專(zhuān)利名稱(chēng):N-(的制作方法
本發(fā)明涉及式(Ⅰ)所示的免疫調(diào)節(jié)劑有利的制備方法，
式(Ⅰ)中R是甲基或乙基;和R4及R5各是氫，或R4及R5之中一個(gè)是氫，另一個(gè)是(C1-C6)烷基或(C6-C8)環(huán)烷基甲基;本發(fā)明還涉及反式-R-3-烷基-4-庚烯酸(Ⅵb，見(jiàn)后)、S-3-甲基-6-庚烯酸(Ⅹb，見(jiàn)后)和S-3-烷基-庚酸的制備方法和中間體，S-3-烷基庚酸的絕對(duì)立體化學(xué)式為
式(Ⅱ)中R規(guī)定如上，它們可用作合成式(Ⅰ)化合物的中間體;本發(fā)明涉及絕對(duì)立體化學(xué)式如(Ⅲ)所示的免疫調(diào)節(jié)劑(或前體)或其可用作醫(yī)藥的鹽，
式(Ⅲ)中兩個(gè)虛線中之任一個(gè)代表一個(gè)雙鍵而不是兩者同時(shí)都代表雙鍵，R規(guī)定如上，R2及R3兩者都是氫(Ⅲa)或其可作醫(yī)藥用的鹽或R2和R3各自獨(dú)立地為(C1-C6)烷基，(C6-C8)環(huán)烷基甲基或芐基(Ⅲb)，附帶條件是當(dāng)末端6，7-位是雙鍵時(shí)，R是甲基。
旋光純的S-3-甲基庚酸(Ⅱ，R＝CH3)原先由其相應(yīng)的消旋體在-15℃通過(guò)多次重結(jié)晶其奎寧鹽得到，產(chǎn)率未詳細(xì)說(shuō)明〔Levene等人J.Biol.Chem.，1932年95卷1-24頁(yè)，在18頁(yè)上，文獻(xiàn)中稱(chēng)作2-正丁基丁酸-4〕。具有旋光活性的3-甲基庚酸相繼報(bào)道可用一些其它的方法制備〔Soai等人，J.Chem.Soc.，Chem.Commun，1985年469-470頁(yè);Oppolzer等人，Helv.Chim.Acta.1985年68卷212-215頁(yè);Ohno等人，美國(guó)專(zhuān)利1986年4，564，620;Mori等人，Synthesis 1982年752-753頁(yè);Oppolzer等人，Helv.Chim.Acta.1981年64卷2808-2811頁(yè);Mukaiyama等人，Chem.Lett.1981年913-916頁(yè);Posner等人，J.Am.Chem.Soc.1981年103卷2886-2888頁(yè);Mukaiyama等人，Bull.Chem.Soc.Japan，1978年51卷3368-3372頁(yè);Meyers等人，J.Am.Chem.Soc.1976年98卷2290-2294頁(yè)〕，但這些制備方法有一個(gè)或多個(gè)缺點(diǎn)(最大可能收率為50%，至少有50%不需要的副產(chǎn)物需要處理;至少有50%的不需要的副產(chǎn)物一直帶到操作過(guò)程的最終幾步;得到的產(chǎn)物酸不是旋光純的;需要應(yīng)用大規(guī)模制備中難于操作的有機(jī)金屬試劑;總收率低;和/或所需試劑不易得到)。
現(xiàn)在所用的不對(duì)稱(chēng)環(huán)氧化作用〔所謂夏普勒斯(Sharpless)拆分〕以前已報(bào)告過(guò)(Katsuhi和Sharpless，J.Am.Chem.Soc.，1980年102卷5974-5976頁(yè);Sharpless等人，Pure Appl.Chem.，1983年55卷589-604頁(yè));此外還有立體定向的克萊森(Claisen)縮合反應(yīng)(Chan等人，美國(guó)專(zhuān)利4，045，475)。
比較新的免疫藥理學(xué)領(lǐng)域，特別是涉及免疫調(diào)節(jié)部分，取得迅速發(fā)展。種種天然發(fā)生的化合物已被研究，包括四肽妥福特西(tuffsin)，化學(xué)名為N-〔1-(N-L-蘇氨?；?L-賴(lài)氨?；?-L-脯氨?；?L-精氨酸。多把注意力集中于合成聚糖肽衍生物，特別是那些稱(chēng)為胞壁酰二肽的化合物。
式(Ⅰ)的免疫調(diào)節(jié)劑(當(dāng)R4＝R5＝H時(shí)一般為無(wú)定形冷凍干燥物)和它們的使用方法早在1985年11月25手提出申請(qǐng)的與此有關(guān)的國(guó)際專(zhuān)利(PCT)申請(qǐng)系列號(hào)PCT/US85/02351中敘述。由于人們還不能公開(kāi)地獲得該申請(qǐng)，這些化合物的制備和它們的使用方法已并入本公開(kāi)以支持應(yīng)用。
其它的免疫興奮肽類(lèi)在一些書(shū)中已有敘述L-丙氨?；?α-戊二酸N-?；念?lèi)，(見(jiàn)于1981年1月15日公布的西德專(zhuān)利3，024，355);
含有D-丙氨?；?L-谷氨酰基部分或L-丙氨?；?D-谷氨酰基部分的四-和五-肽類(lèi)(分別見(jiàn)于1981年2月4日公布的英國(guó)專(zhuān)利2，053，231和西德專(zhuān)利3，024，281);
N-酰基-丙氨?；?r-o-谷氨?；难苌?，其中C-末端氨基酸是賴(lài)氨酸或二氨基庚二酸(見(jiàn)于1981年1月15日公布的西德專(zhuān)利3，024，369);
包括N-乳?；滨；?，谷氨?；?，二氨基庚二?；汪燃谆被M分的乳酰四肽類(lèi)(見(jiàn)于1980年5月23日公布的歐專(zhuān)利EP-11283);
具有式(A)的多肽及其衍生物公開(kāi)于美國(guó)專(zhuān)利4，311，640和4，322，341;歐洲專(zhuān)利申請(qǐng)25，482，50，856，51，812，53，388，55，846和57，419中，
式(A)中Ra是氫或酰基;Rb首先是氫，也可以是低級(jí)烷基，羥甲基，芐基;Rc和Rd各是氫，羧基，CONRgRh(其中Rg是氫，用羥基有選擇取代的低級(jí)烷基，Rh是單羧基，二羧基低級(jí)烷基);Re是氫或羧基，附帶條件是當(dāng)Rd和Re之中一個(gè)是氫，另一個(gè)則為羧基或-CONRgRh;Rf是氫;m是1～3和n是0～2，多肽及其衍生物中的羧基和氨基是受保護(hù)的;以及相似于上式(A)的肽類(lèi)，但其中Rd形成一個(gè)堿性的氨基酸部分(Ⅳes等人，美國(guó)專(zhuān)利4，565，653;歐洲專(zhuān)利申請(qǐng)157，572)，或是一個(gè)雜環(huán)氨基酸(Ⅳes，歐洲專(zhuān)利申請(qǐng)178，845)。
Kitaura等人于J.Med.Chem.1982年25卷335-337頁(yè)報(bào)道，N2(r-D-谷氨?；?-內(nèi)消旋-2(L)，2(D)-二氨基庚二酸為(A)式化合物能夠引出生物學(xué)反應(yīng)特性的最小結(jié)構(gòu)，(A)式中n是1;m是2;Ra是CH3CH(OH)-CO-;Rb是CH3;Rc和Re各為-COOH;Rd是-CONHCH2COOH;和Rf是H。該(A)式化合物稱(chēng)為FK-156。
我們現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)一種更穩(wěn)定的結(jié)晶形式的免疫調(diào)節(jié)劑，即上述式(Ⅰ)中R＝CH3和R4＝R5＝氫的化合物N-(S-甲基庚酰基)-D-r-谷氨?；?甘氨酰基-D-丙氨酸。
我們現(xiàn)已找到了制備旋光純度高的中間體R-3-烷基-4-庚烯酸(Ⅵb，見(jiàn)后)和S-3-烷基庚酸(Ⅱ，見(jiàn)前)有效的方法，其總收率高，并避免應(yīng)用有機(jī)金屬試劑和后期合成中R-對(duì)映體無(wú)用的副產(chǎn)物。
第一條路線，開(kāi)頭的一步是使下式的反式-4-烷烯-3-醇進(jìn)行夏普勒斯型拆分，
式中R的規(guī)定如上。具體說(shuō)，該步包括使式(Ⅳ)的消旋體在有四異丙醇鈦和L-(+)-酒石酸二異丙酯存在的反應(yīng)惰性溶劑中，與叔丁基氫過(guò)氧化物反應(yīng)，后者的量應(yīng)足以氧化S-對(duì)映體而保留所需不起反應(yīng)的絕對(duì)立體化學(xué)式(Ⅴ)的R-對(duì)映體。
在第二步中，式Ⅴ化合物立體定向地與原乙酸三〔(C1-C3)烷基〕酯縮合，不經(jīng)分離，在有酸存在的反應(yīng)惰性試劑中，中間體烯丙基-烯醇醚重排，得到絕對(duì)立體化學(xué)式(Ⅵa)的R-3-烷基-4-庚烯酸(C1-C3)烷基酯，
(Ⅴ1a)X＝OR1;R1＝(C1-C3)烷基(Ⅴ1b)X＝OH(Ⅴ1c)X＝Cl(Ⅴ1d)X＝H
在另一條路線中，該酯接著被水解為反式-R-3-烷基-4-庚烯酸(Ⅴ1b)，如需要，再氫化成S-3-烷基庚酸(Ⅱ)。另一條可擇用的路線中，首先將該酯氫化，得S-3-烷基庚酸(C1-C3)烷基酯，然后水解為式(Ⅱ)所示的酸。
在另一條路線中，拆分的反式-4-烷稀-3-醇(式Ⅴ)在有催化劑醋酸汞〔Hg(OAc)2〕存在時(shí)，用乙基乙烯基醚作用，轉(zhuǎn)變成烯丙基乙烯基醚(Ⅸ)。然后加熱使烯丙基乙烯基醚重排為式(Ⅴ1d)所示的R-3-烷基-4-庚烯醛，再氧化，例如用瓊斯試劑(在稀無(wú)機(jī)酸中的鉻酐)，形成上述R-3-烷基-4-庚烯酸。
