專利名稱：：含氮四環(huán)化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及對(duì)線粒體地西泮結(jié)合抑制劑受體(mitochondrialdiazepambindinginhibitorreceptor，簡(jiǎn)稱MDR)具有較高親和性的化合物。因此，期望開發(fā)一種MDR激動(dòng)劑，作為對(duì)于以前BZ類不能充分發(fā)揮療效的癥狀(強(qiáng)迫癥、恐慌癥)的治療藥，以及減輕了以前BZ類的副作用的鎮(zhèn)靜催眠藥。另外，對(duì)MDR作用的化合物由于通過GABAA受體作用，有可能成為失眠障礙、癲癇、伴有肌肉僵直的運(yùn)動(dòng)障礙、攝食障礙、循環(huán)障礙、認(rèn)識(shí)學(xué)習(xí)障礙、藥物依賴性的治療藥(ProgressinNeurobiology，38，379-395，1992；ibid，49，73-97，1996，J．Neurochem．58，1589-1601；Neuropharmacol．30，1435-1440，1991)。而且，從MDR的生理機(jī)能來看，有可能成為癌(BiochimicaetBIOphysicaActa，1241，453-470，1995)、脂質(zhì)代謝障礙(Eur．J．Pharmacol．，294，601-607，1995)、精神分裂癥(Neuropharmacology，35，1075-1079，1996)、腦梗塞(J．Neurosci．，15，5263-5274，1995)、ADIS(AbstractsofthefifthinternationalconferenceonAIDS，P458，1989)、阿耳茨海默氏病(AlzheimerDis．Assoc．Disotd．2，331-336，1988)或亨庭頓氏舞蹈病(BrainRes．，248，396-401，1982)的治療藥。作為對(duì)MDR有親和性的化合物，有在特表平6-501030號(hào)中公開的吲哚類化合物。也就是說，本發(fā)明是式〔I〕表示的含氮四環(huán)化合物或其可藥用鹽。〔式中，Y1-Y2-Y3表示N-C=N或式C=C-NR3(式中R3表示氫原子、C1-5的烷基或C2-10的含氮烷基)所示基團(tuán)。Y4表示S、SO、SO2、CH2或NR4(式中R4表示C1-5的烷?；駽1-5的烷基)所示基團(tuán)。R1和R2相同或不同，表示氫原子、C1-10的烷基、C3-15的烷氧基烷基或C3-15的烷基氨基烷基，或者R1和R2與相鄰的氮原子一同形成環(huán)狀氨基。X1和X2相同或不同，表示氫原子、C1-5的烷基、C1-5的烷氧基或鹵素原子，n表示0、1或2〕在本發(fā)明中，R3、R4、X1、X2的C1-5烷基表示直鏈狀、支鏈狀或環(huán)狀烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、環(huán)丙基甲基、戊基、異戊基等。R3的C2-10含氮烷基例如甲氨基丙基、二甲氨基乙基、吡咯烷基乙基、4-甲基哌嗪基乙基等。R4的C1-5烷酰基例如甲?；⒁阴；?、丙?；?。R1、R2的C1-10烷基表示直鏈狀、支鏈狀或環(huán)狀烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基、丁基、異丁基、環(huán)丁基、環(huán)丙基甲基、戊基、異戊基、環(huán)戊基、環(huán)丁基甲基、1-乙基丙基、己基、異己基、環(huán)己基、環(huán)戊基甲基、1-乙基丁基、庚基、異庚基、環(huán)己基甲基、辛基、壬基、癸基等。