專利名稱：有歧化過(guò)氧化物催化劑效果的含氮大環(huán)配位體錳或鐵配合物的生物綴合物的制作方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及有歧化過(guò)氧化物催化劑效果的化合物。本發(fā)明涉及能催化歧化過(guò)氧化物的含氮15元大環(huán)配位體的錳或鐵配合物。在另一方面，本發(fā)明涉及與靶目標(biāo)生物分子綴合的含氮15元大環(huán)配位體的錳或鐵配合物。
相關(guān)技術(shù)過(guò)氧化物歧化酶按照方程式(1)催化過(guò)氧化物轉(zhuǎn)化為氧和過(guò)氧化氫(后面稱之為歧化)。源于過(guò)氧化物的活性氧代謝物被認(rèn)為有助于許多炎性疾病和機(jī)能失調(diào)的組織病變。
(1)這些疾病比如心肌缺血再灌注損傷、腸炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓、轉(zhuǎn)移瘤、牛皮癬、器官移植排斥、輻射誘發(fā)損害、哮喘、流行性感冒、中風(fēng)、燒傷和外傷。例如參見(jiàn)Bulkeley,G.B.的《活性氧代謝物和再灌注損傷網(wǎng)狀內(nèi)皮功能的異常觸發(fā)》載《柳葉刀》(The Lancet),344卷，934-36頁(yè)，1994年10月1日；Grisham M.B.的《腸炎中的氧化劑和自由基》載《柳葉刀》，344卷，859-861頁(yè)，1994年9月24日；Cross,C.E.等人的《各種活性氧形式和肺》載《柳葉刀》，344卷，930-33頁(yè)，1994年10月1日；Jenner,P.的《神經(jīng)退行性疾病中的氧化性損害》載《柳葉刀》，344卷，796-798頁(yè)，1994年9月17日；Cerutti,P.A.的《氧自由基和癌》載《柳葉刀》，344卷，862-863頁(yè)，1994年9月24日；Simic,M.G.等人的《生物學(xué)和醫(yī)學(xué)中的氧自由基》載《基礎(chǔ)生命科學(xué)》(Basic Life Science)，49卷，Plenum出版社，NewYork和London 1988年版；Weiss在《細(xì)胞生物化學(xué)雜志》(J.Cell.Biochem.),1991年增刊，15C,216，摘要C110(1991)；Petkau,A.的《癌癥治療評(píng)論》(Cancer Treat.Rev.)13,17(1966)中；McCord在《自由基生物醫(yī)學(xué)雜志》(J.Free Radicals Biol.Med.),2,307,(1986)中；Baunuster,J.V.等人在《生物化學(xué)評(píng)論》(Crit.Rev.Biochem.),22,111(1987)中。上面從《柳葉刀》中選出的參考文獻(xiàn)告訴我們由過(guò)氧化物產(chǎn)生的自由基和許多種疾病之間的緊密關(guān)系。特別是Bulkley和Grisham的參考文獻(xiàn)告訴我們，在過(guò)氧化物歧化和最終的疾病治療之間的緊密關(guān)系。
眾所周知，來(lái)源于內(nèi)皮的血管松弛因子(EDRF)的分解涉及過(guò)氧化物，它經(jīng)鑒別為氮的氧化物(NO)，過(guò)氧化物歧化酶可以防止EDRF的分解。這意味著在血管痙攣、血栓形成和動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)理中，源于過(guò)氧化物的各種形式的活性氧有重要的作用。請(qǐng)見(jiàn)比如Gryglewski,R.J.等人的《在來(lái)源于內(nèi)皮的血管松弛因子分解時(shí)涉及的過(guò)氧化物陰離子》載《自然》(Nature),320卷，454-56頁(yè)，(1986)；和Palmer,R.M.J.等人的《氧化氮釋放是引起來(lái)源于內(nèi)皮的血管松弛因子分解的原因》載《自然》，327卷，523-26頁(yè)，(1987)。
對(duì)天然的、重組的和改性的過(guò)氧化物歧化酶已經(jīng)完成了臨床試驗(yàn)和動(dòng)物研究，這些正在顯示出上面指明的疾病狀態(tài)中減少過(guò)氧化物水平的治療效果。然而，使用這種酶作為潛在的治療劑也產(chǎn)生了許多問(wèn)題，包括缺乏口服的活性、在體內(nèi)半壽命期短、對(duì)于非人類源的酶具有致免疫性和組織分布不良等。
含氮15元大環(huán)配位體的錳或鐵配合物是過(guò)氧化物歧化酶(SOD)的低分子量仿制品，它可以用作治療劑和避免許多使用SOD酶所具有的問(wèn)題。然而，人們希望SOD仿制品能夠?qū)?zhǔn)所需靶體，在這里該化合物被濃縮到具有最佳的效果。用不著賦予該化合物以什么“打靶”的方法，有時(shí)必須增大劑量以在作用點(diǎn)得到有效的濃度。這樣的加大劑量有時(shí)導(dǎo)致對(duì)病人有不希望的副作用。
現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的大環(huán)或錳或鐵配合物可以通過(guò)鏈接基團(tuán)與一種或幾種靶生物分子結(jié)合即配合，形成靶生物分子-大環(huán)或靶生物分子-錳配合物綴合物。
發(fā)明概要本發(fā)明的目標(biāo)是提供含氮15元大環(huán)配位體錳或鐵配合物的生物綴合物，它是過(guò)氧化物歧化酶(SOD)的低分子量仿制品，可以作為至少部分由過(guò)氧化物引起的炎性疾病狀態(tài)或機(jī)能失調(diào)的治療劑。本發(fā)明的另一個(gè)目標(biāo)是提供含氮15元大環(huán)配位體錳(Ⅱ)或鐵(Ⅲ)配合物的生物綴合物，它可以用作具有提高了動(dòng)態(tài)穩(wěn)定性、提高了氧化穩(wěn)定性和提高了氫結(jié)合能力的核磁共振成像(MRI)造影劑。本發(fā)明的再一個(gè)目標(biāo)是提供能夠瞄準(zhǔn)體內(nèi)特異位點(diǎn)的含氮15元大環(huán)配位體錳或鐵配合物的生物綴合物。
按照本發(fā)明，提供了含氮15元大環(huán)配位體錳或鐵配合物的生物綴合物，其中，(1)1-5個(gè)“R”基通過(guò)鏈接基團(tuán)連在生物分子上，(2)X、Y和Z中之一通過(guò)鏈接基團(tuán)連接在生物分子上，或(3)1-5個(gè)“R”基和X、Y和Z中之一通過(guò)鏈接基團(tuán)連在生物分子上；生物分子獨(dú)立地選自如下的基團(tuán)類固醇、碳水化合物、脂肪酸、氨基酸、肽、蛋白質(zhì)、抗體、維生素、類脂、磷脂、磷酸酯、膦酸酯、核酸、酶底物、酶抑制劑和酶受體底物，而且鏈接基團(tuán)來(lái)源于與“R”基或X、Y和Z連接并和生物分子反應(yīng)的取代基，它們選自-NH2、-NHR10、-SH、-OH、-COOH、-COOR10、-CONH2、-NCO、-NCS、-COOX”、烯基、炔基、鹵素、甲苯磺酸酯、甲磺酸酯、tresylate、三氟甲磺酸酯和苯酚，這里R10是烷基、芳基或烷芳基，X”是鹵素。
發(fā)明的詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明涉及含氮15元大環(huán)配位體錳或鐵配合物的生物綴合物，它催化過(guò)氧化物轉(zhuǎn)化為氧和過(guò)氧化氫。這些配合物用如下的通式表示
其中R、R’、R1、R’1、R2、R’2、R3、R’3、R4、R’4、R5、R’5、R6、R’6、R7、R’7、R8、R’8、R9和R’9獨(dú)立地表示氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)烷基烷基、環(huán)烷基環(huán)烷基、環(huán)烯基烷基、烷基環(huán)烷基、烯基環(huán)烷基、烷基環(huán)烯基、烯基環(huán)烯基、雜環(huán)基、芳基和芳烷基，以及連接在α-氨基酸的α-碳上的基團(tuán)；或者R1或R’1和R2或R’2、R3或R’3和R4或R’4、R5或R’5和R6或R’6、R7或R’7和R8或R’8、R9或R’9和R或R’與和它們相連的碳原子一起獨(dú)立地形成具有3-20個(gè)碳原子的飽和的、部分飽和的或不飽和的環(huán)，或者R或R’和R1或R’1、R2或R’2和R3或R’3、R4或R’4和R5或R’5、R6或R’6和R7或R’7、R8或R’8和R9或R’9與和它們相連的碳原子一起獨(dú)立地形成具有2-20個(gè)碳原子的含氮雜環(huán)，以及上述各種情況的結(jié)合，這里條件是，當(dāng)含氮雜環(huán)是不含與氮連接的氫即在所述式中與氮結(jié)合的氫的雜芳環(huán)時(shí)，所述氮仍在大環(huán)中，且不存在與大環(huán)的相同碳連接的幾個(gè)R基團(tuán)，其中，(1)1-5個(gè)“R”基團(tuán)通過(guò)鏈接基團(tuán)連接到生物分子上；(2)X、Y和Z中的一個(gè)通過(guò)鏈接基團(tuán)連接到生物分子上；或者(3)“R”基團(tuán)中的1-5個(gè)和X、Y和Z中的一個(gè)通過(guò)鏈接基團(tuán)連接到生物分子上，且生物分子獨(dú)立地選自類固醇、碳水化合物、脂肪酸、氨基酸、肽、蛋白質(zhì)、抗體、維生素、類脂、磷脂、磷酸酯、膦酸酯、核酸、酶底物、酶抑制劑和酶受體底物，而且鏈接基團(tuán)來(lái)源于與生物分子反應(yīng)的“R”基或X、Y和Z連接的取代基，它們選自-NH2、-NHR10、-SH、-OH、-COOH、-COOR10、-CONH2、-NCO、-NCS、-COOX”、烯基、炔基、鹵素、甲苯磺酸酯、甲磺酸酯、tresylate、三氟甲磺酸酯和苯酚，這里R10是烷基、芳基或烷芳基，X”是鹵素；M是錳或鐵。
X、Y和Z表示來(lái)源于任何的單齒或多齒配位體或配位體系統(tǒng)的適當(dāng)?shù)呐湮惑w或電中性的陰離子，或其相應(yīng)的陰離子(比如苯甲酸或苯甲酸根陰離子、苯酚或苯氧基陰離子、醇或烷氧基陰離子)。X、Y和Z獨(dú)立地選自鹵素、氧代基、結(jié)晶水、配位羥離子、醇、苯酚、二氧、過(guò)氧、氫過(guò)氧、烷基過(guò)氧、芳基過(guò)氧、氨、烷基氨基、芳基氨基、雜環(huán)烷基氨基、雜環(huán)芳基氨基、氨基氧化物、肼、烷基肼、芳基肼、氧化氮、氰化物、氰酸鹽、硫氰酸鹽、異氰酸鹽、異硫氰酸鹽、烷基腈、芳基腈、烷基異腈、芳基異腈、硝酸鹽、亞硝酸鹽、疊氮基、烷基磺酸、芳基磺酸、烷基亞砜、芳基亞砜、烷基芳基亞砜、烷基次磺酸、芳基次磺酸、烷基亞磺酸、芳基亞磺酸、烷基硫醇羧酸、芳基硫醇羧酸、烷基硫醇硫代羧酸、芳基硫醇硫代羧酸、烷基羧酸(如醋酸、三氟乙酸、草酸)、芳基羧酸(如苯甲酸、鄰苯二甲酸)、尿素、烷基脲、芳基脲、烷基芳基脲、硫脲、烷基硫脲、芳基硫脲、烷基芳基硫脲、硫酸鹽、亞硫酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸氫鹽、硫代硫酸鹽、硫代亞硫酸鹽、連二亞硫酸鹽、烷基膦、芳基膦、烷基膦氧化物、芳基膦氧化物、烷基芳基膦氧化物、烷基膦硫化物、芳基膦硫化物、烷基芳基膦硫化物、烷基膦酸、芳基膦酸、烷基次膦酸、芳基次膦酸、烷基三價(jià)膦酸、芳基三價(jià)膦酸、磷酸鹽、硫代磷酸鹽、亞磷酸鹽、焦亞磷酸鹽、三磷酸鹽、磷酸氫鹽、磷酸二氫鹽、烷基胍基、芳基胍基、烷基芳基胍基、烷基氨基甲酸酯、芳基氨基甲酸酯、烷基芳基氨基甲酸酯、烷基硫代氨基甲酸酯、芳基硫代氨基甲酸酯、烷基芳基硫代氨基甲酸酯、烷基二硫代氨基甲酸酯、芳基二硫代氨基甲酸酯、烷基芳基二硫代氨基甲酸酯、碳酸氫鹽、碳酸鹽、高氯酸鹽、氯酸鹽、亞氯酸鹽、次氯酸鹽、高溴酸鹽、溴酸鹽、亞溴酸鹽、次溴酸鹽、四鹵錳酸鹽、四氟硼酸鹽、六氟磷酸鹽、六氟銻酸根、次亞磷酸鹽、碘酸鹽、高碘酸鹽、偏硼酸鹽、四芳基硼酸鹽、四烷基硼酸鹽、酒石酸鹽、水楊酸鹽、琥珀酸鹽、檸檬酸鹽、抗壞血酸鹽、糖精酸鹽、氨基酸、異羥肟酸鹽、硫代甲苯磺酸鹽以及離子交換樹(shù)脂的陰離子，或者X、Y和Z中的一個(gè)或幾個(gè)獨(dú)立地與“R”基團(tuán)中的一個(gè)或幾個(gè)相連的系統(tǒng)，其中n是0或1。從中選擇X、Y和Z的優(yōu)選配位體包括鹵素、有機(jī)酸、硝酸鹽和硼酸氫根陰離子。
