專(zhuān)利名稱：吡啶正離子型多肽縮合劑、合成及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一類(lèi)多肽縮合劑，即吡啶正離子型多肽縮合劑、合成及其應(yīng)用。
隨著多肽以及蛋白質(zhì)化學(xué)的發(fā)展，人們?cè)O(shè)計(jì)、合成了多種類(lèi)型的縮合劑以滿足多肽以及蛋白質(zhì)合成的要求。例如1955年由Sheehan和Hess首先提出的縮合劑二環(huán)己基碳二亞胺DCC就很有代表性，至今仍被廣泛使用。但DCC作縮合劑用于多肽合成會(huì)產(chǎn)生很多副反應(yīng)，如反應(yīng)過(guò)程中會(huì)形成N-?；甯碑a(chǎn)物，發(fā)生消旋。如D.R.Detar，R.Silverstein，F(xiàn).F.Rogers，J.Am.Chem.Soc.，1966，88，1024.和D.R.Detar，R.Silverstein，J.Am.Chem.Soc.，1966，88，1020.中報(bào)道的DCC活化Asn和Gln時(shí)，還能引起ω-酰胺基脫水形成氰基的副反應(yīng)。DCC法的另一個(gè)缺點(diǎn)是反應(yīng)生成的N，N’-二環(huán)己基脲DCU在大多數(shù)有機(jī)溶劑中溶解度很小，有時(shí)會(huì)混在產(chǎn)物中而很難除盡。為此人們?cè)贒CCI的結(jié)構(gòu)上進(jìn)行了改進(jìn)，發(fā)展了一些水溶性的碳二亞胺，如N-cyclohexyl-N’-(4-diethylaminocyclohexyl)-carbodiimide，N-cyclohexyl-N’-[2-(4-methyl morpholini)-ethyl]carbodiimide tosylate和N-ethyl-N’-(3-dimethyl aminopropyl)-carbodiimide來(lái)代替DCC，但都未得到廣泛的應(yīng)用。
自1975年，Castro等人設(shè)計(jì)、合成了第一個(gè)基于HOBt的磷正離子型縮合劑BOP以來(lái)，以1-羥基苯并三唑HOBt為活化酯的磷正離子型和碳正離子型試劑迅速發(fā)展，如Coste，J.，Le-Nguyen，D.AndCastro，B.，Tetrahedron Lett.，1990，31，205等文獻(xiàn)中報(bào)道了PyBOP，HBTU，HBPyU，HBPipU，HBMDU，HBMTU等以HOBt為活化酯的縮合劑。但在這類(lèi)試劑中，除BOP和HBTU在合成中已被應(yīng)用外，其余的試劑都未被普遍使用。而B(niǎo)OP和HBTU也存在一些缺點(diǎn)，如在文獻(xiàn)Rowell，R.M.，Appl.Biochem.Biotechnol，1984，9，447；Oustrin，M.L.，Moisand，C.，Cros，M.L.and Bonnefoux，J.，Ann.Pharm.Fr.，1972，30，685；Moisand，A.，Moisand，C.and Pitet，G.，Ann.Pharm.Fr.，1970，28，575中指出在制備和使用BOP時(shí)，會(huì)遇到有致癌毒性的六甲基磷酰三胺。HBTU也有同樣的問(wèn)題，在制備和使用過(guò)程中，遇到的四甲基脲素也是具有細(xì)胞毒的物質(zhì)。產(chǎn)生消旋也是這類(lèi)試劑的一個(gè)缺點(diǎn)。在young’s test中，Chen，S.Q.andXu，J.C.，Tetrahedron Lett.，1992，33，647-650用BOP試劑發(fā)現(xiàn)有39.8％的消旋產(chǎn)物，而HBTU試劑也有25.4％的消旋產(chǎn)物。Galpin，I.J.，Gordon，P.F.