專利名稱：用以生產(chǎn)微膠囊的生物可降解復(fù)合材料的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物可降解聚合復(fù)合材料，用以生產(chǎn)能裝諸如食品、藥物和免疫原等任何物質(zhì)或能裝油類、色料、酶等工程技術(shù)材料的微膠囊。
背景技術(shù)：
為了使液體或固體物質(zhì)免受外部影響，采用微粒或膠囊形式加以保護(hù)，對(duì)于各種不同的應(yīng)用領(lǐng)域，例如食品工業(yè)、藥劑學(xué)和工程技術(shù)，都具有重要意義。微粒的物理、化學(xué)和生物特性取決于●生產(chǎn)工藝(干燥噴霧法，凝聚層形成法(koazeivation)，擠出法(Extrusion)，封閉法(乳化劑法和分散劑法)，共聚合法，通過(guò)超臨界氣體超微粉化)，●所使用的基質(zhì)、包皮/膠囊材料(不同化合和混合比的單、二和多糖，蛋白質(zhì)(Proteine)，聚氨基酸(Polyaminosaeuren)，聚羧酸(Polycarbonsaeuren)，聚(丙交酯共乙交酯)(poly(lactid-co-glycolid))，丙烯酸酯(Acrylate)，多元醇及其共聚物，脂質(zhì)體，硅酸酯(Silikat)等。
●可能的表面改性(免疫球蛋白(Immunglobuline)，植物血凝素(Lektine)，聚(乙二醇)(Poly(ethylenglycol))，GM1神經(jīng)節(jié)苷脂(Gangliosid)，藥理學(xué)有效化合物)。
當(dāng)今的技術(shù)發(fā)展趨勢(shì)一方面是生產(chǎn)小型膠囊和微粒的工藝，另一方面是為不斷擴(kuò)大的應(yīng)用領(lǐng)域?qū)ふ倚碌哪z囊材料。
特別是，為了指向目標(biāo)把藥物釋放出來(lái)，正在尋找這樣的解決辦法，即既能可靠地保護(hù)有效物質(zhì)不受外界的影響，又能作為運(yùn)輸工具把有效物質(zhì)輸送到預(yù)定的作用區(qū)域，然后在目的地把有效物質(zhì)釋放出來(lái)。
根據(jù)美國(guó)專利US-A5,700,486了解到，構(gòu)成膠囊的制藥學(xué)成份中的生物可降解聚合物或二元共聚物可用來(lái)控制藥理學(xué)有效物質(zhì)的釋放。其中，被引用的成份完全是均聚物和二元共聚物的物理混合物，其混合含量在膠囊配制過(guò)程之前是可變的。這種生物可降解聚合物的缺點(diǎn)是，物質(zhì)既不能指向目標(biāo)釋放，也不能通過(guò)規(guī)定的酶的作用釋放。
美國(guó)專利US-A5,686,113描述了在水溶液中微膠囊的形成。所采用的生物可降解膠囊材料是陰離子聚合物或其鹽類與一種氨基官能化單體的混合物，其中，在配制微膠囊過(guò)程中形成反應(yīng)生成物。這種混合物的缺點(diǎn)在于，微膠囊的生成反應(yīng)不能同時(shí)在含水和不含水的系統(tǒng)中完成。利用所述表面改性，微粒雖然可以有選擇地與一定的配體結(jié)合，但膠囊壁不可能在結(jié)合部位發(fā)生特效溶解。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的任務(wù)在于，找到適當(dāng)?shù)纳锟山到獬煞?，技術(shù)上能用簡(jiǎn)單的方法生產(chǎn)并能裝任何物質(zhì)的微膠囊，而且，既能使諸如油類、色料、酶、藥物、免疫原、核酸等各種物質(zhì)暫時(shí)與周圍環(huán)境分離，又能適合于指向目標(biāo)輸送和有控制地釋放藥理學(xué)有效物質(zhì)。