鏈接基團(tuán)(在本文中也稱作Linker)來(lái)源于與“R”基團(tuán)或X、Y和Z相連的特殊的官能基團(tuán)，和將生物分子連接到“R”基團(tuán)或X、Y和Z的官能基。這種官能基團(tuán)選自-NH2、-NHR10、-SH、-OH、-COOH、-COOR10、-CONH2、-NCO、-NCS、-COOX”、烯基、炔基、鹵素、甲苯磺酸酯、甲磺酸酯、tresylate、三氟甲磺酸酯和苯酚，這里R10是烷基、芳基或烷芳基，X”是鹵素。當(dāng)前，優(yōu)選的烯基是乙烯基，而優(yōu)選的炔基是乙炔基。在“R”基團(tuán)或X、Y和Z上的官能基是可以與生物分子反應(yīng)的，就是可以與類固醇、碳水化合物、脂肪酸、氨基酸、肽、蛋白質(zhì)、抗體、維生素、類脂、磷脂、磷酸酯、膦酸酯、核酸、酶底物、酶抑制劑和酶受體底物和其它有意義的靶目標(biāo)生物分子反應(yīng)。當(dāng)與“R”基團(tuán)或X、Y和Z相連的官能基和生物分子反應(yīng)時(shí)，該官能基被改變，所產(chǎn)生的官能團(tuán)就是鏈接基團(tuán)。比如，當(dāng)與“R”基團(tuán)相連的-NH2基團(tuán)與如實(shí)施例1的類固醇反應(yīng)時(shí)，鏈接基團(tuán)就是-NH-。對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，特定的鏈接基團(tuán)的準(zhǔn)確結(jié)構(gòu)是明顯的，取決于特定的官能基和所選擇的生物分子。對(duì)于在“R”基團(tuán)或X、Y和Z上相連的官能基和生物分子的特定反應(yīng)條件對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)也明顯的。
在本文中將形成鏈接基團(tuán)的官能基定義為“鏈接基團(tuán)前體”，它可以在制備大環(huán)時(shí)存在于“R”基團(tuán)上，或者在制備了大環(huán)或其錳配合物之后加上或改變。類似地，當(dāng)錳或鐵配合物被制備或進(jìn)行軸向配位體交換反應(yīng)以交換存在于錳或鐵配合物中的軸向配體時(shí)，鏈接基團(tuán)可以存在于軸向配體上(即X、Y或Z)。
本發(fā)明的大環(huán)可以在其與靶目標(biāo)生物分子綴合之前或以后(這要根據(jù)使用的特定的生物分子的不同而定)與錳或鐵配合。大環(huán)配合物和靶目標(biāo)生物分子的綴合物在本文中被定義為“生物綴合物”。
對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，藥物的靶目標(biāo)是已知的。請(qǐng)見(jiàn)J.A.Katzenellenbogen等人在《核醫(yī)學(xué)雜志》(Journal of NuclearMedicine),33卷，No.4,1992,558和J.A.Katzenellenbogen等人在《生物綴合物化學(xué)》(Bioconjugate Chemistry),1991,2,253上的文獻(xiàn)。靶目標(biāo)試劑一般是生物分子。本發(fā)明的生物分子是具有部位特異性的生物活性的分子，這就是說(shuō)已知在有興趣的特定器官或組織濃縮。生物分子經(jīng)過(guò)選擇，經(jīng)過(guò)受體結(jié)合、膜結(jié)合、膜溶解等引導(dǎo)生物綴合物在組織間分布。這些生物分子包括比如類固醇、碳水化合物(包括單糖、二糖和多糖)、脂肪酸、氨基酸、肽、蛋白質(zhì)、抗體(包括多克隆、單克隆及它們的碎片)、維生素、類脂、磷脂、磷酸酯、膦酸酯、核酸、酶底物、酶抑制劑和酶受體底物。生物分子也包括上述生物分子結(jié)合的生物分子，比如類固醇與碳水化合物的結(jié)合，如毛地黃皂苷。
可以用來(lái)瞄準(zhǔn)所需器官或組織靶目標(biāo)的特定生物分子在先有技術(shù)中是已知的，對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)也是顯而易見(jiàn)的。本發(fā)明生物分子是可從市場(chǎng)上購(gòu)得的，或者是使用通常的方法容易由本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員制備的。
目前優(yōu)選的是，在大環(huán)的氮原子之間的碳原子上連接的最大的“R”基團(tuán)具有通過(guò)鏈接基團(tuán)相連的生物分子。另外，優(yōu)選的化合物是具有1-5個(gè)，最優(yōu)選1-2個(gè)與生物分子相連的“R”基團(tuán)，而沒(méi)有與生物分子相連的X、Y和Z的化合物，或者是具有與生物分子相連的X、Y和Z中的一個(gè)，而沒(méi)有與生物分子相連的“R”基團(tuán)的化合物。
當(dāng)前，優(yōu)選的化合物是分子中除了與生物分子相連的“R”基團(tuán)外，至少1個(gè)，優(yōu)選至少2個(gè)“R”基團(tuán)表示烷基、環(huán)烷基烷基和芳基烷基基團(tuán)，其余的不與生物分子相連的“R”基團(tuán)表示氫、飽和、部分飽和或不飽和的環(huán)或者含氮的雜環(huán)。其它優(yōu)選化合物的基團(tuán)是R1或R’1和R2或R’2、R3或R’3和R4或R’4、R5或R’5和R6或R’6、R7或R’7和R8或R’8、R9或R’9和R或R’中的至少一個(gè)，優(yōu)選2個(gè)與和它們相連的碳原子一起表示具有3-20個(gè)碳原子的飽和的、部分飽和的或不飽和的環(huán)，而除了通過(guò)鏈接基團(tuán)與生物分子相連的“R”基團(tuán)以外，其它的“R”基團(tuán)表示氫、含氮的雜環(huán)或烷基的化合物，以及分子中R或R’和R1或R’1、R2或R’2和R3或R’3、R4或R’4和R5或R’5、R6或R’6和R7或R’7、R8或R’8和R9或R’9中的至少一個(gè)，優(yōu)選至少2個(gè)與和它們相連的碳原子一起形成具有2-20個(gè)碳原子的含氮雜環(huán)，而除了通過(guò)鏈接基團(tuán)與生物分子相連的“R”基團(tuán)以外，其它的“R”基團(tuán)獨(dú)立地選自氫、飽和的、部分飽和的或不飽和的環(huán)或者烷基。
正如在本文中使用的，“R”基團(tuán)表示與大環(huán)上的碳原子相連的全部R基團(tuán)，即R、R’、R1、R’1、R2、R’2、R3、R’3、R4、R’4、R5、R’5、R6、R’6、R7、R’7、R8、R’8、R9和R’9。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是呈單劑形用來(lái)歧化過(guò)氧化物的藥物組合物，它包括(a)有治療或預(yù)防有效量的如上所述的配合物，以及(b)無(wú)毒可藥用的載體、助劑或賦形劑。
一般可以接受的錳基SOD酶的作用機(jī)理涉及在兩種氧化態(tài)(Ⅱ、Ⅲ)之間的錳中心的環(huán)化。請(qǐng)見(jiàn)J.V.Bannister和G.Rotilio在《生物化學(xué)評(píng)論》(Crit.Rew.Biochem.),22,111-180(1987)上的文獻(xiàn)。
1)2)在pH=7時(shí)，O2/O2.-和HO2./H2O2的克式量氧化還原電位分別是--0.33v和0.87v。請(qǐng)見(jiàn)A.E.G.Cass在《金屬蛋白質(zhì)》(Metalloproteins)第一部分，具有氧化還原作用的金屬蛋白質(zhì)，編輯P.Harrison,P.121,Verlag Chemie(Weinheim,GDR)(1985)上的文獻(xiàn)。對(duì)于上面揭示的機(jī)理，這樣的電位要求被稱為SOD的催化劑在-0.33至0.87v的范圍內(nèi)能夠迅速地進(jìn)行氧化態(tài)的改變。使用環(huán)狀伏安法來(lái)表征本文敘述的源于Mn(Ⅱ)和一般種類的C-取代[15]N5配位體形成的配合物，以測(cè)量其氧化還原電位。在本文中敘述的錳基C取代配合物具有大約+0.7V的雙向氧化(SHE)。庫(kù)侖計(jì)表明，此氧化作用是單電子過(guò)程，即這是Mn(Ⅱ)配合物氧化成為Mn(Ⅲ)配合物。因此，對(duì)于這些起SOD催化劑作用的配合物，在催化周期中涉及Mn(Ⅲ)氧化態(tài)。這意味著，所有這些配位體的Mn(Ⅲ)配合物同樣是作為SOD催化劑的組分，因?yàn)楫?dāng)過(guò)氧化物存在時(shí)，由于過(guò)氧化物簡(jiǎn)單地將Mn(Ⅲ)還原為Mn(Ⅱ)而釋放出氧，所以以哪種形式[Mn(Ⅱ)還是Mn(Ⅲ)]存在都沒(méi)有關(guān)系。
本發(fā)明的鐵基配合物是特別有用的，因?yàn)榕c相應(yīng)的錳基配合物相比，鐵基配合物有意外強(qiáng)的穩(wěn)定性。在口服時(shí)，以及當(dāng)靶目標(biāo)組織的pH值很低時(shí)，比如在局部缺血的組織里，這種很強(qiáng)的穩(wěn)定性可能是很重要的。
正如在本文中使用的“烷基”一詞，無(wú)論單獨(dú)還是與其它詞一起使用，都意味著含有1至大約22個(gè)碳原子，優(yōu)選大約1至大約18個(gè)碳原子，最優(yōu)選大約1至大約12個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基，它們可以任選地帶有一個(gè)或幾個(gè)取代基，這些取代基選自(1)-NR30R31，其中R30和R31獨(dú)立地選自氫、烷基、芳基或芳基烷基；或者R30是氫、烷基、芳基或芳基烷基，而R31選自-NR32R33、-OH、-OR34、
其中R32和R33獨(dú)立地是氫、烷基、芳基或酰基，R34是烷基、芳基或烷基芳基，Z’是氫、烷基、芳基、烷基芳基、-OR34、-SR34或-NR40R41，這里R40和R41獨(dú)立地選自氫、烷基、芳基或烷基芳基，Z”是烷基、芳基、烷基芳基、-OR34、-SR34或-NR40R41,R35是烷基、芳基，-OR34或-NR40R41、R36是烷基、芳基或-NR40R41,R37是烷基、芳基或烷基芳基，X’是氧或硫，而R38和R39獨(dú)立地選自氫、烷基或芳基；(2)-SR42，其中R42是氫、烷基、芳基、烷基芳基、-SR34、-NR32R33、
其中R43是-OH、-OR34或-NR32R33，而A和B獨(dú)立地是-OR34、-SR34或-NR32R33；