，Ramage，R.and Thorpe，W.D.，Tetrahedron，1976，32，2417中Galpin等人報(bào)道在用BOP縮合Z-Gly-Ala-OH和H-Leu-OCH2Ph的過(guò)程中有29％的消旋，Steinauer，R.，Chen，F(xiàn).M.F.and Benoiton，N.L.，Int.J.Peptide Protein Res.，1989，34，295中Steinauer等人認(rèn)為BOP試劑由于本身的消旋程度而導(dǎo)致在肽的片段縮合中不適合性。
近年來(lái)，人們又開(kāi)發(fā)了一些基于7-氮雜-1-羥基苯并三唑HOAt的磷正離子型和碳正離子型縮合劑，如Albericio，F(xiàn).，Cases，M.，Alsina，J.，Triolo，S.A.，Carpino，L.A.and Kates，S.A.，Tetrahedron Lett.，1997，38，4853；Carpino，L.A.，El-Faham，A.，Minor，C.A.and Albericio，F(xiàn).，J.Chem.Soc.Chem.Commun.，1994，201；Angell，Y.M.，Thomas，T.L.and Rich，D.H.，PeptidesChemistry，structure and Biology，Pravin，T.P.，Kaumaya andHodges，R.S.(Eds)，MayflowerScientific Ltd.，1996，p88；等中公開(kāi)的AOP，PyAOP，HATU，HAPipU，HAPyU，HAMDU，HAMTU等試劑。此類(lèi)試劑較相應(yīng)的基于HOBt的縮合劑具有較高的活性和較小的消旋，但制備較困難，穩(wěn)定性較差，價(jià)格也比較昂貴。Carpino，L.A.，J.Am.Chem.Soc，1993，115，4397；Raman，P.，Stokes，S.S.，Angll，Y.M.，F(xiàn)lentke，G.R.and Rich，D.H.，J.Org.Chem.，1998，63，5734；Angll，Y.M.，Thomas，T.L.，F(xiàn)lentke，G.R.and Rich，D.H.，Am.Chem.Soc.，1995，117，7279中主要是將HOAt作為添加劑與DIPCDI，DCC等縮合劑聯(lián)合使用。Carpino，L.A.，El-Faham，A.，Minor，C.A.and Albericio，F(xiàn).，J.Chem.Soc.Chem.Commun.，1994，201中證明了碳正離子型縮合劑與相應(yīng)的磷正離子型縮合劑相比具有更高的活性。目前基于HOBt或HOAt的碳正離子型縮合劑均為脲正離子類(lèi)型，其結(jié)構(gòu)通式如下
A＝PF6-，BF4-；X＝C，N ；R1，R2＝alkyl由于碳正離子鄰位兩個(gè)含有孤對(duì)電子的氮原子的存在，對(duì)此碳正離子具有極大的穩(wěn)定作用，并且分子主要氮正離子形式存在，但由于碳正離子是此類(lèi)縮合劑參與形成酰胺鍵的反應(yīng)時(shí)的反應(yīng)中心，因此人們習(xí)慣稱此類(lèi)縮合劑為碳正離子型縮合劑。
由于兩個(gè)氨基取代基造成的兩個(gè)等價(jià)的共振結(jié)構(gòu)導(dǎo)致此類(lèi)化合物的穩(wěn)定，也可以說(shuō)是鈍化Wijkmans，J.C.H.M.，Blok，F(xiàn).A.A.，van derMarel，G.A.，van Boom，J.H.and Bloemhoff，W.，Tetrahedron Lett.，1995，36，4643；Wijkmans，J.C.H.M.，Kruijtzer，A.W.，van derMarel，G.A.，van Boom，J.H.and Bloemhoff，W.，Recl.Trav.Chim.Pays-Bas，1994，113，394中在活化酯部分引入三氟甲基，硝基等吸電子取代基來(lái)提高縮合劑的活性。在ZL99113545.8中我們將脲正離子縮合劑中的一個(gè)氨基用烷基、芳基甚至氫取代來(lái)進(jìn)一步提高縮合劑的活性，成功設(shè)計(jì)并合成了一類(lèi)亞胺正離子型縮合劑，實(shí)驗(yàn)證明這類(lèi)縮合劑具有較好的性能。