有一種聚合物復(fù)合材料令人驚異地適合于作為膠囊壁材料，它是一種均勻的反應(yīng)生成物，并能支配亞結(jié)構(gòu)之間的共價(jià)結(jié)合，同時(shí)所采用的成份中至少有一種成份具有親水性。這種復(fù)合材料允許用固體的或溶解的材料在含水和不含水的系統(tǒng)中形成微膠囊。
根據(jù)本發(fā)明的生物可降解聚合物只與規(guī)定的配體結(jié)合，并且僅在已知因素的影響下分解為亞單元。新型的聚合物可用于各種不同的應(yīng)用場(chǎng)合。
可以生產(chǎn)這樣的膠囊材料，這種材料根據(jù)使用的目的與靶細(xì)胞特效結(jié)合，能被靶細(xì)胞吸收，或者能在細(xì)胞表面或細(xì)胞內(nèi)部溶解。不可降解或難降解物質(zhì)與通過(guò)特定的酶特效裂解的材料(復(fù)合材料)發(fā)生化合的這一基本概念可以用于極端不同的生物和工程技術(shù)領(lǐng)域，將創(chuàng)造新型的藥物運(yùn)載體系。有目的地表面改性和選擇只要通過(guò)適合本體的和病原體的酶才裂解的分割部位，就可能在病理學(xué)反應(yīng)標(biāo)本的位點(diǎn)上達(dá)到特別高的有效物質(zhì)濃度。通過(guò)-使用這種新型材料，-微粒度的變化(nm-μm)，-在應(yīng)用不同復(fù)合材料條件下形成多層膠囊壁結(jié)構(gòu)，-通過(guò)“配制芯層-殼層膠囊”或共聚合反應(yīng)采用不同的微膠囊生產(chǎn)工藝，可采用下列一般化學(xué)式的復(fù)合材料R1n-P1-(Q-P2)1-R2m式中相同或不同高分子結(jié)構(gòu)的P1和P2，最好由聚酯、聚酰胺或多糖類構(gòu)成。
R1和R2相當(dāng)于相同或不同的端基或保護(hù)基，或者更準(zhǔn)確地說(shuō)，受體分子或基因。
i，n和m在自然數(shù)范圍內(nèi)，個(gè)別情況下可取0或1。
Q相當(dāng)于一個(gè)具有親水特性的至少是雙官能的結(jié)構(gòu)，由多元醇、聚酰胺和聚酯類得出，作為膠囊壁材料使用，為了裂解亞結(jié)構(gòu)R、P之間和/或Q內(nèi)部的結(jié)合，它有一個(gè)酶識(shí)別和/或分割部位。
對(duì)于P1和P2而言，特別優(yōu)先考慮使用帶有羥基羧酸及其鹽或酯的結(jié)構(gòu)要素的聚合物。最為重要的是聚酯，例如聚乙醇酸交酯，聚交酯，聚(羥基奶油酸)或由此產(chǎn)生的(二元)共聚物，多糖，如聚半乳糖醛酸或藻酸。端基或保護(hù)基R1和/或R2是?；?、烷基或烷氧基羰基。在另一實(shí)施變型中，R1和/或R2是標(biāo)志基因、受體分子或另外一種與結(jié)構(gòu)特效結(jié)合的分子，最好由低肽物類、蛋白質(zhì)、糖蛋白和低核苷酸構(gòu)成。一般可取的受體分子是外源凝集素，受體配體或抗體。
特別適合于作為結(jié)構(gòu)要素Q的是由單糖、二糖和多糖得出的化合物和在一定情況下支配氨基或羰基的化合物，或適合于由二肽、低聚肽或多肽得出的化合物。結(jié)構(gòu)要素Q最好具有酶識(shí)別和分割部位，它最好還有二糖或多糖，或帶有特定蛋白酶分割部位的低聚肽。
特別可取的是，由復(fù)合材料構(gòu)成的混合物用作為配制膠囊的材料，其中i＝0或i＝1。
根據(jù)本發(fā)明，采用符合本發(fā)明的復(fù)合材料，并使物質(zhì)，例如礦物油之類的有害物質(zhì)，與周圍環(huán)境暫時(shí)分離，生產(chǎn)出微膠囊。