(3)其中x是1或2，R44是鹵素、烷基、芳基、烷基芳基、-OH、-OR34、-SR34或-NR32R33；(4)-OR45，其中R45是氫、烷基、芳基、烷基芳基、-NR32R33、
其中D和E獨(dú)立地是-OR34或-NR32R33；
(5)其中R46是鹵素、-OH、-SH、-OR34、-SR34或-NR32R33；或者(6)如下式的胺氧化物
條件是R30和R31不是氫；或者
(7)其中F和G獨(dú)立地是-OH、-SH、-OR34、-SR34或-NR32R33；或者(8)-O-(-(CH2)a-O)b-R10，其中R10是氫或烷基，a和b是整數(shù)，獨(dú)立地選自1+6；或者(9)鹵素、氰基、硝基或疊氮基。上面定義的烷基的取代基上的烷基、芳基和烷基芳基可以含有一個(gè)附加的取代基，但是優(yōu)選是未被取代的。這樣的基團(tuán)的例子包括但不限于甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、己基、辛基、壬基、癸基、十二烷基、十四烷基、十六烷基、十八烷基和二十烷基。單獨(dú)或與其它詞聯(lián)合使用的“烯基”一詞意味著具有一個(gè)或幾個(gè)雙鍵的烴基。這樣的烯基的例子包括但不限于乙烯基、丙烯基、1-丁烯基、2-順式丁烯基、2-反式丁烯基、異丁烯基、2-順式戊烯基、2-反式戊烯基、3-甲基-1-丁烯基、2,3-二甲基-2-丁烯基、1-戊烯基、1-己烯基、1-辛烯基、癸烯基、十二烯基、十四烯基、十六烯基、順式和反式9-十八烯基、1,3-戊二烯基、2,4-戊二烯基、2,3-戊二烯基、1,3-己二烯基、2,4-己二烯基、5,8,11,14-二十碳四烯基和9,12,15-十八碳三烯基。單獨(dú)或與其它詞聯(lián)合使用的“炔基”一詞意味著具有一個(gè)或幾個(gè)叁鍵的烴基。這樣的炔基的例子包括但不限于乙炔基、丙炔基、(炔丙基)、1-丁炔基、1-辛炔基、9-十八炔基、1,3-戊二炔基、2,4-戊二炔基、1,3-己二炔基、2,4-己二炔基。單獨(dú)或與其它詞聯(lián)合使用的“環(huán)烷基”一詞意味著含有3-大約10個(gè)碳原子、優(yōu)選含有3-大約8個(gè)碳原子、最優(yōu)選含有3-大約6個(gè)碳原子的環(huán)烷基。這樣的環(huán)烷基的例子包括但不限于環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基和全氫萘基?！碍h(huán)烷基烷基”一詞意味著被如上所定義的環(huán)烷基取代的如上所定義的烷基。環(huán)烷基烷基的例子包括但不限于環(huán)己基甲基、環(huán)戊基甲基、(4-異丙基己基)甲基、(4-叔丁基環(huán)己基)甲基、3-環(huán)己基丙基、2-環(huán)己基甲基戊基、3-環(huán)戊基甲基己基、1-(4-新戊基環(huán)己基)甲基己基和1-(4-異丙基環(huán)己基)甲基庚基?！碍h(huán)烷基環(huán)烷基”一詞意味著被另一種如上所定義的環(huán)烷基取代的如上所定義的環(huán)烷基。環(huán)烷基環(huán)烷基的例子包括但不限于環(huán)己基環(huán)戊基和環(huán)己基環(huán)己基。單獨(dú)或與其它詞聯(lián)合使用的“環(huán)烯基”一詞意味著具有一個(gè)或幾個(gè)雙鍵的環(huán)烴基。環(huán)烯基的例子包括但不限于環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基、環(huán)辛烯基、環(huán)戊二烯基、環(huán)己二烯基和環(huán)辛二烯基?！碍h(huán)烯基烷基”意味著被如上所定義的環(huán)烯基取代的烷基。環(huán)烯基烷基的例子包括但不限于2-環(huán)己烯-1-基甲基、1-環(huán)戊烯-1-基甲基、2-(1-環(huán)己烯-1-基)乙基、3-(1-環(huán)戊烯-1-基)丙基、1-(1-環(huán)己烯-1-基甲基)戊基、1-(1-環(huán)戊烯-1-基)己基、6-(1-環(huán)己烯-1-基)己基、1-(1-環(huán)戊烯-1-基)壬基和1-(1-環(huán)己烯-1-基)壬基?！巴榛h(huán)烷基”和“烯基環(huán)烷基”意味著被如上所定義的烷基或烯基取代的如上所定義的環(huán)烷基。烷基環(huán)烷基和烯基環(huán)烷基的例子包括但不限于2-乙基環(huán)丁基、1-甲基環(huán)戊基、1-己基環(huán)戊基、1-甲基環(huán)己基、1-(9-十八烷基)環(huán)戊基和1-(9-十八烷基)環(huán)己基，術(shù)語(yǔ)“烷基環(huán)烯基”和“烯基環(huán)烯基”是指被如上所述的烷基或烯基取代的如上所定義的環(huán)烯基，烷基環(huán)烯基和烯基環(huán)烯基的實(shí)例包括1-甲基-2-環(huán)戊烯基、1-己基-2-環(huán)戊烯基、1-乙基-2-環(huán)己烯基、1-丁基-2-環(huán)己烯基、1-(9-十八烯基)-2-環(huán)己烯基和1-(2-戊烯基)-2-環(huán)己烯基。單獨(dú)或與其它詞聯(lián)合使用的“芳基”一詞意味著任選地帶有一個(gè)或幾個(gè)取代基的苯基或萘基，該取代基選自烷基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、芳基、雜環(huán)基、烷氧基芳基、烷基芳基、烷氧基、鹵素、羥基、胺、氰基、硝基、烷硫基、苯氧基、醚基、三氟甲基等，比如苯基、對(duì)甲苯基、4-甲氧基苯基、4-(叔丁氧基)苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-羥基苯基、1-萘基、2-萘基等。單獨(dú)或與其它詞聯(lián)合使用的“芳基烷基”一詞意味著分子中一個(gè)氫原子被如上所定義的芳基取代的如上所定義的烷基或環(huán)烷基，比如芐基、2-苯基乙基等。“雜環(huán)”一詞意味著在環(huán)中含有至少一個(gè)碳原子以外的其它原子的環(huán)狀結(jié)構(gòu)。最普通的其它類別的原子包括氮、氧和硫。雜環(huán)的例子包括但不限于吡咯烷基、哌啶基、咪唑烷基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、喹啉基、異喹啉基、噠嗪基、吡嗪基、吲哚基、咪唑基、(噁)唑基、噻唑基、吡唑基、pyridinyl、苯并(噁)二唑基、苯并噻二唑基、三唑基和四唑基等?！帮柡偷?、部分飽和的或不飽和的環(huán)”意味著分子中環(huán)的2個(gè)碳原子也是15元大環(huán)配位體的一部分的稠環(huán)結(jié)構(gòu)。該環(huán)狀結(jié)構(gòu)可以含有3-20個(gè)碳原子，優(yōu)選含有5-10個(gè)碳原子，也可以含有一個(gè)或幾個(gè)碳原子以外的其它種類的原子。最普通的其它種類的原子包括氮、氧和硫。該環(huán)狀結(jié)構(gòu)也可以含有多于一個(gè)的環(huán)。飽和的、部分飽和的或不飽和的環(huán)狀結(jié)構(gòu)”意味著其中環(huán)的一個(gè)碳原子也是15元大環(huán)配位體的一部分的環(huán)狀結(jié)構(gòu)。該環(huán)狀結(jié)構(gòu)可以含有3-20個(gè)，優(yōu)選含有5-10個(gè)碳原子，也可以含有氮、氧和/或硫原子?！昂s環(huán)”一詞意味著其中環(huán)的2個(gè)碳原子和氮原子也是15元大環(huán)配位體一部分的環(huán)狀結(jié)構(gòu)。該環(huán)狀結(jié)構(gòu)可以含有2-20個(gè)，優(yōu)選含有4-10個(gè)碳原子，可以是部分或全部不飽和的或飽和的，在也是15元大環(huán)配位體一部分的部分環(huán)中，也可以含有氮、氧和/或硫原子?！坝袡C(jī)酸陰離子”一詞指的是具有大約1-大約18個(gè)碳原子的羧酸陰離子?！胞u素”一詞意味著氯或溴。
在本發(fā)明配合物中使用的大環(huán)配位體可以按照在下面給出的示意式A中所顯示的一般操作程序來(lái)制備。比如將天然或非天然存在的α-氨基酸的相應(yīng)酰胺衍生物的氨基酸酰胺還原，形成相應(yīng)的取代乙二胺。這樣的氨基酸酰胺可以是許多已知的氨基酸中任何一種的酰胺衍生物。優(yōu)選的氨基酸酰胺是如下式表示的化合物
其中，R來(lái)源于D型或L型的氨基酸，即丙氨酸、天門(mén)冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、絲氨酸、色氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、纈氨酸和/或來(lái)源于非天然氨基酸的R基，比如烷基、乙基、丁基、叔丁基、環(huán)烷基、苯基、烯基、烯丙基、炔基、芳基、雜芳基、多環(huán)烷基、多環(huán)芳基、多環(huán)雜芳基、亞胺、氨基烷基、羥基烷基、羥基、酚、胺氧化物、硫烷基、羰烷氧烷基、羧酸及其衍生物、酮、醚、醛、胺、腈、鹵素、硫醇、亞砜、砜、磺酸、硫化物、二硫化物、膦酸、次膦酸、膦氧化物、磺酰胺、酰胺、氨基酸、肽、蛋白質(zhì)、碳水化合物、核酸、脂肪酸、類脂、硝基、羥基胺、羥肟酸、硫代羰基、硼酸鹽、硼烷、硼氮雜、甲硅基、硅氧基、硅氮雜和它們的結(jié)合。最優(yōu)選的是其中R是氫、烷基、環(huán)烷基烷基和芳基烷基的化合物。然后，將二胺進(jìn)行甲苯磺?；?，得到二N-甲苯磺?；难苌?，讓它與二-O-甲苯磺?；娜?N-甲苯磺?；娜s烷二醇反應(yīng)，得到相應(yīng)的取代-N-五甲苯磺?；宓s環(huán)烷。然后除去甲苯磺酰基，將得到的化合物在本質(zhì)上無(wú)水和厭氧條件下與錳(Ⅱ)或鐵(Ⅲ)化合物反應(yīng)，形成相應(yīng)的取代錳(Ⅱ)或鐵(Ⅲ)五氮雜環(huán)烷配合物。當(dāng)配位體或電中性的陰離子，即X、Y和Z是陰離子或不能直接從錳或鐵化合物引進(jìn)的配位體時(shí)，通過(guò)帶有錳或鐵化合物的大環(huán)反應(yīng)得到的配合物進(jìn)行交換反應(yīng)，可以形成帶有這些陰離子或配位體的配合物。
本發(fā)明的分子中R9和R2是烷基，而R3、R’3、R4、R’4、R5、R’5、R6、R’6、R7、R’7、R8、R’8可以是烷基、芳基烷基或環(huán)烷基烷基，以及R或R’和R1或R’1與和它們相連的碳原子結(jié)合形成含氮雜環(huán)的配合物也可以按照在下面給出的示意式B顯示的一般程序，使用先有技術(shù)中用來(lái)制備錳(Ⅱ)或鐵(Ⅲ)五氮雜雙環(huán)[12.3.1.]十八碳五烯配合物前體的已知方法來(lái)制備。請(qǐng)見(jiàn)比如Alexander等人在《無(wú)機(jī)核化學(xué)通信》(Inorg.Nucl.Chem.Lett.),6,445(1970)中的敘述。比如，在錳(Ⅱ)或鐵(Ⅲ)化合物存在下，讓2,6-二酮基吡啶和三亞乙基四胺縮合，得到錳(Ⅱ)或鐵(Ⅲ)五氮雜雙環(huán)[12.3.1.]十八碳五烯配合物。此錳(Ⅱ)或鐵(Ⅲ)五氮雜雙環(huán)[12.3.1.]十八碳五烯配合物在10-1000psi的壓力下用氧化鉑加氫，得到錳(Ⅱ)或鐵(Ⅲ)五氮雜雙環(huán)[12.3.1.]十八碳三烯配合物。