此類(lèi)縮合劑雖然在普通氨基酸間的縮合中具有較好的性能，可對(duì)于有空間位阻的多肽合成結(jié)果卻不能令人滿意。為此我們?cè)谝验_(kāi)發(fā)出的脲、磷和亞胺正離子型縮合劑的基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)合成了吡啶正離子型多肽縮合劑。
本發(fā)明的目的就是提供一類(lèi)新型的吡啶正離子型多肽縮合劑，其分子通式為
其中R1＝H、CnH2n+1，n＝1-5、苯基、取代苯基；R2＝
其中R5、R6＝CF3、NO2，X＝CH、N，
其中R7、R8＝H、CnH2n+1，n＝1-5、COOEt、COOR、CF3、NO2，
其中R9、R10＝NO2、CF3，
R2也可以是F、Cl、Br；A＝SbCl6、SbF6、CF3SO3、PF6、BPh4、BF4。
本發(fā)明的另一目的是提供了新型吡啶正離子型多肽縮合劑相應(yīng)的合成方法，即以2-鹵吡啶為原料，在0-70℃的條件下與N-烷基化試劑反應(yīng)后，和/或在-30-25℃的溫度下與相應(yīng)的活化組分反應(yīng)得到相應(yīng)的縮合劑。反應(yīng)式如下
其中N-烷基化試劑為(R1)3O+BF4-、(R1)3O+SbCl6-、(R1)3O+SbF6-、(R1)3O+BPh4-、CF3SO3R1、(R1)3O+PF6-；有機(jī)溶劑為極性非質(zhì)子性溶劑；活化組分為含有羥基的活性組分，即KR2’或HR2’+有機(jī)堿，R2’為
其中R5、R6＝CF3、NO2，X＝CH、N，
其中R7、R8＝H、CnH2n+1，n＝1-5、COOEt、COOR、CF3、NO2，
R9、R10＝NO2、CF3，
有機(jī)堿是三乙胺、二異丙基乙基胺，吡啶，N-甲基嗎啡啉，N-甲基咪唑。
當(dāng)R2為F、Cl、Br的吡啶正離子多肽縮合劑時(shí)，其合成方法是2-鹵吡啶為原料，在有機(jī)溶劑、0-70℃的條件下與N-烷基化試劑反應(yīng)后得到，反應(yīng)式如下
其中X＝F、Cl、Br；R1＝H、CnH2n+1，n＝1-5、苯基、取代苯基；有機(jī)溶劑為極性非質(zhì)子性溶劑；N-烷基化試劑為(R1)3O+BF4-、(R1)3O+SbCl6-、(R1)3O+SbF6-、(R1)3O+BPh4-、CF3SO3R1、(R1)3O+PF6-。
本發(fā)明的另一目的是該類(lèi)正離子型多肽縮合劑可用于多肽的合成，尤其是R2為F、Cl、Br的吡啶類(lèi)正離子多肽縮合劑，其主要應(yīng)用于有空間位阻的含N-烷基化氨基酸和α，α-二烷基化氨基酸的多肽的合成。這類(lèi)縮合劑用于多肽合成時(shí)的通用合成步驟為將N-端保護(hù)的氨基酸或多肽片段，C-端保護(hù)的氨基酸或多肽片段酯的鹽酸鹽或三氟醋酸鹽和縮合劑溶于DMF或CH2Cl2中，在低溫下緩慢加入有機(jī)堿二異丙基乙基胺或2，6-二甲基吡啶，加完后低溫反應(yīng)五分鐘，然后室溫反應(yīng)，通過(guò)薄層色譜鑒定反應(yīng)終點(diǎn)，即得到相應(yīng)的多肽。