使用符合本發(fā)明的帶有不同標(biāo)志基因或受體分子R1和/或R2的復(fù)合材料，其優(yōu)點(diǎn)在于用它們識(shí)別細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外結(jié)構(gòu)。由于使用復(fù)合材料以及由于經(jīng)過(guò)分子識(shí)別而系住了一個(gè)標(biāo)志基因，因而可以實(shí)現(xiàn)目標(biāo)定向運(yùn)載，并實(shí)現(xiàn)有目的地釋放物質(zhì)，把在免疫學(xué)上和/或藥理學(xué)/毒性上有效的物質(zhì)釋放到作用部位。
利用符合本發(fā)明的復(fù)合材料，在有機(jī)溶劑或含水乳狀液中，根據(jù)已知的工藝，例如通過(guò)配制芯層-殼層膠囊的工藝，可以生產(chǎn)能裝任何物質(zhì)，例如能裝食品類、藥劑調(diào)制或技術(shù)產(chǎn)品或添加劑的微膠囊?？刹捎玫膹?fù)合材料可以取自下面的表1。

表1符合本發(fā)明的復(fù)合材料R1n-P1-(Q-P2)1-R2m)2(實(shí)施例1-11)實(shí)施 R1R2P1)1P2)1Q)1n i m例號(hào)1 OAc OAcPLA2000PLA2000 Lys-Lys 1 1 12 OAc OAcPLA2000PLA2000 His-His 1 1 13 COOH COOH PLA17000 PLA PLA170001 1 117000 |H-Lys-Cys-Thr-Cys-Cys-Ala-OH4 COOH COOH PGUS PGUS Lys-Lys 1 1 15 COOH COOH PGUS PGUS His-His 1 1 16 NH2 COOH PGlu PGlu His-His 1 1 -7 OAc OAcPLA2000PLA2000 Lactose(乳糖) 1 1 18 OAc OAc PLA17000 PLA Lactose(乳糖) 1 1 1170009 OHOHPLA2000 PLA2000 Dextran(葡聚糖)1 1 110Lektin)1Lektin)1MS-PLA2000 - - 1 0 111BAS)1BAS)1MS-PLA2000 - - 1 0 11)在給出的結(jié)構(gòu)要素中沒(méi)有考慮形式上被替代的氫原子或終端基。2)一般的化學(xué)式不反映同分異構(gòu)區(qū)的存在。


圖1是根據(jù)實(shí)施例12添加和不添加酶(β半乳糖苷酶)時(shí)微膠囊中兔免疫球蛋白G的釋放情況。
圖2是根據(jù)實(shí)施例12微膠囊中兔免疫球蛋白G的釋放與用PLA17000構(gòu)成的模擬微膠囊的比較。
圖3是根據(jù)實(shí)施例16添加和不添加酶(β半乳糖苷酶)時(shí)微膠囊中莧菜紅的釋放情況。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1由O型乙酰基聚交酯(O-Acetyl-polylactid)2000和雙賴氨酸(Dilysin)構(gòu)成的復(fù)合材料一次將EDC溶液(1ml水中95.6mg)和DMAP溶液(2ml乙腈中122mg)添加到Ac-PLA2000(1g)在乙腈(40ml)中的溶液。反應(yīng)混合物常溫下在超聲浴器中活化30分鐘。將H-Lys-Lys-OH·2HCl溶液(2ml水中80.3mg)添加到活化的混合物，并在50℃的溫度下將整個(gè)沉積物攪拌2小時(shí)。然后，將反應(yīng)混合物在真空中濃縮到約10ml。接下來(lái)用30ml的乙醇/水(v/v50/50)洗滌殘留的油。將形成的固體物進(jìn)行離心分離(5000轉(zhuǎn)/分，5分鐘)，用20ml的水洗滌，再次進(jìn)行離心分離，并在真空中干燥。