我們也已找到了制備高旋光純度的中間體S-3-甲基-6-庚烯酸(Ⅹd，見(jiàn)后)和S-3-甲基庚酸(Ⅱ，R＝CH3，見(jiàn)前)的有效方法，總收率高，避免應(yīng)用有機(jī)金屬試劑和無(wú)用的R-對(duì)映體副產(chǎn)物，以易得的有絕對(duì)立體化學(xué)式的S-香茅醇(Ⅺ)為原料。
該合成方法開(kāi)頭幾步是常規(guī)的，包括用常規(guī)的甲硅烷基保護(hù)基團(tuán)(如叔丁基二甲基甲硅烷基)有選擇保護(hù)醇基，接著臭氧分解，用二甲硫處理，得到絕對(duì)立體化學(xué)式如(Ⅻ)所示的新化合物，
式(Ⅻ)中R8是氫(Ⅻa)或甲硅烷基羥基保護(hù)基(Ⅻb)。所用的方法在后面的制備中專(zhuān)門(mén)解釋?zhuān)⑾嗨朴谠谥苽渖鲜鍪?Ⅴ)化合物的R-對(duì)映體中予先用于R-香茅醇的方法，其中R8是叔丁基二甲基甲硅烷基。后者(R-香茅醇在這兒沒(méi)有用)可用于合成普昔福來(lái)(proxipomin)(Tapolczay等人，J.Chem.Soc.，Chem.Commun.1985年143-145頁(yè))。
本發(fā)明特別涉及式(Ⅴ)中間體化合物和式(Ⅹ)化合物，
(Ⅹa)R9＝CH2OR10，R10＝甲硅烷基保護(hù)基(Ⅹb)R9＝CH2OH(Ⅹc)R9＝CHO(Ⅹd)R9＝COOH(Ⅹe)R9＝COCl
并且涉及將式(Ⅻ)化合物轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂行饣钚缘乃帷彩?Ⅹd)和(Ⅱ，R＝CH3)〕的方法，該方法包括下列步驟(a)式(Ⅻ)的化合物與亞甲基三苯基膦CH2＝P(C6H5)3反應(yīng)，形成式(Ⅹa)或(Ⅹb)化合物;
(b)當(dāng)用稀無(wú)機(jī)酸水解式(Ⅹa)化合物為式(Ⅹb)化合物時(shí)，可以作為單獨(dú)的一步進(jìn)行或與下一步同時(shí)進(jìn)行;和(c)用在稀無(wú)機(jī)酸中的鉻酐氧化式(Ⅹb)化合物為S-3-甲基-6-庚烯酸(式Ⅹd);如果需要，可再進(jìn)行一下步，(d)催化氫化式(Ⅹd)化合物為式(Ⅱ)中R是甲基的S-3-甲基庚酸。
R8為氫，有步驟較少的好處，而R8為甲硅烷基保護(hù)基，則當(dāng)由步驟(a)分離中間產(chǎn)物時(shí)，有更易純化的好處。優(yōu)選的羥基保護(hù)基是三甲基甲烷基，對(duì)叔丁基苯乙基二甲基甲硅烷基和叔丁基二甲基甲硅烷基。優(yōu)選的稀無(wú)機(jī)酸是H2SO4。最好選用以S-香茅醇臭氧分解，用二甲硫處理的方法合成式(Ⅻa)化合物;以及經(jīng)下面(e)，(f)兩步合成R8是叔丁基二甲基甲硅烷基的式(Ⅻb)化合物。
(e)以S-香茅醇與氯化叔丁基二甲基甲硅烷基反應(yīng);及(f)反應(yīng)得到的羥基保護(hù)的香茅醇以臭氧分解，用二甲硫處理。
本發(fā)明也涉及制備式(Ⅰ)免疫調(diào)節(jié)劑的改良方法，該方法包括步驟(a)使R-3-烷基-4-庚烯酸或S-3-甲基-6-庚烯酸的活化形式(如酰氯Ⅴ1c或Ⅹe)與式(Ⅶ)所示化合物在反應(yīng)惰性溶劑中偶聯(lián)，形成上述式(Ⅲb)中間體化合物，
式(Ⅶ)中，R6和R7兩者均是芐基，或R6和R7之中一個(gè)是芐基，另一個(gè)是(C1-C6)烷基或(C6-C8)環(huán)烷基甲基。式(Ⅲb)中的R2和R3相應(yīng)于式(Ⅶ)中的R6和R7;和(b)在有氫化催化劑存在的反應(yīng)惰性溶劑中氫化上述中間體化合物，使雙鍵的還原及一個(gè)或多個(gè)芐基的氫解同時(shí)發(fā)生。
最后，本發(fā)明涉及免疫調(diào)節(jié)劑和/或上述化合物(Ⅰ)的前體式(Ⅲ)。式(Ⅲa)化合物(即R2＝R3＝氫)是由式(Ⅲb)雙酯化合物經(jīng)常規(guī)的酯水解得到。
這里所用的“反應(yīng)惰性溶劑”一詞是指這樣的溶劑，它不與起始原料、中間體或產(chǎn)物反應(yīng)，但它對(duì)所需產(chǎn)物的收率有不利的影響。
優(yōu)選的R是乙基。優(yōu)選的酸催化劑是路易斯酸(即干燥的HCl，AlCl3)。優(yōu)選的反式-4-己烯-3-醇或反式-4-庚烯-3-醇的消旋體是通過(guò)乙基格利雅試劑分別與巴豆醛或2-戊烯醛反應(yīng)得到，但本發(fā)明并不受此局限。
本發(fā)明很易實(shí)現(xiàn)。R-反式-4-烷烯-3-醇(Ⅴ)是由不對(duì)稱(chēng)環(huán)氧化作用，即所謂的夏普勒斯拆分法(前面引用的文獻(xiàn))獲得。按照這個(gè)方法，消旋體(Ⅳ)中不需要的S-反式-2-己烯-4-醇在有多于1摩爾的L-(+)-酒石酸二異丙酯與大體上為1摩爾當(dāng)量的四異丙醇鈦存在下，選擇性地與叔丁基氫過(guò)氧化物(至少0.5摩爾，但每摩爾消旋己烯醇肯定其用量少于1摩爾)反應(yīng)。該反應(yīng)在無(wú)水條件下在反應(yīng)惰性溶劑如二氯甲烷中于低溫進(jìn)行，一般溫度范圍為-20～-80℃。所需未反應(yīng)的R-反式-2-烷烯-4-醇(Ⅴ)用標(biāo)準(zhǔn)方法(如蒸餾或色譜法)分離。因?yàn)樵撍璁a(chǎn)物的揮發(fā)性較高，所以用于色譜分離的低沸點(diǎn)溶劑最好是如戊烷和乙醚。
下一步是R-反式-4-烷烯-3-醇(Ⅴ)與原乙酸(C1-C3)三烷基酯縮合(克萊森縮合重排)，得R-3-烷基-4-庚烯酸(C1-C3)烷基酯(Ⅴ1a)。該反應(yīng)能在反應(yīng)惰性溶劑中進(jìn)行，但最好在只有過(guò)量的原乙酸酯中進(jìn)行，一般在高溫(例如在120-160℃)反應(yīng)。當(dāng)原乙酸三乙酯(沸點(diǎn)142℃)為試劑時(shí)，通常應(yīng)用回流溫度。該反應(yīng)在酸催化劑存在下進(jìn)行。酸如丙酸、新戊酸、2，4-二硝基苯酚、干燥HCl和AlCl3是有效的，優(yōu)選的催化劑是路易斯酸，最好是AlCl3。
在另一條路線中，將得到的酯(式Ⅴ1a)用常規(guī)方法水解，得到相應(yīng)的不飽和酸(式Ⅴ1b)。
本發(fā)明的另一條可擇用的路線也容易實(shí)現(xiàn)。首先，將買(mǎi)來(lái)的S-香茅醇(Ⅺ)用常規(guī)方法轉(zhuǎn)變?yōu)槭?Ⅻ)所示的具有旋光活性的起始原料，這已在前面指出并在后面制備中將會(huì)詳細(xì)敘述。然后，化合物(Ⅻ)分別轉(zhuǎn)變?yōu)镾-3-甲基-6-庚烯酸(Ⅹd)或S-3-甲基庚酸(Ⅱ)，分步詳述于下。
在第一步中，羥基未保護(hù)或保護(hù)的醛(Ⅻa或Ⅻb)與亞甲基三苯膦進(jìn)行維悌希反應(yīng)。一般，亞甲基三苯膦是新制備的，通常由鹵化甲基三苯(方便使用的是溴化物)與正丁基鋰在反應(yīng)惰性非質(zhì)子傳遞溶劑(如四氫呋喃和己烷的混合溶劑)中形成。
例如
雖然在膦的形成中溫度不是關(guān)鍵的，但是較好的溫度在±25℃范圍內(nèi)，最好在±10℃。然后羥基未保護(hù)的醛(Ⅻa)或羥基保護(hù)的醛(Ⅻb)與膦在同樣的溶劑和同樣的溫度范圍內(nèi)分別形成羥基未被保護(hù)或保護(hù)的烯(Ⅹb)或(Ⅹa)。
在第二步中，用水解法脫去保護(hù)基，這僅在有羥基保護(hù)基存在時(shí)需要，最好用第三步中使用的含水酸條件，第三步是用瓊斯氧化法將伯醇(Ⅹb)氧化成酸(Ⅹd)。瓊斯氧化法用所謂的瓊斯試劑，即由CrO3與強(qiáng)酸形成的HCrO4的水溶液。典型的瓊斯試劑是由過(guò)量濃H2SO4，約1∶1(按重量計(jì))的CrO3和水制備，然后用水稀釋至所需濃度，例如，約3M。醇(Ⅹb)、保護(hù)的醇(Ⅹa)一般溶于與水混溶的反應(yīng)惰性有機(jī)溶劑如丙酮中，它們與至少兩個(gè)摩爾當(dāng)量的瓊斯試劑反應(yīng)。在這些條件下，任何甲硅烷基醚基團(tuán)很快水解為醇(Ⅹb)，然后氧化成酸(Ⅹd)。溫度不是關(guān)鍵的，例如，0-50℃通常是符合要求的，最適宜用室溫，例如17-27℃。
瓊斯氧化開(kāi)始先由醇氧化成醛(Ⅹc)，通常不分離出來(lái)。如果需要分離出中間體醛，需要選擇性更高的氧化劑，如氯鉻酸吡啶鎓來(lái)氧化醇。將得到的純中間體醛(Ⅹc)再氧化(用瓊斯試劑或另外合適的試劑)成酸(Ⅹd)。
如果需要，不飽和酸(Ⅴ1b)或(Ⅹd)以活化形式〔例如，酰基氯(Ⅴ1c)或(Ⅹe)，常用的混酐，或用常用的脫水偶聯(lián)劑如二環(huán)己基碳化二業(yè)胺活化〕，按常規(guī)方法與式(Ⅷ)所示化合物偶聯(lián)成所需具有免疫調(diào)節(jié)作用的雙酯化合物(式Ⅲb)。后者用常規(guī)方法水解，得到具有免疫調(diào)節(jié)作用的二元酸化合物(式Ⅲa)或其可用作醫(yī)藥的鹽。
式(Ⅷ)中R9和R10各自獨(dú)立地為(C1-C6)烷基，(C6-C8)環(huán)烷基甲基或芐基。
另外，當(dāng)R2和/或R3是芐基時(shí)，可將式(Ⅲb)化合物氫化成式(Ⅰ)化合物的免疫調(diào)節(jié)劑。在該氫化反應(yīng)中，雙鍵被氫飽和，芐基(1個(gè)或2個(gè))被氫解。該氫化反應(yīng)在反應(yīng)惰性溶劑和氫化催化劑中進(jìn)行，氫化催化劑可以應(yīng)用如，鎳或貴金屬;可為有載體的(例如阮內(nèi)鎳，Pd/C)或無(wú)載體的(如RhCl3)。溶劑，溫度和壓力不是關(guān)鍵的。合適的溶劑不限于低級(jí)醇類(lèi)，可以包括醚類(lèi)如二噁烷，四氫呋喃或二甲氧基乙烷;酯類(lèi)如乙酸乙酯。最好用室溫，即使該反應(yīng)有些放熱也不需要冷卻，這樣避免了加熱或冷卻的費(fèi)用。壓力不是關(guān)鍵的，但為了避免使用昂貴的高壓設(shè)備，壓力最好低于7個(gè)大氣壓。用Pd/C進(jìn)行氫化反應(yīng)，壓力3-6倍于大氣壓特別適合本反應(yīng)。
