專利名稱：新的樺木酸衍生物,所述衍生物的制備方法以及它們作為癌癥生長(zhǎng)抑制劑的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用作腫瘤/癌細(xì)胞抑制劑的新的樺木酸衍生物，以及所述衍生物的制備方法。本發(fā)明還提供了用于治療卵巢癌、結(jié)腸癌、肺癌、喉癌、前列腺癌，以及具有抗白血病和抗淋巴癌活性的所述新的樺木酸衍生物的藥物組合物。
本發(fā)明還提供了治療哺乳動(dòng)物的卵巢癌、結(jié)腸癌、肺癌、喉癌和前列腺癌的方法。
由National Cooperative Natural Product Drug Discovery Group贊助，和由National Cancer Institute支持的項(xiàng)目中，對(duì)由全球收集的植物衍生得到大約有2500種萃取物可能具有抗腫瘤活性，通過一系列酶基試驗(yàn)和對(duì)一系列經(jīng)過培養(yǎng)的人腫瘤細(xì)胞系進(jìn)行試驗(yàn)以對(duì)其進(jìn)行評(píng)價(jià)，其中有一種由Ziziphus mauritiana Lam.(Rhamnaceae)的樹皮得到的萃取物對(duì)培養(yǎng)的人黑色素瘤細(xì)胞具有選擇性的細(xì)胞毒性(Nature Medicine，Vol.1(10)，1995，WO96/29068)。以生物活性進(jìn)行分級(jí)的結(jié)果鑒定出可作為對(duì)黑色素瘤有特異性的細(xì)胞毒素劑樺木酸，一種五環(huán)三萜類化合物。用患有人體黑色素瘤的無胸腺小鼠進(jìn)行的后續(xù)試驗(yàn)中，腫瘤的生長(zhǎng)被完全抑制，而且沒有毒性。從各種細(xì)胞響應(yīng)判斷，其抗腫瘤活性是由誘導(dǎo)編程性細(xì)胞死亡介導(dǎo)的。
一些三萜化合物，包括樺木酸在內(nèi)，具有幾種已知的醫(yī)藥應(yīng)用，包括可作為抗癌藥。Anderson等人在WO95/04526中已經(jīng)公開了可用于癌癥治療的三萜化合物，包括它們對(duì)抗多胺的活性，所述的多胺通過細(xì)胞以最佳速度生長(zhǎng)是所需要的。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，在這些三萜化合物中有一些會(huì)干擾最佳的細(xì)胞生長(zhǎng)所需多胺的酶合成，因此可抑制癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，特別是可抑制鳥氨酸脫羧酶(Yasukawa，K.等人，Oncology 4872-76，1991)。通過將小鼠肉瘤180細(xì)胞植入裸鼠的皮下可說明樺木酸和某些衍生物的抗癌活性(JP87,301,580)。Choi等人已指出樺木酸3-單乙酸酯和樺木酸甲酯顯示出對(duì)P388淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞的ED50值分別為10.5和6.8μg/ml(Choi，Y-H等人，Planta Medica vol XLVII，p511-513，1988)。
Pezzilto等人(USP5,869,535)公開了用樺木酸或其衍生物作為抑制腫瘤生長(zhǎng)的探針的方法和組合物。所用的樺木酸是由Ziziphusmauritiana的樹皮分離得到的，所述的抑制作用是通過對(duì)一系列人體癌細(xì)胞系具有選擇性細(xì)胞毒性來介導(dǎo)的，以生物活性作用為基礎(chǔ)的分級(jí)所進(jìn)行的生物試驗(yàn)用培養(yǎng)的人黑色素瘤細(xì)胞(MEL-2)為探測(cè)器，由此獲得的樺木酸為活性化合物。所得到的樺木酸可用于抑制腫瘤生長(zhǎng)，或可以被轉(zhuǎn)化為C-28樺木酸衍生物以預(yù)防或抑制腫瘤生長(zhǎng)。本發(fā)明還提供了用樺木酸治療的方法以防止癌細(xì)胞的生長(zhǎng)或擴(kuò)散，其中的樺木酸或其衍生物被用于局部制劑。發(fā)現(xiàn)樺木酸可在體外抑制MEL-2細(xì)胞的生長(zhǎng)。但是，Pezzuto沒有進(jìn)行樺木酸對(duì)下述細(xì)胞系作用的試驗(yàn)[A431(鱗狀細(xì)胞)，BC-1(乳癌)，COL-2(結(jié)腸)，HT1080(肉瘤)，KB(人體口腔鱗狀細(xì)胞癌)，LNCaP(前列腺)，LU-1(肺)，U373(神經(jīng)膠質(zhì)瘤)和ZR-75-1(乳癌)(即ED50值大于20μg/ml)。
通常認(rèn)為具有ED50值大于4.0μg/ml的衍生物沒有任何明顯的抗癌活性。相應(yīng)的，申請(qǐng)人集中研究了樺木酸衍生物對(duì)抗其它癌癥的臨床作用的可能應(yīng)用。
本發(fā)明的主要目的是提供新的樺木酸衍生物，它們的制備方法，以及它們作為抗癌藥物的應(yīng)用；
本發(fā)明的另一目的是提供用樺木酸，一種或多種樺木酸衍生物或?qū)⑺鼈兘Y(jié)合使用用于抑制和/或預(yù)防癌細(xì)胞生長(zhǎng)的藥物組合物，特別是用于抑制白血病和淋巴瘤，和抑制前列腺癌、喉癌、卵巢癌、結(jié)腸癌和肺癌的藥物組合物；本發(fā)明的另一目的是提供用本發(fā)明的樺木酸衍生物防止癌細(xì)胞生長(zhǎng)的治療的方法，其中的樺木酸衍生物是系統(tǒng)給藥；本發(fā)明的另一目的是通過使用天然產(chǎn)物得到的化合物，例如樺木酸衍生物克服了常規(guī)化療制劑所產(chǎn)生的高毒性問題；本發(fā)明的另一目的是通過使用樺木酸的合成衍生物克服了合成抗癌制劑所具有的利用率不足的問題。
本發(fā)明提供了新的樺木酸衍生物以及這些衍生物的制備方法。本發(fā)明還提供了含有樺木酸衍生物的藥物組合物，該藥物組合物用于殺死癌細(xì)胞或抑制癌細(xì)胞增生。樺木酸衍生物的生物活性可用培養(yǎng)的下述人體腫瘤細(xì)胞作為探測(cè)器進(jìn)行試驗(yàn)白血病細(xì)胞(MOLT-4)，淋巴瘤細(xì)胞(U937)，前列腺癌細(xì)胞(DU145)，肺癌細(xì)胞(L132)，結(jié)腸癌細(xì)胞(HT29)，卵巢癌細(xì)胞(PA-1)和喉癌細(xì)胞(HeP.2)。
本發(fā)明提供了治療患有癌癥或其它腫瘤的人、哺乳動(dòng)物或其它動(dòng)物方法，該方法包括施用治療有效量的本發(fā)明的藥物組合物的步驟，以殺死或抑制癌或腫瘤細(xì)胞的增生。本發(fā)明的治療方法特別是用于治療白血病和淋巴瘤，以及通常被用于治療前列腺癌、卵巢癌和肺癌。


圖1表示樺木酸的結(jié)構(gòu)式；圖2表示樺木酸衍生物一般的骨架結(jié)構(gòu)；和圖3是有代表性的樺木酸活性衍生物的結(jié)構(gòu)式。
新的樺木酸衍生物如上文所述，本發(fā)明涉及新的樺木酸衍生物和它們用作抗癌劑的應(yīng)用。本發(fā)明衍生物通式的基本骨架如附圖2所示。本發(fā)明的衍生物是對(duì)樺木酸的C2、C3、C17、C20和/或C29位進(jìn)行改性的結(jié)果。本發(fā)明的衍生物以基本的光譜數(shù)據(jù)表征。所述的衍生物的結(jié)構(gòu)列于下表II。
本發(fā)明的樺木酸衍生物具有如附圖2所示的樺木酸基本骨架 圖2其中R、R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7各自獨(dú)立地或一起表示下述基團(tuán)R是HR1是H、Br、Cl、F或I；R2是H和R3是OH、OR[R＝CnH2n＋1(n＝1-8)、環(huán)己基、苯基、芐基、萘基或優(yōu)選其對(duì)位取代的衍生物]、OCO(CH2)nCH3(其中n＝0-14)、OCOC(CH3)3、OCO(CH2)nX(其中n＝1-7，X＝H，Cl，Br，F(xiàn))、OCOC6HnX、OCOCH2C6HnX(n＝2-4)，OCOC10HnX、OCOCH2C10HnX(n＝2-6)[X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，I，CN，NO2，NH2，CF3，OH，OCH3，OC2H5，CHCl2或CnH2n＋1(n＝1-7)]、OSO2(CH2)nX(其中n＝1-7，X＝H或CI)、OSO2ONH2、OCOC6HnX[n＝0-4，X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，I，CN，NO2，NH2，CF3，OH，OCH3，OC2H5，CHCl2或CnH2n＋1(n＝1-7)]、NH2、NH(CH2)nOR[(n＝2-4)，R＝H或COCH3]、NHR、N(R)2[其中R＝CH3，C2H5，C3H7，C4H9]、NHC6HnX、NHCH2C6HnX(其中n＝2-4)、NHCH2C10HnX(n＝2-7)[X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，I，CHCI2，CN，CF3，CHCl2，OH，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-7)]、RCH2NOH(R＝H，CH3，C2H5，C3H7，C4H9)、NHOR(R＝H，COCH3，COC6HnX，OCH2C6HnX，OC6HnX)[n＝2-4，X＝Cl，Br，F(xiàn)，I，CF3，CHCl2，CN，NO2，CH3，NH2，OH，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-7)]、N＝CHC6HnX(其中n＝2-4)、N＝CHC10HnX(n＝2-6)[R＝H，Cl，Br，F(xiàn)，I，CF3，CN，NO2，NH2，OH，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-3)]、OCO(CH2)nNH2(n＝1-8)、NHCO(CH2)nX(X＝H，Cl或Br，n＝1-4)、NHCOC6HnX、NHCOC10HnX(n＝2-6)、NHCOCH2C6HnX(n＝2-4)、NHCOCH2C10HnX(n＝2-6)[X＝Cl，Br，F(xiàn)，I，CF3，CN，NO2，NH2，OH，OCH3，OC2H5，CHCl2或CnH2n＋1(n＝1-7)]、NHCOC6H4COOH、NHCOC6Hn(COOH)X[其中n＝2或3，X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，NO2或NH2]、OCOC6H4COOH、OCOC6Hn(COOH)X(其中n＝2或3，X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，NO2或NH2)，OCOCHRR1(R＝H，CH3或Ph；R1＝OH，Cl，Br或OCOCH3)、NHNHC6HnX(n＝2-4)、NHNHCH(OH)C6HnX(n＝2-4)、NHNHC10HnX(n＝2-6)、NHHHCH(OH)C10HnX(n＝2-6)[X＝Cl，Br，F(xiàn)，I，OH，OCH3，OC2H5，NO2，NH2，CHCI2，CF3或CnH2n＋1(n＝1-7)]、OCOCH=C(R)2(R是H，CH3或C2H5)、OCOCH＝CH-COOH、O-CO-C(Br)＝CHCOOH、OCOCH2C(R)2COOH(R＝H或CH3)、OCO(CH2)nCOOH(n＝O-3)、 -OOCCH(OH)CH(Ph)R[R＝NH2，NHC6HnX(n＝2-4)、NHC10HnX(n＝2-6)、NHCO(CH2)nX(n＝1-16)[X＝H，Cl，F(xiàn)，Br]、NHCOC6HnX、NHCOCH2C6HnX(n＝2-4)、NHCOC10HnX(n＝2-6)、N＝CHC6HnX(n＝2-4)、N＝CHC10HnX(n＝2-6)、NHCH2C6HnX(n＝2-4)、NHCH2C10HnX(n＝2-6)[X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，I，CN，NO2，NH2，CF3，CHCI2，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-7)]、NHSO2(CH2)nX(n＝1-7)、NHSO2C6HnX(n＝2-4)[X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，CH3，NO2或NH2]；R2和R3一起表示O、NNHC6HnX、NNHCOC6HnX(n＝2-4)、NNHC10HnX(n＝2-6)、NNHCOC10HnX(n＝2-6)、NC6HnX(n＝2-4)、NC10HnX(n＝2-6)[X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，I，CN，NO2，NH2，CF3，CHCl2，OH，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-7)、NNHC6HnBrX[(n＝2或3)，X＝F，Cl，NO2，NH2，OCH3，OC2H5，CnH2n＋1(n＝1-7)、NOSO3H、N-OX、NHOX[X是H，CH3，C2H5，COCH3，SO2C6H4CH3，COC6HnX，C6HnX，CH2C6HnX[(n＝2-4)X＝H，CI，Br，F(xiàn)，I，CN，NO2，NH2，OH，OCH3，OC2H5，CnH2n＋1(n＝1-7)]、CF3或CHCl2]、NNHR[R是CH3，C2H5，C2H4OY，Y＝H，烷基，苯基，芐基或其被Cl，Br，F(xiàn)，I，NO2，NH2，CF3，CHCl2，OH，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-7)取代的衍生物]；R7是O和R4是H、OH、OM(M＝Na+，K+，Li+)、Cl、N3、NH2、OR(R＝CH3，C2H5，C3H7，C4H9)、O(CH2)nCOY(n＝1-3)[Y＝OH，OCH3，OC2H5，CI，CN，N3，NH2]、OCH2CH2OY[Y＝H，CH3，C2H5，COCH3]、OCOCH＝C(R)2(R＝H，CH3或C2H5)、OCO(CH2)nX(n＝1-16)(X＝H，Cl，F(xiàn)或Br)、OCOC6HnX(n＝0-4)、OCOCH2C6HnX(n＝2-4)[X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，I，CN，NO2，CF3，CHCl2，OH，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-7)]、NH(CH2)nCH3(n＝0-9)、NH(CH2)nCOOH(n＝1-8)、OCH2CHO、OCH2CH＝NOX、OCH2CH2NHOX[X＝H，CH3，SO2C6H4CH3，OCOCH3，OCOC6H5，苯基或芐基取代的衍生物]、OCH2CH＝NNHC6HnX、OCH2CH2NHNHC6HnX(n＝2-4)、OCH2CH＝NNHC10HnX(n＝2-6)，OCH2CH2CH2NHNHC10HnX[X＝H，CI，Br，F(xiàn)，I，CN，CF3，CHCl2，NO2，NH2，OH，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-7)]、OCH2CH2N(R)2(R＝H，CH3，C2H5，C3H7，C4H9，C6H5，C6H5CH2或其取代衍生物如Cl，Br，CN，F(xiàn)，I，NO2，NH2，CF3，CHCl2，OH，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-7))、O-(3-脫氧樺木酸)、O-(3-脫氧二氫樺木酸)、O-(2-溴-3-氧代-28-?；?羽扇烷。
R4是H和R7是NOH、NHOR、N-OR[R是H，CH3，C2H5，SO2C6H4CH3，COCH3，CH2C6HnX，COC6HnX(n＝2-4)，X＝Cl，Br，F(xiàn)，I，CN，NO2，NH2，OH，OCH3，OC2H5，CF3，CHCl2或CnH2n＋1(n＝1-7)]、RCH2NOH(R＝H，CH3或C2H5)、NH2、NHSO2(CH2)nX(n＝1-7)、NHSO2C6HnX(n＝2-5)[X＝H，Cl，Br，CH3，NO2或NH2]、(NR)2(R是H，CH3，C2H5，C3H7，C4H9，苯基或芐基或其取代衍生物)、NC6HnX、NHC6HnX、N＝CHC6HnX、NHCH2C6HnX(n＝2-4)、NC10HnX、NHC10HnX、N＝CHC10HnX、NHCH2C10HnX[(n＝2-6)，X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，I，CN，NO2，NH2，CF3，CHCl2，OH，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-7)]、NNHC6HnX、NHNHC6HnX、NHNHCH(OH)C6HnX、NNHCOC6HnX(n＝2-4)、NNHC10HnX、NNHCOC10HnX、NHNHC10HnX、NHNHCH(OH)C10HnX[其中n＝2-6，X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，I，CN，NO2，NH2，OH，OCH3，OC2H5，CnH2n＋1(n＝1-7)]、NHCOR[R是CH3，CH2CI，CHCl2，CCl3，C2H5，C2H4Cl，C3H7，C3H6OH，C3H6Cl，C6H5，C6HnX，CH2C6HnX，COCH2C6HnX(n＝2-4)，C10HnX，CH2C10HnX，COCH2C10HnX(n＝2-6)，X＝Cl，Br，CN，F(xiàn)，I，NO2，NH2，CF3，OH，OCH3，OC2H5，CHCl2或CnH2n＋1(n＝1-7)]；R5是H或Br；R6是CH3、CH2Br、CH2OR[R是CO(CH2)nX，(n＝1-7；X＝H，Cl，Br或F)，CHO，CHNOY，CH2NHOY，[Y＝H，CH3，C2H5，SO2C6H5，SO2C6H4CH3，CH2C6HnX，C6HnX(n＝2-4)，X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，I，CN，NO2，NH2，CF3，CHCl2，OH，OCH3，OC2H5，CnH2n＋1(n＝1-7)]、RCH2NOH[其中R是H，CH3，C2H5，C3H7，C4H9]、CH2NH2、CH2NHR或CH2N(R)2[R是CH3，C2H5，C3H7，C4H9，C6H5，C6HnX，COC6HnX，CH2C6HnX，COCH2C6HnX(n＝2-4)，CH2C10HnX，COC10HnX，COCH2C10HnX(n＝2-6)，CH2OCOC6HnX，CH2OCOCH2C6HnX(n＝2-4)，CH2OCOC10HnX，CH2OCOCH2C10HnX(n＝2-6)，X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，CN，I，NO2，NH2，OH，OCH3，OC2H5，CF3，CHCl2或CnH2n＋1(n＝1-7)]、COOH、COCl、CONHR(R是取代的烷基或芳基基團(tuán))、CO-OCOR(R是取代的烷基或芳基基團(tuán))、COCH2COR(R是OH，OCH3，OC2H5，NH2或Cl)、COCH2CH2OR[R是H，CO(CH2)nX(n＝1-16)，COC6HnX，COCH2C6HnX，(n＝2-4，X＝H，Cl，Br，CN，F(xiàn)，I，NO2，NH2，CF3，CHCl2，OH，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-7)]、COO(CH2)nH(n＝1-5)，COO(CH2)nCOY(n＝1-5，Y＝OH，OCH3，OC2H5，Cl或Br)，CH＝NC6HnX(n＝2-4)、CH＝NC10HnX(n＝2-6)、CH＝NNHC6HnX、CH＝NNHCOC6HnX(n＝2-4)、CH＝NNHC10HnX、CH＝NNHCOC10HnX(n＝2-6)、CH2NHNHC6HnX(n＝2-4)、CH2NHNHC10HnX(n＝2-6)、CH2NHNHCH(OH)C6HnX(n＝2-4)、CH2NHNHCH(OH)C10HnX(n＝2-6)[其中X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，I，CN，CF3，NO2，NH2，CHCl2，OH，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-7)]；R5和R6一起是O、OH、OR[R＝CnH2n＋1(n＝1-8)，環(huán)己基，苯基，芐基，萘基或優(yōu)選其對(duì)位取代的衍生物]、OCO(CH2)nX(n＝1-6，X＝H，Cl或Br)、OCOC6HnX、OCOCH2C6HnX[n＝2-4，X＝H，CI，Br，F(xiàn)，I，CN，NO2，NH2，CF3，OH，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-7)]、OCO(CH2)nCOOH(n＝1-3)、NOR、NHOR(R＝H，CH3，C2H5，C3H7，COCH3，COC6H5，苯基或芐基取代的衍生物)、NH2、(N(R)2(R＝H，CH3，C2H5，C3H7，C4H9，C6HnX，CH2C6HnX；n＝2-5，X＝Cl，Br，F(xiàn)，I，CF3，CN，NO2，NH2，OH，OCH3，OC2H5，CnH2n＋1(n＝1-7))、NHCO(CH2)nX[n＝1-16，X＝Cl或Br]、NHCOC6HnX、NHCOCH2C6HnX(n＝2-4)、NHCOC10HnX、NHCOCH2C10HnX(n＝2-6)[X＝Cl，Br，F(xiàn)，I，CN，CF3，NO2，NH2，OH，OCH3，OC2H5，CnH2n＋1(n＝1-7)]、N＝CHC6HnX(n＝2-4)、N＝CHC10HnX(n＝2-6)、NHCH2C6HnX(n＝2-5)、NHCH2C10HnX(n＝2-6)、NNHC6HnX、NC6HnX、NHC6HnX(n＝2-4)、NC10HnX、NHC10HnX、NNHC10HnX(n＝2-6)、NNHCOC6HnX(n＝2-4)、NNHCOC10HnX(n＝2-6)、NR[R＝C6HnX(n＝2-5)、C10HnX(n＝2-7)[X＝H，Cl，Br，Cl，F(xiàn)，I，CN，NO2，NH2，CF3，CHCI2，OCH3，OC2H5，OH或CnH2n＋1(n＝1-7)]。