紅外光譜3342，3335(NH)，1759(酯)，1647(酰胺)1H-NMRδ＝1.4-1.61(m，CH3)，2.58-3.27(m，CH2)，5.08-5.15(m，CH)，6.58-6.61(m，NH)，8.15-8.17(m，NH)；13C-NMRδ＝14.6，15.5，16 5，17.6，20.4，20.5(CH3，PLA)，25.6，34.9，35.5，36.7(CH2)，39.5，40.9，43.1(CH)，55.6(CH2)，68.9(CH，PLA)，106.5，143.6(CH)，169.5，169.6，169.8，170.3(CO，PLA)，175.0(COOH，PLA)，175.8(COOH)實(shí)施例2由O型乙?；劢货?O-Acetyl-polylactid)2000和雙組氨酸(Dihistidin)構(gòu)成的復(fù)合材料一次將EDC溶液(1ml水中95.6mg)和DMAP溶液(2ml乙腈中122mg)添加到Ac-PLA2000(1g)在乙腈(40ml)中的溶液。反應(yīng)混合物常溫下在超聲浴器中活化30分鐘。將H-His-His-OH·三氟乙酸溶液(2ml水中101.6mg)添加到活化的混合物，并在50℃的溫度下將整個(gè)沉積物攪拌2小時(shí)。然后，將反應(yīng)混合物在真空中濃縮到約10ml。接下來(lái)用30ml的乙醇/水(50/50)洗滌殘留的油。將形成的固體物進(jìn)行離心分離(5000轉(zhuǎn)/分，5分鐘)，用20ml的水洗滌，再次進(jìn)行離心分離，并在真空中干燥。
紅外光譜3504，3496(NH)，1759(酯)，1648(酰胺)實(shí)施例3由O型氯乙?；劢货?O-Chloracety-polylactid)17000和富含半胱氨酸的肽(cysteinreichen Peptid)構(gòu)成的復(fù)合材料將一H-Lys-Cys-Thr-Cys-Cys-Ala-OH·三氟乙酸溶液(1ml水中25mg)和DBU(20μl)添加到ClAc-PLA17000溶液(50ml乙腈z中1.73g)，并全部在50℃的溫度下攪拌3小時(shí)。然后，將反應(yīng)混合物在真空中濃縮到約10ml。再用40ml的乙醇/水(50/50)洗滌殘留的油，并小心地將溶液傾析。用30ml的乙醇重復(fù)上述過(guò)程，并讓產(chǎn)品在真空中干燥。
元素分析ber.N0.19；gef.N0.25紅外光譜3504(NH)，1751(酯)，1648(酰胺)實(shí)施例4由聚半乳糖醛酸(Polygalacturonsaeure)和雙賴氨酸(Dilysin)構(gòu)成的復(fù)合材料將BrCN-溶液(35μl，c＝0.1g/l在乙腈中)放在10ml水中稀釋，并滴入Na2CO3-緩沖液(100ml)中形成聚半乳糖醛酸(1.25g)溶液。攪拌15分鐘后，添加H-Lys-Lys-OH·2HCl(5.335mg)在水(5ml)中的溶液，并在常溫下將反應(yīng)混合物攪拌過(guò)夜。用乙醇將制成品析出，進(jìn)行離心分離(4000轉(zhuǎn)/分，5分鐘)，然后凍干。
紅外光譜3600-3100(OH，NH)，1606(bs sh，COOH COO-，酰胺)，1098(C-O-C)實(shí)施例5由聚半乳糖醛酸(Polygalacturonsaeure)和雙組氨酸(Dihistidin)構(gòu)成的復(fù)合材料將BrCN-溶液(35μl，c＝0.1g/l在乙腈中)放在10ml水中稀釋，并滴入Na2CO3-緩沖液(100ml)中形成聚半乳糖醛酸(1.25g)溶液。攪拌15分鐘后，添加H-His-His-OH·三氟乙酸(6.24mg)在水(5ml)中的溶液，并在常溫下將反應(yīng)混合物攪拌過(guò)夜。用乙醇將制成品析出，進(jìn)行離心分離(4000轉(zhuǎn)/分，5分鐘)，然后凍干。