另外，不飽和酸(Ⅴ1b)或(Ⅹd)可在與前面段落詳述的相同條件下氫化，得到S-3-烷基庚酸(Ⅱ)。也可用相反的氫化/水解步驟由反式-R-3-烷基-4-庚烯酸(C1-C3)烷基酯(Ⅴ1a)通過(guò)S-3-烷基庚酸(C1-C3)烷基酯得到。最后S-3-烷基庚酸以上面詳述的方法活化，與上述式(Ⅶ)雙酯偶聯(lián)，并用上述方法氫化，得到上述式(Ⅰ)化合物的免疫調(diào)節(jié)劑。
在本發(fā)明另一條可擇用的路線中，將R-反式-4-烷烯-3-醇(Ⅴ)轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的乙烯基醚(Ⅸ)，這是在反應(yīng)惰性溶劑(最好是過(guò)量的乙基乙烯基醚)中，以Hg(OAc)2為催化劑與乙基乙烯基醚作用得到的，溫度范圍25-40℃，而方便的是在乙基乙烯基醚(沸點(diǎn)36℃)的回流溫度進(jìn)行。得到的乙烯基醚(Ⅸ)加熱至140-200℃，一般是在高沸點(diǎn)、親脂的反應(yīng)惰性溶劑如二甲苯或萘烷中，必要時(shí)在壓力下立體定向地重排為不飽和醛(Ⅴ1d)。為得到不飽和酸(Ⅴ1b)，可方便地用所謂瓊斯試劑(即由CrO3和強(qiáng)酸形成的H2CrO4水溶液)容易地使該醛氧化。典型的瓊斯試劑由過(guò)量濃硫酸、約1∶1(按重量計(jì))的CrO3和水制備，然后用水稀釋至所需濃度，例如，約3M。為生成不飽和酸(Ⅴ1b)，通常將該不飽和醛(Ⅴ1d)溶于與水混溶的反應(yīng)惰性有機(jī)溶劑(如丙酮)中，與至少1摩爾當(dāng)量的瓊斯試劑反應(yīng)。溫度不是關(guān)鍵的，例如通常0-50℃是符合要求的，最適宜用室溫，例如，17-27℃。
式(Ⅰ)中R是甲基和R4＝R5＝氫的化合物的結(jié)晶形式，是由一種有機(jī)溶劑或混合有機(jī)溶劑重結(jié)晶得到的。合適的溶劑是丙酮，乙腈/乙醇和四氫呋喃/乙醚。在產(chǎn)物回收率方面，較好的溶劑是乙腈/乙醇，但在產(chǎn)物純度方面，則丙酮較好。這一新穎形式肯定比先前的無(wú)定形冷凍干燥物穩(wěn)定，它更容易操作，更加密集，靜電力也少得多，并可制備成更精密的劑量形式。
可用作醫(yī)藥的式(Ⅰ)或(Ⅲa)化合物的單堿基和雙堿基鹽類(lèi)，通?？捎盟岬娜芤?，最好為水溶液與堿(如NaOH，KOH，Na2CO3或胺)以適當(dāng)化學(xué)計(jì)算的比例進(jìn)行反應(yīng)制得，鹽可用蒸發(fā)或沉淀分離出來(lái)。
本發(fā)明的式(Ⅰ)和(Ⅲ)化合物用作治療哺乳動(dòng)物(包括人)由于各種致病微生物，特別是格蘭氏陰性細(xì)菌引起的疾病的藥物。由于原有的和臨床所引起的免疫抑制會(huì)增加感染的危險(xiǎn)性，本發(fā)明化合物還可以用作哺乳動(dòng)物(包括人)的免疫刺激劑。
試勢(shì)方法是用正常或受CH3H/HeN免疫過(guò)的來(lái)自查里斯河繁殖實(shí)驗(yàn)室的雄鼠進(jìn)行。鼠在使用前適應(yīng)環(huán)境五天，然后分別皮下(SC)或口服(PO)給予不同稀釋度(100，10，1和0.1毫克/公斤)的試驗(yàn)化合物或安慰劑(無(wú)鹽熱源)，所用體積為0.2毫升。給藥方法與感染所用微生物有關(guān)肺炎桿菌在正常小鼠攻毒前24和0小時(shí)給藥;大腸桿菌或金黃色葡萄球菌在受過(guò)免疫小鼠攻毒前3，2和1天給藥。在臀部肌肉注射(IM)攻入肺炎桿菌，腹腔注射(IP)攻入大腸桿菌或金黃色葡萄球菌。攻毒時(shí)用0.2毫升體積。用肺炎桿菌時(shí)是七天后記錄死亡率，用其他兩種微生物攻毒時(shí)是三天后記錄死亡率。
培養(yǎng)標(biāo)本肺炎桿菌，大腸桿菌，或金黃色葡萄球菌為了純化，培養(yǎng)物是用貯備的冷凍血液在腦心浸液(BHI)瓊脂上劃線。從培養(yǎng)了18及時(shí)平皿培養(yǎng)物中挑出三個(gè)菌落放到9毫升BHI肉湯培養(yǎng)基中。肉湯培養(yǎng)物在旋轉(zhuǎn)搖動(dòng)器上于37℃生長(zhǎng)2小時(shí)后，取0.2毫升劃在幾個(gè)腦心浸液瓊脂斜面上。隨后于37℃培養(yǎng)18小時(shí)，斜面用腦心浸液培養(yǎng)基洗出，用Spectronic20檢查培養(yǎng)物的濁度并進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂專(zhuān)乖谡Ｐ∈笊线_(dá)到LD90攻毒水平。
當(dāng)將本發(fā)明(Ⅰ)和(Ⅲ)化合物用于人體上作為抗感染劑或免疫刺激劑時(shí)，一般是經(jīng)口服，皮下注射，肌肉注射，靜脈注射，腹腔注射的途徑給藥，通常是以制藥實(shí)踐中符合規(guī)格的組合物形式服用。例如，可以服用含有賦形劑(如淀粉，乳糖，一些粘合劑等)的片劑，丸劑，粉劑或顆粒劑。可以服用膠囊劑，該膠囊劑是與上述相同或相當(dāng)賦形劑相混合，再將混合物置于膠囊中而得。也可以應(yīng)用口服的懸浮液，溶液劑，乳劑，糖漿和酏劑，它們可含有調(diào)味劑和著色劑。本發(fā)明的治療制劑經(jīng)口服給藥時(shí)，片劑或膠囊劑含有約從50～500毫克的有效成分，這是適用于大部分使用情況的。
醫(yī)生將根據(jù)每個(gè)患者不同的年齡、體重、個(gè)別患者的反應(yīng)和給藥途徑來(lái)決定最合適的劑量。最好的口服劑量范圍是從約1.0～約300毫克/公斤/天，單次或均分劑量。非徑腸道給藥的劑量從約1.0～約100毫克/公斤/天較好;更好的范圍是從約1.0～約20毫克/公斤/天。
以下給出實(shí)例旨在說(shuō)明本發(fā)明，而不應(yīng)將其看作為是對(duì)本發(fā)明的限制，在本發(fā)明范圍和實(shí)質(zhì)內(nèi)容之內(nèi)，下述實(shí)例可以進(jìn)行許多變化。
實(shí)例1R-反式-4-己烯-3-醇在裝有電磁攪拌，隔膜，溫度計(jì)和通N2管的500毫升三頸圓底燒瓶中，放入270毫升CH2Cl2和7.2克4A型分子篩。通過(guò)注射器加入Ti〔OCH(CH3)2〕(10.7毫升，0.036摩爾)，將混合物冷至-66℃，用套管加入用10毫升CH2Cl2稀釋后已降低了粘度的L-(+)酒石酸二異丙酯(10.1克，0.043摩爾)，另加5毫升CH2Cl2沖洗。溫度升至-62℃時(shí)，加入外消旋的反式-2-己烯-4-醇(3.60克，0.036摩爾)，并用5毫升CH2Cl2沖洗。在丙酮/干冰浴攪拌8分鐘后，溫度降至-68℃時(shí)，用注射器加入叔丁基氫過(guò)氧化物(7.18毫升的3M甲苯溶液，0.022摩爾)。反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?35℃，在冷藏箱中保持該溫度18小時(shí)。用槽紋濾紙將冷卻混合物過(guò)濾到已冷至-20℃的540毫升丙酮和11毫升H2O的攪拌混合物中?；旌衔锫郎?zé)嶂潦覝夭嚢?0小時(shí)。混合物通過(guò)硅藻土過(guò)濾并用CH2Cl2洗滌。合并的濾液和洗液不經(jīng)加熱使其蒸發(fā)，得油狀物(17.62克)。要避免蒸發(fā)過(guò)分，因所需產(chǎn)物易揮發(fā)。油狀物在176克硅膠上層析，用4∶1己烷∶異丙醚作洗脫液，用薄層層析監(jiān)測(cè)。用裝有可變導(dǎo)出壓頭并有玻璃單螺旋環(huán)填料的短柱蒸餾除去溶劑。溶劑沸騰到蒸餾頭溫度為69.5℃(到達(dá)該溫度后，蒸餾頭溫度開(kāi)始下降)，殘留物為純的標(biāo)題產(chǎn)物;薄層層析Rf0.25(3∶1己烷∶乙醚)。在重復(fù)這一試驗(yàn)時(shí)，用更易揮發(fā)的4∶1戊烷∶乙醚作洗脫液，這樣可使溶劑更快除去，以使蒸發(fā)時(shí)產(chǎn)物損失減至最少量。
實(shí)例2R-3-甲基-4-己烯酸乙酯前例產(chǎn)物(0.4克)，原乙酸三乙酯(3毫升)和三甲基乙酸加熱回流2.5小時(shí)，冷卻，并將全部反應(yīng)混合物在硅膠上層析兩次，開(kāi)始用6∶1己烷∶乙醚洗脫，得0.45克產(chǎn)物，然后用7∶1己烷∶乙醚洗脫，得純標(biāo)題產(chǎn)物0.35克;IR(薄膜)2960，1736，1456，1367，1334，1280，1232，1172，1028，962，840厘米-1。
另外，含有純S-反式-2-己烯-4-醇的戊烷/乙醚柱流分都直接引入本步驟，開(kāi)始時(shí)將戊烷和乙醚從反應(yīng)混合物中蒸出。
丙酸代替三甲基乙酸，得到實(shí)際上相同的結(jié)果。干燥的HCl和2，4-二硝基苯酚也可成功地用作酸催化劑，但是在下一實(shí)例中，AlCl3是最好的催化劑。