如實(shí)施例所述，某些樺木酸衍生物可通過在樺木酸的C2、C17、C20和/或C29位進(jìn)行取代和/或結(jié)構(gòu)改造來制備。所述衍生物以基本光譜數(shù)據(jù)表征。表II給出了圖3所示結(jié)構(gòu)的化合物，并列出了表I中給出的28種衍生物的結(jié)構(gòu)。
表I樺木酸衍生物的ED50值(ug/ml)


樺木酸衍生物的體外細(xì)胞毒性活性如表I所示，新的樺木酸衍生物的體外細(xì)胞毒性活性是針對(duì)抗下述細(xì)胞測(cè)定的人的白血病細(xì)胞(MOLT-4)、淋巴瘤細(xì)胞(U937)、前列腺癌細(xì)胞(DU145)、肺癌細(xì)胞(L132)、結(jié)腸癌細(xì)胞(HT29)、卵巢癌細(xì)胞(PA-1)和喉癌細(xì)胞(HeP.2)。新的樺木酸衍生物的體外細(xì)胞毒性活性是通過進(jìn)行MTT細(xì)胞毒性試驗(yàn)測(cè)定的。72小時(shí)后終止試驗(yàn)，計(jì)算得到的細(xì)胞毒性百分?jǐn)?shù)如表I所示。如表中所述，相關(guān)的白血病細(xì)胞(MOLT-4)的活性被活性的樺木酸衍生物所抑制，即ED50值大約為0.34-2.00μg/ml。對(duì)于淋巴瘤細(xì)胞(U937)，活性樺木酸衍生物的ED50值在0.3-4.0μg/ml范圍內(nèi)?；钚詷迥舅嵫苌飳?duì)抗DU145(人的前列腺癌)、L132(人的肺癌)、PA-1(人的卵巢癌)、HT29(人的結(jié)腸癌)和HeP.2(人的喉癌)的ED50值分別是0.40-4.0、0.50-4.、0.5-4.0、0.35-4.0μg/ml和1.0-4.0μg/ml。
如上文所述，可對(duì)樺木酸的C2、C3、C17、C20和/或C29位進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造，申請(qǐng)人己制備了樺木酸衍生物。所述的衍生物以基本的光譜數(shù)據(jù)表征。表II列出了樺木酸衍生物的結(jié)構(gòu)。
樺木酸衍生物具有如下表示的結(jié)構(gòu)式 圖3
其中，樺木酸衍生物中R、R1、R2、R3、和R4選自下表II








Y＝3-脫氧二氫樺木酸(C3→表II中列出的優(yōu)選活性樺木酸衍生物如下述結(jié)構(gòu)式所示

圖3其中R＝H；R1＝H，Cl，Br；R2＝-OCOCH3，＝NNHC6H5，-OCOCH(OCOCH3)CH3，＝NOCOCH3，＝NOSO2C6H4CH3(4)，-OCOCH2CH3，-OCOC6H5，＝NNHC6H4OCH3(4)，-OCOCH(OCOCH3)C6H5，-N＝CHC6H4F(2)，＝NNHC6H3Br(3)OCH3(4)，-OSO2CH3，-N＝CHC6H4Cl(3)，-N＝CHC6H4NO2(2)，-N＝CHC6H4Br(2)，-OCOC6H3F2(2，3)，-OCOC6H3F2(3，4)，-OCOC6H3F2(3，5)，-OCOC6H3F2(2，4)，-OCOC6H4CF3(3)，-OCOC6H4CF3(2)，-OCOC6H4F(4)，-NH2，-N＝CHC6H4NO2(3)，-N＝CHC6H4Br(4)，-OH，-NHNHC6H4(OCH3)(4)，-OCOC6H4F(2)，-N＝CHC6H4Cl(2)，-N＝CHC6H3F2(3，4)，OSO2ONH2，-N＝CHC6H3F2(3，5)，-NHCH2CH2OCOCH3，＝NNHC6H4F(4)，＝NNHCH(OH)C6H5，＝NNHC6H4F(2)，＝NNHCOC6H5，＝N-OCH2C6H5，＝NNHCH2C6H5，NHCH2CH2OH，-OCOC6H4(C5H11)(4)，-OCOCH2C6H3(OCH3)2(2，5)，-OCOC6H4(C7H15)(4)，-OCOCH2C6H3(OCH3)2(3，4)，OSO2C6F5，-OCOC6H4(OC2H5)(4)，-NHNHC6H5，OCOC6H3F2(3，5)，-NHNHCOC6H5，-NHCOCH2Cl，-NHCOCH3，N＝CHC6H3F2(2，4)，＝NNHCOC6H4Cl(2)，＝NNHC6H4Br(3)，N-OCH2C6H4NO2(4)，＝NNHC6H3Cl2(3，4)，＝NNHC6H4Cl(3)，＝NOH，＝O，-OCOCH2C6H2Br(3)(OCH3)2(2，5)，-OCO(CH2)3NH2，-OCOC6H3(OCH3)2(2，4)，-OCOC6H4(C6H5)(4)，OCOCCl(C6H5)2，-OCOC6H3(OCH3)2(3，4)，OCOC(CH3)＝C(CH3)COOH，-OCOCClF2，-OCO(CH2)3COOH，-NNHC6H3Cl2(2，4)，NNHC6H3Cl2(2，5)，-OCOC6H4Cl(4)，-OCOC6H4(CHCl2)(3)，-OSO2(CH2)3Cl，＝NNHCOC6H4OH(2)，OCOC6H2COOH(2)Cl2(3，6)，-COCH(Cl)-CH3，-OCOC6H2Br(6)F2(2，4)，-NHOCH2C6H4NH2(4)，＝NOCH2C6H3Br(2)NO2(4)，-NHOCH2C6H3Br(2)NO2(4)，-OSO2C6H4NO2(2)，＝NOCH2C6F5，＝NOC2H5，-OSO2C6H3NO2(2)CF3(4)，＝NNHCONH2，-NHOCH2C6H2Br2(3，5)NH2(4)，-NHSO2C6F5，-NHSO2CH3，-NHOCH2C6H4[N＝CHC6H3F2(2，4)](4)NHOCH2C6H4[N＝CHC6H3F2(3，4)](4)，-NHOCH2C6H4[NHCH2C6H3F2(2，4)](4)，-NHCH2C6H3F2(2，4)，-NHOCH2C6H4[NHCH2C6H3F2(3，4)](4)，-NHCH2C6H3F2(3，4)，-NHCOC6H3F2(2，4)，-NHOCH2C6H4(NHSO2C6F5)(4)，-NHOCH2C6H4(NHSO2CH3)(4)，-N[COC6H3F2(2，4)]OCH2C6H4NO2(4)，-N[COC6H3F2(2，4)]OCH2C6H4[NHCOC6H3F2(2，4)](4)，-OCOC6H2F3(2，3，4)，-OCOC6H2F3(2，3，5)，-OCOC6H2F3(2，3，6)，＝NNHC6H2Br2(3，5)OCH3(4)，-O-環(huán)丙?；?，-O-環(huán)丁?；?O-環(huán)己?；?O-嗎啉代基， R3＝H，-CH2COOCH3，-CH2COOH，-CH2CH2COOCH3，-COCH＝CH2，3-脫氧二氫樺木酸(C3→)，3-脫氧樺木酸(C3→)，2-溴-3-氧代-28-?；鹕韧?；R4＝CH＝C-CH3，CH(CH3)2和/或BrCH2C(Br)CH3。
制備樺木酸衍生物的方法本發(fā)明進(jìn)一步提供了用于制備本發(fā)明樺木酸衍生物的方法。在制備本發(fā)明樺木酸衍生物時(shí)可采用常規(guī)的方法。除非另有說明，在本文所描述的方法中，原料是樺木酸或是其衍生物。除非另有說明，術(shù)語“底物”是指用作原料的樺木酸，二氫樺木酸，或是其帶有游離C3-羥基和/或C17-羧基基團(tuán)的衍生物。二氫樺木酸可由樺木酸通過還原其C20-29雙鍵獲得，二氫樺木酸衍生物是指其C2、C3和/或C17位的衍生物。
在一實(shí)施方案中，用于制備樺木酸的3-O-苯甲?；苌锏姆椒òㄒ韵虏襟Ei)于室溫，在有機(jī)堿中用適合的苯甲酰氯衍生物處理底物大約6-16小時(shí)，ii)加水溶解反應(yīng)物，用有機(jī)溶劑萃取得到有機(jī)層，和iii)用無水硫酸鈉干燥有機(jī)層，蒸發(fā)，使殘余物結(jié)晶得到純的3-O-苯甲?；苌铩?br> 在一實(shí)施方案中，步驟(i)中所用的苯甲酰氯衍生物可表示為通式C6HnXCOCl，其中n＝2-4，和C10HnXCOCl(n＝2-6)，X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，CF3，C6H5，OH，OCH3，C2H5，CHCI2，CnH2n＋1(n＝1-7)。
在這里，有機(jī)堿選自吡啶和哌啶。
在另一實(shí)施方案中，制備樺木酸的3-N-羥乙基衍生物的方法包括以下步驟(a)將樺木酸的3-氧代衍生物溶解于無水甲醇或乙醇中；(b)向其中加入15-20％的醇化鹽酸，于室溫下攪拌；(c)加入氰基硼氫鈉，并于室溫下攪拌；和(d)使步驟b)的溶液過濾和結(jié)晶，得到純的3-N-羥乙基衍生物。
在另一實(shí)施方案中，制備樺木酸的3-N-亞芐基衍生物的方法包括以下步驟(a)將樺木酸的3-氨基衍生物溶解于甲醇或乙醇中；
(b)向其中加入苯甲醛或取代的苯甲醛；(c)于室溫至70℃攪拌混合物；和(d)真空除去溶劑，加水，得到N-亞芐基衍生物。
在步驟b)中的苯甲醛或取代的苯甲醛中加入堿式碳酸鹽。
在一實(shí)施方案中，制備樺木酸的3-O-甲磺酸酯衍生物的方法包括以下步驟i)將底物溶解在鹵代有機(jī)溶劑中，加入幾滴吡啶，接著在5-10℃緩慢加入甲磺酰氯；ii)混合物于室溫?cái)嚢?-4小時(shí)；iii)用水洗滌有機(jī)層以處理反應(yīng)混合物；iv)用無水硫酸鈉干燥有機(jī)層，過濾，蒸發(fā)至干，得到的殘余物在乙腈中結(jié)晶，得到純的3-O-甲磺酸酯衍生物。
在另一實(shí)施方案中，制備樺木酸的3-苯肼基或其苯基取代衍生物的方法包括以下步驟i)將樺木酸或二氫樺木酸的3-苯腙或其苯基取代衍生物溶于冰乙酸中，并于氫氣氛(50-70psi)中，和在鉑棉催化劑存在下振蕩3-5小時(shí)；ii)過濾反應(yīng)混合物，真空蒸發(fā)所述的母液，以除去冰乙酸；和iii)用醇溶劑使殘余物結(jié)晶，得到純的3-苯肼基或其苯基取代衍生物。
在上述方法中，所用的醇溶劑是甲醇、乙醇或異丙醇。
在另一實(shí)施方案中，制備樺木酸的3-氨基衍生物的方法包括以下步驟i)將3-氧代衍生物溶于冰乙酸中，并于氫氣氛(60-70psi)中，和在氧化鉑催化劑存在下振蕩數(shù)小時(shí)；ii)過濾反應(yīng)混合物，真空蒸發(fā)得到母液，以除去冰乙酸；和
iii)用醇溶劑使殘余物結(jié)晶，得到相應(yīng)的3-氨基衍生物。
在一實(shí)施方案中，可選擇地制備樺木酸的3-氨基衍生物的方法包括以下步驟i)將3-氧代衍生物溶于甲醇中；ii)加入硫酸銨和氫硼化鈉，回流該混合物；和iii)使反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，加水，過濾出固體，使其結(jié)晶后得到3-氨基衍生物。
