專利名稱：雙環(huán)血纖維蛋白原拮抗劑的制作方法
本申請是申請?zhí)枮?3119926.3、申請日為1993年12月21日、發(fā)明名稱為“雙環(huán)血纖維蛋白原拮抗劑”的發(fā)明專利申請的分案申請。
本發(fā)明是關于新的抑制血小板凝聚的雙環(huán)化合物，含有這些化合物的藥物組合物和使用這些化合物的方法。
血小板凝聚被認為主要是由血纖維蛋白原受體或GPⅡb-Ⅲa血小板受體復合物介導的，血纖維蛋白原受體或GPⅡb-Ⅲa血小板受體復合物屬于稱之為整合素的粘合受體族中的一種。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)整合素受體的天然配體是含有Arg-Gly-Asp序列的蛋白。被認為是GPⅡb-Ⅲa受體天然配體的遺傳性假血友病因子和血纖維蛋白原在其主結(jié)構上具有Arg-Gly-Asp(用單字母氨基酸代碼表示為RGD)序列。功能上，這些蛋白能使GPⅡb-Ⅲa受體結(jié)合和交聯(lián)到相鄰的血小板上并由此使血小板發(fā)生凝聚。
纖維蛋白連接素，體外連接素和血小板反應素是已證明能結(jié)合到GPⅡb-Ⅲa上的含有RGD的蛋白。纖維蛋白連接素存在于血漿中和作為結(jié)構蛋白存在于細胞基質(zhì)中。結(jié)構蛋白和GPⅡb-Ⅲa之間的結(jié)合可以起到使血小板粘合到受損傷的血管壁上的作用。
結(jié)合到體外連接素上的和含有RGD序列的直鏈和環(huán)狀的肽公開在WO89/05150(PCT US88/04403)中，EP0275748中公開了結(jié)合在GPⅡb-Ⅲa受體上的并能抑制血小板凝聚的直鏈四至六肽和環(huán)狀的六至八肽。在EP-A0341915中報道了其它的直鏈和環(huán)狀的肽，該專利申請的公開內(nèi)容在此作為參考文獻引用。然而，象這類抑制劑結(jié)構的肽往往具有如下的問題，如藥物的運送，代謝穩(wěn)定性和選擇性。在EP-A0372,486,EP-A0381033和EP-A0478363中公開了不是由天然氨基酸序列構成的血纖維蛋白原的抑制劑。WO92/07568(PCT/US91/08166)公開了血纖維蛋白原受體拮抗劑，這在拮抗劑通過7元單環(huán)結(jié)構的生成來摸擬RGD序列中的構象γ-旋轉(zhuǎn)。但是，現(xiàn)在仍然存在對于新的血纖維蛋白原受體拮抗劑(例如GPⅡb-Ⅲa蛋白的抑制劑)的需求，所說的新的血纖維蛋白原受體拮抗劑應于于體內(nèi)和體外都具有有效的作用并且其沒有氨基酸序列的肽主鏈結(jié)構。
本發(fā)明公開了新的雙環(huán)化合物，其包括苯并吖庚因和苯并二吖庚因，它們是GPⅡb-Ⅲa受體的抑制劑并能抑制血小板凝聚。某些5-苯基-1,4-苯并二吖庚因是已知的一類作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的藥物，并且一直被用作抗焦慮藥。參見Sternbach,L.H.,J.Med.Chem.,22,2(1979)。現(xiàn)有技術中還公開了某些5-苯基-1,4-苯并二吖庚因拮抗縮膽囊素的作用。參見Friedinger,Med.Res.Rev.,9,271(1989)。在WO93/08174(PCT/US92/28788)和WO93/00095(PCT/US/92/05463)中公開了某些具有血纖維蛋白原拮抗活性的雙環(huán)化合物。
一方面，本發(fā)明是關于用下述式(Ⅰ)表示的含有稠合在取代的7元環(huán)上的取代的6元環(huán)的雙環(huán)化合物。
本發(fā)明還涉及用于抑制血小板凝聚或凝塊生成的藥物組合物，其包含式(Ⅰ)的化合物和藥學上可接受的載體。
本發(fā)明還包括式(Ⅰ)的化合物在制備用于抑制血小板凝聚藥物中的應用。
另一方面，本發(fā)明提供了一種在血纖維蛋白溶解治療之后抑制哺乳動物的動脈或靜脈再閉塞的方法，其包括在體內(nèi)施用有效量的血纖維蛋白溶解劑和式(Ⅰ)化合物。本發(fā)明還涉及治療中風，瞬時局部缺血癥或心肌梗塞的方法。
本發(fā)明公開了能抑制血小板凝聚的新的雙環(huán)化合物。該新的雙環(huán)化合物包含與芳香性6元環(huán)稠合的7元環(huán)，和在6元環(huán)上具有含氮的取代基，在7元環(huán)上具有脂族取代基，優(yōu)選的是含有酸基的脂族取代基。稠合的6-7元環(huán)素被認為與GPⅡb-Ⅲa受體具有有利的相互作用并定向6元和7元環(huán)上的側(cè)鏈以使其與受體也能產(chǎn)生有利的相互作用。
雖然不希望受限于任何具體的作用機制，但可以相信這些化合物抑制了血纖維蛋白原與結(jié)合血小板血纖維蛋白原受體GPⅡb-Ⅲa的結(jié)合，并通過推定的RGD結(jié)合部位的拮抗作用與其它的粘合蛋白發(fā)生相互作用。
本發(fā)明的化合物是式(Ⅰ)的化合物和其藥學上可接受的鹽
其中A1為O,S,N-R1或CHR1；A4為N-R4或CHR4；R2為至少一個選自下列的取代基R7,Q-C1-C4烷基，Q-C2-4鏈烯基，被R7取代的Q-C2-4鏈炔基；R1和R4為H,Q-C1-6烷基，Q-C1-6氧代烷基，Q-C2-6鏈烯基，Q-C3-4氧代鏈烯基，Q-C3-4氧代鏈炔基，Q-C2-4鏈炔基，C3-6環(huán)烷基，Ar或Het其可任意地被一個或多個R″取代；Q是H,C3-6環(huán)烷基，Het或Ar；R6是W-(CR′2)q-Z-(CR′R10)r-U-(CR′2)s-V-；R7是-COR8,-COCR′2R9,-C(S)R8,-S(O)mOR′，-S(O)mNR′R″,-PO(OR′),-PO(OR′)2,-B(OR′)2,-NO2和Tet；R8是-OR′,-NR′R″,-NR′SO2R′,-NR′OR′,-OCR′2C(O)OR′,-OCR′2OC(O)-R′,-OCR′2C(O)NR′2,CF3或AA；R9是-OR′,-CN,-S(O)rR′,S(O)mNR′2,-C(O)R′C(O)NR′2或-CO2R′；R10是H,C1-4烷基或-NR′R″；R11是H，鹵素，-OR12,-CN,-NR1R12,-NO2,-CF3,CF3S(O)r-,-CO2R′,-CONR′2,Q-C0-6烷基，Q-C1-6氧代烷基，Q-C2-6鏈烯基，Q-C2-6鏈炔基，Q-C0-6烷氧基-，Q-C0-6烷基氨基或Q-C0-6烷基-S(O)r-；R12是R′,-C(O)R′,-C(O)NR′2,-C(O)OR15,-S(O)mR′或S(O)mNR′2；
R15是H,C1-5烷基或Ar-C0-4烷基；R7是H,C1-6烷基，C3-7環(huán)烷基-C0-4烷基或Ar-C0-4烷基；R″是R′,-C(O)R′或-C(O)OR15；R是R″或AA2；AA1是通過其氨基相連的和具有選擇性保護的羰基的氨基酸，AA2是通過其羧基相連的和具有選擇性保護的氨基的氨基酸；U和V可以不存在或為CO,CR′2,C(=CR′2),S(O)n,O,NR′,CR′OR′,CR′(OR″)CR′2,CR′2CR′(OR″),C(O)CR′2,CR′2C(O),CONR′,NR′CO,OC(O),C(O)O,C(S)O,OC(S),C(S)NR′,NR′C(S),S(O)nNR′,NR′S(O)n,N=N,NR′NR′,NR′CR′2,CR′2NR′,CR′2O,OCR′2,C≡C或CR′=CR′，上述定義的先決條件為U和V不能同時不存在；W是R′RN-或
Z是(CH2)t或Het；m為1或2；n為0至3；q為0至3；r為0至2；s為0至2；和t為0至2；本發(fā)明還包括本發(fā)明化合物的藥學上可接受的加成鹽，復合物或前藥。前藥被認為是在體內(nèi)能釋放式(Ⅰ)的活性母藥的任何共價相連的載體。
在本發(fā)明的化合物具有一個或多個手性中心的情況下，除非另有說明，本發(fā)明包括可以用常用方法合成和拆分的每一種唯一的非外消旋的化合物。在本發(fā)明的化合物中具有碳-碳雙鍵的情況下，順式(Z)和反式(E)異構體都屬于本發(fā)明的范圍。在本發(fā)明的化合物以互變異構的形式存在時，如酮-烯醇互變異構體，例如
和
和胍類基團的互變異構體如
和
每種互變異構形式無論其以平衡的形式或以一種用R′經(jīng)適當?shù)娜〈男问酱嬖跁r都屬于本發(fā)明的范圍，除非另有說明，否則在任何一種情況下的任何一種取代基的定義與在任何其它情況下的它的定義和任何其它取代基的定義無關。
適宜的R8為-OR′,-OCR′2C(O)OR,-OCR′2C(O)NR′2或OCR′2OC(O)-R′，優(yōu)選的為-OR′。
適宜的R10和R11為H。
適宜的(CR′R10)r-U-(CR′2)sx-V是(CR′R10)r-U-或-U-(CR′2)s。
適宜的U是CO,CONR′或NR′CO。
優(yōu)選的(CR′R10)r-U-(CR′2)s-V是(CH2)0-2NR′CO,(CH2)0-2CONR′,(CH2)0-2CO,(CH2)0-2CH=CH,(CH2)0-2C≡C,(CH2)1-3O，或(CH2)1-5。更優(yōu)選的(CR′R10)r-U-(CR′2)s-V是(CH2)0-2NR′CO或(CH2)0-2CONR′，其中R′是H或甲基。
優(yōu)選的W是
優(yōu)選的Z是哌啶基，哌嗪基或(CH2)t。適宜的t為1。R6的具體實例為
和R″HN-(CH2)5-U其中E是N或CH,R20是氫，氨基，一或二-C1-4烷基氨基，羥基或C1-4烷基，和U是NR′CO,CONR′,(CH2)CO,CH=CH,C≡C,CH2O,OCH2和(CH2)2。
R6的優(yōu)選的具有代表性的實例是
其中R′和R″是H或C1-4烷基，優(yōu)選的R′是甲基和R″是H。
在優(yōu)選的實施方案中，A1是NR1,A4是NR′。
在另一個優(yōu)選的實施方案中，A1是CHR1,A4是NR′。
優(yōu)選的，R2是CH2-R7。更優(yōu)選的，R2是CH2CO2R′，特別是CH2CO2H。
優(yōu)選的，R1和R4是H,C1-4烷基，Ar-C1-4烷基或C3-6環(huán)烷基-C1-4烷基。適宜的R1是H或甲基，R4是H，甲基，環(huán)己基乙基或苯乙基。
在更為優(yōu)選的實施方案中，A1是NR″或CH2，其中R″是H，C1-4烷基或C(O)R′；R2是CH2CO2H；A4是NR4；R4是H，C1-6烷基，C3-6環(huán)烷基C0-4烷基或Ar-C0-4烷基；Z是6元的Het或(CH2)t；W是R′2N，或
；(CR′R10)r-U-(CR′2)s-V是(CR′R10)r-U-或-U-(CR′2)s，(例如，V不存在，S和r之一個為O)其中U是NR′CO,CONR′,CR′=CR′,C≡C,O,CO或CH2，適宜的，(CR′R10)r-U-(CR′2)s-V是(CH2)0-3NR′CO,(CH2)0-3CONR′，其中R′是H或甲基，或(CH2)0-3O。優(yōu)選的，R′是甲基。
本發(fā)明的具體的實施方案，包括有用的中間體和前藥在實施例1-88的全部實施例中進行描述。
在上述式(Ⅰ)中，W表示能夠形成氫鍵的含氮基團。優(yōu)選的W是堿性氮基團。R7表示具有能形成氫鍵或與金屬陽離子螯合的非鍵合電子對的基團。優(yōu)選的R7是酸性的。為了這些基團之間的最佳間距并因此而選擇T,U,V和Z基團和用q,r,s表示的烷基間距，通過最短的分子內(nèi)路徑在R7基團和W的端部堿性氮基團之間存在10-15(最優(yōu)選的是約13)個中介共價鍵是優(yōu)選的。例如，用來說明而不是用于限定本發(fā)明的例子可以是當R2或R4中的一個為(CH2)2CO2H，或優(yōu)選的為CH2CO2H，和R6為苯并二吖庚因環(huán)等中的7位或8位上的取代基和V-(CR′2)q-Z-(CR′R10)r-U-(例如S是O，無V存在)，然而當W是
(優(yōu)選的是4位上取代的6元氮雜環(huán))，和Z是(CH2)t，和U選自NR′CO,CONR′,CH2O,OCH2,CH2CH2,CR′=CR′或C≡C，(‘基團1’)時，適宜的q+t+r是1-3，優(yōu)選的q+t+r為1；當W為
和Z為6元Ar或Het環(huán)(優(yōu)選的是1,4-二取代的)，和U是O,CH2或CO,q和r優(yōu)選的為O；當W是H2N-和Z是(CH2)t，和U選擇上述基團1時，q+r+t是4-6，優(yōu)選的為5 ；當W是H2N-和Z是6元Ar或Het環(huán)時，適宜的q+t為0-2，優(yōu)選的為1。
通常用于肽和化學技術領域內(nèi)的縮寫和符號在此用于描述本發(fā)明的化合物。通常，氨基酸的縮寫是使用在Eur.J.Biochem.,158,9(1984)中所述的IUPAC-IUB Joint Commission on BiochemicalNomenclature。
Arg是指精氨酸，MeArg是指Nα-甲基-精氨酸，HArg是指高精氨酸，NArg是指降精氨酸，(Me2)Arg是指N′,N″-二甲基精氨酸，(Et2)Arg是指N′,N″-二乙基精氨酸和Orn是指鳥氨酸。這些基團是適當?shù)娜〈鵕6的一部分。這些氨基酸的Nα-取代的衍生物也可用于本發(fā)明。具有代表性的制備α取代的衍生物的方法公開在美國專利4,687,758；Cheung等人，Can.J.Chem.,55,906(1977)；Freidinger等人，J.Org.Chem.,48,77,(1982)；和Shuman等人，PEPTIDES:PROCEEDINGS OF THE 7THAMERICAN PEPTIDE SYMPOSIUM,Rich,D.,Gross,E.,Eds,PierceChemical Co.,Rockford,Ⅲ.,617(1981),這些文獻在此作為參考文獻引用。
本文中使用的C1-4烷基其定義包括甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，異丁基和叔丁基。C1-6烷基另外還包括戊基，正戊基，異戊基，新戊基和己基，和其簡單的脂族異構體。C0-4烷基和C0-6烷基還表示不需要有烷基存在(例如存在的是共價鍵)。
本文中使用的C2-6鏈烯基是指具有2至6個碳原子的烷基，其中用碳-碳雙鍵替代碳-碳單鍵。C2-6鏈烯基包括乙烯基，1-丙烯基，2-丙烯基，1-丁烯基，2-丁烯基，異丁烯基和幾種異構的戊烯基和己烯基。包括順式和反式異構體。
C2-6鏈炔基是指其中碳-碳三鍵替代了碳-碳單鍵的2至6個碳原子的烷基。C2-5鏈炔基包括乙炔基，1-丙炔基，2-丙炔基，1-丁炔基，2-丁炔基，3-丁炔基和戊炔和己炔的簡單異構體。
C1-4氧代烷基是指其中CH2基被C(O)或羰基取代的最多為4個碳原子的烷基。取代的甲?；?，乙?；?-丙醛，2-丙酮，3-丙醛，2-丁酮，3-丁酮，1-和4-丁醛基是具有代表性的。C1-6氧代烷基還包括被羰基取代的5和6個碳原子的更高級的類似物和異構體。C3-6氧代鏈烯基和C3-6氧代鏈炔基是指其中CH2基被C(O)基替代的C3-6鏈烯基或C3-6鏈炔基。C3-4氧代鏈烯基包括1-氧代-2-丙烯基，3-氧代-1-丙烯基，2-氧代-3-丁烯基等。
在C1-6烷基，C2-6鏈烯基，C2-6鏈炔基或C1-6氧代烷基上的取代基如R11可以在結(jié)果能形成穩(wěn)定結(jié)構的任何碳原子上，并且其可以用普通的合成技術獲得。
Q-C1-6烷基是指其中任何碳氫鍵被碳-Q鍵替代的C1-6烷基。Q-C2-6鏈烯基和Q-C2-6鏈炔基具有與有關C2-6鏈烯基和C2-6鏈炔基的定義相似的定義。
本文中使用的Ar或芳基是指苯基或萘基，或被一至三個R11基取代的苯基和萘基。R11具體的可以是C1-4烷基，C1-4烷氧基，C1-4烷硫基，三氟烷基，OH,F,Cl,Br或I。
Het，或雜環(huán)基表示選擇性取代的5元或6元單環(huán)，或含有一個或三個選自氮，氧和硫的雜原子的9元或10元雙環(huán)，上述環(huán)是穩(wěn)定的和可以用普通的化學合成方法獲得。具有代表性的雜環(huán)是苯并呋喃基，苯并咪唑，苯并吡喃，苯并噻吩，呋喃，咪唑，二氫吲哚，嗎啉，哌啶，哌嗪，吡咯，吡咯烷，四氫吡啶，吡啶，噻唑，噻吩，喹啉，異喹啉，和四氫化和全氫化喹啉和異喹啉。含有一個或二個氮的6元雜環(huán)如哌啶，哌嗪，四氫吡啶和吡啶是對于Z基的優(yōu)選雜環(huán)。在Het環(huán)上的最多3個選自如R11的取代基的任何可能的組合都可以用化學合成來獲得，它們是穩(wěn)定的并且都屬于本發(fā)明的范圍。含有一至二個氮的6元單一雜環(huán)如哌啶，哌嗪，四氫吡啶和吡啶是對于Z基的優(yōu)選雜環(huán)。
C3-7環(huán)烷基是指最多含二個不飽和的碳-碳鍵的三至七個碳原子的選擇性取代的碳環(huán)系。典型的C3-7環(huán)烷基是環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)戊烯基，環(huán)己基，環(huán)己烯基和環(huán)庚基。在環(huán)烷基環(huán)上最多三個選自R11的取代基的任何組合都可以用常規(guī)的化學合成方法獲得，這些組合是穩(wěn)定的并且都屬于本發(fā)明的范圍。
本文中使用的
表示氮雜環(huán)，它們可以是飽和的或不飽和的穩(wěn)定的5元，6元或7元單環(huán)或7元至10元雙環(huán)，環(huán)中含有最多為三個氮原子或含一個氮原子和一個選自氧和硫的雜原子，所說的環(huán)上的任何原子都可被取代以形成穩(wěn)定的結(jié)構。在這些環(huán)中的氮原子可以被取代以形成季氮。氮雜環(huán)可以在任何穩(wěn)定的位置上被R20取代，例如被下述基團取代，H,C1-4烷氧基，F(xiàn),Cl,Br,I,NO2,NR′2,OH,CO2R′,CONHR′,CF3,Q-C0-4烷基，Q-C1-4烷基-S(O)u(例如u是0,1或2)或被任何上述取代基團取代的C1-4烷基。具有代表性的是
是吡咯啉，吡咯烷，咪唑，咪唑啉，咪唑烷，吡唑，吡唑啉，吡唑烷，哌啶，哌嗪，嗎啉，吡啶，吡啶鎓，四氫吡啶，四氫化和六氫化吖庚因，奎寧環(huán)，奎寧鎓(quinuclidinium)，喹啉，異喹啉，和四氫化和全氫化喹啉和異喹啉，特別是
可以為吡啶基，吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，氮雜環(huán)丁烷基，奎寧環(huán)基或四氫吡啶基。
優(yōu)選的是4-吡啶基，4-(2-氨基吡啶基)，4-四氫吡啶基，4-哌啶基或4-哌嗪基。
本文中AA1是指其羧基被選擇性保護的氨基酸，其中氨基酸可以是任何的天然α-氨基酸或青霉胺。未保護的羧基是游離的羧酸基。羧基的保護基是生成的酯或酰胺，例如當羧基的OH被R8取代時所生成的酯或酰胺。AA2是如上所述的其氨基被選擇性保護的氨基酸。氨基保護基是現(xiàn)有技術中已知的，例如當氨基被R12所取代時的基團。未保護的氨基是游離的NH2基團。
C(O)表示與氧雙鍵相連的碳(例如羰基)，C(S)表示與硫雙鍵相連的碳(例如硫代羰基)。
t-Bu是指叔丁基，BOC是指叔丁氧羰基，F(xiàn)moc是指芴基甲氧基羰基，Ph是指苯基，CbZ是指芐氧基羰基，BrZ是指鄰溴芐氧基羰基，ClZ是指鄰氯芐氧基羰基，BZl是指芐基，4-MBZl是指4-甲基芐基，Me是指甲基，Et是指乙基，Ac是乙?；?，AlK是指C1-4烷基，NPh是指1-或2-萘基和cHeX是指環(huán)己基。Tet是指5-四唑基。
DCC是指二環(huán)己基碳二亞胺，DMAP是指二甲基氨基吡啶，DIEA是指二異丙基乙胺，EDC是指N-乙基-N′(二甲基氨基丙基)碳二亞胺。HOBt是指1-羥基苯并三唑，THF是指四氫呋喃，DIEA是指二異丙基乙胺，DMF是指二甲基甲酰胺，NBS是指N-溴代-琥珀酰亞胺，Pd/c是指鈀碳催化劑，PPA是指1-丙烷膦酸環(huán)狀酸酐，DPPA是指二苯基磷?；B氮化物，BOP是指苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)六氟磷酸鏻，HF是指氫氟酸，TEA是指三乙胺，TFA是指三氟乙酸，PCC是指氯鉻酸吡啶鎓。
式(Ⅰ)的化合物通常由下述方法來制備即式(Ⅺ)的化合物與式(Ⅻ)的化合物反應
其中A1,A4,U,V,R′,R10,S和r如式(Ⅰ)中的定義，任何反應官能團被保護起來；L1和L2是能反應生成鍵合的-(CR′R10)r-U-(CR′2)s-V-的官能團；R6″是W′-(CR′2)q-Z-和與L2相連的-(CR′R10)r-U-(CR′2)s-V-基團的任何部分，任何反應官能團被保護起來；R2′是任何反應官能團被保護起來的如式(Ⅰ)中定義的R2；和W′是任何堿性氮基團被保護起來的如式(Ⅰ)中定義的W；以制得式為
的化合物，其中R6′是W′-(CR′2)q-Z-(CR′R10)r-U-(CR′2)s-V-；然后除去任何的保護基，并選擇性地生成藥學上可接受的鹽。
很明顯，L1和L2的確切定義將取決于所生成的鍵的位置。鍵合的-(CR′R10)r-U-(CR′2)s-V-的一般制備方法描述在例如EP-A-0372486和EP-A0381033和EP-A0478363中。這些文獻在此作為參考文獻引用。
例如，如果V是CONH,L1可以是-NH2,L2可以是OH(如在酸中的OH)或Cl(如酰基氯中的Cl)，和R6″可以是W-(CR′2)q-Z-(CR′R10)r-U-(CR′2)s-C(O)，任何官能團被選擇性地保護。例如R6″可以是(芐氧基羰基-脒基)苯甲?；?或(Nα-BOC,Nguan-TOS)精氨?；?，當L2是OH時，使用偶合劑。
同樣，如果V是NHCO,L1可以是-CO2H或CO-Cl,L2可以是-NH2，和R6″可以是W-(CR′2)q-Z-(CR′R10)r-U-(CR′2)s-。例如R6″可以是(芐氧基羰基脒基)苯基，(芐氧基羰基氨基)甲基芐基-或6-(芐氧基羰基氨基)己基-。
如果V是NHSO2,L1可以是SO2Cl,L2可以是-NH2和R6″可以如上述定義。如果V是SO2NH,L1可以是-NH2和L2可以是SO2Cl。這類磺酰氯的制備方法公開在例如J.Org.Chem.,23,1257(1958)中。
如果V是CH=CH,L1可以是-CHO,L2可以是CH=P-Ph3和R6″可以是W-(CR′2)q-Z-(CR′R10)r-U-(CR′2)s-。L1也可以是CH=P-Ph3,L2也可以是CHO，例如R6″可以是W-(CR′2)q-Z-(CR′R10)r-U-(CR′2)S-1-CHO。
如果V是CH2CH2，化合物可以通過還原適當保護的其中V是CH=CH的化合物來制得。
如果V是CH2O,CH2N或C≡C,L1分別可以是-OH,-NH或-C≡CH；L2可以是-Br，和R6″可以是W-(CO′2)q-Z-(CR′R10)r-U-(CR′2)s-。例如R6″可以是(芐氧基羰基氨基)甲基芐基-或2-(N-芐基-4-哌啶基)乙基。同樣，如果U或V是OCH2,NR′CH2或C≡C,L1可以是-CH2Br和L2分別可以是-OH,-NH或-C≡CH，另外，當U或V是C≡C時，L1也可以是Br,I或CF3SO3,L2可以是C≡CH，偶合作用可以用鈀和堿來催化。
V是CHOHCH2的化合物可以用公開在J.Org.Chem.,54,1354(1989)中的方法從適當保護的其中V是CH=CH的化合物來制備。
V是CH2CHOH的化合物可以通過公開在Tet.Lett.,31,231(1990)中所公開的硼氫化和堿性氧化的方法從適當保護的其中V是CH=CH的化合物獲得。
式(Ⅺ)化合物是苯并二吖庚因和苯并吖庚因，并且可以用流程1-9所述的-般方法來制備。具有代表性的制備苯并二吖庚因的方法是現(xiàn)有技術中熟知的(例如.,Hynes,等人,J.Het.Chem.,1988,25,1173；Muller,等人，Helv.Chem.Acta.,1982,65,2118；Mori,等人,Heterocycles,1981,16,1491)；和WO93/00095，它們在此作為參考文獻引用。在所說的流程中R1″-R7″表示R1-R7或其適當?shù)那绑w，其中任何官能團按現(xiàn)有技術中已知的方法進行保護。
流程1
eg.R6″=對(Cbz-脒基)苯甲?；鵕6=對(脒基)苯甲酰氨基流程2
流程3
流程4
eg. R4″=Ph-CH2CH2-R6″=對(Cbz-脒基)苯胺基R6=對(脒基苯胺基)羰基流程5
流程6
eg.R4-=(CH2)2PhNBs=N-溴代琥珀酰亞胺 R6″=對(Cbz-脒基)苯胺基R6=對脒基苯基氨基羰基流程7
Imid=咪唑 eg.R6″=對(Cbz-脒基)苯甲酰基Phth=鄰苯二甲酰亞胺 R6=對脒基苯甲酰氨基流程8
eg.R6″=對(Cbz-脒基)苯甲?；鵕6=對脒基苯甲酰氨基流程9
eg.R4″=CH2CH2-PhR6″=對(Cbz-脒基)苯甲?；鵕6=對脒基苯甲酰氨基特別有用的中間體是式(Ⅺ)的1,4-苯并二吖庚因化合物，其中A1是NR1,A4是NR4；L1是CHO,CO2R′,Br,I,OH,CF3SO3,CH2-T或NR′R″，和T是OH,NHR″,Cl,Br或I。特別是，其中R1是H,C1-4烷基，C1-4氧代烷基；R2是CH2CO2R′和R4是Q-C1-6烷基的化合物是有用的。更具體地說，其中R4是H,C1-4烷基或苯基C1-4烷基的化合物是有用的，其它有用的中間體是類似的式(Ⅺ)的取代的苯并吖庚因化合物，其中A1是CHR1和A4是NR4。
本發(fā)明中使用的偶合劑是能用來生成肽鍵的試劑。典型的偶合方法使用碳化二亞胺，活化的酐和酯和酰鹵。試劑例如EDC,DCC,DPPA,PPA,BOP試劑，HOBt,N-羥基琥珀酰亞胺和草酰氯是典型。
形成肽鍵的偶合方法通常是現(xiàn)有技術中熟知的，這些肽合成方法由Bodansky等人提出題為THE PRACTICE OF PEPTIDE SYNTHESIS,Springer.-Veralg,Berlin,1984,Ali等人，在J.Med.Chem.,29,984(1986)和J.Med.Chem.,30,2291(1987)的文章中描述了這一技術方法，它們在此作為參考文獻引用。
生成酰胺或肽鍵的溶液合成是通過使用用于生成酰胺鍵的普通方法來完成，通常，在選擇性地有催化劑如1-羥基苯并三唑(HOBt)和二甲基氨基吡啶(DMAP)存在下使用適當?shù)奶蓟啺放己蟿┤鏝,N′-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)，胺或苯胺通過其游離氨基偶合到適當?shù)聂人峄|(zhì)來進行偶合，其它的方法如在選擇性地有堿存在下，使適當保護的酸基質(zhì)的游離羧基生成活化的酯，酐或?；u，接著再使其與適當保護胺的游離胺進行反應的方法也是適用的。例如，在堿如N-甲基嗎啉，DMAP或三烷基胺存在下，在無水溶劑如二氯甲烷或四氫呋喃(THF)中用氯甲酸異丁酯處理保護的BOC-氨基酸或cbZ-脒基苯甲酸以生成“活化的酐”，接著使該“活化的酐”與第二次保護的氨基酸或苯胺的游離胺反應。
式(Ⅻ)的化合物可以用現(xiàn)有技術中已知的普通方法從商業(yè)上可獲得的物質(zhì)來制備。W通常是選擇性地通過烷基鏈與Z相連的堿性官能團，該官能團在R6合成中被保護，或在-(CR′R10)r-U-(CR′2)s-V-鍵已形成之后引入到該分子中。例如，其中W是適當取代的R′R″,N-,R″R′NC(=NR′),R′2N(R13)C=N-,R″N=(R13)C-NR′-,R′2N(R′2N)C=N-或R″R′N(R′N=)C-NR′的式(Ⅻ)或式(Ⅰ)的化合物可以用包括在EP-A0372486,EP-A0381033或EP-A0478363中公開的普通方法來制備，這些文獻在此作為參考文獻引用。
式(Ⅻ)中W是
的化合物特別可以用EP-A0478363中公開的方法來制備。
W是R′2N(R′2N)C=N-X-或R″R′N(R′N=)C-NR′-X-，和X是O的化合物特別可以用在J.Org.Chem.,51,5047(1986)中公開的方法來制備。
W是R′2N(R′2N)C=N-X-或R″R′N(R′N=)C-NR′-X-，和X是N=CR′的化合物特別可以用在美國專利3,714,253和Eur.J.Med.Chem.-Chim.Ther.,20,25(1985)中公開的方法來制備。
W是R′2N(R′2N)C=N-X-或R″R′N(R′N=)C-NR′-X-，和X是C(O)的化合物特別可以用在美國專利3,714,253和Can.J.Chem.,43,3103(1965)中公開的方法來制備。
W是R′ONR′C(C=NR′)-的化合物特別可以用在J.Het.Chem.,16,1063(1979)或J.Het.Chem.,26,125(1989)中公開的方法來制備。
W是R′2NR′NC(NR′)-的化合物可以用包括在Synthesis,583(1974)公開的普通方法來制備。
W是R′R″NR′N-的化合物特別可以用在J.Prakt.Chem.,36,29(1967)中公開的方法來制備。
W是R′R″NR′NCO-的化合物特別可以用在Bull.Chem.Soc.Jpn.,43,2257(1970)中公開的方法來制備。
W是R″R′NC(=NR′)Y，和Y是S的化合物特別可以用在Chem.Lett.,1379(1986)中公開的方法來制備。
式(Ⅻ)或式(Ⅰ)中W是R″R′NC(=NR′)Y和Y是O的化合物可以用日本專利2022751中公開的普通方法來制備。
式(Ⅻ)的有用的中間體包括式為W′-(CR′2)q-Z-(CR′R10)r-U-(CR′2)s-L2的化合物，其中Z,R′,R″,R10,U,q,r和s如式(Ⅰ)中的定義；L2是CHO,CO2R′,C≡C-H,OH,Cl,Br,I,CH2-T或NR′R″，和T是CF3SO3,OH,NHR″,Cl,Br或I，和W′是具有用氮保護基Rp按本發(fā)明所述的方法保護的任何反應活性的堿性氮基團的W。R′SO2,R′OCO和R′CO(例如TOS,BOC,CbZ或乙酰基)是典型的氮保護基團。這類中間體的具體實例是
，其中E是N或CH,R20是氫，氨基，單或二-C1-4烷基氨基，羥基或C1-4烷基。
每一合成片段的側(cè)鏈上的反應活性官能團按現(xiàn)有技術的方法適當?shù)乇Ｗo起來。適用的保護基公開在Greene,PROTECTIVE GROUPS INORGANIC CHEMISTRY,John Wiley和Sons,New York,1981中。例如，BOC,CbZ，鄰苯二甲?；騀moc基團可以用于氨基或脒基的保護。通常，用于α-氨基保護，BOC基團是優(yōu)選的。t-Bu,CHeX或芐酯也可用于側(cè)鏈羧基的保護。芐基或適當取代的芐基(例如4-甲氧基芐基或2,4-二甲氧基-芐基)可以用于保護巰基或羥基。甲苯磺酰基可以用于保護咪唑基和甲苯磺?；蛳趸糜诒Ｗo胍基。適當取代的芐氧羰基(Carbobenzyloxy)或芐基也可用于保護羥基或氨基。芐氧羰基或芐基保護基的適當?shù)娜〈窃卩徫缓?或?qū)ξ簧嫌寐?，溴，硝基或甲基進行取代，并由此來調(diào)節(jié)保護基的反應活性。除了BOC基之外，氨基保護基最適合的是那些用弱酸處理而不能除去的保護基。這些保護基是用現(xiàn)有技術中已知的催化加氫，用液氨中的鈉或HF處理的方法來除去。
氨基的改性，特別是在雙環(huán)系的6元環(huán)上的氨基的改性可以用現(xiàn)有技術中已知的烷基化，磺化，氰化或酰化作用來完成。
肽的酸加成鹽是用標準的方法，在適當?shù)娜軇┲袕哪阁w化合物和過量的酸來制備，所說的酸可以是例如鹽酸，氫溴酸，硫酸，磷酸，乙酸，馬來酸，琥珀酸或甲磺酸。乙酸鹽形式是特別有用的。某些內(nèi)鹽或兩性離子形式的化合物也可以接受。陽離子鹽是通過母體化合物與過量堿性試劑或與合適的有機胺的反應來制備，所說的堿性試劑可以是例如含有合適陽離子的氫氧化物，碳酸鹽或醇鹽；陽離子如Li+,Na+,K+,Ca++,Mg++和NH4+是存在于藥學上可接受的鹽中的陽離子的具體實例。
本發(fā)明提供了含有式(Ⅰ)化合物和藥學上可接受的載體的藥物組合物。因此，式(Ⅰ)的化合物可用來制備藥物。按上述方法制得的式(Ⅰ)化合物的藥物組合物可以被配制成適用于胃腸外給藥的溶液或冰凍干燥的粉劑。粉劑可以在使用之前通過加入適當?shù)南♂寗┗蚱渌帉W上可接受的載體進行再生，液體制劑可以是緩沖的，等滲的水溶液。適用的稀釋劑的實例是常用的等滲鹽水溶液，標準的5％右旋糖水溶液或緩沖的乙酸鈉或乙酸銨溶液。這類制劑特別適用于胃腸外給藥，但是也可用于口服或裝入用于吸入給藥的計量劑量吸入器或噴霧器。另外加入賦形劑也是有利的，所說的賦形劑可以是例如聚乙烯基吡咯烷酮，明膠，氧化纖維素，阿拉伯膠，聚乙二醇，甘露糖醇，氯化鈉或檸檬酸鈉。
另外，這些肽也可以制成膠囊，片劑或制成適用于口服的乳劑或糖漿?？梢约尤胨帉W上可接受的固體或液體載體以增強組合物的效率或穩(wěn)定組合物，或便于組合物的制備。固體載體包括淀粉，乳糖，硫酸鈣二水合物，石膏粉，硬脂酸鎂或硬脂酸，滑石，果膠，阿拉伯膠，瓊脂或明膠。液體載體包括糖漿，花生油，橄欖油，鹽水和水。載體還可以是持續(xù)釋放的物質(zhì)如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯，其可單獨使用或與蠟一起使用。固體載體的用量是可以變化的，但是優(yōu)選的用量為每劑量單位約20毫克至1克。藥物制劑可以使用制藥工藝中的普通方法來制備，即通過研磨，混合，造粒和對于片劑所必需的壓制；或研磨，混合，和對于硬膠囊所需裝填來制備。當使用液體載體時，制劑將會是糖漿，酏劑，乳劑或含水或非水懸浮液的形式。這類液體制劑可以直接P.O.給藥或裝入軟膠囊中給藥。
為了直腸給藥，本發(fā)明的肽還可以與賦形劑如可可脂，甘油，明膠或聚乙二醇相結(jié)合和制成栓劑。
本發(fā)明的化合物也可用在玻璃器內(nèi)以抑制血液中和血制品中的血小板凝聚，例如可用于儲藏或用于體外操作如診斷或研究。
本發(fā)明還提供了在哺乳動物特別是人體內(nèi)抑制血小板凝聚和凝塊形成的方法，它包括內(nèi)用式(Ⅰ)的肽和藥學上可接受的鹽。這類治療的適應癥包括急性心肌梗死(AMI)，深度的靜脈血栓形成，肺動脈栓塞，dissecting anurysm，短暫性腦缺血發(fā)作(TIA)，中風和其它與心肌有關的疾病和不穩(wěn)定型心絞痛。高聚集能力的慢性或急性癥狀如彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)，敗血癥，外科或傳染性休克，手術后和產(chǎn)后損傷，心肺分流術手術，不相容的輸血，胎盤分裂(abruptio placenta)，血栓形成性血小板減少性紫癜(TTP)，蛇毒和免疫性疾病，這些疾病對上述治療可能都會有所反應。另外，本發(fā)明的肽還可以用于預防易位癥狀，預防或治療真菌或細菌感染，誘導免疫刺激，治療鐮形紅細胞疾病和預防或治療有關骨吸收的疾病。
本發(fā)明的肽以足以能在血漿中的藥物濃度達到抑制血小板凝聚或其它這類適應癥的方式通過口服或胃腸外給藥而施用于病人。含有肽的藥物組合物根據(jù)病人的不同癥狀其施用劑量為約0.2至約50毫克/公斤。對于急性治療，胃腸外給藥是優(yōu)選的。對于持久狀態(tài)的高聚集能力，靜脈內(nèi)注入在5％右旋糖水溶液或常規(guī)鹽水溶液中的肽是最有效的，雖然肌內(nèi)藥團注射也足以達到要求。
對于慢性的，但不是臨界的血小板凝聚癥，口服膠囊或片劑或藥團肌內(nèi)注射都是適用的。每天以約0.4至約50毫克/公斤的劑量給藥一至四次以使日總劑量達到約0.4至約200毫克/公斤/天。
本發(fā)明還進一步提供了在血纖維蛋白溶解治療之后抑制動脈或靜脈再次閉塞的方法，它包括內(nèi)用式(Ⅰ)的肽和血纖維蛋白溶解劑。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在血纖維蛋白溶解治療中施用肽能夠完全防止血管的再次閉塞或者能延長血管再次閉塞發(fā)生的時間。
在本發(fā)明中使用的術語血纖維蛋白溶解劑是指天然的或合成的能直接或間接引起血纖維蛋白凝塊溶解的任何化合物。血纖維蛋白溶酶原活化劑是一組已知的血纖維蛋白溶解劑。有用的血纖維蛋白溶酶原活化劑包括例如，anistreplase，尿激酶(UK)，前尿激酶(PUK)，鏈激酶(SK)，組織血纖維蛋白溶酶原活化劑(tPA)和能保持血纖維蛋白溶酶原活化劑活性的它們的突變體或變異體，例如經(jīng)過化學改性或其中加入，缺失或取代了一個或多個氨基酸或其中加入，缺失，或改變了一個或多個官能區(qū)域的變異體，上述的改變一個或多個官能團或官能區(qū)域可以通過例如使一種血纖維蛋白溶酶原活化劑的活性部位與另一種血纖維蛋白溶酶原活化劑的血纖維蛋白結(jié)合區(qū)域或血纖維蛋白結(jié)合分子相結(jié)合來完成。其它具有代表性的變異體是其中有一個或多個糖基化部位被改變的tPA分子。在血纖維蛋白溶酶原活化劑中優(yōu)選的是tPA的變異體，其中原氨基酸序列已在生長因子區(qū)發(fā)生了變化由此提高血纖維蛋白溶酶原活化劑的血清半衰期。tPA生長因子變異體例如由Robinson等人在EP-A0297589和Browne等人在EP-A0240334中公開。其它變異體包括雜交蛋白，例如在EP0028489,EP0155387和EP0297882(所有這些文獻在此作為參考文獻引用)中公開的那些雜交蛋白。Anistreplase是用于本發(fā)明的優(yōu)選雜交蛋白。血纖維蛋白溶解劑可以從天然資源中分離獲得，但是一般是用傳統(tǒng)的遺傳工程方法制備的。
tPA,SK,UK和PUK的有用制劑公開在例如EP-A0211592,EP-A0092182和美國專利4,568,543中，這些文獻在此作為參考文獻引用。通常，血纖維蛋白溶解劑被配制成含水的，緩沖的等滲溶液，例如PH為3.5至5.5的緩沖的乙酸鈉或乙酸銨，或己二酸鈉或己二酸銨。其中還可以加入賦形劑如聚乙烯基吡咯烷酮，明膠，氧化纖維素，阿拉伯膠，聚乙二醇，甘露糖和氯化鈉。還可將這類組合物冰凍干燥。
用式(Ⅰ)化合物和血纖維蛋白溶解劑制備的藥物組合物可以被配制在同一個容器中，但是配制在不同的容器中是優(yōu)選的。當兩種試劑以溶解的形式提供時，可以將它們裝入輸注/注射系統(tǒng)同時給藥或依次給藥。
對于這類治療的適應癥包括心肌梗塞，深度靜脈血栓形成，肺栓塞，中風和其它與心肌有關的疾病。在胃腸外施用tPA或其它血纖維蛋白溶解劑之前，同時或之后施用肽?？梢宰C明在重復灌注建立之后用肽連續(xù)處理一段時間以最大地抑制治療后的血管再次閉塞是有利的。tPA,SK,UK或PUK的有效劑量為0.5至5毫克/公斤和肽的有效劑量為0.1至25毫克/公斤。
為了使抑制劑和血纖維蛋白溶解劑便于同時或不同時間施用，需制備一個藥盒，它包括單一的容器如紙盒或其它容器，多個單一的瓶，袋，管形瓶或其它容器，每個容器具有有效量適于胃腸外給藥的如上所述的抑制劑和有效量的tPA或其它適于胃腸外給藥的如上所述的血纖維蛋白溶解劑。這類藥盒包括例如在不同容器中的兩種藥物試劑或在同一容器中的兩種藥物試劑，選擇性地作為冰凍干燥的填料的兩種藥物試劑和用于再生的溶液的容器。這種藥盒的變化方式為在單個容器的兩個室內(nèi)包含用于再生的溶液和冰凍干燥的填料，該容器能在使用之前使填料和溶液發(fā)生混合。使用這種給藥方式，可以將血纖維蛋白溶解劑和肽分別裝入兩個容器中或一起冰凍干燥成粉末并用單個容器提供。
當兩種試劑以溶液形式提供時，可以將它們裝入輸注/注射系統(tǒng)同時給藥或成對裝藥形式的依次給藥。例如血小板凝聚抑制劑可以以體內(nèi)可注射的形式施用或以通過管子與第二個輸注袋中的血纖維蛋白溶解劑相連的一系列連接的輸注袋形式施用。使用這種系統(tǒng)，病人開始獲得藥團型注射或輸注的肽抑制劑，接著輸注血纖維蛋白溶解劑。
本發(fā)明化合物的藥物活性可以用它們抑制3H-SK＆F107260，已知的RGD-血纖維蛋白原拮抗劑與GPⅡbⅢa受體結(jié)合的能力；它們抑制試管內(nèi)血小板凝聚的能力，和它們抑制體內(nèi)血栓形成的能力來評價。
RGD介導的GPⅡb-Ⅲa結(jié)合的抑制RGD-介導的GPⅡb-Ⅲa結(jié)合的抑制作用可用通過按照WO93/00095(PCT/US/92/05463)中公開的方法評價化合物抑制3H-SKF＆107260，已知的RGD血纖維蛋白原拮抗劑與GPⅡbⅢa受體結(jié)合的能力來顯示說明。
血小板凝聚的抑制血小板凝聚的抑制是按照WO93/00095(PCT/US/92/05463)中公開的方法來試驗說明。
本發(fā)明的化合物抑制由ADP刺激的人體血小板凝聚，其IC50為約0.001至約150μM。優(yōu)選的化合物其IC50小于0.1μM。
為了評價化合物對血漿蛋白酶的穩(wěn)定性，在興奮劑加入之前在PRP中將化合物培育3小時(而不是3分鐘)。
體內(nèi)血小板凝聚的抑制體內(nèi)血栓形成的抑制可以按照在Aiken等人的Prostaglandins,19,629(1980)中公開的方法記錄肽注入麻醉狗后的全身的血液動力的效果。
下面給出的實施例不是用來限定本發(fā)明的范圍，而是用于說明本發(fā)明的化合物如何制備和使用。許多其它的實施方案對于本領域內(nèi)的普通技術人員來說是顯而易見的。
下列實施例不是對本發(fā)明范圍的限制，但它們舉例說明了如何制備和使用本發(fā)明化合物。對于本領域技術人員來說，許多其他實施方案是顯而易見和易于得到的。
實施例在這些實施例中，所有溫度均為攝氏度。質(zhì)譜是用快速原子轟擊(FAB)或電子噴霧(ES)離子化法進行的。熔點是在Thomas-Hoover毛細管熔點儀上測定的，并且未經(jīng)校正。