實(shí)例3R-3-甲基-4-庚烯酸方法A在帶有磁力攪拌和在套管中裝有4A型分子篩的索格利特取器的35毫升煉瓶中，加入前例產(chǎn)物(1.5克，0.015摩爾)。加入原乙酸三乙酯(9毫升，0.049摩爾)，再加入AlCl3(0.12克，0.009摩爾)，混合物在索格利特提取器上回流2小時(shí)，在這時(shí)間內(nèi)薄層層析顯示，已完全轉(zhuǎn)變成中間體R-3-甲基-4-己烯酸乙酯;薄層層析Rf0.75(4∶1己烷∶乙酸乙酯)，Rf0.85(15∶5∶2己烷∶乙醚∶醋酸)。
冷卻反應(yīng)混合物，用15毫升2N NaoH和12毫升甲醇稀釋?zhuān)谑覝叵聰嚢?7小時(shí)，在這時(shí)間內(nèi)，薄層層析顯示已水解完全。從反應(yīng)混合物除去甲醇，用12毫升H2O稀釋?zhuān)?×25毫升CH2Cl2提取，合并的CH2Cl2用1×25毫升2N NaoH回洗，合并水層和回洗液，用濃HCl調(diào)至PH1，用3×CH2Cl2提取。合并有機(jī)層，用MgSO4干燥并蒸發(fā)，得油狀標(biāo)題產(chǎn)物1.28克(60%);薄層層析Rf0.65(15∶5∶2己烷∶乙醚∶醋酸);
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm)9.4(S，1H，-CO2H)，5.5(m，2H，-CH＝CH-)，3.0-1.6(m，5H)，1.3-0.8(m，6H);IR(薄膜)3400-2400，2960，2925，2860，1708，1458，1410，1380，1295，1228，1190，1152，1100，930厘米-1。
方法B前例酯產(chǎn)物(0.24克)與25毫升CH3OH和11.5毫升1N NaOH合并，將混合物在室溫下攪拌3.5小時(shí)，在這段時(shí)間內(nèi)薄層層析顯示已水解完全。用2×35毫升乙醚提取混合物，用濃HCl調(diào)至PH2，并用3×35毫升乙醚提取。合并酸提取液，干燥和蒸發(fā)，獲得和方法A產(chǎn)物相一致的標(biāo)題產(chǎn)物0.20克。
實(shí)例4
S-3-甲基庚酸乙酯實(shí)例2產(chǎn)物(0.20克)在40毫升乙酸乙酯中用0.20克5%Pd/C(50%水潤(rùn)濕)，于Paar氫化設(shè)備內(nèi)，在4個(gè)大氣壓的氫氣下氫化3小時(shí)。通過(guò)硅藻土過(guò)濾回收催化劑。蒸發(fā)濾液得標(biāo)題產(chǎn)物。
實(shí)例5S-3-甲基庚酸方法A實(shí)例3的產(chǎn)物(0.20克)在40毫升乙酸乙酯中，用0.2克5%Pd/C(50%水濕潤(rùn))于帕爾(Paar)氫化設(shè)備內(nèi)，在4個(gè)大氣壓的氫氣下氫化3小時(shí)。通過(guò)硅藻土過(guò)濾回收催化劑，并蒸發(fā)濾液，得0.2克油狀的標(biāo)題產(chǎn)物。如需要，可在高真空下蒸餾，得純的標(biāo)題產(chǎn)物，沸點(diǎn)77-79℃/0.2毫米;1H-NMR)CDCl3)δ)ppm)12.0(S，COOH)，1.0(d，-CH3)，0.6-2.8(m，其余的13H);IR(薄膜)3400-2400，2960，2925，2860，1708，1458，1410，1380，1295，1228，1190，1152，1100，930厘米-1;〔α〕＝-6.41°(c＝1%，在甲醇中);n22.5D＝1.427。
方法B按實(shí)例3方法B將前例產(chǎn)物水解，得標(biāo)題產(chǎn)物。
實(shí)例6S-3-甲基庚酰氯前例或?qū)嵗?7的酸產(chǎn)物(8.5克，0.062摩爾)溶于18毫升CH2Cl2中。將草酰氯(5.36毫升，7.80克，0.0614摩爾)加入該溶液中并使混合物放置4小時(shí)，在這段時(shí)間內(nèi)以沒(méi)有氣體再逸出證實(shí)反應(yīng)是完全的。該酰氯溶液立即直接用于實(shí)例8方法C。或者該酰每經(jīng)蒸去溶劑后分出，用于實(shí)例8方法A，并且，如果需要，可蒸餾以進(jìn)一步純化，沸點(diǎn)為45°/1.5毫米。
實(shí)例7R-3-甲基-4-庚烯酰氯用前例方法將實(shí)例3的酸產(chǎn)物(0.747克，5毫摩爾)轉(zhuǎn)變成標(biāo)題產(chǎn)物的CH2Cl2溶液，并直接用于下面實(shí)例9。或者蒸發(fā)反應(yīng)混合物，得標(biāo)題產(chǎn)物，如果需要，可將它在減壓下蒸出。
實(shí)例8N-(S-3-甲基庚?；?-D-γ-谷氨?；?α芐酯)-甘氨?；?D-丙氨酸芐酯。
方法A將660毫克(4.06毫摩爾)S-3-甲基庚酰氯加到1.0克(2.03毫摩爾)D-γ-谷氨酰(α芐酯-甘氨?；?D-丙氨酸芐酯鹽酸鹽(制備4)和616毫克(6.09毫摩爾)三乙胺的50毫升二氯甲烷溶液中，并在室溫下將反應(yīng)混合物攪拌80小時(shí)。在真空中蒸出二氯甲烷，其殘留物溶于乙酸乙酯中。將所得溶液依次用2.5%鹽酸，水，10%碳酸鉀溶液，水和氯化鈉溶液洗滌。分出有機(jī)相，通過(guò)硫酸鎂干燥并在真空中濃縮。殘留物用乙醚研磨并在氮?dú)庀逻^(guò)濾，得標(biāo)題產(chǎn)物，該產(chǎn)物全部直接用于實(shí)例10方法A。
方法B將制備4的產(chǎn)物(0.75克，1.53毫摩爾)，5毫升二氯甲烷和三乙胺(0.212毫升，1.53毫摩爾)合并，在氮乞下攪拌，加入S-3-甲基庚酸(實(shí)例5，0.20克，1.39毫摩爾)在4毫升CH2Cl2中的溶液，然后加入二環(huán)己基碳化二亞胺(0.286克，1.37毫摩爾)，反應(yīng)混合物攪拌16小時(shí)。過(guò)濾反應(yīng)混合物，蒸發(fā)濾液，將殘留物溶于10毫升乙酸乙酯中，溶液依次用5毫升2.5%HCl，5毫升水，5毫升10%K2CO3溶液和5毫升鹽水洗滌，通過(guò)MgSO4干燥，得71毫克(88%)標(biāo)題產(chǎn)物。
方法C在裝有攪拌器，溫度計(jì)，滴液漏斗和N2入口管的500毫升四頸圓底燒瓶中，把制備4的產(chǎn)物(32.8克，0.059摩爾)溶于175毫升CH2Cl2中，并冷至0-5℃。保持在這溫度范圍內(nèi)，在15分鐘內(nèi)慢慢滴入三乙胺(24.7毫升，17.9克，0.177摩爾，3當(dāng)量)。在冰水浴冷卻下，于15分鐘內(nèi)加入由實(shí)例6得到的全部S-3-甲基庚酰氯的CH2Cl2溶液，其溫度升至21℃。在冰水浴中繼續(xù)攪拌45分鐘，在這段時(shí)間內(nèi)膠凝狀混合物變得太厚使攪拌發(fā)生困難。把膠凝塊打碎并和125毫升10%HCl和50毫升CH2Cl2混合。分出有機(jī)層，依次用2×125毫升HO，2×125毫升10%K2CO3和1×125毫升H2O洗滌，通過(guò)MgSO4干燥和蒸發(fā)，得82.3克潮濕的白色固體。將該固體溶于500毫升熱的乙酸乙酯中。慢慢冷至室溫，本題產(chǎn)物結(jié)晶緩慢，混合物再用另外40毫升乙酸乙酯稀釋?zhuān)员惚３至己玫臄嚢?。過(guò)濾并于40℃下真空干燥，得到純的標(biāo)題產(chǎn)物31.1克，(90.5%)。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm)8.4-8.1(m，3H)，7.15(s＜10H)，5.1(s，4H)，4.4-4.2(m，2H)，3.7(d，2H)，2.2(t，2H)2.1-1.7(m，6H)，1.4-1.1(m，10H)，0.92-0.8(m，6H)。
實(shí)例9N-(R-3-甲基-4-庚烯酰基)-D-γ-谷氨?；?(α芐酯)-甘氨?；?D-丙氨酸芐酯按前例方法C，使制備4的產(chǎn)物(2.77克，5毫摩爾)和由實(shí)例7得到的全部酰氯的CH2Cl2溶液反應(yīng)。蒸發(fā)經(jīng)洗滌和干燥后的有機(jī)層，再將殘留物溶于乙酸乙酯，再蒸發(fā)，并且多次重復(fù)該步驟，而獲得產(chǎn)物。
實(shí)例10N-(S-3-甲基庚?；?-D-γ-谷氨?；?甘氨?；?D-丙氨酸。
方法A將實(shí)例8方法A的全部產(chǎn)物溶于65毫升甲醇中。向該溶液加入氫氧化鈀(250毫克)，混合物在4個(gè)大氣壓氫氣中搖動(dòng)3小時(shí)。濾出催化劑并在真空中除去溶劑。殘留物溶于水并冷凍干燥，得目的產(chǎn)物。
NMR(DMSO-d6)顯示，在8.27-8.03(m，3H)，4.32-4.1(m，2H)3.72(d，J＝6Hz，2H)，2.22(t，J＝8Hz，2H)，2.27-1.68(m，6H)，1.42-1.0(m，10H)和0.94-0.8(m，6H)處吸收。
當(dāng)用實(shí)例8產(chǎn)物(0.50克)，90毫克20%Pd/(OH)2/C(31%水潤(rùn)濕)在25毫升甲醇中進(jìn)行時(shí)，該方法得0.24克同樣松軟的有靜電的標(biāo)題產(chǎn)物，Ir(石蠟糊)3300，2940，1740，1650，1540，1468和1380厘米-1;除最后兩個(gè)峰之外，所有的峰是寬的和分辨性差的。