R1、R2的C3-5烷氧基烷基表示直鏈狀、支鏈狀或環(huán)狀的C1-13烷氧基-C2-14烷基，例如甲氧基乙基、甲氧基丙基、甲氧基丁基、乙氧基乙基、乙氧基丙基、乙氧基丁基、乙氧基戊基、乙氧基己基、乙氧基庚基、丙氧基乙基、丙氧基丙基、丙氧基丁基、異丙氧基乙基、環(huán)丙基甲氧基乙基等。R1、R2的C3-15烷基氨基烷基表示直鏈狀、支鏈狀或環(huán)狀的C1-13烷基氨基-C2-14烷基，例如甲氨基乙基、二甲氨基乙基、甲氨基丙基、二甲氨基丙基、甲氨基丁基、乙氨基乙基、乙氨基丙基、乙氨基丁基、乙氨基戊基、乙氨基己基、乙氨基庚基、乙氨基辛基、丙氨基乙基、丙氨基丙基、丙氨基丁基、異丙氨基乙基、環(huán)丙基甲氨基乙基、吡咯烷基乙基等。R1、R2以及與其相鄰的氮原子形成的環(huán)狀氨基例如吡咯烷基、哌啶基、高哌啶基、嗎啉基、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、3，5-二甲基哌嗪基等。X1、X2的C1-5烷氧基表示直鏈狀、支鏈狀或環(huán)狀烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、環(huán)丙基甲氧基、戊氧基、異戊氧基等。X1、X2的鹵素原子表示氟原子、氯原子、溴原子或碘原子。另外，本發(fā)明中的可藥用鹽是與硫酸、鹽酸、磷酸等無機(jī)酸形成的鹽，與醋酸、草酸、乳酸、酒石酸、富馬酸、馬來酸、甲磺酸、苯磺酸等有機(jī)酸形成的鹽。式〔Ⅰ〕的化合物可以采用以下的常規(guī)制備方法1～6制備(以下反應(yīng)式中，Y1、Y2、Y3、Y4、R1、R2、X1、X2和n與上述相同，R5表示氫原子或C1-5的烷基，R6表示C1-5的烷基或C2-10的含氮烷基，R7和R8相同或不同，表示C1-5的烷基或苯甲基，X3表示氯原子、溴原子或碘原子，X4表示氟原子、氯原子、溴原子或碘原子，Boc表示叔丁氧基羰基)?！渤Ｒ?guī)制備方法1〕步驟A使用酮酸衍生物(1)和苯肼衍生物(2)，采用費(fèi)希爾吲哚合成法制得四環(huán)吲哚衍生物(3)。四環(huán)吲哚衍生物(3)的R5為C1-5烷基時(shí)，其酯通過通常的堿或酸水解可以衍生出羧酸衍生物(R5=H)。步驟B由四環(huán)吲哚衍生物(3)經(jīng)由酰鹵或混合酸酐等，可以合成本發(fā)明的化合物(5)。這里酰鹵表示酰氯、酰溴等，可以通過亞硫酰氯、亞磺酰溴、乙二酰氯、四氯化碳-三苯基磷化氫、四溴化碳-三苯基磷化氫等鹵化劑在惰性溶劑中與四環(huán)吲哚衍生物(3)(R5=H)反應(yīng)制得。所述惰性溶劑是四氫呋喃等醚類；甲苯、苯等烴類；氯仿、二氯甲烷等鹵代烴類溶劑、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺等。混合酸酐表示羧酸衍生物(3)(R5=H)與碳酸酯或羧酸形成的酸酐等，可以通過氯碳酸乙酯、氯碳酸異丁酯等鹵代碳酸酯，或醋酸、丙酸、苯甲酸、萘甲酸等羧酸類，在三乙胺、二異丙基乙胺、N-甲基嗎啉、吡啶等有機(jī)堿或氫氧化鈉等無機(jī)堿存在下，在惰性溶劑中反應(yīng)制得。所述惰性溶劑是四氫呋喃等醚類；甲苯、苯等烴類；氯仿、二氯甲烷等鹵代烴類溶劑、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺等。另外，本發(fā)明化合物(5)也可以通過使四環(huán)吲哚衍生物(3)與縮合劑以及胺(4)在惰性溶劑中反應(yīng)制得。這里的縮合劑表示通常使用的酰胺化試劑，例如二苯基磷酰胺、氰基磷酸二乙酯、羰基二咪唑、N，N’二環(huán)己基碳化二亞胺、N-乙基-N’-二甲氨基丙基碳化二亞胺鹽酸鹽等。