本發(fā)明所提供的新型吡啶正離子型多肽縮合劑無(wú)論在反應(yīng)活性方面，還是在用于肽的合成時(shí)產(chǎn)品的消旋程度方面都優(yōu)于目前已開(kāi)發(fā)出的脲正離子和磷正離子型縮合劑。尤其是R2為F、Cl、Br的吡啶正離子多肽縮合劑，其可應(yīng)用于有空間位阻的含N-烷基化氨基酸和α，α-二烷基化氨基酸的多肽的合成，既能用于液相合成中也能用于固相合成中。此外這類(lèi)縮合劑還具有合成簡(jiǎn)便，原料廉價(jià)易得，室溫下穩(wěn)定，使用方便等諸多優(yōu)點(diǎn)，是一類(lèi)新型的反應(yīng)性能和應(yīng)用性能均十分優(yōu)良的，值得進(jìn)一步研究開(kāi)發(fā)與廣泛應(yīng)用的縮合劑。
以下實(shí)施例有助于理解本發(fā)明，但不限于本發(fā)明的內(nèi)容實(shí)施例1
在室溫條件下將0.0176mol的2-溴-吡啶加入到0.0176mol的Et3O+BF4-的ClCH2CH2Cl溶液中，油浴加熱至60℃，反應(yīng)十分鐘，自然冷卻至室溫，有大量產(chǎn)品析出，得無(wú)色晶體2-溴-1-乙基吡啶正離子四氟硼酸鹽BEP為4.588g，收率95.2％，mp 103-104℃1H NMR(300MHz，d6-acetone，TMS)1.69(t，J＝7.3Hz，3H，CH2CH3)，5.01(q，J＝7.3Hz，CH2CH3)，8.24(m，1H，aryl)，8.53-8.57(m，2H，aryl)，9.32(d，J＝6.9Hz，aryl)；IR(KBr)ν＝3106，1617，1571，1500，1467，1296，1050，786，718，521cm-1；FAB-MS186[M-BF4-]，188[M-BF4-+2]。
實(shí)施例2
在0℃條件下將0.0539mol的2-氟-吡啶加入到0.0539mol Et3O+BF4-的CH2Cl2溶液中，室溫反應(yīng)一小時(shí)后冷卻至0℃，有大量產(chǎn)品析出，得無(wú)色晶體2-氟-1-乙基吡啶正離子四氟硼酸鹽10.837g，收率94.7％，mp 38-40℃.
1H NMR(300MHz，d6-acetone，TMS)1.57(t，J(H，F(xiàn))＝70.7Hz，3J(H，H)＝7.3Hz，3H，CH2CH3)，4.62(q，J(H，F(xiàn))＝141Hz，3J(H，H)＝7.3Hz，CH2CH3)，7.10-9.04(m，4H，aryl).19F NMR(CF3COOH)δ＝75.2ppm(s，1F)IR(KBr)ν＝3039，1643，1587，1519，1475，11456，1307，1035，847，786，725，534，522cm-1.FAB-MS126[M-BF4-]實(shí)施例3
第一步反應(yīng)同實(shí)施例2，將10.0mmol的2-氟-1-乙基吡啶正離子六氯銻酸鹽溶于30ml干燥乙腈中，攪拌冷卻至-30℃，加入10.0mmol 1-羥基-7-氮雜苯并三唑鉀鹽，低溫反應(yīng)后，撤去冰浴，室溫反應(yīng)2-4小時(shí)，過(guò)濾，濾液濃縮至結(jié)晶狀固體析出，得產(chǎn)品4.77克。收率為80％。
1HNMRδ＝8.01-9.12(m，7H，aryl)，4.79(q，3J(H，H)＝7Hz，2H，N-CH2)，1.50(t，3J(H，H)＝7Hz，3H，β-CH3)ppm；FABMS242[M-SbCl6-]；elemental analysis calcd. for C12H12Cl6N5OSb(576.677)C 24.99，H 2.10，N 12.14foundC 25.21，H 2.14，N 11.98實(shí)施例4第一步反應(yīng)同實(shí)施例1，第二步反應(yīng)步驟和條件同實(shí)施例3，所不同的是反應(yīng)溫度為-20-20℃，N-烷基化試劑Et3O+SbF6-，活化組份為
，產(chǎn)物為
