專利名稱：一種銹毛莓多糖的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從植物體內(nèi)提取多糖類物質(zhì)的方法，具體涉及銹毛莓
多糖的提取方法。 技術(shù)背景銹毛莓(Rubus reflexus Ker)又名蛇包簕、大葉蛇簕(廣東)、山煙筒 子(廣西)，系薔薇科類懸鉤子屬植物。攀援灌木，枝被銹色茸毛，疏生小剌。單葉，心狀長 卵形，上面無毛，下面密被銹色茸毛，沿葉脈有長茸毛，邊緣3 5裂，有不整齊粗鋸齒或重 鋸齒。葉柄被茸毛，疏生小剌。托葉倒卵形，被長柔毛?；〝?shù)朵團聚腋生或組成頂生總狀花 序，總花梗和花梗密被銹色長柔毛。苞片與托葉類似，花白色，花萼外面密被銹色長柔毛和 茸毛，萼片卵形，頂端掌狀分裂。花瓣長圓形，與萼片等長。雄蕊短，花絲寬扁。果近球形深 紅色。 銹毛莓有銹毛莓Rubus reflexus Ker var.(原變種)、長葉銹毛莓Rubus reflexus Ker var. orogenes Hand.—Mazz.(變禾中)、淺裂誘毛毒Rubus reflexus Ker var. hui (Diels) Mete (變禾中)、深裂誘毛毒Rubus reflexus Ker var. lanceolobus Metc(變禾中) 禾口大葉誘毛毒Rubus reflexus Ker var. macrophyllus Yiiet Lu(變禾中)等。其中誘毛毒 (原變種)、長葉銹毛莓(變種)為目前國內(nèi)有較詳細(xì)報道的2種，銹毛莓(原變種)分布 于江西，湖南，浙江，福建，臺灣，廣西；長葉銹毛莓(變種)分布于江西、湖北、湖南、廣西、貴 州。 銹毛莓其根莖均可入藥，民間廣泛用于治療各型肝炎，有良好的民間用藥基礎(chǔ)。但
目前國內(nèi)外尚未見銹毛莓化學(xué)成分報道，也未見銹毛莓提取物及用途的報道。 發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種銹毛莓多糖的提取方法，為進(jìn)一步研究開發(fā)
新藥提供基礎(chǔ)。 本發(fā)明的目的是通過以下方法實現(xiàn)的。 本發(fā)明的銹毛莓多糖的提取方法，包括材料選擇、破碎、粗提、濃縮、提取、萃取、抽 濾和干燥，具體方法如下 1.材料選擇選取銹毛莓干草的莖桿，重力破碎， 一般破碎至0. 5 1. 0cm ;
2.粗提將干燥的銹毛莓莖桿6(TC溫水浸泡不低于8h ;6(TC熱水浴回流提取3h， 提取3次，合并提取液； 3.濃縮用真空旋轉(zhuǎn)濃縮儀，8(TC水浴條件下，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至總提取液體積的
1/3 ;4.提取取濃縮水提液，加入無水乙醇，使醇濃度不低于70% (V/V) ，4t:冷藏不少
于12h，布氏漏斗抽濾并真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至無醇； 5.萃取4t:冷藏8h后，置分液漏斗中用乙醚萃取，取濃縮液中脂溶部分，共萃3 次，合并萃后濾液加無水乙醇，使最后醇濃度不低于80% (v/v)，置冰箱中4t:靜置不少于
8h ; 6.抽濾去上清液得沉淀，加2倍量(V/V)無水乙醇攪拌后抽濾，棄濾液，得濾物； 7.干燥將濾物用無水乙醇洗滌3次，真空冷凍干燥機干燥后得多糖。 本發(fā)明的銹毛莓多糖的提取方法，具有提取方法簡單、多糖的得率高、純度高的優(yōu)點，而且成本低廉，試劑可以回收利用。本發(fā)明的銹毛莓多糖的提取方法，多糖得率可達(dá) 1. 21%。 具體實施例為了充分公開本發(fā)明的銹毛莓多糖的提取方法，以下結(jié)合實施例加 以說明。 實施例1 :銹毛莓多糖的提取方法 銹毛莓多糖的提取方法，包括以下步驟 1、材料選擇選取銹毛莓莖桿，洗凈曬干備用； 2、破碎將干燥的銹毛莓莖桿重力破碎至1. 0cm ; 3、粗提將干燥的銹毛莓莖桿6(TC溫水浸泡8h ;6(TC熱水浴回流提取3h，提取3
次，合并提取液； 4、濃縮用真空旋轉(zhuǎn)濃縮儀，8(TC水浴條件下，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至總提取液體積的 1/3 ; 5、提取取濃縮水提液，加入無水乙醇，使醇濃度為70% (V/V) ，4t:冷藏12h，布氏 漏斗抽濾并真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至無醇； 6、萃取4t:冷藏8h后，置分液漏斗中用乙醚萃取，取濃縮液中脂溶部分，共萃3 次，合并萃后濾液加無水乙醇，使最后醇濃度為80% (V/V)，置冰箱中4t:靜置8h ;
7、抽濾去上清液得沉淀，加2倍量(V/V)無水乙醇，攪拌后抽濾，棄濾液，得濾 物； 8、干燥將濾物用無水乙醇洗滌3次，真空冷凍干燥機干燥后得多糖。 本發(fā)明的產(chǎn)物經(jīng)紅外光譜多糖特征峰鑒定和紫外檢測蛋白和核酸吸收、應(yīng)用
Molisch反應(yīng)(a-萘酚反應(yīng))方法鑒定為多糖，并運用蒽酮-硫酸比色法測定了多糖含量。
權(quán)利要求
一種銹毛莓多糖的提取方法，其特征在于由以下步驟組成(1)材料選擇選取銹毛莓干草的莖桿，重力破碎；(2)粗提將干燥的銹毛莓莖桿60℃溫水浸泡不低于8h；60℃熱水浴回流提取3h，提取3次，合并提取液；(3)濃縮用真空旋轉(zhuǎn)濃縮儀，80℃水浴條件下，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至總提取液體積的1/3；(4)提取取濃縮水提液，加入無水乙醇，使醇濃度不低于70％，4℃冷藏不少于12h，布氏漏斗抽濾并真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至無醇；(5)萃取4℃冷藏8h后，置分液漏斗中用乙醚萃取，取濃縮液中脂溶部分，共萃3次，合并萃后濾液加無水乙醇，使最后醇濃度不低于80％，置冰箱中4℃靜置不少于8h；(6)抽濾去上清液得沉淀，加2倍量無水乙醇攪拌后抽濾，棄濾液，得濾物；(7)干燥將濾物用無水乙醇洗滌3次，真空冷凍干燥機干燥后得多糖。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種銹毛莓多糖的提取方法，其特征在于步驟(1)所述的重 力破碎，破碎至0. 5 1. Ocm。
全文摘要
一種銹毛莓多糖的提取方法，包括材料選擇、破碎、粗提、濃縮、提取、萃取、抽濾和干燥。本發(fā)明的銹毛莓多糖的提取方法，具有提取方法簡單、多糖的得率高、純度高的優(yōu)點，提取多糖的得率可達(dá)1.21％；而且成本低廉，試劑可以回收利用。
文檔編號C08B37/00GK101709092SQ20091011293
公開日2010年5月19日 申請日期2009年12月9日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月9日
發(fā)明者寧書菊, 施恩靜, 魏道智 申請人:福建農(nóng)林大學(xué)