專利名稱：7－表－哥納香二醇及其衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新穎的7-表-哥納香二醇及其衍生物。該類化合物初步顯示了有抗癌作用。
自1982年Shivanan D.Jolad等在番荔枝科植物中發(fā)現(xiàn)第一個番荔枝內(nèi)酯化合物以來(見1982，J.org.Chem，473151-3153)，由于番荔枝內(nèi)酯類化合物對9B淋巴白血病，9kB鼻咽癌，A549肺癌，MCF-7乳腺癌，HF29結(jié)腸癌，L-1210白血病等有很強的抑制活性，有幾個番荔枝內(nèi)酯Acetogenin類化合物，體內(nèi)試驗活性比紫杉醇強40-300倍，如布拉化辛(Bullatacin)對9KB鼻咽癌活性ED50/10-15ug/ml，遠較美登素和紫杉醇強。因此，對番荔枝科植物中活性成分的研究已成為國際上植物化學研究的一個熱點。T.W.Sam等報道(見文獻1987，Tetrahedron Letters28(22)2541-2544)，從番荔枝科哥納香屬植物中得到抗癌成分番荔枝內(nèi)酯，以及有打胎作用的苯乙烯吡喃酮類化合物，但均未有抗癌作用于的7-表-哥納香二醇及其衍生物的報道。
本發(fā)明的目的在于提供-類新的具有藥用價值的7-表-哥納香二醇及其衍生物。
本發(fā)明的新的7-表-哥納香二醇及其衍生物用下述通式(I)表示
式中，R1＝H，7’-(5’-羥基二氫黃酮)，7’-(5’-乙酰氧基二氫黃酮)；R2＝H，COCH3。
本發(fā)明優(yōu)選化合物之一7-表-哥納香二醇，R1＝H，R2＝H。
本發(fā)明優(yōu)選化合物之二金平哥納香乙素，R1＝7’-(5’-羥基二氫黃酮)，R2＝H。
本發(fā)明優(yōu)選化合物之三乙酰金平哥納香乙素，R1＝7’-(5’-乙酰氧基二氫黃酮)，R2＝COCH3。
本發(fā)明上述化合物7-表-哥納香二醇和金平哥納香乙素是由下述過程得到的
(1)金平哥納香(Goniothalamus leiocarpus)樹皮5.0kg----曬干、粉碎----95％酒精提取----硅膠柱層析----氯仿-甲醇(955)洗脫----氯仿重結(jié)晶----7-表-哥納香二醇(500毫克)和金平哥納香乙素(2克)。
(2)金平哥納香乙素(500毫克)----醋酐(10)+吡啶(10毫升)----放置24小時---氯仿/水分配----用蒸餾水反復洗滌氯仿層----蒸干氯仿層----乙酰金平哥納香乙素(510mg)。
本發(fā)明7-表-哥納香二醇和金平哥納香乙素體外抗癌活性試驗結(jié)果如下1、對HL-60(人早幼粒白血病)細胞的作用療效評價抑制率＝(對照組細胞數(shù)-用藥組細胞數(shù))/對照組細胞數(shù)×100％實驗方法臺盼藍排染法。于96孔板中每孔加入1.2×104cells/ml濃度的細胞，以不同濃度的藥物作用6天后，以臺盼藍排染法計數(shù)活細胞。細胞株HL-60，人急性早幼粒白血病實驗設(shè)計藥物濃度分為100，10，1，0.1，0.01(μg/ml)五組，懸浮細胞用臺盼蘭排染法計活細胞數(shù)，根據(jù)療效評價計算抑制率。觀察在不同濃度下藥物對腫瘤細胞生長的抑制率。測試單位中國科學院上海藥物研究所藥理I室測試時間1998.10.測試結(jié)果
2、對Be17404，Bcap32和HeLa癌細胞的作用療效評價抑制率＝(對照組OD值-用藥組OD值)/對照組OD值×100％實驗方法MTT法.于96也板中每孔加入1.2×105cells/ml濃度的細胞，以不同濃度的藥物作用3天后加MTT工作液，酶標儀測OD值。細胞株Bel-7404人肝癌細胞Bcap-32人乳癌細胞HeLa人宮頸癌細胞實驗設(shè)計藥物濃度分為100，10，0.1，0.01(μg/ml)五組，測定細胞OD值，根據(jù)療效評價計算抑制率，觀察在不同濃度下藥物對腫瘤細胞生長的抑制率。測試單位中國科學院上海藥物研究所藥理I室測試時間1998.11.測試結(jié)果(見圖)各藥物濃度下的OD540值 抑制率(％)7404cell Ctrl 100 10 10.1 0.01100 10 1 0.1 0.01 IC500.617-表-哥納香二醇 0.02 0.16 0.45 0.47 0.5197 74 26 23 160.79金平哥納香乙素 0.01 0.25 0.40 0.49 0.5498 59 34 20 110.96各藥物濃度下的OD540值 抑制率(％)Bcap32cell Ctrl 100 10 1 0.1 0.01 100 10 1 0.1 0.01 IC500.557-表-哥納香二醇0.27 0.35 0.36 0.38 0.4851 36 35 31 13＞100金平哥納香乙素 0.08 0.43 0.47 0.49 0.4385 22 15 11 2212.8各藥物濃度下的OD540值 抑制率(％)Hela cell Ctrl 100 10 10.1 0.01 100 10 1 0.1 0.01 IC500.577-表-哥納香二醇0.26 0.34 0.49 0.45 0.47 54 40 14 21 1830金平哥納香乙素 0.00 0.25 0.52 0.41 0.43 100 56 9 28 183從上述結(jié)果中看出7-表-哥納香二醇和金平哥納香乙素對7404人肝癌細胞有較強的抑制作用；金平哥納香乙素對Bcap-32人乳癌細胞及Hela人宮頸癌細胞亦有一定抑制作用。