在另一實(shí)施方案中，制備樺木酸的3-氧代衍生物的方法包括以下步驟i)將底物溶解于有機(jī)溶劑中；ii)加入常用的氧化劑；和iii)用常規(guī)的方法得到相應(yīng)的、純凈形式的3-氧代衍生物。
將底物溶解于有機(jī)溶劑中，在常用的反應(yīng)條件下加入常用的氧化劑。精制反應(yīng)物得到相應(yīng)的、純凈形式的3-氧代衍生物。
在另一實(shí)施方案中，制備樺木酸的3-肟基衍生物的方法包括以下步驟i)將3-氧代衍生物溶解于醇溶劑中；ii)加入鹽酸羥胺或其o-取代衍生物，在反應(yīng)混合物中加入乙酸鈉，并回流幾小時(shí)；iii)將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干；和iv)在反應(yīng)混合物中加水，然后過濾，得到粗制的3-肟基衍生物，結(jié)晶后得到相應(yīng)的純的3-肟基衍生物。
在另一實(shí)施方案中，制備樺木酸的3-腙衍生物的方法包括以下步驟i)加入溶解于醇溶劑中的苯肼、烷基肼或其取代的3-氧代衍生物；ii)反應(yīng)混合物回流4小時(shí)；和
iii)在反應(yīng)混合物中加水，然后過濾，得到苯肼衍生物，結(jié)晶后得到相應(yīng)的苯肼衍生物。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，制備樺木酸的3-O-?；苌锏姆椒òㄒ韵碌牟襟E(i)在室溫下，用適合的酸酐(飽和或非飽和的)處理在有機(jī)堿中的底物大約4-16小時(shí)，在該方法中可以使用的酸酐的實(shí)例由通式(RCH2CO)2O表示，其中R＝H、CH3、C2H5；(ii)蒸發(fā)反應(yīng)混合物，加入水并用有機(jī)溶劑萃取，和(iii)有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，蒸發(fā)，使殘余物結(jié)晶分別得到相應(yīng)的純的3-O-?；苌?。
所使用的有機(jī)堿是TEA、吡啶和DMPA。
在一個(gè)實(shí)施方案中，3-O-?；苌锟蛇x擇地由包括下述步驟的方法制備(i)在鹵代有機(jī)溶劑中的底物用適合的酰氯在室溫下處理4-16小時(shí)；(ii)蒸發(fā)反應(yīng)混合物，加水并用有機(jī)溶劑萃?。?iii)蒸發(fā)殘余物，得到粗制的3-O-酰基衍生物，結(jié)晶得到樺木酸的純3-O-?；苌铩＿m用于該反應(yīng)的酰氯是R(CH2)nCOCl，其中R＝H，Cl，Br，F(xiàn)，和n＝1-16或R＝CH2(CH)nXCOCl，其中R＝H，X＝OH，OCOCH3和n＝1。適用于該反應(yīng)的溶劑選自CCl4，CH2Cl2，C6H5CH3。
在一個(gè)實(shí)施方案中，樺木酸的17和/或20-羧基烷基羧酸酯衍生物由包括下述步驟的方法制備(i)將底物溶解在無水二甲基甲酰胺中；(ii)加入氫化鈉，在室溫下攪拌該混合物大約兩小時(shí)；(iii)加入適合的烷基羧酸酯，并在室溫下攪拌該混合物16-20小時(shí)；(iv)用水洗滌有機(jī)層；
(v)用無水硫酸鹽干燥有機(jī)層，隨后將其過濾，蒸發(fā)至干，得到的殘余物結(jié)晶，便得到純的17和/或20-羧基烷基羧酸酯衍生物。在該反應(yīng)中可使用的鹵代烷基羧酸酯是乙酸甲酯或乙酸乙酯的氯或溴衍生物，或丙酸酯的氯或溴衍生物等。
在一個(gè)實(shí)施方案中，樺木酸的17和/或20-羧基烷基羧酸酯衍生物由包括下述步驟的方法制備(i)將17和/或20-羧基烷基羧酸酯溶解在醇溶劑，如甲醇、乙醇、丙醇等之中，并向其中加入氫氧化物如氫氧化鈉或氫氧化鉀等；(ii)將該混合物升溫至40-50℃加熱2-4小時(shí)；(iii)用水洗滌有機(jī)層，無水硫酸鹽干燥有機(jī)層，而后過濾，蒸發(fā)至干，使得到的殘余物結(jié)晶，得到純的17和/或20-羧基烷基羧酸酯衍生物。在該反應(yīng)中可使用的鹵代烷基羧酸酯是乙酸甲酯或乙酸乙酯的氯或溴衍生物，或丙酸酯的氯或溴衍生物等。
在一個(gè)實(shí)施方案中，樺木酸的3-O-苯磺酸酯衍生物可由包括下述步驟的方法制備a)將底物溶解在氯代有機(jī)溶劑中，加入少許幾滴吡啶，而后慢慢加入苯磺酰氯或其苯取代的衍生物，并保持溫度在5-10℃之間；b)在室溫下攪拌該混合物幾小時(shí)；c)通過由水洗滌有機(jī)層來分離凈化該反應(yīng)混合物；d)用無水硫酸鈣干燥有機(jī)層，過濾，蒸發(fā)，得到的殘余物由腈或醇溶劑結(jié)晶，得到純的3-O-苯磺酸酯衍生物。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，樺木酸的3-O-磺酰胺衍生物可由包括下述步驟的方法制備a)將3-氨基衍生物溶解在鹵代有機(jī)溶劑中，加入少許幾滴三乙胺，而后慢慢加入烷基磺酰氯或苯磺酰氯或其取代的衍生物，并保持溫度在5-10℃之間；b)在室溫下攪拌該混合物幾小時(shí)；c)通過用水洗滌來分離純化該反應(yīng)混合物；和d)用無水硫酸鈉干燥有機(jī)層，過濾，蒸發(fā)至干，得到的殘余物進(jìn)行結(jié)晶，得到純的3-O-磺酰胺衍生物。
在一個(gè)實(shí)施方案中，樺木酸的溴-化合物或溴衍生物可由包括下述步驟的方法制備(a)將在三氟乙酸加入到底物(樺木酸衍生物)中；(b)加入N-溴代琥珀酰亞胺和少許幾滴10％的硫酸水溶液；(c)在室溫下攪拌該反應(yīng)混合物過夜；(d)加入水并用乙酸乙酯萃取；(e)用碳酸氫鹽水溶液，隨后用水洗滌有機(jī)層；(f)用無水硫酸鈉干燥有機(jī)層，過濾，蒸發(fā)至干；和(g)殘余物由醇溶劑結(jié)晶，得到純的溴代化合物。
上述方法也可應(yīng)用于芳核鈍化的化合物的制備。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，樺木酸的氨基-化合物或氨基-衍生物可通過將芳族硝基還原成氨基的方法制備，所說的方法包括以下步驟(a)將底物溶解在甲醇中；(b)在室溫下加入10％鉑催化劑和硼氫化鈉；(c)攪拌該反應(yīng)混合物幾小時(shí)；(d)過濾該反應(yīng)混合物，蒸發(fā)至干，加入水分離純化，用有機(jī)溶劑萃??；(e)有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，過濾，并蒸發(fā)至干；(f)殘余物由醇或腈溶劑結(jié)晶，得到純的氨基化合物。
藥物組合物
按照本發(fā)明的實(shí)踐，使用本發(fā)明新的樺木酸衍生物和藥用載體可以制備藥物組合物。本發(fā)明的制劑在性質(zhì)上具有增效性，表現(xiàn)出優(yōu)良的性能和作用?；钚越M分對(duì)載體或添加劑的比例范圍可以是1∶1至1∶100，優(yōu)選1∶1至1∶10。
該藥物組合物可只用本發(fā)明的樺木酸衍生物或適合的結(jié)合物來制備。
本發(fā)明的組合物可包含有藥理上可接受的稀釋劑、填充劑、潤(rùn)滑劑、賦形劑、溶劑、粘合劑、穩(wěn)定劑等。在該組合物中可使用的稀釋劑包括但不限于磷酸二鈣、硫酸鈣、乳糖、纖維素、高嶺土、甘露糖醇、氯化鈉、干淀粉、粉糖和作為緩釋片使用的羥基丙基甲基纖維素(HPMC)。在該組合物中可使用的粘合劑包括但不限于淀粉、明膠、和填充劑如蔗糖、葡萄糖、右旋糖和乳糖。
本發(fā)明使用的天然和合成的樹膠選自藻酸鈉、茄替膠、羧甲基纖維素、甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮和V形膠。本方法使用的賦形劑選自微晶纖維素、硫酸鈣、磷酸二鈣、淀粉、硬脂酸鎂、乳糖、蔗糖。所用的穩(wěn)定劑是多糖，如金合歡膠、瓊脂、藻酸、瓜耳膠和黃蓍膠、兩性膠如明膠和合成或半合成聚合物如丙烯酸樹脂、纖維素醚和羧甲基甲殼質(zhì)。
所用的溶劑包括但不限于林格式溶液、水、蒸餾水、含二甲基亞砜50％的水、丙二醇(淡的或在水中的)、磷酸鹽緩沖鹽水、平衡的鹽溶液、甘油和其他通用的流體。
按照本發(fā)明的實(shí)踐制備的組合物可依需要系統(tǒng)地給藥于受治療者。
系統(tǒng)給藥指口服、經(jīng)結(jié)腸、經(jīng)鼻、經(jīng)皮膚和腸胃外(即肌肉的、腹膜內(nèi)的、皮下的和靜脈的)。按照良好的臨床實(shí)踐，該組合物的給藥劑量最好能抑制/防止癌細(xì)胞的生長(zhǎng)而又不引起過度的有害副作用。該組合物可單獨(dú)給藥，或與其他藥劑的混合物形式給藥。
每單位劑量提供大約10mg至1000mg組合物的組合物是優(yōu)選的。該組合物可以是任意常規(guī)方法制備的片劑、錠劑、膠囊、粉劑、水性或油性懸浮液、糖漿、酏劑、植入物或水溶液等。當(dāng)然，所使用的組合物的性質(zhì)將取決于所需的給藥方法。該化合物對(duì)人的使用劑量范圍是1.0至200mg/kg/天，優(yōu)選的范圍是1.0至50mg/kg/天。
治療方法本發(fā)明進(jìn)一步提供治療癌癥病人的方法，主要是白血病或淋巴瘤、前列腺癌、肺癌、卵巢癌、結(jié)腸癌或喉癌，所述的方法包括對(duì)病人施用藥用有效劑量的樺木酸衍生物或其結(jié)合物或含有樺木酸衍生物或其結(jié)合物的制劑。
在一個(gè)實(shí)施方案中，受治療者是人、哺乳動(dòng)物或其他動(dòng)物。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，活性樺木酸衍生物抗白血病或淋巴瘤的ED50值的范圍分別是0.34至2.00μg/ml和0.3至4.00μg/ml。
在又一個(gè)實(shí)施方案中，活性樺木酸衍生物抗前列腺癌的ED50值的范圍是0.4至4.0μg/ml。
在又一個(gè)實(shí)施方案中，活性樺木酸衍生物抗肺癌的ED50值的范圍是0.5至4.0μg/ml。
在又一個(gè)實(shí)施方案中，活性樺木酸衍生物抗卵巢癌的ED50值的范圍是0.5至4.0μg/ml。
在又一個(gè)實(shí)施方案中，活性樺木酸衍生物抗結(jié)腸癌的ED50值的范圍是0.35至4.0μg/ml。
在又一個(gè)實(shí)施方案中，活性樺木酸衍生物抗喉癌的ED50值的范圍是1.0至4.0μg/ml。
在又一個(gè)實(shí)施方案中，表2列出的樺木酸衍生物可單獨(dú)對(duì)受治療者給藥，或以與藥用添加劑、載體、稀釋劑、溶劑、填充劑、潤(rùn)滑劑、賦形劑、粘合劑或穩(wěn)定劑等結(jié)合的形式給藥。
在又一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物可制備成不同的物理形式，如片劑、錠劑、膠囊、粉劑、水性或油性懸浮液、糖漿、酏劑、植入物或含水溶液等。
在一個(gè)實(shí)施方案中，該組合物對(duì)人的施用劑量的范圍是10-200mg/kg/天。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，對(duì)人的優(yōu)選施用劑量的范圍是20-50mg/kg/天。