惰性溶劑例如1，2-二甲氧基乙烷、四氫呋喃等醚類；甲苯、苯等烴類；氯仿、二氯甲烷等鹵代烴類溶劑；乙腈、N，N-二甲基甲酰胺等。另外，本反應(yīng)在必要時(shí)可以添加N-羥基琥珀酰亞胺、1-羥基苯并三唑或3-羥基-4-氧代-3，4-二氫-1，2，3-苯并三嗪等作為活化劑?！渤Ｒ?guī)制備方法2〕本發(fā)明化合物(5)也可以通過酮酸(6)進(jìn)行步驟B的酰胺化后，使得到的酮酰胺衍生物(7)在步驟A的費(fèi)希爾吲哚合成條件下反應(yīng)制得?！渤Ｒ?guī)制備方法3〕步驟C通過使四環(huán)化合物(5)與鹵代化合物(8)在惰性溶劑中，有相間移動(dòng)催化劑存在或沒有相間移動(dòng)催化劑存在下，與堿一起反應(yīng)可以制得本發(fā)明化合物(9)。這里的惰性溶劑例如甲醇、乙醇等醇類；1，2-二甲氧基乙烷、四氫呋喃等醚類；甲苯、苯等烴類；氯仿、二氯甲烷等鹵代烴類溶劑；乙腈、N，N-二甲基甲酰胺等。相間移動(dòng)催化劑例如苯甲基三乙基銨溴化物、四丁基銨溴化物等季銨鹽；18-冠-6-醚等冠醚等。堿例如碳酸鉀、氫氧化鈉、氫化鈉、金屬鈉等無機(jī)堿類；叔丁醇鉀、乙醇鈉等醇化物等?！渤Ｒ?guī)制備方法4〕步驟D通過使2-氰基苯甲基鹵化物(10)與2-氨基丙二酸二酯衍生物(11)在惰性溶劑中，有相間移動(dòng)催化劑存在或沒有相間移動(dòng)催化劑存在下，與堿一起反應(yīng)可以制得苯甲基丙二酸衍生物(12)。這里惰性溶劑例如甲醇、乙醇等醇類；1，2-二甲氧基乙烷、四氫呋喃等醚類；甲苯、苯等烴類；氯仿、二氯甲烷等鹵代烴類溶劑；乙腈、N，N-二甲基甲酰胺等。相間移動(dòng)催化劑例如苯甲基三乙基銨溴化物、四丁基銨溴化物等季銨鹽；18-冠-6-醚等冠醚等。堿例如碳酸鉀、氫氧化鈉、氫化鈉、金屬鈉等無機(jī)堿；叔丁醇鉀、乙醇鈉等醇化物等。步驟E苯甲基丙二酸衍生物(12)在惰性溶劑中，通過堿或酸將酯水解，然后脫羧可以得到苯基丙氨酸衍生物(13)。這里惰性溶劑例如甲醇、乙醇等醇類；1，2-二甲氧基乙烷、四氫呋喃等醚類；甲苯、苯等烴類；氯仿、二氯甲烷等鹵代烴類溶劑；乙腈、N，N-二甲基甲酰胺、水或其混合溶劑。堿例如碳酸鉀、碳酸鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈉等無機(jī)堿，酸例如鹽酸、硫酸、磷酸等。而且，苯基丙氨酸衍生物(13)通過步驟B反應(yīng)后，用三氟醋酸、甲酸等有機(jī)酸或氯化氫、鹽酸、氫溴酸、硫酸等無機(jī)酸處理脫保護(hù)，可以衍生得到酰胺化合物(14)。步驟F酰胺化合物(14)在有堿存在下或沒有堿存在下，在惰性溶劑中與硝基苯衍生物(15)反應(yīng)，可以衍生出苯胺衍生物(16)。這里堿例如碳酸鉀、碳酸鈉、氫氧化鈉、氫化鈉、金屬鈉等無機(jī)堿，叔丁醇鉀、乙醇鈉等醇化物，三乙胺、二異丙基乙胺、吡啶等有機(jī)堿等。惰性溶劑例如甲醇、乙醇等醇類；1，2-二甲氧基乙烷、四氫呋喃等醚類；甲苯、苯等烴類；氯仿、二氯甲烷等鹵代烴類溶劑；乙腈、N，N-二甲基甲酰胺等。步驟G苯胺衍生物(16)的硝基在惰性溶劑中還原后，通過在惰性溶劑中進(jìn)行酸處理，可以制得本發(fā)明化合物(17)。這里還原是指使用二氧化鉑、鈀等的加氫，或使用錫、鐵、鋅等金屬或氯化亞錫等金屬鹽在酸性、中性或堿性條件下的金屬還原。這時(shí)的惰性溶劑例如甲醇、乙醇等醇類；二乙基醚、四氫呋喃等醚類；甲苯、苯等烴類；二氯甲烷、氯仿等鹵代烴類溶劑；乙腈、N，N-二甲基甲酰胺、醋酸等有機(jī)羧酸、水或其混合溶劑等。惰性溶劑中的酸處理是在甲醇、乙醇等醇類的單獨(dú)溶劑中，或在二乙基醚、四氫呋喃等醚類、甲苯、苯等烴類、二氯甲烷、氯仿等鹵代烴類溶劑、N，N-二甲基甲酰胺等與醇的混合溶劑中，使用氯化氫、溴化氫、硫酸、三氟醋酸等酸進(jìn)行反應(yīng)。