紅外光譜3600-3100(OH，NH)，1608(bs sh，COOH COO-，酰胺)，1098(C-O-C)實(shí)施例6由聚谷氨酸(Polyglutaminsaeure)和雙組氨酸(Dihistidin)構(gòu)成的復(fù)合材料讓聚谷氨酸(100mg)混懸在乙腈(10ml)中。添加EDC溶液(1ml水中2.24mg)和DMAP溶液(1ml乙腈中2.144mg)?；旌衔镌?0℃的溫度下在超聲浴器中活化30分鐘。然后添加H-His-His-OH·三氟乙酸(2.4mg)在水(1ml)中的溶液，并在50℃的溫度下攪拌2小時(shí)。然后進(jìn)行離心分離(4000轉(zhuǎn)/分，5分鐘)出固體物，用5ml的乙醇/水(50/50)洗滌，并重新進(jìn)行離心分離。用5ml的水重復(fù)上述過(guò)程。最后將制成品凍干。
紅外光譜3342，3287(NH)，1733(CO)，1645(酰胺)實(shí)施例7由O型乙酰基聚交酯(O-Acetyl-polylactid)2000和乳糖(Lactose)構(gòu)成的復(fù)合材料一次將EDC溶液(5ml水中960mg)和DMAP溶液(10ml乙腈中610mg)添加到Ac-PLA2000(10g)在乙腈(150ml)中的溶液。反應(yīng)混合物常溫下在超聲浴器中活化30分鐘。將乳糖溶液(25ml水中1.8g)添加到活化的混合物，并在50℃的溫度下攪拌2小時(shí)。然后，將反應(yīng)混合物在真空中濃縮到約20ml。接下來(lái)用100ml的水洗滌剩下的殘留物，進(jìn)行離心分離(3500轉(zhuǎn)/分，10分鐘)，并在真空中干燥。
1H-NMRδ＝1.13-1.35(m，CH3)，1.45-1.62(m，CH3，PLA)，2.10(s，CH3)，2.57-2.71(m，CH)，3.17(s，CH)，4.30-4.37(m，CH)，5.10-5.19(CH，PLA)；13C-NMRδ＝14.6，16.6，16.7，17.4，20.5(CH3)，39.8，42.77，42.81，43.0(CH)，66.6，68.2，68.5，68.7，68.8，68.9，69.1，69.4(CH)，169.16，169.2，169.3，169.6，169.7，170.3，170.4(C＝O)，175.2(COOH)實(shí)施例8由O型乙?；劢货?O-Acetyl-polylactid)17000和乳糖(Lactose)構(gòu)成的復(fù)合材料一次將EDC溶液(1ml水中96mg)和DMAP溶液(1ml乙腈中61mg)添加到Ac-PLA17000(8.5g)在乙腈(100ml)中的溶液。反應(yīng)混合物常溫下在超聲浴器中活化30分鐘。將乳糖溶液(5ml水中90mg)添加到活化的混合物，并在50℃的溫度下攪拌2小時(shí)。然后，將反應(yīng)混合物在真空中濃縮到約20ml。接下來(lái)用100ml的乙醇/水(50/50)洗滌剩下的殘留物，并小心地將溶液傾析。用100ml的乙醇/水(50/50)和50ml的乙醇重復(fù)以上過(guò)程。最后讓產(chǎn)品在真空中干燥。
1H-NMRδ＝1.18-1.26(m，CH3)，1.41-1.56(m，CH3，PLA)，1.98(s，CH3)，2.70(s，CH)，3.12(s，CH)，3.68(dd，CH)，4.13-4.21(m，CH)，4.29-4.37(m，CH)，5.06-5.23(CH，PLA)；13C-NMRδ＝14.0，16.6，16.7，18.4，20.5(CH3)，58.3，61.5(CH2)，66.57，66.63，68.9，69.1，69.2，69.4(CH)，169.1，169.2，169.3，169.4，169.5(C＝O)MALDI-TOF-MS證實(shí)了結(jié)構(gòu)AcO-PLA-Lactose-PLA-OAc實(shí)施例9由O型乙酰基聚交酯(O-Acetyl-polylactid)2000和葡聚糖(Dextran)6000構(gòu)成的復(fù)合材料一次將EDC溶液(1ml水中95.6mg)和DMAP溶液(1ml乙腈中61mg)添加到Ac-PLA2000(1g)在乙腈(40ml)中的溶液。將葡聚糖6000(3g)在水中的溶液添加到混合物，并在50℃的溫度下將整個(gè)沉積物攪拌2小時(shí)。然后析出白色的沉淀物，進(jìn)行離心分離(3000轉(zhuǎn)/分，10分鐘)，并用40ml的水洗滌。然后重新離心分離，并讓固體物在真空中干燥。
