專(zhuān)利名稱：一種桑葉多糖產(chǎn)品及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種桑葉多糖產(chǎn)品，更具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及一種利用?？浦参锷?shù)(Morus albail)的葉子提取的桑葉多糖產(chǎn)品，本發(fā)明還涉及該桑葉多糖產(chǎn)品的用途。
桑葉是生產(chǎn)蠶繭的主要原料，在我國(guó)南方一年四季均可種植采集，在蠶桑各階段產(chǎn)品中也是來(lái)源最容易、資源最豐富、價(jià)格最便宜的產(chǎn)品。文獻(xiàn)記載桑葉具清肝明目、利五臟、降血脂、降血壓、降血糖、抑制癌癥等功效。但長(zhǎng)期以來(lái)，桑葉僅主要用于養(yǎng)蠶，除少量作為中藥外，桑葉中許多有價(jià)值的成分還沒(méi)有開(kāi)發(fā)出來(lái)，資源沒(méi)有得到充分的利用。
本發(fā)明目的在于提供一種利用桑科植物桑樹(shù)的葉子提取的桑葉多糖產(chǎn)品。
本發(fā)明的另一目的在于提供該桑葉多糖產(chǎn)品的用途。
本發(fā)明提供的桑葉多糖產(chǎn)品，以?？浦参锷?shù)的葉子為原料，按下述順序的步驟制備得到(1)用水浸泡洗去雜質(zhì)，晾干后粉碎稱量；(2)用有機(jī)溶劑浸泡，除去脂溶部份，然后過(guò)濾取渣去液；(3)將渣減壓去有機(jī)溶劑，所得的桑粉渣用水泡，重復(fù)三至五次，過(guò)濾、取液；(4)將步驟(3)所得的濾液加入有機(jī)溶劑，攪拌后靜置、分層，除去上層含葉綠素部分；(5)將步驟(4)所得的濾液脫去非糖有機(jī)物及無(wú)機(jī)鹽；(6)將步驟(5)所得的濾液用酸性離子交換，再用堿性離子交換去蛋白；(7)對(duì)離交下柱液部分加氨水中和至中性，加乙醇形成紅棕色沉淀物；(8)再用無(wú)水乙醇洗滌紅棕色沉淀物2～3次，后用陰離子交換樹(shù)脂和陽(yáng)離子交換樹(shù)脂截取分子量在15000～50000道爾頓之間的多糖；(9)將步驟(8)所得液濃縮后烘干、粉碎，即得本桑葉初級(jí)多糖產(chǎn)品。
本發(fā)明可將上述步驟(8)的所得物進(jìn)一步提純，用高壓液相色譜分離、純化得分子量在15000～25000道爾頓之間的多糖，后再繼續(xù)按步驟(9)所述的方法精制，得到本桑葉多糖產(chǎn)品。
本發(fā)明步驟(2)中所用的有機(jī)溶劑為乙醇、甲醇、異丙醇、丙酮、丁醇、二甲基甲酰胺或二甲亞砜；步驟(4)中所用的有機(jī)溶劑為乙酸乙酯、乙酸丁酯、苯、甲苯或60-90°的石油醚；步驟(8)中所用的陽(yáng)離子交換樹(shù)脂為724(弱酸1D1)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂或732陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，所用的陰離子交換樹(shù)脂為701(弱堿330)陰離子交換樹(shù)脂。
本發(fā)明步驟(5)中脫去非糖有機(jī)物及無(wú)機(jī)鹽的方法為離子交換樹(shù)脂、大孔樹(shù)脂或離子滲折方法。
本發(fā)明桑葉多糖產(chǎn)品分子量在15000-25000道爾頓之間，固態(tài)呈淺棕色或淺黃色?？裳兄瞥上盗芯呓笛亲饔玫谋＝∑坊蚴称罚哂袃r(jià)格便宜、藥效顯著、食用方便等特點(diǎn)，提供給糖尿病患者及中老年人保健防病使用，具有重要意義。
下面結(jié)合實(shí)施例及藥效實(shí)驗(yàn)對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明。
第一部分桑葉多糖制備實(shí)例實(shí)施例1取?？浦参锷５娜~子2公斤，用水浸泡1小時(shí)過(guò)濾，取葉(渣)風(fēng)干粉碎后，用2倍體積水60-80℃浸泡3小時(shí)，重復(fù)5次過(guò)濾取液，80℃下減壓蒸干，干物加丙酮攪拌浸泡一小時(shí)，框?yàn)V出濾液，加苯攪拌1小時(shí)，靜置1小時(shí)，分層后除去上層含葉綠素部分層液，再用離子滲折法脫去非糖有機(jī)物、蛋白質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽，然后用酸性和堿性離子交換樹(shù)脂交換，柱下液加氨水中和至中性，加乙醇沉淀出多糖，取沉淀物，用無(wú)水乙醇洗滌沉淀物三次，再用701陰離子交換樹(shù)脂及724陽(yáng)離子交換樹(shù)脂載取分子量為15000-50000道爾頓分子量的初級(jí)多糖，再用大孔樹(shù)脂、高壓液相色譜分離，提純得分子量15000-25000道爾頓的多糖。80℃下烘干，粉碎烘干物即得本發(fā)明微淺棕色桑葉多糖。