方法B實(shí)例8方法C的產(chǎn)物(30.8克)和無(wú)水乙醇300毫升置于2升高壓釜中攪成漿狀，加入5%Pd/C(1.54克，50%水潤(rùn)濕)?；旌衔镌?個(gè)大氣壓下氫化1小時(shí)，在這段時(shí)間內(nèi)氫氣吸收完全。催化劑可先通過(guò)濾紙，然后通過(guò)0.45微米小孔尼龍過(guò)濾回收，用100-150毫升乙醇洗滌。合并濾液和洗液，蒸發(fā)，得潮濕白色固體，將它溶于150毫升熱的1∶10無(wú)水乙醇和乙腈的混合物中，熱濾使其澄清，蒸發(fā)，使其體積減至35毫升，慢慢冷至室溫，粉碎和過(guò)濾，得無(wú)靜電的致密結(jié)晶狀的標(biāo)題產(chǎn)物，重20.1克(94%)，用IR(石蠟糊)鑒定，其主要的分辨性好的尖峰有3340，3300，2900，2836，1725，1650，1628，1580，1532，1455，1410，1370，1280，1240，1216和1175厘米-1。
方法C直接將按前方法B制備的結(jié)晶產(chǎn)物(9.4克)置于1000毫升丙酮中，加熱回流1小時(shí)使其溶解。溶液冷至室溫，用微量的方法B所得產(chǎn)物作為晶種誘發(fā)結(jié)晶。攪拌6小時(shí)后，進(jìn)一步純化后的標(biāo)題產(chǎn)物經(jīng)過(guò)濾收集，用少量丙酮洗滌，在真空中35℃干燥，得7.25克，它與方法B用乙腈/乙醇結(jié)晶的產(chǎn)物具有一致的紅外峰值。
方法D前例產(chǎn)物(0.50克)和0.026克5%Pd/C(50%水潤(rùn)濕)及125毫升無(wú)水乙醇置于帕爾(Paar)氫化瓶中。在4個(gè)大氣區(qū)氫氣下將混合物氫化2.5小時(shí)。過(guò)濾回收催化劑，濾液蒸發(fā)，得粘的固體標(biāo)題產(chǎn)物，直接按前方法進(jìn)行結(jié)晶。
實(shí)例11N-(R-3-甲基-4-庚烯?；?-D-γ谷氨酰基-甘氨?；?D-丙氨酸實(shí)例9產(chǎn)物(1克)溶于5毫升CH3OH中。加入1N NaOH(2.50毫升)，混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。蒸去甲醇，含水殘留物用7.5毫升水稀釋?zhuān)?×7.5毫升乙酸乙酯提取，用1N HCl酸化至pH3.0。經(jīng)酸化水用新配制的乙酸乙酯連續(xù)地提取，蒸發(fā)提取液得標(biāo)題產(chǎn)物，按實(shí)例10方法A，可將該標(biāo)題產(chǎn)物制成冷凍干燥的產(chǎn)物。
實(shí)例12R-反式-4-庚烯-3-醇用實(shí)例1的方法，只是在所有加入試劑階段反應(yīng)溫度是-20℃，制備5的標(biāo)題化合物(10克，0.088摩爾)可轉(zhuǎn)變?yōu)楸緲?biāo)題產(chǎn)物。在加完全部試劑后，混合物在-20℃攪拌1.5小時(shí)，然后溫?zé)嶂潦覝?，依次滴?5毫升HO和6毫升30%NaOH(用NaCl飽和)使混合物驟然冷卻。冷卻的混合物攪拌20分鐘，用90毫升CH2Cl2稀釋?zhuān)殖鏊畬?，?×50毫升新配制的CH2Cl2洗滌。合并有機(jī)層，經(jīng)MgSO4干燥并蒸發(fā)至剩余體積為50毫升，在硅膠上層析，先用戊烷后用4∶1戊烷∶乙醚作洗脫液。棄去含有少量極性雜質(zhì)的開(kāi)始的流份。合并Rf為0.3(4∶1戊烷∶乙醚)的純產(chǎn)物部分并蒸發(fā)，得標(biāo)題產(chǎn)物5.6克，該產(chǎn)物澄清的無(wú)色液體。
實(shí)例13R-3-乙基-4-庚烯酸用實(shí)例3方法A，只是在分離時(shí)用乙醚代替CH2Cl2，前例產(chǎn)物(5.7克，0.05摩爾)和原乙酸乙酯縮合，重排和皂化，得油狀的標(biāo)題產(chǎn)物，薄層層析Rf0.4(2∶1己烷∶乙醚)。在同一薄層系統(tǒng)，中間體乙酯的Rf為0.25。
實(shí)例14S-3-乙基庚酸前例產(chǎn)物(1.4克)在20毫升CH3OH中用0.1克5%Pd(OH)/C在4個(gè)大氣壓下氫化1小時(shí)，過(guò)濾回收催化劑。從濾液中蒸去溶劑并將殘留物蒸餾，得標(biāo)題產(chǎn)物1.0克;沸點(diǎn)76-77℃/0.4乇;〔α〕25D-1.6°(C＝2%，在甲醇中)。
實(shí)例15S-3-乙基-庚酰氯在干燥N2下，將前例產(chǎn)物(1.0克，0.00633摩爾)溶于10毫升CH2Cl2中，加入草酰氯(0.547毫升，0.00627摩爾)，混合物攪拌1小時(shí)，在這段時(shí)間內(nèi)停止逸出氣體。在N2流下將所得標(biāo)題產(chǎn)物的溶液蒸發(fā)至7毫升。便可直接用于下一步。
用同樣方法，可將實(shí)例13不飽和的酸轉(zhuǎn)變?yōu)镽-3-乙基-4-庚烯酰氯的溶液。
實(shí)例16N-(S-3-乙基庚?；?-D-γ-谷氨?；?2-芐酯)-甘氨?；?D-丙氨酸芐酯將制備4的標(biāo)題產(chǎn)物(1.1克，0.00222摩爾)溶于30毫升CH2Cl2和三乙胺(0.935毫升，0.00666摩爾)中。將前例的S-3-乙基庚酰氯(2.3毫升，0.00211摩爾)的CH2Cl2溶液加入，混合物在N2下攪拌0.75小時(shí)，依次用20毫升10%HCl，H2O，10%K2CO3和飽和鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，蒸發(fā)，得固體殘留物，用乙醚研磨并過(guò)濾回收得0.8克。將其溶于乙酸乙酯中，再次用上面的方法洗滌，再次蒸發(fā)，又得固體0.7克，在硅膠上層析，用97∶3CHCl∶CHOH作洗脫液，得純的標(biāo)題產(chǎn)物467毫克。
用同樣方法，將3-乙基-4-庚烯酰氯和制備4的標(biāo)題產(chǎn)物偶聯(lián)，得N-(R-3-乙基-4-庚烯?；?-D-γ-谷氨酰基(α芐酯)-甘氨?；?D-丙氨酸芐酯。
實(shí)例17N-(S-3-乙基庚酰基)-D-γ-谷氨?；?甘氨酰基-D-丙氨酸將前例標(biāo)題產(chǎn)物(467毫克)按實(shí)例14方法氫化?；厥沾呋瘎┖?，濾液蒸發(fā)，得泡沫狀物，使其溶于水中并過(guò)濾，冷凍干燥，得標(biāo)題產(chǎn)物238毫克。
1H-NMR(DHSO-d6)δ(ppm)8.20-8.00(m，3H)，4.24-4.16(m，2H)，3.74-3.60(m，2H)，2.18(t，J＝7，2H)，2.02(d，J＝7，2H)，2.02-1.60(m，3H)，1.26(d，J＝6，3H)，1.26-1.08(m，8H)，0.92-0.74(m，6H)。
用同樣的方法，可將前例不飽和產(chǎn)物轉(zhuǎn)變成同樣的產(chǎn)物。
實(shí)例18N-(R-3-乙基-4-庚烯酰)-D-γ-谷氨?；?甘氨?；?D-丙氨酸可將實(shí)例16的不飽和產(chǎn)物用實(shí)例11方法水解成本標(biāo)題產(chǎn)物。
實(shí)例19N-(S-3-乙基庚?；?-D-γ-谷氨?；?α芐酯)-甘氨?；?D-丙氨酸丁酯用實(shí)例17的方法，將實(shí)例16的S-3-乙基庚酰氯和D-γ-谷氨?；?α芐酯)-甘氨酰基-D-丙氨酸丁酯(1.0克，0.00222摩爾)偶聯(lián)，得到本標(biāo)題產(chǎn)物，用相同的方法進(jìn)行分離和純化，得0.7克。
1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)8.22(d，J＝7，1H)，8.12-8.00(m，2H)，4.40-4.16(m，2H)，4.08-3.95(m，2H)，3.75-3.62(m，2H)，2.18(t，J＝6，2H)，2.02(d，J＝6，2H)，2.04-1.62(m，3H)，1.60-1.46(m，2H)，1.38-1.10(m，15H)0.90-0.75(m，9H)。
用同樣的方法，可將R-3-乙基-4-庚烯酰氯轉(zhuǎn)變成N-(R-3-乙基-4-戊烯?；?-D-γ-谷氨?；?α芐酯)-甘氨酰基-D-丙氨酸丁酯。
實(shí)例20N-(S-3-乙基庚?；?-D-γ-谷氨酰基-甘氨?；?D-丙氨酸丁酯用實(shí)例14的方法，將前例標(biāo)題產(chǎn)物氫化，得本標(biāo)題產(chǎn)物?；厥沾呋瘎┖螅舭l(fā)濾液，得固體，用乙醚研磨和過(guò)濾，得256毫克，熔點(diǎn)130-131℃。
用同樣的方法，可將前例不飽和產(chǎn)物轉(zhuǎn)變?yōu)橥瑯赢a(chǎn)物。
實(shí)例21R-3-乙基-4-庚烯醛將實(shí)例12 R-反式-4-庚烯-3-醇(3.0克)的300毫升干燥乙基乙烯基醚溶液加熱回流，在該過(guò)程中分次加入五份Hg(OAc)2(每份2克，在2小時(shí)時(shí)間隔內(nèi))，在另外回流18小時(shí)后，將澄清液冷卻至室溫，用0.5毫升冰醋酸處理并攪拌3小時(shí)。用乙醚稀釋所得溶液，倒入200毫升5%KOH溶液中，用乙醚提取三次。合并乙醚提取液后用K2CO3干燥，蒸發(fā)，得烯丙基乙烯基醚，R-反式-0-乙烯基-4-庚烯-3-醇。
上述烯丙基乙烯基醚(2.3克)在20毫升萘烷中的溶液回流10.5小時(shí)。然后將所得溶液冷卻至室溫;直接置于硅膠柱上層析。用己烷沖洗去萘烷后，用乙醚洗脫柱并蒸發(fā)，得標(biāo)題產(chǎn)物。