〔常規(guī)制備方法5〕步驟H通過在惰性溶劑中用氧化劑處理含有硫原子的四環(huán)化合物(18)可以得到消旋或光學(xué)活性的亞砜衍生物(19)或砜衍生物(20)。這里惰性溶劑例如甲醇、乙醇等醇類；二乙基醚、四氫呋喃等醚類；甲苯、苯等烴類；二氯甲烷、氯仿等鹵代烴類溶劑；乙腈、N，N-二甲基甲酰胺、醋酸等有機(jī)羧酸、水或其混合溶劑等。氧化劑例如間氯過苯甲酸、過醋酸等過羧酸，或過氧化氫、過氧化鉀(OXONE，2KSO5·KHSO4·K2SO4)等無機(jī)過氧化物。步驟I光學(xué)活性體(22)也可以通過使用手性固定相的HPLC對(duì)本發(fā)明化合物的消旋體(21)進(jìn)行拆分制得。這里手性固定相是纖維素酯、纖維素氨基甲酸酯、直鏈淀粉氨基甲酸酯、冠醚、聚甲基丙烯酸酯等衍生物。步驟J通過將消旋體的羧酸衍生物(23)與手性胺形成鹽，可以拆分成光學(xué)活性體(24)。這里手性胺為(+)或(-)-1-苯基乙胺、(+)或(-)-2-氨基-1-丁醇、(+)或(-)-氨基丙醇(アラニノ-ル)、馬錢子堿、辛可尼丁、辛可寧、奎寧、奎尼丁、脫氫松香胺等。光學(xué)活性體(22)可以通過步驟B使光學(xué)活性體(24)酰胺化得到?！渤Ｒ?guī)制備方法7〕常規(guī)制備方法6中所示的本發(fā)明化合物(21)或(22)當(dāng)R1、R2中之一或兩者均含有被?；?、烷氧基羰基等保護(hù)的氮原子時(shí)，可以通過酸或堿脫去這些保護(hù)基，得到本發(fā)明的化合物。這里酸表示三氟醋酸、甲酸、氯化氫、溴化氫、鹽酸、氫溴酸等，堿表示碳酸鉀、碳酸鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈉、氫氧化鋰、氫氧化鋇等。工業(yè)實(shí)用性本發(fā)明的化合物對(duì)MDR具有較高的親和性。因此，作為不安或與之相關(guān)連的疾病、抑郁病、癲癇、睡眠障礙、認(rèn)識(shí)學(xué)習(xí)障礙、精神分裂癥等中樞性疾病、伴有肌肉僵直的運(yùn)動(dòng)障礙、攝食障礙、循環(huán)障礙、藥物依賴性、癌、脂質(zhì)代謝障礙、腦梗塞、AIDS、阿耳茨海默氏病或亨庭頓氏舞蹈病的治療或預(yù)防藥是有效的。發(fā)明的最佳實(shí)施方式以下結(jié)合實(shí)施例和實(shí)驗(yàn)例具體說明本發(fā)明。實(shí)施例1N-2-(丙基氨基)乙基-N-己基-6，11-二氫-5-硫代-11-氮雜-苯并〔a〕芴-6-甲酰胺的制備(1)在(4-氧代-硫代苯并二氫吡喃-2-基)-甲酸22．54g與苯肼10．7ml的乙醇1OOml溶液中加入硫酸15ml，加熱回流5小時(shí)。將反應(yīng)液冷卻到室溫，注入到冰水500ml中，用乙醚萃取。用飽和食鹽水洗滌萃取液，用無水硫酸鈉干燥后，過濾除去干燥劑，在減壓條件下濃縮濾液，將殘?jiān)靡掖?己烷重結(jié)晶，得到6，11-二氫-5-硫代-11-氮雜-苯并〔a〕芴-6-甲酸乙酯21．85g。(2)將氫氧化鉀19．46g溶解于水40ml中，加入到6，11-二氫-5-硫代-11-氮雜-苯并〔a〕芴-6-甲酸乙酯21．63g的乙醇100ml溶液中。加熱回流2小時(shí)后，在反應(yīng)溶液中滴加濃鹽酸，調(diào)節(jié)為pH=3，用乙酸乙酯萃取。用飽和食鹽水洗滌萃取液，用無水硫酸鈉干燥后，過濾除去干燥劑，在減壓條件下濃縮濾液，將殘?jiān)靡掖?己烷重結(jié)晶，得到6，11-二氫-5-硫代-11-氮雜-苯并〔a〕芴-6-甲酸19．94g。m．p．141．5～142．