實(shí)施例2取水浸泡去雜后風(fēng)干的桑葉2公斤，加水3倍，60-80℃浸泡，重復(fù)4次，過(guò)濾，濾液減壓濃縮至糖漿狀，加丙酮及乙酸乙酯靜止一小時(shí)，分層去上層含葉綠素及非多糖有機(jī)質(zhì)，然后用離子滲折法去非糖及蛋白質(zhì)及無(wú)機(jī)鹽，然后通過(guò)陰離子、陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，所得液體加氨水中和，再通過(guò)陰型701離子交換樹(shù)脂、陽(yáng)型724離子交換樹(shù)脂得分子量為15000-50000道爾頓之間的初級(jí)多糖，呈固態(tài)、淺棕色或棕色多糖，最后用高壓液相色譜提純得15000-25000道爾頓之間的多糖。80℃下烘干，粉碎烘干物即得本發(fā)明桑葉多糖。
實(shí)施例3將水洗風(fēng)干粉碎的桑葉稱2公斤，用5倍水浸泡重復(fù)3次，每次過(guò)濾，濾液集中減壓濃縮，加乙酸乙酯、苯分別攪拌、萃取、靜止，集中萃取液。靜置去含葉綠素及非糖類(lèi)的有機(jī)雜質(zhì)(蛋白質(zhì)、甾醇物)，離子交換樹(shù)脂方法脫鹽。離交下柱液加氨水中和至中性，加入乙醇，有沉淀物產(chǎn)生，用無(wú)水乙醇洗滌沉淀物三次，再用701陰離子交換樹(shù)脂及732陽(yáng)離子交換樹(shù)脂載取分子量為15000-50000道爾頓之間的初級(jí)多糖，然后用高壓液相色譜柱分離提純得分子量為15000-25000道爾頓之間的多糖。用噴霧法或減壓烘干法得本發(fā)明淺棕色或棕色桑葉多糖。
實(shí)施例4將本發(fā)明初級(jí)桑葉多糖與無(wú)公害烏龍茶，按1∶1比例，制備成桑葉降糖茶。其產(chǎn)品外觀與原烏龍茶相似，味道帶有桑葉特有清香，并保持茶葉原味。成人每天食用4-6g，可控制或降低血糖值。
實(shí)施例5將本發(fā)明初級(jí)桑葉多糖與甘露醇或乳糖，按1∶2比例，混合均勻后，壓成顆粒，經(jīng)整粒后，分裝于防濕包裝材料、原塑料、鋁箔等，制成桑葉降糖沖劑。每天食用6-10g，可控制或降低血糖值。
第二部分 藥效實(shí)驗(yàn)本發(fā)明提供的桑葉多糖及由桑葉多糖制備而成的桑葉降糖茶、桑葉降糖沖劑，具有良好的降血糖作用。已經(jīng)過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明，藥效實(shí)驗(yàn)報(bào)告如下1.樣品降血糖作用的桑葉多糖、桑葉降糖茶、桑葉降糖沖劑。
2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物NIH純系雄性小鼠，由廣東省醫(yī)用動(dòng)物飼養(yǎng)場(chǎng)提供。
3.試驗(yàn)方法(1)糖尿病模型小鼠的形成健康雄性小鼠，體重20-22g，絕食24小時(shí)，靜脈注射鏈佐霉素(100mg/kg)，正常飼養(yǎng)20天，糖尿病模型形成。
(2)形成糖尿病模型小鼠，按10只為1組，在無(wú)禁食情況下，每只腹腔分別注入2ml同等濃度(2％)桑葉多糖含量的桑葉多糖原液、桑葉降糖茶、桑葉降糖沖劑。6小時(shí)后采血測(cè)血糖值。
(3)血糖值測(cè)試按常規(guī)的葡萄糖氧化酶一過(guò)氧化物酶的方法進(jìn)行。
4.測(cè)試結(jié)果(1)不同分子量桑葉多糖的降血糖效果測(cè)試采用不同工藝，獲得三種分子量片段的桑葉多糖。經(jīng)鏈佐霉素糖尿病小鼠降糖試驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表1。
表1不同分子量桑葉多糖降血糖效果 n＝10
試驗(yàn)結(jié)果表明15000-25000道爾頓分子量桑葉多糖，對(duì)鏈佐霉素形成的糖尿病模型小鼠，血糖下降率最高。
(2)桑葉降糖茶降血糖效果測(cè)試桑葉降糖茶與原桑葉多糖降血糖效果比較；桑葉降糖茶適宜使用濃度的降血糖試驗(yàn)。結(jié)果如表2。
表2桑葉降糖茶對(duì)鏈佐霉素及糖尿病小鼠血糖的影響 n＝10
