專利名稱：對(duì)整聯(lián)蛋白,特別是ανβ3整聯(lián)蛋白具有特異性活性的三環(huán)化合物,它們的制備方法和這種 ...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的三環(huán)化合物、它們的制備方法和這種方法的中間體、它們作為藥物的用途以及含有它們的藥物組合物。
本發(fā)明的目的是提供通式(Ⅰ)化合物以及它們的酸和堿加成鹽和它們的酯
其中R1代表-C≡C-[A]-[B]-COR6,-CH=CH-[A]-[B]-COR6,-(CH2)2-[A]-[B]-COR6,-O-[A]-[B]-COR6,-CH2CO-[A]-[B]-COR6基團(tuán)，-[A]-代表-衍生自包含1-12個(gè)碳原子和1-6個(gè)選自氧、氮或硫原子的雜原子的飽和或不飽和、直鏈或支鏈結(jié)構(gòu)的二價(jià)烴基，-或衍生自包含1-12個(gè)碳原子的飽和或不飽和、直鏈或支鏈無(wú)環(huán)烴的二價(jià)基團(tuán)，[B]代表苯基，CH[Z]基，或單鍵，Z代表氫原子，下列基團(tuán)之一(D)0-6-NRaRb,(D)0-6-NH-SO2-Rc,(D)0-6-NH-CO2-Rc,(D)0-6-NH-CO-Rc,(D)0-6-NH-SO2-NH-Rc,(D)0-6-NH-CO-NH-Rc,(D)0-6-CO2-Rc,(D)0-6-SO2-Rc,(D)0-6-CO-Rc或(D)0-6-Rc，其中(D)0-6表示衍生自含有0-6個(gè)碳原子的飽和或不飽和、直鏈或支鏈無(wú)環(huán)烴的二價(jià)基團(tuán)，Ra、Rb和Rc代表氫原子；(CH2)0-3-Ar基，其中Ar代表含有6-18個(gè)碳原子的碳環(huán)芳基；(CH2)0-3-Het基，其中Het代表衍生自含有1-9個(gè)碳原子和1-5個(gè)選自氧，氮或硫原子的雜原子的飽和或不飽和芳族或非芳族雜環(huán)的基團(tuán)；(CH2)0-3-Alk基，其中Alk代表衍生自含有1-12個(gè)碳原子的飽和或不飽和直鏈、支鏈或環(huán)狀非芳烴的基團(tuán)，基團(tuán)Het、Ar和Alk可以為未取代的或?yàn)槿〈模蛘逺a和Rb還可以與它們所鍵連的氮原子一起表示任選含有1個(gè)或多個(gè)選自氧，氮或硫原子的雜原子的飽和或不飽和芳族或非芳族含氮雜環(huán)，該基團(tuán)可以是取代的或未取代的。
-R6代表羥基，O-Alk,O-Ar,NH2,NH-Alk,N(Alk)2基團(tuán)或L或D氨基酸的剩余部分，Alk和Ar的定義同上，可以為取代的或未取代的。
-R2和R3相同或不同，且代表氫原子，羥基，O-Alk基或O-(CH2)03-Ar基，其中Alk和Ar的定義如上，或者R2與R3一起形成-O-(CRdRe)n-O-型環(huán)，其中n為整數(shù)1-5,Rd和Re各自獨(dú)立表示氫原子，含有1-6個(gè)碳原子的烷基，或苯基。
-R4代表氫原子，鹵原子，下列基團(tuán)之一羥基、氨基、硝基、氰基、CF3、含有1-12個(gè)碳原子的?；蝓Ｑ趸?、烷基、鏈烯基、炔基、烷硫基、烷氧基、烷基氨基、二烷基氨基、二烷基氨基烷基、二烷基氨基烷氧基，其中術(shù)語(yǔ)烷基含1-6個(gè)碳原子。
-R5代表氫原子，羥基，鹵原子，O-Alk基團(tuán)或O-(CH2)0-3-Ar基團(tuán)，其中的Alk和Ar如上定義，-G代表式G1基團(tuán)
其中Rh為氫原子或如上所定義的(Alk)基團(tuán)，且(Het′)代表如下通式的雜環(huán)
其中(H)與N=C-NH-單元一起形成含有1-9個(gè)碳原子和2-5個(gè)選自氧、氮和硫原子的雜原子的飽和或不飽和的單-或二環(huán)芳族或非芳族雜環(huán)的剩余部分，該基團(tuán)可以是取代的或未取代的，-或NRaRb基團(tuán)(基團(tuán)G2),Ra和Rb的定義同上，-或定義同上的(Het)基團(tuán)(基團(tuán)G3)，-或-NRh-C(=X)-NHRc基團(tuán)(基團(tuán)G4)，其中X為硫或氧原子或NH，Rh和Rc的定義同上，-或-NRh-SO2Rc基團(tuán)(基團(tuán)G5)，其中Rh和Rc的定義同上，虛線代表任選的第二條鍵，以及R1、R2和R3可以位于三環(huán)的8、9或10位上。
式(Ⅰ)化合物指所有可能的單一幾何異構(gòu)體和立體異構(gòu)體以及它們的混合物形式。
表示衍生自含1-12個(gè)碳原子和1-6個(gè)選自氧、氮或硫原子的雜原子的飽和或不飽和、直鏈或支鏈結(jié)構(gòu)的二價(jià)基團(tuán)的-[A]-基團(tuán)尤指衍生自鏈烷烴的基團(tuán)，其中該鏈烷烴的一些碳原子被氧或硫原子置換，或者被下列基團(tuán)置換C=O,SO,SO2,NH,N(Alk),NH-CO,N(Alk)-CO,CO-NH,CO-N(Alk),SO2-NH,SO2-N(Alk)，其中(Alk)的定義同上。因此，上述-[A]-基團(tuán)可以為下列基團(tuán)-CH2-CH2-O-CH2-CH2-,-CH2-CH2-N(CH3)-CH2-CH2-,-CH2-CH2-C(O)-CH2-CH2-,-CH2-C(O)-C(Me)2-CH2-。
當(dāng)-[A]-代表衍生自含1-12個(gè)碳原子的飽和或不飽和、直鏈或支鏈無(wú)環(huán)烴的二價(jià)基團(tuán)時(shí)，尤指式-(CH2)n-亞烷基基團(tuán)(其中n代表1-12的整數(shù))，如-CH2-,-CH2CH2-,-CH2CH2CH2-或-CH2CH2CH2CH2-，或諸如-CH=CH-CH2-或-C≡C-CH2-之類的亞烯基或亞炔基。
當(dāng)這些二價(jià)基團(tuán)為支鏈基團(tuán)時(shí)，它們可以是諸如-CH(CH3)-,-C(Me)2,-CH2-C(Me)2-,-CH(Et)-,-CH(C≡CH)-或-C(C≡CH)(Et)-之類的基團(tuán)。
當(dāng)[B]代表-Ph-二價(jià)基團(tuán)時(shí)，COR6基團(tuán)可以位于鄰、間或?qū)ξ簧?。?yōu)選位于對(duì)位位置上。
當(dāng)(D)0-6代表衍生自含有0-6個(gè)碳原子的飽和或不飽和、直鏈或支鏈無(wú)環(huán)烴的二價(jià)基團(tuán)時(shí)，(D)0-6選自上文[A]中所述的基團(tuán)。(D)0是指該基團(tuán)不存在，即再一次具有共價(jià)單鍵。(D)優(yōu)選為單鍵或(CH2)n基團(tuán)，其中n為選自1、2或3的整數(shù)。
當(dāng)Ra,Rb和Rc代表(CH2)0-3-Ar,(CH2)0-3-Het,(CH2)0-3-Alk基團(tuán)時(shí)，(CH2)0-3代表單鍵(就(CH2)0而言)，或基團(tuán)-CH2-,-(CH2)2-或-(CH2)3-。
代表含有6-18個(gè)碳原子碳環(huán)芳基基團(tuán)的術(shù)語(yǔ)“(Ar)”是指衍生自芳族環(huán)烴的基團(tuán)如苯基，萘基，菲基，或者為衍生自含有苯環(huán)的稠合二環(huán)或三環(huán)烴的基團(tuán)，如2,3-二氫化茚基，茚基，二氫化萘基，四氫萘基或芴基。聯(lián)接點(diǎn)位于苯環(huán)部分。優(yōu)選苯基。
代表衍生自含有1-9個(gè)碳原子和1-5個(gè)選自氧，氮或硫原子的雜原子的飽和或不飽和、芳族或非芳族雜環(huán)基團(tuán)的術(shù)語(yǔ)“(Het)”尤指-單環(huán)雜環(huán)基，例如，下列基團(tuán)噻吩基，呋喃基，吡喃基，吡咯基，咪唑基，吡唑基，吡啶基，吡嗪基，嘧啶基，噠嗪基，噻唑基，噁唑基，呋咱基，吡咯啉基，咪唑啉基，吡唑啉基，噻唑啉基，三唑基，四唑基，-稠合雜環(huán)，例如，苯并呋喃基，苯并噻吩基，苯并咪唑基，苯并噻唑基，萘并[2,3-b]噻吩基，噻蒽基，異苯并呋喃基，苯并吡喃基，呫噸基，吩噁噻基(phenoxathiinyle)，中氮茚基，異吲哚基，3H-吲哚基，吲哚基，吲唑基，嘌呤基，喹嗪基，異喹啉基，喹啉基，2,3-二氮雜萘基，1,5-二氮雜萘基，喹喔啉基，喹唑啉基，噌啉基，喋啶基，咔唑基，β-咔啉基，吖啶基，吩嗪基，吩噻嗪基，吩噁嗪基，二氫吲哚基，異二氫吲哚基，咪唑并吡啶基，咪唑并嘧啶基，或者還可以為上述單環(huán)雜環(huán)構(gòu)成的稠合多環(huán)體系，例如呋喃并[2,3-b]吡咯或噻吩并[2,3-b]呋喃，-或飽和雜環(huán)基，例如吡咯烷，哌啶，嗎啉。
此外，該術(shù)語(yǔ)(Het)還包括上述(Het′)中的基團(tuán)。
代表衍生自飽和或不飽和、直鏈、支鏈或環(huán)狀非芳香烴的基團(tuán)的術(shù)語(yǔ)(Alk)在無(wú)環(huán)烴情況下是指烷基如甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，異丁基，叔丁基，正戊基，正己基，2-甲基戊基，2,3-二甲基丁基，正庚基，2-甲基己基，2,2-二甲基戊基，3,3-二甲基戊基，3-乙基戊基，正-辛基，2,2-二甲基己基，3,3-二甲基己基，3-甲基-3-乙基戊基，壬基，2,4-二甲基庚基或正-癸基，鏈烯基如乙烯基，丙烯基，異丙烯基，烯丙基，2-甲基烯丙基，丁烯基或異丁烯基，或炔基如乙炔基，丙炔基，炔丙基，丁炔基或異丁炔基；在環(huán)狀基團(tuán)情況下是指環(huán)烷基，如環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)己基或金剛烷基。
當(dāng)Ra和Rb與它們所鍵連的氮原子一起代表含氮雜環(huán)時(shí)，尤為下列飽和雜環(huán)嗎啉，哌啶，哌嗪，吡咯烷，或不飽和雜環(huán)如嘧啶，吡啶或吡嗪。
當(dāng)R2,R3,R4和R5代表含1-12個(gè)碳原子的O-(Alk)基團(tuán)時(shí)，優(yōu)選為甲氧基，乙氧基，丙氧基，異丙氧基，丁氧基，烯丙基氧基或炔丙氧基。當(dāng)R2,R3,R4和R5代表O-(CH2)0-3-Ar基時(shí)，優(yōu)選為苯乙氧基和苯丙氧基。
當(dāng)R2和R3一起形成-O-(CRdRe)n-O-型環(huán)時(shí)(n為整數(shù)1-5)，尤指-O-CH2-O,O-C(Me2)-O,O-C(Ph2)-O基團(tuán)。
R2與R3必須相互成鄰位關(guān)系。
當(dāng)R6代表O-Alk或O-Ar基團(tuán)時(shí)(其中Alk和Ar為取代或未取代的)，尤為下列基團(tuán)之一(C1-C8)烷氧基，(C1-C14)芳基(C1-C8)烷氧基，(C6-Cl4)芳氧基，(C1-C8)烷基羧基氧基，(C1-C8)二烷基氨基羰基甲氧基，(C6-C14)芳基，(C1-C8)二烷基氨基羰基甲氧基。
當(dāng)R6代表NH-alk,NH(alk)2或NH-Ar基團(tuán)時(shí)，尤為下列基團(tuán)之一(C1-C8)烷基氨基，二-(C1-C8)烷基氨基，(C6-C14)芳基(C2-C8)烷基氨基，(C6-C14)芳基氨基。
當(dāng)R6代表氨基酸的剩余部分時(shí)，它可以為L(zhǎng)或D氨基酸。
L或D氨基酸可以為天然或非天然的。它們優(yōu)選為α-氨基酸。例如，Houben-Weyl，有機(jī)化學(xué)方法(Methoden der organischen Chemie)，Vol.XV/1和2,Georg Thieme Verlag,Stuttgart,1974中所述的氨基酸Aad, Abu, γAbu, Abz, 2ABz, εAca, Ach, Acp, Adpd, Ahb, Aib,βAib, Ala, βAla, Δala, Alg, All, Ama, Amt, Ape, Apm, Apr,Arg, Asn, Asp, Asu, Aze, Azi, Bai, Bph, Can, Cit, Cys,(Cys)2, Cyta, Daad, Dab, Dadd, Dap, Dapm, Dasu, Djen, Dpa,Dtc, Fel, Gln, Glu, Gly, Guy, hAla, hArg, hCys, hGln, hGlu,His, hlle, hLeu, hLys, hMet, hPhe, hPro, hSer, hThr, hTrp,hTyr, Hyl, Hyp, 3Hyp, Ile, Ise, Iva, Kyn, Lant, Lcn, Leu,Lsg, Lys, βLys, Δlys, Met, Mim, Min, nArg, Nle, Nva, Oly,Orn, Pan, Pec, Pen, Phe, Phg, Pic, Pro, Δpro, Pse, Pya, Pyr,Pza, Qin, Ros, Sar, Sec, Sem, Ser, Thi, βThi, Thr, Thy, Thx,Tia, Tle, Tly, Trp, Trta, Tyr, Val,
Tia,Tle,Tly,Trp,Trta,Tyr,Val，叔丁基甘氨酸(Tbg)，新戊基甘氨酸(Npg)，環(huán)己基甘氨酸(Chg)，環(huán)己基丙氨酸(Cha),2-噻吩基丙氨酸(Thia),2,2-二苯基氨基乙酸，2-(對(duì)-甲苯基)2-苯基氨基乙酸，2-(對(duì)-氯苯基)氨基乙酸，或者還為2-吡咯烷乙酸，1,2,3,4-四氫異喹啉-3-乙酸，十氫異喹啉-3-乙酸，八氫異吲哚-2-乙酸，十氫喹啉-2-乙酸，八氫環(huán)戊二烯并[b]吡咯-2-羧酸，2-氮雜二環(huán)[2,2,2]辛烷-3-羧酸，2-氮雜二環(huán)[2,2,1]庚烷-3-羧酸，2-氮雜二環(huán)[3,1,0]己烷-3-羧酸，2-氮雜螺[4,4]壬烷-3-羧酸，2-氮雜螺[4,5]癸烷-3-羧酸，螺(二環(huán)[2,2,1]庚烷)-2,3-吡咯烷-5-羧酸，螺(二環(huán)[2,2,2]辛烷)-2,3-吡咯烷-5-羧酸，2-氮雜三環(huán)[4,3,0,16,9]癸烷-3-羧酸，十氫環(huán)庚并[b]吡咯-2-羧酸，十氫環(huán)辛并[c]吡咯-2-羧酸，八氫環(huán)戊二烯并[c]吡咯-2-羧酸，八氫異吲哚-1-羧酸，2,3,3a,4,6a-六氫環(huán)戊二烯并[b]吡咯-2-羧酸，2,3,3a,4,5,7a-六氫吲哚-2-羧酸，四氫噻唑-4-羧酸，異噁唑烷-3-羧酸，吡唑烷-3-羧酸，羥基吡咯烷-2-羧酸，如果合適的話，這些基團(tuán)可以是取代的(參見(jiàn)下列結(jié)構(gòu)式)
上述雜環(huán)剩余部分是已知的，例如，參見(jiàn)下列專利或?qū)＠暾?qǐng)US-A-4.344.949；US-A-4.374.847；US-A-4.350.704；EP-A-29.488；EP-A-31.741；EP-A-46.953；EP-A-49.605； EP-A-49.658；EP-A-50.800；EP-A-51.020；EP-A-52.870； EP-A-79.022；EP-A-84.164；EP-A-89.637；EP-A-90.341； EP-A-90.362；EP-A-105.102；EP-A-109.020；EP-A-111.873；EP-A-271,865和EP-A-344,682。
另外，氨基酸可以為酯或酰胺形式，例如，甲基酯，乙基酯，異丙基酯，異丁基酯，叔丁基酯，芐基酯，乙基酰胺，氨基脲或ω-氨基酸(C2-C8)-烷基酰胺。
最后，這些氨基酸的官能團(tuán)可以加以保護(hù)。合適的保護(hù)基如尿烷保護(hù)基，羧基保護(hù)基或側(cè)鏈保護(hù)基已記載在Hubbuch,Kontakte(Merck)1979,N°3,p.14-23和Bullesbach,Kontakte(Merck)1980,N°1,p.23-25.中。
例如，可提及的保護(hù)基包括下列Aloc,Pyoc,Fmoc,Tcboc,Z,Boc,Ddz,Bpoc,Adoc,Msc,Moc,Z(NO2),Z(Haln),Bobz,Iboc,Adpoc,Mboc,Acm，叔丁基，Obzl,Onbzl,Ombzl,Bzl,Mob,Pic,Trt。
當(dāng)G為式G1基團(tuán)
和(Het′)為下述通式雜環(huán)
其中(H)與N=C-NH-單元一起形成含1-9個(gè)碳原子和2-5個(gè)選自氧、氮或硫原子的雜原子的飽和或不飽和、單-或二環(huán)的芳族或非芳族雜環(huán)時(shí)，這一基團(tuán)可以是取代的或未取代的，G1尤其代表下列雜環(huán)
其中p代表整數(shù)1-4。
-當(dāng)G代表-NRaRb基團(tuán)(稱作G2)時(shí)，Ra和Rb可以為氫原子，(CH2)0-3-Ar,(CH2)0-3-Het或(CH2)0-3-Alk基團(tuán)。Ar,Het和Alk基團(tuán)還可以被定義如下的基團(tuán)取代。
G2尤為NH2,NH-Alk基團(tuán)如NHMe,NHET,N(Alk)2基團(tuán)如NMe2,NEt2,NMeEt,NH-(CH2)0-1-Ar基團(tuán)如NHPh,NHCH2Ph或NHCH2Het基團(tuán)如NHCH2-吡咯-2-基。
當(dāng)Ra為氫原子或(Alk)基團(tuán)以及Rb為(Het′)基團(tuán)時(shí)，重新可見(jiàn)G1基團(tuán)的有用性。
當(dāng)Ra和Rb與它們所鍵連的氮原子一起形成含氮雜環(huán)時(shí)，尤為上文所述的雜環(huán)基，這些基團(tuán)可以為取代的或未取代的。
-當(dāng)G為(Het)基(基團(tuán)G3)時(shí)，該基團(tuán)可以為取代的或未取代的，尤為上文所列雜環(huán)，特別是上文所述的通式(Het′)雜環(huán)。當(dāng)該雜環(huán)通過(guò)其氮原子位置連接時(shí)，還可見(jiàn)其中Ra和Rb與載有它們的氮原子一起形成雜環(huán)的G2基團(tuán)的有用性。