在本發(fā)明的配合物中使用的大環(huán)配位體也可以通過(guò)如下所示的示意式C中的二酰氯路線來(lái)制備。因此，在適當(dāng)?shù)娜軇┫到y(tǒng)中，將三氮雜烷甲苯磺?；玫较鄳?yīng)的三(N-甲苯磺?；?衍生物。用適當(dāng)?shù)膲A處理這樣的衍生物，得到相應(yīng)的二磺酰胺陰離子。用適當(dāng)?shù)挠H電子試劑將該二磺酰胺陰離子二烷基化，得到二羧酸衍生物。處理此二羧酸衍生物得到二羧酸，然后用適當(dāng)?shù)脑噭┨幚硇纬啥Ｂ?。使用幾種方法中的任何一種得到所需的連二胺?？梢允褂玫囊环N方法是在氯化銨存在下，通過(guò)由醛類與氰化物反應(yīng)來(lái)制備，然后用酸處理，得到**銨，在酸存在下，還原后面的化合物，然后用適當(dāng)?shù)膲A處理，得到連二胺。在適當(dāng)?shù)膲A存在下，二酰氯與連二胺縮合形成三(甲苯磺酰基)二胺大環(huán)。除去甲苯磺酰基，還原酰胺，并在本質(zhì)上無(wú)水和厭氧條件下用錳(Ⅱ)或鐵(Ⅲ)化合物與得到的化合物反應(yīng)，形成相應(yīng)的取代五氮雜環(huán)烷錳(Ⅱ)或鐵(Ⅲ)配合物。
通過(guò)所示的路線(稱作Strecker合成)制得了連二胺，當(dāng)該連二胺有商品時(shí)，可以購(gòu)買?？梢允褂萌魏畏椒ㄖ苽溥B二胺。
在本發(fā)明的配合物中使用的大環(huán)配位體也可以通過(guò)如下所示的示意式D中的吡啶二酰胺路線來(lái)制備。比如，通過(guò)在適當(dāng)?shù)娜軇┤缂状贾屑訜?，使用如四氮雜化合物的含有兩個(gè)伯胺的多胺與2,6-吡啶二羧酸二甲酯縮合，得到并入了吡啶環(huán)作為2,6-二羧酸酰胺的大環(huán)。將大環(huán)中的吡啶環(huán)還原為大環(huán)中的相應(yīng)哌啶環(huán)，然后還原二胺，在本質(zhì)上無(wú)水和厭氧條件下，所得化合物與錳(Ⅱ)或鐵(Ⅲ)化合物反應(yīng)，形成相應(yīng)的取代五氮雜環(huán)烷錳(Ⅱ)或鐵(Ⅲ)配合物。
在本發(fā)明的配合物中使用的大環(huán)配位體也可以通過(guò)如下所示的示意式E中的二(鹵乙酰胺)路線來(lái)制備。比如，在適當(dāng)?shù)娜軇┫到y(tǒng)中，將三氮雜烷甲苯磺?；?，得到相應(yīng)的三(N-甲苯磺?；?衍生物。用適當(dāng)?shù)膲A處理這樣的衍生物，得到相應(yīng)的二磺酰胺陰離子。在堿存在下，通過(guò)二胺與過(guò)量的鹵乙酰鹵如氯乙酰氯反應(yīng)制備連二胺的二(鹵乙酰胺)，如二(氯乙酰胺)。然后用二胺的二(氯乙酰胺)與三(N-甲苯磺?；?三氮雜烷的二磺酰胺陰離子反應(yīng)，得到取代三(N-甲苯磺?；?二胺大環(huán)。除去甲苯磺酰基，還原此酰胺，再在本質(zhì)上無(wú)水和厭氧條件下，將得到的化合物與錳(Ⅱ)或鐵(Ⅲ)化合物反應(yīng)，得到相應(yīng)的取代五氮雜環(huán)烷錳(Ⅱ)或鐵(Ⅲ)配合物。
在本發(fā)明的配合物中使用的分子中R1、R’1、R2、R’2來(lái)源于二氨基起始原料，而R5、R’5、R7、R’7和R9、R’9可以是氫或任何前面敘述過(guò)的官能基的大環(huán)配位體也可以通過(guò)如下所示的示意式F中的假肽路線來(lái)制備。由下式
表示的取代1,2-二氨基乙烷中R1、R’1、R2、R’2是在如上面所示的產(chǎn)物大環(huán)配位體中相鄰的碳原子上的取代基，可以在此方法中將此化合物與任何的氨基酸一起使用?？梢杂萌魏伪拘袠I(yè)的專業(yè)人員所公知的傳統(tǒng)方法得到此二胺。在大環(huán)中來(lái)源于α-氨基酸的α-碳上的取代基的R基(即R5、R5’、R7、R7’、R9和R9’)可以源于D或L型的氨基酸，比如即丙氨酸、天門(mén)冬氨酸、精氨酸、天門(mén)冬酰胺、半胱氨酸、甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、絲氨酸、色氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、纈氨酸和/或來(lái)源于非天然α-氨基酸的R基，比如烷基、乙基、丁基、叔丁基、環(huán)烷基、苯基、烯基、烯丙基、炔基、芳基、雜芳基、多環(huán)烷基、多環(huán)芳基、多環(huán)雜芳基、亞胺、氨基烷基、羥基烷基、羥基、酚、胺氧化物、硫烷基、羰烷氧烷基、羧酸及其衍生物、酮、醚、醛、胺、腈、鹵素、硫醇、亞砜、砜、磺酸、硫化物、二硫化物、膦酸、次膦酸、膦氧化物、磺酰胺、酰胺、氨基酸、肽、蛋白質(zhì)、碳水化合物、核酸、脂肪酸、類脂、硝基、羥基胺、羥肟酸、硫代羰基、硼酸鹽、硼烷、硼氮雜、甲硅基、硅氧基、硅氮雜和它們的結(jié)合。作為例子，1,8-二羥基-4,5-二氨基辛烷被單甲苯磺酰化，并和叔丁氧羰基酸酐反應(yīng)，而能夠得到差別化的N-叔丁氧羰基、N-甲苯磺?；苌铩Ｊ褂脷浠c作為堿，用溴乙酸甲酯將磺酰胺烷基化，及皂化成為游離酸。使用含有二胺的N-甲苯磺?；拾彼嵩跇?biāo)準(zhǔn)的溶液相合成中作為二肽代用品。這樣，用官能化的氨基酸偶合可以得到相應(yīng)的假三肽。隨后進(jìn)行兩次TFA裂解-偶合以得到假五肽，，可以使用HCl/AcOH在一步中進(jìn)行N-和C-端基解保護(hù)。使用DPPA作為介質(zhì)的環(huán)化反應(yīng)，隨后用LiAlH4或硼烷還原得到相應(yīng)的大環(huán)配位體。在本質(zhì)上厭氧的條件下，將這個(gè)配位體系統(tǒng)與錳(Ⅱ)或鐵(Ⅲ)化合物如氯化錳(Ⅱ)或氯化鐵(Ⅲ)反應(yīng)，形成相應(yīng)的官能化錳(Ⅱ)或(Ⅲ)五氮雜環(huán)烷配合物。當(dāng)配位體或電中性的陰離子，即X、Y和Z是陰離子或不能直接從錳或鐵化合物引進(jìn)的配位體時(shí)，通過(guò)與通過(guò)大環(huán)和錳或鐵化合物反應(yīng)而制備的配合物進(jìn)行交換反應(yīng)可以形成具有這些陰離子或配位體的配合物。
在本發(fā)明的配合物中使用的大環(huán)配位體中R1、R’1、R3、R’3、R5、R’5、R7、R’7、R9和R’9可以是氫或者任何如前面所述的官能基，它們可以按照如下面所示的示意式G的一般肽方法制備。由α-氨基酸的α-碳上的取代基得到的大環(huán)中的R基，即R1、R’1、R3、R’3、R5、R’5、R7、R’7、R9和R’9如上面的式F中所定義。從相應(yīng)的線形肽制備環(huán)狀肽前體的過(guò)程與先有技術(shù)中已知的方法相同或者有較大的改變。請(qǐng)見(jiàn)比如Veber D.F.等人在《有機(jī)化學(xué)雜志》(J.Org.Chem.),44，3101(1979)中的敘述。在下面示意式G中所概述的一般性方法是使用相繼溶液相制備法由N-端基保護(hù)的官能化線形五肽制備C-端基保護(hù)的化合物的一個(gè)例子。另外，使用先有技術(shù)中已知的方法，可以通過(guò)固相制備進(jìn)行制備線形五肽的過(guò)程。該過(guò)程可以從C-端基保護(hù)到N-端基保護(hù)，并通過(guò)收斂的方法，比如根據(jù)需要進(jìn)行二肽和三肽偶合來(lái)進(jìn)行。比如使用標(biāo)準(zhǔn)的肽偶合劑，使叔丁氧羰基保護(hù)的氨基酸與氨基酸酯偶合。然后將新的叔丁氧羰基-二肽酯皂化成為游離酸，再將該游離酸偶合成為另一種氨基酸酯。將得到的叔丁氧羰基-三氨基酸酯再進(jìn)行皂化，將此方法繼續(xù)進(jìn)行，直至制備出叔丁氧羰基保護(hù)的五肽游離酸。在標(biāo)準(zhǔn)條件下除去叔丁氧羰基保護(hù)基，將得到的五肽或其鹽轉(zhuǎn)化為環(huán)狀五肽。然后將此環(huán)狀五肽用氫化鋰鋁或硼烷還原為五氮雜環(huán)十五烷。然后在本質(zhì)上厭氧的條件下，將最終的配位體與錳(Ⅱ)或鐵(Ⅲ)化合物反應(yīng)，形成相應(yīng)的錳(Ⅱ)或鐵(Ⅲ)五氮雜環(huán)十五烷配合物。當(dāng)配位體或電中性的陰離子，即X、Y和Z是陰離子或不能直接從錳或鐵化合物引進(jìn)的配位體時(shí)，通過(guò)與由大環(huán)和錳或鐵化合物反應(yīng)得到的配合物進(jìn)行交換反應(yīng)，可以形成與這些陰離子或配位體的配合物。
描述了如下的示意式用于制備本發(fā)明的錳配合物，可以用鐵化合物代替錳化合物來(lái)制備本發(fā)明的鐵配合物。
示意式A
示意式B
示意式C
示意式D
示意式E
示意式F
示意式F(續(xù))
示意式G
示意式G(續(xù))
本發(fā)明的五氮雜大環(huán)可以具有一個(gè)或幾個(gè)不對(duì)稱碳，因此可以光學(xué)異構(gòu)體的形式存在，以及其外消旋或非外消旋混合物的形式存在?？梢园凑粘Ｒ?guī)方法，比如通過(guò)用光學(xué)活性的酸進(jìn)行處理，形成非對(duì)映立構(gòu)鹽，進(jìn)行外消旋混合物的解析，從而得到光學(xué)異構(gòu)體。適當(dāng)?shù)乃岬睦邮蔷剖帷⒍阴＞剖?、二芐基酒石酸、二甲苯基酒石酸和樟腦磺酸。然后通過(guò)結(jié)晶從鹽中釋放出其光學(xué)活性堿，就分離了非對(duì)映立構(gòu)體混合物。分離光學(xué)異構(gòu)體的不同方法包括使用優(yōu)化選擇到使具有最大對(duì)映體分離效果的手性色譜柱。另一個(gè)適用的方法包括，通過(guò)本發(fā)明化合物的一個(gè)或幾個(gè)仲胺基團(tuán)與呈活化形式的光學(xué)純的酸，或者光學(xué)純的異氰酸酯反應(yīng)，合成共價(jià)的非對(duì)映立構(gòu)體?？梢杂贸Ｒ?guī)方法，如色譜、蒸餾、結(jié)晶或升華來(lái)分離合成的非對(duì)映立構(gòu)體，然后水解給出對(duì)映體純的配位體。本發(fā)明的光學(xué)活性化合物類似地可以使用光學(xué)純的原料如天然氨基酸來(lái)得到。
本發(fā)明的化合物或配合物是新穎的，可以用于治療許多炎癥的疾病或失調(diào)。比如，對(duì)于缺血器官的再灌注損傷，如對(duì)于缺血的心肌再灌注損傷、外科手術(shù)誘發(fā)的缺血、炎性腸疾病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、器官移植排斥、輻射誘發(fā)損害、氧化劑誘發(fā)組織損傷和損害、動(dòng)脈粥樣硬化、血栓形成、血小板凝聚、中風(fēng)、急性胰腺炎、胰島素依賴型糖尿病尿糖癥、散播性血管內(nèi)凝血、脂肪栓塞、成人及嬰兒呼吸系統(tǒng)疾病、轉(zhuǎn)移瘤和癌發(fā)生。
使用如在Riley,D.P.、Rivers,W.J.和Weiss,R.H.等人在《監(jiān)測(cè)水溶液系統(tǒng)中的過(guò)氧化物衰變用的停留法動(dòng)力學(xué)分析》載《分析生物化學(xué)》(Anal.Biochem.),196,344-349(1991)中敘述的停留法分析技術(shù)，顯示出本發(fā)明的化合物或配合物在催化過(guò)氧化物歧化方面的活性，此文獻(xiàn)在此引作參考。停留法動(dòng)力學(xué)分析是一種定量監(jiān)測(cè)水中過(guò)氧化物衰減速率的精確和直接的方法。停留法動(dòng)力學(xué)分析適合于篩選化合物，因?yàn)檎缤Ａ舴ǚ治鏊砻鞯模景l(fā)明化合物或配合物的SOD活性和催化活性與治療上述的癥狀和疾病是相關(guān)的。