注*為達(dá)到正常水平試驗(yàn)結(jié)果表明含桑葉多糖的桑葉降糖茶有很好的降血糖效果，在同樣條件下，降糖效果保持原來(lái)水平。糖尿病模型小鼠用含2％桑葉多糖的桑葉降糖茶治療后，血糖下降率達(dá)80％以上，治療效果顯著。
(3)桑葉降糖沖劑降血糖效果測(cè)試對(duì)幾種賦型劑與桑葉多糖配制成的沖劑進(jìn)行降糖效果的測(cè)試，結(jié)果如表3。
表3桑葉降糖沖劑對(duì)鏈佐霉素糖尿病小鼠降糖效果n＝10
試驗(yàn)結(jié)果表明幾種賦型劑形成的桑葉降糖沖劑，均有明顯的降血糖作用。其中以采用甘露醇形成的桑葉降糖沖劑降血糖效果最好。
血糖下降率＝(a-b)/(a-7.1)×100％a陽(yáng)性組血糖水平b試驗(yàn)組血糖水平7.1無(wú)禁食正常小鼠血糖水平(7.1mmol/L)
權(quán)利要求
1.一種桑葉多糖產(chǎn)品，其特征在于該產(chǎn)品以?？浦参锷?shù)的葉子為原料，按下述順序的步驟制備得到(1)用水浸泡洗去雜質(zhì)，晾干后粉碎稱量；(2)用有機(jī)溶劑浸泡，除去脂溶部份，然后過(guò)濾取渣去液；(3)將渣減壓去有機(jī)溶劑，所得的桑粉渣用水泡，重復(fù)三至五次，過(guò)濾、取液；(4)將步驟(3)所得的濾液加入有機(jī)溶劑，攪拌后靜置、分層，除去上層含葉綠素部分；(5)將步驟(4)所得的濾液脫去非糖有機(jī)物及無(wú)機(jī)鹽；(6)將步驟(5)所得的濾液用酸性離子交換，再用堿性離子交換去蛋白；(7)對(duì)離交下柱液部分加氨水中和至中性，加乙醇形成紅棕色沉淀物；(8)再用無(wú)水乙醇洗滌紅棕色沉淀物2～3次，后用陰離子交換樹(shù)脂和陽(yáng)離子交換樹(shù)脂截取分子量在15000～50000道爾頓之間的多糖；(9)將步驟(8)所得液濃縮后烘干、粉碎，即得本桑葉初級(jí)多糖產(chǎn)品。
2.如權(quán)利要求1所述的桑葉多糖產(chǎn)品，其特征在于步驟(8)的所得物可進(jìn)一步提純，用高壓液相色譜分離、純化得分子量在15000～25000道爾頓之間的多糖，后再繼續(xù)按步驟(9)所述的方法精制，得到本桑葉多糖產(chǎn)品。
3.如權(quán)利要求1所述的桑葉多糖產(chǎn)品，其特征在于步驟(2)中所用的有機(jī)溶劑為乙醇、甲醇、異丙醇、丙酮、丁醇、二甲基甲酰胺或二甲亞砜。
4.如權(quán)利要求1所述的桑葉多糖產(chǎn)品，其特征在于步驟(5)中脫去非糖有機(jī)物及無(wú)機(jī)鹽的方法為離子交換樹(shù)脂、大孔樹(shù)脂或離子滲折方法。
5.如權(quán)利要求1所述的桑葉多糖產(chǎn)品，其特征在于步驟(4)中所用的有機(jī)溶劑為乙酸乙酯、乙酸丁酯、苯、甲苯或60-90°的石油醚。
6.如權(quán)利要求1所述的桑葉多糖產(chǎn)品，其特征在于步驟(8)中所用的陽(yáng)離子交換樹(shù)脂為724(弱酸1D1)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂或732陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，所用的陰離子交換樹(shù)脂為701(弱堿330)陰離子交換樹(shù)脂。
7.權(quán)利要求1所述的桑葉多糖產(chǎn)品在加工具有降血糖作用的食品中的應(yīng)用。
8.權(quán)利要求1所述的桑葉多糖產(chǎn)品在加工具有降血糖作用的保健品中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種利用桑科植物桑樹(shù)的葉子提取的桑葉多糖產(chǎn)品及其用途。所說(shuō)的桑葉多糖產(chǎn)品為桑科植物桑樹(shù)的葉子,曬干后提取分離獲得的有功能作用的有效部分多糖,分子量在15000－50000道爾頓之間,固態(tài)呈淺棕色或淺黃色。本發(fā)明桑葉多糖可研制成系列具降血糖作用的保健品或食品,具有價(jià)格便宜、藥效顯著、食用方便等特點(diǎn),提供給糖尿病患者及中老年人保健防病使用,具有重要意義。
文檔編號(hào)C08B37/00GK1351085SQ0112997
公開(kāi)日2002年5月29日 申請(qǐng)日期2001年11月27日 優(yōu)先權(quán)日2001年11月27日
發(fā)明者廖森泰, 李瑞聲, 鄒宇曉, 鄭祥明, 林卓新, 黃炳輝, 楊瓊, 陳衛(wèi)東 申請(qǐng)人:廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)研究所