從后面所描述的具體的實(shí)施方案和實(shí)施例將使本發(fā)明的這些方面和其他方面變得更加清楚。對(duì)本領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)人員易于明了的各種修正都認(rèn)為是包含于本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
實(shí)施例13-O-苯甲?；苌锏闹苽湓谑覝叵掠眠m合的苯甲酰氯處理在有機(jī)堿中的底物大約6-16小時(shí)?？梢允褂玫谋郊柞Ｂ鹊膶?shí)例由下述通式表示C6HnXCOCl，其中n＝2-4，C10HnXCOCl(n＝2-6)，X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，CF3，C6H5，OH，OCH3，C2H5，CHCl2，CnH2n＋1(n＝1-7)。該反應(yīng)通過加入水進(jìn)行，并用有機(jī)溶劑萃取。有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，蒸發(fā)，對(duì)殘余物結(jié)晶便分別得到純的3-O-苯甲酰衍生物。可使用的有機(jī)堿的實(shí)例是吡啶、哌啶。
實(shí)施例23-O-甲磺酸酯衍生物的制備將底物溶解在鹵代溶劑中，并在5-10℃向其慢慢加入甲磺酰氯。在室溫下攪拌該混合物2-4小時(shí)。通過用水洗滌有機(jī)層分離凈化該反應(yīng)混合物。有機(jī)層用無水硫酸鹽干燥，過濾，蒸發(fā)至干，得到的殘余物由乙腈結(jié)晶，得到純的3-O-甲磺酸酯衍生物。
實(shí)施例3
3-苯基肼基衍生物或其苯基取代的衍生物的制備將樺木酸或二氯樺木酸的3-苯基腙或其苯基取代的衍生物溶解在冰醋酸中，并于氫氣氛(50-70-psi)并在鉑棉催化劑存在下震蕩3-5小時(shí)。將反應(yīng)混合物過濾，真空蒸發(fā)母液以除去冰醋酸，殘余物用醇溶劑結(jié)晶，得到純的3-苯基肼基衍生物或其苯基取代的衍生物。使用的醇溶劑是甲醇、乙醇、異丙醇。
實(shí)施例43-N-羥乙基衍生物的制備將3-氧代-衍生物溶解在無水醇溶劑中，如甲醇/乙醇，并向其中加入15-20％的醇鹽酸和2-氨基乙醇，在室溫下攪拌30-60分鐘。再向其加入氰基硼氫鈉，在室溫下再攪拌大約72小時(shí)。通過加水處理而后過濾固體，以得到粗產(chǎn)品，由乙醇結(jié)晶后得到純的3-N-羥乙基衍生物。
實(shí)施例53-N-亞芐基衍生物的制備將3-氨基衍生物溶解在醇溶劑，如甲醇/乙醇中，并在堿金屬的碳酸鹽如碳酸鈉或碳酸鉀存在或不存在下向其加入苯甲醛或取代的苯甲醛衍生物。在室溫至大約50℃下將該混合物攪拌幾小時(shí)。通過真空除去醇來處理該反應(yīng)混合物并加入水。水層或過濾或用鹵代有機(jī)溶劑萃取，而后蒸發(fā)得到3-N-亞芐基衍生物。
實(shí)施例63-氧基衍生物的制備將3-氧代衍生物溶解在冰醋酸中，于氫氣氛(60-70psi)并在氧化鉑催化劑存在下震蕩幾小時(shí)，反應(yīng)混合物過濾，真空蒸發(fā)熔融溶液，以除去冰醋酸，殘余物按常用的方法分離凈化，得到相應(yīng)的3-氨基衍生物。
實(shí)施例7
3-氧代衍生物的制備將底物溶解在有機(jī)溶劑中，并在正常反應(yīng)條件下加入通用的氧化劑。處理該反應(yīng)物以得到純化形式的相應(yīng)3-氧代衍生物。
實(shí)施例83-肟基衍生物的制備按方法1描述得到粗制的3-肟基衍生物，將其經(jīng)結(jié)晶得到相應(yīng)的純化3-肟基衍生物。
實(shí)施例93-氧代衍生物的苯腙的制備將苯肼加入到溶解在醇溶劑中的3-氧代衍生物中，并回流4小時(shí)。如方法1描述的那樣處理該反應(yīng)混合物，以得到純化形式的相應(yīng)苯腙衍生物。
實(shí)施例1017和/或20羧基烷基羧酸的制備將17和/或20-羧基烷基羧酸酯溶解在醇溶劑，如甲醇、乙醇、丙醇等中，并向其中加入氫氧化物如氫氧化鈉或氫氧化鉀等。將該混合物升溫至40-50℃加熱2-4小時(shí)。如實(shí)施例2的方法I描述的那樣處理該反應(yīng)混合物，得到純化的17或20-羧基烷基羧酸衍生物。
實(shí)施例112-溴-3-氧代-衍生物的制備將3-氧代-二氫樺木酸衍生物溶解在鹵代有機(jī)溶劑如CCl4、CH2Cl2、CHCl3等中。將溶解在相同溶劑中的液體溴滴加進(jìn)去，并同時(shí)維持溫度在0-10℃之間。將反應(yīng)混合物提高到室溫并維持幾小時(shí)。反應(yīng)混合物用通常的方法處理，有機(jī)層用5-10％的堿性水溶液洗滌，隨后用水洗滌。蒸發(fā)并結(jié)晶得到純的2-溴-3-氧代-衍生物?？墒褂玫膲A性水溶液的實(shí)例是堿金屬在水中的碳酸氫鹽或碳酸鹽等。
實(shí)施例123-O-?；苌锏闹苽浞椒?在室溫下用適合的酐處理在有機(jī)堿中的底物大約4-16小時(shí)。在該方法中可以使用的酐的實(shí)例由通式(RCH2CO)2O表示，其中R＝H、CH3、C2H5等。該反應(yīng)物通過蒸發(fā)反應(yīng)混合物、加入水并用有機(jī)溶劑萃取來處理。有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，蒸發(fā)，對(duì)殘余物結(jié)晶，分別得到相應(yīng)的純的3-O-?；苌?。在這個(gè)方法中可使用的有機(jī)堿的實(shí)例是TEA、吡啶和DMPA。
方法II在鹵代有機(jī)溶劑中的底物用適合的酰氯如方法I那樣處理。使該反應(yīng)物如方法I描述的那樣處理，以得到相應(yīng)的純化形式的3-O-酰基衍生物?？梢允褂玫孽Ｂ鹊膶?shí)例是R(CH2)nCOCl，其中R＝H、Cl、F、Br或I和n＝1-16，或RCH2(CH)nXCOCl，其中R＝H，X＝OH、OCOCH3和n＝1。鹵化溶劑可選自CCl4、CH2Cl2、C6H5CH3等。
實(shí)施例1317和/或20-羧基烷基羧酸酯的制備向溶解在無水二甲基甲酰胺中的底物中加入氫化鈉，并在室溫下攪拌該混合物大約兩小時(shí)。將適合的鹵化烷基羧酸酯加入到上述反應(yīng)混合物中，并使該混合物在室溫下攪拌16-20小時(shí)。使該反應(yīng)物如實(shí)施例2的方法1中描述的那樣處理，以得到純的17和/或20-羧基烷基羧酸酯?？墒褂玫柠u代烷基羧酸酯的實(shí)例是乙酸甲酯或乙酸乙酯的氯或溴代衍生物或丙酸酯的氯或溴代衍生物等。
實(shí)施例143-O-苯磺酸酯衍生物可按下述步驟制備(a)將底物溶解在氯代有機(jī)溶劑中，加入少許幾滴吡啶，而后慢慢加入苯磺酰氯或其苯取代的衍生物，并保持溫度在5-10℃之間；(b)在室溫下攪拌該混合物幾小時(shí)；(c)通過用水洗滌有機(jī)層來分離凈化該反應(yīng)混合物；(d)用無水硫酸鈉干燥有機(jī)層，過濾，蒸發(fā)，得到的殘余物由乙腈或醇溶劑結(jié)晶，得到純的3-O-苯磺酸酯衍生物。
實(shí)施例153-O-磺酰胺衍生物可由下述步驟制備(a)將3-O-氨基衍生物溶解在氯代有機(jī)溶劑中，加入少許幾滴三乙胺，而后慢慢加入烷基磺酰氯或苯磺酰氯或其取代的衍生物，并保持溫度在5-10℃之間；(b)在室溫下攪拌該混合物幾小時(shí)；(c)通過由水洗滌有機(jī)層來分離凈化該反應(yīng)混合物；(d)用無水硫酸鈉干燥有機(jī)層，過濾，蒸發(fā)至干，得到的殘余物進(jìn)行結(jié)晶，以得到純的3-O-磺酰胺衍生物。
實(shí)施例16芳環(huán)的溴化(a)將底物(BA衍生物)溶于在三氟乙酸中；(b)向其加入N-溴代琥珀酰亞胺和少許幾滴10％的硫酸水溶液；(c)在室溫下攪拌該反應(yīng)混合物過夜；
(d)加入水并用乙酸乙酯萃?。?e)用碳酸氫鹽水溶液隨后用水洗滌該有機(jī)層；(f)用無水硫酸鈉干燥有機(jī)層，過濾，蒸發(fā)至干，殘余物由醇溶劑結(jié)晶，以得到純的溴代化合物。
上述方法也可推廣應(yīng)用于芳核鈍化的化合物。
實(shí)施例17芳族硝基還原成氨基(a)將底物溶解在甲醇中；(b)加入10％Pd/c，隨后在室溫下加入硼氫化鈉；(c)攪拌該反應(yīng)混合物幾小時(shí)；(d)過濾該反應(yīng)混合物，蒸發(fā)至干，并加水處理，用有機(jī)溶劑萃取；(e)有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，過濾，并蒸發(fā)至干；(f)將步驟(c)的殘余物由乙醇或乙腈結(jié)晶，得到純的氨基化合物。
實(shí)施例18C28-羧基衍生物的制備(具體指化合物MJ-1155-RS，MJ-1161-RS和MJ-1163-RS)(a)將樺木酸/二氧樺木酸/或2-溴-3-氧代二氫樺木酸溶解在二甲基甲酰胺或氯代有機(jī)溶劑(優(yōu)選二氯甲烷)中；(b)加入二環(huán)己基碳二亞胺和二甲基氨基吡啶；(c)在室溫下攪拌該反應(yīng)混合物過夜；(d)加水處理，無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸發(fā)至干，得到粗制固體，將其由乙醇結(jié)晶得到相應(yīng)的純的衍生物。
實(shí)施例19樺木酸衍生物的適合制劑按下述方法制備。樺木酸衍生物在最小量的甲醇中增溶。樺木酸衍生物也可以在異丙醇、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜或任意其他適合的溶液中增溶。將取代的β-環(huán)糊精，如2-二羥基丙基β-環(huán)糊精、磺基丁基醚β-環(huán)糊精分別溶解在水中，使其濃度達(dá)到大約50-1000mg/ml，優(yōu)選250-750mg/ml。將增溶的樺木酸或它的衍生物以小額份數(shù)加入到衍生的β-環(huán)糊精溶液中，并在低溫下聲波振蕩，直到透明溶液產(chǎn)生為止。而后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑，過濾最后的溶液，得到無菌產(chǎn)品。將所得溶液凍干。
實(shí)施例20新的樺木酸衍生物的體外細(xì)胞毒性活性是通過進(jìn)行MIT細(xì)胞毒性試驗(yàn)(Mosmann T.，J.Immunological Methods，6555；1983)測(cè)定的。簡(jiǎn)單地說，是將孵化的腫瘤細(xì)胞分別放置在96-孔培養(yǎng)板中，與溶解在甲醇、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜或異丙醇中的樺木酸或它的衍生物共同孵化，相關(guān)的對(duì)照試驗(yàn)是在37℃在CO2孵化器中。72小時(shí)后終止試驗(yàn)，計(jì)算細(xì)胞毒性的百分?jǐn)?shù)。如表I所示，白血病細(xì)胞(MOLT-4，Jurkat E6.1，HL60，CEM.CM3)的代謝活性被活化樺木酸衍生物所抑制，即ED50值大約是0.34-2.00μg/ml?；罨瘶迥舅嵫苌飳?duì)淋巴瘤細(xì)胞(BRISTOL-8，U937)的ED50值的范圍是0.3-4.00μg/ml。另外，活化樺木酸衍生物對(duì)DU145(人的前列腺癌)、PA-1(人的卵巢癌)和L132(人的肺癌)、HT-29(人的結(jié)腸癌)和Hep2(人的喉癌)分別顯示ED50值為0.4-4.00μg/ml、0.5-4.00μg/ml、0.5-4.0μg/ml、0.35-4.0μg/ml和1.0-4.0μg/ml。