5℃(3)在6，11-二氫-5-硫代-11-氮雜-苯并〔a〕芴-6-羧酸844mg與N-2-(N-叔丁氧基羰基丙基氨基)乙基-己胺1．66g的二氯甲烷44ml溶液中加入1-羥基苯并三唑一水合物552mg以及N-乙基-N’-二甲氨基丙基碳化二亞胺鹽酸鹽863mg，在室溫下攪拌1夜。減壓條件下濃縮反應(yīng)液后，溶解于乙酸乙酯，用水、5％硫酸氫鈉水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥后，過濾除去干燥劑，減壓條件下濃縮濾液，用快速色譜法(硅膠ChromatrexNHDM1020(富士Devisone化學(xué)公司生產(chǎn))，展開溶劑己烷-乙酸乙酯=2∶1～3∶2)處理殘?jiān)?，得到無定形的N-2-(N-叔丁氧基羰基丙基氨基)乙基-N-己基-6，11-二氫-5-硫代-11-氮雜-苯并〔a〕芴-6-甲酰胺1．35g。(4)在99％甲酸4．2ml中，將N-2-(N-叔丁氧基羰基丙基氨基)乙基-N-己基-6，11-二氫-5-硫代-11-氮雜-苯并〔a〕芴-6-甲酰胺600mg攪拌5小時(shí)。減壓條件下濃縮反應(yīng)液后，溶解于乙酸乙酯，用飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥后，過濾除去干燥劑，在減壓條件下濃縮濾液，將殘?jiān)靡宜嵋阴ブ亟Y(jié)晶，得到N-2-(丙基氨基)乙基-N-己基-6，11-二氫-5-硫代-11-氮雜-苯并〔a〕芴-6-甲酰胺406mg。該化合物以及采用相同方法得到的化合物的結(jié)構(gòu)和物理數(shù)據(jù)如表1所示。實(shí)施例2N，N-二己基-6，11-二氫-5-硫代-11-氮雜-苯并〔a〕芴-6-甲酰胺的制備(1)在(4-氧代-硫代苯并二氫吡喃-2-基)-甲酸20．00g的苯200ml溶液中加入亞硫酰氯14．0ml，加熱回流3小時(shí)。減壓條件下濃縮反應(yīng)液，將該殘?jiān)亩燃淄?00ml溶液在冰水浴條件下，邊攪拌邊滴加到二己基胺24．6ml和三乙胺20．0ml的二氯甲烷200ml溶液中。在室溫下攪拌1夜后，減壓濃縮反應(yīng)液，在殘?jiān)屑尤胍宜嵋阴?，用水?N鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥后，過濾除去干燥劑，減壓濃縮濾液。采用色譜法(硅膠WacogelC200(和光純藥生產(chǎn))，展開溶劑己烷-乙酸乙酯=5∶1～3∶1)精制殘?jiān)螅眉和橹亟Y(jié)晶，得到N，N-二己基-(4-氧代-硫代苯并二氫吡喃-2-基)-甲酰胺29．22g。(2)將N，N-二己基-(4-氧代-硫代苯并二氫吡喃-2-基)-甲酰胺l．00g和苯肼0．26ml在100℃下攪拌30分鐘后，在減壓50℃條件下將反應(yīng)混合物干燥30分鐘。在殘?jiān)屑尤霟o水氯化鋅1．44g，在170℃下攪拌5分鐘，冷卻到室溫。在反應(yīng)混合物中加入冰水，用乙酸乙酯萃取，用1N鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥后，過濾除去干燥劑，減壓濃縮濾液。將殘?jiān)靡宜嵋阴?己烷重結(jié)晶，得到N，N-二己基-6，11-二氫-5-硫代-11-氮雜-苯并〔a〕芴-6-甲酰胺0．79g。(3)將消旋體的N，N-二己基-6，11-二氫-5-硫代-11-氮雜-苯并〔a〕芴-6-甲酰胺用高效液相色譜法(chiralpakAD(Daicel公司生產(chǎn))，2φ×25cm，移動(dòng)相己烷-乙醇=3∶7，流速5ml／min)拆分。(-)-N，N-二己基-6，11-二氫-5-硫代-11-氮雜-苯并〔a〕芴-6-甲酰胺[α]D26-25．