對(duì)于宿主服用的總?cè)談┝浚詥蝿┗蚍謩┝坑?jì)，是每天大約1-大約100mg/kg體重，更一般地是大約3-30mg/kg。單位劑量的組合物可以含有這樣數(shù)量的若干分之一，以達(dá)到每天的劑量。
可以與載體物質(zhì)合并以形成單劑形的活性成分的量依被治療的宿主和特定服用的方式而變化。
用本發(fā)明的化合物和/或組合物治療疾病的服藥方案要根據(jù)許多因素來(lái)選擇，這包括病人的類型、年齡、體重、性別、飲食習(xí)慣和醫(yī)療條件、疾病的嚴(yán)重程度、服藥途徑、藥理學(xué)方面的考慮，比如具體使用的化合物的活性、藥效、藥物動(dòng)力學(xué)和毒理學(xué)特性，以及是否使用藥物投送系統(tǒng)，該化合物的服用是否是組合服用藥物的一部分。因此，實(shí)際上可以使用的服藥方案在很寬的范圍內(nèi)變化，因此可以不同于上述的優(yōu)選服藥方案。
本發(fā)明的化合物可以經(jīng)口、腸道外、吸入噴霧、經(jīng)直腸或局部給藥，以根據(jù)需要所含有常規(guī)無(wú)毒可藥用載體、助劑和賦形劑的單劑形配方的方式服用。局部給藥也可以涉及使用穿透皮膚給藥的方法，比如皮膚穿透片或離子滲透設(shè)施。在本文中使用的腸道外一詞包括皮下注射、靜脈注射、肌肉注射、胸骨內(nèi)注射或灌注技術(shù)。
使用適當(dāng)?shù)姆稚┗驖?rùn)濕劑和懸浮劑，按照先有技術(shù)配方成為可注射的制劑，比如滅菌可注射水溶液或油性懸浮劑。該滅菌可注射制劑也可以是在可腸道外使用的無(wú)毒稀釋劑或溶劑中的滅菌可注射溶液或懸浮液，比如在1,3-丁二醇中的溶液。在可接受的賦形劑和溶劑中，可以使用的是水、林格注射液和等滲氯化鈉溶液。此外，滅菌、不揮發(fā)油一般被用作溶劑或懸浮介質(zhì)。出于這個(gè)目的，可以使用任何牌號(hào)的不揮發(fā)油，包括合成的單甘油酯或二甘油酯。此外，在制備可注射制劑時(shí)可以使用脂肪酸比如油酸。
將藥物與無(wú)刺激性的、在常溫下是固體、而在直腸溫度下是液體、因而在直腸中將要融化并釋放出藥物的賦形劑如可可脂和聚乙二醇等混合可以制備該藥物的直腸給藥的錠劑。
用于口服的固體劑形可以包括膠囊、片劑、丸劑、粉劑、顆粒劑和凝膠。在這些固體劑形中，活性化合物可以與至少一種惰性稀釋劑如蔗糖、乳糖或淀粉混合。正如在正常的實(shí)踐中，這樣的劑形也可以包括含有惰性稀釋劑以外的附加的物質(zhì)，比如潤(rùn)滑劑，如硬脂酸鎂。在膠囊、片劑和丸劑的情況下，該劑型也可以含有緩沖劑。片劑和丸劑另外可以用腸溶糖衣制備。
用于口服的液體劑形可以包括可藥用的乳液、溶液、懸浮液、糖漿和含有在一般先有技術(shù)中使用的惰性稀釋劑如水的醑劑。這樣的組合物還可以含有助劑，如潤(rùn)濕劑、乳化劑和懸浮劑，以及甜味劑、調(diào)味劑和香精。
當(dāng)本發(fā)明的化合物可以作為單獨(dú)的活性藥劑服用時(shí)，它們也可以與已知是對(duì)于特定的作為治療目標(biāo)的疾病有效的一種或幾種化合物一起使用。
本發(fā)明的化合物或配合物也可以用作MRI對(duì)照劑。在專利申請(qǐng)系列號(hào)08/397,469中可見(jiàn)MRI中使用對(duì)照劑的討論，該專利在此引作參考。
對(duì)于此化合物和衍生物、以及中間體的上述的通式的預(yù)期的等價(jià)物是其它的相當(dāng)化合物和具有相同通性的化合物，比如該化合物的互變異構(gòu)體以及在分子中的一個(gè)或幾個(gè)不同的R基是如本文中所定義的取代基的簡(jiǎn)單變化的化合物，比如分子中的R是比所指出的更高級(jí)的烷基，或者分子中的甲苯磺?；瞧渌牡蜓醣Ｗo(hù)基，或者分子中的O-甲苯磺?；躯u化物?？梢允褂镁哂须姾刹皇?的陰離子，比如碳酸根、磷酸根和碳酸氫根來(lái)代替電荷是1的陰離子，只要它們不對(duì)該配合物的總活性有不利的影響即可。然而，具有電荷不是1的陰離子會(huì)導(dǎo)致上述的配合物的通式有稍微的改變。此外，當(dāng)取代基被設(shè)計(jì)為，或者可能是氫的時(shí)候，在該位置上的不是氫的取代基，比如烴基、或者鹵素、羥基、氨基等嚴(yán)格的化學(xué)性質(zhì)并不重要，只要它不對(duì)總活性和/或合成程序有相反的影響即可。再有，預(yù)期錳(Ⅲ)和鐵(Ⅱ)配合物將和主題的錳(Ⅱ)或鐵(Ⅲ)配合物是等價(jià)物。
上述的化學(xué)反應(yīng)一般性地在其制備本發(fā)明的化合物方面的最廣闊的應(yīng)用上予以公開(kāi)。偶然這些反應(yīng)也可能不是對(duì)于在所公開(kāi)的范圍內(nèi)的所包括的每一種化合物都能適用。本領(lǐng)域的技術(shù)人員將很容易識(shí)別具有這種情況的化合物。在所有這些情況下，使用對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方便的改進(jìn)也能夠成功地進(jìn)行反應(yīng)，比如通過(guò)適當(dāng)?shù)乇Ｗo(hù)干擾基團(tuán)、通過(guò)就使用另一種方便的試劑、通過(guò)常規(guī)地改變反應(yīng)條件，就可以成功地實(shí)施這些反應(yīng)，或者是在本文中公開(kāi)的其它反應(yīng)或另外的方便的反應(yīng)也將可以應(yīng)用于制備本發(fā)明的相應(yīng)的化合物。在所有的制備方法中，所有的原料都是已知的，或者容易從已知的原料得到的。
不用進(jìn)一步地描述，相信本領(lǐng)域的專業(yè)人員按照前面的說(shuō)明就能夠最充分地使用本發(fā)明。因此，下面的特定的優(yōu)選實(shí)施方案主要是用于說(shuō)明。而不是以任何其它的方式限制所公開(kāi)的其余內(nèi)容。
實(shí)施例除非另有說(shuō)明，所有的反應(yīng)劑使用時(shí)不用進(jìn)行提純。所有的核磁共振波譜都是在Varian VXR-300或VXR-400核磁共振光譜儀上得到的。使用間硝基芐醇(NBA)、間硝基芐醇/LiCl(NBA-Li)在FiniganMAT90、Finigan 4500和VG40-250T上進(jìn)行定量和定性的質(zhì)譜分析。熔點(diǎn)(mp)是未校正的。
下面的有關(guān)氨基酸及其衍生物的縮寫(xiě)按照IUPAC-IUB委員會(huì)關(guān)于生物化學(xué)命名法[見(jiàn)《生物化學(xué)》(Biochemistry),1972,11,1726]的推薦和普通的用法。
Ala L-丙氨酸DAla D-丙氨酸Gly 甘氨酸Ser L-絲氨酸DSer D-絲氨酸Bzl 芐基Boc 叔丁氧羰基Et 乙基TFA 三氟乙酸DMF 二甲基甲酰胺HOBT·H2O 1-羥基-(1H)-苯并三唑一水合物EDC·HCl 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽TEA 三乙胺DMSO 二甲基亞砜THF 氫呋喃DPPA 二苯基磷酰疊氮化物*縮寫(xiě)Cyc表示1,2-環(huán)己二胺(在此要指出其立體化學(xué)，即R,R或S,S)。這樣就許可在含有1,2-環(huán)己二胺“殘基”的假肽中使用三字母肽命名法。
實(shí)施例1A．合成N-(對(duì)甲苯磺?；?-(R,R)-1,2-二氨基環(huán)己烷在-10℃和攪拌下，在7小時(shí)的時(shí)間內(nèi)，向攪拌看的(R,R)-1,2-二氨基環(huán)己烷(300g,2.63mol)在二氯甲烷(5.00L)中的溶液里滴加對(duì)甲苯磺酰氯(209g,1.10mol)在二氯甲烷(5.00L)中的溶液，保持溫度在-5～-10℃。讓該混合物溫?zé)嶂潦覝?，同時(shí)攪拌過(guò)夜。在真空下將混合物濃縮到3L的體積，過(guò)濾分離白色的固體。然后用水(10×1L)洗滌該溶液，再用硫酸鎂干燥。在真空下除去溶劑，得到286g黃色結(jié)晶固體狀產(chǎn)物，產(chǎn)率97.5％:1H核磁共振(CDCl3)δ0.98-1.27(m,4H),1.54-1.66(m,2H),1.81-1.93(m,2H),2.34(dt,J=4.0,10.7Hz,1H),2.42(s,3H),2.62(dt,J=4.2,9.9Hz,1H),7.29(d,J=8.1Hz,2H),7.77(d,J=8.3Hz,2H)；質(zhì)譜(LRFAB-DTT-DTE)m/z 269[M+H]+。
B．合成N-(對(duì)甲苯磺?；?-N’-(Boc)-(R,R)-1,2-二氨基環(huán)己烷在攪拌下向如實(shí)施例1A所制備的N-(對(duì)甲苯磺?；?-(R,R)-1,2-二氨基環(huán)己烷(256g,0.955mol)在四氫呋喃(1.15L)中的溶液里加入1N的氫氧化鈉水溶液(1.15L,1.15mol)。然后加入二碳酸二叔丁基酯(229g,1.05mol)，并將得到的混合物攪拌過(guò)夜。分離兩層，用1N的鹽酸將水層的pH值調(diào)節(jié)到2，用NaCl飽和。然后用二氯甲烷(2×500mL)萃取水溶液，用硫酸鎂干燥。在真空下除去溶劑得到黃色固體。用四氫呋喃-乙醚-己烷的混合物進(jìn)行結(jié)晶提純粗產(chǎn)物，得到310g白色結(jié)晶固體的產(chǎn)物，產(chǎn)率88.15％,mp:137-139℃；1H核磁共振(CDCl3)δ1.04-1.28(m,4H),1.44(s,9H),1.61-1.69(m,2H),1.94-2.01(m,2H),2.43(s,3H),2.86(brs,1H),3.30(br,d,J=9.6Hz,1H),4.37(br d,J=6.7Hz,1H),5.48(br d,J=4.6Hz,1H),7.27(d,J=9.7Hz,2H),7.73(d,J=8.1Hz,2H)；質(zhì)譜(LRFAB,NBA-Li)m/z 375[M+Li]+。
C．合成Boc-(R,R)-Cyc(Ts)-Gly-OMe在0℃和攪拌下向在實(shí)施例1B中制備的N-(對(duì)甲苯磺?；?-N’-(Boc)-(R,R)-1,2-二氨基環(huán)己烷(310g,0.841mol)在無(wú)水DMF(3.11L)的溶液里分幾批加入氫化鈉(37.4g的60％油懸浮液，0.934mol)，將得到的混合物攪拌30分鐘。然后在45分鐘內(nèi)滴加溴乙酸甲酯(142g,0.925mol)，讓混合物溫?zé)嶂潦覝兀瑫r(shí)攪拌過(guò)夜。在攪拌17小時(shí)以后，在真空下除去溶劑，將殘?jiān)芙庥谝宜嵋阴?3L)和水(1L)中。用飽和的碳酸氫鈉(1L)、飽和的氯化鈉(500mL)洗滌乙酸乙酯溶液，再用硫酸鎂干燥。在真空下除去溶劑，將得到的黃色油狀物溶解于乙醚中。加入己烷進(jìn)行結(jié)晶，得到364g無(wú)色針狀物的產(chǎn)物，產(chǎn)率985％。薄層色譜(98∶2氯仿-甲醇/硅膠/紫外檢出)表明，該產(chǎn)物中含有大約5％的原料。純?cè)嚇拥膍p為151-152℃。1H核磁共振(CDCl3)δ1.11-1.22(m,4H),1.45(s,9H),1.64-1.70(m,3H),2.16-2.19(m,1H),2.43(s,3H),3.34-3.40(m,2H),3.68(s,3H),4.06(Abq,J=18.5Hz,Δν=155Hz,2H),4.77(br s,1H),7.30(d,J=8.3Hz,2H),7.82(d,J=8.3Hz,2H)；質(zhì)譜(LRFAB,DTT-DTE)m/z 441[M+H]+。