除非另有說明，用Bruker AM250分光計在250MHz記錄NMR。所報告的化學位移是從四甲基硅烷向低場偏移的ppm(δ)。NMR譜的多重度表示如下s=單峰，d=雙峰，t=三重峰，q=四重峰，m=多重峰，dd=兩組雙峰，dt二三組雙峰，等等，br代表寬峰。J代表NMR偶合常數(shù)，單位赫茲。
Diazald是N-甲基-N-亞硝基-對甲苯磺酰胺，它是AlrichChemical Co.,Milwaukee,Wisconsin的注冊商標。Celite是由酸洗硅藻土組成的助濾劑，它是Mansville Corp.,Denver,Colorado的注冊商標。Florisil是活化的硅酸鎂色譜載體，它是FloridonCo.,Pittsburgh,Pennsylvania的注冊商標。Analtech硅膠GF和EM硅膠薄層板被用于薄層色譜?？焖俸椭亓ιV均通過Merck60(230-400目)硅膠進行。ODS是指十八烷基甲硅烷基衍生的硅膠色譜載體。AN/W-TFA代表在含有0.1％TFA的水中指定百分比的乙腈的等洗脫體系。5μApex-ODS代表十八烷基甲硅烷衍生的硅膠載體，其標稱粒度5μ，由JonesChromatography,Littleton,Colorado制造。YMC ODS-AQ是ODS色譜載體，它是YMC Co.Ltd.,Kyoto,Japan的注冊商標。PRP-1是聚合的(苯乙烯-二乙烯基苯)色譜載體，它是Hamilton Co.,Reno,Nevada的注冊商標。
下列方法是對制備本發(fā)明化合物的某些有用中間體的制備方法的說明。
制備例1制備3-(2-吡嗪基)丙酸a)3-(2-吡嗪基)丙酸叔丁基酯將二異丙胺(4.0ml,28.5mmol)的THF(20ml)溶液在-78℃下用2.5M正丁基鋰(11.42ml,28.5mmol)處理。混合物溫熱至室溫0.5小時，冷卻到-78℃，加入2-甲基吡嗪(2.0ml,21.9mmol)。將反應混合物溫熱至室溫，攪拌1小時，冷卻到-78℃，加入溴乙酸丁酯(4.25ml,26.3mmol)，將反應混合物溫熱至室溫，攪拌18小時并用水(1ml)驟冷。濃縮混合物，殘余物通過快速色譜純化(硅膠，60％乙酸乙酯/己烷)，得到標題化合物(3.06g,67％)，為淺黃色油狀物。MS(ES)m/e 209[M+H]+；1H NMR(250MHz)δ8.37-8.57(m,3H),3.10(t,2H),2.74(t,2H),1.43(s,9H)。b)3-(2-吡嗪基)丙酸用THF(3ml)處理制備例1(a)(0.26g,1.2mmol)的化合物30分鐘，濃縮混合物，得到標題化合物(0.18g,98％)。為淺黃色油狀物。1H NMR(90MHz)δ8.41-8.56(m,3H),3,24(t,2H),2.77(t,2H)。
制備例2制備3-(4-吡啶基)丙胺a)N-[3-(4-吡啶基)丙基]苯鄰二甲酰亞胺將偶氮二甲酸二乙酯(4.4g,25.4mmol)溶于無水THF中，并滴加到3-(4-吡啶基)丙醇(3.18g,23.18mmol)、三苯基膦(12.3g,46.9mmol)和苯二甲酰亞胺(3.6g,24.5mmol)的無水THF(50ml)溶液中?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?.5小時，濃縮，殘余物溶于乙醚中并過濾。將濾餅溶于己烷/乙酸乙酯/氯仿(40∶30∶30)中，并進行快速色譜純化(硅膠，30∶35∶35己烷∶乙酸乙酯∶氯仿)(3L)，得到標題化合物(3.3g,54％)。1H NMR(90MHz,CDCl3)δ8.44(m,2H),7.71(m,4H),7.13(d,2H),3.70(t,2H),2.65(t,2H),2.05(m,2H)。b)3-(4-吡啶基)丙胺將制備例2(a)的化合物(2.1g,7.7mmol)溶于乙醇，用無水肼(0.3ml,9.5mmol)處理，攪拌過夜并濃縮。殘余物用肼乙醇溶液處理過夜，濃縮，并將殘余物溶于氯仿，過濾并濃縮，得到標題化合物(1.1g，定量)。1H NMR(90MHz,CDCl3)δ8.45(d,2H),7.77(t,1H),7.40(m,2H),7.12(d,2H),3,38(q,2H),2.60(t,2H),1.86(m,2H)。
制備例3制備5-(芐氧羰基氨基)戊胺在0℃下，向1,5-二氨基戊烷二鹽酸鹽(2.9g,16.7mmol)在THF(100ml)中的懸浮液中加入20％氫氧化鈉(10.0g,50mmol)水溶液。快速滴加氯甲酸芐酯(1.7g,10mmol)的THF(10ml)溶液，所得混合物在室溫下攪拌。1小時后分出有機層并濃縮，將得到的殘余物溶于乙酸乙酯(200ml)中。該溶液用水(3×50ml)萃取，干燥(硫酸鈉)并濃縮。殘余物再溶于乙醚(50ml)中，并加入1.0M氯化氫乙醚溶液(3.0ml)。將產(chǎn)生的沉淀過濾，懸浮于CH2Cl2(75ml)中并與5％氫氧化鈉(15ml)一起震蕩。有機層用水(75ml)洗滌，干燥(硫酸鈉)并濃縮，得到標題化合物(0.25g,30％):1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.15-7.4(m,5H),5.15-5.4(m,1H),5.05(s,2H),3.05-3.2(m,2H),2.55-2.7(m,2H),1.2-1.5(m,6H)。
制備例4制備4-[N-(叔丁氧羰基-N-(丙基)氨基甲基]苯胺a)4-[N-叔丁氧羰基-N-(丙基)氨基甲基]-1-硝基苯室溫下，將N-(丙基)氨基甲基-1-硝基苯(1.8g,9.27mmol)、三乙胺(1.41g,13.9mmol)和碳酸二叔丁基酯(2.8g,13mmol)的THF(60ml)溶液攪拌1小時，濃縮，殘余物在水(100ml)中攪拌1小時。潷析水相，將殘余物溶于乙酸乙酯(300ml)中。溶液用水(3×100ml)和鹽水(100ml)萃取，干燥(硫酸鈉)并濃縮，得到標題化合物(2.65g,95％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.2(d,2H),7.4(d,2H),4.5(m,2H),3.15(d,2H),1.3-1.6(m,9H),0.9(t,3H)。b)4-[N-(叔丁氧羰基)-N-(丙基)氨基甲基]苯胺將含有10％鈀/炭(0.4g)的制備例4(a)化合物(2.7g,9.2mmol)的乙醇(100ml)溶液在40psi下氫化。30分鐘后，將混合物過濾并濃縮，得到標題化合物(2.4g,100％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.0-7.3(m,3H),6.6(d,1H),4.3(m,2H),3.6(br,2H),3.1(m,2H),1.4-1.6(m,9H),0.9(t,3H)。
制備例5制備3-[N-(叔丁氧羰基)氨基甲基]芐胺和4-[N-(叔丁氧羰基)氨基甲基]芐胺該標題化合物是用J.Med.Chem.,32,391(1989)的一般方法制備的。
制備例6制備3-[4-[N-(叔丁氧羰基)哌啶基]]丙胺a)3-[4-[N-(叔丁氧羰基)哌啶基]]丙醇將3-(4-吡啶基)丙醇(10.40g,75.8mmol)溶于冰醋酸中，加入氧化鉑(1g)，將混合物震蕩氫化(50psi)6小時?；旌衔锿ㄟ^Celite過濾，濃縮，并經(jīng)甲苯濃縮二次。將殘余物減壓干燥，溶于CH2Cl2(150ml)并用三乙胺(10.2g,100.7mmol)然后用碳酸二叔丁酯(18.0g,82.5mmol)處理。反應物攪拌2小時，濃縮，將殘余物溶于乙酸乙酯，依次用水、1N鹽酸(2×)、水和1N碳酸氫鈉(2×)洗滌。將有機相干燥(硫酸鎂)、過濾并濃縮；殘余物通過快速色譜純化(硅膠，氯仿；5∶95甲醇∶氯仿)，得到標題化合物(12.87g,68.7％):TLCRf0.78(硅膠9∶1，氯仿∶甲醇)，1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.08(m,2H),3.65(t,2H),2.64(t,2H),1.80-0.90(m),1.43(s,9H)。b)N-[3-[4-[N-(叔丁氧羰基)哌啶基]]丙基]苯鄰二甲酰亞胺將制備例6(a)化合物(2.0g,8.22mmol)溶于含有苯鄰二甲酰亞胺(1.52g,10.34mmol)和三苯基膦(2.22g,8.46mmol)的無水THF(100ml)中。將偶氮二甲酸二乙酯(1.65g,9.53mmol)溶于無水THF中，并緩慢加入醇反應混合物中。反應物在室溫攪拌3天。真空蒸發(fā)溶劑。殘余物溶于己烷∶乙酸乙酯(9∶1)中并進行快速色譜純化(硅膠，10％，20％乙酸乙酯/己烷)，得到標題化合物(2.0g,60.6％)。1H NMR(90MHz,CDCl3)δ8.05-7.65(m,4H),4.40(br.d.,2H),3.72(t,2H),2.78(t,2H),1.0-2.0(m),1.50(s.,9H)c)3-[4-[N-(叔丁氧羰基)哌啶基]]丙胺將制備例6(b)化合物(2.0g,5.42mmol)溶于乙醇(50ml)中。加入無水肼(過量)，將溶液攪拌過夜，濃縮，殘余物溶于氯仿并過濾。將濾液濃縮，得到標題化合物(863.5mg,65.7％)。1H NMR(250MHz,CDCl3)δ4.05(br.d.,2H),3.00(t,2H),2.66(t,2H),2.2-0.90(m),1.45(s,9H)；TLC Rf 0.63(3∶1∶1n-Bu0H∶HOAc∶水)。
制備例7制備2-[1-[4-(芐氧羰基)哌嗪基]]乙胺和2-[1-[4-(芐氧羰基)哌嗪基]]-N-甲基乙胺a)2-[1-[4-(芐氧羰基)哌嗪基]]乙胺根據(jù)Tet.Lett.,27,4391(1986)的一般方法保護2-(1-哌嗪基)乙胺。將叔丁基氯二苯基硅烷(7.8ml,30mmol)的乙腈(10ml)溶液滴加到在10℃攪拌著的2-(1-哌嗪基)乙胺(4.0ml,31mmol)和三乙胺(6.3ml,45mmol)的乙腈(20ml)溶液中?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?小時，冷卻到10℃，用三乙胺(6.3ml,45mmol)和氯甲酸芐酯(4.3ml,30mmol)的CH2Cl2(10ml)溶液處理?；旌衔镌谑覝財嚢?小時，過濾并濃縮。殘余物在80％乙酸(100ml)中攪拌過夜，倒入鹽水中并用乙酸乙酯洗滌。水相用飽和碳酸鈉堿化，用乙酸乙酯萃取，將有機相干燥(硫酸鎂)、過濾并濃縮，得到標題化合物(1.1g,14％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.43(6H,m),2.80(2H,m),3.52(4H,m),5.14(2H,s),7.38(5H,s)。b)2-[1-[4-(芐氧羰基)哌嗪基]]-N-甲基乙胺在10℃下將甲酸(0.5ml,12.2mmol)通過注射器加入乙酸酐(1.0ml,9.8mmol)中?；旌衔飻嚢?0分鐘并在50℃加熱2小時。將混合物冷卻到室溫，加入無水THF(10ml)，然后加入溶于THF的制備例7(a)的化合物(1.0g,3.8mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?.5小時，濃縮，殘余物溶于THF(25ml)并冷卻到10℃。在10℃下滴加溶于THF(10ml)中的1.0M二甲硫硼(1ml,10mmol)。將混合物攪拌直至氣體停止逸出，并加熱回流2小時。將混合物冷卻，用飽和氯化氫甲醇溶液(20ml)小心處理并加熱回流1小時。將混合物濃縮，得到標題化合物(400mg,40％)。MS(ES)m/e 278.0[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.68-3.92(15H,m),5.15(2H,s),7.37(5H,s)制備例8制備6-(叔丁氧羰基氨基)己胺將1,6-二氨基己烷(14g,0.12mol)乙醇(500ml)溶液與碳酸二叔丁酯(23g,0.1mol)乙醇(500ml)溶液混合，并攪拌過夜。將混合物過濾，濃縮，殘余物與乙醚(200ml)和水(50ml)混合物一起震蕩。水相用乙醚(50ml)萃取兩次，有機相依次用鹽水、冷0.4N鹽酸(150ml)和水(2×100ml)萃取。用1N氫氧化鈉調(diào)節(jié)酸性萃取液的PH至12-13，并用乙醚(50ml)萃取兩次。有機相用鹽水洗滌，干燥(硫酸鈉)并濃縮，得到標題化合物(13.16g,49％)。TLC Rf 0.53(Kieselgel 60 F 254,15∶3∶22-丁醇∶甲酸∶水)MS(ES)m/e 217.0；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.57(brs,1H),3.10-3.12(m 2H),2.68-2.71(m 2H),1.84(brs 2H),1.44-1.48(brs 9H),1.32-1.34(brs8H)。
制備例9制備4-(叔丁氧羰基氨基)胺用制備例8的方法，只是用1,4-二氨基丁烷代替1,6-二氨基己烷，得到標題化合物(2.5g,26％)..TLC Rf 0.39(Kieselgel 60 F 254,15∶3∶22-丁醇∶甲酸∶水)；MS(ES)m/e 189.0。
制備例10制備2-(2-吡嗪基)乙胺a)2-[N-(芐氧羰基氨基)]乙基-(2-吡嗪)將制備例1(b)的化合物(0.49g,3.24mmol)、三乙胺(1.02g,10.1mmol)和二苯基磷?；B氮(1.28g,4.5mmol)在甲苯(20ml)中的混合物在105℃加熱0.5小時。將溫度降低，反應物在80℃用芐醇(1.11g,10.14mmol)處理14小時。將混合物濃縮，殘余物通過快速色譜純化(硅膠，60％乙酸乙酯/己烷)，得到標題化合物的被保護胺(0.40g,48％)，為淺黃色油狀物MS(ES)258[M+H]+；1HNMR(250MHz)δ8.35-8.70(m,3H),7.07-7.51(m,5H),5.42(b,1H),5.11(s,2H),3.62(t,2H),2.99(t,2H)。b)2-(2-吡嗪基)乙胺將制備例10(a)化合物(0.15g,0.58mmol)溶于甲醇(10ml)中，加入鈀/炭(5％,50mg)?；旌衔餁浠?小時，通過Celite過濾，濃縮，得到標題化合物(69mg,96％)，為淺黃色油狀物。
制備例11制備(S)-4-[N-[N-(叔丁氧羰基)丙氨?；鵠氨基甲基]苯胺a)(S)-4-[N-[N-(叔丁氧羰基)丙氨酰基]氨基甲基]-1-硝基苯在室溫下，將4-硝基芐胺鹽酸鹽(1.89g,10.0mmol)的DMF(20ml)溶液用4-甲基嗎啉中和，并用N-叔丁氧羰基-L-丙氨酸N-羥基琥珀酰亞胺酯(2.86g,10.0mmol)的DMF(14ml)溶液處理。混合物在室溫下保持72小時，濃縮，所得固體再溶于乙酸乙酯中，依次用水、1N鹽酸和鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)并濃縮，得到標題化合物(2.37g,73％)，為油狀物。TLC Rf 0.74(5∶95甲醇∶乙酸乙酯)；1H NMR(CDCl3)δ1.41(d,J=11.2Hz,3H),1.46(s,9H),4.22(m,1H),4.56(m,2H),4.94(brs,1H),6.90(brs,1H),7.43(d,J=12.8Hz,2H),8.18(d,J=12.8Hz,2H)。b)(S)-4-[N-[N-叔丁氧羰基)丙氨?；鵠氨基甲基]苯胺將制備例11(a)化合物(2.37g,7.3mmol)、10％Pd/炭(0.24g,0.23mmol)和甲醇(125ml)的混合物在室溫H(1atm.)氣氛下攪拌6.5小時，過濾，將濾液濃縮，得到標題化合物(2.02g,98％)，為油狀物。TLC Rf0.68(5％甲醇/乙酸乙酯)；1H NMR(CDCl3)δ1.33(d,J=7.10Hz,3H),1.39(s,9H),4.12(m,1H),4.27(d,J=5.0Hz,2H),5.05(brs,1H),6.38(brs,1H),6.60(d,J=8.3Hz,2H),7.01(d,J=8.3Hz,2H)。
制備例12制備4-[(叔丁氧羰基)氨基甲基]-3-氯苯甲酸a)4-(苯二甲酰亞氨基甲基)-3-氯苯甲酸甲酯將4-溴甲基-3-氯苯甲酸甲酯(10g,38mmol)和苯二甲酰亞胺鉀(9.85g,53mmol)在二甲基甲酰胺(65ml)中的混合物攪拌，并加熱至85℃2小時。將熱混合物倒入冰水中，得到的固體過濾，依次用水、乙醇和少量乙醚洗滌，干燥，得到標題化合物。b)4-(氨基甲基)-3-氯苯甲酸將制備例12(a)化合物(4.0g,12.2mmol)和肼(1.25g,25mmol)在甲醇(55ml)中的混合物加熱回流1小時，濃縮，殘余物用濃鹽酸(25ml)處理?；旌衔锛訜峄亓?小時，冷卻到0℃，并過濾。將濾液濃縮，殘余物用水稀釋并用2N氫氧化鈉調(diào)節(jié)至pH7。將產(chǎn)生的沉淀過濾并干燥，得到標題化合物。c)4-[(叔丁氧羰基)氨基甲基]-3-氯苯甲酸將制備例12(b)化合物(1.8g,8.2mmol)、碳酸二叔丁酯(2.1g,9.8mmol)和三乙胺(2.3ml,16.4mmol)在二甲基甲酰胺(15ml)中的混合物攪拌4小時，濃縮，使殘余物在5％檸檬酸水溶液和乙酸乙酯之間分配。有機相用5％檸檬酸水溶液洗滌，干燥(硫酸鎂)并濃縮，得到標題化合物。
制備例13制備2-(氨基)吡啶-4-乙胺二鹽酸鹽a)2-(乙酰氨基)吡啶-4-甲酸甲酯向2-(乙酰氨基)吡啶-4-甲酸(25g,139mmol)中加入無水氯化氫的甲醇飽和溶液(600ml)。將混濁的懸浮液在室溫攪拌16小時并回流24小時。將所得溶液濃縮，溶于氯仿中，用飽和碳酸氫鈉、鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)并濃縮，得到標題化合物，為白色固體(17.86g,84％)。TLC Rf0.55(5％甲醇/氯仿)；1H NMR(CDCl3)δ3.96(3H,s),4.80(2H,s),7.12(1H,J=5Hz,d),7.19(1H,s),8.10(1H,d,J=5Hz)。b)2-(氨基)吡啶-4-甲醇在0℃氬氣氛及攪拌下，向制備例13(a)化合物(15.14g,100mmol)的無水THF(300ml)溶液中滴加1N氫化鋁鋰THF溶液(200ml,200mmol)，歷經(jīng)1小時。加完后撤去冰浴，反應物在室溫攪拌1小時。將反應物冷卻到0℃，用乙酸乙酯(50ml)、水(8ml)、15％氫氧化鈉(8ml)和水(22ml)小心地使反應物驟冷。15分鐘后，將得到的懸浮液過濾，濾器用20％甲醇/氯仿(200ml)溶液充分洗滌。濃縮濾液，殘余物通過快速色譜純化(硅膠，10％甲醇/氯仿)，得到標題化合物(9.60g,77％)，為白色固體。TLC Rf0.17(5％甲醇/氯仿)。1H NMR(CD3OD)δ4.55(2H,s),4.88(3H,s),6.62(1H,d,J=5Hz),6.65(1H,s),7.88(1H,d,J=5Hz)。c)2-氨基-4-(溴甲基)吡啶向制備例13(b)化合物(9.40g,76mmol)中加入48％氫溴酸(75ml)。溶液在氬氣氛下加熱至100℃16小時，濃縮并真空干燥，得到標題化合物，為灰白色固體，該產(chǎn)物不經(jīng)純化而用于下一步反應中。d)3-[(2-氨基)吡啶-4-基]-2-(甲氧羰基)丙酸甲酯在0℃下，將制備例13(c)化合物(18.67g,70mmol)一次加入攪拌著的丙二酸二甲酯(20ml,175mmol)和甲醇鈉(25wt％甲醇溶液，35ml,162mmol)的無水甲醇(100ml)溶液中。5分鐘后，將反應物溫熱至室溫?；旌衔飻嚢?小時，用乙酸酸化并濃縮。殘余物溶于氯仿中，用飽和碳酸氫鈉、鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)并濃縮。殘余物通過快速色譜純化(硅膠，3％甲醇/氯仿)，得到標題化合物(11.00g,66％)，為油狀物，真空下固化。TLC Rf 0.46(5％甲醇∶氯仿)。1H NMR(CDCl3)δ3.10(2H,d,J=8Hz)3.69(1H,t),3.73(6H,s),4.51(2H,brs),6.38(1H,s),6.50(1H,d,J=5Hz),8.01(1H,d,J=5Hz)。e)2-(氨基)吡啶-4-丙酸鹽酸鹽向制備例13(d)化合物(11.0g,46mmol)中加入濃鹽酸(100ml)。反應物在100℃加熱16小時，濃縮，得到標題化合物(9.36g,100％)，為白色固體。f)2-(氨基)吡啶-4-丙酸甲酯向制備例13(e)化合物(8.36g,41mmol)中加入無水氯化氫的甲醇飽和溶液(300ml)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?天，濃縮，真空干燥。將剩余固體溶于氯仿，用飽和碳酸鈉、鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)并濃縮，得到標題化合物(7.40g,100％)。TLC Rf0.44(5％甲醇/氯仿)。1H NMR(CDCl3)δ2.72(4H,m),3.70(3H,s),4.69(2H,brs),6.38(1H,s),6.52(1H,d,J=5Hz),8.01(1H,d,J=5Hz)。g)2-(乙酰氨基)吡啶-4-丙酸甲酯向攪拌著的制備例13(f)化合物(7.40g,41mmol)的THF(200ml)溶液中加入碳酸氫鈉(4.5g,53.6mmol)。然后加入乙酸酐(5ml,53mmol)。攪拌16小時后，反應物用乙酸乙酯稀釋，用飽和碳酸鈉，鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)并濃縮。殘余物通過快速色譜純化(硅膠，3％甲醇/氯仿)，得到標題化合物(9.02g,98％)。TLC Rf0.27(60％乙酸乙酯/己烷)。1H NMR(CDCl3)δ2.22(3H,s),2.70(2H,t),3.0(2H,t),3.72(3H,s),6.98(1H,d,J=5Hz),8.20(1H,s),8.24(1H,d,J=5Hz),9.88(1H,brs)。h)2-(乙酰氨基)吡啶-4-丙酸向攪拌著的制備例13(g)化合物(9.0g,40mmol)的二噁烷(150ml)溶液中滴加1N氫氧化鈉(80ml)。攪拌5小時后，反應物用1N鹽酸(80ml)酸化，將得到的溶液濃縮成小體積使產(chǎn)物沉淀，將其濾出，用少量冷水洗滌，真空干燥，得到標題化合物(7.83g,94％)。TLC Rf0.32(95∶4∶1氯仿∶甲醇∶乙酸)。MS(DCI/NH3)m/e 209.1[M+H]+；1H NMR(D6-DMSO)δ2.08(3H,s),2.56(2H,t),3.36(2H,brs),6.97(1H,d,J=5Hz),7.97(1H,s),8.18(1H,d,J=5Hz)。i)2-[(2-乙酰氨基)吡啶-4-基]-N-(甲氧羰基)乙胺將二苯基磷?；B氮(5.7ml,26mmol)加入攪拌著的制備例13(h)化合物(4.75g,23mmol)和三乙胺(3.8ml,27mmol)的無水甲苯(150ml)溶液中。反應物在室溫下攪拌15分鐘，然后在安全防護屏后，連上回流冷凝器將反應物加熱至80℃。約10分鐘后有氣體劇烈產(chǎn)生。將反應物再攪拌30分鐘，混合物澄清且氣體停止發(fā)生。加入甲醇(5ml,123mmol)，將反應物在80℃再攪拌4小時。濃縮混合物，殘余物通過快速色譜純化(硅膠，3％甲醇/氯仿)，得到標題化合物(3.92g,72％),TLCRf 0.42(5％甲醇/氯仿)。MS(DCI/NH3)m/e 238.1[M+H]+；1H NMR(CDCl3)δ2.23(3H,s),2.82(2H,t),3.39(2H,m),3.68(3H,s),4.81(2H,s),7.02(1H,d,J=5Hz),8.03(1H,s),8.22(1H,d,J=5Hz)。j)2-(氨基)吡啶-4-乙胺向制備例13(i)化合物(3.80g,16mmol)中加入6N鹽酸溶液(150ml)。反應物在110℃加熱24小時，濃縮并真空干燥，得到標題化合物(3.37g,100％)，為白色固體。MS(DCI)m/e 138.1[M+H]+。
制備例14制備2-(羥基)吡啶-4-乙胺鹽酸鹽a)2-[(2-甲氧基)吡啶-4-基]-N-(甲氧羰基)乙胺用制備例13(i)的方法，只是用2-(甲氧基)吡啶-4-丙酸代替制備例13(h)化合物，得到標題化合物。TLC Rf0.24(30％乙酸乙酯/己烷)。MS(DCI/NH3)m/e 211.1[M+H]+；1H NMR(CDCl3)δ2.80(2H,t),3.49(2H,m),3.72(3H,s),3.96(3H,s),4.82(1H,brs),6.66(1H,s),6.79(1H,d,J=5Hz),8.17(1H,d,J=5Hz)。b)2-(羥基)吡啶-4-乙胺鹽酸鹽用制備例13(j)的方法，只是用制備例14(a)的化合物代替制備例13(i)的化合物，得到標題化合物。MS(DCI/NH)m/e 139.1[M+H]+。
制備例15制備4-[(叔丁氧羰基)(氨基甲基)]苯酚將4-(氨基甲基)苯酚[J.Med.Chem.,26,808-813,1983]溶于二氯甲烷(5ml)中，在0℃用1N氫氧化鈉(4ml)然后用碳酸二叔丁酯(610mg,2.8mmol)處理。將溶液溫熱至室溫，攪拌4小時并濃縮。殘余物通過快速色譜純化(硅膠，2％甲醇/氯仿)，得到標題化合物(440mg)。1H NMR(250MHz)δ7.06(d,2H),6.78(d,2H),4.95(bs,1H),4.20-4.18(m,2H),1.45(s,9H)。
制備例16制備4-[2-[N-(叔丁氧羰基)氨基乙基]]哌啶a)4-[[2-(叔丁氧羰基)氨基]乙基]吡啶在0℃，用碳酸二叔丁酯(2.75g,12.6mmol)和三乙胺(1.76ml,12.6mmol)處理吡啶-4-乙胺(1.54g,12.6mmol)的二氯甲烷(15ml)溶液，在室溫攪拌3天。混合物用氯仿稀釋，用5％碳酸鈉洗滌，干燥(硫酸鎂)并濃縮。殘余物通過快速色譜純化(硅膠，80％乙酸乙酯/己烷)，得到標題化合物1.01g(36％)。1H NMR(90MHz,CDCl3)δ8.53(d,2H,J=4.5Hz),7.17(d,2H,J=4.5Hz),5.77(brs,1H),3.40(dt,2H,J=6.0,7.5Hz),2.83(t,2H,J=7.5Hz),1.45(s,9H)。b)4-[2-[N-(叔丁氧羰基)氨基乙基]]哌啶將制備例16(a)化合物(1.01g,4.54mmol)和氧化鉑(150mg)在乙醇中的混合物在室溫氫氣氛下震蕩4小時。再加入1N鹽酸(4ml)和氧化鉑(100mg)，反應混合物與氫氣在室溫下震蕩1小時，然后在中性pH(用5％碳酸鈉調(diào)節(jié))氬氣氛下放置18小時。經(jīng)Celite過濾除去催化劑，將濾液濃縮。殘余物經(jīng)甲醇∶甲苯濃縮兩次，溶于氯仿中，過濾并濃縮，得到標題化合物，該產(chǎn)物不經(jīng)純化而被使用。
制備例17制備N-甲基-2-(1-甲基-1,2,5,6-四氫吡啶-4-基)乙胺二鹽酸鹽a)N-(叔丁氧羰基)-N-甲基-2-(1-甲基-吡啶-4-基)乙胺將N-甲基-2-(吡啶-4-基)乙胺(4.1g,30mmol)、碳酸二叔丁酯(26.2g,120mmol)和三乙胺(15.2g,150mmol)在二氯甲烷(100ml)中的混合物攪拌16小時，濃縮，殘余物用水稀釋并用二氯甲烷萃取。將有機相洗滌，干燥(硫酸鎂)并濃縮。殘余物經(jīng)色譜純化(硅膠，5％甲醇∶二氯甲烷)，得到標題化合物(4g,56％)。b)N-(叔丁氧羰基)-N-甲基-2-(1-甲基-4-吡啶鎓)乙胺碘化物將制備例17(a)化合物(2g,10mmol)和碘甲烷(21.2g,150mmol)在乙腈(30ml)中的混合物加熱回流2小時。濃縮混合物，殘余物溶于二氯甲烷中，用活性炭脫色，過濾，將濾液濃縮。殘余物用乙醚處理，得到標題化合物(3.0g,79％)，為黃色固體。MS(ES)m/e 251(M-I]+。c)N-(叔丁氧羰基)-N-甲基-2-(1-甲基-1,2,5,6-四氫吡啶-4-基)乙胺二鹽酸鹽將制備例17(b)化合物(0.95g,25mmol)溶于甲醇(30ml)中，用硼氫化鈉(0.38g,10mmol)處理并攪拌2小時。將混合物濃縮，溶于水并用二氯甲烷萃取。將有機相干燥(硫酸鎂)、濃縮，殘余物用4N氯化氫的二噁烷溶液(5ml)處理過夜。濃縮混合物，殘余物與甲苯共沸。所得固體用乙醚研制，得到標題化合物(0.5g,89％)。
制備例18制備3-[N-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基]丙醛在-78℃氬氣氛下，向攪拌著的草酰氯(2ml,22mmol)的無水二氯甲烷(50ml)溶液中滴加二甲亞砜(3.4ml,44mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液。2分鐘后，滴加3-[N-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基]丙醇(4.86g,20mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液，歷時5分鐘。在-78℃再攪拌15分鐘后，滴加三乙胺(14ml)。5分鐘后，反應物變成粘稠的白色懸浮液，將其溫熱至室溫并攪拌16小時。反應混合物用冷的1N鹽酸和鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)并濃縮。殘余物通過快速色譜純化(硅膠，30％乙酸乙酯/己烷)，得到標題化合物(4.18g,87％)。TLC Rf0.40(30％乙酸乙酯/己烷)；1H NMR(CDCl3)δ0.95-1.80(7H,m),1.48(9H,s),2.40-2.90(4H,m),4.14(2H,br dt),9.88(1H,t)。
制備例19制備4-[N-(叔丁氧羰基)氨基甲基]苯甲醛a)4-[N-(叔丁氧羰基)氨基甲基]芐醇在0℃向攪拌著的4-[N-(叔丁氧羰基)氨基甲基]苯甲酸(16.5g,65mmol)和三乙胺(10ml,71mmol)的無水THF(500ml)溶液中滴加氯甲酸乙酯(7.5ml,78mmol)。攪拌15分鐘后，一次加入硼氫化鈉(6g,159mmol)，反應物溫熱至室溫并攪拌16小時。將反應物在冰浴中冷卻，用1N鹽酸小心地驟冷，用乙酸乙酯萃取，有機相用鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)并濃縮。殘余物通過快速色譜純化(硅膠，20％乙酸乙酯∶氯仿)，得到標題化合物(10.07g,65％)，為白色固體。TLC Rf0.31(20％乙酸乙酯∶氯仿)；1H NMR(CDCl3)δ1.46(9H,s),3.28(1H,brs),4.27(2H,d,J=6Hz),4.65(2H,s),5.04(1H,brs),7.30(4H,dd)。b)4-[N-(叔丁氧羰基)氨基甲基]苯甲醛向制備例19(a)化合物(4.0g,16.9mmol)的無水二氯甲烷(50ml)溶液中加入二氧化錳(10g,115mmol)。將混合物攪拌并回流16小時，通過Celite濾墊熱過濾，將濾墊用二氯甲烷清洗。濃縮濾液，得到標題化合物(3.55g,89％)，為白色固體。TLC Rf0.45(5％甲醇/氯仿)；1H NMR(CDCl3)δ1.49(9H,s),4.43(2H,d,J=6Hz),5.15(1H,brs),7.51(2H,d,J=8Hz),7.92(2H,d,J=8Hz),10.10(1H,s)。
制備例20制備2-[2-(氨基)吡啶-4-基]-N-甲基乙胺a)2-[2-(氨基)吡啶-4-基]-N-甲?；?N-甲基乙胺向攪拌著的制備例13(j)化合物(1.5g,7.1mmol)的1N氫氧化鈉(14.3ml)、水(15ml)和THF(30ml)溶液中滴加4-硝基苯基甲酸酯(1.3g,7.8mmol)的THF(15ml)溶液。攪拌16小時后，將反應物濃縮，殘余物通過快速色譜純化(硅膠，15∶85∶0.1甲醇/氯仿∶氫氧化銨)，得到標題化合物(1.14g,96％)，為淺黃色固體。TLC Rf0.32(90∶10∶0.1，氯仿∶甲醇∶氫氧化銨)；1H NMR(CDCl3)δ2.77(2H,t),3.57(2H,dt),4.84(2H,brs),6.47(1H,s),6.57(1H,d,J=6Hz),6.94(1H,brs),8.0(1H,d,J=6Hz),8.21(1H,s)。b)2-[2-(氨基)吡啶-4-基]-N-甲基乙胺在0℃氬氣氛下，向攪拌著的制備例20(a)化合物(0.5g,3mmol)的無水THF(30ml)溶液中滴加1N氫化鋁鋰的THF溶液(20ml,20mmol)。將反應物溫熱至室溫并加熱回流16小時。冷卻到0℃后，將反應物用乙酸乙酯(2ml)、水(0.8ml)、15％氫氧化鈉(0.8ml)和水(2.3ml)小心地驟冷。得到的懸浮液攪拌15分鐘，通過Celite過濾，將濾液濃縮。殘余物通過快速色譜純化(硅膠，75∶25∶0.1氯仿∶甲醇∶氫氧化銨)，得到標題化合物(0.30g,66％)。TLC Rf0.16(80∶20∶0.1，氯仿∶甲醇∶氫氧化銨)；1H NMR(CDCl3)δ2.45(3H,s),2.82(4H,dt),4.95(3H,brs),6.53(1H,s),6.57(1H,d,J=6Hz),7.87(1H,d,J=6Hz)。
制備例21制備4-[N-(叔丁氧羰基)哌嗪-1-基]丁-1-炔將丁炔-1-基-4-甲苯磺酸酯(0.4g,1.7mmol)、N-(叔丁氧羰基)哌嗪(0.28g,1.5mmol)和碳酸氫鈉(0.15g,1.7mmol)在二甲基甲酰胺(7ml)中的混合物攪拌并加熱到80℃。濃縮混合物，使殘余物在二氯甲烷和水之間分配。有機相用鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)并濃縮，得到標題化合物(0.38g)，為油狀物1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.45(m,4H),2.60(t,2H),2.42(m,4H),2.38(t,2H),1.99(s,1H),1.98(s,9H)。
制備例22制備N-(叔丁氧羰基)-4,4′-聯(lián)哌啶將4,4′-聯(lián)哌啶二鹽酸鹽(2.5g,10mmol)溶于水(10ml)中，用5N氫氧化鈉處理至pH8-9，用乙醇稀釋到120ml，并在室溫下攪拌。將所得混合物用碳酸二叔丁酯(2.4g,11mmol)的乙醇(80ml)溶液(一次加入)處理，混合物在室溫下攪拌，間歇加入5N氫氧化鈉以保持pH8-9。5小時后，將混合物濃縮。殘余物溶于1∶1乙醚∶水混合物(100ml)中，用5N氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至12。水相用乙醚萃取，有機相依次用鹽水、稀檸檬酸和水洗滌。用5N氫氧化鈉將水相調(diào)節(jié)到pH12-13，并用乙醚萃取。有機相用鹽水洗滌，干燥(硫酸鈉)，濃縮為澄清的油狀物，將其在真空下干燥，得到標題化合物(1.7g,63％)，為固體。TLC Rf0.4(Kieselgel 60F254,15∶3∶22-丁醇∶甲酸∶水)；MS(ES)m/e 268.3[M+H]+。
制備例23制備(RS)-7-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]羰基]氨基]-1-甲基-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1,3,4,5-四氫-2H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)β-芐基(RS)-N-甲基天冬氨酸酯根據(jù)Benoiton,L.方法(Can.J.Chem.,40,570(1962))制備標題化合物。將硫酸(3.5ml)加入無水乙醚(35ml)中，然后加入芐醇(35ml)。真空除去乙醚，分批加入研細的(RS)-N-甲基天冬氨酸(5g,34mmol)。同時將混合物電磁攪拌。24小時后加入乙醇(70ml)，然后滴加吡啶(17ml)。將混合物冷卻過夜，過濾，得到標題化合物(6.6g,82％)。Mp219-220℃。b)(RS)-β-芐基N-芐氧羰基-N-甲基天冬氨酸酯將β-芐基(RS)-N-甲基天冬氨酸酯(6.6g,27.8mmol)、三乙胺(3.9ml)和碳酸二叔丁酯(6.1g,27.8mmol)懸浮在DMF(45ml)中。溶解后將反應混合物用冷KHSO4溶液處理，用EtOAc萃取，經(jīng)MgSO4干燥，蒸發(fā)，得到標題化合物(6.8g,72％)。MS m/e 338[M+H]+。c)2-氟-5-硝基-[N-(2-苯乙基)]芐胺將2-氟-5-硝基苯甲醛(11.9g,70mmol)和2-苯基乙胺(13ml,0.1mol)溶于甲醇(150ml)和冰醋酸(15ml)中。將溶液冷卻到0℃，分批加入氰基硼氫鈉(6.6g,0.1mol)。用乙酸將反應物調(diào)節(jié)到pH6并于室溫下攪拌24小時。反應混合物用冰驟冷并用水稀釋。用氫氧化鈉調(diào)節(jié)其pH至11，混合物用EtOAc萃取。有機萃取液用冷的稀HCl溶液洗滌，析出固體。過濾得到標題化合物(15.6g,82％)。Mp235-6°,MSm/e 275[M+H]+。d)(RS)-N-[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]-N-甲基-O-芐基天冬酰基[(N′-(2-氟-5-硝基芐基)，N′-(2-苯乙基)]酰胺將制備例23(c)化合物(4.0g,11.9mmol)的CH2Cl2(45ml)溶液在氬氣氛室溫下攪拌。加入三乙胺(3.0ml)和BOP試劑(3.3g,11.9mmol)，然后加入制備例23(b)化合物(6.0g,17.8mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌過夜，并倒入冰水(350ml)中。混合物用乙酸乙酯萃取。合并的有機萃取液用1M KHSO4、水、5％NaHCO3和鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。將混合物過濾，濾液蒸發(fā)，并通過快速色譜純化，得到標題化合物(2.0g,29％)。MS m/e 594.2[M+H]+。e)(RS)-N-甲基-O-芐基天冬氨?；鵞(N′-(2-氟-5-硝基芐基)，N′-(2-苯基乙基)]酰胺將制備例23(d)化合物(2.0g,3.4mmol)與4M HCl/二噁烷(9ml)一起攪拌18小時。真空蒸發(fā)溶劑，得到標題化合物。f)1-甲基-7-硝基-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-1,3,4,5-四氫-2H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸芐基酯向制備例23(e)化合物(2.0g,3.4mmol)的DMSO溶液(50ml)中加入三乙胺(2.4ml)。將反應混合物攪拌過夜，倒入水中，用乙酸乙酯萃取合并的有機相用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。過濾并將有機萃取液真空濃縮，得到標題化合物(1.6g,98％)。MS m/e 474.2[M+H]+。g)7-氨基-1-甲基-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-1,3,4,5-四氫-2H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸芐基酯將制備例23(f)化合物(1.6g,3.38mmol)的乙酸乙酯(100ml)溶液和氧化鉑催化劑(0.6g)在Parr震蕩器上氫氣氛(40psi)下震蕩24小時。從溶液中濾除催化劑。真空蒸發(fā)溶劑，得到標題化合物(1.5g,98％)。MS m/e 444.2[M+H]+。h)7-[[[4-(芐氧羰基氨基亞氨基甲基)苯基]羰基]氨基]-1-甲基-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-1,3,4,5-四氫-2H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸芐基酯將制備例23(g)化合物(1.5g,3.4mmol)、對(芐氧羰基脒基)苯甲酸(1.01g,3.4mmol)、BOP試劑(1.5g,3.4mmol)和三乙胺(1.0ml)在DMF(12ml)中的混合物在氬氣氛下攪拌過夜。將溶液倒入冰水(160ml)和5％NaHCO3(14ml)混合物中，濾出所產(chǎn)生的沉淀。將濾出的固體溶于CH2Cl2中，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾，將濾液真空濃縮成固體(3.2g)。該產(chǎn)物通過色譜法純化(硅膠，65％EtOAc/己烷)，得到標題化合物(1.5g,61％)。MS m/e 724[M+H]+。i)7-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]羰基]氨基]-1-甲基-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-1,3,4,5-四氫-2H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸芐基酯，和7-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]羰基]氨基]-1-甲基-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-1,3,4,5-四氫-2H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸將10％Pd/炭催化劑(1.3g，活化的)加入制備例23(h)化合物(1.5g,2.1mmol)的1∶1冰醋酸∶乙酸乙酯(30ml)和濃鹽酸(0.5ml)溶液中。混合物在Parr震蕩器上氫化(45psi)6小時。將反應混合物過濾，濾液蒸發(fā)，將所得的部分殘余物通過HPLC純化(硅膠-ODS,32％CH3CN/H2O-0.1％TFA)，得到標題的芐基酯和酸。對于芐基酯元素分析(C35H35N5O4·TFA·H2O)計算值C,61.58；H,5.31；N,9.70。實測值C,61.52；H,5.00；N,9.45。對于酸ESMSm/e 590[M+H]+。