-當(dāng)G為-NRh-C(=X)-NHRc基(基團(tuán)G4)，或NRhSO2Rc基(基團(tuán)G5)時(shí)(其中X為硫或氧原子或NH,Rh和Rc的定義同上)，具體為下列基團(tuán)之一-NH-C(=NH)-NH2,-NH-C(=O)-NH2或-NH-C(=S)-NH2,-NH-C(=NH)-NHCH2-Ar例如-NH-C(=NH)-NHCH2Ph,-NH-C(=NH)-NHCH2-Het,-NH-C(=NH)-NHCH2-Het′,-NH-C(=NH)-NH-Alk例如-NH-C(=NH)-NHCH3,或-NH-SO2Ph，其中的Ar,Het,Het′或Alk基團(tuán)為取代或未取代的。
(Alk),(Ar),(Het),(Het′)或形成雜環(huán)的NRaRb基團(tuán)上的可能取代基優(yōu)選為下列基團(tuán)-鹵素氟，氯，溴，碘，-含有1-12個(gè)碳原子的烷基、鏈烯基、炔基，例如甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，異丁基，叔丁基，乙烯基或烯丙基；這些基團(tuán)本身任選被一個(gè)或多個(gè)鹵原子(例如氟)取代，例如三氟甲基，-氧代，氰基，硝基，甲?；?，羧基和含有1-6個(gè)碳原子的羧基烷基，甲酰氨基，-含有1-12個(gè)碳原子的烷氧基如甲氧基，乙氧基，丙氧基，異丙氧基，丁氧基，-含有1-12個(gè)碳原子的烷硫基，如甲硫基，乙硫基，丙硫基，異丙硫基，丁硫基，-氨基，含有1-12個(gè)碳原子的烷基氨基，例如甲氨基或乙氨基，含有2-24個(gè)碳原子的二烷基氨基，例如二甲基氨基，二乙基氨基，甲基乙基氨基，這些二烷基氨基可能呈氧化形式，-含有1-12個(gè)碳原子的氨基烷基，例如氨基甲基或氨乙基，-含有3-25個(gè)碳原子的二烷基氨基烷基，例如二甲氨基甲基或乙基，-含有3-25個(gè)碳原子的二烷基氨基烷氧基，例如二甲氨基乙氧基，-含有1-12個(gè)碳原子的可能?；牧u基，例如乙酰氧基，-含有1-12個(gè)碳原子可能被例如氯、碘或氟原子取代的?；缂柞；?、乙?；⒈；⒍□；惗□；⑽祯；愇祯；?、琥珀?；?、新戊酰基、苯甲?；?。還可提及氯乙?；纫阴；纫阴；?，溴乙?；蛉阴；?。
-碳環(huán)或雜環(huán)雜芳基例如苯基，呋喃基，噻吩基，吡啶基或芳烷基如芐基，這些基團(tuán)本身可能被上文所述的鹵素、烷基、烷氧基、烷硫基、氨基烷基或二烷基氨基取代。
當(dāng)然，可以存在一個(gè)或多個(gè)相同或不同的取代基。就(Het)來(lái)講，取代基可以位于NH基團(tuán)或碳原子的位置上。
這些取代基還說(shuō)明了R4的定義。
應(yīng)當(dāng)理解，當(dāng)R1,R2,R3,R4,R5,R6,Ra,Rb,Rc中包含如上文所述的烷基、芳基或雜環(huán)基時(shí)，它們彼此獨(dú)立地相同或不同。
本發(fā)明自然擴(kuò)展到式(Ⅰ)化合物的鹽，例如，當(dāng)式(Ⅰ)化合物包含氨基或氨基胍官能團(tuán)時(shí)，與下列酸所成的鹽鹽酸，氫溴酸，硝酸，硫酸，磷酸，乙酸，三氟乙酸，甲酸，丙酸，苯甲酸，馬來(lái)酸，富馬酸，琥珀酸，酒石酸，檸檬酸，草酸，二羥乙酸，天冬氨酸，烷烴磺酸如甲烷-或乙烷磺酸，芳烴磺酸例如苯-或?qū)妆交撬嵋约胺蓟人?，或者，?dāng)式(Ⅰ)化合物含酸官能團(tuán)時(shí)，與堿金屬或堿土金屬所成的鹽，或可能取代的銨鹽。
本發(fā)明還擴(kuò)展到式(Ⅰ)化合物的酯。
在第一優(yōu)選方面中，本發(fā)明主題是上文所定義的相應(yīng)于通式(Ⅰ′)的通式(Ⅰ)化合物及其酸和堿的加成鹽和它們的酯
其中R′1代表下列基團(tuán)之一-C≡C-[A′]-B′]-COR′6,-CH=CH-[A′]-[B′]-COR′6,-(CH2)2-[A′]-[B′]-COR′6,-O-[A′]-[B′]-COR′6,-CH2CO-[A′]-[B]-COR′6,-[A′]-代表包含1-6個(gè)碳原子的二價(jià)亞烷基、亞烯基或亞炔基，[B′]代表CH(Z′)基團(tuán)或單鍵，Z′代表氫原子，下列基團(tuán)之一(CH2)0-6-NRaRb,(CH2)0-6-NH-SO2-Rc,(CH2)0-6-NH-CO2-Rc,(CH2)0-6-NH-CO-Rc,(CH2)0-6-NH-SO2-NH-Rc,(CH2)0-6-NH-CO-NH-Rc,(CH2)0-6-CO2-Rc,(CH2)0-6-SO2-Rc,
(CH2)0-6-CO-Rc或(CH2)0-6-Rc,Ra,Rb和Rc的定義同上，R′6代表OH，氨基或含有1-8個(gè)碳原子且可能被一個(gè)或多個(gè)選自羥基、氨基、苯基、烷基氨基或二烷基氨基的基團(tuán)取代的烷氧基，R′2和R′3代表氫原子或甲氧基，且G的定義同上，虛線表示任選的第二條鍵。
在第二優(yōu)選方面中，本發(fā)明主題是如上定義的通式(Ⅰ)化合物及其酸和堿的加成鹽和它們的酯，其中R6代表下列基團(tuán)之一-OH,-OCH3,-OCH2CH3,-O-(CH2)2-OH,
-O-(CH2)2-N-(CH3)2,-NH2或-O-(CH2)-苯基。
在第三優(yōu)選方面中，本發(fā)明主題是如上定義的通式(Ⅰ)化合物及其酸和堿的加成鹽和它們的酯，其中R1代表O-(CH2)0-6CH(Z′)-COOH或-(CH2)0-7-CH(Z′)-COOH基團(tuán)。
在第四優(yōu)選方面中，本發(fā)明主題是如上定義的通式(Ⅰ)化合物及其酸和堿的加成鹽和它們的酯，其中(Z′)為氫原子。
在第五優(yōu)選方面中，本發(fā)明主題是如上定義的通式(Ⅰ)化合物及其酸和堿的加成鹽和它們的酯，其中(Z′)為(CH2)0-6-NH-CO2-Rc或(CH2)0-6-NHRb基團(tuán)，且Rb和Rc的定義同上。
在第六優(yōu)選方面中，本發(fā)明主題是如上定義的通式(Ⅰ)化合物及其酸和堿的加成鹽和酯，其中Rb和Rc代表(CH2)0-3-Ar基團(tuán)，Ar的定義同上且可以為取代的或未取代的。
在第七優(yōu)選方面中，本發(fā)明主題是如上定義的通式(Ⅰ)化合物及其酸和堿的加成鹽和它們的酯，其中G為式-NH-C(=NH)-NHRc的G4基團(tuán)，且Rc的定義同上。
在第八優(yōu)選方面中，本發(fā)明主題是如上定義的通式(Ⅰ)化合物及其酸和堿的加成鹽和它們的酯，其中G為NH-C(=NH)-NH2的G4基團(tuán)。
在第九優(yōu)選方面中，本發(fā)明主題是如上定義的通式(Ⅰ)化合物及其酸和堿的加成鹽和它們的酯，其中G為如上定義的-NH-Het′基團(tuán)，特別為
p為整數(shù)2,3或4，這些雜環(huán)為取代或未取代的。
在第十優(yōu)選方面中，本發(fā)明主題是如上定義的通式(Ⅰ)化合物及其酸和堿的加成鹽和它們的酯，其中G為基團(tuán)
p為整數(shù)2,3或4。
在第十一優(yōu)選方面中，本發(fā)明提供了下列如上定義的通式(Ⅰ)化合物-4-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸，-5-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸，-5-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-8,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-9-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸，-6-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-己酸，-7-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-庚酸，-5-((9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-4-((4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-8-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸，-5-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸乙酯鹽酸鹽，-4-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-8,9-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-10-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸，-5-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-8,9-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-10-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸，-5-((4-(((氨基)羰基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸，-5-((4-(((氨基)硫代羰基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸，-4-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-8,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-9-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸，-6-((4-((4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-己酸，-5-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-3,3-二甲基-4-氧代-戊酸，-5-((4-((4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-3,3-二甲基-4-氧代-戊酸，-5-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸鹽酸鹽，-4-((4-((4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸，-5-((8-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-6,7,8,9,10,11-六氫-薁并(5,6-d)-1,3-苯并二氧雜環(huán)戊烯-4-基)氧基)-戊酸，
-5-((8-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-2,2-二苯基-6,7,8,9,10,11-六氫-薁并(4,5-e)-(1,3)-苯并二氧雜環(huán)戊烯-4-基)氧基)-戊酸，-4-((9,10-二甲氧基-4-((1,4,5,6-四氫-2-嘧啶基)亞肼基)-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸，-2-((4-((4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-乙酸，-3-((4-((4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-丙酸，-4-((4-((4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸，-4-((4-((4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸，-0-[4-[(4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并[e]薁基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸，-0-[4-[(4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并[e]薁基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸，-0-[4-[(1,2,3,4-四氫-6-嘧啶基)亞肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并[e]薁基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸，-0-(9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-4-[(1,4,5,6-四氫2-嘧啶基)亞肼基]]-8-苯并[e]薁基]N-[(苯基甲氧基)羰基]DL-高絲氨酸的(2,3-二羥基丙基)酯，-0-[4-[(4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基]-N-[(8-喹啉基)磺?；鵠-DL-高絲氨酸，-0-[4-[(4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基]-N-[[3-[4-(3-吡啶基)-1H-咪唑-1-基]丙氧基]羰基]-DL-高絲氨酸的一鹽酸鹽，-5-[[4-[(4,5-二氫-4-氧代-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基]氧基]戊酸，
-0-[9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-4-[(4,5,6,7-四氫-1H-1,3-二氮雜-2-基)亞肼基]-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]DL-高絲氨酸，-0-[9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-4-[(3a,4,5,6,7,7a-六氫-1H-苯并咪唑-2-基)亞肼基]-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]DL-高絲氨酸，本發(fā)明主題同樣是通式(Ⅰ)化合物的制備方法，其特征在于使式(Ⅱ)化合物
其中R2,R3,R4和R5如上所述，但不為羥基，在堿存在下與式(F1)化合物反應(yīng)Hal-[A]-[B]-COR6(F1)或在膦和偶氮二羧酸二乙酯存在下與式(F′1)化合物反應(yīng)HO-[A]-[B]-COR6(F′1)其中Hal為鹵原子，[A],[B]和R6定義同上，[B]還可以代表基團(tuán)
其中P為胺官能團(tuán)保護(hù)基，以得到式(Ⅲa)化合物
或者先與活化劑反應(yīng)，然后在催化劑存在下與式(F2)化合物反應(yīng)
以得到式(Ⅲb)化合物
隨后使式(Ⅲa)或(Ⅲb)化合物與式(F3)化合物反應(yīng)H2N-G(F3)其中G定義同上，以得到相應(yīng)于某些式(Ⅰ)產(chǎn)物的式(Ⅳa)和(Ⅳb)化合物
隨后，如果合適的話，以合適的次序使這些化合物進(jìn)行下列反應(yīng)-與堿或酸反應(yīng)以斷裂酯，獲得相應(yīng)的酸，-與適合于部分或完全還原R1基團(tuán)中不飽和鍵的還原劑反應(yīng)，-與三鍵水化劑反應(yīng)，-與脫烷基化劑反應(yīng)，-當(dāng)[B]代表CH-NHP基團(tuán)時(shí)，與CO-R6的β位置上的NH-P官能團(tuán)的脫保護(hù)劑反應(yīng)，-由CO-R6的β位置上的相應(yīng)胺形成NH-SO2Rc,NH-CO2Rc,NHCORC,NH-SO2-NH-RC,NH-CO-NHRC基團(tuán)，以得到相應(yīng)的式(Ⅰ)化合物，如果合適的話，這些化合物可與酸或堿作用以得到相應(yīng)的鹽，或者與酯化劑作用以得到相應(yīng)的酯。
與式Hal-[A]-[B]-COR6(F1)化合物的反應(yīng)優(yōu)選在有無(wú)機(jī)堿如碳酸鉀或碳酸鈉存在下在諸如二甲基甲酰胺之類的非質(zhì)子偶極溶劑中進(jìn)行。Hal優(yōu)選為氯或溴原子。
與式HO-[A]-[B]-COR6(F′1)化合物的反應(yīng)在諸如三苯膦之類的膦和反應(yīng)劑如偶氮二羧酸二乙酯(DEAD)存在下于對(duì)質(zhì)子溶劑如二氯甲烷中進(jìn)行。
與式H-C≡C-[A]-[B]-COR6(F2)化合物的反應(yīng)首先在堿如吡啶存在下與活化劑如式(CF3SO2)2O三氟甲磺酸酐反應(yīng)，以得到相應(yīng)的式(OSO2CF3)三氟甲磺酸酯，然后在鈀衍生物(Pd0)如Pd(PPh3)4存在下進(jìn)行。
與NH2-G(F3)的反應(yīng)可以在無(wú)溶劑條件下或者在醇類溶劑如乙醇或丁醇中進(jìn)行。合成子(Synthon)NH2-G任選以鹽形式使用，如鹽酸鹽或氫溴酸鹽。
酯官能團(tuán)的皂化反應(yīng)通過(guò)例如與堿金屬堿如蘇打或碳酸鉀在四氫呋喃或低級(jí)醇如甲醇或乙醇中進(jìn)行。酯的裂解也可以根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法在酸性介質(zhì)中進(jìn)行。