實(shí)例22S-3-乙基-4-庚烯酸前例產(chǎn)物(100毫克)溶于4毫升丙酮中并冷至0-5℃。在另一燒瓶中，CrO3(72.1克，0.72摩爾)和50毫升H2O混合，在0-5℃攪拌，慢慢加入62.1毫升濃H2SO4，混合物用H2O稀釋至250毫升，得2.88摩爾H2CrO4溶液(瓊斯試劑)。將一溶液(1毫升)在1小時(shí)內(nèi)分次加到上面的丙酮溶液中。在試劑加入時(shí)溫度上升，并使溫度保持在17-25℃。混合物再冷至6℃，在10分內(nèi)(在此期間溫度允許上升到20℃)加入70毫升2-丙醇，然后在真空下濃縮，得油狀物，在攪拌下于50分鐘內(nèi)向油狀物中加入8毫升2.5N NaoH，保持溫度22±5℃?；旌衔锛訜岵⑼ㄟ^(guò)硅藻土過(guò)濾，用2.5N熱的NaoH洗滌。合并濾液，用3×300毫升異丙醚提取。合并有機(jī)層，用200毫升2N NaoH反提取。合并水層，緩慢加入0.5毫升濃HCl將水層酸化至pH1，產(chǎn)物提取至3×300毫升新配制的異丙醚中。有機(jī)層合并和蒸發(fā)，得標(biāo)題產(chǎn)物，為油狀物。
實(shí)例23S-7-(叔丁基二甲基甲硅氧烷氧基)-5-甲基-1-庚烯在裝有攪拌器，溫度計(jì)，進(jìn)N2管和加料漏斗的500毫升四頸圓底燒瓶中，甲基三苯基溴化鏻(25.7克，0.072摩爾，1.25當(dāng)量)與77毫升THF(四氫呋喃)一起攪成漿狀，并在丙酮/濕冰浴中冷卻。正丁基鋰(43.2毫升1.6N己烷溶液，0.069摩爾，1.20當(dāng)量)放入加料漏斗中，在1小時(shí)內(nèi)將丁基鋰加入初溫為-8℃的漿狀物中，溫度上升并維持在±1℃?；旌衔镌僭?-2℃攪拌0.5小時(shí)，以保證中間體亞甲基三苯基膦在LiBr薄懸浮體中完全形成。在40分鐘內(nèi)分批加入制備2的醛產(chǎn)物(14.1克，0.0576摩爾)在14毫升THF中的溶液，控制溫度在3-7℃。再攪拌15分鐘后，用薄層層析檢查，以3∶1己烷∶乙醚為展開(kāi)劑，證明已無(wú)起始醛(起始的醛Rf0.6;產(chǎn)物Rf0.95)。反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝夭⒂?50毫升乙酸乙酯和90毫升H2O稀釋。有機(jī)層分出并用2×100毫升H2O洗滌。用40毫升乙酸乙酯反提取合并的三份水層。合并有機(jī)層，經(jīng)MgSO4干燥，蒸發(fā)，得25克油狀物，用10毫升己烷研磨，在熔結(jié)玻璃板漏斗上過(guò)濾，用4×10毫升己烷充分洗滌固體，合并己烷濾液和洗液，蒸發(fā);得標(biāo)題產(chǎn)物13.5克(96.6%)為油狀物。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm)5.4-6.2(m，＝CH)，4.8-5.3(m，＝CH2)，3.7(t，J＝6.5H，-OCH2O-)，0.08(s，C(CH3)3)和0.0(s，Si(CH3)2)，混有8%摩爾(C6H5)3PO(7.6，s，1.25H)。
實(shí)例24S-3-甲基-庚-6-烯-1-醇方法A用前例方法，但用甲基三苯基溴化鏻和正丁基鋰各2.2當(dāng)量，制備6的醛產(chǎn)物(26.3克，0.20摩爾;純度合格)與亞甲基三苯基膦反應(yīng)。雖然在加入醛溶液時(shí)形成了膠粘的固體，但只要將反應(yīng)物溫?zé)嶂潦覝?，反?yīng)物便變成稀的漿狀物。用500毫升H2O和300毫升乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物。分出各層，并用3×250毫升H2O洗滌。合并的水層用2×300毫升乙酸乙酯反洗。三份有機(jī)層合并，經(jīng)MgSO4干燥和蒸發(fā)，得65.7克油狀物，其中含有25.6克(100%)標(biāo)題產(chǎn)物和約40克氧化三苯膦，可按下述實(shí)例26的方法進(jìn)一步處理。
方法B通過(guò)將實(shí)例23產(chǎn)物按常規(guī)方法水解，例如按后面實(shí)例26所述在稀硫酸中水解的方法，可以較容易地得到純的標(biāo)題產(chǎn)物。將本標(biāo)題產(chǎn)物提取到乙酯乙酯中，經(jīng)MgSO4干燥和蒸發(fā)，可將標(biāo)題產(chǎn)物分離出來(lái)。
實(shí)例25S-3-甲基-6-庚烯醛將前面實(shí)例的標(biāo)題產(chǎn)物(1.14克，0.01摩爾)溶于20毫升CH2Cl2中，冷卻到0℃。將氯鉻酸吡啶鎓(400克，0.02摩爾)分批加入，同時(shí)溫度保持在0-5℃。混合物加溫到室溫，攪拌2小時(shí)，通過(guò)一硅膠墊過(guò)濾，蒸發(fā)濾液，得油狀標(biāo)題產(chǎn)物，如需要可用蒸餾法進(jìn)一步提純。
實(shí)例26S-3-甲基-6-庚烯酸方法A在裝有攪拌，溫度計(jì)及加液漏斗的2000毫升三頸瓶中，將實(shí)例23的標(biāo)題產(chǎn)物(81克，純度合格，0.33摩爾)溶于400毫升丙酮中，并冷卻到0-5℃。在另一燒瓶中，將CrO3(72.1克，0.72摩爾)與50毫升水混合，并在0-5℃攪拌下，將62.1毫升濃硫酸慢慢滴入，用250毫升水稀釋混合物，即得到2.88摩爾H2CrO4溶液(瓊斯試劑)。在1.2小時(shí)內(nèi)，將后面溶液(240毫升，0.67摩爾)分批加到上面的丙酮溶液中。溫度很快升至17℃，當(dāng)試劑加入時(shí)溫度保持在17-25℃，加到最后，也沒(méi)有引起溫升，將混合物再次冷至6℃，在10分鐘內(nèi)，加入70毫升2-丙醇(此時(shí)溫度升至20℃)，然后在真空中濃縮成油，在保持溫度22±5℃及攪拌下，于50分鐘內(nèi)，將400毫升5N NaoH加入，用400毫升H2O稀釋粘稠的反應(yīng)混合物，在硅藻土上過(guò)濾，將濕餅再與400毫升H2O及50毫升5N NaoH調(diào)成漿狀，在蒸汽浴上加熱，重過(guò)濾，用3×300毫升異丙醚洗滌合并的濾液。用200毫升2N NaoH反提取合并的有機(jī)層溶液，慢慢加入50毫升濃鹽酸以使合并了的水層溶液酸化至pH1.0，產(chǎn)物被提取入3×300毫升新配制異丙醚中。合并有機(jī)提取液，蒸發(fā)，得標(biāo)題產(chǎn)物29.1克(61%)，為油狀物。將硅藻土濾餅提取液再次堿化，經(jīng)同樣方法分離，另外得到產(chǎn)物7.7g(16%)。合并產(chǎn)物的1H-NMR(CDCl3)，δ(ppm)11.9(S，-COOH)，5.8(m，＝CH)，5.0(m，＝CH2)，1.0(d，-CH3)，異丙醚峰在3.7及1.1，指示混有8.6%(摩爾)(6.3%(重量))的異丙醚，但并不影響此產(chǎn)物在進(jìn)一步操作上的應(yīng)用。
方法B按照本實(shí)例方法A氧化實(shí)例24方法A的產(chǎn)物(65.7克，含26.3克，0.20摩爾S-3-甲基庚-6-烯-1-醇)。在加入異丙醇并在0-5℃下攪拌1小時(shí)后，反應(yīng)混合物是完全綠色，蒸去有機(jī)溶劑，用250毫升水稀釋含水的殘留物，用3×250毫升異丙醚提取，合并有機(jī)提取液，用160毫升2N NaoH處理，生成大量的沉淀物(C6H5)3PO(雜在原料中)，經(jīng)過(guò)濾回收，用1N NaoH洗滌，合并濾液及洗液，溶液分層，有機(jī)層再另用80毫升1N NaoH洗滌，合并所有的水層，用3×250毫升異丙醚洗滌，用50毫升濃HCl酸化至pH1.0，所需產(chǎn)物被提取入3×250毫升新配制的異丙醚中，合并的酸性有機(jī)提取液以MgSO4干燥，蒸發(fā)，得標(biāo)題產(chǎn)物14.0克，如需要，可用蒸餾法進(jìn)一步純化。
實(shí)例27S-3-甲基庚酸將10%Pd/C(1.64克，含50%水)，150毫升乙酸乙酯及前例中不飽和酸(3.28克，純度合格)裝入Parr氫化瓶中，漿狀液在4個(gè)大氣壓下進(jìn)行氫化，氫氣吸收完全約需1.5小時(shí)，經(jīng)硅藻土過(guò)濾回收催化劑，濾液經(jīng)蒸發(fā)后得標(biāo)題產(chǎn)物3.20克(96%)，為油狀物。
另外，5%Pd/C(2克，含50%水)、前例的標(biāo)題產(chǎn)物(33.3克，純度合格)及150毫升乙酸乙酯一起裝入1升高壓釜中，在30-31℃，4個(gè)大氣壓力下氫化2小時(shí)，此時(shí)H2已被吸收完全。在硅藻土上進(jìn)行過(guò)濾回收催化劑，蒸發(fā)濾液，得35.4克油狀物，在高真空下蒸餾，得純的標(biāo)題產(chǎn)物29.6克(87.6%);沸點(diǎn)77-79℃/0.2毫米;1H-NMR(CDCl3)δ(ppm)12.0(s，-COOH)，1.0(d，-CH3)，0.6-2.8(m，其余的13H);IR(薄膜)3400-2400，2960，2925，2860，1708，1458，1410，1380，1295，1228，1190，1152，1100，930厘米-1，〔α〕25D＝-6.41°(C＝1%，在甲醇中)，n22.5D＝1.427。
實(shí)例28S-3-甲基-6-庚烯酰氯將實(shí)例4的產(chǎn)物酸(0.747克，5毫摩爾)用實(shí)例6的方法轉(zhuǎn)變成本標(biāo)題產(chǎn)物的CH2Cl2溶液，可直接應(yīng)用于下面實(shí)例9中。另外，將反應(yīng)混合物蒸發(fā)，可得到標(biāo)題產(chǎn)物，如果需要，可將標(biāo)題產(chǎn)物在減壓下蒸餾。