1HNMRδ＝8.12-9.04(m，6H，aryl)，4.95(q，J＝7Hz，2H，N-CH2)，1.68(t，J＝7Hz，3H，β-CH3)ppm；FABMS354[M-SbF6-]；elemental analysis calcd.for C14H11F9N5O5Sb(589.957)C 28.50，H 1.88，N 11.87foundC 28.31，H 2.04，N 11.99實(shí)施例5第一步反應(yīng)同實(shí)施例2，第二步反應(yīng)步驟和條件同實(shí)施例3，所不同的是反應(yīng)溫度為-25℃-15℃，N-烷基化試劑Et3O+SbCl6-，活化組份為
產(chǎn)物為
1H NMRδ＝8.05-9.02(m，4H，aryl)，6.57(s，1H，aryl)，4.90(q，J＝7Hz，2H，N-CH2)，4.27(q，J＝7Hz，2H，CH2)，1.65(t，J＝7Hz，3H，β-CH3)，1.30(t，J＝7Hz，3H，CH3)ppm；FABMS354[M-SbCl6-］；elemental analysis calcd.for C12H15Cl6N4O3Sb(597.692)C 24.11，H 2.53，N 9.37foundC 24.00，H 2.53，N 9.21實(shí)施例6第一步反應(yīng)同實(shí)施例2，所不同是有機(jī)溶劑為CH3CN，第二步反應(yīng)步驟和條件同實(shí)施例3，所不同的是反應(yīng)溫度為-15℃-25℃，N-烷基化試劑Et3O+SbCl6-，活化組份為
，產(chǎn)物為
1H NMRδ＝8.11-9.14(m，4H，aryl)，4.97(q，J＝7Hz，2H，N-CH2)，1.71(t，J＝7Hz，3H，β-CH3)ppm；FABMS377[M-SbCl6-］；379[M-SbCl6-+2]；381[M-SbCl6-+4]；383[M-SbCl6-+6]；elemental analysis calcd. for C13H9Cl10N4OSb(713.470)C 21.89，H 1.27，N 7.85foundC 22.03，H 1.25，N 7.79實(shí)施例7第一步反應(yīng)同實(shí)施例1，所不同的是有機(jī)溶劑為四氫呋喃，第二步反應(yīng)步驟和條件同實(shí)施例3，所不同的是反應(yīng)溫度為-10℃-20℃，N-烷基化試劑Et3O+SbCl6-，活化組份為
+二異丙基乙基胺，產(chǎn)物為
1H NMRδ＝7.79-9.02(m，8H，aryl)，4.88(q，J＝7Hz，2H，N-CH2)，1.69(t，J＝7Hz，3H，β-CH3)ppm；FABMS269[M-SbCl6-]；elemental analysis calcd. for C15H13Cl6N2O3Sb(603.696)C 29.84，H 2.17，N 4.64foundC 30.12，H 2.26，N 4.65實(shí)施例8
第一步反應(yīng)同實(shí)施例1，所不同的是2-鹵代吡啶為
，反應(yīng)溫度為0-70℃，有機(jī)溶劑為乙酸乙酯，第二步反應(yīng)步驟和條件同實(shí)施例3，所不同的是反應(yīng)溫度為-5℃-室溫，，N-烷基化試劑Et3O+SbCl6-，活化組份為
產(chǎn)物為
1H NMRδ＝8.19-9.21(m，6H，aryl)，5.03(q，J＝7Hz，2H，N-CH2)，1.77(t，J＝7Hz，3H，β-CH3)ppm；FABMS358[M-SbCl6-]；elemental analysis calcd. for C14H11Cl6F3N3O5Sb(692.669)C 24.28，H 1.60，N 6.07foundC 24.34，H 1.66，N 6.17實(shí)施例9第一步反應(yīng)同實(shí)施例1，所不同的是2-鹵代吡啶為
，反應(yīng)溫度為0-70℃，有機(jī)溶劑為CH2Cl2，第二步反應(yīng)步驟和條件同實(shí)施例3，所不同的是反應(yīng)溫度為-5℃-室溫，N-烷基化試Et3O+SbCl6-，活化組份為