不飽和鍵的還原可以通過(guò)在催化劑如鈀-炭或銠催化劑如Wilkinson試劑存在下與氫氣作用完全還原，或者還可以通過(guò)與中毒催化劑如被吡啶或三乙胺毒化的鈀或硫酸鋇作用部分還原(亞炔基還原成亞烯基)。
由-C≡C-[A]-[B]-COR6得到-CH2CO-[A]-[B]-COR6基團(tuán)的水合反應(yīng)優(yōu)選通過(guò)在硫酸汞存在下與水作用來(lái)進(jìn)行。
得到其中R2,R3,R4或R5代表羥基的式(Ⅰ)化合物的脫烷基化反應(yīng)在氯化鋁或三溴化硼存在下進(jìn)行。
COR6的α位上的NH2([B]代表CH-NH2或CH-NH2,HCl)的官能化反應(yīng)按照有機(jī)化學(xué)中已知的標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行。
由相應(yīng)的胺形成NHSO2RC的反應(yīng)優(yōu)選通過(guò)在堿例如三乙胺存在下與RCSO2Hal作用來(lái)進(jìn)行。
由相應(yīng)的胺形成NHCO2RC的反應(yīng)優(yōu)選按下所述進(jìn)行首先在碳酸氫鈉存在下與三光氣反應(yīng)以得到中間體異氰酸酯，然后按照有機(jī)化學(xué)雜志(J.Org.Chem),61,3929-3934中記載的方法與RCOH反應(yīng)。
成鹽反應(yīng)可以在常規(guī)條件下進(jìn)行。例如，為成鹽R1的末端CO2H基團(tuán)，在鈉鹽如碳酸鈉或碳酸氫鈉或碳酸氫鉀存在下進(jìn)行操作。
同樣，可以用G表示的胺或氨基胍與酸的成鹽反應(yīng)也在常規(guī)條件下進(jìn)行。例如，用氫氯酸(例如其醚溶液)進(jìn)行操作。
產(chǎn)物的任選酯化反應(yīng)在本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)條件下進(jìn)行。
操作通常通過(guò)使式(Ⅰ)酸或其官能衍生物與能夠?qū)膈セ脑噭┓磻?yīng)來(lái)進(jìn)行，其中所述酯基的非窮舉實(shí)例見(jiàn)上文R6的定義中所述。
通式(F1),(F′1),(F2),(F3)化合物是已知的或者按照本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法制備。
不同反應(yīng)試劑的連接次序還可以改變。也就是說(shuō)，可以將式(Ⅱ)化合物先與式F3化合物反應(yīng)，以得到中間體式(Ⅲc)產(chǎn)物
然后再將所得式(Ⅲc)化合物與式(F1),(F′1)或(F2)反應(yīng)以得到相應(yīng)的式(Ⅳa)和(Ⅳb)產(chǎn)物。
在這種情形下，有必要對(duì)式(Ⅲc)產(chǎn)物中的G基團(tuán)加以保護(hù)，然后在加入(F1),(F′1)或(F2)之后再按照本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法脫保護(hù)(T.W.Greene有機(jī)合成中的保護(hù)基(Protective Group inOrganic Synthesis),John,Wiley and Sons Inc.1991)。
CO-R6的β位上的NH-P([B]代表CH-NHP基團(tuán))的脫保護(hù)反應(yīng)還可以按照本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法進(jìn)行，特別是當(dāng)P代表CO2tBu基團(tuán)時(shí)，可以通過(guò)脫羧反應(yīng)例如與鹽酸作用來(lái)進(jìn)行。
骨不斷進(jìn)行著包括骨吸收和骨形成在內(nèi)的動(dòng)力學(xué)過(guò)程。這些過(guò)程通過(guò)特定細(xì)胞介導(dǎo)。骨形成是成骨細(xì)胞引起礦質(zhì)基質(zhì)沉積的結(jié)果，而骨的吸收則是破骨細(xì)胞溶解這種骨基質(zhì)的結(jié)果。骨指疏松癥的特征在于這種骨基質(zhì)干性脫失。活化成熟的破骨細(xì)胞在粘連于骨基質(zhì)后通過(guò)在粘連區(qū)內(nèi)分泌蛋白水解酶和質(zhì)子而吸收骨質(zhì)，結(jié)果當(dāng)破骨細(xì)胞脫離骨后，在骨的表面形成凹陷或洞穴。
式(Ⅰ)化合物及其可藥用加成鹽具有有用的藥理性質(zhì)。這些化合物抑制通過(guò)破骨細(xì)胞介導(dǎo)的骨吸收。
因此，本發(fā)明化合物可用于治療骨基質(zhì)脫失所致的疾病，特別是骨質(zhì)疏松癥，噁性血鈣過(guò)多癥，起因于骨轉(zhuǎn)移的骨質(zhì)減少，牙周炎，甲狀旁腺機(jī)能亢進(jìn)，風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)周圍侵蝕，佩吉特病，由于靜止不動(dòng)、糖皮質(zhì)激素治療或者雄性或雌性性激素缺乏誘發(fā)的骨質(zhì)減少。
它們還可用于治療炎癥，癌癥和包括動(dòng)脈粥樣硬化，再狹窄復(fù)發(fā)在內(nèi)的心血管病。
最后，本發(fā)明化合物還可用作血管生成抑制劑，因而可用于治療腫瘤(通過(guò)抑制它們的新血管生成作用)，糖尿病性視網(wǎng)膜病和腎病。
近年來(lái)的研究已經(jīng)表明，破骨細(xì)胞在骨上的固定由受體整聯(lián)蛋白介導(dǎo)。
整聯(lián)蛋白是受體介導(dǎo)細(xì)胞/細(xì)胞，尤其是為細(xì)胞/基質(zhì)粘連過(guò)程的超家族受體，特別包括作為血小板受體(血纖維蛋白原)的α2bβ3和作為玻連蛋白受體的ανβ3，以及骨涎蛋白如骨橋蛋白和血小板反應(yīng)蛋白。
這些由兩種亞單位α和β組成的異二聚體蛋白受體對(duì)二價(jià)離子如特別是Ca2+具有固定位點(diǎn)，并對(duì)由其亞單位性質(zhì)預(yù)先確定的配體具有識(shí)別位點(diǎn)。
ανβ3受體是一種在許多細(xì)胞，包括內(nèi)皮細(xì)胞，平滑肌細(xì)胞，破骨細(xì)胞和癌細(xì)胞在內(nèi)的細(xì)胞中都有表達(dá)的跨膜糖蛋白，因此本發(fā)明化合物具有多種潛在用途。
ανβ3受體在破骨細(xì)胞膜上的表述是粘連/吸收過(guò)程的基礎(chǔ)，有助于細(xì)胞骨架的組構(gòu)，并與骨質(zhì)疏松有關(guān)(ROSS等，生物化學(xué)雜志(J.Biol.Chem.),1987,262,7703)。
ανβ3受體在動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞中的表達(dá)能夠刺激它們朝新內(nèi)膜方向遷移，進(jìn)而導(dǎo)致形成動(dòng)脈粥樣硬化和血管成形術(shù)后再狹窄(Btown等，心血管研究(Cardiovascular Res.)(1994),28,1815)。
內(nèi)皮細(xì)胞分泌生長(zhǎng)因子，它們促使內(nèi)皮進(jìn)行有絲分裂，有助于形成新血管(血管生成)。血管原刺激引起新血管形成。因此，整聯(lián)蛋白ανβ3的拮抗劑通過(guò)誘導(dǎo)血管原血管編程性細(xì)胞死亡能引起癌癥腫瘤消退。(Brook等，細(xì)胞(Cell)(1994)79,1157)。
整聯(lián)蛋白ανβ3的天然配體全都包含有RGD單元(Arg-Gly-Asp)。包含這種RGD單元的肽以及抗ανβ3抗體以其抑制牙齒吸收、防止破骨細(xì)胞粘連在礦化基質(zhì)上的能力而為人所知(Horton等，實(shí)驗(yàn)細(xì)胞研究(Exp.Cell.Res.)(1991),195,368)。
分離自蛇毒的鋸鱗血抑肽也含有RGD單元，這種肽據(jù)說(shuō)為破骨細(xì)胞粘連于骨的抑制劑，因此是體外組織培養(yǎng)(Sato等，細(xì)胞生物學(xué)雜志(J.Cell.Biol.)(1990),111,1713)和大鼠活體(Fisher等，內(nèi)分泌學(xué)(Endocrionlogy)(1993),132,1441)骨吸收的強(qiáng)效抑制劑。
特別是，式(Ⅰ)化合物及其可藥用加成鹽和它們的酯通過(guò)抑制與它們的天然配體的結(jié)合而對(duì)玻連蛋白受體αν63或含有玻連蛋白作為配體(ανβ1,ανβ5,α2bβ3)的其它整聯(lián)蛋白具有親和性。
因此，這種性質(zhì)使得本發(fā)明化合物可用于預(yù)防或治療一些疾病，這些疾病的病理基礎(chǔ)是由能夠與玻連蛋白受體相互作用的配體或細(xì)胞所致。
這些化合物還對(duì)能夠通過(guò)RGD三肽序列與其配體相互作用的其它整聯(lián)蛋白具有活性。這樣使得本發(fā)明化合物具有可用于治療與這些受體有關(guān)的病理學(xué)病癥的藥理性質(zhì)。
因此，這種對(duì)整聯(lián)蛋白的活性使得本發(fā)明化合物適于治療多種疾病，例如上文或雜志Dermot Cox DN&P8(4)1995年5月，197-205中所述的病癥(該文章的內(nèi)容納入本申請(qǐng)中)。
因此，本發(fā)明主題是提供用作藥物的式(Ⅰ)化合物及其可藥用加成鹽和其酯。
在本發(fā)明的藥物中，特別值得提及的是實(shí)驗(yàn)部分所述的化合物。
在這些產(chǎn)物中，本發(fā)明主題特別是作為藥物，上文所列的式(Ⅰ)化合物。
劑量根據(jù)受治療的病癥，給藥途徑而變化例如，對(duì)成人來(lái)說(shuō)口服途徑給藥劑量可以為1mg-1000mg/天。
本發(fā)明還擴(kuò)展到作為活性成分，至少含有一種上文所述藥物的藥物組合物。
式(Ⅰ)化合物可通過(guò)消化，胃腸外或局部途徑(例如經(jīng)皮途徑)使用。它們可以配制成簡(jiǎn)單的或糖包衣片劑，膠囊劑，顆粒劑，栓劑，陰道栓，注射劑，軟膏劑，霜?jiǎng)z劑，微球劑，納球劑，移植劑，斑貼劑，它們均按照常規(guī)復(fù)發(fā)制備。
一種或多種活性成分可以與這些藥物組合物中通常使用的賦形劑一同摻合，所述賦形劑如滑石，阿拉伯膠，乳糖，淀粉，硬脂酸鎂，椰子油，含水或無(wú)水賦形劑，動(dòng)物或植物源脂肪物質(zhì)，石蠟衍生物，甘醇，各種濕潤(rùn)劑，分散劑或乳化劑，防腐劑。
式(Ⅱ)中羥基位于位置10上，且位于位置8上的R2和位于位置9上的R3代表O-(Alk)或O-(CH2)0-3-Ar基團(tuán)，R4與R5均為氫原子的化合物按照歐洲專利申請(qǐng)N°0729933和下文實(shí)驗(yàn)部分(制備例2)中所述方法制備。
兩種其它位置異構(gòu)體可按照下述方式制備使式(ⅡA)化合物
與脫烷基化劑反應(yīng)，以得到式(ⅡB)化合物
隨后使式(ⅡB)化合物或者在堿性介質(zhì)中與二醇保護(hù)劑反應(yīng)，以便選擇性得到式(ⅡC)化合物
其中P表示二醇保護(hù)劑的剩余部分，接著使該化合物依次與酚保護(hù)劑、二醇的脫保護(hù)劑、烷基化劑以及酚的脫保護(hù)劑反應(yīng)，以得到式(ⅡD)化合物，即OH位于8位上的三取代式(Ⅱ)化合物
或者依次與酚保護(hù)劑、烷基化劑和脫保護(hù)劑反應(yīng)，以得到式(ⅡE)化合物，即OH位于9位上的三取代式(Ⅱ)化合物
脫烷基化劑優(yōu)選指諸如三溴化硼或氯化鋁之類的試劑。
與式(ⅡB)產(chǎn)物反應(yīng)的二醇保護(hù)劑可以是硼衍生物如硼酸，硼酸三烷基酯(例如硼酸三甲酯或三乙酯)，或者還可以為硼砂。
酚保護(hù)劑具體指鹵化物，如甲磺酰氯或溴或甲苯磺酰氯或溴，或者還指芐化衍生物如甲苯磺酸芐酯或甲磺酸芐酯。
二醇脫保護(hù)劑具體指強(qiáng)酸如鹽酸，硫酸或?qū)妆交撬?，用硼衍生物保護(hù)的情況下，或者還有氧化劑，例如過(guò)氧化氫。
烷基化劑是指用于烷基化酚類化合物的本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何標(biāo)準(zhǔn)試劑。例如，可提及的包括烷基鹵如甲基或乙基氯，硫酸烷基酯如硫酸甲基或乙基酯，或重氮甲烷。
脫保護(hù)劑是指諸如蘇打，碳酸鉀或碳酸鈉或碳酸鉀之類的堿。
式(Ⅱ)中R2、R3、R4和R5代表氫原子的單取代產(chǎn)物按照歐洲專利申請(qǐng)N°0729933中所述的類似方法制備(ⅰ)使式(a)化合物
其中O-(Alk)位于烷基羧基的間或?qū)ξ唬?Alk)的定義同上，與鹵化劑反應(yīng)，以得到相應(yīng)的?；u，(ⅱ)將所得酰基鹵與式(b)試劑反應(yīng)
其中R(Ⅰ)和R(Ⅱ)相同或不同且代表含1-6個(gè)碳原子的烷基，或者R(Ⅰ)和R(Ⅱ)與它們所鍵連的氮原子一起表示任選含有另一個(gè)選自O(shè)和N雜原子的5或6元飽和或不飽和雜環(huán)，以得到式(c)化合物
(ⅲ)使所得式(c)化合物與鹵化劑反應(yīng)，得到式(d)化合物
其中Hal1代表鹵原子，(ⅳ)將所得式(d)化合物與路易斯酸反應(yīng)，得到式(e)化合物
(ⅴ)將所得式(e)化合物與脫烷基化劑反應(yīng)，以得到式(ⅡF)產(chǎn)物，即預(yù)期的式(Ⅱ)單取代產(chǎn)物
其中R2代表O-(Alk)或0-(CH2)0-3-Ar,R3,R4和R5為氫原子和OH,且R2位于8,9或10位上的式(Ⅱ)雙取代產(chǎn)物可按照上文所述方法以式(a′)化合物為起始物質(zhì)制備
其中O-(Alk)和R2位于烷基羧基的間或?qū)ξ簧希琑2為O-(Alk)或-(CH2)0-3-Ar基團(tuán)。將上述起始物質(zhì)依次進(jìn)行反應(yīng)(ⅰ),(ⅱ),(ⅲ),(ⅳ)和(ⅴ)，最終得到式(ⅡG)產(chǎn)物，即預(yù)期的式(Ⅱ)雙取代產(chǎn)物
與式(a)或(a′)化合物反應(yīng)的鹵化劑為例如亞硫酰氯，草酰氯或?yàn)橹苽漉；u用的本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的任何其它試劑。
式(b)試劑由環(huán)戊酮和仲胺(例如二乙胺，哌啶，哌嗪或者且優(yōu)選嗎啉)制備。操作在強(qiáng)酸催化劑(例如對(duì)甲苯磺酸)存在下進(jìn)行。
式(b)烯胺與?；u的反應(yīng)優(yōu)選在叔胺如三乙胺或吡啶存在下進(jìn)行。
與式(c)化合物或其式(c′)二取代等同物反應(yīng)的鹵化劑可以為例如亞硫酰氯，光氣，磷酰氯或(優(yōu)選)草酰氯。
用于環(huán)化式(d)化合物或其式(d′)二取代等同物的路易斯酸為例如氯化鋁，四氯化鈦，或優(yōu)選氯化鐵，或四氯化錫。如同前述反應(yīng)一樣，該反應(yīng)也可以在例如有鹵化溶劑(例如二氯甲烷，氯仿或二氯乙烷)存在下進(jìn)行。
用于脫烷基化式(e)化合物或其式(e′)二取代等同物以得到相應(yīng)酚類化合物的試劑優(yōu)選為氯化鋁或三溴化硼。
其中R4不為氫原子的式(Ⅱ)產(chǎn)物按照本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的芳香親電和親核取代標(biāo)準(zhǔn)方法制備。
其中R5不為氫原子的式(Ⅱ)產(chǎn)物按照本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法，特別是歐洲專利申請(qǐng)N°0729933中所述的方法制備，即先進(jìn)行鹵化反應(yīng)，隨后與水和合適的醇反應(yīng)。
其中R5為氫原子且位置1-2間存在雙鍵的式(Ⅱ)產(chǎn)物按照本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法，特別是歐洲專利申請(qǐng)N°0729933中所述的方法制備，即通過(guò)在無(wú)水酸性介質(zhì)中進(jìn)行脫水或脫烷氧基化作用來(lái)制備。
其中位置5處的環(huán)與位置7處的環(huán)之間的連接處為飽和的式(Ⅱ)產(chǎn)物可按照標(biāo)準(zhǔn)氫化方法特別是在鈀-炭存在下氫化相應(yīng)的雙鍵而制備。
R4、R5的導(dǎo)入以及氫化反應(yīng)優(yōu)選在式(ⅡA),(ⅡD),(ⅡE),(ⅡF)或(ⅡG)化合物上進(jìn)行。
其中相互成鄰位關(guān)系的R2和R3形成如上所述-O-(CRdRe)n-O型環(huán)的式(Ⅱ)產(chǎn)物也可以按照本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法，特別是下文實(shí)驗(yàn)部分所述的方法制備。
本發(fā)明主題還涉及作為中間產(chǎn)物的式(Ⅲa),(Ⅲb),(Ⅲc)和(Ⅱ)產(chǎn)物，當(dāng)然，式(Ⅱc)化合物和下列化合物是排除在外的-2,3,5,6-四氫-9,10-二甲氧基-8-羥基-苯并[e]薁-4(1H)-酮，和2,3,5,6-四氫-8,9-二甲氧基-10-羥基-苯并[e]薁-4(1H)-酮。
這兩個(gè)化合物的制備見(jiàn)下文實(shí)驗(yàn)部分。
下列實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明并不局限于此。
制備例1:2,3,5,6-四氫-8,9,10-三羥基-苯并[e]-薁-4(1H)-酮步驟A:3,4,5-三甲氧基-苯丙酸取6.8g碳酸鉀加到21.44g3,4,5-三甲氧基苯基丙烯酸和45ml水的溶液中，然后在1.8g含10％鈀的活性炭存在下在1200-1300毫巴壓力下氫化1小時(shí)，吸收2.11氫氣。過(guò)濾反應(yīng)介質(zhì)，繼之用水洗滌，并用50ml鹽酸(2N)酸化。分離后，將殘留物用水洗滌，然后在室溫下減壓干燥。這樣得到19.8g預(yù)期產(chǎn)物(M.P.=102-103℃).