實(shí)例29N-(S-3-甲基-6-庚烯?；?-D-γ-谷氨?；?(α芐酯)-甘氨酰基)-D-丙氨酸芐酯用實(shí)例8方法C，將制備4的產(chǎn)物(2.77克，5毫摩爾)與從實(shí)例28得到的全部酰氯在CH2Cl2中偶聯(lián)。最初的產(chǎn)物2.77克是由蒸發(fā)洗液及干燥過(guò)的有機(jī)層而得到的，將此產(chǎn)物溶于20毫升乙酸乙酯中，用20毫升己烷稀釋?zhuān)鋮s，經(jīng)過(guò)濾得到純的產(chǎn)物2.24克(77%)，熔點(diǎn)137.5-139.5℃。
實(shí)例30N-(S-3-甲基-6-庚烯?；?-D-γ-谷氨?；?甘氨酰基-D-丙氨酸將實(shí)例29的產(chǎn)物(1克)溶于5毫升甲醇中，加入1N NaoH(2.50毫升)，在室溫下攪拌混合物3小時(shí)，蒸發(fā)甲醇，用7.5毫升HO稀釋水殘留物，用2×7.5毫升乙酸乙酯提取，以1N HCl酸化至pH3.0。用新配制的乙酸乙酯連續(xù)提取酸性水溶液，蒸發(fā)提取液，得標(biāo)題產(chǎn)物，按照實(shí)例10方法A，可將標(biāo)題產(chǎn)物轉(zhuǎn)變成冷凍干燥物。
實(shí)例31N-(S-3-甲基-6-庚烯?；?-D-γ-谷氨酰(α-芐酯)-甘氨酰-D-丙氨酸丁酯用實(shí)例8方法A，使D-γ-谷氨酰(α-芐酯)-甘氨酰-D-丙氨酸丁酯(制備4)與S-3-甲基-6-庚烯酰氯偶合，得本標(biāo)題產(chǎn)物。
實(shí)例32N-(S-甲基庚?；?-D-γ-谷氨酰-甘氨酰-D-丙氨酸丁酯用實(shí)例10的方法氫化，可將前例產(chǎn)物轉(zhuǎn)變成本標(biāo)題產(chǎn)物。
制備1消旋反式-4-己烯-3-醇將400毫升THF裝入配有攪拌，加液漏斗，溫度計(jì)及氮進(jìn)氣管的3升四頸燒瓶中，THF冷卻至-70℃，加入溴化乙基鎂(600毫升2M的THF溶液，1.2摩爾)。保持溫度在-70℃至-60℃，于7分鐘內(nèi)將丁烯醛(78毫升，0.94摩爾)加入在-70℃攪拌20分鐘后，使混合物慢慢升溫至-20℃，攪拌1小時(shí)，混合物再次冷卻至-70℃，小心地加入200毫升飽和NH4Cl使驟冷(開(kāi)始起泡)，升溫至室溫，用200毫升乙酸及100毫升水稀釋?zhuān)瑑蓪右后w用NaCl飽和。分出水層，用2×500毫升乙醚提取。合并最初的有機(jī)層及乙醚提取液，用4×250毫升飽和NaHCO洗滌，用MgCO4干燥，蒸發(fā)，在大氣壓下蒸餾殘留物，得69克;沸點(diǎn)133-137℃.，1H-NMR(CDCl3)δ(ppm)5.53(復(fù)雜的m，2H)，3.39(m，1H)，2.26(s，1H)，1.71(d，3H)，1.43(m，2H)，0.84(t，3H)。
制備2甘氨酰-D-丙氨酸芐酯鹽酸鹽將12.3克(60毫摩爾)二環(huán)己基碳化二亞胺加入含有10克(57毫摩爾)N-叔丁氧基-羰基甘氨酸，20克(57毫摩爾)D-丙氨酸芐酯對(duì)甲苯磺酸鹽及5.77克(57毫摩爾)三乙胺的100毫升冷的(0℃)二氯甲烷中，使反應(yīng)混合物升溫至室溫，18小時(shí)后將混合物過(guò)濾，在真空中濃縮濾液。殘留物溶于200毫升乙酸乙酯中，用2.5%鹽酸，水，飽和碳酸氫鈉及鹽水溶液洗滌有機(jī)層，分出有機(jī)層，用硫酸鎂干燥，在減壓下蒸發(fā)。將用氯化氫飽和的200毫升二噁烷加入所得到的油中。30分鐘后加入400毫升乙醚，在氮?dú)饬飨逻^(guò)濾產(chǎn)物，得10.9克(70%產(chǎn)率)。
制備3N-叔丁氧基羰基-D-γ-谷氨?；?α-芐酯)羥基琥珀酰胺酯將30.9克(15毫摩爾)二環(huán)己基碳化二亞胺加入含有50克(143毫摩爾)N-叔丁氧基羰基-D-γ-谷氨酸α-芐酯及17.3克(150毫摩爾)N-羥基琥珀酰胺的1500毫升二氯甲烷中，在室溫下將所得的反應(yīng)混合物攪拌18小時(shí)。過(guò)濾固體，在真空中濃縮濾液。用乙醚研磨殘留物，在氮?dú)饬飨聻V集固體，得43.7克(68%產(chǎn)率)。
制備4D-γ-谷氨?；?α-芐酯)-甘氨?；?D-丙氨酸芐酯鹽酸鹽在室溫下，將含有4.3克(9.45毫摩爾)N-叔丁氧基羰基-D-γ-谷氨?；?α-芐酯)羥基琥珀酰胺酯，2.71克(9.92毫摩爾)甘氨?；?D-丙氨酸芐酯鹽酸鹽及1.0克(9.92毫摩爾)三乙胺的100毫升二氯甲烷溶液攪拌18小時(shí)，然后在真空中濃縮，將殘留物溶于200毫升乙酸乙酯中，溶液用2.5%鹽酸，水，10%碳酸鉀及鹽水洗滌，分出有機(jī)層，用硫酸鎂干燥，在減壓下蒸發(fā)，殘余物用氯化氫飽和的二惡烷處理，攪拌2小時(shí)，在真空中濃縮溶液至干，用乙醚研磨殘留物，在氮?dú)饬飨逻^(guò)濾，得固體3.41克(73%產(chǎn)率)。
用同樣的方法，前面制備中的產(chǎn)物和甘氨?；?D-丙氨酸丁酯被轉(zhuǎn)變成D-γ-谷氨酰基(α芐酯)-甘氨?；?D-丙氨酸丁酯。
制備5消旋 反式-4-庚烯-3-醇用制備1的方法，但用普通的乙醚作為溶劑，2-戊烯(25克，0.30摩爾)被轉(zhuǎn)變成標(biāo)題產(chǎn)物，得25.6克;沸點(diǎn)145-150℃。
制備60-(叔丁基二甲基甲硅)-S-香茅醇在室溫(21℃)，將5-香茅醇(547克，3.5摩爾)溶于547毫升DMF(二甲基甲酰胺)中，將此溶液置于裝有攪拌器，溫度計(jì)，進(jìn)N管及加液漏斗的500毫升四頸圓底瓶中，加入咪唑(262.1克，3.85摩爾，1.1當(dāng)量)。溫度降至13℃，用冰/丙酮浴進(jìn)一步降至-6.5℃。在1.25小時(shí)內(nèi)，將在激烈攪拌下預(yù)先溶于1160毫升DMF中的叔丁基二甲基氯硅烷(580.3克，3.85摩爾，1.1當(dāng)量)加入，同時(shí)使溫度慢慢升至11℃。在另外的0.5小時(shí)后，薄層層析(3∶1己烷∶乙醚)指示已完全轉(zhuǎn)變成所需要的產(chǎn)物(原料Rf為0.2;產(chǎn)物Rf為0.9)。
將混合物加入500毫升己烷及1000毫升冰及水中分成二層，用2000毫升冰冷的0.25N鹽酸洗滌有機(jī)層，合并二份水層，用500毫升己烷洗滌，該洗液與最初的有機(jī)層合并，用500毫升飽和NaHCO3洗滌，用MgSO4干燥，蒸發(fā)，得標(biāo)題產(chǎn)物986.7克，因?yàn)橛猩倭咳軇┐嬖冢詾槔碚摿康?04%，1H-NMR(CDCl3)δ(ppm)，5.2(t，J＝7Hz，＝CH)，3.65(t，J＝6.5Hz，-O-CH2-)，1.7及1.65(2S，2×C(CH3))，0.8(S，-SiC(CH3)3)，及0.0(S，-SiC(CH3)2)，制備7S-6-叔丁基-二甲基甲硅烷氧)-4-甲基-己醛將前面制備的產(chǎn)物(81.2克，溶劑含量已校正，0.3摩爾)溶于120毫升CH2Cl2及81毫升CH3OH中，該溶液置于裝有機(jī)械攪拌器，通O3/O2流的直玻璃管，溫度計(jì)及出口管與飽和KI捕集器相連的500毫升四頸圓底燒瓶中。加入NaHCO3(6.3克，0.075摩爾，0.25當(dāng)量)，混合物用丙酮/干冰浴冷卻到-10℃。當(dāng)O3/O2吹入反應(yīng)液時(shí)再降溫度，維持在-72℃至-75℃共6小時(shí)。在不到1小時(shí)之后，反應(yīng)混合物不再吸收O3，這可由在KI捕集器中形成的黃色來(lái)證明。用己烷作展開(kāi)劑的薄層層析指示反應(yīng)的完全情況，(原料Rf為0.3;中間體為Rf0.0)。
含過(guò)量O3的反應(yīng)混合物用N清洗，加二甲硫(26.4毫升，22.4克，0.36摩爾，1.2當(dāng)量)，移去冷卻浴，混合物加溫至室溫，在N2流下攪拌16小時(shí)，此時(shí)薄層層析(6∶1己烷∶乙醚)指示沒(méi)有中間原料存在了(中間原料Rf為0.8;產(chǎn)物Rf為0.05)。蒸發(fā)混合物，殘留物在150毫升乙酸乙酯及300毫升H2O中進(jìn)行分配，用300毫升水洗滌有機(jī)層，用150毫升新配制的乙酸乙酯回洗合并了的水層。合并有機(jī)層，用MgSO4干燥，蒸發(fā)，得油狀物，最后在高真空下蒸發(fā)16小時(shí)，得到定量的標(biāo)題產(chǎn)物74.7克，理論量的101.9%(由于有少量溶劑雜質(zhì)之故)1H-NMR(CDCl3)δ(ppm);9.75(t，-CHO)，3.6(t，J＝6Hz，-O-CH2-)，0.9(s，-SiC(CH3)3)，0.0(s，-Si(CH3)2)。