，產(chǎn)物為
1H NMRδ＝7.97-9.02(m，4H,aryl)，4.96(q，J＝7Hz，2H，N-CH2)，1.71(t，J＝7Hz，3H，β-CH3)ppm；FABMS370[M-SbCl6-］；372[M-SbCl6-+2]；374[M-SbCl6-+4]；376[M-SbCl6-+6]；378[M-SbCl6-+8]；elemental analysis calcd. for C13H9Cl11NOSb(706.903)C 22.09，H 1.28，N 1.98foundC 22.31，H 1.30，N 1.98實(shí)施例10第一步反應(yīng)同實(shí)施例2，所不同的是有機(jī)溶劑為CH3CN，第二步反應(yīng)步驟和條件同實(shí)施例3，所不同的是反應(yīng)溫度為-10℃-室溫，，N-烷基化試劑Et3O+SbCl6-，活化組份為
+吡啶，產(chǎn)物為
1HNMRδ＝7.45-8.95(m，7H，aryl)，4.90(q，J＝7Hz，2H，N-CH2)，1.66(t，J＝7Hz，3H，β-CH3)ppm；FABMS336[M-SbCl6-]；elemental analysis calcd.for C15H12Cl6F6NOSb(670.674)C 26.86，H 1.80，N 2.09foundC 26.66，H 1.62，N 2.13實(shí)施例11第一步反應(yīng)同實(shí)施例2，所不同的是反應(yīng)溫度為0-40℃，有機(jī)溶劑為四氫呋喃，第二步反應(yīng)步驟和條件同實(shí)施例3，所不同的是反應(yīng)溫度為0-25℃，，N-烷基化試劑Et3O+SbCl6-，活化組份為
，產(chǎn)物為
1H NMRδ＝8.23-9.24(m，6H,aryl)，5.16(q，J＝7Hz，2H，N-CH2)，1.80(t，J＝7Hz，3H，β-CH3)ppm；FABMS290[M-SbCl6-]；elemental analysis calcd. for C13H9Cl6F5NOSb(624.63)C 25.00，H 1.45，N 2.24foundC 25.21，H 1.62，N 12.50實(shí)施例12第一步反應(yīng)同實(shí)施例2，所不同的是反應(yīng)溫度為室溫-50℃，有機(jī)溶劑為乙酸乙酯，第二步反應(yīng)步驟和條件同實(shí)施例3，所不同的是N-烷基化試劑Et3O+SbCl6-，活化組份為
+N-甲基嗎啡啉，產(chǎn)物為
1H NMRδ＝8.01-8.99(m，4H，aryl)，4.98(q， J＝7Hz，2H，N-CH2)，2.75(s，3H，CH3)；2.15(s，3H，CH3)1.62(t，J＝7Hz，3H，β-CH3)ppm；FABMS247[M-SbCl6-]；elemental analysis calcd. for C12H15Cl6N4O2Sb(581.693)C 24.78，H 2.60，N 9.63foundC 24.61，H 2.55，N 9.57實(shí)施例13第一步反應(yīng)同實(shí)施例1，所不同的是2-鹵代吡啶為
，反應(yīng)溫度為0-60℃，有機(jī)溶劑為CH3CN，第二步反應(yīng)步驟和條件同實(shí)施例3，所不同的是反應(yīng)溫度為-5℃-室溫，N-烷基化試劑Et3O+SbCl6-，活化組份為
，產(chǎn)物為
1H NMRδ＝8.23-9.31(m，4H，aryl)，5.09(q，J＝7Hz，2H，N-CH2)，1.88(t，J＝7Hz，3H，β-CH3)ppm；FABMS377[M-SbCl6-］；elemental analysis calcd. for C13H9Cl10N4OSb(713.470)C 21.89，H 1.27，N 7.85foundC 22.03，H 1.25，N 7.79實(shí)施例14