1H-NMRδ＝1.44，1.46(CH3，PLA)，3.04-3.71(m，CH，CH2，葡聚糖)4.66(bd)，5.15-5.22(m，CH，PLA)；13C-NMRδ＝16.7(CH3)，66.2(CH2)，68.9，70.3，70.6，72.0，72.7，73.5，98.4(CH)，169.4(C＝O)實(shí)施例10由O型馬來(lái)酰基聚交酯2000(O-Maleoyl-polylactid)和外源凝集素(Lektin)UEA I構(gòu)成的復(fù)合材料讓MS-PLA2000(0.736mg)和EDC(0.269mg)混懸在0.1M MES緩沖溶液(1ml)中，并在常溫下在超聲浴器中活化30分鐘。添加外源凝集素UEAI(10mg)，并將混合物在常溫下?lián)u蕩2小時(shí)。然后將固體物進(jìn)行離心分離(3000轉(zhuǎn)/分，10分鐘)，在水中洗滌兩次，并凍干。
實(shí)施例11由O型馬來(lái)酰基聚交酯2000(O-Maleoyl-polylactid)和白蛋白(BSA)(Albumin)構(gòu)成的復(fù)合材料讓MS-PLA2000(0.736mg)和EDC(0.269mg)混懸在0.1M MES緩沖溶液(1ml)中，并在常溫下在超聲浴器中活化30分鐘。添加BSA(20mg)，并將混合物在常溫下?lián)u蕩2小時(shí)。然后將固體物進(jìn)行離心分離(3000轉(zhuǎn)/分，10分鐘)，在水中洗滌兩次，并凍干。
實(shí)施例12根據(jù)實(shí)施例8的復(fù)合材料配制兔免疫球蛋白(Rabbit)G微膠囊通過(guò)搖蕩讓1g凍干的兔免疫球蛋白G制劑(顆粒度1到5μm)混懸在100ml的石油醚(80-100℃)中。在5小時(shí)的時(shí)間內(nèi)分10次滴入1g由實(shí)施例8的復(fù)合材料構(gòu)成的溶液和5ml丙酮。繼續(xù)攪拌1小時(shí)。沉淀后，過(guò)濾混懸液，用20ml的石油醚洗滌，然后吹干。
為了對(duì)酶分割部位的作用原理作對(duì)比研究，使用聚交酯17000和根據(jù)實(shí)施例8的相應(yīng)的復(fù)合材料作外殼材料，并作模擬處理。
37℃時(shí)在孵化攪拌器中對(duì)在PH為7.3的PBS緩沖液中的釋放情況進(jìn)行觀測(cè)研究。讓200mg的微粒混懸在10ml的PBS緩沖液中。為了觀測(cè)研究酶對(duì)微粒外殼穩(wěn)定性的影響，在加入微粒之前，投入β半乳糖苷酶(20單位)。在30分鐘的時(shí)間間隔內(nèi)取出500μl溶液，以5000l/min離心分離5分鐘，利用ELISA對(duì)浮在表面上的兔免疫球蛋白G含量進(jìn)行分析。
結(jié)果匯集在圖1和2中。
實(shí)施例13根據(jù)實(shí)施例7的復(fù)合材料配制白蛋白(Albumin)(BSA)微膠囊將1g根據(jù)例7的復(fù)合材料溶解在10ml的二氯甲烷中。然后將20mg的BSA分散投入500μl的水中。然后以500l/min向乳狀液滴入1％的聚乙烯醇溶液300ml。再攪拌30分鐘，以1800l/min離心分離5分鐘。浮在上面的溶液被分離。微粒與少量的水再次混懸，重新離心分離，然后在真空中干燥。
實(shí)施例14借助干燥噴霧法根據(jù)實(shí)施例7的復(fù)合材料配制白蛋白(BSA)微膠囊將400mg的BSA溶解在200ml的水中。其中有20g根據(jù)例7的復(fù)合材料是這樣分散在100ml的二氯甲烷中，即二氯甲烷幾乎完全被蒸發(fā)，并產(chǎn)生一種穩(wěn)定的乳狀液。然后將乳狀液噴霧干燥。