D．合成Boc-(R,R)-Cyc(Ts)-Gly-OH在攪拌下向如實(shí)施例1C中制備的不純Boc-(R,R)-Cyc(Ts)-Gly-Ome(217g,0.492mol)在甲醇(1.05L)的溶液里慢慢加入2.5N的氫氧化鈉水溶液(295M1,0.737)，將得到的溶液攪拌2小時(shí)。在真空下除去溶劑，將殘?jiān)芙庥谒?1.5L)中。過(guò)濾溶液除去少量固體，用乙醚(7×1L)洗滌，除去雜質(zhì)(化合物1B)，用硫酸鎂干燥合并的洗滌液，在真空下除去溶劑，回收8.37g物質(zhì)。然后用1N的鹽酸將水溶液調(diào)節(jié)到pH2，用乙酸乙酯(3×1L)萃取產(chǎn)物。合并萃取液，用飽和氯化鈉(500mL)洗滌，用硫酸鎂干燥。在真空下除去溶劑，先與乙醚(500mL)，再用二氯甲烷(500mL)共蒸發(fā)除去殘留的乙酸乙酯，得到205g白色泡沫狀產(chǎn)物，產(chǎn)率97.6％:1H核磁共振(CDCl3)δ1.15-1.22(m,4H),1.48(s,9H),1.55-1.68(m,3H),2.12-2.15(m,1H),2.43(s,3H),3.41-3.49(m,2H),3.97(ABq,J=17.9Hz,Δν=69.6Hz,2H),4.79(br s,1H),7.31(d,J=8.1Hz,2H),7.77(d,J=8.3Hz,2H),8.81(br s,1H)；質(zhì)譜(LRFAB,NBA-Li)m/z 433[M+Li]+。
E．合成Boc-(R,R)-Cyc(Ts)-Gly-Gly-OEt在Boc-(R,R)-Cyc(Ts)-Gly-OH(18.1g,43.1mmol)在DMF(480mL)的溶液里加入HOBT·H2O(7.92g,51.7mmol)和EDC·HCl(9.91g,51.7mmol)，在室溫下攪拌得到的混合物20分鐘。向此溶液里加入GlyOEt·HCl(6.0g,43.1mmol)和TEA(7.2mL,51.7mmol)，以后再將得到的混合物攪拌16小時(shí)。蒸出DMF，在水(250mL)和乙酸乙酯(400mL)之間分配殘留物。分離乙酸乙酯層，用1N的硫酸氫鉀(250mL)、水(250mL)、飽和碳酸氫鈉(250mL)和鹽水(250mL)洗滌，用硫酸鎂干燥。經(jīng)過(guò)過(guò)濾和濃縮得到21.9g白色泡沫狀純產(chǎn)物，產(chǎn)率99％:1H核磁共振(DMSO-d6)δ1.00-1.10(m,1H),1.19(t,J=7.6Hz,3H),1.38(s,9H),1.50-1.56(m,3H),1.75-1.84(m,1H),2.38(s,3H),3.31-3.40(br,2H),3.75-4.01(配合物m,4H),4.08(q,J=7.6Hz,2H),6.05(br,1H),7.32(d,J=8.0Hz,2H),7.77(d,J=8.0Hz,2H),8.32(t,J=7.2Hz,1H)；質(zhì)譜(HRFAB)m/z 518.2551[M+Li]+；對(duì)于C24H37N3O7SLi計(jì)算為518.2512。
F．合成Cyc(Ts)-Gly-Gly-OEt TFA鹽在Boc-Cyc(Ts)-Gly-Gly-OEt(21.2g,41.4mmol)在二氯甲烷(180mL)的溶液里加入TFA(44mL)，在室溫下攪拌得到的混合物30分鐘。濃縮溶液，將殘?jiān)芙庥谝颐?50mL)中，并用己烷(500mL)沉淀。傾出溶劑，用10/1的己烷/乙醚(500mL)洗滌殘留物。通過(guò)高真空干燥最后的殘?jiān)玫?0.7g棕黃色泡沫狀產(chǎn)物，產(chǎn)率95％:1H核磁共振(DMSO-d6)δ0.85-0.96(m,1H),1.03-1.31(配合物m,7H),1.09(t,J=7.6Hz,3H),2.00(m,1H),2.39(s,3H),3.02(bs,1H),3.62(m,1H),3.82-4.05(m,4H),4.10(q,J=7.6,2H),7.41(d,J=8.0Hz,2H),7.67(d,J=8.0Hz,2H),8.25(bs,3H),9.09(t,J=5.63Hz,1H)；質(zhì)譜(HRFAB)m/z 418.1990[M-TFA+Li]+；對(duì)于C19H29N3O5S計(jì)算為418.1988。
G．合成Boc-Orn(Z)-Cyc(Ts)-Gly-Gly-OEt向Boc-Orn(Z)-OH(8.37g,22.8mmol)在DMF(200mL)的溶液里加入HOBT·H2O(4.29g,27.4mmol)和EDC·HCl(5.25g,27.4mmol),在室溫下攪拌得到的溶液20分鐘。向此溶液中加入Cyc(Ts)-Gly-Gly-OEt TFA鹽(12.0g,22.8mmol)和TEA(3.82mL,27.4mmol)，然后保持?jǐn)嚢?6小時(shí)。蒸出DMF，在水(200mL)和乙酸乙酯(250mL)之間分配殘留物。分離乙酸乙酯層，用1N的硫酸氫鉀(150mL)、水(150mL)、飽和碳酸氫鈉(150mL)和鹽水(150mL)洗滌，用硫酸鎂干燥。過(guò)濾和濃縮得到15.1g白色泡沫狀產(chǎn)物，產(chǎn)率87％:1H核磁共振(DMSO-d6)δ1.00-1.94(配合物m,12H),1.15(t,J=7.4Hz,3H),2.38(s,3H),2.98(bs,2H),3.30-3.46(m,2H),3.70-3.82(m,4H),3.90-4.02(m,1H),4.05(t,J=7.4Hz,2H),5.00(s,2H),6.43(m,1H),7.17(m,1H),7.20-7.37(m,8H),7.78(m,2H),8.30(bs,1H)；質(zhì)譜(LRFAB,NBA+HCl)m/z 760[M+H]+。
H．合成Orn(Z)-Cyc(Ts)-Gly-Gly-OEt TFA鹽向Boc-Orn(Z)-Cyc(Ts)-Gly-Gly-OEt(14.5g,19.1mmol)在二氯甲烷(120mL)的溶液里加入TFA(30mL)，在室溫下攪拌得到的混合物30分鐘。蒸發(fā)溶液，用乙醚(100mL)研制殘?jiān)?。傾出乙醚，通過(guò)高真空干燥殘?jiān)?，得到橙色泡沫狀產(chǎn)物，產(chǎn)率＞100％，含有TFA。1H核磁共振(DMSO-d6)δ0.97-1.93(配合物m,12H),1.16(t,J=7.4Hz,3H),2.38(s,3H),2.98(bs,2H),3.31-3.50(m,2H),3.71-3.91(m,4H),3.97-4.04(m,1H),4.08(q,J=7.4Hz,2H),5.00(s,2H),7.23-7.39(m,8H),7.77-7.81(m,2H),8.18(bs,3H),8.41(bs,1H)；質(zhì)譜(LRFAB,NBA+HCl)m/z660[M-TFA]+。
I．合成Boc-Gly-Orn(Z)-Cyc(Ts)-Gly-Gly-OEt向Boc-Gly-OH(3.36g,19.2mmol)在DMF(220mL)的溶液里加入HOBT·H2O(3.52g,23.0mmol)和EDC·HCl(4.41g,23.0mmol),在室溫下將得到的溶液攪拌20分鐘。在此溶液里加入Orn(Z)-Cyc(Ts)-Gly-Gly-0Et TFA鹽(14.8g,19.2mmol)和TEA(3.20M1,23.0mmol)，然后保持?jǐn)嚢?2小時(shí)。蒸出DMF，在水(200mL)和乙酸乙酯(350mL)之間分配殘留物。分離兩層，用1N的硫酸氫鉀(150mL)、水(150mL)、飽和碳酸氫鈉(150mL)和鹽水(150mL)洗滌，用硫酸鎂干燥。過(guò)濾和濃縮得到13.7g白色泡沫狀產(chǎn)物，產(chǎn)率87％:1H核磁共振(DMSO-d6)δ0.96-1.10(m,2H),1.17(t,J=7.4Hz,3H),1.38(s,9H),1.35-2.00(配合物m,10H),2.97(m,2H),3.60(bs,2H),3.67-3.84(m,4H),3.93-4.03(m,3H),4.06(q,J=7.4Hz,2H),6.92(br,1H),7.19(m,1H),7.24-7.37(m,7H),7.60(d,J=8.3Hz,1H),7.76(m,2H),7.38(bs,1H)；質(zhì)譜(LRFAB,NBA+Li)+m/z 823[M+Li]+。
J．合成Boc-Gly-Orn(Z)-Cyc(Ts)-Gly-Gly-OH向Boc-Gly-Orn(Z)-Cyc(Ts)-Gly-Gly-OEt(13.3g,16.3mmol)在甲醇(100mL)的溶液里加入1N的氫氧化鈉(25mL)。在室溫下攪拌得到的混合物，并用薄層色譜監(jiān)測(cè)。2小時(shí)以后反應(yīng)完成。蒸出甲醇，在殘?jiān)屑尤胨?50mL)。用乙酸乙酯(2×100mL)洗滌此水相，倒掉乙酸乙酯層。用1N的硫酸氫鉀將pH值降低到3.5，用乙酸乙酯(3×100mL)萃取水相。合并乙酸乙酯層，用硫酸鎂干燥。過(guò)濾和濃縮得到11.7g白色泡沫狀產(chǎn)物，產(chǎn)率91％:1H核磁共振(DMSO-d6)δ0.98-1.25(m,2H),1.38(s,9H),1.40-1.92(m,10H),2.38(s,3H),2.97(m,2H),3.62(bs,2H),3.75-3.85(m,3H),3.95-4.05(m,2H),5.01(s,2H),6.96(br,1H),7.28(m,1H),7.25-7.38(m.7H),7.61(d,J=8.4Hz,1H),7.78(m,2H),8.25(bs,1H)。
K．合成Gly-Orn(Z)-Cyc(Ts)-Gly-Gly-OH TFA鹽向Boc-Gly-Orn(Z)-Cyc(Ts)-Gly-Gly-OH(11.2g,14.3mmol)在二氯甲烷(100mL)的溶液里加入TFA(24mL)，在室溫下攪拌得到的溶液30分鐘。濃縮溶液，用乙醚(500mL)研制。過(guò)濾得到11.3g白色粉末狀產(chǎn)物，產(chǎn)率99％:1H核磁共振(DMSO-d6)δ0.95-1.98(配合物m,12H),2.39(s,3H),3.01(m,2H),3.38(m,1H),3.65-4.10(配合物m,7H),4.18(q,J=7.4Hz,1H),5.02(s,2H),7.24-7.40(m,9H),7.77-7.85(m,2H),8.13(bs,3H),8.31(bs,1H),8.42(d,J=8.3Hz,1H)；質(zhì)譜(HRFAB)m/z689.2953[M-TFA]+；對(duì)于C32H45N6O9S計(jì)算為689.2969。