權(quán)利要求
1.具有下述通式2的樺木酸衍生物 圖2其中R、R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7各自獨(dú)立地或一起表示下述基團(tuán)R是H；R1是H、Br、Cl、F或I；R2是H和R3是OH、OR[R＝CnH2n＋1(n＝1-8)、環(huán)己基、苯基、芐基、萘基或優(yōu)選其對(duì)位取代的衍生物]、OCO(CH2)nCH3(其中n＝0-14)、OCOC(CH3)3、OCO(CH2)nX(其中n＝1-7，X＝H，Cl，Br，F(xiàn))、OCOC6HnX、OCOCH2C6HnX(n＝2-4)，OCOC10HnX、OCOCH2C10HnX(n＝2-6)[X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，I，CN，NO2，NH2，CF3，OH，OCH3，OC2H5，CHCl2或CnH2n＋1(n＝1-7)]、OSO2(CH2)nX(其中n＝1-7，X＝H或CI)、OSO2ONH2、OCOC6HnX[n＝0-4，X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，I，CN，NO2，NH2，CF3，OH，OCH3，OC2H5，CHCl2或CnH2n＋1(n＝1-7)]、NH2、NH(CH2)nOR[(n＝2-4)，R＝H或COCH3]、NHR、N(R)2[其中R＝CH3，C2H5，C3H7，C4H9]、NHC6HnX、NHCH2C6HnX(其中n＝2-4)、NHCH2C10HnX(n＝2-7)[X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，I，CHCI2，CN，CF3，CHCl2，OH，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-7)]、RCH2NOH(R＝H，CH3，C2H5，C3H7，C4H9)、NHOR(R＝H，COCH3，COC6HnX，OCH2C6HnX，OC6HnX)[n＝2-4，X＝Cl，Br，F(xiàn)，I，CF3，CHCl2，CN，NO2，CH3，NH2，OH，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-7)]、N＝CHC6HnX(其中n＝2-4)、N＝CHC10HnX(n＝2-6)[R＝H，Cl，Br，F(xiàn)，I，CF3，CN，NO2，NH2，OH，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-3)]、OCO(CH2)nNH2(n＝1-8)、NHCO(CH2)nX(X＝H，Cl或Br，n＝1-4)、NHCOC6HnX、NHCOC10HnX(n＝2-6)、NHCOCH2C6HnX(n＝2-4)、NHCOCH2C10HnX(n＝2-6)[X＝Cl，Br，F(xiàn)，I，CF3，CN，NO2，NH2，OH，OCH3，OC2H5，CHCl2或CnH2n＋1(n＝1-7)]、NHCOC6H4COOH、NHCOC6Hn(COOH)X[其中n＝2或3，X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，NO2或NH2]、OCOC6H4COOH、OCOC6Hn(COOH)X(其中n＝2或3，X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，NO2或NH2)，OCOCHRR1(R＝H，CH3或Ph；R1＝OH，Cl，Br或OCOCH3)、NHNHC6HnX(n＝2-4)、NHNHCH(OH)C6HnX(n＝2-4)、NHNHC10HnX(n＝2-6)、NHHHCH(OH)C10HnX(n＝2-6)[X＝Cl，Br，F(xiàn)，I，OH，OCH3，OC2H5，NO2，NH2，CHCI2，CF3或CnH2n＋1(n＝1-7)]、OCOCH＝C(R)2(R是H，CH3或C2H5)、OCOCH＝CH-COOH、O-CO-C(Br)＝CHCOOH、OCOCH2C(R)2COOH(R＝H或CH3)、OCO(CH2)nCOOH(n＝0-3)、 -OOCCH(OH)CH(Ph)R[R＝NH2，NHC6HnX(n＝2-4)、NHC10HnX(n＝2-6)、NHCO(CH2)nX(n＝1-16)[X＝H，Cl，F(xiàn)，Br]、NHCOC6HnX、NHCOCH2C6HnX(n＝2-4)、NHCOC10HnX(n＝2-6)、N＝CHC6HnX(n＝2-4)、N＝CHC10HnX(n＝2-6)、NHCH2C6HnX(n＝2-4)、NHCH2C10HnX(n＝2-6)[X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，I，CN，NO2，NH2，CF3，CHCI2，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-7)]、NHSO2(CH2)nX(n＝1-7)、NHSO2C6HnX(n＝2-4)[X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，CH3，NO2或NH2]；R2和R3一起表示O、NNHC6HnX、NNHCOC6HnX(n＝2-4)、NNHC10HnX(n＝2-6)、NNHCOC10HnX(n＝2-6)、NC6HnX(n＝2-4)、NC10HnX(n＝2-6)[X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，I，CN，NO2，NH2，CF3，CHCl2，OH，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-7)、NNHC6HnBrX[(n＝2或3)，X＝F，Cl，NO2，NH2，OCH3，OC2H5，CnH2n＋1(n＝1-7)]、NOSO3H、N-OX、NHOX[X是H，CH3，C2H5，COCH3，SO2C6H4CH3，COC6HnX，C6HnX，CH2C6HnX[(n＝2-4)X＝H，CI，Br，F(xiàn)，I，CN，NO2，NH2，OH，OCH3，OC2H5，CnH2n＋1(n＝1-7)]、CF3或CHCl2]、NNHR[R是CH3，C2H5，C2H4OY，Y＝H，烷基，苯基，芐基或其被Cl，Br，F(xiàn)，I，NO2，NH2，CF3，CHCl2，OH，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-7)取代的衍生物]；R7是O和R4是H、OH、OM(M＝Na+，K+，Li+)、Cl、N3、NH2、OR(R＝CH3，C2H5，C3H7，C4H9)、O(CH2)nCOY(n＝1-3)[Y＝OH，OCH3，OC2H5，CI，CN，N3，NH2]、OCH2CH2OY[Y＝H，CH3，C2H5，COCH3]、OCOCH＝C(R)2(R＝H，CH3或C2H5)、OCO(CH2)nX(n＝1-16)(X＝H，Cl，F(xiàn)或Br)、OCOC6HnX(n＝0-4)、OCOCH2C6HnX(n＝2-4)[X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，I，CN，NO2，CF3，CHCl2，OH，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-7)]、NH(CH2)nCH3(n＝0-9)、NH(CH2)nCOOH(n＝1-8)、OCH2CHO、OCH2CH＝NOX、OCH2CH2NHOX[X＝H，CH3，SO2C6H4CH3，OCOCH3，OCOC6H5，苯基或芐基取代的衍生物]、OCH2CH＝NNHC6HnX、OCH2CH2NHNHC6HnX(n＝2-4)、OCH2CH＝NNHC10HnX(n＝2-6)、OCH2CH2CH2NHNHC10HnX[X＝H，CI，Br，F(xiàn)，I，CN，CF3，CHCl2，NO2，NH2，OH，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-7)]、OCH2CH2N(R)2(R＝H，CH3，C2H5，C3H7，C4H9，C6H5，C6H5CH2或其取代衍生物如Cl，Br，CN，F(xiàn)，I，NO2，NH2，CF3，CHCl2，OH，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-7))、O-(3-脫氧樺木酸)、O-(3-脫氧二氫樺木酸)、O-(2-溴-3-氧代-28-?；?羽扇烷；R4是H和R7是NOH、NHOR、N-OR[R是H，CH3，C2H5，SO2C6H4CH3，COCH3，CH2C6HnX，COC6HnX(n＝2-4)，X＝Cl，Br，F(xiàn)，I，CN，NO2，NH2，OH，OCH3，OC2H5，CF3，CHCl2或CnH2n＋1(n＝1-7)]、RCH2NOH(R＝H，CH3或C2H5)、NH2、NHSO2(CH2)nX(n＝1-7)、NHSO2C6HnX(n＝2-5)[X＝H，Cl，Br，CH3，NO2或NH2]、(NR)2(R是H，CH3，C2H5，C3H7，C4H9，苯基或芐基或其取代衍生物)、NC6HnX、NHC6HnX、N＝CHC6HnX、NHCH2C6HnX(n＝2-4)、NC10HnX、NHC10HnX、N＝CHC10HnX、NHCH2C10HnX[(n＝2-6)，X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，I，CN，NO2，NH2，CF3，CHCl2，OH，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-7)]、NNHC6HnX、NHNHC6HnX、NHNHCH(OH)C6HnX、NNHCOC6HnX(n＝2-4)、NNHC10HnX、NNHCOC10HnX、NHNHC10HnX、NHNHCH(OH)C10HnX[其中n＝2-6，X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，I，CN，NO2，NH2，OH，OCH3，OC2H5，CnH2n＋1(n＝1-7)]、NHCOR[R是CH3，CH2CI，CHCl2，CCl3，C2H5，C2H4Cl，C3H7，C3H6OH，C3H6Cl，C6H5，C6HnX，CH2C6HnX，COCH2C6HnX(n＝2-4)，C10HnX，CH2C10HnX，COCH2C10HnX(n＝2-6)，X＝Cl，Br，CN，F(xiàn)，I，NO2，NH2，CF3，OH，OCH3，OC2H5，CHCl2或CnH2n＋1(n＝1-7)]；R5是H或Br；R6是CH3、CH2Br、CH2OR[R是CO(CH2)nX，(n＝1-7；X＝H，Cl，Br或F)、CHO、CHNOY、CH2NHOY[Y＝H