停止反應，開始回收所需的產(chǎn)物。
反應產(chǎn)物根據(jù)本專業(yè)已知的常用方法回收；例如反應混合物用合適的緩沖溶液(如磷酸，碳酸等等，pH6-8)洗滌，然后最終產(chǎn)物在合適的溶劑中結(jié)晶。根據(jù)優(yōu)選的方案，當(C1-C4)羧酸的(C1-C4)烷基酯被用作反應溶劑時，尤其是用乙酸乙酯時，最終產(chǎn)物可以直接在相同的反應溶劑中結(jié)晶，不需要加入用于結(jié)晶的不同溶劑。
為了更好地說明本發(fā)明，給出下列實施例。
實施例1C．lunata和A．simplex的連續(xù)生長Ⅰ)斜面培養(yǎng)基薩布羅(Sabouraud)培養(yǎng)基(用于C．lunata)抗生素瓊脂No．1(用于A．simplex)Ⅱ)植物性的和預-培養(yǎng)的培養(yǎng)基a)用于C．lunata大豆粗粉 13g／lKH2PO45g／l葡萄糖10g／l蛋白胨5g／l高壓滅菌之前將pH調(diào)節(jié)至6．5-7．5b)用于A．simplex葡萄糖1．0g／l大豆粗粉 5．0g／l蛋白胨5．0g／lBasamin Busch 3．0g／lKH2PO45．0g／lNaCl 5．0g／l聚硅氧烷 0．1ml／l高壓滅菌之前將pH調(diào)節(jié)至6．5-7．5。Ⅲ)發(fā)酵培養(yǎng)基具有相同組成的用于C．lunata的預-培養(yǎng)的發(fā)酵培養(yǎng)基已在上面敘述過。Ⅳ)發(fā)酵工藝斜面被分別用于接種500ml燒瓶，在100ml上面指出的植物性培養(yǎng)基存在下在約28℃培養(yǎng)約12-24小時(C．lunata)或18-36小時(A．simplex)。這些接種物被用于下述工藝在上面得到的C．lunata培養(yǎng)物的等分試樣(約1至5％)被轉(zhuǎn)移到含有上述的發(fā)酵培養(yǎng)基的8升培養(yǎng)器中并在29-32℃溫育24小時。
然后加入2’-甲基-4-孕甾烯-21-醇-[17α，16α-d-]-噁唑啉基-3，20-二酮，從接種開始連續(xù)發(fā)酵36-72小時。
以后，A．simplex的18-36小時培養(yǎng)物被加入其中，繼續(xù)發(fā)酵40-55小時。
反應進程通過如本專業(yè)已知的TLC或優(yōu)選地HPLC通過跟蹤原料的消失和／或最終產(chǎn)物的出現(xiàn)而監(jiān)測。作為進一步的控制，中間體的出現(xiàn)消失也可以被跟蹤。HPLC轉(zhuǎn)化產(chǎn)率70-75％。回收加入A．simplex 40-55小時之后，轉(zhuǎn)化一般可以被認為已完成，而發(fā)酵物可以被處理以分離所需的式Ⅰ化合物。
發(fā)酵混合物通過過濾分離，菌絲體反復用氯仿(3×11)洗滌，濾液用氯仿(3×11)萃取。合并的氯仿洗滌液和萃取液在減壓下部分濃縮，用活性炭脫色。然后濃縮為油狀殘余物。加入石油醚，形成沉淀，將其用83倍乙醚洗滌，過濾收集給出3g式Ⅱ化合物。
實施例2地夫可特的制備在5℃，攪拌下往(11β，16β)-11，21-二羥基-2’-甲基-5’H-孕甾-1，4-二烯并[17，16-D]噁唑-3，20-二酮(10g，0．025mol)在300ml含有4．5g(0．25mol)水的乙酸乙酯中的溶液中加入3．32ml(0．035mol)乙酸酐和0．2g(0．0016mol)4-(N，N-二甲基氨基)吡啶。反應通過在硅膠上的TLC跟蹤，用氯仿／甲醇9／1的混合物作為洗脫劑。6小時后，反應被認為已經(jīng)完成。