制備例24制備(R,S)-8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]氨基]羰基]-1,2,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-3H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸二鹽酸鹽a)3-硝基-4-[N-(2-苯基乙基)氨基甲基]苯甲酸叔丁酯，和3-硝基-4-[N-(叔丁氧羰基)-N-(2-苯基乙基)氨基甲基]苯甲酸叔丁酯將4-溴甲基-3-硝基苯甲酸叔丁酯[按照Int.J.PeptideRes.,36,31(1990)的方法制備](1.6g,0.005mol)的CH2Cl2(10ml)溶液滴加到苯乙胺(1.89g,0.015mol)的CH2Cl2(50ml)溶液中，歷時15分鐘?；旌衔镌谑覝貧鍤夥障聰嚢?4小時并真空濃縮。殘余物溶于THF(50ml)中，用三乙胺(2.5g,0.025mol)和碳酸二叔丁酯(4.4g,0.02mol)的THF(50ml)溶液處理。所得混合物在室溫氬氣氛下攪拌過夜并真空濃縮。殘余物溶于乙酸乙酯中，用水洗滌并用硫酸鈉干燥。將有機相真空濃縮，殘余物用乙酸乙酯∶己烷(15∶85)研制，得到標題化合物(0.87g,37％)。Mp 110-113℃。
將濾液通過色譜純化(硅膠，乙酸乙酯∶己烷15∶85)，得到另外一份化合物(0.5g,21％)。Mp 113-115℃。b)3-氨基-4-[N-(叔丁氧羰基)-N-(2-苯基乙基)氨基甲基]苯甲酸叔丁酯將制備例24(a)化合物(1.3g,0.0028mol)、乙醇(125ml)和10％Pd/C(0.32g)的混合物在氫氣氛下(40psi)震蕩50分鐘。將混合物過濾，濾液真空濃縮，得到標題化合物。Mp 105-106℃。c)(E/Z)-3-[2-(1,4-二甲氧基-1,4-二氧代-2-丁烯基)氨基]-4-[N-(叔丁氧羰基)-N-(2-苯基乙基)氨基甲基]苯甲酸叔丁酯將制備例24(b)化合物(1.15g,0.0027mol)的甲醇(50ml)溶液用乙炔二羧酸二甲酯(0.45g,0.0032mol)處理，得到的溶液在氬氣氛下加熱回流1小時。將混合物真空濃縮，殘余物經(jīng)色譜純化(硅膠，乙酸乙酯∶己烷20∶80)，得到標題化合物(1.3g,85％)。d)(R,S)-3-[2-(1,4-二甲氧基-1,4-二氧代-2-丁基)氨基]-4-[N-(叔丁氧羰基)-N-(2-苯基乙基)氨基甲基]苯甲酸叔丁酯將含有10％Pd/C(0.38g)的制備例24(c)化合物(1.3g,0.0023mol)的甲醇(100ml)溶液在氫氣氛(40psi)中震蕩4.5小時。將混合物過濾，濾液真空濃縮，得到標題化合物。e)(R,S)-8-羧基-1,2,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-3H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯將制備例24(d)化合物(1.3g,0.003mol)的CH2Cl2(50ml)和TFA(50ml)溶液在室溫氬氣氛下保持過夜。將混合物真空濃縮，得到的殘余物含有粗(R,S)-3-[2-(1,4-二甲氧基-1,4-二氧代-2-丁基)氨基]-4-[N-(2-苯基乙基)氨基甲基]苯甲酸。殘余物溶于無水甲醇(70ml)中，用甲醇鈉的甲醇溶液(1.6ml,0.007mol)處理并加熱回流8小時?；旌衔镌谑覝乇３?4小時，用1N HCl乙醚溶液(7.5ml)處理，真空濃縮，用甲醇(3×20ml)處理并真空濃縮。殘余物溶于甲醇∶CH2Cl2∶乙酸(10∶90∶0.4,15ml)中，過濾并色譜純化(硅膠，甲醇∶CH2Cl2∶乙酸10∶90∶0.4)，得到標題化合物(0.66g,70％)。
將固體溶于CH2Cl2(30ml)中，用1N HCl乙醚溶液(3ml)處理。得到(R,S)-8-羧基-1,2,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-3H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯鹽酸鹽。f)(R,S)-8-氯羰基-1,2,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-3H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯鹽酸鹽將制備例24(e)化合物的鹽酸鹽(0.2g,0.5mmol)和亞硫酰氯(6ml)的混合物在氬氣氛下加熱回流15分鐘。混合物真空濃縮，用CH2Cl2(3×20ml)處理，真空濃縮，得到(R,S)-8-氯羰基-1,2,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-3H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯鹽酸鹽，為黃色固體。g)(R,S)-8-[[[4-[N-(芐氧羰基)-氨基亞氨基甲基]苯基]氨基]羰基]-1,2,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-3H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯將4-[N-(芐氧羰基)氨基亞氨基甲基]苯胺(0.13g,0.5mmol)和二異丙基乙胺(0.062g,0.5mmol)的CH2Cl2(25ml)溶液加入制備例24(f)化合物的CH2Cl2(5ml)溶液中?；旌衔镌谑覝乇３?0小時，用二異丙基乙胺(0.15g)處理并用水洗滌。有機相用硫酸鈉干燥并真空濃縮。殘余物通過制備性TLC純化(硅膠，甲醇CH2Cl25∶95)，用甲醇-CH2Cl2-二異丙基乙胺洗脫，得到標題化合物(0.14g,46％)。MS(ES)m/e 634[M+H]+。元素分析(C36H35N5O6·HCl·2.5H2O)計算值C,60.45；H,5.78；N,9.79,實測值C,60.51；H,5.58；N,9.84。h)(R,S)-8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]氨基]羰基]-1,2,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-3H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯將制備例24(g)化合物(0.13g,0.2mmol)和10％Pd/C(0.1g)的甲醇(50ml)和1N HCl乙醚(1.0ml)溶液在氫氣氛(30psi)室溫下震蕩30分鐘。將混合物過濾，濾液真空濃縮，得到標題化合物。1H NMR(CD3OD,400MH2)δ8.0(d,2H),7.8(d,2H),7.0-7.25(m,8H),5.5(d,1H),5.15(m,1H),3.9(d,1H),3.75(m,1H),3.7(s,3H),3.65(m,1H),2.95(dd,1H),2.75(t,2H),2.65(dd,1H)；MS(ES)m/e 500.2[M+H]+。i)(R,S)-8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]氨基]羰基]-1,2,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-3H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸二鹽酸鹽將制備例24(h)化合物(0.1g,0.175mmol)在甲醇(20ml)、水(2ml)和1N NaOH(1ml)混合物的溶液中在室溫下攪拌19小時?；旌衔镉?N HCl酸化至PH1,真空濃縮，通過HPLC-RT 21.19min純化(YMC ODS-AQ,50×250mm,1.5ml/min,33％AN/W-TFA，在220nm UV檢測)。收集含有產(chǎn)物的餾份并冷凍干燥，再溶于水(70ml)、6N HCl(2ml)和乙腈，并凍干，得到標題化合物(0.37g,40％)。MS(EI)m/e 486[M+H]+。
制備例25制備(R,S)-8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-1,2,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)4-(氨基甲基)芐腈將4-氨基芐腈(5.91g,50mmol)和TFA(0.19ml,2.5mmol)的無水蒸餾的原甲酸三乙酯(100ml)溶液在氬氣氛下加熱回流?；亓?.5小時后，將黃色溶液真空濃縮至干，剩下的黃色油狀物通過高真空干燥使其結(jié)晶。將固體溶于無水EtOH(100ml)中，在氬氣氛下冷卻到0℃，加入NaBH4(5.68g,150mmol)。經(jīng)0.5小時將混合物溫熱至室溫并加熱回流。1小時后，將粘稠的混合物真空濃縮，使殘余物在H2O(100ml)和Et2O(100ml)之間分配。分層，水層用Et2O萃取。將合并的有機層干燥(MgSO4)并濃縮為黃色固體。該固體通過色譜純化(硅膠，30％EtOAc/己烷)，得到標題化合物，為淺黃色固體(6.10g,92％)。TLC Rf 0.45(硅膠，30％EtOAc/己烷)；1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.43(d,2H),6.55(d,2H),4.39(brs,1H),2.88(s,3H)；IR(CHCL3)2460,2220,1610,1528,1337,1176,823cm-1；MS(ES)m/e 133.0[M+H]+。b)4-氨基甲基-(N-芐氧羰基)芐脒在火焰干燥的燒瓶中于0℃氬氣氛下，將三甲基鋁甲苯溶液(2.0M,51ml,102mmol)經(jīng)4分鐘加到粉狀NH4Cl(5.46g,102mmol)在無水甲苯(51ml)的懸浮液中。然后撤去冰溶，使反應物在室溫下攪拌直到停止產(chǎn)生氣體(1小時)。加入制備例25(a)化合物(4.49g,34mmol)，將反應物加熱至80℃(油浴)。加熱時產(chǎn)生氣體。在80℃加熱23小時后，將反應物冷卻到室溫，并倒入攪拌著的硅膠(170g)的CHCl3(500ml)懸浮液中，引起劇烈的放熱反應。將所得混合物攪拌0.5小時，然后過濾，濾墊用MeOH(1L)洗滌。濃縮濾液，得到的黃色固體在高真空下于50-60℃干燥0.5小時。所得產(chǎn)物不經(jīng)純化而被使用。
將該產(chǎn)物溶于THF(136ml)和H2O(34ml)中，溶液冷卻到0℃，滴加5N NaOH(20ml,100mmol)。得到的兩相混合物再冷卻5分鐘。滴加氯甲酸芐基酯(4.85ml,34mmol)，反應物在0℃攪拌0.5小時。真空除去THF，殘余物用CH2Cl2然后用EtOAc萃取。將合并的有機萃取液干燥(Na2SO4)，并濃縮為灰白色固體。色譜純化(硅膠，3∶2EtOAc∶己烷)得到標題化合物，為灰白色固體(6.50g,67％)。為鑒定目的，將少量樣品用EtOAc/己烷重結(jié)晶。Mp 141-143℃；TLC Rf0.49(硅膠，3∶2EtOAc∶己烷)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.77(d,2H),7.45(m,2H),7.27-7.38(m,3H),6.56(d,2H),5.20(s,2H),4.28(brs,1H),2.88(s,3H)；IR(CHCl3)3500,3450,2310,1648,1608,1575,1493,1263,1141cm-1；MS(ES)m/e 284.2[M+H]+。c)(R,S)-8-[[[4-[N-(芐氧羰基)氨基亞氨基甲基]苯基]甲氨基]羰基]-1,2,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-3H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯將制備例24(e)化合物(382.4mg,1.0mmol)與SOCl2(10ml)一起回流15分鐘，溶液真空濃縮至干。殘余物溶于無水甲苯(5ml)，再真空濃縮除去殘余的SOCl2，并溶于無水CH2Cl2(2.5ml)中。在0℃氬氣氛下，將該溶液經(jīng)5分鐘滴加到充分攪拌著的制備例25(b)化合物(0.85g,3.0mmol)和無水吡啶(0.40ml,5mmol)的無水CH2Cl2(30ml)溶液中。將得到的橙黃色混合物加熱到室溫，攪拌1小時，用EtOAc(100ml)稀釋，用5％NaHCO3水溶液洗滌。將溶液干燥(Na2SO4)、濃縮，并通過色譜純化(硅膠，9∶1EtOAc/甲苯)，得到標題化合物(441.6mg,68％)。TLC Rf0.38(硅膠，9∶1EtOAc∶甲苯)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.71(d,J=8.5Hz,2H),7.02-7.46(m,12H),6.62(d,J=1.4Hz,1H),6.56(d,J=7.8Hz,1H),6.38(dd,J=7.8,1.4Hz,1H),5.19(s,2H),5.18(d,J=16.8Hz,1H),4.85-4.93(m,1H),4.17(d,J=5.3Hz,1H),3.71(s,3H),3.57-3.70(m,2H),3.53(d,J=16.8Hz,1H),3.44(s,3H),2.90(dd,J=16.1,6.9Hz,1H),2.63-2.79(m,2H),2.58(dd,J=16.1,6.3Hz,1H)；IR(CHCL3)3160-3540(br),3490,3300,1733,1655,1616,1577,1500,1443,1380,1271,1149,1110cm-1；MS(ES)m/e 648.4[M+H]+。d)(R,S)-8-[[[4-(氫基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-1,2,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸將含有制備例25(c)化合物(556.2mg,0.86mmol)、10％Pd/C(0.18g,0.17mmol)、TFA(0.07ml,0.86mmol)、EtOAc(15ml)和MeOH(15ml)的混合物在室溫H2氣氛(30psi)下震蕩。1.5小時后，濾出催化劑并將濾液濃縮至干。使用新制催化劑使殘余物再經(jīng)過上述氫化條件。1.5小時后將反應物過濾，濾墊用EtOAc和MeOH充分洗滌，將濾液濃縮至干。殘余物溶于MeOH(30ml)中，加入1N NaOH(3.4ml,3.4mmol)。將黃色溶液在室溫下攪拌過夜，真空濃縮。殘余物溶于CH3CN∶H2O(1∶1,8.6ml)并冷卻到0℃。加入TFA(0.66ml,8.6mmol)，將所得溶液真空濃縮至干(CH3CN共沸)。殘余物通過反相快速色譜純化(ODS-硅膠，25％CH3CN/H2O-0.1％TFA)，冷凍干燥，得到標題化合物，為淺黃色粉末(403.4mg,68％)。HPLCk′9.1(PRP-1柱；25％CH3CN-H2O 0.1％TFA)；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.67(m,2H),7.37(m,2H),7.06-7.25(m,5H),6.74(d,J=7.8Hz,1H),6.64(d,J=1.6Hz,1H),6.40(dd,J=7.8,1.6Hz,1H),5.33(d,J=16.9Hz,1H),5.01(dd,J=9.0,5.1Hz,1H),3.77(d,J=16.9Hz,1H),3.53-3.71(m,2H),3.46(s,3H),2.88(dd,J=16.7,9.0Hz,1H),2.60-2.75(m,2H),2.58(dd,J=16.7,5.1Hz,1H)；MS(ES)m/e 500.2[M+H]+；元素分析計算值(C28H29N5O4·1.5TFA·H2O):C,54.07；H,4.76；N,10.17.實測值C,53.73；H,4.94；N,9.84。
制備例26制備(R,S)-8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]羰基]氨基]-1,2,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-3H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸三氟乙酸鹽a)(R,S)-8-疊氮基羰基-1,2,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-3H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯將制備例24(f)化合物(0.6g,1.3mmol)溶于無水丙酮(6ml)中，并滴加到在冰浴中攪拌著的疊氮化鈉(120mg,1.8mmol)水(3ml)溶液中。將混合物攪拌1小時，用水(15ml)稀釋并用乙酸乙酯萃取。有機相經(jīng)MgSO4干燥，真空濃縮，得到標題化合物(0.55g,90％)。b)(R,S)-8-氨基-1,2,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-3H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯將制備例26(a)化合物(0.55g,1.1mmol)的無水甲苯(12ml)溶液在氬氣氛中加熱至80℃2小時?；旌衔镎婵諠饪s，得到(R,S)-8-異氰酸基-1,2,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-3H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯。
殘余物在3N HCl(6ml)和THF(10ml)中攪拌1小時。將混合物真空濃縮，加入固體碳酸氫鈉至PH8?；旌衔镉靡宜嵋阴ポ腿?，有機相用MgSO4干燥，真空濃縮，得到(R,S)-8-氨基-1,2,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-3H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯(0.3g,67％)。c)(R,S)-8-[[[4-[N-(芐氧羰基)氨基亞氨基甲基]苯基]羰基]氨基]-1,2,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-3H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯將4-[N-(芐氧羰基)(氨基亞氨基甲基)]苯甲酸(0.23g,1.0mmol)和亞硫酰氯(3ml)在CH2Cl2(3ml)中的混合物加熱回流10分鐘，真空濃縮，用甲苯處理并真空濃縮數(shù)次，得到4-[N-(芐氧羰基)(氨基亞氨基甲基)]苯甲酰氯。將該酰氯的CH2Cl2(3ml)溶液滴加到制備例26(b)化合物(0.3g,0.9mmol)和二異丙基乙胺(130mg,1.0mmol)的無水CH2Cl2(5ml)溶液中。混合物在室溫氬氣氛下攪拌5小時，用CH2Cl2(20ml)稀釋，用水、3N HCl、5％碳酸氫鈉和鹽水萃取。有機相用MgSO4干燥并真空濃縮。殘余物經(jīng)色譜純化(硅膠，甲醇∶CH2Cl22∶98)，得到標題化合物(0.17g,32％)。d)(R,S)-8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]羰基]氨基]-1,2,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-3H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯將制備例26(c)化合物(0.1g,0.15mmol)和10％Pd/C(20mg)的甲醇(40ml)和3N HCl(8滴)溶液在氫氣氛中(45psi)震蕩30分鐘。將混合物過濾，濾液真空濃縮，得到標題化合物(65mg,87％)。e)(R,S)-8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]羰基]氨基]-1,2,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-3H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸將制備例26(d)化合物(65mg,0.12mmol)的甲醇(15ml)、水(2ml)和1N NaOH(1ml)溶液在室溫氬氣氛下攪拌過夜。混合物用3N HCl(1ml)處理并真空濃縮。殘余物溶于乙腈∶水(33∶67)中，通過HPLC RT 11.2min純化(YMC ODS-AQ,50×250mm,85ml/min,33％AN/W-TFA,在220nmUV檢測)，得到標題化合物(26mg,33％)。MS(EI)m/e 486[M+H]+。
下列實施例說明了制備本發(fā)明的藥物活性化合物和組合物的方法。
實施例1制備(R,S)-7-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-2-(2-苯基乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸a)3-溴-4-甲基苯甲酸叔丁酯在70℃下，將二甲基甲酰胺二甲縮醛(48ml,200mmol)經(jīng)15分鐘滴加到3-溴-4-甲基苯甲酸(85％,10.75g,42.5mmol)的甲苯(100ml)懸浮液中。反應物在70-80℃再攪拌0.5小時，然后冷卻，依次用水和5％碳酸氫鈉洗滌，干燥(硫酸鈉)。混合物通過硅膠濾墊過濾，濾墊用甲苯洗滌。將濾液濃縮，得到標題化合物(8.0g,69％)，為黃色油狀物。TLC(甲苯)Rf0.68；1H NMR(250MHz,CDCl3)δ8.13(d,J=1.7Hz,1H),7.81(dd,J=7.9,1.7Hz,1H),7.27(d,J=7.9Hz,1H),2.44(3H),1.59(s,9H)；IR(CCl4)1715,1368,1297,1255,1170,1123,1115cm-1；MS(ES)m/e273.0[M+H]+,271.0[M+H]+,214.8[M+H-56]+。b)3-溴-4-(溴甲基)苯甲酸叔丁酯將實施例1(a)化合物(1.36g,5mmol)、N-溴丁二酰亞胺(0.98g,5.5mmol)和過氧化苯甲酰(61mg,0.25mmol)在四氯化碳(25ml)中的混合物加熱回流。4小時后，將混合物冷卻并過濾，濃縮濾液。所得產(chǎn)物不用純化而被使用。TLCRf0.39(5∶95乙酸乙酯∶己烷)。c)3-溴-4-[[(2-苯基乙基)氨基]甲基]苯甲酸叔丁酯將實施例1(b)化合物溶于無水乙醚(25ml)，加入苯乙胺(1.9ml,15mmol)。添加時有輕微的放熱，且反應物變得混濁。反應物在室溫下攪拌過夜，然后用乙醚(75ml)稀釋，并依次用5％碳酸氫鈉和鹽水(25ml)洗滌。干燥(硫酸鎂)，濃縮，硅膠色譜純化(33％乙酸乙酯/己烷)，得到標題化合物(1.26g,65％)，為淺黃色油狀物。TLC Rf0.42(30∶70乙酸乙酯∶己烷)；1H NMR(250MHz,CDCl3)δ8.12(d,J=1.5Hz,1H),7.87(dd,J=7.9,1.5Hz,1H),7.40(d,J=7.9Hz,1H),7.10-7.40(m,5H),3.90(s,2H),2.70-3.00(m,4H),1.59(s,9H)；IR(CCl4)1717,1368,1294,1253,1170,1118cm-1；MS(ES)m/e 390.0[M+H]+。d)3-溴-4-[[[N-(2-苯基乙基)-N-叔丁氧羰基]氨基]甲基]苯甲酸叔丁酯室溫下將碳酸二叔丁酯(845mg,3.88mmol)一起加入實施例1(c)化合物(1.26g,3.23mmol)的氯仿(16ml)溶液中。反應物在室溫下攪拌1.5小時，然后回流0.5小時。濃縮并色譜純化(硅膠，10％乙酸乙酯/己烷)，得到標題化合物(1.57g,99％)，為無色油狀物，真空下固化。TLC Rf0.49(10∶90乙酸乙酯∶己烷)；1H NMR(250MHz,CDCl3)外消旋混合物比約為.1.5∶1；δ8.13(d,J=1.5Hz,1H),7.88(dd,J=8.1,1.5Hz,1H),7.05-7.40(m,6H),4.30-4.60(m,2H),3.30-3.55(m,2H),2.74-2.93(m,2H),1.20-1.80(m,18H)；IR(CCl4)1717,1698,1367,1295,1251,1165,1120cm-1；MS(ES)m/e 490.2[M+H]+,436.0。e)3-甲氧羰基-4-[[5-(叔丁氧羰基)-2-[[N-(2-苯基乙基)-N-[叔丁氧羰基]氨基]甲基]苯基]-2-丁烯酸甲酯和3-甲氧羰基-4-[[5-(叔丁氧羰基)
-2-[[N-(2-苯基乙基)-N-叔丁氧羰基)]氨基]甲基]苯基]-3-丁烯酸甲酯將實施例1(d)化合物(1.34g,2.73mmol)、衣康酸二甲酯(648mg,4.10mmol)、乙酸鈀(Ⅱ)(30.7mg,0.14mmol)、三鄰甲苯基膦(83.2mg,0.27mmol)、無水三乙胺(0.76ml,5.46mmol)和無水乙腈(27ml)的混合物通過一個抽氣/氬氣清洗循環(huán)脫氧，然后在氬氣氛下加熱回流。6小時后，將反應物冷卻，再加入乙酸鈀(Ⅱ)(30.7mg,0.14mmol)和三鄰甲苯基膦(83.2mg,0.27mmol)。通過三個抽氣/氬氣清洗循環(huán)使混合物脫氧，然后在氬氣氛下加熱回流過夜(16.5小時)。將反應物濃縮，殘余物溶于乙醚并用水和鹽水洗滌。干燥(硫酸鎂)，濃縮并進行色譜純化(硅膠，15％乙酸乙酯/己烷；然后40％乙酸乙酯/己烷)，得到粗標題化合物，為黃色油狀物。將殘余物再進行色譜純化(硅膠，25％乙酸乙酯/己烷)，得到標題化合物(1.36g,88％)，為淺黃色油狀物。該產(chǎn)物不用分離異構體反應產(chǎn)物而被使用。f)3-甲氧羰基-4-[5-(叔丁氧羰基)-2-[[[N-(2-苯基乙基)-N-叔丁氧羰基]氨基]甲基]苯基]丁酸甲酯將實施例1(e)化合物(1.18g,2.08mmol)溶于無水甲醇(21ml)中，加入氫氧化鈀(Ⅱ)炭(0.21g)。所得混合物在室溫H2氣氛下(47psi)震蕩2小時，然后通過Celite過濾。將濾液濃縮，使其再經(jīng)過相同的反應條件。再過5.5小時后，如前面那樣將混合物過濾，濾液濃縮，得到標題化合物(1.13g,95％)，為無色油狀物。g)(R,S)-7-羧基-2,3,4,5-四氫-3-氧代-2-(2-苯基乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯在0℃氬氣氛下，將TFA(11ml)一起加入實施例1(f)化合物(1.30g,2.28mmol)的無水CH2Cl2(11ml)混濁溶液中。將所得淺黃色溶液加熱至室溫，攪拌2小時并濃縮。殘余物再經(jīng)1,2-二氯乙烷濃縮以除去殘留的TFA，得到3-甲氧羰基-4-(5-羧基-2-[[N-(2-苯基乙基)氨基]甲基]苯基]丁酸甲酯，為淺綠色油狀物。
將該油狀物溶于無水甲醇(11ml)中，溶液在氬氣氛下冷卻到0℃。加入新制備的1.0M甲醇鈉/甲醇(11ml,11mmol)，移去冰浴。經(jīng)5分鐘將黃色溶液加熱到室溫，并在氬氣氛下加熱回流。3小時后，將反應物在冰中冷卻并用冰醋酸(1.3ml,22.8mmol)驟冷。將反應物用乙酸乙酯(100ml)稀釋并用水洗滌。合并的水相用乙酸乙酯反萃取，將合并的乙酸乙酯相用鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)，并濃縮為淺綠色殘余物。色譜純化(硅膠，10％甲醇/氯仿/0.1％乙酸)，得到標題化合物，為黃色泡沫狀物。用含有少量氯仿的甲醇結(jié)晶，得到標題化合物(528.2mg,61％)，為灰白色固體。mp 214-216℃；TLC Rf0.49(10∶90甲醇∶氯仿)；1H NMR(400MHz,10％CD3OD/CDCl3)δ7.72-7.78(m,2H),7.11-7.22(m,3H),7.01-7.08(m,3H),5.21(d,J=16.8Hz,1H),3.70-3.92(m,3H),3.72(s,3H),3.5-3.66(m,1H,被小峰部分遮蓋)，3.03(近似dd,1H),2.97(dd,J=16.7,8.7Hz,1H),2.86(dd,J=17.3,13.6Hz,1H),2.76(t,J=7.3Hz,2H),2.43(dd,J=16.7,5.3Hz,1H)；MS(ES)m/e 404.0(M+Na)+,382.4[M+H]+,350.2(M+H-CH3OH)+。h)(R,S)-7-[[[4-[N-(芐氧羰基)氨基亞氨基甲基]苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-2-(2-苯基乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯將實施例1(g)化合物(117.9mg,0.31mmol)與亞硫酰氯(3ml)一起回流15分鐘，濃縮黃色溶液。殘余物經(jīng)無水甲苯(3ml)濃縮，除去殘余的亞硫酰氯，將所得產(chǎn)物溶于無水CH2Cl2(0.5ml)。在0℃氬氣氛下經(jīng)1-2分鐘將該溶液滴加到4-(甲氨基)-(N-芐氧羰基)芐脒(263mg,0.93mmol)和無水吡啶(0.125ml,1.55mmol)的無水CH2Cl2(10ml)溶液中。將所得黃色混合物加熱至室溫并攪拌0.5小時，用乙酸乙酯稀釋，并用5％碳酸氫鈉洗滌。干燥(硫酸鈉)，濃縮，色譜純化(硅膠，10％乙酸乙酯/甲苯)，得到標題化合物(174.8mg,87％)，為淺黃色油狀物。TLC Rf0.45(9∶1甲苯∶乙酸乙酯)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.73(近似d,2H),7.00-7.45(m,13H),6.89(近似d,1H),6.74(d,J=7.8Hz,1H),5.19(s,2H),5.05(d,J=16.6Hz,1H),3.52-3.77(m,4H),3.69(s,3H),3.48(s,3H),2.93(dd,J=16.8,8.4Hz,1H),2.83(dd,J=17.3,3.9Hz,1H),2.60-2.77(m,3H),2.34(dd,J=16.8,5.4Hz,1H)；IR(CHCl3)3490,3300,1731,1650,1614,1495,1437,1360,1284(肩峰),1264,1143cm-1；MS(ES)m/e 647.2[M+H]+。i)(R,S)-7-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-2-(2-苯基乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯向?qū)嵤├?(h)化合物(174.8mg,0.27mmol)和TFA(0.021ml,0.27mmol)的乙酸乙酯/甲醇(1∶1,9ml)溶液中小心地加入10％Pd/C(58mg,0.054mmol)，混合物在氫氣(氣球壓力)下短暫地攪拌。1.5小時后，混合物通過Celite過濾，濾墊用乙酸乙酯和甲醇充分洗滌。濃縮得到標題化合物。j)(R,S)-7-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-2-(2-苯基乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸將實施例1(i)化合物溶于甲醇(9ml)，加入1.0N氫氧化鈉(0.81ml,0.81mmol)。溶液在室溫下攪拌過夜，然后濃縮。殘余物溶于水/乙腈(3ml)，冷卻到0℃，用TFA(0.21ml,2.7mmol)酸化。將淺黃色溶液濃縮，殘余物通過反相快速色譜純化(C-18硅膠，25％AN/W·TFA)。濃縮并冷凍干燥，得到標題化合物(123mg,67％)，為無色粉末。HPLC k′=1.84(PRP-1,30％AN/W-TFA)；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.67(近似d,2H),7.40(近似d,2H),6.96-7.20(m,8H),5.13(d,J=16.8Hz,1H),3.96(d,J=16.8Hz,1H),3.66-3.81(m,2H),3.45-3.58(m,1H),3.49(s,3H),2.92(近似dd,1H),2.77(dd,J=17.0,9.1Hz,1H),2.54-2.68(m,3H),2.38(dd,J=17.0,4.8Hz,1H)；MS(MS)m/e 499.0[M+H]+；元素分析(C29H30N4O4·1.5(CF3CO2H).0.5H2O)計算值C,56.64；H,4.83；N,8.26.實測值C,56.77；H,5.05；N,8.35。
實施例2制備(R,S)-8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-1-甲基-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)4-[N-(叔丁氧羰基)-N-(苯乙基)氨基甲基]-3-(甲氨基)苯甲酸叔丁酯在0℃將甲酸(0.166g,3.6mmol)緩慢加入乙酸酐(0.36g,3.5mmol)中。該溶液在0℃攪拌10分鐘，然后在55℃攪拌2小時，冷卻到室溫，用THF(15ml)稀釋。向此溶液中滴加制備例24(b)化合物(0.5g,1.17mmol)的THF(3ml)溶液。將溶液攪拌3小時并濃縮，得到無色油狀物。殘余物再溶于THF(20ml)中，冷卻到0℃。加入2.0M甲硼烷-二甲硫的THF溶液(0.22g,2.9mmol,1.45ml)。氣體停止逸出后，將溶液加熱回流3小時，冷卻到室溫，并加入甲醇(5.0ml)。所得溶液回流1小時，濃縮得到標題化合物(0.5g,98％)，為無色油狀物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.1-7.3(m,5H),7.05(d,2H),7.0(d,1H),5.5(b,1H),4.3(s,2H),3.3(t,2H),2.9(s,3H),2.65(t,2H),1.6(s,9H),1.45(s,9H)；TLC Rf0.75(1∶4乙酸乙酯∶己烷)。b)(E/Z)-4-[N-(叔丁氧羰基)-N-(2-苯基乙基)氨基甲基]-3-[N-[2-(1,4-二甲氧基-1,4-二氧代-2-丁烯基)]-N-(甲基)氨基]苯甲酸叔丁酯將乙炔二羧酸二甲酯(0.34g,2.4mmol)加到實施例2(a)化合物(1.0g,2.7mmol)的甲醇(50ml)溶液中。將溶液加熱回流1小時，用乙炔二羧酸二甲酯(0.17g,1.2mmol)處理，并再加熱回流1小時。將混合物冷卻，過濾，濃縮，殘余的黃色油狀物經(jīng)色譜純化(硅膠，25％乙酸乙酯/己烷)，得到標題化合物(0.5g,80％)。(1∶1；E∶Z)1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.9(d,2H),7.7(s,2H),7.3-7.1(m,12H),6.2(s,1H),5.2(s,1H),4.7(d,2H),4.3(m,2H),3.9(s,3H),3.85(s,3H),3.8(s,3H),3.7(s,3H),3.6-3.2(m,8H),3.0(b,3H),2.9(b,3H),1.6(s,18H),1.4(d,18H)。c)4-[N-叔丁氧羰基-N-(2-苯基乙基)氨基甲基]-3-[N-[2-(1,4-二甲氧基-1,4-二氧代-2-丁基)]-N-(甲基)氨基]苯甲酸叔丁酯將含有10％Pd/C(0.5g)的實施例2(b)化合物的甲醇(50ml)溶液在室溫下氫化(45psi)。4小時后，將懸浮液過濾并濃縮，得到淺黃色油狀物。殘余物通過色譜純化(硅膠，1∶4乙酸乙酯∶己烷)，得到標題化合物，為淺黃色油狀物(0.17g,40％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.8(s,1H),7.7(d,1H),7.0-7.3(m,6H),4.4-4.6(m,2H),4.05(m,1H),3.7(s,3H),3.6(s,3H),3.2-3.5(m,2H),3.0(dd,1H),2.7-2.9(m,3H),2.65(s,3H),1.6(s,9H),1.4(m,9H)。d)(R,S)-8-羧基-1-甲基-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯將TFA(50ml)加到實施例2(c)化合物(0.17g,0.3mmol)的CH2Cl2(10ml)溶液中?；旌衔飻嚢?小時并濃縮，得到4-[N-(2-苯乙基)氨基甲基]-3-[N-[2-(1,4-二甲氧基-1,4-二氧代-2-丁基)]-N-(甲基)氨基]苯甲酸鹽，為黃色固體。
將黃色固體溶于甲醇(20ml)中，用25％甲醇鈉的甲醇溶液(0.2ml,0.87mmol)處理?；旌衔锉患訜岬?0℃2小時，冷卻并用1M氯化氫乙醚溶液(2ml)處理。濃縮混合物，得到標題化合物，為黃色固體(0.12g,94％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.55(s,1H),7.5(d,1H),7.1(m,4H),7.0(m,2H),5.2(d,1H),4.8(m,1H),4.1(m,2H),3.7(s,3H),3.5(m,1H),3.0(dd,1H),2.8(t,2H),2.7(dd,1H),2.6(s,3H)。e)(R,S)-8-[[[4-[N-(芐氧羰基)氨基亞氨基甲基]苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-1-甲基-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯用實施例1(h)的方法，只是用實施例2(d)化合物代替實施例1(g)化合物，制備標題化合物(0.040g,35％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.75(d,2H),7.25-7.45(m,6H),7.0-7.2(m,6H),6.95(s,1H),6.7(m,2H),5.2(s,2H),5.0(d,1H),4.6(m,1H),3.9(m,1H),3.65(m,4H),3.6(m,1H),3.5(s,3H),2.9(dd,1H),2.75(t,2H),2.55(dd,1H),2.5(s,3H)。f)(R,S)-8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-1-甲基-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯將含有1.0M氯化氫乙醚溶液(0.6ml)的實施例2(e)化合物(0.04g,0.06mmol)的甲醇(25ml)溶液用10％Pd/C(0.06g)處理，混合物在氫氣氛(40psi)中震蕩1小時。將混合物過濾并濃縮，得到標題化合物。g)(R,S)-8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-1-甲基-3-氧代-4-(2-苯基乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸用實施例1(j)的方法，只是用實施例2(f)化合物代替實施例1(i)化合物，得到的殘余物通過HPLC純化(YMC-ODS AQ,33％AN/W·TFA)，得到標題化合物(0.012g,35％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.7(d,2H),7.45(d,2H),7.05-7.15(m,3H),7.0(d,2H),6.9(m,2H),6.8(d,1H),5.1(dd,1H),4.7(m,1H),4.0(d,1H),3.9(m,1H),3.55(m,1H),3.5(s,3H),2.85(dd,1H),2.7(t,2H),2.5(dd,1H),2.4(s,3H)；MS(ES)m/e 514.2[M+H]+。