9(c=0．180，EtOH)，保留時(shí)間20min。(+)-N，N-二己基-6，11-二氫-5-硫代-11-氮雜-苯并〔a〕芴-6-甲酰胺[α]D26+25．9(c=O．207，EtOH)，保留時(shí)間37min。該化合物以及采用相同方法得到的化合物的結(jié)構(gòu)和物理數(shù)據(jù)如表1、2所示。實(shí)施例3N，N-二己基-6，11-二氫-11-甲基-5-硫代-11-氮雜-苯并〔a〕芴-6-甲酰胺的制備在N，N-二己基-6，11-二氫-5-硫代-11-氮雜-苯并〔a〕芴-6-甲酰胺200mg的N，N-二甲基甲酰胺1Oml溶液中加入60％氫化鈉／油21mg，在室溫下攪拌1小時(shí)。在該溶液中加入碘甲烷33μl，在室溫下攪拌5小時(shí)。在反應(yīng)溶液中加入乙酸乙酯，用水、1N鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥后，過濾除去干燥劑，減壓濃縮濾液。將殘?jiān)眉和橹亟Y(jié)晶，得到N，N-二己基-6，11-二氫-11-甲基-5-硫代-11-氮雜-苯并〔a〕芴-6-甲酰胺155mg。該化合物以及采用相同方法得到的化合物的結(jié)構(gòu)和物理數(shù)據(jù)如表2所示。實(shí)施例4N，N-二己基-5，6-二氫-苯并〔4，5〕咪唑并〔2，1-a〕異喹啉-6-甲酰胺(1)將鈉0．49g溶解于乙醇20ml中，在室溫下邊攪拌邊向其中加入2-N-叔丁氧基羰基氨基丙二酸二乙酯5．90g的乙醇10ml溶液。攪拌20分鐘后，向反應(yīng)液中加入2一氰基苯甲基溴化物4．00g的乙醇10ml溶液，在室溫下攪拌10分鐘，再在加熱回流下攪拌3．5小時(shí)。減壓濃縮反應(yīng)液，在殘?jiān)屑尤胍宜嵋阴?，用水?％硫酸氫鉀水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥后，過濾除去干燥劑，減壓濃縮濾液。采用色譜法(硅膠WacogelC200(和光純藥生產(chǎn))，展開溶劑己烷一乙酸乙酯=5∶1)精制殘?jiān)?，得到油狀?-(2-氰基苯甲基)-2-N-叔丁氧基羰基氨基丙二酸二乙酯7．86g。(2)在2-(2-氰基苯甲基)-2-N-叔丁氧基羰基氨基丙二酸二乙酯1．17g中加入乙醇20ml和氫氧化鈉水溶液(氫氧化鈉O．36g／水O．5ml)，在加熱回流下攪拌2小時(shí)。減壓濃縮反應(yīng)液，在殘?jiān)屑尤?％硫酸氫鉀水溶液，用乙酸乙酯萃取。用飽和食鹽水洗滌萃取液，用無水硫酸鈉干燥后，過濾除去干燥劑，減壓濃縮濾液，得到油狀的粗N-叔丁氧基羰基-(2-氰基苯基)丙氨酸0．81g。該化合物不進(jìn)行精制直接用于下一步。(3)將粗N-叔丁氧基羰基-(2-氰基苯基)丙氨酸0．81g和二己基胺0．67g溶解于N，N-二甲基甲酰胺8ml中，將其中加入1-羥基苯并三唑一水合物0．55g與N-乙基-N-二甲氨基丙基碳化二亞胺鹽酸鹽0．69g，在室溫下攪拌1夜。將反應(yīng)混合物注入到水中，用乙酸乙酯萃取，用5％硫酸氫鉀水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥后，過濾除去干燥劑、減壓濃縮濾液。用色譜法(硅膠WacogelC200(和光純藥生產(chǎn))，展開溶劑己烷-乙酸乙酯=4∶1)精制殘?jiān)?，得到N-叔丁氧基羰基-(2-氰基苯基)丙氨酸二己基酰胺1．01g。(4)將N-叔丁氧基羰基-(2-氰基苯基)丙氨酸二己基酰胺O．98g溶解于二氯甲烷1．7ml中，加入三氟醋酸1．7ml，在室溫下攪拌1．5小時(shí)。