第一步反應(yīng)同實(shí)施例2，所不同的是有機(jī)溶劑為乙酸乙酯，第二步反應(yīng)步驟和條件同實(shí)施例3，所不同的是反應(yīng)溫度為-25℃-室溫，，N-烷基化試劑Et3O+SbCl6-，活化組份為
，產(chǎn)物為
1H NMRδ＝7.65-8.53(m，8H，aryl)，5.12(q，J＝7Hz，2H,N-CH2)，1.91(t，J＝7Hz，3H，β-CH3)ppm；FABMS377[M-SbCl6-］；elemental analysis calcd.for C14H15Cl6N4O2Sb(605.72)C 27.76，H 2.50，N 9.25foundC 27.60，H 2.25，N 9.06實(shí)施例15第一步反應(yīng)同實(shí)施例1，所不同的是2-鹵代吡啶為
，反應(yīng)溫度為10-70℃，有機(jī)溶劑為乙酸乙酯，第二步反應(yīng)步驟和條件同實(shí)施例3，所不同的是反應(yīng)溫度為-20℃-室溫，，N-烷基化試劑CF3SO2OCH2CH2CH2CH2CH3，活化組份為
，產(chǎn)物為
1H NMRδ＝7.97-9.02(m，4H，aryl)，4.96(q，J＝7Hz，2H，N-CH2)，1.71(t，J＝7Hz，3H，β-CH3)ppm；FABMS370[M-SbCl6-]；372[M-SbCl6-+2]；374[M-SbCl6-+4]；376[M-SbCl6-+6]；378[M-SbCl6-+8]；elemental analysis calcd. for C13H9Cl11NOSb(706.903)C 22.09，H 1.28，N 1.98foundC 22.31，H 1.30，N 1.98實(shí)施例16第一步反應(yīng)同實(shí)施例2，第二步反應(yīng)步驟和條件同實(shí)施例3，所不同的是反應(yīng)溫度為-25℃-25℃，N-烷基化試劑CF3SO2OPh，活化組份為
，產(chǎn)物為
1HNMRδ＝7.97-9.02(m，4H，aryl)，4.96(q， J＝7Hz，2H，N-CH2)，1.71(t，J＝7Hz，3H，β-CH3)ppm；FABMS370[M-SbCl6-]；372[M-SbCl6-+2]；374[M-SbCl6-+4]；376[M-SbCl6-+6]；378[M-SbCl6-+8]；elemental analysis calcd. for C13H9Cl11NOSb(706.903)
C 22.09，H 1.28，N 1.98foundC 22.31，H 1.30，N 1.98實(shí)施例17第一步反應(yīng)同實(shí)施例1，第二步反應(yīng)步驟和條件同實(shí)施例3，所不同的是反應(yīng)溫度為-30℃-25℃，N-烷基化試劑CF3SO2OC6H4-Cl-p，活化組份為
，產(chǎn)物為
1H NMRδ＝7.97-9.02(m，4H，aryl)，4.96(q，J＝7Hz，2H，N-CH2)，1.71(t，J＝7Hz，3H，β-CH3)ppm；FABMS370[M-SbCl6-]；372[M-SbCl6-+2]；374[M-SbCl6-+4]；376[M-SbCl6-+6]；378[M-SbCl6-+8]；elemental analysis calcd. for C13H9Cl11NOSb(706.903)C 22.09，H 1.28.N 1.98foundC 22.31，H 1.30.N 1.98實(shí)施例18以下列吡啶多肽縮合劑