實施例3地夫可特的回收當實施例1的反應完成后，反應混合物的溫度達到室溫，并在1小時內(nèi)加入85ml磷酸緩沖液(pH7．5)。丟棄水層，有機層用80ml水洗滌，過濾并濃縮至約30ml。晶體的懸浮液保持在5℃2小時；過濾并干燥后，得到10g結(jié)晶產(chǎn)物。通過進一步濃縮母液至5ml并冷卻至5℃，再得到0．4g產(chǎn)物，總共10．4g，總產(chǎn)率94％(純度＞98％)。
權利要求
1．制備式Ⅰ化合物(11β，16β)-21-(乙酰氧基)-11-羥基-2’-甲基-5’H-孕甾-1，4-二烯并[17，16-d]噁唑-3，20-二酮(地夫可特)的方法
該方法包括式Ⅱ的(11β，16β)-11，21-二羥基-2’-甲基-5’H-孕甾-1，4-二烯并[17，16-d]噁唑-3，20-二酮
與乙酸酐在合適的有機溶劑中在堿性催化劑和水存在下反應。
2．根據(jù)權利要求1的方法，其中有機溶劑選自鹵代(C1-C4)烴，(C1-C4)羧酸的(C1-C4)烷基酯，二甲基甲酰胺，乙腈和丙酮。
3．根據(jù)權利要求2的方法，其中有機溶劑是(C1-C4)羧酸的(C1-C4)烷基酯。
4．根據(jù)權利要求3的方法，其中有機溶劑是乙酸乙酯。
5．根據(jù)權利要求1的方法，其中堿性催化劑選自三甲胺，三乙胺，N-甲基吡咯烷，吡啶，4-(N，N-二甲基氨基)吡啶，4-(N，N-二乙基氨基)吡啶，可力丁，甲基吡啶。
6．根據(jù)權利要求1的方法，其中反應溫度為-15℃至30℃。
7．根據(jù)權利要求1的方法，其中式Ⅱ化合物與乙酸酐之間的摩爾比是1．0／1．2至1．0／2。
8．根據(jù)權利要求1的方法，其中式Ⅱ化合物與乙酸酐之間的摩爾比是1．0／1．4。
9．根據(jù)權利要求1的方法，其中堿性催化劑的量是式Ⅱ化合物摩爾量的0．05至0．30倍。
10．根據(jù)權利要求1的方法，其中堿性催化劑的量是式Ⅱ化合物摩爾量的0．05至0．10倍。
11．根據(jù)權利要求1的方法，其中水的量是式Ⅱ化合物摩爾量的3至20倍。
12．根據(jù)權利要求1的方法，其中水的量是式Ⅱ化合物摩爾量的5至15倍。
13．根據(jù)權利要求3或4的方法，其中地夫可特在反應完成后通過用約pH6-8的緩沖水溶液洗滌反應混合物，分離并過濾有機相，在相同的反應溶劑中結(jié)晶最終產(chǎn)物而回收。
全文摘要
一種制備式Ⅰ化合物(11β,16β)－21－(乙酰氧基)－11－羥基－2’－甲基－5’H－孕甾－1,4－二烯并[17,16－d]噁唑－3,20－二酮(地夫可特)的方法,該方法包括(11β,16β)－11,21－二羥基－2’－甲基－5’H－孕甾－1,4－二烯并[17,16－d]噁唑－3,20－二酮與乙酸酐在合適的有機溶劑中在堿性催化劑和水存在下反應。
文檔編號C07J71/00GK1204339SQ96199013
公開日1999年1月6日 申請日期1996年12月4日 優(yōu)先權日1995年12月13日
發(fā)明者L·福特, C·肯塞利里 申請人:格魯波萊佩蒂特公司