減壓濃縮反應(yīng)液，在殘?jiān)屑尤腼柡吞妓釟溻c水溶液，用二氯甲烷萃取，用飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥后，過濾除去干燥劑，減壓濃縮濾液，得到粗(2-氰基苯基)丙氨酸二己基酰胺0．76g。該化合物不進(jìn)行精制直接用于下一步。(5)將粗(2-氰基苯基)丙氨酸二己基酰胺0．76g、2-氟硝基苯0．30g和無水碳酸鉀0．36g在N，N-二甲基甲酰胺8ml中加熱回流2．5小時(shí)。將反應(yīng)混合物注入水中，用乙酸乙酯萃取，用水、飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥后，過濾除去干燥劑，減壓濃縮濾液。采用色譜法(硅膠WacogelC200(和光純藥生產(chǎn))，展開溶劑己烷-乙酸乙酯=5∶1)精制殘?jiān)?，得到N-(2-硝基苯基)-(2-氰基苯基)丙氨酸二己基酰胺0．42g。(6)將N-(2-硝基苯基)-(2-氰基苯基)丙氨酸二己基酰胺95mg與二氧化鉑10mg在甲醇3ml中，氫氣環(huán)境下攪拌2小時(shí)。使用硅藻土板過濾除去不溶物后，減壓濃縮濾液。將殘?jiān)芙庥谝掖?ml中，向其中通入氯化氫氣體，得到飽和溶液。將反應(yīng)液攪拌4小時(shí)后，注入到飽和碳酸氫鈉水溶液中，用乙酸乙酯萃取。用飽和食鹽水洗滌萃取液，用無水硫酸鈉干燥后，過濾除去干燥劑，減壓濃縮濾液。采用色譜法(硅膠WacogelC200(和光純藥生產(chǎn))，展開溶劑己烷-乙酸乙酯=2∶1)精制殘?jiān)?，用乙酸乙酯重結(jié)晶，得到N，N-二己基-5，6-二氫-苯并〔4，5〕咪唑并〔2，1-a〕異喹啉-6-甲酰胺24mg。該化合物以及采用相同方法得到的化合物的結(jié)構(gòu)和物理數(shù)據(jù)如表3所示。實(shí)施例5N，N-二丙基-6，11-二氫-5-硫代-11-氮雜-苯并〔a〕芴-6-甲酰胺5，5-二氧化物的制備在冰水浴條件下，用20分鐘邊攪拌邊向N，N-二丙基-6，11-二氫-5-硫代-11-氮雜-苯并〔a〕芴-6-甲酰胺500mg的二氯甲烷30ml溶液中滴加間氯過苯甲酸(含有70％以上)710mg的二氯甲烷30ml溶液。再在室溫下攪拌1小時(shí)后，減壓濃縮反應(yīng)混合物，將殘?jiān)苡谝宜嵋阴?，用飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥后，過濾除去干燥劑，減壓濃縮濾液。采用色譜法(硅膠WacogelC200(和光純藥生產(chǎn))，展開溶劑己烷-乙酸乙酯=3∶1～1∶1)精制殘?jiān)螅靡宜嵋阴?己烷重結(jié)晶，得到N，N-二丙基-6，11-二氫-5-硫代-11-氮雜-苯并〔a〕芴-6-甲酰胺5，5-二氧化物230mg。該化合物以及采用相同方法得到的化合物的結(jié)構(gòu)和物理數(shù)據(jù)如表2所示。表1*1化合物編號(hào)*2化合物合成所用的實(shí)施例編號(hào)*3重結(jié)晶溶劑AcOEt=乙酸乙酯，Hex=己烷，Et2O=二乙基醚*4化合物6的光學(xué)活性體(化合物7=(-)-化合物6，化合物8=(+)-化合物6)*5柱精制、干燥后，放置使之結(jié)晶。另外，R1、R2中，n-Hex=正己基、n-Pr=正丙基。表2*1化合物編號(hào)*2化合物合成所用的實(shí)施例編號(hào)*3重結(jié)晶溶劑AcOEt=乙酸乙酯，Hex=乙烷，Et2O=二乙基醚*4:1鹽酸鹽另外，R1、R2中，n-Hex=正已基、n-Pr=正丙基。表3*1化合物編號(hào)*2化合物合成所用的實(shí)施例編號(hào)*3重結(jié)晶溶劑AcOEt=乙酸乙酯，Hex=己烷*4柱精制、干燥后，放置，進(jìn)行結(jié)晶化。