IR光譜(CHCl3)羰基{1712cm-1(max) 芳香骨架{1592cm-1{1740cm-1(sh) {1510cm-1NMR光譜(CDCl3)2,69(t)}=C-CH2-CH2-CO 3,83(s)}3H3CO-C-2,91(t)} | 3,85(s)}6.43(s)芳香質(zhì)子2H10.50(m)活動(dòng)性的質(zhì)子1H步驟B:3,4,5-三甲氧基-苯丙酰氯將6g步驟A所得產(chǎn)物在21ml二氯甲烷中的溶液用1.5g硫酸鎂干燥，過(guò)濾后，冷卻反應(yīng)混合物至5℃，加入2.2ml亞硫酰氯，然后在室溫下攪拌所得溶液20小時(shí)。減壓蒸發(fā)至干，繼續(xù)用環(huán)己烷夾帶兩次，這樣收集到6.46g預(yù)期產(chǎn)物。(M.P.=60℃).
步驟C:2-[3-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1-氧代丙基]-環(huán)戊酮在+5℃下，于1小時(shí)30分鐘內(nèi)向冷卻到5℃的包含2.4ml1-(N-嗎啉基)環(huán)戊烯(其制備見(jiàn)下文所述)，2.31ml三乙胺和15ml二氯甲烷的溶液內(nèi)加入4.27g步驟B所得產(chǎn)物在15ml二氯甲烷中的溶液。在+5℃下攪拌反應(yīng)介質(zhì)1小時(shí)，然后在升溫反應(yīng)介質(zhì)的同時(shí)加入10ml2N鹽酸，接著在環(huán)境溫度下攪拌1小時(shí)，潷析，用水和碳酸氫鈉飽和溶液依次洗滌，干燥，過(guò)濾并減壓蒸發(fā)至干，得到5g預(yù)期產(chǎn)物。該粗產(chǎn)物按下所述方式純化溶于10體積乙酸乙酯，用N蘇打溶液提取，堿相用乙酸乙酯洗滌，然后用濃鹽酸酸化至pH1，繼之用二氯甲烷提取，干燥并減壓蒸發(fā)至干。收集到2.75g純化產(chǎn)物。
IR光譜(CHCl3)羰基{1741cm-1芳族骨架{1592cm-1{1709cm-1{1509cm-1羰基{1658cm-1+C=C {1610cm-1包含螯合形式的OHNMR光譜(CDCl3)6.41(s)芳香質(zhì)子，2H(積分基線)3.81(s)3.82(s)}共9H3.83(s)3.85(s)}4種類型CH3O-C=1.86(m)CH2-CH2-CH2-1.5H1.95-2,95(m)共～7.5H，包括數(shù)種類型的=C-CH23.26(t)～0.40
11.2(m寬)活動(dòng)性的H步驟C中所用的1-(N-嗎啉基)-環(huán)戊烯的制備將100ml環(huán)己烷、20ml環(huán)戊酮、50ml嗎啉以及100mg對(duì)-甲苯磺酸構(gòu)成的溶液在回流狀態(tài)下攪拌4小時(shí)30分鐘，同時(shí)除去所形成的水。減壓蒸發(fā)溶劑后，在12-13毫巴壓力下進(jìn)行蒸餾，收集到27.44g所需產(chǎn)物(B.P.=83℃).
步驟D:1-(2-氯-1-環(huán)戊烯-1-基)-3-(3,4,5-三甲氧基苯基)丙-1-酮室溫下，在23g步驟C所得產(chǎn)物和230ml氯仿形成的溶液內(nèi)加入13ml草酰氯。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時(shí)，然后減壓濃縮，并繼續(xù)用環(huán)己烷夾帶兩次。得到28g粗產(chǎn)物。然后在50ml環(huán)己烷和50ml二異丙基醚混合物中經(jīng)部分濃縮后重結(jié)晶上述粗產(chǎn)物。析出結(jié)晶，用二異丙醚洗滌，減壓干燥后得到16.24g預(yù)期產(chǎn)物。(M.P.=93℃)。
IR光譜(CHCl3):
1659cm-1羰基1599cm-11586cm-1:C=C+芳香骨架1508cm-1NMR光譜CDCl31.93(m)中心CH22.69(m)-2.81(m)環(huán)戊烯的C-CH2-C=質(zhì)子2.85(t,J=7.5)-3.08(t,J=7.5)其余=C-CH2-C質(zhì)子2.44:CH3-C=3.68-3.81所有OCH3質(zhì)子6.59-6.68(d,j=2)間位偶合的芳香CH=7.31-7.80(d,j=8)芳香質(zhì)子步驟E:2,3,5,6-四氫-8,9,10-三甲氧基-苯并[e]薁-4(1H)-酮將900mg步驟D所得產(chǎn)物、9ml1,2-二氯乙烷和0.9ml氯化錫在室溫下一同攪拌20小時(shí)。然后加入9ml冰水，潷析混合物，并用水洗滌，然后再用二氯甲烷提取一次，繼之用硫酸鎂干燥，過(guò)濾并減壓蒸發(fā)至干，得到1g預(yù)期(粗制)產(chǎn)物。通過(guò)硅膠色譜純化所得粗產(chǎn)物，依次采用含10％和25％乙酸乙酯的環(huán)己烷洗脫。濃縮后，收集到700mg產(chǎn)物，在5ml正己烷中結(jié)晶，接著冷卻到0℃，分離，用少量正己烷洗滌，然后在室溫下減壓干燥，得到630mg預(yù)期產(chǎn)物。
(M.P.=101-102 ℃).
NMR光譜(CDCl3):
1.86(m)中心CH22.65(dd)2H} 3.84}2.72(t) 2H}其余CH2質(zhì)子 3.86}OMe質(zhì)子2.84(dd)2H} 3.90}3.062H}6.59(s)芳香H步驟F:2,3,5,6-四氫-8,9,10-三羥基-苯并[e]薁-4(1H)-酮如制備例1a的步驟B所述進(jìn)行操作，得到預(yù)期的脫甲基產(chǎn)物。
制備例1a:2,3,5,6-四氫-8,9,10-三羥基-苯并[e]薁-4(1H)-酮步驟A:2,3,5,6-四氫-8,9,10-三甲氧基-苯并[e]薁-4(1H)-酮將60g制備例2所得的產(chǎn)物，600ml1,2-二氯乙烷，342ml2N蘇打，1.2g丁基溴化銨和33ml硫酸二甲酯在20℃下一起攪拌2小時(shí)30分鐘。然后加入39ml三乙胺以分解過(guò)量的硫酸二甲酯，并在20℃±2℃下攪拌1小時(shí)。隨后加入342ml軟化水，再在20℃+2℃下攪拌15分鐘，然后潷析，將水相用1,2-二氯乙烷(2×120ml)提取。合并1,2-二氯乙烷相，依次用4×240ml軟化水、1×300ml N鹽酸、3×240ml軟化水洗滌(直至為中性為止)。合并的有機(jī)相用硫酸鈉干燥，過(guò)濾并在83℃下常壓濃縮至480ml殘留體積。
步驟B:2,3,5,6-四氫-8,9,10-三羥基-苯并[e]薁-4(1H)-酮將步驟(A)中所得的480ml溶液與102.3g無(wú)水氯化鋁一起加熱回流1小時(shí)。冷卻介質(zhì)到0℃±2℃，然后在2小時(shí)內(nèi)加入預(yù)先冷卻到大約0℃的600ml軟化水和192ml純硫酸(濃)混合物，期間保持反應(yīng)介質(zhì)溫度低于20℃。在20℃±2℃下于5分鐘內(nèi)加入300ml軟化水，并在20℃±2℃下攪拌16小時(shí)，繼之分離，用1,2-二氯乙烷洗滌兩次，每次60ml，然后用軟化水洗滌，減壓干燥，得到52.2g預(yù)期產(chǎn)物。
制備例2:8,9-二甲氧基-10-羥基-2,3,5,6-四氫-苯并[e]薁-4(1H)-酮步驟A:3,4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)-磺?；鵠氧基]-苯丙酸如制備例1步驟A所述，采用29.76g 3,4-二甲氧基-5-[[[(4-甲基苯基)-磺酰基]氧基]苯基]-肉桂酸(其制備見(jiàn)下文所述)，43.5g碳酸鉀，60ml甲醇和1.48g活性炭(含10％鈀)進(jìn)行操作。得到28.33g預(yù)期產(chǎn)物，為無(wú)色結(jié)晶(M.P.=48-149℃).
UV光譜(EtOH)對(duì)于M=380.4max 226nm ε=22100infl 263nm ε=2000infl 269nm ε=2400max 274nm ε=2800infl 279nm ε=2500infl 307nm ε=450NMR光譜(CDCl3)2,45(s)CH3-2,61(m)=C-CH2-CH2-C= 3,68(s)2 CH3O-C=2,86(m) 3,81(s)6,61(d,j=2) 7,32(dl)H3H56,65(d,j=2)H4H67,80(dl)H2H6步驟B:3,4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)-磺?；鵠氧基]-苯丙酰鹵如制備例1步驟B所述，用1.9g步驟A所得產(chǎn)物，9.5ml二氯甲烷和0.7ml亞硫酰氯進(jìn)行操作。得到2.2.4g預(yù)期產(chǎn)物，該產(chǎn)物直接用于下一步驟中。
步驟C:2-[3-[3,4-二甲氧基-5-[[(4-甲氧基苯基)磺?；鵠氧基]苯基]-1-氧代丙基]-環(huán)戊酮如制備例1步驟C所述，以2.24g步驟B所得的酰氯為起始原料，并使用770mg1-(N-嗎啉基)-環(huán)戊烯(制備例1步驟C中所制)，6ml二氯甲烷和0.77ml三乙胺進(jìn)行操作。經(jīng)用二異丙醚重結(jié)晶后，得到1.27g預(yù)期產(chǎn)物(M.p.=84℃).