設(shè)備條件進(jìn)口溫度93℃，出口溫度63-66℃，抽吸器98％，泵10％
實(shí)施例15根據(jù)實(shí)施例7的復(fù)合材料配制兔免疫球蛋白(Rabbit)G/PLA17000內(nèi)核(Kernen)的芯層-殼層膠囊(Core-Shell-Verkapselung)將1g兔免疫球蛋白G/PLA17000內(nèi)核(模擬實(shí)施例12制成，d＝1-10μm)經(jīng)攪拌混懸在50ml的石油醚(80-100℃)中。再滴入0.05g根據(jù)例實(shí)施10的復(fù)合材料和0.05g的PLA17000熱解在2ml丙酮中的溶液。然后繼續(xù)攪拌1小時(shí)。沉淀后，過(guò)濾混懸液，用20ml的石油醚洗滌，然后吹干。
再混懸的微粒與有抗烏樂(lè)涂層的熒光硅酸酯(Silikat)微粒(d＝800nm)定量粘接。
實(shí)施例16根據(jù)實(shí)施例7的復(fù)合材料配制硅酸酯(Silkatpartibeln)微粒(用莧菜紅浸染)微膠囊合成硅酸酯(Silikat)微粒(d＝800nm)被作為內(nèi)核材料使用。將2g硅酸酯(Silikat)微粒放在莧菜紅的水溶液(50mg/50ml水)中攪拌10分鐘，進(jìn)行離心分離和干燥。讓1g的這種微?；鞈以?00ml的石油醚(80-110℃)中。在5小時(shí)內(nèi)分10次滴入1g根據(jù)實(shí)施例7的復(fù)合材料和5ml的丙酮進(jìn)行。繼續(xù)攪拌1小時(shí)。沉淀后，過(guò)濾混懸液，用20ml的石油醚洗滌，然后吹干。
37℃時(shí)在孵化攪拌器中對(duì)在Ph為7.3的PBS緩沖液中的釋放情況進(jìn)行觀測(cè)研究。讓200mg的微?；鞈以?0ml的PBS緩沖液中。為了觀測(cè)研究酶對(duì)微粒外殼穩(wěn)定性的影響，在加入微粒之前，投入β半乳糖苷酶(20單位)。在30分鐘的時(shí)間間隔內(nèi)取出500μl溶液，在波長(zhǎng)為520nm時(shí)用分光光度計(jì)對(duì)莧菜紅的含量進(jìn)行分析。
結(jié)果匯集在圖3中。
權(quán)利要求
1.用以生產(chǎn)微膠囊的生物可降解聚合復(fù)合材料由固體或溶解物質(zhì)構(gòu)成，或由有機(jī)溶劑中的添加物或含水乳狀液構(gòu)成，其特征在于，它具有下列一般化學(xué)式的聚合成份R1n-P1-(Q-P2)1-R2m式中P1和P2代表相同或不同的高分子結(jié)構(gòu)，R1和R2相當(dāng)于相同或不同的端基或保護(hù)基，或者相當(dāng)于受體分子或標(biāo)志基因，i，n和m在自然數(shù)范圍內(nèi)，個(gè)別情況下可取0或1，以及Q相當(dāng)于一個(gè)具有親水特性的至少是雙官能的結(jié)構(gòu)，由多元醇、聚酰胺和聚酯類得出，同時(shí)，為了裂解亞結(jié)構(gòu)R、P之間和/或Q內(nèi)部的結(jié)合，它具有一個(gè)酶識(shí)別和/或分割部位。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合材料，其特征在于，P1和P2是具有由聚酯類、聚酰胺/多胺或多糖構(gòu)成或由羥基羧酸及其鹽或酯構(gòu)成的結(jié)構(gòu)要素的聚合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的復(fù)合材料，其特征在于，聚酯是聚乙醇酸交酯、聚交酯、聚(羥基羧酸)或由此產(chǎn)生的(二元)共聚物。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的復(fù)合材料，其特征在于，多糖是聚半乳糖醛酸或藻酸。