，CH3，C2H5，SO2C6H5，SO2C6H4CH3，CH2C6HnX，C6HnX(n＝2-4)，X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，I，CN，NO2，NH2，CF3，CHCl2，OH，OCH3，OC2H5，CnH2n＋1(n＝1-7)]、RCH2NOH[其中R是H，CH3，C2H5，C3H7，C4H9]、CH2NH2、CH2NHR或CH2N(R)2[R是CH3，C2H5，C3H7，C4H9，C6H5，C6HnX，COC6HnX，CH2C6HnX，COCH2C6HnX(n＝2-4)，CH2C10HnX，COC10HnX，COCH2C10HnX(n＝2-6)，CH2OCOC6HnX，CH2OCOCH2C6HnX(n＝2-4)，CH2OCOC10HnX，CH2OCOCH2C10HnX(n＝2-6)，X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，CN，I，NO2，NH2，OH，OCH3，OC2H5，CF3，CHCl2或CnH2n+1(n＝1-7)]、COOH、COCl、CONHR(R是取代的烷基或芳基基團(tuán))、CO-OCOR(R是取代的烷基或芳基基團(tuán))、COCH2COR(R是OH，OCH3，OC2H5，NH2或Cl)、COCH2CH2OR[R是H，CO(CH2)nX(n＝1-16)，COC6HnX，COCH2C6HnX，(n＝2-4，X＝H，Cl，Br，CN，F(xiàn)，I，NO2，NH2，CF3，CHCl2，OH，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-7))、COO(CH2)nH(n＝1-5)、COO(CH2)nCOY(n＝1-5，Y＝OH，OCH3，OC2H5，Cl或Br)、CH＝NC6HnX(n＝2-4)、CH＝NC10HnX(n＝2-6)、CH＝NNHC6HnX、CH＝NNHCOC6HnX(n＝2-4)、CH＝NNHC10HnX、CH＝NNHCOC10HnX(n＝2-6)、CH2NHNHC6HnX(n＝2-4)、CH2NHNHC10HnX(n＝2-6)、CH2NHNHCH(OH)C6HnX(n＝2-4)、CH2NHNHCH(OH)C10HnX(n＝2-6)[其中X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，I，CN，CF3，NO2，NH2，CHCl2，OH，OCH3，OC2H5或CnH2n+1(n＝1-7)]；R5和R6一起是O、OH、OR[R＝CnH2n＋1(n＝1-8)，環(huán)己基，苯基，芐基，萘基或優(yōu)選其對(duì)位取代衍生物]、OCO(CH2)nX(n＝1-6，X＝H，Cl或Br)、OCOC6HnX、OCOCH2C6HnX[n＝2-4，X＝H，CI，Br，F(xiàn)，I，CN，NO2，NH2，CF3，OH，OCH3，OC2H5或CnH2n＋1(n＝1-7)]、OCO(CH2)nCOOH(n＝1-3)、NOR、NHOR(R＝H，CH3，C2H5，C3H7，COCH3，COC6H5，苯基或芐基取代衍生物)、NH2、(N(R)2(R＝H，CH3，C2H5，C3H7，C4H9，C6HnX，CH2C6HnX；n＝2-5，X＝Cl，Br，F(xiàn)，I，CF3，CN，NO2，NH2，OH，OCH3，OC2H5，CnH2n＋1(n＝1-7))、NHCO(CH2)nX[n＝1-16，X＝Cl或Br]、NHCOC6HnX、NHCOCH2C6HnX(n＝2-4)、NHCOC10HnX、NHCOCH2C10HnX(n＝2-6)(X＝Cl，Br，F(xiàn)，I，CN，CF3，NO2，NH2，OH，OCH3，OC2H5，CnH2n＋1(n＝1-7))、N＝CHC6HnX(n＝2-4)、N＝CHC10HnX(n＝2-6)、NHCH2C6HnX(n＝2-5)、NHCH2C10HnX(n＝2-6)、NNHC6HnX、NC6HnX、NHC6HnX(n＝2-4)、NC10HnX、NHC10HnX、NNHC10HnX(n＝2-6)、NNHCOC6HnX(n＝2-4)、NNHCOC10HnX(n＝2-6)、NR[R＝C6HnX(n＝2-5)、C10HnX(n＝2-7)[X＝H，Cl，Br，Cl，F(xiàn)，I，CN，NO2，NH2，CF3，CHCI2，OCH3，OC2H5，OH或CnH2n＋1(n＝1-7)]。
2.具有下述結(jié)構(gòu)式的活性樺木酸衍生物 圖3其中R2＝-OCOCH3，＝NNHC6H5，-OCOCH(OCOCH3)CH3，＝NOCOCH3，＝NOSO2C6H4CH3(4)，-OCOCH2CH3，-OCOC6H5，＝NNHC6H4OCH3(4)，-OCOCH(OCOCH3)C6H5，-N＝CHC6H4F(2)，＝NNHC6H3Br(3)OCH3(4)，-OSO2CH3，-N＝CHC6H4Cl(3)，-N＝CHC6H4NO2(2)，-N＝CHC6H4Br(2)，-OCOC6H3F2(2，3)，-OCOC6H3F2(3，4)，-OCOC6H3F2(3，5)，-OCOC6H3F2(2，4)，-OCOC6H4CF3(3)，-OCOC6H4CF3(2)，-OCOC6H4F(4)，-NH2，-N＝CHC6H4NO2(3)，-N＝CHC6H4Br(4)，-OH，-NHNHC6H4(OCH3)(4)，-OCOC6H4F(2)，-N＝CHC6H4Cl(2)，-N＝CHC6H3F2(3，4)，OSO2ONH2，-N＝CHC6H3F2(3，5)，-NHCH2CH2OCOCH3，＝NNHC6H4F(4)，＝NNHCH(OH)C6H5，＝NNHC6H4F(2)，＝NNHCOC6H5，＝N-OCH2C6H5，＝NNHCH2C6H5，NHCH2CH2OH，-OCOC6H4(C5H11)(4)，-OCOCH2C6H3(OCH3)2(2，5)，-OCOC6H4(C7H15)(4)，-OCOCH2C6H3(OCH3)2(3，4)，OSO2C6F5，-OCOC6H4(OC2H5)(4)，-NHNHC6H5，OCOC6H3F2(3，5)，-NHNHCOC6H5，-NHCOCH2Cl，-NHCOCH3，N＝CHC6H3F2(2，4)，＝NNHCOC6H4Cl(2)，＝NNHC6H4Br(3)，N-OCH2C6H4NO2(4)，＝NNHC6H3Cl2(3，4)，＝NNHC6H4Cl(3)，＝NOH，＝O，-OCOCH2C6H2Br(3)(OCH3)2(2，5)，-OCO(CH2)3NH2，-OCOC6H3(OCH3)2(2，4)，-OCOC6H4(C6H5)(4)，OCOCCl(C6H5)2，-OCOC6H3(OCH3)2(3，4)，OCOC(CH3)＝C(CH3)COOH，-OCOCClF2，-OCO(CH2)3COOH，-NNHC6H3Cl2(2，4)，NNHC6H3Cl2(2，5)，-OCOC6H4Cl(4)，-OCOC6H4(CHCl2)(3)，-OSO2(CH2)3Cl，＝NNHCOC6H4OH(2)，OCOC6H2COOH(2)Cl2(3，6)，-COCH(Cl)-CH3，-OCOC6H2Br(6)F2(2，4)，-NHOCH2C6H4NH2(4)，＝NOCH2C6H3Br(2)NO2(4)，-NHOCH2C6H3Br(2)NO2(4)，-OSO2C6H4NO2(2)，＝NOCH2C6F5，＝NOC2H5，-OSO2C6H3NO2(2)CF3(4)，＝NNHCONH2，-NHOCH2C6H2Br2(3，5)NH2(4)，-NHSO2C6F5，-NHSO2CH3，-NHOCH2C6H4[N＝CHC6H3F2(2，4)](4)-NHOCH2C6H4[N＝CHC6H3F2(3，4)](4)，-NHOCH2C6H4[NHCH2C6H3F2(2，4)](4)，-NHCH2C6H3F2(2，4)，-NHOCH2C6H4[NHCH2C6H3F2(3，4)](4)，-NHCH2C6H3F2(3，4)，-NHCOC6H3F2(2，4)，-NHOCH2C6H4(NHSO2C6F5)(4)，-NHOCH2C6H4(NHSO2CH3)(4)，-N[COC6H3F2(2，4)]OCH2C4H4NO2(4)，-N[COC6H3F2(2，4)]OCH2C6H4[NHCOC6H3F2(2，4)](4)，-OCOC6H2F3(2，3，4)，-OCOC6H2F3(2，3，5)，-OCOC6H2F3(2，3，6)，＝NNHC6H2Br2(3，5)OCH3(4)，-O-環(huán)丙?；?O-環(huán)丁?；?，-O-環(huán)己酰基，-O-嗎啉代基， R3＝H，-CH2COOCH3，-CH2COOH，-CH2CH2COOCH3，-COCH＝CH2，3-脫氧二氫樺木酸(C3→)，3-脫氧樺木酸(C3→)，2-溴-3-氧代-28-?；鹕韧?，R4＝CH2＝C-CH3，CH(CH3)2和/或BrCH2C(Br)CH3。
3.一種用于制備樺木酸的3-O-苯甲?；苌锏姆椒ǎ摲椒òㄒ韵虏襟Ei)于室溫，在有機(jī)堿中用適當(dāng)?shù)谋郊柞Ｂ妊苌锾幚砭哂杏坞xC3羥基和/或C17羧基的樺木酸或二氫樺木酸衍生物大約6-16小時(shí)；ii)加水溶解反應(yīng)物，用有機(jī)溶劑萃取得到有機(jī)層；和iii)用無水硫酸鈉干燥有機(jī)層，蒸發(fā)，使殘余物結(jié)晶得到純的3-O-苯甲?；苌?。
4.按照權(quán)利要求3的方法，其中在步驟(i)中所用的苯甲酰氯衍生物表示為通式C6HnXCOCl，其中n＝2-4，和C10HnXCOCl(n＝2-6)，X＝H，Cl，Br，F(xiàn)，CF3，C6H5，OH，OCH3，C2H5，CHCI2，CnH2n＋1(n＝1-7)。
5.按照權(quán)利要求3的方法，其中所述的有機(jī)堿選自吡啶和哌啶。
6.一種用于制備樺木酸的3-N-羥乙基衍生物的方法，該方法包括以下步驟(a)將樺木酸的3-氧代衍生物溶于無水甲醇或乙醇中；(b)向其中加入15-20％的醇化鹽酸，于室溫下攪拌；(c)加入氰基硼氫鈉，并于室溫下攪拌；和(d)使步驟b)的溶液過濾和結(jié)晶，得到純的3-N-羥乙基衍生物。
7.一種用于制備樺木酸的3-N-亞芐基衍生物的方法，該方法包括以下步驟(a)將樺木酸的3-氨基衍生物溶解于甲醇或乙醇中；(b)向其中加入苯甲醛或取代的苯甲醛；(c)于室溫至70℃攪拌該混合物；和(d)真空除去溶劑，加水，得到N-亞芐基衍生物。
8.按照權(quán)利要求7的方法，其中在步驟b)的苯甲醛或取代苯甲醛中加入堿式碳酸鹽。
9.一種用于制備樺木酸的3-O-甲磺酸酯衍生物的方法，該方法包括以下步驟i)將具有游離C3羥基和/或C17羧基的樺木酸或二氫樺木酸衍生物溶于鹵代有機(jī)溶劑中，加入幾滴吡啶，接著在5-10℃緩慢加入甲磺酰氯；ii)混合物于室溫?cái)嚢?-4小時(shí)；iii)處理反應(yīng)混合物，用水洗滌有機(jī)層；和(iv)用無水硫酸鈉干燥有機(jī)層，過濾，蒸發(fā)至干，得到的殘余物在乙腈中結(jié)晶，得到純的3-O-甲磺酸酯衍生物。