實施例一化合物7-表-哥納香二醇的理化性質(zhì)，數(shù)據(jù)金平哥納香(Goniothalamus leiocarpus)樹皮5.0kg----曬干、粉碎----95％酒精提取----硅膠柱層析----氯仿-甲醇(95∶5)洗脫----氯仿重結(jié)晶----7-表-哥納香二醇(500毫克)和金平哥納香乙素(2克)。
表一、7-表-哥納香二醇(7-epi-goniodiol)(1)的核磁共振氫譜(400兆赫茲)和碳譜(100兆赫茲，化學位移ppm，偶合常數(shù)Hz，溶劑∶氘代吡啶)數(shù)據(jù)
化合物名稱7-表-哥納香二醇化學名6R*-(7S*，8R*-二氫-7，8-二羥基苯乙烯基)-5，6-二氫-2-吡喃酮分子式C13H14O4；分子量234熔點108-110℃；比旋光[α]D20+96.4°(c 0.3，氯仿)快原子轟擊質(zhì)譜(質(zhì)荷比)235[MH]+紅外光譜最大吸收頻率值(溴化鉀)3500，1705，1626厘米-1紫外光譜最大吸收波長值(甲醇)206.5(logε3.20)納米相對構(gòu)型6，7-蘇式-7，8-赤式；或6R*，7S*，8R*實施例二金平哥納香乙素(2)的理化性質(zhì)、數(shù)據(jù)金平哥納香(Goniothalamus leiocarpus)樹皮5.0kg----曬干、粉碎----95％酒精提取----硅膠柱層析----氯仿-甲醇(95∶5)洗脫----氯仿重結(jié)晶----7-表-哥納香二醇(500毫克)和金平哥納香乙素(2克)。表二、金平哥納香乙素(leiocarpin B)(2)的核磁共振氫譜(400兆赫茲)和碳譜(100兆赫茲)數(shù)據(jù)(化學位移ppm，偶合常數(shù)Hz，溶劑氘代吡啶)
名稱金平哥納香乙素化學名稱6R*-{7S，8R*-二氫-7-羥基-8-[氧-7’-(5’-羥基-3’S*-二氫黃酮)-苯乙烯基]}-5，6-二氫-2-吡喃酮分子式C28H24O7；分子量472熔點189-191℃，比旋光值[α]D24+28.8°(c 0.52，氯仿)電離質(zhì)譜(質(zhì)荷比)472；高分辨電離質(zhì)譜(質(zhì)荷比)472.1536(計算值472.1552)紅外光譜最大吸收頻率值(溴化鉀)3500；1700厘米-1紫外光譜最大吸收波長值(甲醇)210(logε3.65)，288.5(logε3.33)，317.5(logε2.59)納米
實施例三乙酰金平哥納香乙素(3)的理化性質(zhì)、數(shù)據(jù)用實施例一得到的金平哥納香乙素(500毫克)----醋酐(10)+吡啶(10毫升)----放置24小時---氯仿/水分配----用蒸餾水反復洗滌氯仿層----蒸干氯仿層----乙酰金平哥納香乙素(510mg).。表三、乙酰金平哥納香乙素(leiocarpin B acetate)(3)的核磁共振氫譜(400兆赫茲)和碳譜(100兆赫茲)數(shù)據(jù)(化學位移ppm，偶合常數(shù)Hz，溶劑氘代氯仿)
名稱乙酰金平哥納香乙素化學名稱6R*-{7S，8R*-二氫-7-乙酰氧基-8-[氧-7’-(5’-乙酰氧基-3’S*-二氫黃酮)-苯乙烯基]}-5，6-二氫-2-吡喃酮分子式C32H28O；分子量556熔點105-107℃，比旋光值[α]D17+71.0°(c 0.07，氯仿)電離質(zhì)譜(質(zhì)荷比)556紅外光譜最大吸收頻率值(溴化鉀)1753，1685，1618，1333，1155，1029，701厘米-1紫外光譜最大吸收波長值(甲醇)209.5(logε4.12)，234.5(logε4.57)，271.5(logε4.50)，305(logε3.50)納米
權(quán)利要求
1.如通式(I)所示的7-表-哥納香二醇及其衍生物，
式中，R1＝H，7’-(5’-羥基二氫黃酮)，7’-(5’-乙酰氧基二氫黃酮)；R2＝H，COCH3。
2.按照權(quán)利要求1的化合物，其中R1＝H，R2＝H。
3.按照權(quán)利要求1的化合物，其中R1＝7’-(5’-羥基二氫黃酮)，R2＝H。
4.按照權(quán)利要求1的化合物，其中R1＝7’-(5’-乙酰氧基二氫黃酮)，R2＝COCH全文摘要
本發(fā)明涉及通式(Ⅰ)所示的新穎的7－表—哥納香二醇及其衍生物。式中,R
文檔編號C07D309/32GK1266060SQ99103909
公開日2000年9月13日 申請日期1999年3月3日 優(yōu)先權(quán)日1999年3月3日
發(fā)明者穆青, 唐衛(wèi)東, 李朝明, 胥彬, 孫漢董, 樓麗廣, 鄭惠蘭 申請人:中國科學院昆明植物研究所, 中國科學院上海藥物研究所