另外，R1、R2中，n-Hex=正己基、n-Pr=正丙基。試驗(yàn)例〔MDR受體結(jié)合試驗(yàn)〕使用從大鼠大腦皮層制得的粗線粒體部分作為受體標(biāo)準(zhǔn)品。使用[3H]PK11195作為[3H]標(biāo)識(shí)配體。使用[3H]標(biāo)識(shí)配體的結(jié)合試驗(yàn)按照J(rèn)ournalofPharmacologyandExperimentalTherapeutics，262，971(1992年)記載的下述方法進(jìn)行。受體標(biāo)準(zhǔn)品的配制使用聚四氟乙烯勻化器，用含有其濕重量10倍容量的0．32M蔗糖的10mMHepes緩沖液(pH7．4)，將大腦皮層勻化。以900×g將勻漿離心分離10分鐘。將得到的上清液以9000×g離心分離10分鐘。將沉渣懸濁于Hepes緩沖液中，使蛋白質(zhì)濃度達(dá)到1mg／ml，以12000×g離心分離10分鐘。將得到的沉渣懸濁于50mMHepes緩沖液(pH7．4)中，得到粗線粒體部分。MDR結(jié)合試驗(yàn)使線粒體標(biāo)準(zhǔn)品(1．0mg蛋白質(zhì)／ml)、[3H]PK11195(2nM)和被測(cè)藥物在4℃下反應(yīng)90分鐘。反應(yīng)結(jié)束后，用經(jīng)0．3％聚乙烯亞胺處理過的玻璃濾器(GF／B)抽濾，用液體閃爍計(jì)測(cè)定濾紙的反射能。以10μMPK11195存在下反應(yīng)時(shí)的結(jié)合作為[3H]PK11195的非特異結(jié)合，以總結(jié)合與非特異結(jié)合的差作為特異結(jié)合。通過使一定濃度的[3H]PK11195(2nM)與濃度改變的被測(cè)藥物在上述條件下反應(yīng)得到抑制曲線，由該抑制曲線求出50％抑制[3H]PK11195結(jié)合的被測(cè)藥物濃度(IC50)，結(jié)果如表4所示。表4<tablesid="t01"num="002"><table>Comp．No．MDRIC50(nM)02030405060708091011121415162122232526272855．938．50．4430．3683．7642．32．1513．820．113．922．11．354．981．351．121．231．3573．942．335．112．6</table></tables>權(quán)利要求l、下式表示的含氮四環(huán)化合物或其可藥用鹽。式中，Y1-Y2-Y3表示N-C=N或式C=C-NR3(式中R3表示氫原子、C1-5的烷基或C2-10的含氮烷基)所示基團(tuán)；Y4表示S、SO、SO2、CH2或NR4(式中R4表示C1-5的烷?；駽1-5的烷基)所示基團(tuán)；R1和R2相同或不同，表示氫原子、C1-10的烷基、C3-15的烷氧基烷基或C3-16的烷基氨基烷基，或者R1和R2與相鄰的氮原子一同形成環(huán)狀氨基；X1和X2相同或不同，表示氫原子、C1-5的烷基、C1-5的烷氧基或鹵素原子，n表示0、1或2。全文摘要本發(fā)明提供下式表示的含氮四環(huán)化合物或其可藥用鹽。[式中,Y文檔編號(hào)C07D495/04GK1280567SQ98811795公開日2001年1月17日申請(qǐng)日期1998年12月3日優(yōu)先權(quán)日1997年12月3日發(fā)明者中里篤郎,大久保武利,熊谷利仁,茶木茂之,富澤一雪,永峰政志,后藤誠,近藤國(guó)晃,吉田正德申請(qǐng)人:大正制藥株式會(huì)社,日本農(nóng)藥株式會(huì)社