實施例3制備(R,S)-8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-4-(2-苯基乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)N-[2-硝基-4-(叔丁氧羰基)芐基]-N-苯乙基-4-氨基丁烯酸甲酯在室溫攪拌下，向2-硝基-4-(叔丁氧羰基)芐溴(4.06g,12.8mmol)的THF(50ml)溶液中加入4-(苯乙氨基)丁烯酸甲酯(3.4g,15.5mmol)。然后加入三乙胺(2.2ml,15.7mmol)。攪拌1 6小時后，反應物用乙酸乙酯稀釋，用1N碳酸鈉、鹽水洗滌、干燥(硫酸鈉)并濃縮。經(jīng)快速色譜(硅膠，15％乙酸乙酯/正己烷)純化，得到標題化合物，為油狀物(5.16g,88％)。1H NMR(CDCl3)δ1.60(9H,s),2.74(4H,brs),3.30(2H,dd),3.74(3H,s),4.00(2H,s),6.00(1H,d,J=15Hz),7.02(1H,dt),7.25(5H,m),7.67(1H,d,J=8Hz),8.15(1H,dd),8.45(1H,d,J=2Hz)。b)N-[2-氨基-4-(叔丁氧羰基)芐基]-N-苯乙基-4-氨基丁烯酸甲酯將鐵粉(0.8g)加入攪拌著的實施例3(a)化合物(1.03g,2.26mmol)的乙酸(25ml)和乙醇(25ml)溶液中。攪拌16小時后，將反應物濃縮并溶于乙酸乙酯，用1N碳酸鈉、鹽水洗滌、干燥(硫酸鈉)并濃縮，得到標題化合物(0.96g)，為油狀物。1H-NMR(CDCl3)δ1.57(9H,s),2.80(4H,brs),3.25(2H,d,J=5.2Hz),3.70(2H,s),3.74(3H,s),4.52(2H,brs),5.92(1H,d,J=15.7Hz),6.94(1H,dt),7.0-7.3(8H,m)。c)(R,S)-8-(叔丁氧羰基)-2,3,4,5-四氫-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯將實施例3(b)化合物(0.96g,2.25mmol)溶于無水甲醇(50ml)中，氬氣氛下回流72小時。將混合物冷卻，濃縮，殘余物通過快速色譜純化(硅膠，60％乙酸乙酯/正己烷)，得到標題化合物(0.87g,91％)。1H-NMR(CDCl3)δ1.59(9H,s),2.39(1H,dd),2.51(1H,dd),2.68-3.50(6H,m),3.56(1H,brs),3.73(3H,s),3.95(2H,brs),4.47(1H,brs),7.15-7.27(6H,m),7.42(1H,s),7.51(1H,s,J=7.4Hz)；MS(ES)m/e 425.0[M+H]+。d)(R,S)-8-羧基-2,3,4,5-四氫-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯向?qū)嵤├?(c)化合物(0.87g,2.05mmol)中加入90％TFA的CH2Cl2(30ml)溶液。在室溫攪拌45分鐘后，將反應物濃縮，然后經(jīng)無水甲苯再濃縮兩次，得到標題化合物(0.87g,88％)。e)(R,S)-8-[[[4-[N-(叔丁氧羰基)氨基亞氨基甲基]苯基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-4-(2-苯基乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯向?qū)嵤├?(d)化合物(0.87g,2mmol)中加入亞硫酰氯(5ml)。在氫氣氛下回流15分鐘后，將反應物濃縮，然后經(jīng)無水甲苯再濃縮兩次。氬氣氛攪拌下，將所得到的酰氯的CH2Cl2(15ml)溶液滴加到冷卻的吡啶(0.65ml)和4-(芐氧羰基脒基)苯胺(0.57g,2.4mmol)的CH2Cl2(15ml)溶液中。反應物室溫下攪拌4小時，用氯仿稀釋，用1N碳酸氫鈉洗滌，干燥(硫酸鈉)并濃縮。通過快速色譜純化(硅膠，2％甲醇/氯仿)，得到固體標題化合物(936mg,80％)。1H-NMR(CDCl3)δ1.54(9H,s),2.39(1H,dd),2.52(1H,dd),2.75-2.90(5H,m),3.00(1H,d),3.56(1H,brs),3.70(3H,s),3.89(2H,dd),4.62(1H,s),7.15(4H,m),7.27(2H,m),7.36(2H,m),7.71(2H,d,J=8.5Hz),7.81(2H,d,J=8.5Hz)。f)(R,S)-8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-4-(2-苯基乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸向?qū)嵤├?(e)化合物(936mg,1.6mmol)中加入90％TFA的CH2Cl2(30ml)溶液。攪拌45分鐘后，濃縮反應物，殘余物用乙醚研制，過濾并減壓干燥，得到(R,S)-8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-4-(2-苯基乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯。
將甲酯溶于20％乙酸中，在氬氣氛下回流48小時。濃縮混合物，殘余物通過HPLC純化(PRP-1,25％AN/W-TFA)，得到標題化合物，為白色固體。HPLC k′5.7(PRP-1,20％AN/W-TFA，在220nmUV檢測)；TLCRf0.40(4∶1∶1正丁醇∶乙酸∶水)；Rf0.45(15∶3∶12∶10正丁醇∶乙酸∶水∶吡啶)；MS(ES)m/e472.2[M+H]+；元素分析(C27H29N5O3·2.5CF3CO2H1.0H2O)計算值C,49.62；H,4.36；N,9.04。實測值C,49.73；H,4.437；N,9.18。
實施例4制備(R,S)-8-[[[4-氨基亞氨甲基)苯基]-甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)4-[N-(叔丁氧基羰基)-N-(甲氧基羰基)氨甲基]-3-硝基苯甲酸叔丁酯將在DMF(20mL)中的叔丁基甲基亞氨基二羧酸鉀(J.C.S.Perkin I,1088,(1977))(1.56g,7.3mmol)的懸浮液加入到在DMF(25mL)中的4-溴甲基-3-硝基苯甲酸叔丁酯(2.27g,7.2mmol)(Int.J.Peptide Res.,36,31(1990))的溶液中。將該黑褐色溶液攪拌1小時，然后倒入水中并用乙酸乙酯萃取。合并的有機層用水洗滌，干燥(硫酸鈉)并濃縮得到淺橙色油，用快速色譜法(硅膠，20％乙酸乙酯/己烷)提純該淺橙色油得到標題化合物(2.15g,73％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.6(s,1H),8.2(d,1H),7.45(d,1H),5.3(s,2H),3.8(s,3H),1.6(s,9H),1.45(s,9H)。b)4-[N-(叔丁氧基羰基)氨甲基]-3-硝基苯甲酸叔丁酯將實施例4(a)的化合物(2.15g,5.24mmol)溶解于甲醇(120mL)和0.95N氫氧化鈉(15mL)的混合物中。15分鐘后加入乙酸(3.0mL)，濃縮混合物，將殘余物溶解于乙酸乙酯中并用水萃取，用鹽水洗滌有機層，干燥(硫酸鈉)和濃縮有機層，得到一種黃色油，用色譜法(硅膠，20％乙酸乙酯/己烷)提純該黃色油得到標題化合物(1.0g,54％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.6(s,1H),8.2(d,1H),7.7(d,1H),5.35(m,1H),4.6(d,2H),1.65(s,9H),1.4(s,9H)。c)3-氨基-4-[N-(叔丁氧基羰基)-氨甲基]苯甲酸叔丁酯將在含有載鈀(10％)碳(0.5g)的乙醇(100mL)中的實施例4(b)的化合物(0.80g,2.27mmol)的溶液氫化(40psi)。30分鐘后，過濾混合物并濃縮得到標題化合物(0.72g,100％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.25(m,2H),7.1(d,1H),4.9(b,1H),4.25(d,2H),1.6(s,9H),1.45(s,9H)。d)(E,Z)-4-[N-(叔丁氧基羰基)氨甲基]-3-[2-(1,4-二甲氧基-1,4-二氧代-2-丁烯基)氨基]苯甲酸叔丁酯除了用實施例4(c)的化合物代替實施例2(a)化合物外，使用實施例2(b)的方法制得標題化合物(0.7g,70％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ9.6(s,1H),7.7(d,1H),7.35(m,2H),5.5(s,1H),5.0(b,1H),4.4(d,2H),3.75(s,3H),3.7(s,3H),1.6(s,9H),1.45(s,9H)。e)4-[N-(叔丁氧基羰基)氨甲基]-3-[2-(1,4-二甲氧基-1,4-二氧代-2-丁基)氨基]苯甲酸叔丁酯除了用實施例4(d)的化合物代替實施例2(b)的化合物外，使用實施例2(c)的方法，制得標題化合物(0.66g,95％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.8(d,1H),7.75(s,1H),7.1(d,1H),5.4(b,1H),4.9(b,1H),4.6(m,1H),4.3(m,2H),3.7(s,3H),3.65(s,3H),2.9(m,2H),1.6(s,9H),1.45(s,9H)。f)(R,S)-8-羧基-2,3,4,5-四氫-3-氧代-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯除了用實施例4(e)的化合物代替實施例2(c)的化合物外，使用實施例2(d)的方法，制得標題化合物(0.44g,98％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.15(t,1H),7.2(s,1H),7.1(d,1H),7.05(d,1H),5.0(dd,1H),4.9(m,1H),3.75(dd,1H),3.6(s,3H),2.8(dd,1H),2.6(dd,1H)。g)(R,S)-8-[[[4-[N-(芐氧基羰基)-氨基亞氨基甲基]苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯除了用實施例4(f)的化合物代替實施例1(g)的化合物外，使用實施例1(h)的方法，制得標題化合物(0.30g,45％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.75(d,2H),7.25-7.45(m,5H),7.2(d,2H),6.7(d,1H),6.65(s,1H),6.45(d,1H),5.5(s,1H),5.2(s,2H),4.95(d,1H),4.9(m,1H),3.75(d,1H),3.65(s,3H),3.45(s,3H),2.9(dd,1H),2.6(dd,1H)。h)(R,S)-8-[[[(4-氨基亞氨基甲基)苯基]-甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯除了用實施例4(g)的化合物代替實施例2(e)的化合物外，使用實施例2(f)的方法，制得標題化合物。i)(R,S)-8-[[[(4-氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]-羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸除了用實施例4(h)的化合物代替實施例1(i)的化合物外，使用實施例1(j)的方法，制得標題化合物。用HPLC(YMC ODS-AQ,15％AN/W-TFA，在220nm下UV檢測)提純該化合物得到純化產(chǎn)物(0.125g,57％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.75(s,2H),8.95(s,2H),8.1(d,1H),7.75(d,2H),7.4(d,2H),6.75(s,1H),6.7(d,1H),6.25(d,1H),5.9(d,1H),4.9(dd,1H),4.8(m,1H),3.65(dd,1H),3.4(s,3H),2.75(dd,1H),2.5(dd,1H)；MS(ES)m/e 396.0[M+H]+。
實施例5制備(R,S)-8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)4-(甲氨基)甲基-3-硝基苯甲酸叔丁酯在0℃下將無水甲胺向無水DMF(200mL)中鼓泡15分鐘，將在DMF(10mL)中的4-溴甲基-3-硝基苯甲酸叔丁酯(5.0g,15.8mmol)(Int.J.Peptide.Res.,36,31(1990))的溶液逐滴加入到冷的胺溶液中，在0℃下將該溶液攪拌30分鐘，然后倒入水中。用乙酸乙酯萃取混合物，合并的有機層用水洗滌，干燥(硫酸鈉)并濃縮，得到黃褐色油。用色譜法(硅膠，3％異丙醇/CH2Cl2)提純該油得到標題化合物(1.5g,36％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.5(s,1H),8.2(d,1H),7.7(d,1H),4.05(s,2H),2.5(s,3H),1.6(s,9H)。b)4-[N-(叔丁氧基羰基)-N-(甲基)氨基-甲基]-3-硝基苯甲酸叔丁酯將在THF(50mL)中的實施例5(a)的化合物(1.4g,5.3mmol)、三乙胺(2.1g,21mmol)和碳酸氫二叔丁酯(3.44g,15.8mmol)的溶液攪拌24小時。將混合物濃縮，然后將殘余物溶于乙酸乙酯(200mL)中，溶液用水萃取，干燥(硫酸鈉)并濃縮，得到黃色油，用色譜法(硅膠，15∶85乙酸乙酯∶己烷)提純該油得到標題化合物(1.85g,85％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.6(s,1H),8.25(d,1H),7.4(d,1H),4.85(d,2H),2.9(d,3H),1.6(s,9H),1.45(d,9H)。c)3-氨基-4-[N-(叔丁氧基羰基)-N-(甲基)-氨甲基]苯甲酸叔丁酯除了用實施例5(b)的化合物代替實施例4(b)的化合物外，使用實施例4(c)的方法，制得標題化合物(1.6g,100％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.25(d,2H),7.05(d,1H),4.35(d,2H),2.75(s,3H),1.6(s,9H),1.4(d,9H)。d)(E,Z)-4-[N-(叔丁氧基羰基)-N-(甲基)-氨甲基]-3-[2-(1,4-二甲氧基-1,4-二氧代-2-丁烯基)氨基]苯甲酸叔丁酯除了用實施例5(c)的化合物代替實施例2(a)的化合物外，使用實施例2(b)的方法，制得標題化合物(1.55g,68％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.5(s,1H),7.7(d,1H),7.4(s,1H),7.3(d,1H0,5.5(s,1H),4.55(s,2H),3.75(s,3H),3.7(s,3H),2.85(s,3H),1.6(s,9H),1.45(s,9H)。e)4-[N-(叔丁氧基羰基)-N-(甲基)氨基-甲基]-3-[2-(1,4-二甲氧基-1,4-二氧代-2-丁基)氨基]苯甲酸叔丁酯除了用實施例5(d)的化合物代替實施例2(b)的化合物外，使用實施例2(c)的方法，制得標題化合物(1.55g,100％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.45(d,2H),7.05(d,1H),4.65(q,1H),4.45(d,1H),4.35(d,1H),3.7(s,6H),2.95(dd,1H),2.85(dd,1H),2.75(s,3H),1.6(s,9H),1.45(s,9H)。f)(R,S)-8-羧基-2,3,4,5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯除了用實施例5(e)的化合物代替實施例2(c)的化合物外，使用實施例2(d)的方法，制得標題化合物(0.72g,72％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.2(s,1H),7.1(s,2H),6.1(s,1H),5.5(d,1H),5.1(m,1H),3.9(s,1H),3.6(s,3H),2.9(s,3H),2.8(dd,1H),2.65(dd,1H)。g)(R,S)-8-[[[4-[N-(芐氧基羰基)氨基亞氨基甲基]苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯除了用實施例5(f)的化合物代替實施例1(g)的化合物外，使用實施例1(h)的方法，制得標題化合物(0.29g,40％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.75(d,2H),7.45(d,2H),7.25-7.4(m,3H),7.1(d,2H),6.7(d,1H),6.65(s,1H),6.45(d,1H),5.3(d,1H),5.2(s,2H),4.95(m,1H),4.2(d,1H),3.75(s,3H),3.65(d,1H),3.45(s,3H),3.0(s,3H),2.9(dd,1H),2.55(dd,1H)。h)(R,S)-8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲基-氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-4-甲基-3-氧代-1 H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯除了用實施例5(g)的化合物代替實施例2(e)的化合物外，使用實施例2(f)的方法，制得標題化合物。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.25(s,2H),8.8(s,2H),7.7(d,2H),7.4(s,2H),6.85(d,1H),6.7(s,1H),6.45(d,2H),5.45(d,1H),5.1(m,1H),3.85(d,1H),3.7(s,3H),3.5(s,3H),3.35(s,3H),2.9(dd,1H),2.65(dd,1H)。i)(R,S)-8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]-羰基]-2,3,4,5-四氫-4-甲基-3-氧代-1H-1,4-苯并二吖庚因乙酸除了用實施例5(h)的化合物代替實施例1(i)的化合物外，使用實施例1(j)的方法，并用HPLC(YMC ODS-AQ,50×250mm,90mL/分，15％AN/W-TFA)提純產(chǎn)物，得到標題化合物(0.115g,57％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.3(s,2H),9.1(s,2H),7.75(d,2H),7.4(d,2H),6.75(m,2H),6.25(d,1H),6.0(m,1H),5.35(d,1H),4.95(m,1H),3.75(d,1H),3.4(s,3H),2.9(s,3H),2.75(dd,1H),2.5(dd,1H)；MS(ES)m/e 410.0[M+H]+。
實施例6制備(R,S)-7-[[4-(氨基亞氨基甲基)苯甲?；鵠甲氨基]-2,3,4,5-四氫-1-甲基-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)7-甲氨基-1-甲基-2-氧代-4-(2-苯乙基)-2,3,4,5-四氫-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸乙酯將制備例23(g)的化合物(700mg,1.5mmol)溶于無水原甲酸三乙酯(1mL)中，加入TFA(2滴)，將混合物回流4小時，將溶液濃縮成膜(甲苯共沸物)，溶于乙醇(15mL)中，冷卻至5℃，然后加入硼氫化鈉(167mg,4.4mmol)，在室溫下將混合物攪拌10分鐘，然后加熱回流2小時。濃縮得到的溶液，將其倒入水中，然后用乙酸乙酯萃取。將合并的萃取液干燥(硫酸鎂)濃縮。用色譜法提純(硅膠，30％乙酸乙酯/己烷)得到標題化合物(350mg,60％)。MS(ES)m/e 396[M+H]+；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ1.2(3H,t),2.50(3H,s),2.55(1H,d),2.70-2.85(5H,s+t),2.95(1H,dd),3.54(1H,dt),3.68(1H,d),3.88(1H,dt),4.09(2H,q),4.58(1H,m),5.04(1H,d),6.07(1H,s),6.45(1H,d),6.79(1H,d),7.00-7.20(5H,m)。b)7-[[4-[N-(芐氧基羰基)氨基亞氨基甲基]苯甲?；鵠甲氨基]-1-甲基-3-氧代-4-(2-苯乙基)-2,3,4,5-四氫-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸乙酯將4-[N-(芐氧基羰基)脒基]苯甲酸(500mg,1.7mmol)溶于亞硫酰氯(6.5mL)中，加熱回流5分鐘，濃縮(CH2Cl2共沸物)得到4-[N-(芐氧基羰基)脒基]苯甲酰氯。
將?；?158mg,0.5mmol)溶解于CH2Cl2(3mL)中，然后滴加到實施例6(a)的化合物(200mg,0.5mmol)和二異丙基乙胺(174μl,1.0mmol)的冷卻溶液中。將混合物攪拌1小時，濃縮混合物，色譜分離殘余物(硅膠，25％乙酸乙酯/己烷)得到標題化合物(200mg,54％)。MS(ES)m/e 676.4[M+H]+；NMR(400MHz,CDCl3)δ1.23(3H,t),2.43-2.70(6H,m),2.95(1H,dd),3.41(3H,s),3.60(1H,d),3.92(2H,dt),4.10(2H,q),4.62(1H,m),5.00(1H,d),5.15(2H,s),6.44-7.68(17H,m)。c)(R,S)-7-[[4-(氨基亞氨基甲基)苯甲?；鵠甲氨基]-2,3,4,5-四氫-1-甲基-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸將實施例6(b)的化合物(200mg,0.3mmol)溶解于乙酸乙酯(20mL)中，然后加入到氫氧化鈀(100mg)和3N鹽酸(1mL)中。將混合物氫化(40psi)6小時。過濾反應混合物，用乙腈洗滌催化劑，濃縮濾液得到紅褐色固體的(R,S)-7-[[4-(氨基亞氨基甲基)苯甲?；鵠甲氨基]-2,3,4,5-四氫-1-甲基-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯(200mg)。MS(ES)m/e542.0[M+H]+。
將乙酯(200mg,0.3mmol)溶于甲醇(4mL)和1N氫氧化鈉(0.5mL)中，將溶液攪拌，濃縮，用水稀釋，用3N鹽酸酸化并濃縮。用HPLC(YMC ODS-AQ,25％AN/W-TFA)色譜分離殘余物得到白色固體的標題化合物(78mg,51％)。MS(ES)m/e 514.2[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO)δ2.35(3H,s),2.45(1H,dd),2.62(2H,m),2.78(1H,dd),3.39(s),3.95(1H,dt),4.05(1H,d),4.68(1H,bt),5.05(1H,d),6.75-7.21(8H,m),7.47-7.70(4H,m),9.10(1H,bs),9.20(1H,bs).分析(C29H31N5O4·1.8C2HO2F3)計算值C,54.47；H,4.60；N,9.74測定值C,54.44；H,4.85；N,9.36。
實施例7制備(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[2-(2-吡嗪基)乙基]羰基]氨基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R,S)-8-氨基-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯在105℃下將制備例24(e)的化合物(1.02g,2.67mmol),三乙胺(0.42mL,5.87mmol)和在甲苯(20mL)中的二苯基磷酰基疊氮化物(0.62mL,2.80mmol)的溶液加熱0.5小時。當溫度降至80℃后，混合物用芐醇(0.60mL,0.42mmol)處理，攪拌14小時并濃縮。殘余物用快速色譜法(硅膠，60％乙酸乙酯/己烷)提純，得到淺黃色油狀的(R,S)-8-(羰芐氧基)氨基-2,3,4,5-四氫-3-氧代-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯(0.79g,52％)。MS(ES)m/e 488[M+H]+；1H NMR(250MHz)δ7.12-7.44(m,10H),6.52-6.81(m,3H),5.24(d,1H),5.18(s,2H),4.96(t,1H),3.62-3.79(m,6H),2.95(dd,1H),2.70(m,2H),2.60(dd,1H)。
將Cbz化合物(0.68g,1.38mmol)溶于甲醇(10mL)中，加入載鈀碳(5％,50mg)，將混合物氫化1小時，通過Celite過濾并濃縮得到淺黃色油狀標題化合物(0.39g，產(chǎn)率81％)。MS(ES)m/e 352[M+H]+；1H NMR(250MHz)δ7.10-7.33(m,5H),6.62(d,2H),6.01(dd,1H),5.89(d,1H),5.19(d,1H),4.93(q,1H),3.50-3.75(m,6H),2.94(dd,1H),2.75-2.85(m,2H),2.63(dd,1H)。b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[2-(2-吡嗪基)乙基]羰基]氨基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸用二異丙基乙胺(0.39mL,1.23mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基羧二酰亞胺氫氯化物(0.23g,1.23mmol)處理在DMF(5mL)中的實施例43(a)的化合物(0.36g,1.02mmol)和制備例1(b)的化合物(0.17g,1.12mmol)的溶液，并在室溫下攪拌24小時。將混合物濃縮，然后加入冷水(3mL)。過濾形成的白色固體并將其溶于氯仿中。有機溶液用5％碳酸氫鈉洗滌，干燥(硫酸鈉)和濃縮，得到(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[2-(2-吡嗪基)乙基]羰基]氨基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯的白色固體(0.29g,60％)。MS(ES)m/e488[M+H]+；1H NMR(250MHz)δ8.40-8.55(m,3H),7.10-7.28(m,5H),6.81-6.99(m,3H),5.46(d,1H),5.14(m,1H),3.56-3.80(m,6H),3.27(t,2H),2.90(dd,1H),2.72-2.85(m,4H),2.61(dd,1H)。
除了用上述甲酯代替實施例1(i)的化合物，并用HPLC(PRP柱，21.5×250mm,14mL/分，30％AN/W-TFA,在254mm下UV檢測)提純產(chǎn)物外，使用實施例1(j)的方法，得到灰白色粉末的標題化合物(171mg,92％)。MS(ES)m/e474[M+H]+；1H NMR(400MHz)δ8.40-8.70(m,3H),7.10-7.31(m,5H),6.88(d,1H),6.70(d,1H),6.63(m,1H),5.37(d,1H),5.06(m,1H),3.57-3.81(m,3H),327(t,2H),2.74-2.97(m,5H),2.61(dd,1H)。
實施例8-10a)除了用2-(4-吡啶基)乙胺，2-(2-吡啶基)乙胺和制備例2(b)的化合物代替4-(甲氨基)-(N-芐氧基羰基)芐脒外，使用實施例1(h)的方法，得到下列標題化合物8(a)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[2-(4-吡啶基)乙基]氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯。HPLC RT 17.8分(YMC ODS-AQ,6×250mm,1.5mL/分，梯度，A乙腈B水-0.1％三氟乙酸，10-80％A在20分內(nèi)，在220nm下UV檢測)；1H NMR(250MHz,CDCl3)δ8.5(d,2H),7.1-7.3(m,7H),6.95(s,1H),6.8(s,2H),6.05(m,1H),5.25(d,1H),4.5(m,1H),4.25(m,1H),3.75(s,3H),3.69-3.7(m,3H),2.95-3.0(m,2H),2.8(m,2H),2.65(d,2H)。9(a)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[2-(2-吡啶基)乙基]氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯。HPLC RT 18.3分(YMC ODS-AQ,6×250mm,1.5mL/分，梯度，A乙腈B水-0.1％三氟乙酸，10-80％A在20分內(nèi)，在220nm下UV檢測)。10(a)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[3-(4-吡啶基)丙基]氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯。該化合物用快速色譜法(硅膠，氯仿，5∶95甲醇∶氯仿)提純。1H NMR(250MHz,CDCl3/CD3OD)δ8.48(d,2H),7.46-6.68(m,12H),6.17(m,1H),5.28(d,1H),4.98(q,1H),4.32(d,1H),3.90-3.55(m),3.72(s,3H),2.98(dd,1H),2.88-2.50(m),1.95(m)。b)除了用實施例8-10(a)的化合物代替實施例1(i)的化合物外，使用實施例1(j)的方法，得到下列標題化合物。8(b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[2-(4-吡啶基)乙基]氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸。1H NMR(DMSO d6/TFA,360MHz)δ8.8(d,2H),8.35(m,1H),7.95(d,2H),7.2(m,2H),7.1(m,2H),7.0(m,2H),6.84(d,1H),5.35(d,1H),4.95(d,1H),3.95(d,1H),3.6(m,4H),3.12(m,2H),2.73(m,2H),2.62(m,2H)；MS(ES)m/e 473[M+H]+。9(b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[2-(2-吡啶基)乙基]氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸。MS(ES)m/e 473[M+H]+。10(b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[3-(4-吡啶基)丙基]氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酯，該化合物用色譜法(SephadexLH2O，水)。MS(ES)m/e 487[M+H]+；HPLC RT10.10分(PRP-1,4.6×250mm,1.5mL/分，梯度，A乙腈B水/0.1％TFA,20-50％A在20分鐘內(nèi)，在220和250nm下UV檢測)；TLC Rf0.47(硅膠，3∶1∶1 n-BuOH∶HOAc∶H2O)；分析(C28H30N4O4·3H2O)計算值C,62.21；H,6.71；N,10.36。實驗值C,62.21；H,6.00；N,10.36。
實施例11-12a)除了用制備例3的化合物和4-硝基芐胺代替4(甲氨基)-(N-芐氧基羰基)芐脒外，使用實施例1(h)和1(i)的方法，得到下列標題化合物11(a)(R,S)-8-[[[5-氨基戊基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯。TLC Rf 0.45(硅膠，1∶20CH2Cl2∶甲醇)；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ6.9-7.4(m,13H),5.4(d,1H),5.1(m,1H),5.05(s,2H),3.87(d,1H),3.7(s,3H),3.6-3.8(m,2H),3.1(t,2H),2.95(dd,1H),2.75(t,2H),2.65(dd,1H),1.45-1.65(m,4H),1.3-1.4(m,2H)。12(a)(R,S)-[8-[[(4-氨基苯基)甲基]氨基]-羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.15(d,2H),7.45(d,2H),7.15(m,3H),7.0-7.1(m,4H),6.85(d,1H),5.3(d,1H),4.95(t,1H),4.65(d,2H),4.4(b,1H),3.7(s,3H),3.5-3.65(m,3H),2.95(dd,1H),2.75(m,2H),2.6(dd,1H)。b)除了用實施例47-48(a)的化合物代替實施例1(i)的化合物外，使用實施例1(j)的方法，得到下列標題化合物11(b)(R,S)-8-[[(5-氨基戊基)氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.05-7.25(m,5H),7.0(s,1H),6.95(s,2H),5.45(d,1H),5.1(m,1H),3.9(d,1H),3.8(m,1H),3.7(m,1H),3.4(t,2H),2.95-2.85(m,3H),2.7-2.8(m,2H),2.55-2.65(dd,1H)；MS(ES)m/e 453.4[M+H]+。12(b)(R,S)-[8-[[(4-氨基苯基)甲基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.3(d,2H),7.15-7.25(m,6H),7.1-7.0(m,6H),5.5(d,1H),5.1(m,1H),4.5(d,2H),3.9(d,1H),3.8(m,1H),3.7(m,1H),2.95(dd,1H),2.8(m,2H),2.65(dd,1H)；MS(ES)m/e 473.2[M+H]+。
實施例13制備(R,S)-8-[[[4-(丙基)氨甲基)苯基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R,S)-8-[[[N-(叔丁氧基羰基)-4-(丙基)氨甲基)苯基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯除了用制備例4(b)的化合物代替4-(甲氨基)-(N-芐氧基羰基)芐脒外，使用實施例1(h)的方法，得到標題化合物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.6(d,2H),7.0-7.3(m,9H),6.9(d,1H),5.3(d,1H),5.0(m,1H),4.4(m,2H),4.35(d,1H),3.7(s,3H),3.6-3.7(m,2H),3.0-3.2(m,2H),2.95(dd,1H),2.75(m,2H),2.65(dd,1H),1.5-1.7(m,9H),0.9(t,3H)b)(R,S)-8-[[[4-(丙基)氨甲基)苯基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯將實施例13(a)的化合物(350mg,0.56mmol)溶于CH2Cl2(25mL)和TFA(5mL)的混合物中，1小時后，濃縮混合物得到標題化合物。c)(R,S)-8-[[[4-(丙基)氨甲基)苯基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸除了用實施例13(b)的化合物代替實施例1(i)的化合物外，使用實施例1(j)的方法，得到標題化合物(142mg,40％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.8(d,2H),7.45,(d,2H),7.0-7.25(m,8H),5.5(d,1H),5.1(m,1H),4.2(s,2H),3.9(d,1H),3.8(m,1H),3.7(m,1H),2.9-3,1(m,3H),2.75(m,2H),2.65(dd,1H),1.7(m,2H),1.0(t,3H)；MS(ES)m/e 515.2[M+H]+。
實施例14-16a)除了用制備例5和6(c)的化合物代替制備例4(b)的化合物外，使用實施例13(a)-(c)的方法，得到14(a)(R,S)-8-[[[[4-[N-(叔丁氧基羰基)-氨甲基]苯基]甲基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸15(a)(R,S)-8-[[[[3-[N-(叔丁氧基羰基)-氨甲基]苯基]甲基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸16(a)(R,S)-8-[[[3-[4-[N-(叔丁氧基羰基)哌啶基]丙基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸b)除了用實施例14-16(a)的化合物代替實施例13(a)的化合物，并用色譜法(Sephadex LH20)提純殘余物外，使用實施例13(b)的方法，得到14(b)(R,S)-8-[[[[4-(氨甲基)苯基]甲基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸。MS(ES)m/e 487.0[M+H]+.分析(C28H30N4O4·1.5TFA)計算值C,56.62；H,4.83；N,8.52.測定值C,57.63；H,5.24；N,8.82.15(b)(R,S)-8-[[[[3-(氨甲基)苯基]甲基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸。MS(ES)m/e487.0[M+H]+；HPLC RT 15.9分(PRP-1,4.6×250mm,1.5mL/分，25％AN/W-TFA，在220和250nm下UV檢測)。分析(C28H30N4O4·1.5TFA)計算值C,56.62；H,4.83；N,8.52。實驗值C,57.28；H,5.18；N,8.72。16(b)(R,S)-8-[[[3-[4-哌啶基]丙基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸。1H NMR(250MHz,DMSO-d6)δ7.40-6.70(m,8H),5.38(dd,1H),4.99(m,1H),4.29(s,1H),4.00(dd,1H),3.70-2.90(m),2.90-2.20(m),1.72(d,2H),1.48(m,3H),1.17(m,4H)；TLCRf4.90(硅膠，3∶1∶1正丁醇∶HOAC∶水)；HPLC RT 9.82分(PRP-1,4.6×250mm,20-50％AN/W-TFA，梯度20分@15ml/分，在220和250nm下UV檢測)；MS(ES)m/e 493.2[M+H]+；分析(C28H36N4O4·HOAC·2H2O)計算值C,61.21；H,7.53；N,89.52.測定值C,61.56；H,7.17；N,9.91。