IR光譜(CHCl3)羰基{1742cm-1O-SO2{1374cm-1{1709cm-11178cm-11658cm-1C=C+芳香骨架{1608cm-11599cm-11586cm-11508cm-1NMR光譜(CDCl3)2.44(s)CH3-O3.67(s) }2OCH33.79(s)3.81(s)}6.59-6.65(m)芳香2H(O的鄰位)7.32(wd)H3H57.89(wd)H2H613.58(寬m)烯醇形式OH1.8-3.4(m)10-11H其它質(zhì)子UV光譜1-EtOH(+二噁烷)對(duì)于M=446.52max 225nmε=23000max 282nmε=7900infl 270,277,290,300,313nm2-EtOH(0.1N NaOH)mzx 310nmε=21600infl 268,272,276nm
步驟D:1-(2-氯-1-環(huán)戊烯-1-基)-3-[3,4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)磺酰基]氧基]-苯基]-丙-1-酮如制備例1步驟D所述，采用8.7g步驟C所得產(chǎn)物，70ml氯仿和3.5ml草酰氯進(jìn)行操作。用二異丙醚結(jié)晶后，得到7.75g預(yù)期產(chǎn)物(M.P.=73℃)。該產(chǎn)物直接用于下一步驟中。
通過(guò)用2.5體積二氯甲烷和5體積二異丙醚重結(jié)晶，繼之濃縮到3體積，分離，用二異丙醚洗滌并在室溫下減壓干燥得到分析樣品(M.P.=77-78℃)。
IR光譜(CHCl3)羰基{1659cm-1芳香C=C:{1599cm-1-1586cm-1-1508cm-1UV光譜(EtOH)max 227nm ε=26100infl 248nmε=12800infl 272nmε=5300infl 280nmε=3200infl 320nmNMR光譜(CDCl3)1.93(m)中心-C-CH2-C-}2.69(m)}C-CH2-C=}2.81(m)} }2.85(t,J=7.5)}其余的=C-CH2-C質(zhì)子3.08(t,J=7.5)}2.44 CH3-C=3.68}OCH3質(zhì)子3.81}6.59(d,J=2)芳香CH6.68(d,J=2)間位偶合7.31(d,J=8)}7.80(d,J=8)}步驟E:8,9-二甲氧基-10-[[(4-甲基苯基)磺?；鵠氧基]-2,3,5,6-四氫-苯并[e]薁-4(1H)-酮室溫下，在2.32g步驟C所得產(chǎn)物的50ml1,2-二氯乙烷溶液內(nèi)加入1.65g98％氯化鐵?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?8小時(shí)，然后傾入冰水混合物內(nèi)，劇烈攪拌15分鐘，然后用二氯甲烷提取。提取液用水和氯化鈉飽和水溶液依次洗滌。干燥及減壓蒸發(fā)至干后，得到2.15g粗產(chǎn)物，硅膠層析，用含50％乙酸乙酯的環(huán)己烷洗脫，收集到1.8g產(chǎn)物，將它們?cè)俅螌游霾⒂寐确?二異丙醚混合物重結(jié)晶，得到720mg預(yù)期產(chǎn)物(M.P.=138℃)。
IR光譜(CHCl3)羰基{1650cm-1{1599cm-1C=C+ {1556cm-1芳香骨架 {1512cm-1-1498cm-1UV光譜(EtOH)max 230nmε=25300infl 254nm ε=9400max 323nmε=10300NMR光譜(CDCl3)～1.61(m)(2H)中心CH2～2.41 Ph-CH3～2.50-2.80
3.88(s)}OCH3質(zhì)子3.90(s)}6.74 H47.21(d)}C-Ph-SO27.64(d)}步驟F:8,9-二甲氧基-10-羥基-2,3,5,6-四氫-苯并[e]薁-4(1H)-酮將350g上面步驟E所得產(chǎn)物，1750ml甲醇，350ml軟化水和350ml純凈苛性蘇打堿水(濃縮)的混合物加熱回流2小時(shí)。冷卻反應(yīng)介質(zhì)到大約2℃±2℃，然后在45分鐘內(nèi)加入467ml濃鹽酸，期間保持溫度為2℃±2℃。隨后在10分鐘內(nèi)加入1645ml軟化水，并維持溫度為2℃±2℃。析出所形成的結(jié)晶，在20℃下每次用700ml軟化水進(jìn)行澄清洗滌5次，然后在40℃下減壓干燥，以得到199.1g預(yù)期產(chǎn)物。
制備例2開(kāi)頭使用的3,4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)磺酰基]氧基]-肉桂酸的制備步驟A:3,4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)磺?；鵠氧基]苯甲酸甲酯在室溫及攪拌下，于10分鐘內(nèi)在200g五倍子酸甲酯和2升二氯甲烷的混合物中加入303ml三乙胺。溶解后，冷卻反應(yīng)介質(zhì)到0-5℃，然后在此溫度下于1小時(shí)內(nèi)加入130ml二氯二甲基硅烷，接著在此溫度下進(jìn)一步攪拌30分鐘。在保持0-5℃下，于25分鐘內(nèi)加入303.2ml三乙胺，然后在15分鐘內(nèi)加入227.6g甲苯磺酰氯。在0-5℃下繼續(xù)攪拌1小時(shí)，然后在攪拌下于10分鐘內(nèi)先加入200ml乙酸，然后加入500ml軟化水，期間溫度升至20-22℃，并在20℃下續(xù)攪拌15分鐘。減壓下以恒定體積(3.3l)蒸除二氯甲烷，并用軟化水替代它們，在20℃下攪拌2小時(shí)，然后分離，用軟化水洗滌，得到523g(濕重)3,4-二羥基-5[[(4-甲基苯基)磺?；鵠氧基]苯甲酸甲酯(3-甲苯磺酰基倍酸甲酯)。將所得潮濕產(chǎn)物溶于2.17l蘇打(2N)和2.17l二氯甲烷中。在20℃攪拌至溶解，然后在20℃下加入18g四丁基溴化銨，隨后再在20℃下于15分鐘內(nèi)加入237ml硫酸二甲酯。反應(yīng)介質(zhì)在20-22℃下攪拌1.5小時(shí)。在20-22℃下加入78ml三乙胺并在20-22℃下攪拌過(guò)夜，繼之潷析并用400ml軟化水洗滌。往有機(jī)相中加入20ml純凈乙酸，繼之?dāng)嚢?5分鐘，加入400ml軟化水，爾后潷析。首先在常壓下濃縮，然后在60℃外部溫度下于40mmHg下減壓濃縮合并的有機(jī)相至干。用400ml甲醇進(jìn)行夾帶，然后將所得的無(wú)水提取物溶于600ml甲醇，加熱回流至產(chǎn)物完全溶解，繼之冷卻到0-5℃，在這一溫度下攪拌1小時(shí)。分離后，用200ml甲醇在-10℃下洗滌兩次，然后在40℃下減壓干燥，得到330.4g 3,4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)磺?；鵠氧基]苯甲酸甲酯。將此粗產(chǎn)物用330ml甲苯重結(jié)晶。在-10℃下攪拌2小時(shí)后，進(jìn)行分離，繼之用82ml甲苯洗滌兩次，冷卻到-15℃，然后在40℃下減壓干燥，得到230.3g純凈預(yù)期產(chǎn)物。
步驟B:3,4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)磺?；鵠氧基]肉桂酸a)將600ml甲苯冷卻到0℃，然后在0℃下加入202ml70％Vitride的甲苯溶液，并在0-2℃下于1小時(shí)內(nèi)加入67.6ml嗎啉，溫度升至18℃。將如此得到的溶液立刻用于下一步驟中。
b)將200g步驟A中所得的3,4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)磺?；鵠氧基]苯甲酸甲酯和1400ml甲苯在20-22℃一起攪拌10分鐘至完全溶解為止。在10℃下于1小時(shí)內(nèi)加入上面所得的試劑溶液。續(xù)攪拌1小時(shí)，溫度升至18℃。在10℃下于1小內(nèi)加入預(yù)冷卻到10℃的200ml濃硫酸和1000ml軟化水的溶液。在20℃攪拌16小時(shí)，然后潷析有機(jī)相，用5×200ml軟化水洗滌，干燥，過(guò)濾并用3×100ml二氯甲烷洗滌。如此得到的中間體醛溶液直接用于下一步驟中。
c)將上面得到的中間體醛溶液，200ml2-甲基吡啶，120g丙二酸和20ml哌啶在70℃±2℃下一起加熱16小時(shí)(同時(shí)在常壓下除去二氯甲烷)。冷卻反應(yīng)介質(zhì)到20-22℃，在保持這一溫度下，于15分鐘內(nèi)加入200ml濃鹽酸和400ml軟化水溶液。在20-22℃攪拌2小時(shí)后，冷卻到0℃，析出所形成的結(jié)晶，用軟化水洗滌，并在40℃下減壓干燥，得到171.7g預(yù)期產(chǎn)物3,4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)磺?；鵠氧基]-肉桂酸。
制備例3:9,10-二甲氧基-8-羥基-2,3,5,6-四氫-苯并[e]薁-4(1H)-酮步驟A:9,10-二羥基-8-[[(4-甲基苯基)磺?；鵠氧基]-2,3,5,6-四氫-苯并[e]薁-4(1H)-酮將30g按照制備例1或1a制得的2,3,5,6-四氫-8,9,10-三羥基-苯并[e]薁-4(1H)-酮，300ml四氫呋喃，60ml三乙胺和12.9ml硼酸三甲酯一起在20℃±2℃下攪拌1小時(shí)30分鐘。加入30g甲苯磺酰氯并在20℃±2℃下攪拌16小時(shí)，然后在20℃±2℃攪拌10分鐘，將反應(yīng)介質(zhì)傾入到攪拌著的900ml軟化水和159ml濃鹽酸的混合物中，然后加入90ml四氫呋喃和60ml二氯甲烷。在20℃攪拌所得溶液1小時(shí)，然后加入150ml二氯甲烷，并繼續(xù)攪拌15分鐘，繼之潷析，用2×75ml二氯甲烷再提取。合并的有機(jī)相用4×150ml軟化水洗滌，潷析并用75ml二氯甲烷再提取，在20毫巴壓力下減壓濃縮至蒸餾至50℃時(shí)停止，得到47.6g預(yù)期產(chǎn)物。
步驟B:9,10-二甲氧基-8-[[(4-甲基苯基)磺?；鵠氧基]-2,3,5,6-四氫-苯并[e]薁-4(1H)-酮將47.6g上步所得產(chǎn)物，300ml二氯甲烷，300ml蘇打(2N),0.6g四丁基溴化銨和30ml硫酸二甲酯在20℃下一起攪拌16小時(shí)。然后加入30ml三乙胺以分解過(guò)量的硫酸二甲酯，在20℃±2℃下進(jìn)一步攪拌反應(yīng)介質(zhì)1小時(shí)，然后加入150ml軟化水，繼續(xù)攪拌15分鐘，隨后潷析。水相用2×75ml二氯甲烷再提取，合并的有機(jī)相依次用3×120ml軟化水和120ml N鹽酸以及3×120ml軟化水洗滌，合并有機(jī)相并用硫酸鈉干燥，然后在20℃±2℃及攪拌下于1小時(shí)內(nèi)加入120g硅膠(60目)，并在20℃下進(jìn)一步攪拌1小時(shí)，接著過(guò)濾，用二氯甲烷洗滌并在50℃減壓濃縮至干，得到47.4g預(yù)期產(chǎn)物。該粗產(chǎn)物通過(guò)用390ml乙醇重結(jié)晶純化，蒸餾出90ml乙醇后，在0℃±2℃下攪拌3小時(shí)。使之干燥，用30ml乙醇在0℃下洗滌，然后在40℃減壓干燥，得到41.1g預(yù)期產(chǎn)物(M.P.=129℃).
步驟C:9,10-二甲氧基-8-羥基-2,3,5,6-四氫苯并[e]薁-4(1H)-酮向含10g步驟B所得的9,10-二甲氧基-8-(((4-甲基苯基)磺?；?氧基)-2,3,5,6-四氫-苯并[e]薁-4(1H)-酮和100ml甲醇的懸浮液中依次加入4.5g碳酸鉀和10ml三乙胺。加熱回流反應(yīng)介質(zhì)1小時(shí)，加20ml乙酸酸化，然后加入20ml水。用二氯甲烷進(jìn)行提取，水洗提取液，在40℃下減壓蒸除溶劑，得到5.7g預(yù)期產(chǎn)物。
制備例4:2,3,5,6-四氫-8-羥基-9-甲氧基-苯并[e]薁-4(1H)-酮和2,3,5,6-四氫-9-羥基-8-甲氧基-苯并[e]薁-4(1H)-酮以與制備例2步驟B、C、D、E和F等同的方式進(jìn)行操作，但采用3-(3,4-二甲氧基-苯基)丙酸為起始原料，得到1.08g包含單羥基化產(chǎn)物混合物(8-OH/9-OMe和9-OH/8-OMe)的粗產(chǎn)物，將其通過(guò)硅膠色譜分離，使用環(huán)己烷/乙酸乙酯混合物(7/3)為洗脫劑。從而得到下述兩種位置異構(gòu)體8-OH/9-OMe O.494g Rf(環(huán)己烷/乙酸乙酯6/4)=0.428-OMe/9-OH 0.041g Rg(環(huán)己烷/乙酸乙酯6/4)=0.33制備例5:2,3,5,6-四氫-8-羥基-10-甲氧基-苯并[e]薁-4(1H)-酮和2,3,5,6-四氫-10-羥基-8-甲氧基-苯并[e]薁-4(1H)-酮以與制備例2步驟B、C、D、E和F等同的方式進(jìn)行操作，但采用3-(3,5-二甲氧基苯基)丙酸為起始原料，得到1.428g包含單羥基化產(chǎn)物(8-OH/10-OMe和10-OH/8-OMe)和二羥基化產(chǎn)物(8-OH/10-OH)的混合物，然后通過(guò)硅膠色譜進(jìn)行分離，使用環(huán)己烷/乙酸乙酯混合物(7/3)洗脫。
制備例6:2,3,5,6-四氫-9-羥基-苯并[e]薁-4(1H)-酮以與制備例2步驟B、C、D、E和F等同的方式進(jìn)行操作，但采用3-(4-甲氧基苯基)丙酸為起始原料，得到0.448g預(yù)期產(chǎn)物。隨后采用三溴化硼進(jìn)行脫甲基反應(yīng)。
(Rf=0.15環(huán)己烷/乙酸乙酯7/3).
制備例7:2,3,5,6-四氫-8-羥基-苯并[e]薁-4(1H)-酮以與制備例2步驟B、C、D、E和F等同的方式進(jìn)行操作，但采用10.0g3-(3-甲氧基苯基)丙酸為起始原料。得到2.9g預(yù)期產(chǎn)物。隨后采用三溴化硼進(jìn)行脫甲基反應(yīng)。
(Rf=0.15二氯甲烷/乙酸乙酯95/5).
制備例8:(DL)-4-溴-2-(苯基甲氧羰基氨基)丁酸甲酯將25g2-氨基-4-丁內(nèi)酰胺氫溴酸鹽的200ml乙酸溶液與24％氣態(tài)氫溴酸在密封容器中于120℃下一起攪拌18小時(shí)。冷卻反應(yīng)介質(zhì)到室溫，并恢復(fù)到大氣壓環(huán)境，然后減壓濃縮。將殘留物溶于200ml甲醇，然后通氫氯酸氣流2小時(shí)，期間保持溫度低于35℃。減壓蒸除溶劑，并將得到的2-氨基-4-溴丁酸甲酯再溶于250ml丙酮和100ml水中，隨后將此溶液用2N蘇打中和，然后緩慢加入35ml氯甲酸芐酯。攪拌48小時(shí)，繼之過(guò)濾，用乙酸乙酯提取，并減壓蒸除溶劑，殘留物通過(guò)硅膠層析(洗脫劑環(huán)己烷-乙酸乙酯7-3)，回收27.9g預(yù)期產(chǎn)物。M.P.=90℃.
制備例9:4-溴-2-(叔丁氧基羰基氨基)丁酸甲酯取5.7g制備例8制備的2-氨基-4-溴丁酸甲酯在120ml甲醇中與24ml三乙胺和9g二碳酸二叔丁酯一起室溫下攪拌48小時(shí)。蒸除溶劑，將殘留物溶于水和二氯甲烷，繼之過(guò)濾，用二氯甲烷提取，再次蒸除溶劑，并硅膠層析所得殘留物(洗脫劑環(huán)己酮-ACOEt-TEA7-3-0.5)，得到1.575g預(yù)期產(chǎn)物，Rf=0.52。
制備例10:4-(3-嘧啶基)-1H-咪唑-1-丙醇將505mg乙醇鈉于12.5ml二甲基甲酰胺中混合，然后依次加入1g3-(1H-咪唑-4-基)嘧啶和0.64ml氯丙醇，并在55℃下攪拌16小時(shí)。隨后減壓蒸除溶劑，并層析所得殘留物(洗脫劑CH2Cl2-MeOH98-2),回收1.015g預(yù)期產(chǎn)物。
IR光譜(CHCl3)OH3626cm-1+締合峰雜環(huán)1601,1578,1551,1499cm-1制備例11六氫-2H-1,3-二氮雜-2-酮腙將包含3.3g硝基胍，7ml水，3.47g碳酸鉀和5g二胺二鹽酸鹽的懸浮液在65-70℃下加熱1小時(shí)；加入10.5g鋅，然后在室溫下攪拌30分鐘，隨后加入2ml乙酸，再于40℃加熱全部反應(yīng)物1小時(shí)，繼之過(guò)濾，然后依次加入3g氯化銨和4g碳酸氫鈉。用二氯甲烷進(jìn)行提取，減壓蒸除溶劑，并通過(guò)硅膠層析所得殘留物(洗脫劑CH2Cl2-MeOH-NH4OH8-4-2)，回收1.650g預(yù)期產(chǎn)物。
制備例12:3a,4,5,6,7,7a-六氫-2-(丙硫基)-1H-苯并咪唑一氫溴酸鹽將1g八氫-2H-苯并咪唑-2-硫酮和1.3ml溴丙烷在20ml乙醇中加熱回流至完全溶解。減壓蒸除溶劑，并將殘留物溶于少量二氯甲烷。然后加入異丙醚，再次減壓蒸除溶劑，并在異丙醚中重結(jié)晶，使脫水，并加以干燥(收率95％)。
M.P.=136℃.