10.一種用于制備樺木酸的3-苯肼基或其苯基取代衍生物的方法，該方法包括以下步驟i)將樺木酸或二氫樺木酸的3-苯腙或其苯基取代衍生物溶于冰醋酸中，并于氫氣氛(50-70psi)中，和在鉑棉催化劑存在下振蕩3-5小時(shí)；ii)過濾反應(yīng)混合物，真空蒸發(fā)所述的母液，以除去冰醋酸；和iii)用醇溶劑使殘余物結(jié)晶，得到純的3-苯肼基或其苯基取代衍生物。
11.按照權(quán)利要求10的方法，其中所述的醇溶劑選自甲醇、乙醇或異丙醇。
12.一種用于制備樺木酸的3-氨基衍生物的方法，該方法包括以下步驟i)將3-氧代衍生物溶于冰乙酸中，并于氫氣氛(60-70psi)中，和在氧化鉑催化劑存在下振蕩數(shù)小時(shí)；ii)過濾反應(yīng)混合物，真空蒸發(fā)得到母液，以除去冰醋酸；和iii)用醇溶劑使殘余物結(jié)晶，得到相應(yīng)的3-氨基衍生物。
13.按照權(quán)利要求12的方法，其中選擇3-氨基衍生物由包括以下步驟的下述方法制備i)將3-氧代衍生物溶于甲醇中；ii)加入硫酸銨和氫硼化鈉，回流該混合物；和iii)使反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，加水，過濾出固體，使其結(jié)晶后得到3-氨基衍生物。
14.一種用于制備樺木酸的3-氧代衍生物的方法，該方法包括以下步驟i)將具有游離C3羥基和/或C17羧基的樺木酸或二氫樺木酸衍生物溶于有機(jī)溶劑中；ii)加入常用的氧化劑；和iii)用常規(guī)的方法得到相應(yīng)的、純凈形式的3-氧代衍生物。
15.一種用于制備樺木酸的3-肟基衍生物的方法，該方法包括以下步驟i)將3-氧代衍生物溶解于醇溶劑中；ii)加入鹽酸羥胺或其O-取代衍生物，在反應(yīng)混合物中加入乙酸鈉，回流幾小時(shí)；iii)將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干；和iv)在反應(yīng)混合物中加水，然后過濾，得到粗制的3-肟基衍生物，結(jié)晶后得到相應(yīng)的純的3-肟基衍生物。
16.一種用于制備樺木酸的3-腙衍生物的方法，該方法包括以下步驟i)加入溶解于醇溶劑中的苯肼、烷基肼或其取代的3-氧代衍生物；ii)反應(yīng)混合物回流4小時(shí)；和iii)在反應(yīng)混合物中加水，然后過濾，得到苯肼衍生物，結(jié)晶后得到相應(yīng)的苯肼衍生物。
17.一種用于制備樺木酸的3-O-?；苌锏姆椒ǎ摲椒òㄒ韵碌牟襟E(i)在室溫下，于有機(jī)堿中，將具有游離C3羥基和/或C17羧基的樺木酸或二氫樺木酸衍生物用適合的酸酐(飽和或非飽和的)處理大約4-16小時(shí)，在該方法中可以使用的酸酐的實(shí)例由通式(RCH2CO)2O表示，其中R＝H、CH3、C2H5；(ii)蒸發(fā)反應(yīng)混合物，加入水并用有機(jī)溶劑萃??；和(iii)有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，蒸發(fā)，使殘余物結(jié)晶分別得到相應(yīng)的純3-O-?；苌?。
18.按照權(quán)利要求17的方法，其中所述的有機(jī)堿選自TEA、吡啶和DMPA。
19.按照權(quán)利要求17的方法，其中樺木酸的3-O-?；苌锟蛇x擇地由包括下述步驟的方法制備(i)在鹵代有機(jī)溶劑中，將具有游離C3羥基和/或C17羧基的樺木酸或二氫樺木酸衍生物用適合的酰氯在室溫下處理4-16小時(shí)；(ii)蒸發(fā)反應(yīng)混合物，加水并用有機(jī)溶劑萃取；(iii)蒸發(fā)殘余物，得到粗制的3-O-酰基衍生物，將其結(jié)晶得到樺木酸的純3-O-酰基衍生物。
20.按照權(quán)利要求19的方法，其中適用于該反應(yīng)的酰氯選自R(CH2)nCOCl，其中R＝H，Cl，Br，F(xiàn)，和n＝1-16，或R＝CH2(CH)nXCOCl，其中R＝H，X＝OH，OCOCH3和n＝1。
21.按照權(quán)利要求19的方法，其中所述的溶劑選自CCl4、CH2Cl2、C6H5CH3。
22.一種用于制備樺木酸的17和/或20-羧基烷基羧酸酯衍生物的方法，該方法包括以下步驟(i)將具有游離C17和/或C20羧基的樺木酸或二氫樺木酸衍生物溶解在無水二甲基甲酰胺中；(ii)加入氫化鈉，在室溫下攪拌該混合物大約兩小時(shí)；(iii)加入適合的烷基羧酸酯，并在室溫下使該混合物攪拌16-20小時(shí)；(iv)用水洗滌有機(jī)層；和(v)用無水硫酸鹽干燥有機(jī)層，隨后將其過濾，蒸發(fā)至干，將得到的殘余物結(jié)晶，便得到純的17和/或20-羧基烷基羧酸酯衍生物。
23.按照權(quán)利要求22的方法，其中所述的鹵代烷基羧酸酯選自乙酸甲酯或乙酸乙酯的氯或溴衍生物，或丙酸酯的氯或溴衍生物。
24.一種用于制備樺木酸的17和/或20-羧基烷基羧酸衍生物的方法，該方法包括下述步驟(i)將17和/或20-羧基烷基羧酸酯溶解在諸如甲醇、乙醇、丙醇等的醇溶劑中，并向其中加入氫氧化物如氫氧化鈉或氫氧化鉀等；(ii)將該混合物升溫至40-50℃加熱2-4小時(shí)；和(iii)用水洗滌有機(jī)層，無水硫酸鹽干燥有機(jī)層，而后過濾，蒸發(fā)至干，使得到的殘余物結(jié)晶，得到純的17和/或20-羧基烷基羧酸衍生物。
25.按照權(quán)利要求24的方法，其中所述的鹵代烷基羧酸酯選自乙酸甲酯或乙酸乙酯的氯或溴衍生物，或丙酸酯的氯或溴衍生物。
26.一種用于制備樺木酸的3-O-苯磺酸酯衍生物的方法，該方法包括以下步驟a)將具有游離C3羥基和/或C17羧基的樺木酸衍生物或二氫樺木酸衍生物溶解在氯代有機(jī)溶劑中，加入少許幾滴吡啶，而后加入苯磺酰氯或其苯取代的衍生物，同時(shí)保持溫度在5-10℃之間；b)在室溫下攪拌該混合物幾小時(shí)；c)通過由水洗滌有機(jī)層來分離純化該反應(yīng)混合物；d)用無水硫酸鈉干燥有機(jī)層，過濾，蒸發(fā)，得到的殘余物由腈或醇溶劑結(jié)晶，得到純的3-O-苯磺酸酯衍生物。
27.一種用于制備樺木酸的3-O-磺酰胺衍生物的方法，該方法包括F述步驟a)將3-氨基衍生物溶解在鹵代有機(jī)溶劑中，加入少許幾滴三乙胺，而后慢慢加入烷基磺酰氯或苯磺酰氯或其取代的衍生物，并保持溫度在5-10℃之間；b)在室溫下攪拌該混合物幾小時(shí)；c)通過用水洗滌來分離純化該反應(yīng)混合物；和d)用無水硫酸鈉干燥有機(jī)層，過濾，蒸發(fā)至干，得到的殘余物進(jìn)行結(jié)晶，得到純的3-O-磺酰胺衍生物。
28.一種用于制備樺木酸的芳族溴代衍生物的方法，該方法包括以下步驟(a)將樺木酸衍生物溶于三氟乙酸中；(b)向反應(yīng)混合物中加入N-溴代琥珀酰亞胺和少許幾滴10％的硫酸水溶液；(c)在室溫下攪拌該反應(yīng)混合物過夜；(d)加水并用乙酸乙酯萃取；(e)先用碳酸氫鹽水溶液，隨后再用水洗滌乙酸乙酯層；(f)用無水硫酸鈉干燥有機(jī)層，過濾，蒸發(fā)至干和殘余物由醇溶劑結(jié)晶，得到純的溴代化合物。
29.一種用于制備樺木酸的芳族氨基衍生物的方法，該方法包括以下步驟(a)將具有芳族硝基的樺木酸或二氫樺木酸衍生物溶解在甲醇中；(b)在室溫下加入10％Pd/c，隨后加入硼氫化鈉；(c)攪拌該反應(yīng)混合物幾小時(shí)；(d)過濾該反應(yīng)混合物，蒸發(fā)至干，加水分離純化，用有機(jī)溶劑萃?。?e)有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，過濾，并蒸發(fā)至干；和(f)步驟(e)的殘余物由醇或腈溶劑結(jié)晶，得到純的樺木酸的氨基衍生物。
30.一種用于制備樺木酸衍生物(特別提及的是MJ-1155RS、MJ-1161RS和MJ-1163RS)的方法，該方法包括以下步驟(a)將樺木酸或二氫樺木酸或2-溴-3-氧代-二氫樺木酸溶解于二甲基甲酰胺或鹵代有機(jī)溶劑(優(yōu)選二氯甲烷)中；(b)加入二環(huán)己基碳化二亞胺和二甲基氨基吡啶；(c)室溫下攪拌該反應(yīng)混合物過夜；(d)加水分離純化，然后用有機(jī)溶劑萃?。?e)用水洗滌有機(jī)層，用無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸發(fā)至干，得到的固體用醇結(jié)晶，得到相應(yīng)的純的樺木酸衍生物。
31.一種對(duì)患有癌癥，主要是白血病或淋巴癌或前列腺癌、肺癌、卵巢癌、結(jié)腸癌或喉癌的患者進(jìn)行治療的方法，該方法包括對(duì)患者施用藥學(xué)有效劑量的樺木酸衍生物或其結(jié)合物，或含有樺木酸衍生物或其結(jié)合物的制劑。
32.按照權(quán)利要求31的方法，其中所述的樺木酸衍生物是單獨(dú)使用或是與藥物上可接受的載體結(jié)合使用。
33.按照權(quán)利要求31的方法，其中所述的樺木酸衍生物可系統(tǒng)給藥或口服給藥。
34.按照權(quán)利要求31的方法，其中要治療的病理癥狀選自影響到卵巢、結(jié)腸、肺、喉或前列腺的白血病。
35.按照權(quán)利要求31的方法，其中的受治療者選自動(dòng)物或哺乳動(dòng)物，優(yōu)選是人。
36.按照權(quán)利要求31的方法，其中活性樺木酸衍生物抗白血病或淋巴癌的ED50值分別在0.34-2.00μg/ml和0.3-4.0μg/ml的范圍內(nèi)。
37.按照權(quán)利要求31的方法，其中活性樺木酸衍生物抗前列腺癌的ED50值在0.4-4.0μg/ml的范圍內(nèi)。
38.按照權(quán)利要求31的方法，其中活性樺木酸衍生物抗肺癌的ED50值在0.5-4.0μg/ml的范圍內(nèi)。
39.按照權(quán)利要求31的方法，其中活性樺木酸衍生物抗卵巢癌的ED50值在0.5-4.0μg/ml的范圍內(nèi)。
40.按照權(quán)利要求31的方法，其中活性樺木酸衍生物抗結(jié)腸癌的ED50值在0.35-4.0μg/ml范圍內(nèi)。
41.按照權(quán)利要求31的方法，其中活性樺木酸衍生物抗喉癌的ED50值在1.0-4.0μg/ml范圍內(nèi)。
42.按照權(quán)利要求31的方法，其中對(duì)患者施用的活性樺木酸衍生物可與藥物上可接受的添加劑、載體、稀釋劑、溶劑、填充劑、潤(rùn)滑劑、賦形劑、粘合劑或穩(wěn)定劑結(jié)合給藥。
43.按照權(quán)利要求31的方法，其中用于人的施用日劑量在10-200mg/kg/天范圍內(nèi)。
44.按照權(quán)利要求31的方法，其中優(yōu)選的劑量在20-50mg/kg/天范圍內(nèi)。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的樺木酸衍生物,該衍生物是對(duì)樺木酸的C
文檔編號(hào)C07C309/00GK1326462SQ99813474
公開日2001年12月12日 申請(qǐng)日期1999年11月17日 優(yōu)先權(quán)日1998年11月18日
發(fā)明者桑達(dá)爾·拉瑪多斯, 曼努·賈吉, 穆罕默德·賈姆希德·艾哈邁德·西迪基, 阿赫拉·貝爾·康納 申請(qǐng)人:達(dá)布爾研究基金會(huì)