實施例17-21a)除了用4-(氨甲基)吡啶，4-(2-吡啶基)丁胺，N-甲基-4-(3-吡啶基)丁胺，2-(1H-咪唑-1-基)乙胺(Syn.Comm.,21,535(1991))和3-(1H-咪唑-1-基)丙胺代替4-(甲氨基)-(N-芐氧基羰基)]芐脒和用三乙胺代替吡啶外，使用實施例1(h)的方法，得到17(a)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[4-(吡啶基)甲基]氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯18(a)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[4-(2-吡啶基)丁基]氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯19(a)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[4-(3-吡啶基)丁基]甲氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯20(a)(R,S)-2,3,4,5-四氫-8-[[[2-(1H-咪唑-1-基)乙基]氨基]羰基]-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯。MS(ES)m/e 476.2[M+H]+,1NMR(400MHz,MeOD)δ2.66-2.76(3H,dd+t),2.93(1H,dd),3.58-3.70(7H,m),3.92(1H,d),4.30(2H,t),5.06(1H,m),5.37(1H,d),6.90-7.25(10H,m),7.92(1H,s)。21(a)(R,S)--2,3,4,5-四氫-8-[[[3-(1H-咪唑-1-基)丙基]氨基]羰基]-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯。MS(ES)m/e 490.2[M+H]+,1NMR(400MHz,MeOD)δ2.08(2H,m),2.62-2.77(3H,dd+t),2.93(1H,dd),3.34(2H,t),3.61(1H,m),3.67-3.77(4H,s+m),3.86(1H,d),4.08(2H,t),5.08(1H,m),5.39(1H,d),6.90-7.23(11H,m),7.75(1H,bs)。b)除了用實施例17-21(a)的化合物代替實施例1(i)的化合物外，使用實施例1(j)的方法，得到標題化合物17(b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[4-(吡啶基)甲基]氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸HPLC RT 8.2分(YMCODS-AQ,50×250mm,80mL/分,30％AN/W-TFA,在220nm下UV檢測)；MS(ES)m/e 459.2[M+H]+；1NMR(400MHz,DMSO)δ2.55(1H,dd),2.67(2H,t),2.78(1H,dd,J1=9Hz,J2=17Hz),3.58(2H,m),4.00(1H,d,J=17Hz),4.65(2H,d,J=6Hz),5.03(1H,m),5.44(1H,d,J=17Hz),7.00-7.29(10H,m),7.80(2H,d,J=5Hz),8.78(1H,bs),9.10(1H,t,J1=6Hz,J2=12Hz).分析(C26H26N4O4·1.5C2HF3O2·0.5H2O)計算值C,54.55；H,4.50；N,8.77.測定值C,54.32；H,4.61；N,8.89。18(b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[4-(2-吡啶基)丁基]氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸。HPLC RT 10.5分(YMC ODS-4Q,50×250mm,80mL/分,25％AN/W-TFA，在220nm下UV檢測)；MS(ES)m/e501.2[M+H]+；1NMR(400MHz,DMSO)δ1.53(2H,t),1.75(2H,t),2.55(1H,dd),2.68(2H,t),2.78(1H,dd),2.99(2H,t),3.27(2H,m),3.59(2H,m),4.01(1H,d),5.00(1H,t),5.40(1H,d),6.90(1H,d),7.06(2H,m),7.20(3H,m),7.28(2H,m),7.77(1H,t),7.85(1H,d),8.28(1H,t),8.35(1H,t),8.74(1H,d).分析(C29H32N4O4·1.4C2HO2F3·H2O)計算值C,55.73；H,5.19；N,8.12.測定值C,55.61；H,5.08；N,8.21。19(b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[4-(3-吡啶基)丁基]甲氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸。HPLC RT 12.3分(YMC ODS-AQ,50×250mm,80mL/分,30％AN/W-TFA,在220nm下UV檢測)；MS(ES)m/e515.2[M+H]+；1NMR(400MHz,DMSO)δ1.31-1.70(4H,m),2.40-2.92(m),3.21(1H,m),3.40(1H,m),3.55(2H,m),3.98(1H,d),5.01(1H,m),5.38(1H,d,),6.40-6.55(2H,m),6.92-7.26(6H,m),7.77-7.94(1H,m),8.10-8.34(m),8.54-8.81(2H,m).分析(C30H34N4O4·C4H2F5O4)計算值C,54.99；H,4.89；N,7.54.測定值C,54.86；H,5.24；N,7.81。20(b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-8-[[[2-(1H-咪唑-1-基)乙基]氨基]羰基]-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸。HPLC RT 6.8分(YMC ODS-AQ,50×250nm,80mL/分,30％AN/W-TFA，在220nm下UV檢測)；MS(ES)m/e 462.2[M+H]+；1NMR(400MHz,DMSO-d)δ2.55(1H,dd),2.66(2H,t),2.78(1H,dd),3.55(2H,t),3.65(2H,t),4.00(1H,d),4.35(2H,t),5.00(1H,m),5.38(1H,d),6.00(1H,bs),6.87(1H,d),7.00(1H,s),7.07(1H,d),7.13-7.28(5H,m),7.63(1H,s),7.73(1H,s),8.45(1H,t),9.09(1H,s).分析(C25H27N5O4·1.5(C2HF3O2)H2O)計算值C,51.69；H,4.73；N,10.79.實驗值C,51.46；H,4.66；N,10.70。21(b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-8-[[[3-(1H-咪唑-1-基)丙基]氨基]羰基]-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸。HPLC RT 8.6分(YMC ODS-AQ,50×250nm,80mL/分，30％AN/W-TFA，在220nm下UV檢測)；MS(ES)m/e 476.2[M+H]+；1NMR(400MHz,DMSO-d)δ2.06(4H,bt),2.51(1H,dd),2.66(4H,bt),2.77(1H,dd),3.22(4H,m),3.58(4H,bt),4.00(1H,d),4.20(4H,t),5.00(1H,m),5.40(1H,d),6.92(1H,d),7.05(2H,m),7.1 5(2H,m),7.23(2H,m),7.68(1H,s),7.80(1H,s),8.37(1H,t),9.12(1H,s)；分析(C26H29N5O4·1.75C2HF3O2)計算值C,52.48；H,4.59；N,10.37.測定值C,52.61；H,4.98；N,10.38。
實施例22-23a)除了用制備例7(a)和(b)的化合物代替4-(氨甲基)吡啶外，使用實施例53(a)和38(f)的方法，以及除了用氫氧化鈀代替載鈀碳外，使用實施例2(f)的方法，得到22(a)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[2-(1-哌嗪基)乙基]氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯。HPLC RT 5.3分(YMC ODS-AQ,6×250mm,1.5mL/分，30％AN/W-TFA，在220nm下UV檢測)。23(a)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[2-(1-哌嗪基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯。b)除了用實施例22(a)和23(a)的化合物代替實施例1(i)的化合物外，使用實施例1(j)的方法，得到22(b)(1)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[2-(1-哌嗪基)乙基]氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸。HPLC RT 7.4分(YMC ODS-AQ,50×250mm,80mL/分,22％AN/W-TFA,在220nm下UV檢測)；MS(ES)m/e 480.2[M+H]+；1NMR(400MHz,DMSO-d)δ2.48-2.60(1H,dd),2.70(2H,t),2.82(1H,dd),3.20(2H,bs),3.89(8H,bs),3.58(4H,m),4.05(1H,d),5.00(1H,t),5.40(1H,d),6.97(1H,d),7.11(2H,m),7.18(3H,m),7.26(1H,m),8.50(1H,bs).分析(C26H33N5O4·2.5(C2HF3O2)·2(H2O))計算值C,46.39；H,4.96；N,8.73.測定值C,46.35；H,4.88；N,8.90。23(b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[2-(1-哌嗪基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸。HPLC RT 9.8分(YMC ODS-AQ,50×250mm,80mL/分，25％AN/W-TFA，在220nm下UV檢測)；MS(ES)m/e 494.2[M+H]+；1NMR(400MHz,DMSO-d)δ2.52(1H,dd),2.68(2H,m),2.75(1H,dd),2.92(3H,s),2.94-3.30(8H,m),3.50-4.10(7H,m),5.03(1H,m),5.40(1H,d),6.49(1H,d),6.57(1H,s),7.02(1H,d),7.10-7.25(5H,m)；分析(C27H35N5O4·2.75C2HF3O2)計算值C,48.36；H,4.75；N,8.68.測定值C,48.23；H,4.86；N,8.61。
實施例24-25a)除了用制備例8和9的化合物代替實施例1(i)的化合物并且不用吡啶外，使用實施例1(h)的方法和13(b)的方法，得到24(a)(R,S)-8-[[[6-氨己基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯。TLC Rf 0.35(Kieselgel 60F254,15∶3∶2 2-丁醇∶甲酸∶水)；MS(ES)m/e467。25(a)(R,S)-8-[[[6-氨丁基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯。MS(ES)m/e 453.2。b)除了用實施例24(a)和25(a)的化合物代替化合物1(i)并用氫氧化鋰代替氫氧化鈉外，使用實施例1(j)的方法，得到24(b)(R,S)-8-[[[6-氨己基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸。MS(ES)m/e 467。分析(C26H34N4O4·1.4C2HO2F3)計算值C,55.13；H,5.55；N,8.8.測定值C,55.24；H,5.70；N,8.9。25(b)(R,S)-8-[[[6-氨丁基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸。MS(ES)m/e 439.2。分析(C24H30N4O4.1.5.H2O.0.1HCl)計算值C,61.03；H,7.02；N,11.62；Cl,1.10.測定值C,61.44；H,7.11；N,11.94；Cl,0.76。
實施例26制備(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[3-(4-吡唑基)丙基]氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[3-(4-吡唑基)丙基]氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯用3,3-DCC(458mg,2.2mmol),1-HOBT(285mg,2.1mmol)處理溶于DMF(30mL)的制備例24(e)的化合物(776mg,2.0mmol)，用三乙胺調(diào)節(jié)至PH值為7。用2-(4-吡唑基)乙胺二氫氯化物(300mg,2.4mmol)(J.Am.Chem.Soc.,75,4048(1953))處理混合物，在室溫下攪拌48小時，濃縮，殘余物用快速色譜法(硅膠，臺階梯度，氯仿至95∶5氯仿∶甲醇)提純得到標題化合物(1g,90％)。MS ES[M+H]+=490；1H NMR(250MHz)δ7.44(s,2H),7.29-7.19(m,5H),7.18-7.09(m,3H),5.30(dd,2H J=7.5Hz),4.98-4.95(m,1H),3.73(s,3H),3.70-3.60(m,3H),3.43(d,2H,J=7.5Hz),3.00(dd,2H,J=7.0Hz),2.77-2.65(m,2H),2.63(t,2H,J=7Hz),1.88(p,2H,J=7.5)。b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[3-(4-吡唑基)丙基]氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸除了用實施例26(a)的化合物代替實施例1(i)的化合物外，使用實施例1(j)的方法，得到標題化合物。MS(ES)476[M+H]+；1H NMR(400MHz)δ7.66(s,2H),7.21-7.13(m,5H),7.00-6.96(m,3H),5.47(d,1H,J=16Hz),5.10(m,1H),3.70(d,1H,J=16Hz),3.80-3.71(m,1H),3.70-3.60(m,1H),3.32(t,2H,J=1.6Hz),2.95(dd,2H,J=8Hz),2.75(m,2H),2.66(t,2H,J=8Hz),1.89(p,2H,J=8Hz)。
實施例27-29a)除了用組胺，2-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)乙胺和2-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)乙胺代替2-(4-吡唑基)乙胺二氫氯化物，用1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基羧二亞酰胺氫氯化物代替1,3-二環(huán)己基碳二亞胺外，使用實施例26(a)的方法，得到27(a)(R,S)-2,3,4,5-四氫-8-[[[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]羰基]-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯28(a)(R,S)-2,3,4,5-四氫-8-[[[2-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]羰基]-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯29(a)(R,S)-2,3,4,5-四氫-8-[[[2-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)乙基]氨基]羰基]-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯b)除了用實施例27-29(a)的化合物代替實施例1(i)的化合物外，使用實施例1(j)的方法，得到27(b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-8-[[[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]羰基]-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸。MS(ES)m/e462.2[M+H]+；HPLC k′3.2(YMC ODS AQ,22％AN/W-TFA，在220nm下UV檢測)；TLC Rf 0.85(硅膠，15∶5∶10∶10吡啶∶乙酸∶丁醇∶水)。分析(C25H27NO4·1.25H2O)計算值C,62.03；H,6.14；N,14.47.測定值C,61.89；H,6.37；N,14.20。28(b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-8-[[[2-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)乙基]氨基]羰基]-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸。MS(ES)m/e 476[M+H]+；HPLC k′2.03(YMC ODSAQ,25％AN/W-TFA，在220nm下UV檢測)；TLCRf 0.90(硅膠，15∶5∶10∶10吡啶∶乙酸∶丁醇∶水)。分析(C26H29N5O4·3.5HCl·0.5H2O)計算值C,51.01；H,5.51；N,11.44.測定值C,50.96；H,5.13；N,11.72。29(b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-8-[[[2-(1-甲基-1H-咪唑-5基)乙基]氨基]羰基]-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸。MS(ES)m/e 476[M+H]+；HPLC k′2.03(YMC ODSAQ,25％AN/W-TFA，在220nm下UV檢測)；TLCRf 0.90(硅膠，15∶5∶10∶10吡啶∶乙酸∶丁醇∶水)；分析(C26H29N5O4·5HCl·0.5H2O)計算值C,46.83；H,5.29；N,10.50.測定值C,47.20；H,5.70；N,10.47。
實施例30制備(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[2-(2-哌嗪基)乙基]氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[2-(2-哌嗪基)乙基]氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯除了用制備例10(b)的化合物代替組胺，用二異丙基乙胺代替三乙胺外，使用實施例26(a)的方法，得到標題化合物。MS(ES)m/e[M+H]+488；1H NMR(250MHz)δ8.40-8.55(m,3H),7.10-7.28(m,5H),6.81-6.99(m,3H),5.46(d,1H),5.14(m,1H),3.56-3.80(m,6H),3.19(t,2H),2.90(dd,1H),2.72-2.85(m,4H),2.61(dd,1H)。b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[2-(2-哌嗪基)乙基]氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸除了用實施例30(a)的化合物代替實施例1(i)的化合物外，使用實施例1(j)的方法，得到標題化合物。MS(ES)m/e[M+H]+474；1H NMR(400MHz)δ8.40-8.70(m,3H),7.10-7.31(m,5H),6.88(d,1H),6.70(d,1H),6.63(m,1H),5.37(d,1H),5.06(m,1H),3.57-3.81(m,3H),3.18(t,2H),2.74-2.97(m,5H),2.61(dd,1H)。
實施例31制備(R,S)-7-[[[4-(氨甲基)苯基]羰基]氨基]-2,3,4,5-四氫-1-甲基-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R,S)-7-[[[4-[N-(叔丁氧基羰基)氨基甲基]苯基]羰基]氨基]-2,3,4,5-四氫-1-甲基-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸芐酯除了用制備例23(g)的化合物代替制備例24(e)的化合物、用4-[(叔丁氧基羰基)(氨甲基)]苯甲酸代替制備例10(b)的化合物和用CH2Cl2代替DMF外，使用實施例30(a)的方法，得到標題化合物(100mg,38％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ1.45(9H,s),2.54(3H,s),2.61(1H,dd),2.74(2H,t),3.04(1H,dd),3.50(1H,dt),3.72(1H,d),3.88(1H,dt),4.28(2H,d),4.66(1H,m),4.99(1H,d),5.08(2H,ABq),5.40(1H,t),6.72(1H,d),7.00(2H,d),7.05-7.19(3H,2t),7.20-7.48(5H,m),7.80(1H,d),8.70(1H,s)。b)(R,S)-7-[[[(4-氨甲基)苯基]羰基]氨基]-2,3,4,5-四氫-1-甲基-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸用在二噁烷(0.5mL,2.0mmol)中的4M氯化氫處理在CH2Cl2(15mL)中的實施例31(a)化合物(100mg,0.2mmol)的溶液，在室溫下攪拌4.5小時。將混合物濃縮，將殘余物懸浮于乙酸乙酯(15mL)，3N鹽酸(2mL)和在二噁烷(1mL)中的4M氯化氫的混合物中。將該懸浮加入到氬吹掃的裝有氫氧化鈀(100mg)的帕爾瓶中，并氫化(50psi)24小時。過濾、濃縮混合物得到白色粉末的標題化合物(50mg,52％)。HPLCRT 8.0分(YMC ODS-AQ,50×250mm,80mL/分，27.5％AN/W-TFA，在220nm下UV檢測)；MS(ES)m/e 487.2[M+H]+；1NMR(400MHz,DMSO-d6)δ2.70(1H,dd),2.82(1H,dd),3.88(2H,dt),4.08(1H,d),4.13(2H,s),4.68(1H,m),5.13(1H,d),6.94(1H,d),7.02-7.20(4H,m),7.48-7.62(3H,m),8.01(2H,d),8.25(2H,m)；分析(C28H30N4O4·1.5(C2HF3O2)·1.4(H2O))計算值C,54.57；H,5.06；N,8.21.測定值C,54.95；H,5.11；N,7.81。
實施例32制備(R,S)-8-[[[2-(4-吡啶基)乙基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R,S)-8-[[[2-(4-吡啶基)乙基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯除了用N-甲基-2-(4-吡啶基)乙胺代替組胺并且不使用二異丙基乙胺外，使用實施例27(a)的方法，得到標題化合物。HPLC RT 16.6分(YMC ODS-AQ,6×250mm,1.5mL/分，梯度，A乙腈B水-0.1％三氟乙酸，10-80％A在20分鐘內(nèi)，在220nm下UV檢測；MS(ES)m/e487[M+H]+。b)(R,S)-8-[[[2-(4-吡啶基)乙基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸除了用實施例32(a)的化合物代替實施例1(i)的化合物外，使用實施例1(j)的方法，得到標題化合物。1H NMR(DMSOd6/TFA,360MHz)δ8.8(br,2H),8.0(br,1H),7.7(br,1H),7.15(m,5H),6.0(br,1H),6.3(br,2H),3.35(d,1H),5.0(m,1H),3.95(d,1H),3.75(br,2H),3.6(m,3H),3.15(br,2H),2.9(br,3H),2.75(m,1H),2.65(m,2H)；MS(ES)m/e 487[M+H]+。
實施例33制備(R,S)-8-[[[4-(二甲氨基)丁基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R,S)-8-[[[4-(二甲氨基)丁基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯除了用4-(二甲氨基)丁胺代替N-甲基-2-(4-吡啶基)乙胺，用二甲氨基吡啶代替1-羥基苯并三唑外，使用實施例32(a)的方法，得到標題化合物。MS(ES)m/e 481[M+H]+；1HNMR(250MHz)δ7.44-7.50(m,1H),6.98-7.28(m,7H),6.81(d,1H),5.27(d,1H),5.00(m,1H),3.56-3.80(m,6H),3.44(q,2H),3.00(dd,1H),2.63-2.85(m,3H),2.69(dd,1H),2.48-2.52(m,2H),2.32(s,6H),1.66-1.77(m,4H)。b)(R,S)-8-[[[4-(二甲氨基)丁基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸除了用實施例33(a)的化合物代替實施例1(i)的化合物外，使用實施例1(j)的方法，得到標題化合物。MS(ES)m/e467[M+H]+；1H NMR(400MHz)δ7.00-7.31(m,6H),6.98(d,1H),6.84(d,1H),5.34(d,1H),5.00(m,1H),3.57-3.81(m,3H),3.42(q,2H),2.96(dd,1H),2.62-2.80(m,3H),2.50(q,2H),2.34(s,6H),1.65-1.74(m,4H)。
實施例34制備(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯用氧化鉑(90mg)處理在甲醇中的實施例9(a)的化合物(0.45g,1mmol)和0.6N鹽酸(3.1mL)的溶液，并氫化(45psi)5小時。使混合物脫氣，加入氧化鉑(74mg)，氫化(45psi)混合物16小時，過濾和濃縮，得到標題化合物。MS(ES)m/e 479.2[M+H]+。b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸二(三氟乙酸酯)除了用實施例34(a)的化合物代替實施例1(i)的化合物外，使用實施例1(j)的方法，得到標題化合物。HPLC RT 16.1分(YMC ODS-AQ,6×250mm,1.5mL/分，梯度，A乙腈B水-0.1％三氟乙酸，10-80％A在20分內(nèi)，在220nm下UV檢測)；1H NMR(DMSO d6/TFA,360MHz)δ8.5(br,1H),8.3(m,2H),7.3(m,2H),7.15(m,2H),7.05(m,2H),6.9(d,1H),5.39(d,1H),5.0(m,1H),4.0(d,1H),3.55(m,2H),3.25(d,3H),2.55-2.8(m,3H),1.2-1.8(m,9H)；MS(ES)m/e 479[M+H]+。
實施例35制備(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯用氧化鉑(5mg)處理在甲醇(30mL)中的實施例32(a)的化合物(0.1g,0.2mmol)和0.6N鹽酸(0.6mL)的溶液，并氫化(45psi)一整夜。過濾和濃縮混合物，得到標題化合物。MS(ES)m/e 493[M+H]+。b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸二(三氟乙酸酯)除了用實施例35(a)的化合物代替化合物1(i)外，使用實施例1(j)的方法，得到標題化合物(130mg,92％)。HPLCRT 16.6分(YMC ODS-AQ,6×250mm,1.5mL/分，梯度，A乙腈B水-0.1％TFA,10-80％A在20分內(nèi)，在220nm下UV檢測)；1H NMR(DMSO d6/TFA,360MHz)δ8.5(br,1H),8.1(br,1H),7.2(m,5H),70(d,1H),6.5(s,1H),6.45(d,1H),5.4(d,1H),4.95(m,1H),3.6(br,2H),3.44(br,1H),3.09-3.25(br,4H),2.69-2.85(m,6H),1.85(br,1H),1.1-1.86(m,8H)；MS(ES)m/e 493[M+H]+。
實施例36制備(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-[2-(環(huán)己基)乙基]-8-[[[2-(4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-[2-(環(huán)己基)-乙基]-8-[[[2-(4-吡啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯用氧化鉑(120mg)處理在甲醇(50mL)中的實施例32(a)的化合物(0.6g,1.2mmol)和0.6N鹽酸(4.0mL)的溶液，然后氫化(45psi)，過濾和濃縮混合物，得到標題化合物。HPLCRT 22分(YMC ODS-AQ,6×250mm,1.5mL/分，梯度，A乙腈B水-0.1％TFA,10-80％A在20分內(nèi)，在220nm下UV檢測；MS(ES)m/e 512[M+H]+。b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-[2-環(huán)己基)乙基]-8-[[[2-(4-吡啶)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸二(三氟乙酸酯)
除了用實施例36(a)的化合物代替化合物1(i)外，使用實施例1(j)的方法，得到標題化合物(35mg,4％)。HPLC RT19.8分(YMC ODS-AQ,6×250mm,1.5mL/分,梯度，A乙腈B水-0.1％三氟乙酸，10-80％A在20分內(nèi)，在220nm下UV檢測)；1H NMR(DMSO d5/TFA,360MHz)δ8.5(br,1H),8.15(br,1H),7.0(d,1H),6.5(s,1H),6.4(d,1H),5.4(d,1H),4.95(m,1H),3.89(d,1H),3.2-3.5(br,7H),2.8(br,7H),0.75-1.85(m,23H)；MS(ES)m/e 499[M+H]+。
實施例37制備(R,S)-8-[[2-[4-[1-(甲基)吡啶鎓]-乙基]甲氨基]羰基]-4-(2-苯乙基)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯碘化物用碘代甲烷(0.2mL,3.2mmol)處理溶于乙腈(10mL)中的實施例32(a)的化合物(0.11g,2.2mmol)，并加熱回流24小時，真空濃縮(甲苯共沸物)，用乙醚研制得到黃色固體的標題化合物。1H NMR(DMSO d5/TFA,250MHz)δ8.8(br,2H),8.05(br,1H),7.15(m,6H),6.99(br,1H),6.4(br,2H),5.35(d,1H),5.05(m,1H),4.25(s,3H),3.95(d,1H),3.75(br,3H),3.55(s,3H),2.6-3.15(m,11H)；MS(ES)m/e 641[M-H],515.2[M+H]+。
實施例38-39制備(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-[2-(環(huán)己基)乙基]-8-[[[2-(1-甲基-4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸和(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[2-(1-甲基-4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)用氧化鉑(27mg)處理在甲醇(35mL)中的實施例37的化合物(0.3g,0.47mmol)的溶液，然后氫化8小時，過濾和濃縮混合物，得到下列化合物的混合物38(a)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-[2-(環(huán)己基)乙基]-8-[[[2-(1-甲基-4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯39(a)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[2-(1-甲基-4-哌啶基)乙基]-甲氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯b)除了用實施例74-75(a)的化合物代替實施例1(i)的化合物，用HPLC(YMC ODS AQ,50×250mm,90mL/分，27％AN/W-TFA，在220nm下UV檢測)提純生成的混合物外，使用實施例1(i)的方法，得到38(b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-[2-(環(huán)己基)乙基]-8-[[[2-(1-甲基-4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸1H NMR(DMSO d6/TFA,360MHz)δ9.14(br,1H),7.0(d,1H),6.5(s,1H),6.45(d,1H),5.4(d,1H),5.0(m,1H),3.89(d,1H),2.9-3.5(br,6H),2.25-2.85(m,10H),1.9(br,1H),0.76-1.55(m,19H)；MS(ES)m/e 513[M+H]+。39(b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[2-(1-甲基-4-哌啶基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸1HNMR(DMSO d6/TFA,360MHz)δ9.1(br,1H),7.2(m,5H),7.0(d,1H),6.5(s,1H),6.45(d,1H),5.4(d,1H),5.0(m,1H),3.95(m,1H),3.55(m,9H),3.4(br,2H),3.2(br,2H),2.85(s,3H),2.65-2.75(m,7H),1.95(br,1H),1.0-1.49(br,8H)；MS(ES)m/e 507[M+H]+。
實施例40制備[S-(R,S)]-8-[[[4-[N-(丙氨?；?氨甲基]苯基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)[S-(R,S)]-8-[[[4-[N-[N-(叔丁氧基羰基)-丙氨?；鵠氨甲基]苯基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯除了用制備例11(b)的化合物代替4-(氨甲基)吡啶外，使用實施例17的方法，得到標題化合物(427mg,65％):TLCRf0.52(乙酸乙酯)；HPLC RT 84.0分(超球形ODS4.6mm×15cm,30％AN/W-TFA,1.5mL/分，在240nm下UV檢測)；1H NMR(CDCl3)δ1.34(d,J=7.16Hz,3H),1.39(s,9H),2.61(m,1H),2.75(m,2H),2.92(m,1H),3.62-3.72(m,3H),3.70(s,3H),4.18(m,1H),4.34(m,2H),4.96(dd,J=6.6,6.6Hz,1H),5.12(brs,1H),5.27(d,J=16.6 Hz,1H),6.71(brs,1H),6.84(d,J=8.3Hz,1H),7.04-7.23(m,9H),7.51(d,J=7.9Hz,2H),8.13(brs,1H)。b)[S-(R,S)]-8-[[[4-[N-[N-(叔丁氧基羰基)-丙氨?；鵠氨甲基]苯基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸除了用實施例40(a)的化合物代替實施例1(i)的化合物外，使用實施例1(j)的方法，得到標題化合物(360mg,88％):HPLC RT 33.8分(超球形ODS,4.6mm×15cm,30％AN/W-TFA,1.5mL/分，在240nm下UV檢測)；1H NMR(CD3OD)δ1.32(d,J=7.2Hz,3H),1.44(s,9H),2.65(dd,J=5.2,16.7Hz,1H),2.78(m,2H),2.95(dd,J=8.9,16.7Hz,1H),3.67(m,1H),3.76(m,1H),3.92(d,J=17.0Hz,1H),4.09(m,1H),4.33(m,1H),4.42(m,1H),5.12(dd,J=5.2,8.9Hz,1H),5.48(d,J=16.8Hz,1H),7.01-7.23(m,8H),7.28(d,J=8.3Hz,2H),7.61(d,J=8.3Hz,2H)。c)[S-(R,S)]-8-[[[4-[N-(丙氨?；?氨甲基]苯基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸氫氯化物除了用實施例40(b)的化合物代替實施例31(a)的化合物外，使用實施例31(b)的方法，得到標題化合物(160mg,51％)的淡黃色粉末HPLC RT 3.1分(超球形ODS 4.6mm×15cm,30％AN/W-TFA,1.5mL/分，在240nm下UV檢測)；1H NMR(CD3OD)δ1.52(d,J=7.1Hz,3H),2.67(dd,J=5.1,16.7Hz,1H),2.77(m,2H),2.96(dd,J=8.9,16.7Hz,1H),3.59-3.77(m,2H),3.84-3.98(m,2H),4.40(s,2H),5.11(dd,J=5.1,8.9Hz,1H),5.45(d,J=16.7Hz,1H),7.02-7.22(m,8H),7.29(d,J=8.5Hz,2H),7.64(d,J=8.5Hz,2H)；MS(ES)m/e 544.2(M+H)+、分析(C30H33N5O5·HCl·3H2O)計算值C,56.82；H,6.36；N,11.04.測定值C,56.89；H,6.11；N,10.90。
實施例41制備8-[[4-(氨基亞氨基甲基)苯甲?；鵠氨基]-4,5-二氫-2-甲基-3-氧代-4-(2-苯乙基)-3H-1,4-苯并二吖庚因除了用TFA代替鹽酸外，使用制備例26(e)的方法，得到8-[[4-(氨基亞氨基甲基)苯甲?；鵠氨基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸和標題化合物(80mg)的混合物，用HPLC RT 24.8分(YMC ODS AQ,50×250mm,85mL/分,30％AN/W-TFA，在220nm下UV檢測)分離該混合物；1HNMR(400MHz,MeOD4)δ8.1(d,2H),7.9(d,2H),7.75(s,1H),7.60(d,1H),7.35(d,1H),7.22-7.12(m,5H),4.20(m,2H),3.70(m,2H),2.85(m,2H),2.42(s,3H)；MS(ES)m/e 440[M+H]+。