實(shí)施例1:7-((4-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫苯并(e)薁-8-基)氧基)-庚酸步驟A；7-(4-氧代)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫苯并(e)薁-8-基)氧基)-庚酸甲酯將含0.684g 2,,3,5,6-四氫-8-羥基-9,10-二甲氧基-苯并[e]薁-4(1H)-酮(制備例3),12ml二甲基甲酰胺(DMF),12ml四氫呋喃(THF),0.7g碳酸鉀和0.835g 7-溴庚酸甲酯的懸浮液在40℃下攪拌4小時(shí)。減壓蒸發(fā)之后，通過(guò)硅膠層析所得粗產(chǎn)物，使用二氯甲烷(CH2Cl2)/丙酮混合物(95/5)洗脫。得到1.000g精制產(chǎn)物，為黃色油狀物。
Rf CH2Cl2/丙酮95/5:0.5IR(CHCl3)C=O 1732cm-1OMe 1438cm-1共軛酮1641cm-1C=C 1592cm-1,1557cm-1,1492cm-1+芳香骨架步驟B:7-((4-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-苯并(e)薁-8-基)氧基)-庚酸甲酯將含0.5g上一步驟A產(chǎn)物、5ml乙醇和0.330g氨基胍鹽酸鹽的懸浮液在室溫下攪拌48小時(shí)，減壓蒸除溶劑，將所得粗產(chǎn)物通過(guò)硅膠色譜純化，用CH2Cl2/甲醇(MeOH)/氫氧化銨混合物(80/20/4)洗脫。從而得到0.466g純化產(chǎn)物，為白色泡沫形式。
Rf CH2Cl2/甲醇(MeOH)/氫氧化銨80/20/4:0.8IR(Nujol)NH/NH23495cm-1,3155cm-1+締合峰C=O1731cm-1C=N 1674cm-1C=C 1625cm-1芳香骨架1595cm-1(F)NH/NH21534cm-1,1491cm-1步驟C:7-((4-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫苯并(e)薁-8-基)氧基)-庚酸將含0.44g上一步所得產(chǎn)物、5ml乙醇和2ml1N蘇打的溶液在室溫下攪拌3小時(shí)，然后用2ml1N鹽酸中和。減壓蒸發(fā)后，將所得粗產(chǎn)物通過(guò)硅膠色譜純化，用CH2Cl2/甲醇(MeOH)/氫氧化銨混合物(80/20/4)洗脫。得到0.192g精制用甲醇重結(jié)晶的產(chǎn)物。
RfCH2Cl2/甲醇(MeOH)/氫氧化銨80/20/4:0.17NMR(D2O+1滴1N蘇打)3.92wt 2HCH2-O2.17t 2HCH2-COOH1.34m 4H
1.55m 2H中心CH2+CH2-C=1.70m 4H2.50-2.90m8H6.62s 1H芳香H73.64s,3H OCH33.73s 3H OCH3微量分析％計(jì)算值C 62.86 H 7.47 N 12.21％實(shí)測(cè)值C 62.9 H 7.5 N 12.1以與實(shí)施例1步驟A、B和C等同的方式，采用2,3,5,6-四氫-8-羥基-9,10-二甲氧基苯并[e]薁-4(1H)-酮(制備例3)和不同的烷基化劑和G-NH2為起始原料進(jìn)行操作，制備下列式(Ⅰ)產(chǎn)物實(shí)施例2:4-((4-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫苯并(e)薁-8-基)氧基)丁酸實(shí)施例3:4-((4-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫苯并(e)薁-8-基)氧基)戊酸實(shí)施例4:5-((4-(((氨基)羰基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)戊酸實(shí)施例5:6-((4-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)己酸實(shí)施例6:5-(9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-4-(4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-8-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸實(shí)施例7:5-((4-(((氨基)硫代羰基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)戊酸實(shí)施例8:6-(4-((4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-己酸實(shí)施例9:5-((4-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-3,3-二甲基-4-氧代戊酸實(shí)施例10:5-(4-((4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-3,3-二甲基-4-氧代戊酸實(shí)施例11:4-(4-((4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸實(shí)施例12:4-((9,10-二甲氧基-4-((1,4,5,6-四氫-2-嘧啶基)亞肼基)-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸實(shí)施例13:2-(4-((4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-乙酸實(shí)施例14:3-(4-((4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-丙酸
(1)二氯甲烷/甲醇/氨80/20/4
實(shí)施例15:5-((4-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫苯并(e)薁-8-基)氧基)戊酸鹽酸鹽取86mg實(shí)施例3產(chǎn)物與2ml水和410.1N鹽酸混合，數(shù)分鐘后，凍干介質(zhì)，得到91mg預(yù)期鹽。
實(shí)施例16:4-((4-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-8,9-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-10-苯并(e)薁基)氧基)丁酸實(shí)施例17:5-((4-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-8,9-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-10-苯并(e)薁基)氧基)戊酸如實(shí)施例1步驟A,B和C所述進(jìn)行操作，但以2,3,5,6-四氫-10-羥基-8,9-二甲氧基-苯并[e]薁-4-(1H)-酮(制備例2)為起始物料。
實(shí)施例18:4-((4-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-8,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-9-苯并(e)薁基)氧基)丁酸實(shí)施例19:5-((4-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-8,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-9-苯并(e)薁基)氧基)戊酸如實(shí)施例1步驟A,B和C所述進(jìn)行操作,但以2,3,5,6-四氫-9-羥基-8,10-二甲氧基-苯并[e]薁-4-(1H)-酮為起始物料。
實(shí)施例20:4-((4-((4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-1,2,3,4,5,6-六氫-9-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸步驟A:4-(4-氧代)-1,2,3,4,5,6-六氫苯并(e)薁-9-基)氧基)-丁酸將含0.6g2,3,5,6-四氫-9-羥基-苯并[e]薁-4(1H)-酮(制備例6),12ml二甲基甲酰胺(DMF),12ml四氫呋喃(THF),0.7g碳酸鉀和0.7ml溴丁酸乙酯的懸浮液在室溫下攪拌過(guò)夜。減壓蒸發(fā)后，硅膠層析所得粗產(chǎn)物，使用二氯甲烷混合物(二氯甲烷/丙酮95/5)洗脫。這樣得到0.608mg純化產(chǎn)物，為黃色油狀物形式。
IR(CHCl3)C=O 1728cm-1共軛酮1641cm-1芳香C=C 1610cm-1,1590cm-1,1569cm-1,1449cm-1步驟B:4-((4-((4,5-二氫-1H-味唑啉-2-基)亞肼基)-1,2,3,4,5,6-六氫苯并(e)薁-9-基)氧基)-丁酸乙酯將608mg上述步驟A的產(chǎn)物，l0ml丁醇和600mg下述環(huán)狀氨基胍氫溴酸鹽(4,5-二氫-1H-咪唑啉-2-基)-肼，一同攪拌回流24小時(shí)，減壓蒸除溶劑，并將所得粗產(chǎn)物通過(guò)硅膠色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(MeOH)/氫氧化銨混合物(80/20/4)洗脫。得到0.604g預(yù)期產(chǎn)物。
IR(CHCl3)=C-NH-3451cm-1C=O 1728cm-1(酯)C=N +C=C+芳香基1627cm-1(F),1568cm-1,1548cm-1,1497cm-1,1488cm-1步驟C:7-((4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-1,2,3,4,5,6-六氫苯并(e)薁-9-基)氧基)-丁酸將含0.604g前一步產(chǎn)物，8ml乙醇，5ml四氫呋喃和2ml 2N蘇打的溶液在室溫下攪拌4小時(shí)，然后加2ml鹽酸中和。減壓蒸發(fā)后，將粗產(chǎn)物通過(guò)硅膠色譜純化，用二氯甲烷(CH2Cl2)/甲醇(MeOH)/氫氧化銨混合物(80/20/4)洗脫。得到0.298g用甲醇重結(jié)晶的純化產(chǎn)物。
Rf(二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨80/20/4):0.2NMR(D2O+1滴1N蘇打)1.71(w)2HO-CH2-CH2-CH2-CO1.96(m)2H位置2(環(huán)戊烯)的CH22.30(t)2H CH2-CO2.50-2.75 8H CH2-C3.45(ws)4HCH2-N=
3.89(wt)2HPh-O-CH2-C6.70(m)2H H10和H87.00(d,J=8)H7實(shí)施例21:4-(4-((4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸操作如實(shí)施例20所述進(jìn)行，但以0.856g 2,3,5,6-四氫-8-羥基-苯并[e]薁-4(1H)-酮(制備例7)為起始原料，得到0.299g預(yù)期產(chǎn)物。
Rf(二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨80/20/4):0.27實(shí)施例22:5-((8-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-6,7,8,9,10,11-六氫-薁并(5,6-d)-1,3-苯并二氧雜環(huán)戊烯-4-基)氧基)-戊酸步驟A:5-(((4-氧代)-9,10-二羥基-1,2,3,4,5,6-六氫-苯并(e)薁-9-基)氧基)戊酸乙酯1)保護(hù)惰性氣氛下，在10g2,3,5,6-四氫-8,9,10-三羥基-苯并[e]薁-4(1H)-酮(制備例1)的100ml四氫呋喃溶液內(nèi)加入4.42ml三甲氧基硼酸酯和20.4ml三乙胺，期間保持溫度在37-39℃之間，然后在室溫下攪拌反應(yīng)混合物3小時(shí)。
2)烷基化和脫保護(hù)接著，加入9.7ml5-溴戊酸乙酯，100ml二甲基甲酰胺和8.4g碳酸鉀，并在60℃下攪拌2天。然后加120ml水和50ml36N濃鹽酸處理反應(yīng)混合物，再攪拌1小時(shí)，然后加入乙酸乙酯，分離有機(jī)相和水相。隨后洗滌有機(jī)相，干燥并減壓蒸發(fā)。所得粗產(chǎn)物通過(guò)硅膠色譜純化，用環(huán)己烷/乙酸乙酯混合物(70/30)洗脫。得到5.2g預(yù)期純凈產(chǎn)物。
Rf(二氯甲烷/甲醇95/5)=0.82Rf(環(huán)己烷/乙酸乙酯70/30)=0.23步驟B:5-(((8-氧代)-6,7,8,9,10,11-六氫薁并(5,6-d)-1,3-苯并二氧雜環(huán)戊烯-4-基)氧基))-戊酸乙酯60℃下，將2.5g上一步產(chǎn)物，17ml二甲基甲酰胺，3.6g CsF和1.4ml二溴甲烷在惰性氣氛下一同混合1小時(shí)。過(guò)濾和甲醇沖洗后，進(jìn)行減壓蒸發(fā)，并將所得粗產(chǎn)物通過(guò)硅膠色譜純化，用環(huán)己烷/乙酸乙酯混合物(85/15)洗脫。得到1.73g預(yù)期純凈產(chǎn)物。
(M.P.=118℃)Rf(環(huán)己烷/乙酸乙酯80/20)=0.25步驟C:5-((8-((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-6,7,8,9,10,11-六氫-薁并(5,6-d)-1,3-苯并二氧雜環(huán)戊烯-4-基)氧基)-戊酸乙酯將551mg上步所得產(chǎn)物和467mg氨基胍鹽酸鹽在120℃一同混合過(guò)夜，然后進(jìn)行色譜純化，用二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨混合物(80/20/4)洗脫。得到174mg預(yù)期產(chǎn)物。
Rf(二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨80/20/4)0.98步驟D:5-((8-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-6,7,8,9,10,11-六氫-薁并(5,6-d)-1,3-苯并二氧雜環(huán)戊烯-4-基)氧基)戊酸將274mg上步所得產(chǎn)物和1.86ml1N蘇打溶液在室溫下一同混合1小時(shí)30分鐘，然后用1N鹽酸溶液中和混合物，并減壓蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過(guò)色譜純化，用二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨混合物(80/20/4)洗脫。得到141mg預(yù)期產(chǎn)物。
Rf(二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨80/20/4)0.23NMR(DMSO)1.55-1.9(m)4HO-CH2-CH2-CH2-CH2-CO1.55-1.9(m)2H位置2(環(huán)戊烯)的CH22.26(t)2H CH2-CO2.65-3.00(m)8H CH2-C=4.07(t) 2H O-CH2-CH2-5.95(s)2H -O-CH2-O6.61(m) 1H H8活動(dòng)的H(m，寬) NH-C(=NH)-NH2實(shí)施例23:5-((8-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-2,2-二苯基-6,7,8,9,10,11-六氫-薁并(4,5-e)-1,3-苯并二氧雜環(huán)戊烯-4-基)氧基)-戊酸如上一實(shí)施例所述進(jìn)行操作，但以374mg上一實(shí)施例步驟A所得產(chǎn)物和0.19ml二苯基二氯甲烷為起始原料。得到198mg預(yù)期產(chǎn)物。
Rf(二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨80/20/4)=0.17實(shí)施例24:O-[4-[(4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸步驟A:0-[(4-氧代)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸甲酯室溫下，將0.6g2,3,5,6-四氫-8-羥基-9,10-二甲氧基-苯并[e]薁-4(1H)-酮(制備例3),10ml二甲基甲酰胺(DMF),10ml四氫呋喃，1g碳酸鉀和0.867g如制備例8所述制得的(DL)-4-溴-2-(苯基甲氧基羰基氨基)丁酸甲酯一起攪拌過(guò)夜。減壓蒸發(fā)之后，硅膠層析粗產(chǎn)物，用二氯甲烷(CH2Cl2)/丙酮混合物(95/5)洗脫。由此得到1.166g精制產(chǎn)物，為黃色油狀物。
IR(CHCl3)C=O 1740cm-1(sh.),1721cm-1共軛酮1642cm-1芳香C=C 1593cm-1,1559cm-1,1508cm-1,1493cm-1步驟B:O-[4-[(4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)--9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸甲酯將539mg步驟A產(chǎn)物，15ml丁醇和600mg下述環(huán)狀氨基胍氫溴酸鹽(4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)-肼，在120℃下一起攪拌24小時(shí)，然后減壓蒸除溶劑，并將粗產(chǎn)物通過(guò)硅膠色譜純化，用CH2Cl2/甲醇(MeOH)/氫氧化銨混合物(80/20/4)洗脫。由此得到0.641g預(yù)期產(chǎn)物。
IR(CHCl3)=C-NH-3451cm-1+締合峰C=O 1740cm-1(sh.),1720cm-1(max)C=N+C=C+芳香骨架+酰胺Ⅱ:1667cm-1(F),1606cm-1,1508cm-1,1490cm-1.
步驟C:O-[4-[(4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸將含0.6g上一步所得產(chǎn)物、10ml乙醇和2ml2N蘇打的溶液在室溫下攪拌2小時(shí)，然后用2ml鹽酸中和。減壓蒸發(fā)之后，將粗產(chǎn)物通過(guò)硅膠色譜純化，用CH2Cl2/甲醇(MeOH)/氫氧化銨混合物(80/20/4)洗脫。這樣在用甲醇重結(jié)晶后得到0.349g精制產(chǎn)物。
Rf CH2Cl2/甲醇(MeOH)/氫氧化銨80/20/4:0.37實(shí)施例25:O-[4-[(4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸按與實(shí)施例24等同的方法進(jìn)行操作，但其中使用0.428g2,3,5,6-四氫-9-羥基-苯并[e]薁-4(1H)-酮(制備例7)為起始原料。得到245mg預(yù)期產(chǎn)物。
Rf CH2Cl2/甲醇(MeOH)/氫氧化銨80/20/4:0.5實(shí)施例26:O-[4-[(1,2,3,4-四氫-6-嘧啶基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸步驟A:O-[9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-4-[(1,4,5,6-四氫-2-嘧啶基)亞肼基]-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸甲酯的一氫溴酸鹽如實(shí)施例24步驟B所述，以200mg如實(shí)施例24步驟A所述得到的產(chǎn)物在2ml丁醇中的溶液和74.5mg四氫-2(1H)-嘧啶酮腙一氫溴酸鹽為原料進(jìn)行操作，并加熱回流16小時(shí)。隨后使反應(yīng)介質(zhì)恢復(fù)到室溫，用二氯甲烷進(jìn)行提取，干燥提取液，然后減壓蒸除溶劑，得到152mg預(yù)期產(chǎn)物。
步驟B:O-[4-[(1,2,3,4-四氫-6-嘧啶基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸如實(shí)施例24步驟C所述，采用131mg上面步驟A所得產(chǎn)物在1.3ml乙醇和0.43ml N蘇打中的溶液進(jìn)行操作。加入N鹽酸中和反應(yīng)介質(zhì)，然后蒸除溶劑。經(jīng)過(guò)濾和干燥后，得到78mg預(yù)期產(chǎn)物。M.P.=172℃.
NMR光譜(CDCl3)1.90(m) (2H) 位置9的CH22.03(m)中心CH22.36(m) (2H)2.60-3.00(8H) =C-CH2質(zhì)子3.48(wm) (4H) =N-CH2質(zhì)子3.77(s)3.78(s)(9H)=C-OMe質(zhì)子4.01(m)(1H)4.17 φ-O-CH2
4.67(p)=C-CH-N-C=514(ws)COO-CH2-φ6.13(d)=C-NH-CH6.49(ws) H4≈7.36(m)(5H) φ-C實(shí)施例27:O-(9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-4-[(1,4,5,6-四氫-2-嘧啶基]亞肼基]-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸(2,3-二羥基丙基)酯步驟A:O-[9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-4-[(1,4,5,6-四氫-2-嘧啶基)亞肼基]-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸[(2,2-二甲基-1,3-二氧戊環(huán)-4-基)甲基]酯將0.3g如實(shí)施例26所述制得的產(chǎn)物在1ml二甲基甲酰胺和1ml二氯甲烷中的溶液、96mg1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和68mg1-羥基苯并三唑水合物冷卻到0℃。室溫下攪拌混合物30分鐘，加入0.06ml solketal，并繼續(xù)攪拌3小時(shí)30分鐘。加水稀釋反應(yīng)介質(zhì)，用二氯甲烷進(jìn)行提取，將所得的0.6g粗產(chǎn)物進(jìn)行硅膠色譜純化(洗脫劑CHCl2-MeOH 90-10)回收。得到0.352g預(yù)期產(chǎn)物。
IR光譜(CHCl3)NH3400cm-1C=O 1745(sh),1719cm-1C=N,C=C }芳香骨架，酰胺Ⅱ}1672(F),1645,1597,1565(f),1507,1492cm-1步驟B:O-(9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-4-[(1,4,5,6-四氫-2-嘧啶基)亞肼基]-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸(2,3-二羥基丙基)酯將0.320g步驟A所得產(chǎn)物在3ml乙醇和1ml2N鹽酸中于室溫下攪拌6小時(shí)。蒸發(fā)溶劑后，進(jìn)行硅膠層析(洗脫劑CH2Cl2-MeOH-NH4OH80-20-4)，得到0.112g預(yù)期產(chǎn)物。
NMR光譜(CDCl3)1.88(m) (2H)}1.98}中心CH2和位置9的CH2
2.36 }2.60-3.10(8H) =C-CH23.43(m)(4H) =N-N-CH23.79(s) }3.81 } φ-OMe3.60-3.90 O-CH2-CH-O≈4.00-4.30 } COO-CH2-CH} φ-O-CH2-CH24.64(m)(1H) =C-CH-N-C=5.13(s) COO-CH2-φ6.53(s) H47.20-7.38 φ-C質(zhì)子實(shí)施例28:O-[4-[(4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基]-N-[(8-喹啉基)磺酰基]-DL-高絲氨酸步驟A:O-(9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-4-氧代-8-苯并(e)薁基)-N-[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]-DL-高絲氨酸甲酯將4.1g按制備例3所述制得的產(chǎn)物和5g按制備例9所述制得的產(chǎn)物在50ml二甲基甲酰胺和50ml四氫呋喃中，于5g碳酸鉀和二甲氨基吡啶存在下，在室溫下攪拌65小時(shí)。然后減壓蒸除溶劑，殘留物通過(guò)硅膠色譜純化(洗脫劑CH2Cl2-丙酮95-5)，得到7.3g預(yù)期產(chǎn)物。
IR光譜(CDCl3)=C-NH3430cm-1C=O 1744cm-1(甲酯)1710cm-1(NH-BOC)1648cm-1(共軛酮)芳香骨架+酰胺Ⅱ 1593,1559,1493 cm-1步驟B:O-(9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-四氫-4-氧代-8-苯并(e)薁基)-DL-高絲氨酸甲酯的一鹽酸鹽將10ml氫氯酸的乙酸乙酯溶液分三批加到6g步驟A所制產(chǎn)物的10ml乙酸乙酯溶液中，然后在室溫下攪拌16小時(shí)。減壓蒸除溶劑，得到0.656g預(yù)期產(chǎn)物，該產(chǎn)物直接用于下一步驟中。
步驟C:O-(9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-4-氧代-8-苯并(e)薁基)-N-[(8-喹啉基)磺酰基]-DL-高絲氨酸將上步所得的0.656g產(chǎn)物溶于5ml二氯甲烷，加入1ml三乙胺和0.638g8-氯磺酰基喹啉，并在室溫下攪拌2小時(shí)。減壓蒸發(fā)溶劑后，進(jìn)行硅膠層析(洗脫劑CHCl2-MeOH95-5)，得到0.956g預(yù)期產(chǎn)物。
步驟D:O-[4-[(4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基]-N-[(8-喹啉基)磺?；鵠-DL-高絲氨酸甲酯將0.9g前一步驟A的產(chǎn)物，5ml丁醇和0.6g下述環(huán)狀氨基胍氫溴酸鹽(4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)肼，一起在120℃攪拌16小時(shí)，然后減壓蒸除溶劑，得到0.786g預(yù)期產(chǎn)物，該產(chǎn)物直接用于下一步驟中。
步驟E:O-[4-[(4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基]-N-[(8-喹啉基)磺?；鵠-DL-高絲氨酸將含0.786g上一步驟所得產(chǎn)物，5ml甲醇與2ml2N蘇打的溶液在室溫下攪拌2小時(shí)，然后加2ml2N鹽酸中和，并繼續(xù)攪拌10分鐘。減壓蒸發(fā)后，將所得粗產(chǎn)物通過(guò)硅膠色譜純化，使用CH2Cl2-甲醇-氫氧化銨混合物(80-20-4)洗脫。在經(jīng)甲醇重結(jié)晶后得到0.438g預(yù)期產(chǎn)物。
Rf=0.40(CH2Cl2-MeOH-NH40H80-20-4).