5.根據(jù)權(quán)利要求1到5所述的復(fù)合材料，其特征在于，端基或保護(hù)基R1和/或R2是?；驶⑼榛驶蛲檠趸驶?。
6.根據(jù)權(quán)利要求1到5所述的復(fù)合材料，其特征在于，R1和/或R2代表標(biāo)志基因、受體分子或另外一種與結(jié)構(gòu)特效結(jié)合的分子，最好由低肽物類、蛋白質(zhì)、糖蛋白和低核苷酸等物類構(gòu)成。
7.根據(jù)權(quán)利要求1到6所述的復(fù)合材料，其特征在于，結(jié)構(gòu)要素Q代表一種由單、雙和多糖或在一定情況下支配氨基或羰基導(dǎo)出的化合物，或者，Q代表由二肽、低聚肽或多肽導(dǎo)出的化合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求1到7所述的復(fù)合材料，其特征在于，結(jié)構(gòu)要素Q是一種可以由酶裂解的分子。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的復(fù)合材料，其特征在于，結(jié)構(gòu)要素Q含有一個(gè)二糖或多糖。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述復(fù)合材料，其特征在于，結(jié)構(gòu)要素Q含有一個(gè)帶有特定蛋白酶分割部位的低聚肽。
11.根據(jù)權(quán)利要求1到10所述的復(fù)合材料，其特征在于，采用一般化學(xué)式的化合物，其中i＝0或i＝1。
12.應(yīng)用根據(jù)權(quán)利要求1到11所述的聚合復(fù)合材料暫時(shí)與周圍環(huán)境的物質(zhì)分離。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的應(yīng)用被運(yùn)用在具有不用酶識(shí)別和分割部位的多層殼中。
14.根據(jù)權(quán)利要求12和13所述的應(yīng)用是利用不同的標(biāo)志基因分子或受體分子R1和/或R2。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的應(yīng)用是利用能識(shí)別細(xì)胞內(nèi)和/或細(xì)胞外結(jié)構(gòu)的不同標(biāo)志基因分子或受體分子R1和/或R2。
16.根據(jù)權(quán)利要求12和15所述的對(duì)復(fù)合材料的應(yīng)用是為了目標(biāo)定向運(yùn)載和釋放在免疫學(xué)上和/或藥理學(xué)/毒性上有效的物質(zhì)。
17.用固體或溶解物質(zhì)或添加物生產(chǎn)微膠囊的方法，其特征在于，把按照 1到11所述的復(fù)合材料放在有機(jī)溶劑中溶解，或由此制成含水的乳狀液，并按照已知的技術(shù)配制膠囊。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種生物可降解聚合復(fù)合材料,用以生產(chǎn)能裝諸如食品、藥物和免疫原等任何物質(zhì)或能裝油類、色料、酶等工程技術(shù)材料的微膠囊。根據(jù)本發(fā)明,可降解復(fù)合材料具有一般化學(xué)式R
文檔編號(hào)C08G69/00GK1339964SQ0080389
公開日2002年3月13日 申請(qǐng)日期2000年2月20日 優(yōu)先權(quán)日1999年2月19日
發(fā)明者M·泰勒, H·W·海里西, J·泰勒, U·邁爾 申請(qǐng)人:生化研究股份公司