實施例42制備(R,S)-8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-2-甲基-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因a)(R,S)-3-[2-(1-甲氧基-1-氧代-2-丙基)氨基]-4-[N-(叔丁氧基羰基]-N-(2-苯乙基)-氨甲基]苯甲酸叔丁酯將制備例24(b)的化合物(850mg,2mmol)，二異丙基乙胺(400mg,3mmol),D,L-甲基-α-溴丙酸酯(600mg,＞3mmol)和催化量的碘化四丁銨(12mg)溶于DMF(10mL)中，并在攪拌下加熱至90℃20小時。濃縮混合物，將殘余物溶于乙酸乙酯中，然后用稀鹽酸、5％碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)和濃縮。將殘余物溶于乙酸乙酯中并色譜分離(硅膠，40％乙酸乙酯∶己烷)，得到標題化合物(800mg,70％):MS(ES)m/e 513[M+H]+。b)甲基(R,S)-8-羧基-2,3,4,5-四氫-2-甲基-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因除了用實施例42(a)的化合物代替實施例1(f)的化合物外，使用實施例1(g)的方法，得到標題化合物(290mg,54％):MS(ES)m/e 325[M+H]+.分析(C19H20N2O3·0.5H2O)計算值C,68.45；H,6.35；N,8.40.測定值C,68.24；H,6.23；N,7.92。c)(R,S)-8-[[[4-[N-(芐氧基羰基)氨基亞氨基甲基]苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-2-甲基-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因除了用實施例42(b)的化合物代替實施例1(g)的化合物外，使用實施例1(h)的方法，得到標題化合物(120mg,39％):MS(ES)m/e 590[M+H]+。d)(R,S)-8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-2-甲基-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H,-1,4-苯并二吖庚因二氫氯化物除了用實施例42(c)的化合物代替實施例2(e)的化合物，使用實施例2(f)的方法，得到標題化合物(70mg,54％):MS(ES)m/e 456.2[M+H]+；1H NMR(400MHz,MeOD4)δ9.2(s,1H),8.7(s,1H),7.65(d,2H),7.36(d,2H),7.2-7.06(m,5H),6.77(d,1H),6.75(s,1H),6.47(d,1H),5.3(d,1H),4.77(m,1H),3.85(d,1H),3.75-3.6(m,2H),3.45(s,3H),2.67(m,2H),1.25(d,3H)；分析(C27H29N5O2·2HCl·1.5H2O)計算值C,58.38；H,6.07；N,12.60.測定值C,58.59；H,5.89；N,12.65。
實施例43制備(R,S)-8-[[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸乙酯a)(R,S)-8-羧基-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸乙酯將制備例24(e)(2.0g,4.77mmol)的化合物溶解于通過將鈉金屬(1.15g)溶于于無水乙醇(75mL)中而制備的溶液中。將反應混合物攪拌2小時，用在乙醚中的1.0M氯化氫酸化，濃縮混合物，將殘余物溶解于乙醇中，加入5％碳酸鈉直到所有的物質(zhì)溶解。然后乙酸酸化溶液，過濾生成的沉淀物，干燥，用乙醇結(jié)晶，得到標題化合物(0.6g,42％):1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.1-7.3(m,6H),7.05(s,2H),6.1(d,1H),5.4(d,1H),5.05(m,1H),4.0-4.15(m,3H),3.6(t,2H),2.8(dd,1H),2.7(m,2H),2.6(dd,1H),1.7(t,3H)。b)(R,S)-8[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸乙酯除了用實施例43(a)的化合物代替實施例1(g)的化合物，使用實施例1(h)和2(f)的方法，得到標題化合物(0.07g,50％):1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.2(s,2H),9.0(s,2H),7.7(d,2H),7.4(d,2H),7.1-7.25(m,6H),6.8(d,1H),6.75(s,1H),6.25(d,1H),6.0(d,1H),5.3(d,1H),5.0(m,1H),4.1(q,2H),3.9(d,1H),3.55(m,2H),3.4(s,3H),2.8(dd,1H),2.55-2.7(m,3H),1.2(t,3H)；MS(ES)m/e 528.4[M+H]+。
實施例44制備(R,S)-[[8-[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酰胺a)8-[[[4-[N-(芐氧基羰基)-氨基亞氨基甲基]苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酰胺將制備25(c)的化合物(400mg,0.61mmol)溶于甲醇(50mL)中，混合物在冰浴中冷卻并用氨飽和。塞緊燒瓶并將其在冰箱中放置5天。濃縮溶液，用快速色譜法(硅膠，5％甲醇/水)提純殘余物，得到標題化合物(190mg,48％):MS(ES)m/e 633.2[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.7(d,J=8.5Hz,2H),7.45-7.05(m,12H),6.6(d,J=1.4Hz,1H),6.56(d,J=8.0Hz,1H),6.38(d,d,J=8.0,1.4Hz,1H),5.19(s,2H),5.18(d,J=16.8Hz,1H),4.88(m,1H),4.17(d,J=5.3Hz,1H),3.7(s,3H),3.65(m,2H),3.55(d,J=16.8Hz,1H),3.45(s,3H),2.9(d,d,J=16,6.9Hz,1H),2.7(m,2H),2.6(d,d,J=16,6.3Hz,1H)。b)8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酰胺三氟乙酸酯除了用實施例44(a)的化合物代替實施例2(e)的化合物外，使用實施例2(f)的方法，得到標題化合物(45mg,25％):MS(ES)m/e 499(M+H)+,497(M-H)-；1HNMR(400MHz,MeOD4)δ7.75(d,J=8.5Hz,2H),7.36(d,J=8.5Hz,2H),7.22-7.10(m,5H),6.77(d,J=7.8,1H),6.71(s.1H),6.48(d,J=7.8Hz,1H),5.31(d,J=16.8Hz,1H),5.04(m,1H),3.84(d,J=16.8Hz),3.68-3.5(m,2H),3.47(s,3H),2.88(d,d,J=16,6.9Hz,1H),2.68(m,2H),2.49(d,d,J=16,6.3Hz,1H)；分析(C28H30N6O31.5 TFA)計算值C,55.60；H,4.74；N,12.55.測定值C,55.52；H,4.90；N=12.47。
實施例45制備(R,S)-8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙醇a)(R,S)-8-[[[4-[N-(芐氧基羰基)-(氨基亞氨基甲基]苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙醇用硼氫化鈉(300mg,8mmol)、氯化鋰(255mg,6mmol)和無水乙醇(40mL)處理在THF(25mL)中的制備例25(c)的化合物(0.5g,0.77mmol)，將反應物攪拌4.5小時，用3N鹽酸中和，濃縮，用水和乙酸乙酯處理殘余物。有機相用鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)，濃縮和色譜分離(硅膠，3％甲醇/二氯甲烷)得到標題化合物(95mg,20％):MS(ES)m/e 620.2[M+H]+,618.2[M-H]-；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.65(d,2H；J=8.45),7.44-7.27(m,5H),7.20(d,2H；J=8.45),7.18-7.08(m,5H),6.60(m,2H),6.25(s,1H),5.21(d,2H),5.16(d,2H；J=16.8),4.50(m,1H),3.68-3.64(m,4H),3.55(d,2H；J=16.8),3.47(s,3H),2.72(m,2H),1.96(m,1H),1.85(m,1H)b)(R,S)-8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙醇二氫氯化物用10％載鈀碳(60mg)和濃鹽酸(0.1mL)處理在甲醇(10mL)中的實施例45(a)的化合物(80mg,0.12mmol)溶液，氫化(40psi)2小時，過濾和濃縮混合物，用乙酸乙酯研制殘余物，過濾得到標題化合物(58mg,86％)。MS(ES)m/e 486.2[M+H]+；1H NMR(400MHz,MeOD4)δ9.20(s,1H),8.66(s,1H),7.66(d,2H),7.36(d,2H),7.30-7.08(m,5H),6.75(d,1H),6.67(s,1H),6.40(d,1H),5.30(d,1H),4.78(m,1H),3.80(d,1H),3.76-3.60(m,4H),3.45(s,3H),2.70(m,2H),2.08(m,1H),1.80(m,1H).分析(C28H31N5O3.2HCl.1.5H2O)計算值C,57.44；H,5.76；N,11.96.測定值C,57.52；H,5.89；N,11.87。
實施例46制備(R,S)-8-[[2-[4-(吡啶基)乙基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙醇在室溫下將實施例32(a)的化合物(0.2g,0.4mmol)和硼氫化鈉(200mg,5.3mmol)在甲醇(40mL)中攪拌2小時。另外加硼氫化鈉(200mg,5.3mmol)，攪拌混合物一整夜，濃縮混合物，用水稀釋，用CH2Cl2萃取。濃縮有機相，用快速色譜法(硅膠，CH2Cl2/甲醇)提純殘余物，得到白色固體的標題化合物(37mg,20％)MS(ES)m/e 473.2[M+H]+。
實施例47制備(R,S)-8-[2-[4-(氨甲基)苯基]乙基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)2,3,4,5-四氫-8-羥甲基-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯將亞硫酰氯(50mL)加入到制備例24(e)的化合物(3.8g,10mmol)中，攪拌得到的懸浮液，加熱回流15分鐘，冷卻至室溫，然后濃縮。將殘余物溶于甲苯中并濃縮。殘余物溶于THF(50mL)中，在室溫下攪拌，用硼氫化鈉(2.0g,53mmol)處理，攪拌16小時。在0℃下用1N鹽酸急冷混合物，用乙酸乙酯萃取，用鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)和濃縮。用快速色譜法(硅膠，1％乙醇/氯仿)提純殘余物，得到標題化合物(1.71g,47％)。TLCRf 0.49(硅膠，5％甲醇/氯仿)；1H NMR(CDCl3)δ2.62(dd,1H),2.77(m,2H),2.97(dd,1H),3.27(brs,2H),3.68(m,3H),3.72(s,3H),4.51(s,2H),4.94(t,1H),5.24(d,J=16.5Hz,1H),6.56(s,1H),6.62(d,J=7.4,1H),6.80(d,J=7.7Hz,1H),7.20(m,5H)。b)8-甲?；?2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯將二氧化錳(2.8g,32mmol)加入到在CH2Cl2(50mL)中的實施例47(a)的化合物(1.60g,4.3mmol)中，得到的懸浮液在回流下攪拌16小時，通過Celite填料過濾，用CH2Cl2洗滌填料，濃縮濾液，用快速色譜法(硅膠，50％乙酸乙酯/正己烷)提純殘余物，得到標題化合物(0.71g,44％):TLCRf 0.67(硅膠，5％甲醇/氯仿)；1H NMR(CDCl3)δ2.68(dd,1H),2.81(dt,2H),3.0(dd,1H),3.72(m,3H),3.75(s,3H),5.0(t,1H),5.31(d,J=16.7Hz,1H),6.93(d,J=7.6Hz,1H),7.03(s,1H),7.11(d,7.8Hz,1H),7.19(m,5H),9.85(s,1H)。c)E/Z 8-[2-[4-(氰基)苯基]乙烯基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯用氫化鈉(74mg，油中的60％分散液，1.8mmol)處理在無水DMF(50mL)中的實施例47(b)的化合物(0.67g,1.8mmol)和(4-氰基芐基)三苯基氯化鏻(0.80g,1.9mmol)的溶液，并攪拌5小時。溶液混合物，將殘余物溶解于乙酸乙酯中，用鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)和濃縮。用快速色譜法(硅膠，5％乙酸乙酯/氯仿)提純殘余物，得到以E/Z烯烴異構體的(2∶3)混合物形式的標題化合物(693mg,81％)。進一步色譜分離(硅膠，40％乙酸乙酯/正己烷)得到純E和Z異構體。E異構體TLC Rf0.39(硅膠，40％乙酸乙酯/正己烷)；1H NMR(CDCl3)δ2.65(dd,12H),2.82(dt,2H),2.97(dd,1H),3.71(m,3H),3.71(s,3H),4.94(t,1H),5.23(d,J=16.5,1H),6.46(m,2H),6.52(d,J=12.3Hz,1H),6.61(d,J=12.3Hz,1H),6.71(d,J=8.1Hz,1H),7.21(m,5H),7.32(d,J=8.3,2H),7.5(d,J=8.3,2H)；MS(ES)m/e 466.2[M+H]+。Z異構體TLC Rf 0.33(硅膠，40％乙酸乙酯/正己烷)；1H NMR(CDCl3)δ2.71(dd,1H),2.82(dt,2H),3.03(dd,1H),3.70(m,3H),3.75(s,3H),4.97(t,1H),5.27(d,J=16.6Hz,1H),6.76(s,1H),6.85(s,2H),7.02(d,J=4.2,2H),7.18(m,5H),7.54(d,J=8.4,2H),7.63(d,J=8.4,2H)；MS(ES)m/e 466.2[M+H]+。d)8-[2-[4-(氨甲基)苯基]乙基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯將實施例47(c)的化合物(693mg,1.5mmol),10％載鈀碳(1g)和乙酸(100mL)的混合物氫化(50psi)5小時。過濾混合物，濃縮濾液，得到標題化合物TLC Rf0.77(硅膠，4∶1∶1正丁醇∶乙酸∶水)，HPLC k′2.5(PRP-1,50％AN/W-TFA，在220nm下UV檢測)。e)8-[2-[4-(氨甲基)苯基]乙基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸將實施例47(d)的化合物溶于20％乙酸中，并回流72小時，濃縮混合物，用HPLC(PRP-1,35％AN/W-TFA)提純，得到標題化合物TLC Rf 0.55(硅膠，4∶1∶1正丁醇∶HOAc∶水)，Rf 0.59(硅膠，15∶3∶12∶10正丁醇，乙酸，水，吡啶)；MS(ES)458.2(M+H)+；HPLC k′3.7(PRP-1,35％AN/W-TFA；分析(C28H31N3O3·CF3CO2H·H2O)計算值C,46.98；H,4.14；N,4.63.測定值C,46.84；H,3.96；N,4.80。
實施例48制備7-[3-(4-吡啶基)丙氧基]-2-(2-苯乙基)-3-氧代-2,3,4,5-四氫-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸a)N-(2-苯乙基)-4-硝基鄰苯二甲酰亞胺用Dean-Stark分水器將4-硝基鄰苯二甲酸酐(18g,93.3mmol)和苯乙胺(11.5g,95mmol)在甲苯(250mL)中的混合物加熱至回流以除去水。2.5小時后，濃縮混合物得到固體殘余物，研制和過濾殘余物得到標題化合物(24.5g,89％):mp142-3℃。b)N-(2-苯乙基)-4-甲氧基鄰苯二甲酰亞胺用甲醇鈉(3.6g,0.066mol)分批處理在0℃的DMF(85mL)中的實施例48(a)的化合物(18g,0.06mol)的攪拌溶液。在室溫下攪拌黑褐色混合物3.5小時，用冰水急冷，用乙酸乙酯萃取，干燥(硫酸鎂)和濃縮，用乙醚研制得到標題化合物(10.9g,64％):mp112-4℃；MS(ES)m/e 282[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.72(d,J=8.25Hz,1H),7.25-7.30(m,6H),7.14(dd,J=2.30,8.25Hz,1H),3.9(s,3H),3.89(t,J=7.87Hz,2H),2.99(t,J=7.87Hz,2H)。c)2-羥甲基-4-甲氧基-N-(2-苯乙基)-1-苯甲酰胺用硼氫化鈉(12g,0.3mmol)分批處理在異丙醇(300mL)和水(60mL)中的實施例48(b)的化合物(15g,0.05mol)的溶液。3.5小時后，混合物濃縮至原體積的一半，用5％碳酸氫鈉溶液急冷，用乙酸乙酯萃取，干燥(硫酸鈉)，濃縮至小體積量，過濾得到標題化合物(10g,67％)；mp154-6℃；MS m/e 286[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.39(d,J=8.25Hz,1H),7.12-7.28(m,5H),6.81(d,J=2.3Hz,1H),7.35(dd,J=2.30,8.25Hz,1H),4.46(s,2H),3.76(s,3H),3.61(q,J=7.87Hz,2H),2.89(t,J=7.87Hz,2H)。d)2-羥甲基-4-甲氧基-[N-(2-苯乙基)]芐胺在0.5小時內(nèi)將在THF(250mL)中的實施例48(c)的化合物(25g,0.088mol)的懸浮液加入到在室溫下的甲硼烷(800mL,1M在THF中，0.8mol)溶液中。將混合物加熱回流12小時，冷卻并用1N鹽酸(150mL)處理，加熱混合物1.5小時直到氫氣停止放出，在冷的狀態(tài)下堿化，用乙酸乙酯萃取，干燥(硫酸鈉)和濃縮有機相得到標題化合物(24g,100％):MS m/e 272.2[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.08-7.29(m,5H),6.90(d,J=2.62Hz,1H),6.73(dd,J=2.62,8.29Hz,1H),4.58(s,2H),3.83(s,2H),3.77(s,3H),3.10(t,J=6.78Hz,2H),2.89(t,J=6.78Hz,2H)。e)2-羥甲基-4-甲氧基-[N-(2-苯乙基)-N-(叔丁氧基羰基)]芐胺在室溫下將實施例48(d)的化合物(23g,0.085mol)，碳酸氫二叔丁酯(19.3g,0.089mmol)和三乙胺(12.3mL,0.089mmol)在CH2Cl2(250mL)中的混合物攪拌18小時，濃縮并與CH2Cl2共沸兩次。MS(ES)m/e 372.2[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.13-7.28(m,5H),6.90(d,J=2.53Hz,1H),6.79(dd,J=2.53,8.29Hz,1H),4.60(bs,2H),4.43(bs,2H),3.43(s,3H),3.36(t,J=7.90Hz,2H),2.72(t,J=7.90Hz,2H)。f)5-甲氧基-2-[N-(2-苯乙基)-N-(叔丁氧基羰基)氨甲基]苯甲醛在室溫下將實施例48(e)的化合物和MnO2(75g,0.86mol)在CH2Cl2(275mL)中的懸浮液攪拌18小時，過濾反應混合物并濃縮得到標題化合物(20g,70％):MS m/e 370.2[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.16(s,1H),7.34(d,J=2.14Hz,1H),7.07-7.27(m,7H),4.79(bs,2H),3.81(s,3H),3.32(bt,2H),2.75(bt,2H),1.46(s,9H)。g)2-[5-甲氧基-2-[N-(2-苯乙基)-N-(叔丁氧基羰基)氨甲基]苯基]-5-氧代-四氫-3-呋喃甲酸在0℃下將三乙胺(28mL,0.2mol)逐滴加到氯化鋅(27g,0.2mol；在減壓下火焰干燥)，琥珀酸酐(20g,0.2mol)和實施例48(f)的化合物(20g,0.05mol)在CH2Cl2(150mL)中的懸浮液中。將混合物攪拌18小時，用CH2Cl2(100mL)稀釋，用冷1N鹽酸洗滌，干燥(硫酸鈉)和濃縮。用乙醚/CH2Cl2(75mL,2∶1)研制殘余物并過濾，濃縮濾液得到標題化合物(23g,87％)。h)反-3a,5,6,10b-四氫-9-甲氧基-5-(2-苯乙基)-2H-呋喃[3,2-d][2]苯并吖庚因-2,4-(3H)-二酮在室溫下將在CH2Cl2(150mL)中的實施例48(g)的化合物(23g,0.05mol)和氯化氫(200mL,4M在二噁烷中，0.8mol)的混合物攪拌18小時，濃縮得到2-[5-甲氧基-2-[N-(2-苯乙基)氨甲基]苯基]-5-氧代-四氫-3-呋喃甲酸的淺灰色固體(18g,97％):MS(ES)m/e 370.2[M+H]+。
將該固體，三乙胺(14mL,0.1mol)和苯并三唑-1-氧基-三(二甲基氨基)六氟磷酸鏻(22g,0.05mol)溶解于CH2Cl2(400mL)中并在室溫下攪拌一整夜。濃縮混合物，用快速柱色譜法(硅膠，0.2％甲醇/CH2Cl2)提純殘余物，得到標題化合物(9.5g,55％):MS(ES)m/e 352.2[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.12-7.16(m,3H),6.97-7.00(m,3H),6.91-6.94(d,J=8.47Hz,1H),6.79(dd,J=2.75,8.47Hz,1H),5.01(d,J=17.26Hz,1H),4.92(d,J=11.48Hz,1H),4.07(dt,J=7.82Hz,J=13.57Hz,1H),3.92(d,J=17.26Hz,1H),3.85(m,1H),3.79(s,3H),3.52(m,1H),3.25(dd,J=17.61 Hz,J=11.76,1H),2.78(m,2H),2.65(dd,J=17.26 Hz,J=7.26Hz,1H)。i)7-甲氧基-2-(2-苯乙基)-3-氧代-2,3,4,5-四氫-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸乙酯用氫氧化鈀(120mg)處理在3N鹽酸(15mL)和乙醇(50mL)中實施例48(h)的化合物(0.123g,0.35mmol)的溶液，并氫化(50psi)4小時。過濾混合物，濃縮濾液，殘余物與乙醇和甲苯共沸，將殘余物溶于乙醇(75mL)中，并在4M氯化氫/二噁烷(2mL)存在下加熱回流2小時，濃縮溶液得到標題化合物(0.11g,83％):MS(ES)m/e 382[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.08-7.26(m,5H),6.90(d,J=8.31Hz,1H),6.63(dd,J=2.41,8.28Hz,1H),6.60(d,J=2.41Hz,1H),5.11(d,J=16.47Hz,1H),4.16(q,J=7.10Hz,2H),3.76(s,3H),3.72(d,J=16.47Hz,1H),3.63(m,3H),2.97(m,2H),2.82(m,1H),2.75(t,J=7.30Hz,2H),1.27(t,J=7.10Hz,3H)。j)7-羥基-2-(2-苯乙基)-3-氧代-2,3,4,5-四氫-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸乙酯將氯化鋁(0.2g,1.5mmol)加入到在0℃下的在CH2Cl2(20mL)中的實施例48(i)的化合物(0.11g,0.29mmol)和乙硫醇(1mL,13.5mmol)的溶液中，將混合物升溫至室溫1小時，用CH2Cl2稀釋，用冷的3N鹽酸洗滌，干燥(硫酸鈉)和濃縮，得到標題化合物(0.08g,74％):MS(ES)m/e368.2[M+H]+。k)7-[3-(4-吡啶基)丙氧基]-2-(2-苯乙基)-3-氧代-2,3,4,5-四氫-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸乙酯將實施例48(j)的化合物(20mg,0.05mmol),3-(4-呲啶基)丙基氯氫氯化物(50mg,0.2mmol)，碘化鈉(3mg)和氫化鈉(12mg,0.5mmol)的混合物在90℃下加熱18小時?；旌衔镉帽崩?，用乙酸乙酯萃取，干燥(硫酸鈉)和濃縮得到標題化合物(0.01g,42％):MS(ES)m/e486[M+H]+。1)7-[3-(4-吡啶基)丙氧基]-2-(2-苯乙基)-3-氧代-2,3,4,5-四氫-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸在室溫下將在甲醇中的實施例48(k)的化合物和1N氫氧化鈉溶液的混合物攪拌5小時，用1N鹽酸酸化得到標題化合物。
實施例49制備7-[3-(4-哌啶基)丙氧基]-2-(2-苯乙基)-3-氧代-2,3,4,5-四氫-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸除用實施例48(1)的化合物代替實施例9(a)的化合物外，使用實施例34的方法，得到該標題化合物。
實施例50制備(R,S)-8-[[[3-(氨甲基)苯基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R,S)-8-[[[3-(氨甲基)苯基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯除用3-[N-(叔丁氧基羰基)氨甲基]苯胺代替制備例4(b)的化合物外，使用實施例13(a)和(b)的方法，得到該標題化合物。1H NMR(CD3OD,250MHz)δ2.60-2.73(m,3H),2.95(dd,1H,J=9.16Hz),3.50-3.83(m,2H),3.70(s,3H),3.91(d,1H,J=17Hz),4.90-5.20(m,3H),5.43(d,1H,J=17Hz),6.93-7.93(m,12H)。b)(R,S)-8-[[[3-(氨甲基)苯基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸除用實施例50(a)的化合物代替實施例1(i)的化合物外，使用實施例1(j)的方法，得到該標題化合物(85mg)。MS(ES)m/e 473[M+H]+；1H NMR(CD3OD,250MHz)δ2.60-3.10(m,4H),3.58-3.88(m,2H),3.95(d,J=17Hz,1Hx),4.67-5.04(m,2H),5.10-5.20(m,1H),5.50(d,J=17Hz,1H),6.93-8.05(m,12H)；HPLC k′=2.61(PRP-1,30％ AN/W-TFA,在220nm下UV檢測)。
實施例51制備8-[1-[4-(4-吡啶基)哌嗪基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸除用1-(4-吡啶基)哌嗪代替N-甲基-2-(4-吡啶基)乙胺外，使用實施例3 2的方法，得到該標題化合物HPLC RT16.6分(YMC ODS-AQ,6×250mm,1.5ml/分，梯度,A:乙腈B:水-0.1％TFA，在20分鐘內(nèi)10-80％A，在220nm下UV檢測)。
實施例52制備(R,S)-8-[[[4-(氨甲基)-3-氯苯基]羰基]氨基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸除用制備例12(c)的化合物代替實施例7(b)中的制備1(b)的化合物外，使用實施例7(b)、13(b)和13(c)的方法，得到該標題化合物。MS(ES)m/e507[M+H]+；分析[C27H27ClN4O4·1.5(C2HF3O2)·H2O]計算值C,51.43；H,4.39；N,7.99；測定值C,51.36；H,4.29；N,7.90.1H NMR(DMSO-d6,250MHz)δ2.51-2.60(m,2H),2.65-2.70(m,2H),3.45-3.55(m,2H),3.85(d,J=17Hz,1H),4.15(s,2H),4.95-5.00(m,1H),5.30(d,J=17Hz,1H),5.85(s,1H),6.70-8.05(m,13H),8.20-8.30(m,2H)。
實施例53制備2-[3-(4-哌啶基)丙氧基]-7-氧代-6,7,8,9-四氫-5H-苯并環(huán)庚烯-6-乙酸；和3-[3-(4-哌啶基)丙氧基]-7-氧代-6,7,8,9-四氫-5H-苯并環(huán)庚烯-6-乙酸a)2-甲氧基-7-氧代-6,7,8,9-四氫-5H-苯并環(huán)庚烯-6-乙酸甲酯，和3-甲氧基-7-氧代-6,7,8,9-四氫-5H-苯并環(huán)庚烯-6-乙酸甲酯除用2-甲氧基-苯并環(huán)庚酮[J.Org.Chem.,47,5201(1982)]代替苯并環(huán)庚酮外，使用J.Org.Chem.,57,1429(1992)的一般方法，并通過色譜來分離所得異構體的混合物，得到該標題化合物。b)2-[3-(4-哌啶基)丙氧基]-7-氧代-6,7,8,9-四氫-5H-苯并環(huán)庚烯-6-乙酸；和3-[3-(4-哌啶基)丙氧基]-7-氧代-6,7,8,9-四氫-5 H-苯并環(huán)庚烯-6-乙酸除用實施例51(a)的每種化合物代替實施例48(i)的化合物外，使用實施例48的方法，得到該標題化合物。
實施例54制備(R,S)-8-[[[2-[4-(2-氨基吡啶基)乙基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸除用制備例13(j)的化合物代替組胺和用苯并三唑-1基氧基三(二甲氨基)鏻六氟磷酸鹽代替1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽外，使用實施例27(a)和實施例24(b)的方法，得到該標題化合物。MS(ES)m/e 488.2[M+H]+；分析((C27H29N5O4·1.5CF3CO2H·H2O)計算值C,53.35；H,4.56；N,10.35.測定值C,53.25；H,4.84；N,10.35.；HPLC k′3.88(PRP-1,25％AN/W-TFA)。
實施例55制備(R,S)-2,3,4,5-四氫-8-[[[2-[2-(羥基)吡啶-4-基]乙基]氨基]羰基]-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸除用制備例14(b)的化合物代替制備例13(j)的化合物外，使用實施例54的方法，得到該標題化合物。MS(ES)m/e 489.4[M+H]+；分析(C27H28N4O5·1.125H2O)計算值C,63.74；H,5.74；N,10.71.測定值C,63.74；H,5.99；N,11.01.；HPLC k′3.70(PRP-1,25％AN/W-TFA)。
實施例56制備(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[[[4-(三甲基銨)丁基]氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸THF(5ml)中的實施例33(a)化合物(92mg,0.19mmol)用碘代甲烷(14.3ml,2.0mmol)處理，并且該反應混合物被加熱至回流保持16小時。過濾收集形成的白色固體并用冷乙醚洗滌。固體物用1N鹽酸處理并凍干，得到標題化合物(39mg,41％)。MS(ES)m/e 481[M+H]+；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.06(d,1H),6.90-7.25(m,8H),5.44(d,1H),5.09(t,1H),3.54-3.90(m,4H),3.20-3.45(m,8H),3.13(s,9H),2,93(dd,1H),2.68-2.79(m,2H),2.53-2.65(m,1H),1.78-1.90(m,2H),1.66(t,2H)。
實施例57制備(R,S)-8-[4-(氨甲基)苯氧基甲基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R,S)-2,3,4,5-四氫-8-羥甲基-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯(R,S)-8-羧基-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯(3g,7.8mmol)溶于無水THF(20ml)中，并于-5℃用三乙胺(1.14ml,8.19mmol)和氯甲酸乙酯(775ml,8.11mmol)處理。反應物攪拌1小時并過濾。濾液冷至0℃，并用在水(7.5ml)中的硼氫化鈉(651mg,17.23mmol)處理。使反應物升至室溫并攪拌4小時?；旌衔镉?N鹽酸酸化并用乙酸乙酯萃取。有機相用0.5N氫氧化鈉洗滌兩次并用鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)并濃縮，得到該標題化合物(2.31g)。1HNMR(250MHz)δ7.25-7.10(m,5H),7.09-6.78(m,1H),6.75-6.51(m,2H),5.26-5.25(m,1H),4.94-4.91(m,1H),4.46(s,2H),3.69(s,3H),3.66-3.61(m,3H),3.10-2.62(m,6H)。b)(R,S)-8-[4-(N-叔丁氧基羰基)-(氨甲基)苯氧基甲基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯實施例57(a)的化合物(100mg,0.24mmol)溶于無水THF(10ml)中，并于0℃用制備例15的化合物(122mg,0.546mmol)處理，接著用三苯膦(143mg,0.546mmol)和偶氮二羧酸二乙酯(86ml,0.546mmol)處理。混合物于室溫下攪拌48小時，濃縮并殘余物用快速色譜(硅膠，40％乙酸乙酯/己烷)提純，得到該標題化合物(150mg)。MS(ES)m/e 474[M+H]+。c)(R,S)-8-[4-(氨甲基)苯氧基甲基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯除用實施例57(b)的化合物代替實施例13(a)的化合物外，使用實施例13(b)的方法，得到該標題化合物(65mg)。MS(ES)m/e 574[M+H]+。d)(R,S)-8-[4-(氨甲基)苯氧基甲基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸實施例57(c)的化合物(65mg,0.137mmol)溶于THF(1ml)中，將其冷至0℃，并用1N氫氧化鋰(137ml)處理。使反應物溫升至室溫并攪拌15小時。反應物用乙酸酸化至PH5，并過濾出形成的晶體，得到該標題化合物(70mg)。用HPLC得到95％純度的化合物。MS(ES)m/e 460[M+H]+。
實施例58制備(R,S)-8-[[4-(2-氨乙基)哌啶-1-基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R,S)-8-[[4-[(N-叔丁氧基羰基)-(2-氨乙基)]哌啶-1-基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯除用制備例16(b)的化合物代替實施例1(g)的化合物外，使用實施例1(h)的方法，得到該標題化合物(657mg,37％)。1H NMR(90MHz,CDCl3)δ7.40-7.08(m,5H),6.95-6.50(m,3H),5.50-4.40(m,5H),4.00-2.43(m,14H),3.73(s,3H),1.90-1.00(m,5H),1.43(s,9H)。b)(R,S)-8-[[4-(2-氨乙基)哌啶-1-基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸除用實施例58(a)的化合物代替實施例13(a)的化合物外，使用實施例13(b)和13(c)的方法，得到該標題化合物(160mg)。MS(ES)m/e 479[M+H]+；1H NMR(CD3OD,250MHz)δ7.30-7.08(m,5H),6.98(d,1H,J=7.6Hz),6.60-6.50(m,2H),5.47(d,1H,J=17Hz),5.15-5.08(m,1H),3.90-3.58(m,3H),3.89(d,1H,J=17Hz),3.18-2.55(m,9H),1.95-1.52(m,5H),1.35-1.08(m,2H)；HPLC k′2.43(PRP-1,25％AN/W-TFA，在220nm下UV檢測)；分析(C27H34N4O4·1.5TFA)計算值C,55.46；H,5.51；N,8.62，測定值C,55.19；H,5.68；N,8.58。
實施例59制備(R,S)-8-[[[4-(氨甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R,S)-8-[[[4-(氰基)苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯除用4-氰基-N-甲基苯胺代替實施例1(g)的化合物外，使用實施例1(h)的方法，得到該標題化合物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.52(d,J=8.6Hz,2H),7.05-7.30(m,7H),6.66(d,J=1.5Hz,1H),6.59(d,J=7.8Hz,1H),6.33(dd,J=7.8,1.5Hz,1H),5.19(d,J=16.7Hz,1H),4.93(t,J=6.5Hz,1H),4.13(brs,1H),3.68-3.79(m,1H),3.75(s,3H),3.58-3.67(m,1H),3.54(d,J=16.7Hz,1H),3.48(s,3H),2.95(dd,J=16.0,6.6Hz,1H),2.67-2.82(m,2H),2.62(dd,J=16.0,6.5Hz,1H)；IR(CH3Cl)3230-3580(br),2230,1731,1656,1503,1437,1375cm-1；MS(ES)m/e 497.2[M+H]+,993.4[2M+H]+。b)(R,S)-8-[[[4-(氨甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯實施例59(a)的化合物(0.125g,0.25mmol)和10％鈀/碳(0.25g)在冰醋酸(50ml)中的混合物在氫氣(47psi)中搖動5小時。反應混合物通過Celite過濾，濾液濃縮，得到二(乙酸酯)標題化合物(0.153g,99％)，其在沒有進-步提純的情況下使用。c)(R,S)-8-[[[4-(氨甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸實施例59(b)的化合物(0.15g,0.25mmol)在10％乙酸水溶液(25ml)中于110℃下攪拌一夜。加入1N鹽酸(4ml)并繼續(xù)另外加熱3小時，反應物冷卻、凍干，殘余物在反相制備HPLC(ODS,AN/W-TFA)上提純，得到該標題化合物。MS(ES)m/e 487.2[M+H]+。分析(C28H30N4O4·2C2HF3O2)計算值C,53.78；H,4.51；N,7.84.測定值C,53.69；H,4.79；N,7.76。