合成含有N-烷基化氨基酸和α，α-二烷基化氨基酸多肽的合成步驟為將1molN-端保護(hù)的氨基酸或多肽片段，1molC-端保護(hù)的氨基酸或多肽片段酯的鹽酸鹽或三氟醋酸鹽和1mol縮合劑溶于DMF或CH2Cl2中，在低溫0℃—-10℃的條件下緩慢加入3mol的有機(jī)堿二異丙基乙基胺或2，6-二甲基吡啶，加完后低溫反應(yīng)五分鐘，然后室溫反應(yīng)，通過(guò)薄層色譜鑒定反應(yīng)終點(diǎn)，產(chǎn)率結(jié)果依次如下表1縮合劑合成多肽產(chǎn)率表
注b*代表CO-NH鍵形成位置，所有產(chǎn)品均經(jīng)1H NMR，EIMS和其他方式鑒定，結(jié)構(gòu)正確無(wú)誤。b進(jìn)一步經(jīng)過(guò)HMQC和ESI-MS鑒定。
權(quán)利要求
1.一種吡啶類(lèi)正離子型多肽縮合劑，其特征在于分子通式為
其中R1＝H、CnH2n+1，n＝1-5、苯基、取代苯基；R2＝F，Cl，Br，
其中R5、R6＝CF3、NO2,X＝CH、N，
其中R7、R8＝H、CnH2n+1，n＝1-5、COOEt、COOR、CF3、NO2，
R9、R10＝NO2、CF3，
A＝SbCl6，SbF6，CF3SO3，PF6，BPh4，BF4。
2.一種新型吡啶正離子型多肽縮合劑的合成方法，其特征在于以2-鹵吡啶為原料，在有機(jī)溶劑、0-70℃的條件下與N-烷基化試劑反應(yīng)后，和/或在-30-25℃的溫度下、與相應(yīng)的活化組分反應(yīng)得到相應(yīng)的縮合劑，反應(yīng)式如下
其中X＝F、Cl、Br；R1＝H、CnH2n+1，n＝1-5、苯基、取代苯基。
3.如權(quán)利要求1所述的吡啶正離子型多肽縮合劑，其特征在于其中R2＝F、Cl、Br。
4.如權(quán)利要求2所述的吡啶正離子型多肽縮合劑的合成方法，其特征在于有機(jī)溶劑為極性非質(zhì)子性溶劑；N-烷基化試劑為(R1)3O+BF4-、(R1)3O+SbCl6-、(R1)3O+SbF6-、(R1)3O+BPh4-、CF3SO3R1、(R1)3O+PF6-。
5.如權(quán)利要求2所述的吡啶正離子型多肽縮合劑的合成方法，其特征在于活化組分為含有羥基的活性組分，即KR2’或HR2’+有機(jī)堿，其中R2’＝
其中R5、R6＝CF3、NO2，X＝CH、N，
其中R7、R8＝H、CnH2n+1，n＝1-5、COOEt、COOR、CF3、NO2，
R9、R10＝NO2、CF3，
6.如權(quán)利要求2所述的吡啶正離子型多肽縮合劑的合成方法，其特征在于有機(jī)堿是三乙胺，二異丙基乙基胺，吡啶，N-甲基嗎啡啉，N-甲基咪唑。
7.如權(quán)利要求3所述的吡啶正離子型多肽縮合劑的用途，其特征在于應(yīng)用于有空間位阻的含N-烷基化氨基酸和α，α-二烷基化氨基酸的多肽的合成。
全文摘要
本發(fā)明涉及吡啶正離子型多肽縮合劑、合成及其應(yīng)用,其分子通式為右上式,其是由2－鹵吡啶在0—70℃的條件下與N－烷基化試劑反應(yīng)后,和/或在－30℃—25℃的條件下與活化組分反應(yīng)得到相應(yīng)的吡啶類(lèi)正離子型多肽縮合劑,該多肽縮合劑可用于多肽的合成,尤其是空間位阻的多肽的合成,其性能優(yōu)于目前已廣泛使用的脲正離子和磷正離子型縮合劑,既能用于液相也能用于固相的合成,具有合成簡(jiǎn)便,原料易得,在室溫下穩(wěn)定,在應(yīng)用上具有反應(yīng)活性高、消旋小等諸多優(yōu)點(diǎn);可廣泛應(yīng)用于多肽酰胺、酯及活化酯的合成。
文檔編號(hào)C07D401/00GK1243828SQ99113888
公開(kāi)日2000年2月9日 申請(qǐng)日期1999年7月19日 優(yōu)先權(quán)日1999年7月19日
發(fā)明者徐杰誠(chéng), 李鵬 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院上海有機(jī)化學(xué)研究所