NMR光譜(DMSO):
1.81(ws)位置9的CH22.40-3.20 =C-CH2質(zhì)子3.35(w)=N-CH2質(zhì)子，3.55(ws) =C-OMe質(zhì)子6.63(ws)H47.58(dd)H′37.67(t) H′68.19(d),8.29(d) H′5和H′78.45(d) H48.90(d) H2
7.31(ws)}7.97}活動(dòng)的H10.40(f)}12.62 }實(shí)施例29:O-[4-[(4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基]-N-[[3-[4-(3-吡啶基)-1H-咪唑-1-基]丙氧基]羰基]-DL-高絲氨酸的一鹽酸鹽步驟A:4-[[9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-4-氧代-8-苯并(e)薁基]氧基]-2-異氰酸基丁酸甲酯0℃下，將450mg實(shí)施例28步驟B所得的胺在10.2ml碳酸氫鈉飽和溶液和10.2ml二氯甲烷中攪拌10分鐘。然后在反應(yīng)介質(zhì)的有機(jī)相中加入204mg三光氣的2ml二氯甲烷溶液，攪拌10分鐘，然后用二氯甲烷提取，干燥提取液，減壓蒸除溶劑，得到430mg預(yù)期產(chǎn)物，該產(chǎn)物直接用于下一步驟中。
步驟B:O-[9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-4-氧代-8-苯并(e)薁基]-N-[[3-[4-(3-吡啶基)-1H-咪唑-1-基]丙氧基]羰基]-DL-高絲氨酸將430mg步驟A所得產(chǎn)物的20ml二氯甲烷溶液冷卻到0℃，加入414mg如制備例10所制醇的10ml二氯甲烷溶液。使反應(yīng)介質(zhì)溫度恢復(fù)到室溫，攪拌48小時(shí)，然后減壓蒸除溶劑，殘留物通過(guò)氧化鋁層析(洗脫劑CH2Cl2-MeOH)，回收298mg預(yù)期產(chǎn)物。
步驟C:O-[4-[(4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基]-N-[[3-[4-(3-吡啶基)-1H-咪唑-1-基]丙氧基]羰基]-DL-高絲氨酸的一氫溴酸鹽如實(shí)施例24步驟B所述，以277mg上面步驟B所得產(chǎn)物和164mg環(huán)狀氨基胍氫溴酸鹽的13ml丁醇的溶液為起始原料進(jìn)行操作。經(jīng)氧化鋁層析(洗脫劑CH2Cl2-MeOH95-5)后，得到289mg預(yù)期產(chǎn)物。
TR光譜(CHCl3)C=O1746(sh)1723(max)cm-1共軛體系 }+芳香骨架}1668,1625(F),1599(sh),1551,1509,1489 cm-1+酰胺Ⅱ }
OH 3618cm-1步驟D:0-[4-[(4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基]-N-[[3-[4-(3-吡啶基)-1H-咪唑-1-基]丙氧基]羰基]-DL-高絲氨酸的一鹽酸鹽在277mg上面步驟C所得產(chǎn)物的10ml乙醇中的溶液內(nèi)加入0.3ml N蘇打溶液，攪拌30分鐘，再加10ml水，然后使用N鹽酸酸化反應(yīng)介質(zhì)到pH2.5，減壓蒸除溶劑，殘留物通過(guò)硅膠層析(洗脫劑CH2Cl2-MeOH-NH4OH40-10-2)，減壓蒸發(fā)濾液，將殘留物溶于異丙醚，濾出沉淀，干燥后得到126mg預(yù)期產(chǎn)物。
NMR光譜(DMSO)1.78(m) (2H)}1.90-2.30(m)(2H)}3-CH21.60-2.90(m)(8H)CH2-C=3.53(ws) (≈4H)N-CH2-CH2-N3.69(s),3.71(s) CH3O-C=3.90-4.20(m)(7-8H) CH2和CH6.73(s) H47.20(d，寬) CO-NH-CH-7.35 (dd) H′58.04(d) H′48.37(wd)H′68.94(ws)H′27.72(s),7.80(s)CH=咪唑?qū)嵤├?0:5-[[4-[(4,5-二氫-4-氧代-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基]氧基]戊酸室溫下，將300mg實(shí)施例3步驟A所得產(chǎn)物的6ml乙醇的溶液與61mg碳酸氫鈉和0.7ml溴乙酸乙酯混合。蒸除溶劑，硅膠層析殘留物(洗脫劑CH2Cl2-MeOH95-5)，得到139mg中間體乙基酯。取110mg該酯與1ml乙醇在0.5ml2N蘇打存在下室溫混合2小時(shí)。采用2N鹽酸中和反應(yīng)介質(zhì)后，濾出所形成的沉淀物，干燥，回收44mg預(yù)期產(chǎn)物。
NMR光譜(DMSO)
≈1.73(m)(6H)中心CH2和位置9的CH22.30(t)(2H) =C-CH2(鏈)2.30-3.20=C-CH23.73(s),3.75(s) φ-OMe3.83(ws) =C-N-CH2-C=4.02(t) φ-O-CH26.76(s) H47.20(ws) (1H)}8.28(ws)(1H) }活動(dòng)的H12.04 (1H) }實(shí)施例31:O-[9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-4-[(4,5,6,7-四氫-1H-1,3-二氮雜-2-基)亞肼基]-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-D-高絲氨酸將1g實(shí)施例24步驟A所制產(chǎn)物的5ml丁醇溶液與0.9g制備例11所制的環(huán)狀氨基胍在130℃下一同混合16小時(shí)。減壓蒸發(fā)溶劑，殘留物通過(guò)硅膠層析(洗脫劑CH2Cl2-MeOH90-10)，得到0.8g中間體酯。然后將該產(chǎn)物在3ml甲醇中與2ml2N蘇打在室溫下一起攪拌1小時(shí)30分鐘。采用2N鹽酸中和反應(yīng)介質(zhì)后，減壓蒸發(fā)溶劑，殘留物再通過(guò)硅膠層析(洗脫劑CH2Cl2-MeOH-NH4OH90-15-2)，回收0.22g預(yù)期產(chǎn)物。
實(shí)施例32:0-[9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-4-[(3a,4,5,6,7,7a-六氫-1H-苯并咪唑-2-基)亞肼基]-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸如實(shí)施例24步驟B和C所述，以200mg實(shí)施例24步驟A所制產(chǎn)物和176mg如制備例12所制的環(huán)狀氨基胍為原料進(jìn)行操作。回收102mg中間體酯，其中取100mg該中間體進(jìn)行皂化反應(yīng)，得到59mg預(yù)期產(chǎn)物。
Rf=0.24(CH2Cl2-MeOH-NH4OH 85-15-3).
藥物組合物制備相應(yīng)含下列組分的片劑-實(shí)施例1產(chǎn)物 50mg-片劑用賦型劑(滑石，淀粉，硬脂酸鎂)SQ補(bǔ)加至120mg
本發(fā)明產(chǎn)物的藥理學(xué)研究1-研究本發(fā)明產(chǎn)物對(duì)玻連蛋白/玻連蛋白受體(ανβ3)結(jié)合的抑制作用方案用100μl人玻連蛋白溶液(2μg/ml)(參見(jiàn)Yatohgo等，Cell.,Structure and fraction 13:281-292(1988))(用涂布緩沖液稀釋)在4℃下涂布MaxiSorp 96-孔板過(guò)夜。
第二天，吸去孔內(nèi)物，然后在溫和攪拌下室溫固定配體(玻連蛋白)1小時(shí)(參見(jiàn)固定緩沖液)。
洗滌孔內(nèi)物六次(參見(jiàn)洗滌緩沖液)，然后依次向各孔中加入-40μl培養(yǎng)緩沖液，-10μl受試產(chǎn)物稀釋液，(產(chǎn)物用50/50DMSO-H2O稀釋)-50μl人ανβ3受體(參見(jiàn)Pyteal等酶方法(Methods Enzymol)(1987)144:475)(用培養(yǎng)緩沖液稀釋，稀釋度根據(jù)受體組以及配體調(diào)整)。
在溫和攪拌下，將配體，人ανβ3受體和受試產(chǎn)物在室溫下培養(yǎng)3小時(shí)。
再次洗滌孔六次，然后在100μl抗體4B12-HRP，偶聯(lián)于過(guò)氧化物酶的抗體存在下于室溫溫和攪拌培養(yǎng)2小時(shí)(其中的4B12-HRP抗體用培養(yǎng)緩沖液稀釋，稀釋度根據(jù)受體組加以調(diào)整)。
洗滌孔六次，然后借助過(guò)氧化物酶展示藥盒(TMB MicrowellPeroxidase Substrate System Kirkegaard:Ref.Cat.50-76-00)測(cè)試配體-受體結(jié)合。
這種藥盒包含一瓶底物(3,3′,5,5′-四甲基聯(lián)苯胺，0.4g/l)和一瓶B(0.02％H2O2的檸檬酸鹽/檸檬酸緩沖液溶液)。臨用時(shí)將一體積A液與一體積B液混合，然后以100μl/孔量分配反應(yīng)混合物。對(duì)于玻連蛋白/ανβ3進(jìn)行12小時(shí)酶促反應(yīng)，然后加入100μl1M磷酸終止培養(yǎng)。在450nm處測(cè)量光密度。
緩沖液-涂布緩沖液碳酸鹽0.05M,NaOH pH9.6-固定緩沖液含0.5％BSA的PBS(pH7.4)
-洗滌緩沖液含0.05％吐溫20的PBS(pH7.4)-培養(yǎng)緩沖液·50mM TRIS pH 7.4·0.5％BSA·0.05％吐溫20·1mM MnCl2·50μM CaCl2·50μM MgCl2·100mM NaCl.
結(jié)果表示繪制人玻連蛋白結(jié)合的百分?jǐn)?shù)作為每一受試產(chǎn)物濃度對(duì)數(shù)的函數(shù)曲線。
對(duì)于每一產(chǎn)物，按下式求出其IC50:
IC50=(BO+Bmin)/2BO=無(wú)任何產(chǎn)物存在下的最大結(jié)合Bmin=在最高濃度產(chǎn)物存在下的最小結(jié)合。
2．-小鼠顱蓋試驗(yàn)原理對(duì)妊娠雌性小鼠注射示蹤物劑量45Ca(CaCl2)，以便通過(guò)測(cè)量新生小鼠顱骨蓋釋放的45C來(lái)研究骨吸收。
目的體外研究分子對(duì)骨吸收的活性。
產(chǎn)物1)受試產(chǎn)物賦型劑DMSO,H2O/BSA(0.1％)劑量可變(篩選10μM).
2)對(duì)比產(chǎn)物鋸鱗血抑肽(參見(jiàn)．H-9010-BACHEM)賦型劑H2O/BSA劑量10μM3)放射性示蹤物CaCl2水溶液形式45Ca-參見(jiàn)CES3AMWESHAM或NEZ-013NEN.