實施例60制備(R,S)-2,3,4,5-四氫-8-[[[2-[1-甲基-1,2,5,6-四氫吡啶-4-基]乙基]甲氨基]羰基]-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R,S)-2,3,4,5-四氫-8-[[[2-[1-甲基-1,2,5,6-四氫吡啶-4基]乙基]甲氨基]羰基]-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯除用制備例17(c)的化合物代替組胺外，使用實施例27(a)的方法，得到該標題化合物。MS(ES)m/e 519[M+H]+。b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-8-[[[2-[1-甲基-1,2,5,6-四氫吡啶-4-基]乙基]甲氨基]羰基]-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸除用實施例60(a)的化合物代替實施例1(i)的化合物外，使用實施例1(j)的方法，得到該標題化合物。HPLC RT 15.7分(YMC ODS-AQ,6×250mm,1.5ml/分，梯度，A乙腈B水-0.1％TFA，在20分鐘內(nèi)10-80％A，在220nm下UV檢測)；1H NMR(DMSO-d6/TFA,400MHz)δ9.6(brd,1H),7.25-7.15(m,5H),7.0(d,1H),6.49(s,1H),6.45(s,1H),5.5(s,1H),5.4(d,1H),5.0(m,1H),4.0(d,1H),3.75-3.05(brm,6H),2.9-2.16(brm,16H)；MS(ES)m/e 505[M+H]+。
實施例61制備(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[4-(哌啶-4-基)-1(E)-丁烯基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R,S)-2,3,4,5-四氫-8-羥甲基-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯(R,S)-8-羧基-1,2,3,4-四氫-3-氧代-4-(苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯(3.8g,10mmol)用亞硫酰氯(50ml)處理，并在攪拌的同時將所得懸浮液在氬氣氛中回流加熱15分鐘，冷卻至室溫并濃縮。殘余油狀物再溶于甲苯(25ml)中，濃縮并將殘余物溶于無水THF(50ml)中。該溶液在室溫下攪拌并以一份加入硼氫化鈉(2.0g,53mmol)。攪拌16小時后，反應物在0℃下用1N鹽酸小心地驟冷，用1N碳酸鈉堿化，用乙酸乙酯(150ml)萃取，用鹽水洗滌、干燥(硫酸鎂)和濃縮。用快速色譜(硅膠，1％甲醇/氯仿)提純，得到固體泡沫狀標題化合物(1.71g,47％)。TLC Rf=0.49(硅膠,5％甲醇/氯仿)；1H NMR(CDCl3)δ2.62(dd,1H),2.77(m,2H),2.97(dd,1H),3.27(brs,2H),3.68(m,3H),3.72(s,3H),4.51(s,2H),4.94(t,1H),5.24(d,J=16.5Hz,1H),6.56(s,1H),6.62(d,J=7.4,1H),6.80(d,J=7.7Hz,1H),7.20(m,5H)。b)(R,S)-8-溴甲基--2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯在氬氣氛中，于0℃攪拌下，向?qū)嵤├?1(a)的化合物(1.20g,3.3mmol)和四溴化碳(1.4g,4.2mmol)的無水THF(40ml)的溶液中以-份加入三苯膦(1.1g,4.2mmol)。10分鐘后，使反應物溫升至室溫并攪拌3小時。濃縮混合物，并殘余物用快速色譜(硅膠，50％乙酸乙酯/己烷)提純，得到該標題化合物(1.17g,83％)。TLC Rf 0.38(硅膠，40％乙酸乙酯/己烷)；1H NMR(CDCl3)δ1.26(1H,s),2.82(3H,m),3.11(1H,dd),3.71(2H,m),3.74(3H,s),3.83(1H,d,J=16.5Hz),4.37(2H,s),4.90(1H,t),5.13(1H,d,J=16.5Hz),6.82(2H,s),6.89(1H,d),7.1-7.28(6H,m)。c)(R,S)-[2-甲氧基羰基甲基-3-氧代-4-(2-苯乙基)-2,3,4,5-四氫-1H-1,4-苯并二吖庚因-8-基]甲基三苯基鏻溴化物向?qū)嵤├?1(b)的化合物(1.15g,2.67mmol)的無水THF(30ml)的溶液中加入三苯膦(0.71g,2.7mmol)。反應物回流4小時，冷至室溫，濃縮并用乙醚研制，過濾并在真空中干燥，得到該標題化合物(1.89g,100％)。1H NMR(CDCl3)δ2.01(1H,s),2.73(2H,m),2.90(1H,dd),3.08(1H,dd),3.54(1H,m),3.65(1H,m),3.70(3H,s),3.74(1H,d,J=16.7Hz),4.49(2H,dt),5.08(1H,d,J=15.5Hz),5.17(1H,t),6.40(1H,d),6.58(1H,d,J=11.4Hz),6.87(1H,s),7.18(5H,m),7.58-7.80(15H,m)。d)(R,S)-8-[4-[N-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基]-1-(E和Z)丁烯基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯在氬氣氛中，在攪拌的同時，向?qū)嵤├?1(c)的化合物(1g,1.44mmol)和制備例18的化合物(1.75mmol)的無水THF(30ml)的溶液中以-份加入在礦物油(58mg,1.44mmol)中的60％氫化鈉的分散體。攪拌16小時后，濃縮反應物。殘余物用快速色譜(硅膠，5％乙酸乙酯∶氯仿)提純，得到該標題化合物的混合物(0.717g,86％)。用HPLC(硅膠,40％乙酸乙酯/己烷)以約(1∶2)(Z∶E)的比例得到純烯烴異構體。E-異構體1H NMR(CDCl3)δ1.11(2H,m),1.43(4H,m),1.45(9H,s),1.68(2H,d,J=12.5Hz),2.20(2H,dd),2.67(2H,dt),2.72(1H,dd),2.81(1H,dd),3.72(3H,m),3.74(3H,s),4.08(2H,d,J=13.7Hz),4.90(1H,t),5.18(1H,d,J=16.5Hz),6.14(1H,dt,J反式=15.8Hz),6.24(1H,d,J反式=15.8Hz),6.67(1H,s),6.72(1H,dd,J=7.8Hz),6.80(1H,d,J=7.8Hz),7.20(5H,m)；MS(ES)m/e 576.2(M+H)+。e)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[4-(哌啶-4-基)-1(E)-丁烯基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸除用實施例61(d)的化合物代替實施例13(a)的化合物外，使用實施例13(b)和13(c)的方法，得到該標題化合物MS(ES)m/e 462.2[M+H]+；分析(C28H35N3O3·1.5CF3CO2H)計算值C,58.86；H,5.82；N,6.64.測定值C,58.68；H,5.84；N,6.32；HPLC k′4.07(PRP-1,35％AN/W-TFA)；1H NMR(CD3OD)δ1.38(2H,m),1.45(2H,m),1.61(1H,brs),1.95(2H,d,J=13.6Hz),2.22(2H,dd),2.61(1H,m),2.77(2H,m),2.91(3H,m),3.35(2H,m),3.67(2H,m),3.79(1H,d,J=16.8Hz),5.02(1H,dd),5.37(1H,d,J=16.5Hz),6.15(1H,dt),6.26(1H,d,J=15.9Hz),6.58(1H,s),6.60(1H,d,J=7.8Hz),6.81(1H,d,J=7.8Hz),7.17(5H,m)。
實施例62制備(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[4-(哌啶-4-基)-1(Z)-丁烯基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R,S)-8-[4-[N-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基]-1(Z)-丁烯基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯色譜分離實施例61(d)的混合物來制備標題化合物。Z-異構體MS(ES)m/e 462.2[M+H]+；分析(C28H35N3O3·1.5CF3CO2H·0.5H2O)計算值C,57.83；H,5.73；N,6.27.測定值C,58.03；H,5.89；N,6.55.；HPLC k′4.98(PRP-1,35％CH3CN/水/0.1％TFA)；1H NMR(CD3OD)δ1.3(2H,m),1.41(2H,dd),1.58(1H,brs),1.82(2H,d,J=13.1Hz),2.34(2H,m),2.60(1H,m),2.76(2H,m),2.88(3H,m),3.29(3H,m),3.69(2H,m),3.81(1H,d,J=16.9Hz),5.04(1H,m),5.40(1H,d,J=16.6Hz),5.58(1H,dt),6.31(1H,d,J=11.6Hz),6.48(1H,d,J=7.9Hz),6.50(1H,s),6.85(1H,d,J=7.6Hz),7.18(5H,m)。b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[4-(哌啶-4-基)-1(Z)-丁烯基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸除用實施例62(a)的化合物代替外，使用與實施例61(e)中的方法相同的方法制備該標題化合物。1H NMR(CDCl3)δ1.08(2H,m),1.41(4H,m),1.45(9H,s),1.62(2H,d,J=12.9Hz),2.31(2H,dd),2.64(2H,dt),2.72(1H,dd),2.82(2H,dt),3.03(1H,dd),3.73(3H,m),3.75(3H,s),4.06(2H,d,J=13.2Hz),4.93(1H,t),5.22(1H,d,J=16.5Hz),5.59(1H,dt,J順式=11.6Hz),6.27(1H,d,J順式=11.7Hz),6.55(1H,s),6.63(1H,d,J=7.7Hz),6.82(1H,d,J=7.7Hz),7.20(5H,m)；MS(ES)m/e 576.2(M+H)+。
實施例63制備(R,S)-8-[2(E)-[4-(氨甲基)苯基]乙烯基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R,S)-8-[2(E和Z)-[4-(N-叔丁氧基羰基)(氨甲基)苯基]乙烯基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯除用制備例19的化合物代替制備例18的化合物外，使用實施例61(d)的方法，以約(2∶3)(Z∶E)的比例得到該標題化合物。E-異構體1H NMR(CDCl3)δ1.47(9H,s),2.72(1H,dd),2.83(2H,dt),3.04(1H,dd),3.73(3H,m),3.75(3H,s),4.32(2H,brs),4.85(1H,brs),4.95(1H,t),5.24(1H,d,J=16.5Hz),6.77(1H,s),6.83(2H,2d),6.92(1H,d,J反式=16.5Hz),7.01(1H,d,J反式=16.5Hz),7.2(7H,m),7.43(2H,d,J=8.2Hz)；MS(DCI)m/e 570.5(M+H)+。Z異構體1H NMR(CDCl3)δ1.46(9H,s),2.66(1H,dd),2.82(2H,m),2.98(1H,dd),3.70(3H,m),3.74(3H,s),4.28(2H,brs),4.87(1H,brs),4.90(1H,t),5.20(1H,d,J=16.5Hz),6.43(1H,d,J順式=12.2Hz),6.49(1H,s),6.53(1H,d,J順式=11.8Hz),6.55(1H,d,J=6.2Hz),6.69(1H,d,J=7.8Hz),7.20(9H,m)；MS(DCI)m/e 570.5(M+H)+。b)(R,S)-8-[2(E)-[4-(氨甲基)苯基]乙烯基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸除用實施例63(a)的E異構體代替實施例61(d)的化合物外，使用實施例61(e)的方法，得到該標題化合物。MS(ES)m/e456.2[M+H]+；分析(C28H35N3O3·1.5CF3CO2H)計算值C,59.36；H,5.03；N,6.64.測定值C,59.42；H,4.91；N,6.71；HPLC k′3.34(PRP-1,35％CH3CN/水/0.1％TFA)；1H NMR(CD3OD)δ2.64(1H,dd),2.78(2H,m),2.93(1H,dd),3.70(2H,m),3.84(1H,d,J=16.8Hz),4.91(2H,s),5.07(1H,m),5.42(1H,d,J=16.4Hz),6.77(1H,s),6.81(1H,d,J=7.5Hz),6.91(1H,d,J=7.5Hz),7.08(2H,s),7.18(5H,m),7.42(2H,d,J=7.7Hz),7.59(2H,d,J=7.9Hz)。
實施例64(R,S)-8-[2(Z)-[4-(氨甲基)苯基]乙烯基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸除用實施例63(a)的Z異構體代替實施例61(d)的化合物外，使用實施例61(e)的方法，得到該標題化合物。MS(ES)m/e462.2[M+H]+；分析(C28H35N3O3·1.75CF3CO2H)計算值C,57.53；H,4.67；N,6.38.測定值C,57.75；H,4.73；N,6.41.；HPLC k′4.33(PRP-1,35％CH3CN/水/0.1％TFA)；1H NMR(CD3OD)δ2.59(1H,dd),2.76(2H,m),2.88(1H,dd),3.69(2H,m),3.78(1H,d,J=16.8Hz),4.02(2H,s),5.00(1H,dd),5.35(1H,d,J=16.6Hz),6.39(1H,dd),6.47(1H,s),6.54(2H,s),6.73(1H,d,J=7.8Hz),7.17(5H,m),7.27(4H,2d)。
實施例65制備(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-7-[[4-(吡啶-4-基)哌嗪-1-基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-7-[[4-(吡啶-4-基)哌嗪-1-基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯除用1-(吡啶-4-基)哌嗪代替N-甲基-2-(4-吡啶基)乙胺外，使用實施例32(a)的方法，得到該標題化合物。HPLCRT 16.3分(YMC ODS-AQ,6×250mm,1.5ml/分，梯度，A乙腈B水-0.1％TFA，在20分鐘內(nèi)10-80％A，在220nm下UV檢測)；MS(ES)m/e 528[M+H]+。b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-7-[[4-(吡啶-4-基)哌嗪-1-基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸除用實施例65(a)的化合物代替實施例1(i)的化合物外，使用實施例1(j)的方法，得到該標題化合物。HPLC RT 14.6分(YMC ODS-AQ,6×250mm,1.5ml/分，梯度，A乙腈B水-0.1％TFA，在20分鐘內(nèi)10-80％A，在220nm下UV檢測)；1H NMR(DMSO-d6:TFA,250MHz)δ8.3(m,2H),7.19(m,9H),6.55(d,1H),5.4(d,1H),5.09(m,1H),4.0(d,1H),3.7(m,8H),2.8-2.4(brm,6H)；MS(ES)m/e 514[M+H]+。
實施例66制備(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸a)3-溴-4-甲基苯甲酸叔丁酯將在玻璃高壓氣體貯罐中的3-溴-4-甲基苯甲酸(10.75g,50mmol)的無水乙醚(50ml)混合物冷至-30℃，并鼓入異丁烯氣體，得到總反應物體積為約150ml。向攪拌的混合物中滴加三氟甲磺酸(0.22g,2.5mmol)，并密封該高壓氣體貯罐。使反應物溫升至室溫并攪拌6天。小心打開高壓氣體貯罐，緩慢加入5％碳酸氫鈉(50ml)。將該混合物攪拌15分鐘并加入乙醚(250ml)。分層，有機層用5％碳酸氫鈉(2×50ml)洗滌，然后用鹽水(50ml)洗滌。干燥(硫酸鎂)和濃縮，得到黃色油狀的標題化合物(12.88g,95％)。TLC Rf 0.68(甲苯)；1H NMR(250MHz,CDCl3)δ8.13(d,J=1.7Hz,1H),7.81(dd,J=7.9,1.7Hz,1H),7.27(d,J=7.9Hz,1H),2.44(s,3H),1.59(s,9H)；IR(CCl4)1715,1368,1297,1255,1170,1123,1115cm-1；MS(ES)m/e 273.0[M+H]+,271.0[M+H]+,214.8[M+H-C4H8]+。b)3-溴-4-(溴甲基)苯甲酸叔丁酯將在四氯化碳(100ml)中的實施例66(a)的化合物(5.25g,19.36mmol)、N-溴代琥珀酰亞胺(3.79g,21.3mol)和過氧化苯甲酰(0.23g,0.97mmol)的混合物加熱至回流。15小時后，該混合物冷卻、過濾，并濃縮濾液。在沒有提純的情況下使用所得物質(zhì)。TLC Rf 0.57(10％乙酸乙酯/己烷)。c)3-溴-4-[[N-叔丁氧基羰基-N-甲氧基羰基]氨基]甲基苯甲酸叔丁酯在無水二甲基甲酰胺(20ml)中，將實施例66(b)的化合物與甲基叔丁基亞氨基二羧酸酯鉀鹽(按照J.Chem.Soc.PerkinTrans.1,1088,(1988)來制備)(3.10g,14.52mmol)相混合，該混合物在60℃的油浴中升溫。20分鐘后，再加入甲基叔丁基亞氨基二羧酸酯鉀鹽(0.83g,3.89mmol)，該混合物另外攪拌5分鐘并濃縮。殘余物在水(100ml)和乙醚(100ml)之間分配，并分層。水層用乙醚萃取，合并的有機層干燥(硫酸鎂)并濃縮，得到棕色油狀物。色譜分離(硅膠，20％乙酸乙酯/己烷)得到在真空中固化的黃色油狀的標題化合物(5.21g,61％)。TLC Rf 0.49(20％乙酸乙酯/己烷)；1HNMR(250MHz,CDCl3)δ8.15(d,J=1.6Hz,1H),7.89(dd,J=8.1,1.6Hz,1H),7.16(d,J=8.1Hz,1H),4.95(s,2H),3.84(s,3H),1.59(s,9H),1.41(s,9H)；IR(四氯化碳)1756,1719,1369,1352,1297,1255,1222,1155,1113cm-1；MS(ES)m/e 446[M+H]+,444[M+H]+,390[M+H-C4H8]+,388[M+H-C4H8]+,334[M+H-2xC4H3]+,332[M+H-2xC4H8]+。d)3-溴-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基苯甲酸叔丁酯于室溫下，攪拌實施例66(c)的化合物(5.21g,11.73mmol)和1N氫氧化鈉(11.7ml,11.7mmol)的甲醇(105ml)的溶液。20分鐘后，反應物用水(250ml)稀釋并用乙醚萃取。合并的有機層用鹽水(100ml)洗滌，干燥(硫酸鎂)并濃縮。色譜分離(硅膠，15％乙酸乙酯/己烷)，得到緩慢部分固化的淺黃色油狀的標題化合物(4.29g,95％)。TLC Rf 0.41(15％乙酸乙酯/己烷)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.13(d,J=1.5Hz,1H),7.90(dd,J=8.0,1.5Hz,1H),7.42(d,J=8.0Hz,1H),5.07(m,1H),4.41(d,J=6.3Hz,2H),1.59(s,9H),1.45(s,9H)；IR(四氯化碳)3450,1719,1496,1394,1371,1300,1255,1172,1120cm-1；MS(ES)m/e 410.0[M+Ha]+,408.2[M+Ha]+,386.2[M+H]+,388[M+H]+,330.0[M+H-C4H8]+,332[M+H-C4H8]+,274[M+H-2xC4H8]+,276[M+H-2xC4H8]+。e)3-甲氧基羰基-4-[5-(叔丁氧基羰基)-2-[[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基]苯基]-3-苯甲酸甲酯將衣康酸二甲酯(607mg,3.84mmol)加入到實施例66(d)的化合物(1.14g,2.95mmol)、乙酸鈀(Ⅱ)(33mg,0.15mmol)、三鄰甲苯基膦(90mg,0.30mmol)和二異丙基乙基胺(1.03ml,5.90mmol)的丙腈(15ml)的溶液中。該溶液通過三抽空/氬沖洗循環(huán)進行脫氧，并在氬氣氛中加熱至回流。55分鐘后，反應物在冰/水中冷卻并注入到冷乙醚(150ml)中。放置10分鐘后，過濾混合物，濾墊用乙醚洗滌。濾液濃縮至黃色油狀物，其由甲苯濃縮以便使除去殘余的丙腈。殘余物進行色譜分離(硅膠，階梯梯度，15-30％乙酸乙酯/己烷)。全部產(chǎn)物具有Rf0.26(主產(chǎn)物)至Rf0.65(25％乙酸乙酯/己烷)，它們在一起被分離成為混濁的黃色油狀物。TLC Rf 0.26(主產(chǎn)物)，0.37,0.49,0.56,0.65(副產(chǎn)物)(25％乙酸乙酯/己烷)。f)(R,S)-3-甲氧基羰基-4-[5-(叔丁氧基羰基)-2-[[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基]苯基]丁酸甲酯于0℃下將10％鈀/碳(0.94g)小心加入到實施例66(e)的化合物(1.36g,2.93mmol)的乙酸乙酯-甲醇(1∶1)(29ml)的充分攪拌的溶液中。移出攪拌棒，混合物于室溫下在H2(50psi)中搖動。2小時后，混合物通過Celite過濾，濃縮濾液成為淺黃色殘余物。該殘余物溶于甲醇(29ml)中。加入氫氧化鈀(Ⅱ)/碳(濕的，Pearlman催化劑，0.59g)。混合物于室溫下在H2(50psi)中搖動3小時，然后通過Celite過濾。濾液濃縮成混濁的無色油狀物，其由甲苯再濃縮以除去殘余的甲醇。色譜分離(硅膠，30％乙酸乙酯/己烷)得到無色油狀的標題化合物(1.03g,76％)。TLC Rf0.35(25％乙酸乙酯/己烷)；1H NMR(250MHz,CDCl3)δ7.83(dd,J=8.0,1.6Hz,1H),7.73(d,J=1.6Hz,1H),7.36(d,J=8.0Hz,1H),4.90-5.05(m,1H),4.25-4.50(m,2H),3.66(s,3H),3.64(s,3H),3.03-3.20(m,2H),2.67-2.93(m,2H),2.48(dd,J=16.8,5.1Hz,1H),1.59(s,9H),1.45(s,9H)；IR(CCl4)3300-3480(br),1740,1715,1368,1157cm-1；MS(ES)m/e 953.4[2M+Ha]+,931.4[2M+H]+,488.0[M+Na]+,466.0[M+H]+,410.0[M+H-C4H8]+,354[M+H-2xC4H8]+,310[M+H-2xC4H8-CO2]+。g)(R,S)-3-甲氧基羰基-4-[5-羧基-2-(氨甲基)苯基]丁酸甲酯于0℃下在氬氣氛中將TFA(3.2ml)同時加入到實施例66(f)的化合物(296.5mg,0.64mmol)的無水二氯甲烷(3.2ml)的混濁溶液中。該溶液溫升至室溫，攪拌2小時并濃縮。殘余物由2∶1的1,2-二氯乙烷∶甲苯(10ml)濃縮一次，以便除去殘余的TFA。所得物質(zhì)在沒有提純的情況下使用。h)(R,S)-7-羧基-2,3,4,5-四氫-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯實施例66(g)的化合物溶于無水甲醇(3.2ml)中，溶液在氬氣氛中冷至0℃?？焖偌尤胄屡渲频?.0M甲醇鈉/甲醇(3.2ml,3.2mmol)，并移出冰浴。反應物經(jīng)10分鐘溫升至室溫并在氬氣氛中加熱至回流。2小時后，反應物在冰中冷卻，快速加入冷的1N鹽酸(3.4ml,3.4mmol)，在0℃下1小時后，混合物過濾。濾墊用水洗滌，然后用冷甲醇洗滌，得到無色粉末的標題化合物(149.2mg,84％)。TLC Rf0.38(10％甲醇/氯仿)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.08(類t,1H),7.65-7.72(m,2H),7.27(d,J=7.8Hz,1H),4.79(dd,J=16.4,4.9Hz,1H),4.01(dd,J=16.4,6.7Hz,1H),3.59(s,3H),3.50-3.61(m,1H),3.07(dd,J=17.2,3.6Hz,1H),2.87(dd,J=17.2,13.0Hz,1H),2.70(dd,J=16.7,8.7Hz,1H),2.45(dd,J=16.7,5.2Hz,1H)；MS(ES)m/e 278.0[M+H]+。i)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-7-[[[2-吡啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯于室溫下在氬氣氛中，將1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(90mg,0.47mmol)加入到在無水二甲基甲酰胺(2ml)中的實施例66(h)的化合物(107.6mg,0.39mmol)、N-甲基-2-(吡啶-4-基)乙胺(64mg,0.47mmol)、1-羥基苯并三唑(63mg,0.47mmol)和二異丙基乙基胺(0.14ml,0.78mmol)的溶液中。反應物攪拌23小時并濃縮。殘余物在乙酸乙酯和水之間分配。分層，有機相用水洗滌，合并的水層用乙酸乙酯反萃取，合并的有機層干燥(硫酸鈉)并濃縮，得到黃色油狀物。合并的水層濃縮并加入氯化鈉，所得混合物用氯仿完全萃取。合并的有機相干燥(硫酸鈉)并濃縮，得到與來自乙酸乙酯相的物質(zhì)進行混合的黃色油狀物。色譜分離(硅膠，10％甲醇/氯仿)得到無色油狀物的標題化合物(139.7mg,91％)。TLC Rf0.45(10％甲醇/氯仿)；1H NMR(400MHz,CDCl3)旋轉(zhuǎn)異構體混合物；δ8.41-8.63(m,2H),6.72-7.28(m,5H),6.53(t,J=6.0Hz,1H),4.83(dd,J=16.3,4.8Hz,1H),4.09(dd,J=16.3,6.5Hz,1H),3.45-3.88(m,3H),3.72(s,3H),2.70-3.25(m,8H),2.50(dd,J=16.9,6.1Hz,1H)；IR(氯仿)3400,1727,1660,1623cm-1；MS(ES)m/e 396.2[M+H]+。j)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯將氧化鉑(4mg)加入到實施例66(i)的化合物(139.7mg,0.35mmol)和1N鹽酸(0.35ml,0.35mmol)的甲醇(3.5ml)的溶液中，該混合物在H2(球壓)中快速攪拌。7小時后，反應物通過Celite過濾并濃縮，殘余物溶于甲醇(3.5ml)中。加入氧化鉑(4mg)，混合物在H2(球壓)中快速攪拌16.5小時。通過Celite過濾并濃縮，得到無色油狀物。該物質(zhì)在沒有提純的情況下使用。HPLC k′3.2(PRP-1,15％AN/W-TFA)。k)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸實施例66(j)的化合物溶于甲醇(12ml)中并冷至0℃。滴加1N氫氧化鈉(1.05ml,1.05mmol)，并使該溶液溫升至室溫。反應物于室溫下攪拌24小時并濃縮。殘余物由1∶1乙腈∶水(4ml)濃縮，以便除去甲醇，殘余物溶于1∶1乙腈∶水(4ml)中，并在冰中冷卻。加入TFA(0.27ml,3.5mmol)，反應物濃縮。殘余物用反相快速色譜(ODS,10-12.5％AN/W-TFA)提純。經(jīng)濃縮和凍干得到無色粉末狀的標題化合物(97.5mg,47％)。HPLC k′5.19(PRP-1,10％AN/W-TFA)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構體混合物；δ8.52-8.72(m,1H),8.15-8.43(m,1H),8.07(t,J=5.8Hz,1H),7.20(d,J=8.3Hz,1H),7.08-7.15(m,2H),4.77(dd,J=16.3,4.7Hz,1H),3.96(dd,J=16.3,6.7Hz,1H),2.70-3.55(m,12H),2.65(dd,J=16.8,8.4Hz,1H),2.34(dd,J=16.8,5.2Hz,1H),1.82-1.95(m,1H),1.02-1.62(m,6H)；MS(ES)m/e 388.2[M+H]+；分析(C21H29N3O4·1.75(CF3CO2H))計算值C,50.13；H,5.28；N,7.16.測定值C,50.20；H,5.21；N,7.21。
實施例67制備(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸a)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-7-[[[2-(吡啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯除用實施例1(g)的化合物代替(R,S)-8-羧基-1,2,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-3H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯外，使用實施例32(a)的方法，得到該標題化合物。HPLC RT 16.2分(YMC ODS-AQ,6×250mm,1.5ml/分，梯度，A乙腈B水-0.1％TFA，在20分鐘內(nèi)10-80％A，在220nm下UV檢測)。b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯；和(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-2-(環(huán)己基乙基)-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯除用實施例67(a)的化合物代替實施例32(a)的化合物外，使用實施例36(a)的方法，得到該標題化合物的混合物。2-(2-苯乙基)化合物MS(ES)m/e 506[M+H]+；HPLCRT 16.47分(YMC ODS-AQ,6×250mm,1.5ml/分，梯度，A乙腈B水-0.1％TFA，在20分鐘內(nèi)10-80％A，在220nm下UV檢測)。2-(2-環(huán)己基乙基)化合物MS(ES)m/e 511[M+H]+；HPLC RT 19.14分(YMC ODS-AQ,6×250mm,1.5ml/分，梯度，A乙腈B水-0.1％TFA，在20分鐘內(nèi)10-80％A，在220nm下UV檢測)。c)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸；和除用實施例67(b)的化合物代替實施例1(i)的化合物外，使用實施例1(j)的方法，得到該標題化合物，其是通過HPLC從2-乙基環(huán)己基化合物中分離出來的。HPLC RT 14.59分(YMC ODS-AQ,6×250mm,1.5ml/分，梯度，A乙腈B水-0.1％TFA，在20分鐘內(nèi)10-80％A，在220nm下UV檢測)；MS(ES)m/e 492[M+H]+。
實施例68(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-2-(環(huán)己基乙基)-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸該標題化合物是通過HPLC從實施例68(c)的反應混合物中分離出來的。HPLC RT 17.61分(YMC ODS-AQ,6×250mm,1.5ml/分，梯度，A乙腈B水-0.1％TFA，在20分鐘內(nèi)10-80％A，在220nm下UV檢測)；MS(ES)m/e 498[M+H]+。
實施例69制備(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-[4-(哌啶-4-基)丁基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R,S)-8-[4-[(N-叔丁氧基羰基)哌啶-4-基]丁基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯在氫氣(50psi)中，將在乙酸中的實施例63-64(c)的E/Z異構體和10％鈀/碳的混合物搖動4小時，以便得到該標題化合物。b)(R,S)-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-8-(哌啶-4-基)丁基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸除用實施例69(a)的化合物代替實施例13(a)的化合物外，使用實施例13(b)和13(c)的方法，得到該標題化合物。MS(ES)m/e 464.2[M+H]+；分析(C28H37N3O3·CF3CO2H·1.25H2O)計算值C,59.91；H,6.51；N,6.73.測定值C,60.04；H,6.80；N,7.00.；HPLC k′4.73(PRP-1,35％AN/W-TFA)；1H NMR(CD3OD)δ1.32(6H,m),1.57(3H,m),1.87(2H,d,J=14.0Hz),2.49(2H,t),2.61(1H,dd),2.75(2H,m),2.90(3H,m),3.30(2H,m),3.68(2H,m),3.80(1H,d,J=16.7Hz),5.02(1H,dd),5.37(1H,d,J=16.5Hz),6.41(1H,d,J=8.0Hz),6.42(1H,s),6.80(1H,d,J=8.0Hz),7.17(5H,m)。
實施例70制備8-[[4-(氨基亞氨基甲基)苯甲?；鵠氨基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-1H-2,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)α,α′-二鄰苯二甲酰亞氨基鄰二甲苯將在二甲基甲酰胺(500ml)中的α,α′-二溴鄰二甲苯(26g,98mmol)和鄰苯二甲酰亞胺鉀(54.7g,294mmol)的混合物回流18小時。該溶液冷至室溫，將其注入水中，過濾并在減壓下干燥濾餅，得到該標題化合物(35g,90％)。b)4-硝基-α,α′-二鄰苯二甲酰亞氨基鄰二甲苯向硝酸鉀(6.2g,61.2mmol)的濃硫酸(350ml)的冷溶液中分批加入實施例70(a)的化合物(22g,55.6mmol)。所得溶液溫升至室溫并攪拌18小時。將混合物小心注入到冰水中并過濾該混合物。濾餅用水洗滌并在減壓下干燥，得到該標題化合物(23.58g,96％)。c)1,2-二(氨甲基)-4-硝基苯向肼(26ml,535mmol)的乙醇(1000ml)的溶液中分批加入實施例70(b)的化合物(23.58g,53.5mmol)。溶液回流1小時。加入另外的肼(26ml,535mmol)，接著加入乙醇(500ml)。溶液于室溫下攪拌18小時，過濾并濃縮濾液。殘余物用氯仿(600ml)研制1小時，經(jīng)過濾和濃縮得到該標題化合物(9.42g,97％)。d)2,3,4,5-四氫-7-硝基-3-氧代-1H-2,4-苯并二吖庚因向?qū)嵤├?0(c)的化合物(9.42g,51.9mmol)的THF(500ml)的溶液中滴加溶于THF(250ml)中的1,1′羰基二咪唑(9.2g,56.8mmol)。所得混合物于室溫下攪拌6天，經(jīng)過濾和濃縮得到該標題化合物(7.7g,71％)。e)2,3,4,5-四氫-7-硝基-3-硫代-1H-2,4-苯并二吖庚因在氬氣氛中將在甲苯(100ml)中的由實施例70(d)的化合物(5.5g,26.6mmol)和Lawesson試劑(7.0g,17.3mmol)組成的多相溶液加熱至80℃保持1.5小時。該溶液冷卻并過濾，固體用(7∶3)二氯甲烷∶甲醇研制1小時，過濾并濃縮得到該標題化合物(4.3g,73％)。f)2,5-二氫-3-甲硫基-7-硝基-1H-2,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯；和2,5-二氫-3-甲硫基-8-硝基-1H-2,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯向?qū)嵤├?0(e)的化合物(2.2g,9.9mmol)的二甲基甲酰胺(50ml)的溶液中滴加溶于二甲基甲酰胺(5ml)中的碘代甲烷(0.614ml,9.9mmol)。該溶液攪拌1小時，并加入碳酸鉀(3.0g,21.8mmol)，接著加入溴代乙酸甲酯(0.934ml,9.9mmol)。該溶液攪拌18小時，過濾并濃縮得到殘余物，其在乙酸乙酯和水之間分配。濃縮有機層得到該標題化合物的混合物(2.26g,74％)。g)2,3,4,5-四氫-7-硝基-3-氧代-1H-2,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯；和2,3,4,5-四氫-8-硝基-3-氧代-1H-2,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯將實施例70(f)的化合物的混合物(2.26g,7.3mmol)溶于水/二噁烷(1∶1)(50ml)并回流18小時。濃縮溶液并用水(30ml)研制殘余物，經(jīng)過濾和減壓干燥得到該標題化合物的混合物(1.38g,68％)。h)8-氨基-2,3,4,5-四氫-3-氧代-1H-2,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯將實施例70(g)的化合物的混合物(470mg,1.7mmol)溶于(1∶1)甲醇∶二甲基甲酰胺(20ml)中。鼓入氬氣通過該系統(tǒng)并加入10％鈀/碳(80mg)，該混合物于氫氣(40psi)中搖動1.5小時。溶液通過Celite過濾并濃縮。殘余物經(jīng)色譜分離(硅膠，4％甲醇/二氯甲烷)得到該標題化合物(110mg,42％)。1H NMR(360MHz,DMSO d5)δ3.6-3.65(s,3H),4.0-4.1(m,4H),4.25-4.3(s,2H),5.7(s,2H),6.35-6.45(dd,1H),6.45-6.5(d,1H),6.6-6.65(t,1H),6.85-6.9(d,1H)；MS(ES)m/e 250.2[M+H]+；TLC Rf 0.60(9∶1二氯甲烷∶甲醇)。i)8-[[4-(N-芐氧基羰基)(氨基亞氨基甲基)苯甲?；鵠氨基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代--1H-2,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯除用實施例70(h)的化合物代替(R,S)-8-羧基-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯，用4-(芐氧基羰基脒基)苯甲酸代替N-甲基-2-(4-吡啶基)乙胺，和用二環(huán)己基碳化二亞胺代替1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽外，使用實施例32的方法，得到該標題化合物。j)8-[[4-(氨基亞氨基甲基)苯甲?；鵠氨基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-1H-2,4-苯并二吖庚因-2-乙酸除用實施例70(i)的化合物代替實施例1(h)的化合物外，使用實施例1(i)和1(j)的方法，得到該標題化合物。分析(C21H26N5O7.5)計算值C,53.84；H,5.59；N,14.95.測定值C,54.04；H,5.92；N,14.81；MS(ES)m/e 382.0[M+H]+。1H NMR(DMSO-d6,360MHz)δ2.5(s,3H),3.9-4.0(d,2H),4.2-4.3(d,2H),4.4-4.5(d,2H),6.5-6.6(m,1H),7.2-7.3(d,1H),7.6-8.1(m,10H)。