L．合成環(huán)-(Gly-Orn(Z)-Cyc(Ts)-Gly-Gly-)用TEA(1.74mL,12.5mmol)處理Gly-Orn(Z)-Cyc(Ts)-Gly-Gly-OH TFA鹽在脫氣DMF(1520mL)中的溶液，并將其冷卻到-40℃。在10分鐘內(nèi)滴加DPPA(1.64g,7.60mmol)，然后在-40℃下攪拌反應(yīng)物3小時(shí)。在此時(shí)間之后，將反應(yīng)物放到-2℃的浴中，然后讓其在此溫度下放置16小時(shí)。加入水(1520mL)，在室溫下讓得到的溶液與混合床離子交換樹(shù)脂(750g)一起攪拌6小時(shí)。過(guò)濾掉樹(shù)脂，將溶液濃縮到體積～100M1(DMF)。加入乙醚(500mL)得到固體殘?jiān)瑢⑵湓偃芙庥诩状?100mL)，再加入乙醚(500mL)進(jìn)行沉淀。過(guò)濾得到3.26g白色粉末狀產(chǎn)物，產(chǎn)率78％:1H核磁共振(CDCl3)δ0.96-2.10(配合物m,14H),2.37(bs,3H),2.68-3.05(m,3H),3.42-3.90(配合物m,8H),4.14(m,1H),4.20(m,1H),4.97-5.08(m,3H),6.42(d,J=8.4Hz,1H),7.19(d,J=8.0Hz,1H),7.20-7.39(m,7H),7.65-7.78(m,2H),9.15(bs,1H),9.22(bs,1H)；質(zhì)譜(HRFAB)m/z 671.2842[M+H]+；對(duì)于C32H43N6O8S計(jì)算為671.2863。
M．合成環(huán)-(Gly-Orn-Cyc(Ts)-Gly-Gly-)向環(huán)-(Gly-Orn(Z)-Cyc(Ts)-Gly-Gly-)(3.94g,5.90mmol)在甲醇(40mL)的溶液里加入鉑黑(1.0g)和甲酸銨(2.0g)?；亓鞣磻?yīng)2小時(shí)，讓其冷卻。在氬氣氣氛下通過(guò)硅藻土層過(guò)濾混合物，濃縮過(guò)濾液得到2.86g白色泡沫狀產(chǎn)物，產(chǎn)率89％:1H核磁共振(DMSO-d6)δ0.94-2.22(配合物m,12H),2.39(s,3H),2.55-2.95(m,7H),3.42-3.89(配合物m,9H),4.11(m,1H),4.39(m,1H),6.43(d,J=8.4Hz,1H),7.27(d,J=9.3Hz,1H),7.25-7.45(m,2H),7.64-7.80(m,2H),9.12-9.29(m,2H)；質(zhì)譜(HRFAB)m/z 537.2511[M+H]+；對(duì)于C24H36N6SO6計(jì)算為537.2495。
N．合成環(huán)-(Gly-Orn(石膽酰基)-Cyc(Ts)-Gly-Gly-)向環(huán)-(Gly-Orn-Cyc(Ts)-Gly-Gly-)(1.0g,1.9mmol)在氯仿(25mL)的溶液里加入石膽酸NHS活性酯(881mg,1.9mmol)，然后攪拌得到的混合物16小時(shí)。加入乙醚(50mL)得到固體。過(guò)濾得到946mG棕黃色粉末狀產(chǎn)物，產(chǎn)率56％:1H核磁共振(CD3OD)δ0.66(m,3H),0.93(bs,6H),0.94-2.37(配合物m,48H),2.43(s,3H),2.80-4.60(bm,14H),7.39(bs,2H),7.80(bs,2H)；質(zhì)譜(HRFAB)m/z 895.5432[M+H]+；對(duì)于C48H75N6O8S計(jì)算為895.5367。
O．合成2,3-(R,R)-環(huán)己基-6-(S)-{3-(石膽酰胺基)丙基}-1,4,7,10,13-五氮雜環(huán)十五烷向環(huán)-(Gly-Orn(石膽酰基)-Cyc(Ts)-Gly-Gly-)(2.70g,3.00mmol)在THF(50mL)的懸浮液中加入氫化鋰鋁(51.0mL的1.0M溶液)。然后將得到的混合物回流16小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻到～-20℃，用5％的硫酸鈉(30mL)，再用甲醇(30mL)小心地終止反應(yīng)。在室溫下攪拌此溶液1小時(shí)，濃縮成為干的粉末。用乙醚(3×200mL)研制此粉末，并過(guò)濾。濃縮醚，用乙腈將油狀物重結(jié)晶，得到800mg無(wú)色油狀的產(chǎn)物，產(chǎn)率40％:1H核磁共振(C6D6)δ0.64(s,3H),0.67(s,3H),0.88(d,J=3.0Hz,3H),0.84-2.61(配合物m,52H),2.38-2.95(配合物m,14H),3.49(m,3H)；13C核磁共振(CDCl3)δ71.4,63.1,62.6,61.8,58.2,56.5,56.1,51.5,50.4,50.1,48.3,47.9,46.1,45.7,42.6,42.1,40.4,40.1,36.4,35.8,35.7,35.6,35.4,34.5,31.9,31.7,31.6,30.8,30.5,29.4,28.3,27.2,26.4,26.2,24.9,24.2,23.4,20.8,18.6,12.0；質(zhì)譜(LRFAB,NBA+Li)m/z 677[M+Li]+。
P．合成2,3-(R,R)-環(huán)己基-6-(S)-{3-(石膽酰胺基)丙基}-1,4,7,10,13-五氮雜環(huán)十五烷二氯化錳(Ⅱ)在無(wú)水的氮?dú)鈿夥障?，將如?shí)施例10中制備的2,3-(R,R)-環(huán)己基-6-(S)-{3-(石膽酰胺基)丙基}-1,4,7,10,13-五氮雜環(huán)十五烷(547mg,0.817mmol)加入到含有氯化錳(Ⅱ)(103mg,0.818mmol)的熱的無(wú)水甲醇溶液(50mL)中?；亓?小時(shí)以后，將該溶液減少至干，將殘?jiān)芙庥赥HF(35mL)和乙醚(5mL)的混合溶劑中。通過(guò)硅藻土床層過(guò)濾。濃縮和用乙醚研制，在過(guò)濾后得到512mg白色固體狀配合物，產(chǎn)率79％。FBA質(zhì)譜(NBA)m/z760[M-Cl]+；分析，對(duì)于C41H78N6OMnCl2，計(jì)算C,61.79；H,9.87；N,10.55；Cl,8.90。實(shí)測(cè)C,62.67；H,9.84；N,8.04；Cl,8.29。
實(shí)施例2使用停留法動(dòng)力學(xué)分析確定化合物能否催化過(guò)氧化物歧化，見(jiàn)Riley,D.P.、Rivers,W.J.和Weiss,R.H.的《監(jiān)測(cè)水溶液系統(tǒng)中過(guò)氧化物衰變的停留法動(dòng)力學(xué)分析》載《分析生物化學(xué)》(Anal.Biochem.),196,344-349。為了實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定和精確地測(cè)量，所有的反應(yīng)試劑在生物學(xué)上是干凈的和不含金屬的。為了做到這一點(diǎn)，所有的緩沖劑(Calbiochem公司制造)都是生物級(jí)的、不含金屬的緩沖劑，并且使用的處置工具都是先用0.1N的鹽酸洗滌，再用純水洗滌，然后在pH值為8的104M EDTA浴中漂洗，再用純水漂洗，并在65℃下干燥幾小時(shí)。使用干燥的玻璃器具，在無(wú)水的惰性氬氣氣氛下，在真空大氣干燥手套箱中制備無(wú)水的過(guò)氧化鉀(Aldrich公司制造)的DMSO溶液。在每一次停留實(shí)驗(yàn)之前即時(shí)制備DMSO溶液。使用乳缽和研杵來(lái)研磨黃色的過(guò)氧化鉀固體(～100mg)。然后用幾滴DMSO研磨該粉末，將漿液轉(zhuǎn)移到裝有另外25mLDMSO的燒瓶中。將得到的漿液攪拌30分鐘，然后過(guò)濾。這個(gè)操作可重復(fù)地得到～2mM的過(guò)氧化物在DMSO中的濃度。在裝入充氮注射器之前在密封的小瓶中，將此溶液轉(zhuǎn)移到在氮?dú)庀碌氖痔紫渲?。?yīng)該注意到，DMSO/過(guò)氧化物溶液對(duì)水、熱、空氣和外來(lái)的金屬都是十分敏感的。新鮮的純?nèi)芤壕哂泻艿狞S色調(diào)。
用于緩沖溶液的水來(lái)自于室內(nèi)的去離子水系統(tǒng)，送入BarnsteadNanopure Ultrapure Series 550水系統(tǒng)，然后兩次蒸餾，第一次是從堿性的高錳酸鉀中蒸出，然后從稀的EDTA溶液中蒸出。比如將含有1.0g高錳酸鉀、2L水和將pH值調(diào)到9.0所必需的另加的氫氧化鈉的溶液加入到帶有溶劑蒸餾頭的2L燒杯中。這次蒸餾將把水中的任何極微量的有機(jī)化合物氧化。最后的蒸餾是在氮?dú)庀?，在裝有1500mL從第一次蒸餾得到的水和1.0×106M EDTA的2.5L燒瓶中進(jìn)行的。這一步驟將從超純水中除去殘留的極微量金屬。為了防止從回流柱上方揮發(fā)出的EDTA霧到達(dá)蒸餾頭中，在40cm長(zhǎng)的垂直蒸餾柱中裝有玻璃珠，而且用保溫層包起來(lái)。這個(gè)系統(tǒng)制造的脫氧水，其測(cè)量的電導(dǎo)小于2.0nΩ/cm2。
停留光譜儀系統(tǒng)是由動(dòng)力學(xué)儀器公司(地址Ann Arbor,MI)設(shè)計(jì)和制造的，連接于MAC IICX個(gè)人計(jì)算機(jī)上。停留分析的軟件由動(dòng)力學(xué)儀器公司提供，用QuickBasic語(yǔ)言寫(xiě)在MacAdios驅(qū)動(dòng)器上。典型的注入器的體積(0.01mL的緩沖液和0.006mL的DMSO)被標(biāo)定，使得比DMSO溶液過(guò)量得多的水被混合在一起。實(shí)際的比例大約是19/1，因此在水溶液中的過(guò)氧化物初始濃度為60-120μM。因?yàn)樵?45nm公布的水中的過(guò)氧化物的衰減系數(shù)是～2250M-1cm-1(1)，預(yù)期對(duì)于2cm的路徑長(zhǎng)度的盒，初始的吸收值大約為0.3-0.5，從實(shí)驗(yàn)中觀察到這一點(diǎn)。使用80mM濃度pH值為8.1的Hepes緩沖液(游離酸+鈉的形式)制備將要與過(guò)氧化物的DMSO溶液混合的水溶液。用5mL的DMSO溶液裝入儲(chǔ)存注射器中的一個(gè)，而其它的裝入5mL緩沖水溶液。整個(gè)的注射裝置、混合器和光譜儀的槽都浸入溫度21.0±0.5℃的裝有溫度計(jì)的循環(huán)水浴中。
在開(kāi)始收集過(guò)氧化物衰減的數(shù)據(jù)之前，向混合室中注入幾股緩沖液和DMSO溶液，以得到基線平均值。將這幾次注入取平均，儲(chǔ)存作為基線。在一系列測(cè)試中將要收集的第一針使用不含催化劑的水溶液。這假設(shè)每一系列試驗(yàn)都不含有能夠產(chǎn)生一級(jí)過(guò)氧化物衰減的特征的污染物。如果對(duì)于幾次注入緩沖溶液所觀察到的衰減是二級(jí)的，將能夠使用錳(Ⅱ)配合物溶液。一般說(shuō)來(lái)，在一個(gè)很寬的濃度范圍內(nèi)篩選潛在的SOD。因?yàn)槿Q于DMSO與緩沖水溶液的過(guò)氧化物初始濃度為大約1.2×104M，我們就意圖使用至少比基底過(guò)氧化物小20倍的錳(Ⅱ)配合物濃度。因此，我們一般使用從大約5×10-7至8×10-6M的濃度來(lái)篩選化合物的SOD活性。將從實(shí)驗(yàn)中獲得的數(shù)據(jù)輸入適當(dāng)?shù)臄?shù)學(xué)程序(比如Cricket Graph)，使得能夠進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)的動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)分析。由觀察到的速度常數(shù)(kobs)相對(duì)于錳(Ⅱ)配合物濃度的線性圖測(cè)定實(shí)施例1的錳(Ⅱ)配合物造成的過(guò)氧化物歧化的催化速度常數(shù)。由在245nm的吸收對(duì)于時(shí)間的線性圖得到了由錳(Ⅱ)配合物使過(guò)氧化物歧化的kobs值。在pH=8.1和21℃時(shí)，實(shí)施例1的錳(Ⅱ)配合物的kobs(M-1sec-1)被測(cè)定為0.77×10+7M-1sec-1。
從上面的kcat值可以看出實(shí)施例1的含氮大環(huán)配位體錳(Ⅱ)配合物是過(guò)氧化物歧化的有效催化劑。
權(quán)利要求
1．下式表示配合物的化合物
其中，R、R’、R1、R’1、R2、R’2、R3、R’3、R4、R’4、R5、R’5、R6、R’6、R7、R’7、R8、R’8、R9和R’9獨(dú)立地表示烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)烷基烷基、環(huán)烷基環(huán)烷基、環(huán)烯基烷基、烷基環(huán)烷基、烯基環(huán)烷基、烷基環(huán)烯基、烯基環(huán)烯基、雜環(huán)基、芳基和芳烷基，以及連接在α-氨基酸的α-碳上的基團(tuán)；或者R1或R’1和R2或R’2、R3或R’3和R4或R’4、R5或R’5和R6或R’6、R7或R’7和R8或R’8和R9或R’9和R或R’與和它們相連的碳原子一起獨(dú)立地形成具有3-20個(gè)碳原子的飽和的、部分飽和的或不飽和的環(huán)；或者R或R’和R1或R’1、R2或R’2和R3或R’3、R4或R’4和R5或R’5、R6或R’6和R7或R’7、R8或R’8和R9或R’9與和它們相連的碳原子一起獨(dú)立地形成具有2-20個(gè)碳原子的含氮雜環(huán)，以及它們的結(jié)合，這里條件是，當(dāng)該含氮雜環(huán)是不含有與氮相連的氫即在所述的通式中與氮相連的氫的芳雜環(huán)時(shí)，所述氮仍在大環(huán)中，且與大環(huán)中同一個(gè)碳原子相連的幾個(gè)R基是不存在的；其中，(1)“R”基團(tuán)中的1-5個(gè)通過(guò)鏈接基團(tuán)連接到生物分子上；(2)X、Y和Z中的一個(gè)通過(guò)鏈接基團(tuán)連接到生物分子上；或者(3)“R”基團(tuán)中的1-5個(gè)和X、Y和Z中的一個(gè)通過(guò)鏈接基團(tuán)連接到生物分子上，而且所述的生物分子獨(dú)立地選自類固醇、碳水化合物、脂肪酸、氨基酸、肽、蛋白質(zhì)、抗體、維生素、類脂、磷脂、磷酸酯、膦酸酯、核酸、酶底物、酶抑制劑和酶受體底物，而且所述的鏈接基團(tuán)來(lái)源于與生物分子反應(yīng)的所述的“R”基或所述的X、Y和Z連接的取代基，它們選自-NH2、-NHR10、-SH、-OH、-COOH、-COOR10、-CONH2、-NCO、-NCS、-COOX”、烯基、炔基、鹵素、甲苯磺酸酯、甲磺酸酯、tresylate、三氟甲磺酸酯和苯酚，這里R10是烷基、芳基或烷芳基，X”是鹵素；其中M是錳或鐵；以及其中X、Y和Z是配位體，它們獨(dú)立地選自鹵素、氧代基、結(jié)晶水、配位羥離子、醇、苯酚、二氧、過(guò)氧、氫過(guò)氧、烷基過(guò)氧、芳基過(guò)氧、氨、烷基氨基、芳基氨基、雜環(huán)烷基氨基、雜環(huán)芳基氨基、氨氧化物、肼、烷基肼、芳基肼、氧化氮、氰化物、氰酸鹽、硫氰酸鹽、異氰酸鹽、異硫氰酸鹽、烷基腈、芳基腈、烷基異腈、芳基異腈、硝酸鹽、亞硝酸鹽、疊氮基、烷基磺酸、芳基磺酸、烷基亞砜、芳基亞砜、烷基芳基亞砜、烷基次磺酸、芳基次磺酸、烷基亞磺酸、芳基亞磺酸、烷基硫醇羧酸、芳基硫醇羧酸、烷基硫醇硫代羧酸、芳基硫醇硫代羧酸、烷基羧酸、芳基羧酸、尿素、烷基脲、芳基脲、烷基芳基脲、硫脲、烷基硫脲、芳基硫脲、烷基芳基硫脲、硫酸鹽、亞硫酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸氫鹽、硫代硫酸鹽、硫代亞硫酸鹽、連二亞硫酸鹽、烷基膦、芳基膦、烷基膦氧化物、芳基膦氧化物、烷基芳基膦氧化物、烷基膦硫化物、芳基膦硫化物、烷基芳基膦硫化物、烷基膦酸、芳基膦酸、烷基次膦酸、芳基次膦酸、烷基三價(jià)膦酸、芳基三價(jià)膦酸、磷酸鹽、硫代磷酸鹽、亞磷酸鹽、焦亞磷酸鹽、三磷酸鹽、磷酸氫鹽、磷酸二氫鹽、烷基胍基、芳基胍基、烷基芳基胍基、烷基氨基甲酸酯、芳基氨基甲酸酯、烷基芳基氨基甲酸酯、烷基硫代氨基甲酸酯、芳基硫代氨基甲酸酯、烷基芳基硫代氨基甲酸酯、烷基二硫代氨基甲酸酯、芳基二硫代氨基甲酸酯、烷基芳基二硫代氨基甲酸酯、碳酸氫鹽、碳酸鹽、高氯酸鹽、氯酸鹽、亞氯酸鹽、次氯酸鹽、高溴酸鹽、溴酸鹽、亞溴酸鹽、次溴酸鹽、四鹵錳酸鹽、四氟硼酸鹽、六氟銻酸鹽、六氟磷酸鹽、次亞磷酸鹽、碘酸鹽、高碘酸鹽、偏硼酸鹽、四芳基硼酸鹽、四烷基硼酸鹽、酒石酸鹽、水楊酸鹽、琥珀酸鹽、檸檬酸鹽、抗壞血酸鹽、糖精酸鹽、氨基酸、異羥肟酸鹽、硫代甲苯磺酸鹽以及離子交換樹(shù)脂的陰離子，或它們的相應(yīng)陰離子，或者X、Y和Z中的一個(gè)或幾個(gè)獨(dú)立地與“R”基團(tuán)中的一個(gè)或幾個(gè)相連的系統(tǒng)，其中n是0或1。
2．如權(quán)利要求1的化合物，其中1-2個(gè)“R”基通過(guò)鏈接基團(tuán)與生物分子相連，沒(méi)有X、Y和Z通過(guò)鏈接基團(tuán)與生物分子相連。
3．如權(quán)利要求1的化合物，其中X、Y和Z中有一個(gè)通過(guò)鏈接基團(tuán)與生物分子相連，沒(méi)有“R”基團(tuán)通過(guò)鏈接基團(tuán)與生物分子相連。
4．如權(quán)利要求1的化合物，其中與位于氮原子之間的大環(huán)的碳原子相連的最大的一個(gè)“R”基團(tuán)具有通過(guò)鏈接基團(tuán)相連的生物分子。
5．如權(quán)利要求1的化合物，其中除了通過(guò)鏈接基團(tuán)與生物分子相連的“R”基團(tuán)以外，至少一個(gè)“R”基團(tuán)獨(dú)立地選自烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳烷基、烷基芳基、芳基、雜環(huán)基和與α-氨基酸的α-碳相連的基團(tuán)，其余的基團(tuán)獨(dú)立地選自氫、飽和的、部分飽和的或不飽和的環(huán)狀基團(tuán)或含氮的雜環(huán)基團(tuán)。
6．如權(quán)利要求5的化合物，其中除了通過(guò)鏈接基團(tuán)與生物分子相連的“R”基團(tuán)以外，至少二個(gè)“R”基團(tuán)獨(dú)立地選自烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳烷基、烷基芳基、芳基、雜環(huán)基和與α-氨基酸的α-碳相連的基團(tuán)。
7．如權(quán)利要求5的化合物，其中除了通過(guò)鏈接基團(tuán)與生物分子相連的“R”基團(tuán)以外，至少一個(gè)“R”基團(tuán)是烷基，其余的“R”基團(tuán)獨(dú)立地選自氫或飽和的、部分飽和的或不飽和的環(huán)狀基團(tuán)。
8．如權(quán)利要求1的化合物，其中R1或R’1和R2或R’2、R3或R’3和R4或R’4、R5或R’5和R6或R’6、R7或R’7和R8或R’8、R9或R’9和R或R’中的至少一個(gè)與和它們相連的碳原子一起表示具有3-20個(gè)碳原子的飽和的、部分飽和的或不飽和的環(huán)，而除了通過(guò)鏈接基團(tuán)與生物分子相連的“R”基團(tuán)以外，其余的“R”基團(tuán)獨(dú)立地選自氫、含氮雜環(huán)或烷基。
9．如權(quán)利要求8的化合物，其中R1或R’1和R2或R’2、R3或R’3和R4或R’4、R5或R’5和R6或R’6、R7或R’7和R8或R’8、R9或R’9和R或R’中的至少2個(gè)與和它們相連的碳原子一起表示具有3-20個(gè)碳原子的飽和的、部分飽和的或不飽和的環(huán)，而除了通過(guò)鏈接基團(tuán)與生物分子相連的“R”基團(tuán)以外，其余的“R”基團(tuán)獨(dú)立地選自氫、含氮雜環(huán)或烷基。
10．如權(quán)利要求8的化合物，其中的所述飽和的、部分飽和的或不飽和的環(huán)是環(huán)己基。
11．如權(quán)利要求10的化合物，其中所述除了通過(guò)鏈接基團(tuán)與生物分子相連的“R”基團(tuán)以外的其余“R”基團(tuán)獨(dú)立地選自氫或烷基。
12．如權(quán)利要求1的化合物，其中所述的R或R’和R1或R’1、R2或R’2和R3或R’3、R4或R’4和R5或R’5、R6或R’6和R7或R’7、R8或R’8和R9或R’9與和它們相連的碳原子一起獨(dú)立地形成具有2-20個(gè)碳原子的含氮雜環(huán)，而除了通過(guò)鏈接基團(tuán)與生物分子相連的“R”基團(tuán)以外，其余的“R”基團(tuán)獨(dú)立地選自氫、飽和的、部分飽和的或不飽和的環(huán)狀基團(tuán)或烷基。
13．如權(quán)利要求1的化合物，其中X、Y和Z獨(dú)立地選自鹵素、有機(jī)酸、硝酸根和碳酸氫根陰離子。
14．如權(quán)利要求1的化合物，其中的M是鐵。
15．如權(quán)利要求1的化合物，其中的M是錳。
16．以單劑形的方式用于過(guò)氧化物歧化的藥物組合物，它包括(a)治療或預(yù)防有效量的權(quán)利要求1的配合物和(b)無(wú)毒可藥用的載體、助劑或賦形劑。
17．預(yù)防或治療至少部分由過(guò)氧化物為中介的疾病或機(jī)能失調(diào)的方法，該方法包括給需要進(jìn)行這種預(yù)防或治療的主體服用具有治療、預(yù)防、醫(yī)治或恢復(fù)效果量的權(quán)利要求1的配合物。
18．權(quán)利要求17的方法，其中所述的疾病或機(jī)能失調(diào)選自缺血再灌注損傷、外科手術(shù)誘發(fā)的缺血、炎性腸疾病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、動(dòng)脈粥樣硬化、血栓形成、血小板凝聚、氧化劑誘發(fā)組織損傷和損害、骨關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、器官移植排斥、輻射誘發(fā)損害、中風(fēng)、急性胰腺炎、胰島素依賴型糖尿病尿糖癥、成人及嬰兒呼吸系統(tǒng)疾病、轉(zhuǎn)移瘤和癌發(fā)生。
19．權(quán)利要求18的方法，其中所述的疾病或機(jī)能失調(diào)選自缺血再灌注損傷、中風(fēng)、動(dòng)脈粥樣硬化和炎性腸疾病。
全文摘要
由通式(Ⅰ)所代表的過(guò)氧化物歧化酶(SOD)的低分子量仿制品生物綴合體用作炎性癥狀和疾病的治療劑,這些疾病比如缺血再灌注損傷、中風(fēng)、動(dòng)脈粥樣硬化和所有其它的由氧化劑誘發(fā)的組織損害或損傷的疾病,在式(Ⅰ)中,R、R’、R
文檔編號(hào)C07F15/02GK1225631SQ97194351
公開(kāi)日1999年8月11日 申請(qǐng)日期1997年3月4日 優(yōu)先權(quán)日1996年3月13日
發(fā)明者W·L·紐曼, D·P·里萊, R·H·維斯, S·L·亨克, P·J·倫龍, K·W·阿斯頓 申請(qǐng)人:孟山都公司