賦型劑生理血清劑量25μCi/小鼠/0.4ml培養(yǎng)基補(bǔ)加有0.1％BSA和盤(pán)尼西林/鏈霉素的含酚紅(參見(jiàn)041-01535M/GIBCO)CMRL1066。
方法1)對(duì)妊娠小鼠(OF1，品系瑞士)注射45Caa)制備標(biāo)記溶液將190μl鈣母液(2mci/ml)加到6ml生理血清中。
b)注射在如妊娠的第17天，通過(guò)靜脈途徑對(duì)小鼠注射400μl上述溶液，即25μCi/小鼠。
2)去除組織(顱骨蓋)新生小鼠出生后第6天，斷頭處死，然后取頭顱，沿著后頸到前額切開(kāi)皮膚。用剪刀剪切出顱骨蓋，并利用鑿沿頂骨將顱骨切成兩個(gè)完全等同的半顱蓋(一個(gè)位于左面，另一個(gè)位于右面)。將其中的一個(gè)用作對(duì)照，而另一個(gè)則用于測(cè)試受研究產(chǎn)物。
3)“沖洗”相將每一半顱蓋置于24孔板(其中孔內(nèi)含有1ml培養(yǎng)基)的孔內(nèi)100μm聚乙烯和nylex支持體上，以避免與孔底部完全接觸。24小時(shí)后，將載有顱蓋的聚乙烯支持體移入到含1ml新鮮培養(yǎng)基和受試產(chǎn)物或它們的溶劑的新24-孔板中。從第一塊板的各孔中取出200μl培養(yǎng)基，進(jìn)行第一次放射性計(jì)數(shù)(A值)。
這種培養(yǎng)基變化使得與移出有關(guān)的機(jī)械應(yīng)力消除。
4)再“吸收”相將組織與研究產(chǎn)物接觸48小時(shí)后，從每孔中取出200μl培養(yǎng)基進(jìn)行計(jì)數(shù)(B值)，以測(cè)定在所謂的再吸收相期間從培養(yǎng)基中釋出的45Ca量。
然后將顱蓋在1ml5％三氯乙酸中完全脫去礦物質(zhì)。消化后再移出200μl進(jìn)行計(jì)數(shù)以測(cè)定骨中剩余的鈣量(C值)。
結(jié)果表示按照下式方程，計(jì)算每半顱蓋的骨吸收百分?jǐn)?shù)
％骨吸收=dpm B/dpm(A+B+C)×100dpm A+B+C的總和表示移出當(dāng)天每塊骨部分中45Ca的摻入量。
為測(cè)量產(chǎn)物的效果，對(duì)于每一點(diǎn)，計(jì)算處理孔與相應(yīng)的對(duì)照孔的骨吸收百分?jǐn)?shù)之比。如果產(chǎn)物抑制骨吸收，則會(huì)發(fā)現(xiàn)稱作吸收指數(shù)的數(shù)值在0到1之間，反之，如果產(chǎn)物加強(qiáng)骨吸收，則上述數(shù)值＞1。然后計(jì)算每種產(chǎn)物的6個(gè)指數(shù)的平均值(因每組6個(gè)點(diǎn))，得到每種產(chǎn)物的一個(gè)指數(shù)。如果用1減去此指數(shù)值，便得到產(chǎn)物的抑制率，也可以表示成百分率形式。
此外，通過(guò)比較點(diǎn)/點(diǎn)再吸收指數(shù)，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理(Student T-檢驗(yàn))。
結(jié)果
權(quán)利要求
1．通式(Ⅰ)化合物及其酸和堿加成鹽和它們的酯
其中R1代表-C≡C-[A]-[B]-COR6,-CH=CH-[A]-[B]-COR6,-(CH2)2-[A]-[B]-COR6,-O-[A]-[B]-COR6,-CH2CO-[A]-[B]-COR6基團(tuán)，-[A]-代表-衍生自含1-12個(gè)碳原子和1-6個(gè)選自氧、氮或硫原子的雜原子的飽和或不飽和、直鏈或支鏈結(jié)構(gòu)的二價(jià)烴基，-或衍生自含1-12個(gè)碳原子的飽和或不飽和、直鏈或支鏈無(wú)環(huán)烴的二價(jià)基團(tuán)，[B]代表苯基，CH[Z]基團(tuán)，或單鍵，Z代表氫原子，下列基團(tuán)之一(D)0-6-NRaRb,(D)0-6-NH-SO2-Rc,(D)0-6-NH-CO2-Rc,(D)0-6-NH-CO-Rc,(D)0-6-NH-SO2-NH-Rc,(D)0-6-NH-CO-NH-Rc,(D)0-6-CO2-Rc,(D)0-6-SO2-Rc,(D)0-6-CO-Rc或(D)0-6-Rc，其中(D)0-6表示衍生自含有0-6個(gè)碳原子的飽和或不飽和、直鏈或支鏈無(wú)環(huán)烴的二價(jià)基團(tuán)，Ra、Rb和Rc代表氫原子；(CH2)0-3-Ar基，其中Ar代表含有6-18個(gè)碳原子的碳環(huán)芳基；(CH2)0-3-Het基，其中Het代表衍生自含有1-9個(gè)碳原子和1-5個(gè)選自氧，氮或硫原子的雜原子的飽和或不飽和、芳族或非芳族雜環(huán)的基團(tuán)；(CH2)0-3-Alk基，其中Alk代表衍生自含有1-12個(gè)碳原子的飽和或不飽和、直鏈、支鏈或環(huán)狀非芳烴的基團(tuán)，基團(tuán)Het、Ar和A1k可以為未取代的或?yàn)槿〈?，或者Ra和Rb還可以與它們所連接的氮原子一起表示任選含有1個(gè)或多個(gè)選自氧，氮或硫原子的雜原子的飽和或不飽和芳族或非芳族含氮雜環(huán)，該基團(tuán)可以是取代的或未取代的，-R6代表羥基，O-Alk,O-Ar,NH2,NH-Alk,N(Alk)2基團(tuán)或L或D氨基酸的剩余部分，Alk和Ar的定義同上，且為取代或未取代的，-R2和R3相同或不同，或者代表氫原子，羥基，O-Alk基或O-(CH2)0-3-Ar基，其中Alk和Ar的定義如上，或者R2與R3一起形成-O-(CRdRe)n-O-型環(huán)，其中n為整數(shù)1-5,Rd和Re各自獨(dú)立表示氫原子，含有1-6個(gè)碳原子的烷基，或苯基，-R4代表氫原子，鹵原子，下列基團(tuán)之一羥基、氨基、硝基、氰基、CF3、含有1-12個(gè)碳原子的?；蝓Ｑ趸⑼榛?、鏈烯基、炔基、烷硫基、烷氧基、烷基氨基、二烷基氨基、二烷基氨基烷基、二烷基氨基烷氧基，其中術(shù)語(yǔ)烷基包含1-6個(gè)碳原子，-R5代表氫原子，羥基，鹵原子，O-Alk基團(tuán)或O-(CH2)0-3-Ar基團(tuán)，其中的Alk和Ar如上定義，-G代表式G1基團(tuán)
其中Rh為氫原子或如上所定義的Alk基團(tuán)，且(Het′)代表代表下述通式的雜環(huán)
其中(H)與N=C-NH-單元一起形成含1-9個(gè)碳原子和2-5個(gè)選自氧、氮和硫原子的雜原子的飽和或不飽和的單-或二環(huán)芳族或非芳族雜環(huán)的剩余部分，該基團(tuán)可以是取代的或未取代的，-或NRaRb基團(tuán)(基團(tuán)G2)，其中Ra和Rb的定義同上，-或定義同上的(Het)基團(tuán)(基團(tuán)G3)，-或-NRh-C(=X)-NHRc基團(tuán)(基團(tuán)G4)，其中X為硫或氧原子或NH，Rh和Rc的定義同上，-或-NRh-SO2Rc基團(tuán)(基團(tuán)G5)，其中Rh和Rc的定義同上，虛線代表任選的第二條鍵。R1,R2和R3可以在三環(huán)的8、9或10位。
2．權(quán)利要求1所述的通式(Ⅰ)化合物及其酸和堿加成鹽和它們的酯，所述化合物相應(yīng)地具有通式(Ⅰ′)結(jié)構(gòu)
其中R′1代表下列基團(tuán)之一-C≡C-[A′]-B′]-COR′6,-CH=CH-[A′]-[B′]-COR′6,-(CH2)2-[A′]-[B′]-COR′6,-O-[A′]-[B′]-COR′6,-CH2CO-[A′]-[B′]-COR′6,-[A′]-代表含1-6個(gè)碳原子的二價(jià)亞烷基、亞烯基或亞炔基，[B′]代表CH(Z′)基團(tuán)或單鍵，Z′代表氫原子，下列基團(tuán)之一(CH2)0-6-NRaRb,(CH2)0-6-NH-SO2-Rc,(CH2)0-6-NH-CO2-Rc,(CH2)0-6-NH-CO-Rc,(CH2)0-6-NH-SO2-NH-Rc,(CH2)0-6-NH-CO-NH-Rc,(CH2)0-6-CO2-Rc,(CH2)0-6-SO2-Rc,(CH2)0-6-CO-Rc或(CH2)0-6-Rc，其中Ra,Rb和Rc的定義同權(quán)利要求1,R′6代表OH，氨基或含有1-8個(gè)碳原子且任選被一個(gè)或多個(gè)選自羥基、氨基、苯基烷基氨基或二烷基氨基的基團(tuán)取代的烷氧基，R′2和R′3代表氫原子或甲氧基，且G的定義同權(quán)利要求1，虛線表示任選的第二條鍵。
3．權(quán)利要求1或2中所述的通式(Ⅰ)化合物及其酸和堿加成鹽和它們的酯，其中R6代表下列基團(tuán)之一-OH,-OCH3,-OCH2CH3,-O-(CH2)2-OH,
-O-(CH2)2-N-(CH3)2,-NH2或-O-(CH2)-苯基。
4．權(quán)利要求1,2或3中所述的通式(Ⅰ)化合物及其酸和堿加成鹽和它們的酯，其中R1代表O-(CH2)0-6CH(Z′)-COOH或-(CH2)0-7-CH(Z′)-COOH基團(tuán)。
5．權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的通式(Ⅰ)化合物及其酸和堿加成鹽和它們的酯，其中(Z′)為氫原子。
6．權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的通式(Ⅰ)化合物及其酸和堿加成鹽和它們的酯，其中(Z′)為(CH2)0-6-NH-CO2-Rc或(CH2)0-6-NHRb基團(tuán)，且Rb和Rc的定義同權(quán)利要求1。
7．權(quán)利要求6所述的通式(Ⅰ)化合物及其酸和堿加成鹽和它們的酯，其中Rb和Rc代表(CH2)0-3-Ar或(CH2)0-3-Alk基團(tuán)，Ar和Alk的定義同權(quán)利要求1且可以為取代或未取代的。
8．權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所述的通式(Ⅰ)化合物及其酸和堿加成鹽和它們的酯，其中G為通式-NH-C(=NH)-NHRc的G4基團(tuán)，且Rc的定義同權(quán)利要求1。
9．權(quán)利要求8所述的通式(Ⅰ)化合物及其酸和堿加成鹽和它們的酯，其中Rc為氫原子。
10．權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所述的通式(Ⅰ)化合物，其中G為-NH-(Het′)基團(tuán)，且(Het′)定義同權(quán)利要求1。
11．權(quán)利要求10所述的通式(Ⅰ)化合物及其酸和堿加成鹽和它們的酯，其中G代表下列雜環(huán)
p為整數(shù)2,3或4，這些雜環(huán)為取代或未取代的。
12．權(quán)利要求10或11所述的通式(Ⅰ)化合物及其酸和堿加成鹽和它們的酯，其中G為基團(tuán)
p為整數(shù)2,3或4。
13．權(quán)利要求1所述的式(Ⅰ)化合物，所述化合物如下-4-((4-(氨基亞氨基甲基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸，-5-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸，-5-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-8,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-9-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸，-6-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-己酸，-7-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-庚酸，-5-((9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-4-((4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-8-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸，-5-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸乙酯鹽酸鹽，-4-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-8,9-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-10-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸，-5-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-8,9-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-10-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸，-5-((4-(((氨基)羰基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸，-5-((4-(((氨基)硫代羰基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸，-4-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-8,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-9-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸，-6-((4-((4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-己酸，-5-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-3,3-甲基-4-氧代-戊酸，-5-((4-((4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-3,3-二甲基-4-氧代-戊酸，-5-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-戊酸鹽酸鹽，-4-((4-((4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸，-5-((8-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-6,7,8,9,10,11-六氫-薁并(5,6-d)-1,3-苯并二氧雜環(huán)戊烯-4-基)氧基)-戊酸，-5-((8-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-2,2-二苯基-6,7,8,9,10,11-六氫-薁并(4,5-e)-(1,3)-苯并二氧雜環(huán)戊烯-4-基)氧基)-戊酸，-4-((9,10-二甲氧基-4-((1,4,5,6-四氫-2-嘧啶基)亞肼基)-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸，-2-((4-((4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-乙酸，-3-((4-((4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-丙酸，-4-((4-((4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸，-4-((4-((4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基)氧基)-丁酸，-0-[4-[(4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并[e]薁基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸，-0-[4-[(4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并[e]薁基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸，-0-[4-[(1,2,3,4-四氫-6-嘧啶基)亞肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并[e]薁基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸，-0-(9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-4-[(1,4,5,6-四氫-2-嘧啶基)亞肼基]]-8-苯并[e]薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸的(2,3-二羥基丙基)酯，-0-[4-[(4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基]-N-[(8-喹啉基)磺?；鵠-DL-高絲氨酸，-0-[4-[(4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基]-N-[[3-[4-(3-吡啶基)-1H-咪唑-1-基]丙氧基]羰基]-DL-高絲氨酸的一鹽酸鹽，-5-[[4-[(4,5-二氫-4-氧代-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-8-苯并(e)薁基]氧基]戊酸，-0-[9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-4-[(4,5,6,7-四氫-1H-1,3-二氮雜-2-基)亞肼基]-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸，-0-[9,10-二甲氧基-1,2,3,4,5,6-六氫-4-[(3a,4,5,6,7,7a-六氫-1H-苯并咪唑-2-基)亞肼基]-8-苯并(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸。
14．權(quán)利要求1所述式(Ⅰ)化合物的制備方法，其特征在于使式(Ⅱ)化合物
其中R2,R3,R4和R5的定義同權(quán)利要求1，但不為羥基，在堿存在下與式(F1)化合物反應(yīng)Hal-[A]-[B]-COR6(F1)或在膦和偶氮二羧酸二乙酯存在下與式(F′1)化合物反應(yīng)HO-[A]-[B]-COR6(F′1)其中Hal為鹵原子，[A],[B]和R6定義同上，[B]還可以代表基團(tuán)
其中P為胺官能團(tuán)的保護(hù)基，以得到式(Ⅲa)化合物
或者先與活化劑反應(yīng)，然后在催化劑存在下與式(F2)化合物反應(yīng)
以得到式(Ⅲb)化合物
然后使式(Ⅲa)或(Ⅲb)化合物與式(F3)化合物反應(yīng)H2N-G(F3)其中G定義同權(quán)利要求1，以得到相應(yīng)于某些式(Ⅰ)產(chǎn)物的式(Ⅳa)和(Ⅳb)化合物
隨后，如果合適的話，以適當(dāng)?shù)拇涡蚴惯@些化合物進(jìn)行一種或多種下列反應(yīng)-與堿或酸反應(yīng)以斷裂酯，獲得相應(yīng)的酸，-與適合于部分或完全還原R1基團(tuán)中不飽和鍵的還原劑反應(yīng)，-與三鍵水合劑反應(yīng)，-與脫烷基化劑反應(yīng)，-當(dāng)[B]代表CH-NHP基團(tuán)時(shí)，與CO-R6的β位置上的NH-P官能團(tuán)的脫保護(hù)劑反應(yīng)，-由CO-R6的β位置上的相應(yīng)胺形成NH-SO2Rc,NH-CO2Rc,NHCORc,NH-SO2-NH-RC,NH-CO-NHRC基團(tuán)，以得到相應(yīng)的式(Ⅰ)化合物，如果合適的話，這些化合物可與酸或堿作用以得到相應(yīng)的鹽，或者與酯化劑作用以得到相應(yīng)的酯。
15．權(quán)利要求1所述的式(Ⅰ)化合物的制備方法，其特征在于使式(Ⅱ)化合物先與式(F3)化合物反應(yīng)，以得到中間體式(Ⅲc)產(chǎn)物
然后，如果合適的話，在保護(hù)G后，再將所得式(Ⅲc)化合物與式(F1),(F′1)或(F2)反應(yīng)，隨后如果合適的話，進(jìn)行G的脫保護(hù)反應(yīng)，以得到相應(yīng)的式(Ⅳa)和(Ⅳb)化合物，然后，如果合適的話，將式(Ⅳa)和(Ⅳb)化合物進(jìn)行如權(quán)利要求14中所述的不同反應(yīng)，其中式(Ⅱ),(F),(F′1),(F2),(F3),(Ⅳa)和(Ⅳb)化合物如權(quán)利要求14所定義。
16．權(quán)利要求14所述的其中R2,R3,R4和R5為氫原子且OH位于8,9或10位上的式(Ⅱ)化合物的制備方法，其特征在于(ⅰ)使式(a)化合物
其中O-(Alk)位于烷基羧基的間或?qū)ξ唬?Alk)的定義同權(quán)利要求1，與鹵化劑反應(yīng)，得到相應(yīng)的?；u，(ⅱ)將所得酰基鹵與式(b)試劑反應(yīng)
其中R(Ⅰ)和R(Ⅱ)相同或不同且代表含1-6個(gè)碳原子的烷基，或者R(Ⅰ)和R(Ⅱ)與它們所鍵連的氮原子一起表示任選含有另一個(gè)選自O(shè)和N雜原子的5或6元飽和或不飽和雜環(huán)，得到式(c)化合物
(ⅲ)使所得式(c)化合物與鹵化劑反應(yīng)，得到式(d)化合物
其中Hal1代表鹵原子，(ⅳ)使所得的式(d)化合物與路易斯酸反應(yīng)，得到式(e)化合物
(ⅴ)將所得式(e)化合物與脫烷基化劑反應(yīng)，得到式(ⅡF)產(chǎn)物，即預(yù)期的式(Ⅱ)單取代產(chǎn)物
17．權(quán)利要求14所述的其中R2代表OAlk基團(tuán)或O-(CH2)0-3-Ar基團(tuán)，R3,R4和R5為氫原子和OH，且R2位于8,9或10位上的通式(Ⅱ)化合物的制備方法，其特征在于將式(a′)化合物
其中R2和O-Alk位于烷基羧基的間或?qū)ξ簧?，依次進(jìn)行反應(yīng)(ⅰ),(ⅱ),(ⅲ),(ⅳ)和(ⅴ)，以得到式(ⅡG)產(chǎn)物，即預(yù)期的式(Ⅱ)雙取代產(chǎn)物
18．權(quán)利要求14所述的其中R2和R3代表O-(Alk)或O-(CH2)0-3-(Ar)基團(tuán)，R4和R5為氫原子，OH位于位置9上的通式(Ⅱ)化合物的制備方法，其特征是使式(ⅡA)化合物
與脫烷基化劑反應(yīng)，以得到式(ⅡB)化合物
隨后使式(ⅡB)化合物或者在堿性介質(zhì)中與二醇保護(hù)劑反應(yīng)，以便選擇性得到式(ⅡC)化合物
其中P表示二醇保護(hù)劑的剩余部分，接著使該化合物依次與酚保護(hù)劑、二醇的脫保護(hù)劑、烷基化劑以及酚的脫保護(hù)劑反應(yīng)，以得到式(ⅡD)化合物，即OH位于8位上的三取代式(Ⅱ)化合物
或者依次與酚保護(hù)劑、烷基化劑和脫保護(hù)劑反應(yīng)，以得到式(ⅡE)化合物，即OH位于9位上的三取代式(Ⅱ)化合物
19．用作藥物的權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)所述的化合物及其可藥用加成鹽和它們的酯。
20．用作藥物的權(quán)利要求13的式(Ⅰ)化合物。
21．藥物組合物，所述組合物含作為活性成分的至少一種權(quán)利要求19或20所述的藥物。
22．用作新中間體的權(quán)利要求14-18中任一項(xiàng)所述的通式(Ⅲa)，(Ⅲb),(Ⅲc)和(Ⅱ)化合物，但式(Ⅱc)化合物和下列化合物除外-2,3,5,6-四氫-9,10-二甲氧基-8-羥基-苯并[e]薁-4(1H)-酮，-和2,3,5,6-四氫-8,9-二甲氧基-10-羥基-苯并[e]薁-4(1H)-酮。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了式(Ⅰ)化合物及其酸和堿加成鹽和它們的酯,其中R
文檔編號(hào)C07C331/12GK1219165SQ9719480
公開(kāi)日1999年6月9日 申請(qǐng)日期1997年3月20日 優(yōu)先權(quán)日1996年3月20日
發(fā)明者S·貝爾納德, D·卡尼爾托, J·－F·古爾維斯特, J·－G·托伊施¨, J·克諾勒, H·－U·斯蒂爾茲, V·維納, S·C·伯達(dá)賴, T·R·加德克, R·S·麥多維爾, R·M·皮蒂 申請(qǐng)人:赫斯特·馬里恩·魯索公司, 吉寧特有限公司