實施例71制備(R,S)-8-[[[2-[(2-氨基)吡啶-4-基]乙基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸除用制備例20(b)的化合物代替制備例13(j)的化合物外，使用實施例54的方法，并用快速色譜(YMC ODS-AQS-50,20-25％AN/W-TFA)提純產(chǎn)物，得到該標題化合物。MS(ES)m/e 502.2[M+H]+；HPLC k′4.92(PRP-1,25％AN/W-TFA)；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ2.65(1H,m),2.75(2H,m),2.84(1H,t),2.92(1H,m),2.99(3H,s),3.10(1H,s),3.63(2H,m),3.72(1H,m),3.79(1H,t),3.87(1H,d,J=16.8Hz),5.11(1H,2t),5.43(1H,d,J=15.6Hz),6.35,6.53(1H,2s),6.40,6.49(1H,2d,J=7.5Hz),6.46,6.88(1H,2d),6.61,6.89(1H,2s),6.94,6.97(1H,2d),7.17(5H,m),7.57,7.74(1H,2d,J=6.5Hz)。
實施例72制備(R,S)-7-[[[2-[(2-氨基)吡啶-4-基]乙基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸除用實施例1(g)的化合物代替(R,S)-8-羧基-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯外，使用實施例71的方法，得到該標題化合物。MS(ES)m/e 501.2[M+H]+；分析(C29H32N4O4·1.25CF3CO2H·0.5H2O)計算值C,57.97；H,5.22；N,8.60.測定值C,58.01；H,5.29；N,8.59.；HPLC k′3.42(PRP-1,25％AN/W-TFA)；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ2.46(1H,m),2.70(3H,m),2.83(2H,m),2.98(3H,s),3.02(1H,m),3.13(1H,s),3.57(1H,m),3.64(1H,m),3.81(3H,m),4.03(1H,d,J=16.7Hz),5.21(1H,d,J=16.7Hz),6.47-7.01(3H,m),7.01-7.22(7H,m),7.57,7.76(1H,2d)。
實施例73制備8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-2-苯并吖庚因-2-丙酸a)7-甲氧基-2-四氫萘酮肟將7-甲氧基-2-四氫萘酮(0.50g,2.8mmol)、羥胺鹽酸鹽(0.38g,5.6mmol)和碳酸氫鈉(0.47g,5.6mmol)在甲醇(20ml)中的混合物加熱至回流保持3小時，該混合物注入水(15ml)中并用氯仿萃取。合并有機相，其用鹽水洗滌并濃縮得到白色固體。由乙酸乙酯/己烷沉淀，得到粒狀固體的標題化合物(420mg,79％)。MS(ES)m/e 191[M+H]+。b)8-甲氧基-2,3,4,5-四氫-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因?qū)嵤├?3(a)的化合物(3.0g,15.5mmol)的多磷酸(30g)的攪拌懸浮液加熱至110℃保持10分鐘。黑色溶液冷至室溫，用碎冰(300ml)驟冷并乙酸乙酯萃取。合并有機萃取液，用鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)和濃縮，得到該標題化合物和8-甲氧基-2,3,4,5-四氫-2-氧代-1H-3-苯并吖庚因的混合物(2.63g,88％)。MS(ES)m/e 191[M+H]+。c)8-羥基-2,3,4,5-四氫-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因在氬氣氛中，向氯化鋁(8g,60mmol)的乙硫醇(20ml)的0℃懸浮液中以一份加入實施例73(b)的化合物(3.79g,19.8mmol)的二氯甲烷(40ml)的溶液，使該混合物逐漸溫升至室溫并連續(xù)攪拌18小時。混合物用冰(500ml)驟冷，用1N鹽酸酸化并用乙酸乙酯萃取。合并有機相，用鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)并濃縮。殘余物經(jīng)色譜分離(硅膠，0-4％甲醇/氯仿)得到8-羥基-2,3,4,5-四氫-2-氧代-1H-3-苯并吖庚因和該標題化合物(1.43g,42％)。MS(ES)m/e 177[M+H]+。d)8-(三氟甲基磺?；?氧基-2,3,4,5-四氫-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因于-30℃下攪拌在二氯甲烷(50ml)中的實施例73(c)的化合物(310mg,1.8mmol)，并在氬氣流中用2,6-二甲基吡啶(0.32ml,2.7mmol)、4-(二甲基氨基)吡啶(44mg,0.36mmol)和三氟甲磺酸酐(0.45ml,2.7mmol)處理。使反應物逐漸溫升至室溫并攪拌4小時。濃縮混合物，殘余物用乙醚研制并過濾，濾液用1N鹽酸和鹽水洗滌并濃縮，得到該標題化合物(220mg,40％)。MS(ES)m/e 309[M+H]+。e)8-芐氧基羰基-2,3,4,5-四氫-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因向火焰干燥三頸燒瓶中加入在二甲基甲酰胺(10ml)中的實施例73(d)的化合物(440mg,1.5mmol)、乙酸鈀(Ⅱ)(90mg,0.4mmol)、1,1′-二(二苯基膦基)二茂鐵(443mg,0.8mmol)和無水三乙胺(0.42ml,3.0mmol)。使一氧化碳通過該溶液鼓泡15分鐘，加入芐醇(1.55ml,15mmol)。然后，在一氧化碳球的供氣下將所得溶液加熱至70℃保持4小時。反應物冷至室溫，用乙酸乙酯稀釋，用1N鹽酸、水和鹽水萃取，干燥(硫酸鎂)并濃縮。所得固體經(jīng)色譜分離(硅膠，2％甲醇/氯仿)得到該標題化合物(290mg,91％)。MS(ES)m/e 295[M+H]+。f)8-芐氧基羰基-2,3,4,5-四氫-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-2-丙酸甲酯向?qū)嵤├?3(e)的化合物(290mg,0.98mmol)、丙烯酸甲酯(0.9ml,9.8mmol)和甲醇(5ml)的溶液中加入氫化鈉(24mg,0.98mmol)。所得溶液回流一夜并濃縮該混合物。殘余物經(jīng)色譜分離(硅膠，30％乙酸乙酯/己烷)得到該標題化合物(260mg,70％)。MS(ES)m/e 381[M+H]+。g)8-羧基-2,3,4,5-四氫-3-氧代-2-苯并吖庚因-2-丙酸甲酯在氫氣(50psi)中，將實施例73(f)的化合物(260mg,0.7mmol)、5％鈀/硫酸鋇(50mg)的乙醇(10ml)的懸浮液搖動4小時。所得懸浮液通過Celite過濾并濃縮濾液，由乙酸乙酯/己烷沉淀殘余物得到白色蠟狀的標題化合物(180mg,90％)。MS(ES)m/e 291[M+H]+。h)8-[[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-2-苯并吖庚因-2-丙酸除用實施例73(g)的化合物代替實施例1(g)的化合物外，使用實施例1(h)至1(j)的方法，得到該標題化合物。
實施例74制備7-[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]乙炔基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸a)7-[[(三氟甲基)磺?；鵠氧基]-2-(2-苯乙基)-3-氧代-2,3,4,5-四氫-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸乙酯在冰浴中攪拌實施例48(j)的化合物(360mg,1mmol)和N,N-二異丙基乙基胺(1ml)的二氯甲烷(8ml)的溶液并用三氟甲磺酸酐(0.25ml,1.2mmol)處理。該混合物攪拌30分鐘，使其溫升至室溫并攪拌4小時?；旌衔镉枚燃淄橄♂專来斡?N鹽酸、5％碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)并濃縮。殘余物經(jīng)色譜分離(硅膠，1％甲醇/二氯甲烷)得到琥珀油狀的標題化合物(0.35g,70％)。MS(ES)m/e 500[M+H]+,1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.2-7.12(m,3H),7.0-7.1(m,2H),6.96(s,3H),5.16-5.0(d,J=17Hz,1H),4.15(p,2H),3.9(m,1H),3.78-3.70(d,J=17Hz,1H),3.6(m,1H),3.0-2.9(m,2H),2.8-2.7(m,3H),2.4-2.3(q,1H),1.3(t,3H)。b)7-[(4-氰基苯基)乙炔基]-2-(2-苯乙基)-3-氧代-2,3,4,5-四氫-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸乙酯用二甲基甲酰胺中的4-氰基苯基乙炔[如Synthesis,627(1980)中所制備的]、氯化二(三苯基膦)鈀、碘化亞銅和三乙胺處理實施例74(a)的化合物，該混合物加熱并攪拌?；旌衔锢鋮s、稀釋和用乙酸乙酯萃取。有機相用稀鹽酸和水洗滌，干燥和濃縮得到該標題化合物。c)7-[4-(硫代氨基甲?；?苯基)乙炔基]-2-(2-苯乙基)-3-氧代-2,3,4,5-四氫-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸乙酯使用歐洲專利申請0502536A1的一般方法，用硫化氫氣流處理在吡啶三乙胺中的實施例74(b)的化合物并將其放置。濃縮混合物得到該標題化合物。d)7-[4-(甲基硫代亞氨基)苯基)乙炔基]-2-(2-苯乙基)-3-氧代-2,3,4,5-四氫-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸乙酯使用EP502536的一般方法，用丙酮中的碘代甲烷處理實施例74(c)的化合物，濃縮混合物得到該標題化合物。e)7-[4-(氨基亞氨基甲基)苯基)乙炔基]-2-(2-苯乙基)-3-氧代-2,3,4,5-四氫-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸乙酯使用EP502536的-般方法，用甲醇中的乙酸銨處理實施例74(d)的化合物并將混合物加熱至回流?；旌衔锢鋮s并濃縮得到該標題化合物。f)7-[[4-(氨基亞氨基甲基)苯基]乙炔基]-2-(2-苯乙基)-3-氧代-2,3,4,5-四氫-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸用甲醇中的稀氫氧化鈉然后用稀鹽酸處理實施例74(e)的化合物，得到該標題化合物。
實施例75制備7-[1-[4-(哌嗪-1-基)丁-1-炔基]]-2-(2-苯乙基)-3-氧代-2,3,4,5-四氫-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸a)7-[1-[4-[N-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基]丁-1-炔基]]-2-(2-苯乙基)-3-氧代-2,3,4,5-四氫-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸乙酯將在乙腈(10ml)中的實施例74(a)的化合物(0.3g,0.7mmol)、制備例21的化合物(190mg,0.8mmol)、三乙胺(3ml)、氯化二(三苯基膦)鈀(10mg,0.14mmol)和碘化亞銅(2.5mg,0.14mmol)的混合物加熱至回流保持20小時。混合物用水稀釋并用乙酸乙酯萃取。干燥(硫酸鎂)有機相，將其濃縮，殘余物用快速色譜(硅膠，2％甲醇/二氯甲烷)提純，得到該標題化合物(90mg,25％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.15-7.26(m,5H),7.10(s,1H),7.06(d,J=8Hz,1H),6.8(d,J=8Hz,1H),5.1(d,J=17Hz,1H),4.15(q,2H),3.8(m,2H),3.7(d,J=17Hz,1H),3.6(m,1H),3.5(s,4H),3.0(m,2H),2.8(m,1H),2.7(t,2H),2.6(m,2H),2.5(s,4H),2.4(q,1H),1.4(s,9H),1.3(t,3H)。b)7-[1-[4-(哌嗪-1-基)丁-1-炔基]]-2-(2-苯乙基)-3-氧代-2,3,4,5-四氫-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸乙酯實施例75(a)的化合物與二氯甲烷中的TFA一起攪拌?；旌衔镉盟礈?，干燥和濃縮，得到該標題化合物。c)7-[1-[4-(哌嗪-1-基)丁-1-炔基]]-2-(2-苯乙基)-3-氧代-2,3,4,5-四氫-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸實施例75(b)的化合物與甲醇中的稀氫氧化鈉水溶液一起攪拌，然后用稀鹽酸處理，得到該標題化合物。
實施例76制備(E)-2,5-二氧代-2,3,4,5-四氫-7-[[4-(哌啶-4-基)丁-1-烯基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)7-溴-2,5-二氧代-2,3,4,5-四氫-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸乙酯除用5-溴-2-硝基苯甲酰氯[如在Monatshefte fur Chemie,100,469(1969)中所制備的]代替3,4-二氯-2-硝基苯甲酰氯和用N-(2-乙氧基-2-氧代乙基)甘氨酸乙酯[如在Synthetic Communications,22,1249(1992)中所制備的]代替N-(5-乙氧基-5-氧代戊基)甘氨酸乙酯外，使用美國專利3,415,814(其中實施例1N和20)的一般方法，得到該標題化合物。b)7-羥甲基-2,5-二氧代-2,3,4,5-四氫-1H-1,4-苯并二吖庚因-4-乙酸乙酯使用Chemistry Letters,997(1985)的一般方法，用[(三甲基甲硅烷基氧基)甲基]三丁基錫處理實施例76(a)的化合物，得到該標題化合物。c)(E)-2,5-二氧代-2,3,4,5-四氫-7-[1-[4-(哌啶-4-基)丁-1-烯基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-4-乙酸除用實施例76(b)的化合物代替實施例61(a)的化合物外，使用實施例61(b)-61(e)的方法，得到該標題化合物。
實施例77制備2,5-二氧代-2,3,4,5-四氫-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-4-丙酸a)7-溴-2,5-二氧代-2,3,4,5-四氫-1H-1,4-苯并二吖庚因-4-丙酸乙酯除用5-溴-2-硝基苯甲酰氯[如Monatshefte fur Chemie,100,469(1969)中所制備的]代替3,4-二氯-2-硝基苯甲酰氯和用N-(3-乙氧基-3-氧代丙基)甘氫酸乙酯[如Synthetic Communications,22,1249(1992)中所制備的]代替N-(5-乙氧基-5-氧代戊基)甘氨酸乙酯外，使用引入本文作為參考的美國專利3,415,814(其中實施例1N和20)的一般方法，得到該標題化合物。b)2,5-二氧代-2,3,4,5-四氫-7-[[[2-(吡啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-4-丙酸乙酯用N-甲基-2-(吡啶-4-基)乙胺、一氧化碳和二溴二(三苯基膦)鈀處理實施例77(a)的化合物，按照J.Org.Chem.,39,3327,(1974)的一般方法得到該標題化合物。c)2,5-二氧代-2,3,4,5-四氫-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-4-丙酸乙酯實施例77(b)的化合物溶于含有氧化鉑的稀鹽酸和甲醇中，在氫氣氛中搖動該混合物，將其過濾和濃縮得到該標題化合物。d)2,5-二氧代-2,3,4,5-四氫-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-1H-1,4-苯并二吖庚因-4-丙酸用甲醇中的稀氫氧化鈉然后用稀鹽酸處理實施例77(c)的化合物，得到該標題化合物。
實施例78制備(R,S)-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-2-甲基-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸a)(R,S)-7-芐氧基羰基-2,3,4,5-四氫-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯將1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(1.19g,6.23mmol)于室溫同時加入到無水二甲基甲酰胺(26ml)中的實施例66(h)的化合物(1.44g,5.19mmol)、芐醇(2.7ml,25.95mmol)、二異丙基乙基胺(1.8ml,10.38mmol)和4-(二甲基氨基)吡啶(761mg,6.23mmol)的溶液中，反應物攪拌24小時并濃縮得到淺黃色油狀物。該油狀物用乙酸乙酯(200ml)稀釋，混濁的混合物依次用1N鹽酸(2×20ml)和水(20ml)洗滌。合并的水層用乙酸乙酯(50ml)萃取，并將合并的有機層干燥(硫酸鎂)和濃縮。色譜分離(硅膠，在1∶1乙酸乙酯∶氯仿中的5％甲醇)得到無色且很粘的油狀的標題化合物(1.59g,83％)，可以刮擦器壁和用少量乙酸乙酯處理而促使其固化。TLC Rf 0.52(在1∶1乙酸乙酯∶氯仿中的5％甲醇)；1H NMR(250,CDCl3)δ7.72-7.92(m,2H),7.28-7.55(m,5H),7.14(d,J=8.3Hz,1H),6.76(brt,1H),5.35(s,2H),4.85(dd,J=16.5,5.2Hz,1H),4.12(dd,J=16.5,6.7Hz,1H),3.71(s,3H),3.50-3.70(m,1H),3.00-3.17(m,2H),2.96(dd,J=16.9,7.4Hz,1H),2.50(dd,J=16.9,6.1Hz,1H)；IR(CHCl3)3410,1718,1677,1274cm-1；MS(ES)m/e 390.2[M+Na]+,268.2[M+H]+。b)(R,S)-7-芐氧基羰基-2,3,4,5-四氫-2-甲基-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯實施例78(a)的化合物(220.4mg,0.60mmol)懸浮于甲苯(5-10ml)中，小心濃縮混合物以便除去水和殘余的溶劑。所得固體物溶于無水1∶1 THF∶DMF(12ml)中，加入碘代甲烷(0.19ml,3.0mmol)，加入氫化鈉(在礦物油中60％,29mg,0.72mmol)，其引起放出氣體并稍有溫升。15分鐘后，反應物冷至0℃并用飽和氯化銨水溶液(2ml)驟冷?；旌衔镉靡颐?50ml)稀釋并用水洗滌。合并的水相用乙醚萃取，合并的有機相干燥(硫酸鎂)并濃縮。色譜分離(硅膠，1∶1乙酸乙酯∶甲苯)得到無色油狀的標題化合物(229.2mg,100％)。TLCRf0.66(硅膠，乙酸乙酯)；1H NMR(400,CDCl3)δ7.77-7.87(m,2H),7.31-7.47(m,5H),7.16(d,J=8.4Hz,1H),5.27-5.38(m,3H),3.90(d,J=16.7Hz,1H),3.77-3.90(m,1H),3.71(s,3H),3.11(dd,J=17.4,4.2Hz,1H),3.04(s,3H),2.91-3.07(m,2H),2.43(dd,J=16.7,5.4Hz,1H)；IR(CCl4)1724,1666,1273cm-1；MS(ES)m/e 382.0[M+H]+。c)(R,S)-7-羧基-2,3,4,5-四氫-2-甲基-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯將10％鈀/碳(64mg,0.06mmol)小心加入到實施例78(b)的化合物(229.2mg,0.60mmol)的甲醇(12ml)的溶液中，混合物用氫氣吹洗并于室溫在氫氣(球壓)中快速攪拌。15小時后，混合物通過Celite過濾，濃縮濾液得到無色固體的標題化合物(162.7mg,93％)，其在沒有進一步提純的情況下使用。1H NMR(250,CD3OD)δ7.65-7.85(m,2H),7.28(d,J=7.7Hz,1H),5.38(d,J=16.6Hz,2H),4.11(d,J=16.6Hz,1H),3.85-4.01(m,1H),3.68(s,3H),3.17(dd,J=17.1,4.3Hz,1H),3.01(s,3H),2.75-2.95(m,2H),2.51(dd,J=16.9,4.7Hz,1H)；MS(ES)m/e 605.2[2M+Na]+,314.0[M+Na]+,292.0[M+H]+。d)(R,S)-7-[[[2-(吡啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-2-甲基-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯除用實施例78(c)的化合物代替實施例66(h)的化合物外，使用實施例66(i)的方法，得到暗淺黃色且很粘的油狀的標題化合物(221.3mg,97％):TLC Rf 0.37(在1∶1乙酸乙酯∶氯仿中的10％甲醇)；1H NMR(400MHz,CDCl3)旋轉(zhuǎn)異構體混合物；δ8.42-8.62(m,2H),6.70-7.40(m,5H),5.30(d,J=16.7Hz,1H),3.46-3.92(m,4H),3.72(s,3H),2.73-3.22(m,8H),3.04(s,3H),2.43(dd,J=16.7,5.5Hz,1H)；IR(CHCl3)1730,1643cm-1；MS(ES)m/e410.0[M+H]+。e)(R,S)-7-[[[2-(吡啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-2-甲基-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯除用實施例78(d)的化合物代替實施例66(i)的化合物外，使用實施例66(j)的方法，得到該標題化合物NMR(250MHz,CD3OD)δ7.05-7.45(m,3H),5.36(d,J=16.6Hz,1H),4.10(d,J=16.6Hz,1H),3.84-4.03(m,1H),3.67(s,3H),2.65-3.77(m,12H),3.00(s,3H),2.42-2.60(m,1H),1.89-2.18(m,1H),1.15-1.80(m,6H)。f)(R,S)-7-[[[2-(哌啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-2-甲基-3-氧代-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸除用實施例78(e)的化合物代替實施例66(j)的化合物外，使用實施例66(k)的方法，得到該標題化合物。HPLC k′=2.11(PRP-1；15％AN/W-TFA)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構體混合物δ8.44-8.63(m,1H),8.11-8.37(m,1H),7.27(d,J=7.6Hz,1H),7.07-7.17(m,2H),5.26(d,J=16.5Hz,1H),4.04(d,J=16.5Hz,1H),3.71-3.82(m,1H),3.00-3.52(m,5H),2.60-2.99(m,10H),2.35(dd,J=16.8,4.6Hz,1H),1.80-1.93(m,1H),1.01-1.63(m,6H)；MS(ES)m/e 402.2[M+H]+；分析[C22H31N3O4·1.75(CF3CO2H)]計算值C,50.96；H,5.49；N,6.99；測定值C,51.14；H,5.54；N,7.00。
實施例79制備(R,S)-7-[[[4-氨甲基苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸a)(R,S)-7-[[[4-氰基苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氧-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯除用實施例1(h)的化合物代替(R,S)-8-羧基-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯外，使用實施例59(a)的方法，得到白色固體的標題化合物(0.44g,89％)。b)(R,S)-7-[[[4-氨甲基苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸甲酯除用實施例79(a)的化合物代替實施例59(a)的化合物外，使用實施例59(b)的方法，得到未經(jīng)進一步提純而使用的粗化合物(0.29g)。c)(R,S)-7-[[[4-氨甲基苯基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸除用實施例79(b)的化合物代替實施例57(c)的化合物外，使用實施例57(d)的方法，得到標題化合物。MS(ES)m/e484.0[M-H]+,486.2[M+H]+；分析(C29H31N3O4·1.5C2HF3O2·0.5H2O)計算值C,57.74；H,5.07；N,6.31.測定值C,57.67；H,5.21；N,6.59。
實施例80制備(R,S)-8-[[[4-(N,N-二甲基氨基甲基)苯基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R,S)-8-[[[4-(N,N-二甲基氨基甲基)苯基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯除用(R,S)-8-羧基-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯代替實施例1(g)的化合物和用制備例21(b)的化合物代替4-(甲氨基)-(N-芐氧基羰基)芐脒外，使用實施例1(h)的方法，得到該標題化合物。b)(R,S)-8-[[[4-(N,N-二甲基氨基甲基)苯基]氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸除用實施例80(a)的化合物代替實施例1(i)的化合物外，使用實施例1(j)的方法，得到淺黃色固體的標題化合物(154mg,25％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.85(d,2H),7.4(2H),7.35(d,2H),7.2-7.0(m,6H),6.1(m,1H),5.45(d,1H),5.05(m,1H),4.25(s,2H),4.05(d,1H),3.6(m,2H),2.8(dd,1H),2.75(s,6H),2.7(m,2H),2.6(dd,1H)。
實施例81制備(R,S)-7-[(4,4′-二哌啶-1-基)羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸a)(R,S)-7-[1′-(叔丁氧基羰基)-4,4′-二哌啶-1-基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯除用(R,S)-7-羧基-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸酯代替(R,S)-8-羧基-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸酯和用制備例2 2的化合物代替N-甲基-2-(4-吡啶基)乙胺以及除掉三乙胺外，使用實施例32(a)的方法，得到該標題化合物(0.43g,68％):MS(ES)m/e 633.2[M+H]+。b)(R,S)-7-[(4,4′-二哌啶-1-基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸甲酯除用實施例81(a)的化合物代替實施例13(a)的化合物外，使用實施例13(b)的方法，得到該標題化合物(0.27g,75％):MS(ES)m/e 533.2[M+H]+；HPLC k′=9.4(Vydac C18,4.6×250mm,1.5ml/分，梯度，A乙腈B水-0.1％TFA，在20分鐘內(nèi)5-50％乙腈，在254nm下UV檢測)。c)(R,S)-7-[(4,4′-二哌啶-1-基)羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸實施例81(b)的化合物(0.2g,0.3mmol)懸浮于丙酮(2ml)中，并用在水中(2ml)的氫氧化鋰水合物(25mg)處理?；旌衔飻嚢枰灰?，用甲醇處理并以兩份經(jīng)9小時加入另外的氫氧化鋰水合物(5.5mg)。濃縮混合物和用N鹽酸中和含水殘余物并濃縮。殘余物在制冷器中放置一夜并過濾。濾餅用冷水、丙酮和乙醚洗滌，得到該標題化合物(0.07g)。MS(ES)m/e 519.2[M+H]+；HPLC k′=7.9(Vydac ODS,4.6×250mm,1.5ml/分，梯度，A乙腈B水-0.1％TFA，在20分鐘內(nèi)5-50％A，在254nm下UV檢測)；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.2(t,2H),7.14(d,3H),7.10(d,1H),7.08(d,1H),7.04(s,1H),6.59(d,1H),5.46(d,1H),5.15(q,1H),3.87(d,1H),3.76(m,1H),3.63(m,1H),3.38(d,2H),2.93(dd,4H),2.77(t,2H),2.63(dd,1H),1.93(m,2H),1.45(bs,2H),1.23(m,4H),1.23(m,2H)。
實施例82制備7-[3-(哌嗪-1-基)丙氧基]-2-(2-苯乙基)-3-氧代-2,3-二氫-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸a)7-甲氧基-3-氧代-2,3-二氫-2-(2-苯乙基)-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸乙酯實施例48(h)的化合物(2.6g,6.8mmol)的甲醇(120ml)的溶液用25％甲醇鈉/甲醇溶液(14.1ml,68mmol)處理并加熱至回流保持2.5小時?；旌衔镉帽?水(300ml)驟冷，用3N鹽酸酸化，用乙酸乙酯萃取，經(jīng)干燥和濃縮得到所說的酸。MS(ES)m/e 352[M+H]+。殘余物溶于乙醇(75ml)中，在4M氯化氫/二噁烷(2ml)存在下加熱至回流保持2小時并濃縮，得到該標題化合物(2.5g,97％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.18-7.26(m,5H),7.08(d J=7.95Hz,1H),6.89(s,1H),6.82(m,2H),4.18(m,4H),3.81(s,3H),3.80(t,J=5.57,2H),3.71(t,J=5.57Hz,3H),2.85(t,J=7.62Hz,2H),1.28(t,J=6.5Hz,3H)。b)7-羥基-2,3-氧代-(2-苯乙基)-2,3-二氫-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸乙酯于0℃向?qū)嵤├?2(a)的化合物(2.67g,7.0mmol)和乙硫醇(2.6ml,35mmol)的二氯甲烷(50ml)的溶液中加入氯化鋁(4.6g,35mmol)。混合物經(jīng)1小時溫升至室溫，用二氯甲烷(100ml)稀釋，用冷的3N鹽酸洗滌，經(jīng)干燥(硫酸鈉)和濃縮得到該標題化合物(2.4g,93％)。MS(ES)m/e366.0[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.17-7.26(m,5H),7.02(d J=8.16Hz,1H),6.78(s 1H),6.75(m,1H),6.67(d,J=2.4,1H),4.18(q,J=7.16,2H),3.71(t,J=5.57Hz,4H),2.85(t,J=7.58Hz,4H),1.26(t,J=7.16Hz,3H)。c)7-[3-[(4-叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基]丙氧基]-3-氧代-2-(2-苯乙基)-2,3-二氫-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸乙酯在二甲基甲酰胺(15ml)中的實施例82(b)的化合物(1.28g,3.5mmol)、3-[(4-叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基]丙基氯(1.3g,5mmol)、碳酸鉀(0.58g,4.2mmol)和碘化四乙銨(20mg)的混合物于90℃加熱2小時。反應混合物用冰-水驟冷，用乙酸乙酯萃取，經(jīng)干燥(硫酸鈉)和濃縮得到該標題化合物(1.5g,75％)。MS(ES)m/e 592.0[M+H]+；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.2-7.26(m,5H),7.02(d J=8.16Hz,1H),6.83(s,1H),6.81(d,J=2.4,1H),4.19(m,4H),4.0(m,2H),3.70(m,4H),3.46(bs,4H),2.84(t,J=7.56Hz,2H),2.52(t,J=7.1Hz,2H),1.96(m,2H),1.45(s,9H),1.28(t,J=7.23Hz,3H)。d)7-[3-(1-哌嗪基)丙氧基]-2-(2-苯乙基)-3-氧代-2,3-二氫-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸實施例82(c)的化合物的混合物(0.7g,1.2mmol)溶于1N氫氧化鈉溶液(12ml)甲醇(35ml)中。子室溫下攪拌4小時后，反應混合物用冰-水驟冷，用1N鹽酸酸化，用乙酸乙酯萃取，干燥(硫酸鈉)、過濾和濃縮得到所說的N-芐氧基羰基酸(0.42g,63％；MS(ES)m/e 564.2[M+H]+)，將其在4N氯化氫/二噁烷溶液(4ml)和二氯甲烷(30ml)中攪拌18小時，蒸發(fā)混合物得到該標題化合物(0.39g,97％)。MS(ES)m/e 464.2[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.1 6-7.83(m,6H),7.06(s,1H),6.94(m,2H),4.15(m,2H),3.65(m,14H),3.47(m,2H),2.82(m,2H),2.32(m,2H)。
實施例83制備7-[3-(哌嗪-1-基)丙氧基]-2-(2-苯乙基)-3-氧代-2,3,4,5-四氫-1H-2-苯并吖庚因-4-乙酸實施例82(d)的化合物(0.01g,0.02mmol)的甲醇(15ml)的溶液用氫氧化鈀(0.05mg)處理并氫化(50psi)4小時，得到該標題化合物。
實施例84-88使用上述公開的用于制備-2,3,4,5-四氫-3-氧代-1H-1,4-苯并吖庚因的常規(guī)的各種不同方法制備下述化合物。84.8-[[[2-[吡啶-4-基]乙烯基]羰基]氨基]-2,3,4,5-四氫3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸；85.8-[[[2-(2-氨基吡啶-4-基)乙基]甲氨基]羰基]2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸；86.8-[[(奎寧環(huán)-3-基)氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸；87.8-[2-[4-(氨甲基)苯基]乙基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸；和88.8-[[[[3-(2-甲基)吡啶-2-基]丙基]甲氨基]羰基]-2,3,4,5-四氫-3-氧代-4-(2-苯乙基)-1H-1,4-苯并二吖庚因-2-乙酸。
實施例89非腸道劑量單位組合物含有20mg以無菌干粉形式的實施例10的化合物的組合物的制備如下20mg該化合物溶于15ml蒸餾水中，溶液在無菌條件下過濾而進入25ml多劑量的安瓿中并凍干。所說的粉末由加入用于注入靜脈或肌肉注射的20ml 5％葡萄糖的水(D5W)溶液而被重新組成，在此，劑量由注射的體積確定。由將這種劑量單位的計量體積加入到用于注射的另外體積的D5W中可構成后來的稀釋，或計量的劑量可加入到用于調(diào)制藥物的以用于Ⅳ滴注注入或其他注射注入體系的瓶或袋形式的另外的器械中。
實施例90口服劑量單位組合物通過將50mg實施例34的化合物與75mg乳糖和5mg硬脂酸鎂進行混合和磨碎來制備用于口服給藥的膠囊。所得粉末被篩分并填充到硬明膠膠囊中。-->實施例91口服劑量單位組合物通過將20mg蔗糖、150mg硫酸鈣二水合物和50mg實施例34的化合物與10％明膠溶液進行混合和造粒來制備用于口服給藥的片劑。濕顆粒被篩分、干燥，與10mg淀粉、5mg滑石粉和3mg硬脂酸混合，將其壓制成片劑。
上述內(nèi)容是用來說明本發(fā)明的制備和使用。然而，本發(fā)明不限于本文所述的明確的實施方案，而是包括了下述權利要求書的范圍內(nèi)的所有的改進。
權利要求
1．下列通式的中間體化合物
其中E是N或CH，R20是氫，氨基，單或二-C1-4烷基氨基，羥基或C1-4烷基，RP是氮保護基，L2是CHO,CO2R′,C≡C-H,OH,Cl,Br,I,CH2-T或NR′R″，和T是CF3SO3,OH,NHR″,Cl,Br或I。
全文摘要
本發(fā)明涉及能有效抑制血小板凝聚的下述通式的化合物和其藥學上可接受的鹽,具有所述活性的藥物組合物和抑制血小板凝聚的方法，其中A
文檔編號C07D243/14GK1215054SQ98107358
公開日1999年4月28日 申請日期1998年4月24日 優(yōu)先權日1992年12月21日
發(fā)明者W·E·邦丁奈爾, R·M·基南, J·F·卡拉漢, T·W·F·顧, W·F·哈夫曼, K·A·紐蘭德, J·M·薩馬倫, I·N·尤辛斯卡斯 申請人:史密絲克萊恩比徹姆公司