制備8S-6-羥基-4-甲基己醛方法A向裝有電磁攪拌器，溫度計(jì)，氣體入口管及出口管與含飽和KI的洗氣瓶相連的250毫升三頸圓底燒瓶中，加入S-香茅醇(31.25克，0.20摩爾)的81毫升CH2Cl2及54毫升CH3OH溶液，并冷卻至-8℃。保持溫度在-2℃及-10℃之間，于4.5小時(shí)內(nèi)吹入O2/O3氣泡至反應(yīng)物中，此時(shí)過(guò)量O3被KI溶液捕集，由陽(yáng)性淀粉/KI紙?jiān)囼?yàn)指示反應(yīng)完全情況，混合物保持在-5℃，用N2氣清洗，加入二甲硫(17.7毫升，15.0克，0.24摩爾)。使反應(yīng)混合物升溫至室溫，然后攪拌16小時(shí)，此時(shí)薄層層析(以異丙醚作展開(kāi)劑)指示反應(yīng)完全情況(S-香茅醇Rf為0.7;產(chǎn)物Rf為0.4)，最后蒸發(fā)溶劑，得到50.8克油狀物。用30毫升乙酸乙酯及25毫升H2O稀釋該油為單一相，再加150毫升乙醚得到兩相。溶液層被分開(kāi)，用2×25毫升水洗滌有機(jī)相，用MgSO4干燥，蒸發(fā)，得無(wú)色油狀物23.9克。用2×50毫升乙酸乙酯提取合并的水層，合并提取液，干燥，蒸發(fā)，另外得7.8克為無(wú)色油狀物。合并無(wú)色油狀物，再蒸發(fā)，得標(biāo)題產(chǎn)物28.3克(理論量的108.7%)。薄層層析(上面曾提到過(guò))表明，除混有溶劑外，產(chǎn)品是純的，如上所述，適用于下一步反應(yīng)。
方法B用一般的方法，如上面實(shí)例4中所用的稀硫酸法，將制備2的產(chǎn)物水解。用提取法將標(biāo)題產(chǎn)物提取入乙酸乙酯中，蒸發(fā)，如上面方法A一樣處理，可使標(biāo)題產(chǎn)物分離出。
權(quán)利要求
1.制備R-3-甲基-4-庚烯酸或R-3-乙基-4-庚烯酸的方法，該方法包含以下步驟(a)消旋反式-4-已烯-3-醇或反式-4-庚烯-3-醇與叔丁基氫過(guò)氧化物反應(yīng)，反應(yīng)是在有數(shù)量足以氧化S-對(duì)映體并保留未反應(yīng)的反式-R-4-已烯-3-醇或反式-R-4-庚烯-3-醇的四異丙醇鈦及L-(+)-酒石酸二異丙酯存在進(jìn)行，(b)在酸存在下，上述反式-R-4-已烯-3-醇或反式-R-4-庚烯-3-醇與原乙酸三[(C1-C3)烷基酯縮合，得R-3-甲基-4-庚烯酸(C1-C3)-烷基酯或R-3-乙基-4-庚烯酸(C1-C3)-烷基酯，及(c)水解上述(C1-C3)烷基酯，形成R-3-甲基-4-庚烯酸或R-3-乙基-4-庚烯酸。
2.制備5-3-甲基-庚酸的方法，該方法包含以下步驟(a)消旋反式-4-己烯-3-醇或反式-4-庚烯-3-醇與叔丁基氫過(guò)氧化物反應(yīng)，該反應(yīng)是在有數(shù)量要足以氧化S-對(duì)映體并保留未反應(yīng)的反式-R-4-己烯-3-醇或反式-R-4-庚烯-3醇的四異丙醇鈦及L-(+)-酒石酸二異丙酯存在下進(jìn)行，(b)在酸的存在下，使反式-R-4-己烯-3-醇或反式-R-4-庚烯-3-醇與原乙酸三〔(C1-C3)烷基〕酯縮合，得R-3-甲基-4-庚烯酸(C1-C3)烷基酯或R-3-乙基-4-庚烯酸(C1-C3)烷基酯，或者(c)水解上述(C1-C3)烷基酯，形成R-3-甲基-4-庚烯酸或R-3-乙基-4-庚烯酸;及(d)催化氫化上述4-庚烯酸，生成S-3-甲基庚酸或S-3-乙基庚酸;或(e)催化氫化上述(C1-C3)烷基酯，生成S-3-甲基庚酸(C1-C3)烷基酯或S-3-乙基庚酸(C1-C3)烷基酯，及(f)水解上述S-3-甲基庚酸酯或S-3-乙基庚酸酯，生成S-3-甲基庚酸式S-3-乙基庚酸。
3.按照權(quán)利要求
1或2的方法，其中(C1-C3)烷基各為乙基，而酸為AlCl3。
4.制備R-3-甲基-4-庚烯酸或R-3-乙基-4-庚烯酸的方法，該方法包含以下步驟(a)消旋反式-4-己烯-3-醇或反式-4-庚烯-3-醇與叔丁基氫過(guò)氧化物反應(yīng)，反應(yīng)是在數(shù)量足以氧化S-對(duì)映體并且保留未反應(yīng)的反式R-4-己烯-3-醇或反式-R-4-庚烯-3-醇的四異丙醇鈦及L-(+)-酒石酸二異丙酯存在下進(jìn)行，(b)在Hg(CH3CO2)2存在下，使反式-R-4-己烯-3-醇或反式-R-4-庚烯-3-醇與乙基乙烯基醚反應(yīng)，生成相應(yīng)的0-乙烯基醚，(c)上述0-乙烯基醚在惰性溶劑中加熱重排，生成R-3-甲基-4-庚烯醛或R-3-乙基-4-庚烯醛，及(d)在稀無(wú)機(jī)酸中用鉻酸酐氧化上述4-庚烯醛，生成上述的R-3-甲基-4-庚烯酸或R-3-乙基-4-庚烯酸。
5.按照權(quán)利要求
4的方法，其中無(wú)機(jī)酸是硫酸。
6.制備S-3-甲基-6-庚烯酸的方法，該方法包含以下步驟(a)在惰性溶劑中，使S-6-羥基-4-甲基-己醛或S-6-(被甲硅烷基保護(hù)的)羥基-4-甲基己醛與亞甲基三苯膦反應(yīng)，形成S-7-羥基-5-甲基-1-庚烯或S-7-(被甲硅烷基保護(hù)的)羥基-5-甲基-1-庚烯，(b)當(dāng)步驟(a)含有甲硅烷基保護(hù)基團(tuán)時(shí)，該保護(hù)基團(tuán)在稀無(wú)機(jī)酸中水解，形成S-7-羥基-5-甲基-1-庚烯，可作為單獨(dú)的一步進(jìn)行，或與下一步驟同時(shí)進(jìn)行，及(c)使上述S-7-羥基-5-甲基-1-庚烯與鉻酸酐在稀無(wú)機(jī)酸中氧化，形成S-3-甲基-6-庚烯酸。
7.按照權(quán)利要求
6所述的方法，其中S-6-羥基-4-甲基己醛在步驟(a)中是反應(yīng)物，而無(wú)機(jī)酸是硫酸。
8.按照權(quán)利要求
6所述的方法，其中S-6-(被甲硅烷基保護(hù)的)羥基-4-己醛在步驟(a)中是反應(yīng)物，步驟(b)及(c)同時(shí)進(jìn)行，保護(hù)基團(tuán)甲硅烷基是叔丁基二甲基甲硅烷基，而無(wú)機(jī)酸是硫酸。
9.制備S-3-甲基庚酸的方法，該方法包含以下步驟(a)在惰性溶劑中，S-6-羥基-4-甲基己醛或S-6-(被甲硅烷基保護(hù)的)羥基-4-甲基己醛與亞甲基三苯膦反應(yīng)，形成S-7-羥基-5-甲基-1-庚烯或S-7-(被甲硅烷基保護(hù)的)羥基-5-甲基-1-庚烯，(b)當(dāng)步驟(a)的產(chǎn)物含有甲硅烷基保護(hù)基團(tuán)時(shí)，使該保護(hù)基團(tuán)在稀無(wú)機(jī)酸中水解，形成S-7-羥基-5-甲基-1-庚烯，可作為單獨(dú)的一步進(jìn)行，或與下一步驟同時(shí)進(jìn)行，(c)在稀無(wú)機(jī)酸中，使上述S-7-羥基-5-甲基-1-庚烯與鉻酸酐進(jìn)行氧化反應(yīng)，形成S-3-甲基-6-庚烯酸，及(d)使上述6-庚烯酸中的雙鍵經(jīng)催化氫化，形成S-3-甲基庚酸。
10.按照權(quán)利要求
9所述的方法，其中S-6-羥基-4-甲基己醛在步驟(a)中是反應(yīng)物，而無(wú)機(jī)酸是硫酸。
11.按照權(quán)利要求
9所述的方法，其中S-6-(被甲硅烷基保護(hù)的)羥基-4-己醛在步驟(a)中是反應(yīng)物，步驟(b)及(c)同時(shí)進(jìn)行，保護(hù)基團(tuán)甲硅烷基是叔丁基二甲基甲硅烷基，而無(wú)機(jī)酸是硫酸。
12.制備具有絕對(duì)立體化學(xué)式(Ⅰ)化合物的方法，
式(Ⅰ)中R是甲基或乙基，R4及R5各是氫，或R4及R5之中一個(gè)是氫，另一個(gè)是(C1-C6)烷基或(C6-C8)環(huán)烷基甲基，該方法包括下列步驟(a)使R-反式-3-甲基-4-庚烯酸，R-反式-3-乙基-4-庚烯酸或S-3-甲基-6-庚烯酸的活化形式與具有下述絕對(duì)立體化學(xué)式的化合物進(jìn)行偶合反應(yīng)，形成具有絕對(duì)立體化學(xué)式(Ⅲc)的化合物，
其中R6及R7各為芐基，或R6及R7之中一個(gè)是芐基，另一個(gè)是(C1-C6)烷基或(C6-C8)環(huán)烷基甲基，
式(Ⅲc)中，兩個(gè)虛線中之任何一個(gè)代表雙鍵，但不是兩個(gè)虛線均代表雙鍵，附帶條件是當(dāng)雙鍵在末端的位置6，7時(shí)，R是甲基，及(b)式Ⅲc化合物經(jīng)氫化形成式(Ⅰ)化合物，使雙鍵同時(shí)還原并且芐酯基團(tuán)進(jìn)行氫解。
13.按照權(quán)利要求
12所述的方法，其中酸的活化形式是酰氯，R6及R7制備都是芐基，R4及R5都是氫。
14.制備具有絕對(duì)立體化學(xué)式(Ⅲa)化合物的方法，
其中兩個(gè)虛線中之任何一個(gè)代表雙鍵，但不是兩個(gè)虛線均為雙鍵，R是甲基或乙基，附帶條件是雙鍵在末端位置6，7時(shí)，R是甲基，該方法包含下列步驟(a)使R-反式-3-甲基-4-庚烯酸，R-反式-3-乙基-4-庚烯酸或S-3-甲基-6-庚烯酸的活化形式與具有下述絕對(duì)立體化學(xué)式化合物進(jìn)行偶合反應(yīng)，形成絕對(duì)立體化學(xué)式(Ⅲb)的化合物，
其中R6及R7各自是芐基，(C1-C6)烷基或(C6-C8)環(huán)烷基甲基，(b)使式(Ⅲb)化合物中的酯基水解形成式(Ⅲa)化合物。
15.按照權(quán)利要求
14所述的方法，其中酸的活化形式是酰氯，R6及R都是芐基。
16.制備有下述絕對(duì)立體化學(xué)式結(jié)晶化合物的方法，該方法包括使該化合物從一種或多種有機(jī)溶劑中結(jié)晶。
專(zhuān)利摘要
免疫調(diào)節(jié)劑N-(
文檔編號(hào)C07C51/16GK87105898SQ87105898
公開(kāi)日1988年3月9日 申請(qǐng)日期1987年8月26日
發(fā)明者查爾斯·威廉·默蒂阿肖 申請(qǐng)人:美國(guó)輝瑞有限公司導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan