專利名稱：一種超低分子量肝素的制備及純化工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種超低分子量肝素的制備及純化工藝，具體地，涉及到利用β-消 除降解法制備分子量范圍在2000D-2500D之間的超低分子量肝素鈉或鈣鹽、利用陶瓷超濾 膜分離純化的生產(chǎn)工藝，屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
肝素(heparin)是廣泛存在于動(dòng)物器官和組織(如小腸粘膜、肺等)中的一種葡 萄糖胺聚糖，具有抗凝、抗炎、抗過敏、抗病毒、抗癌、調(diào)節(jié)血脂等多種藥理活性，但長(zhǎng)期使 用則可能產(chǎn)生某些不良反應(yīng)，如出血和誘導(dǎo)血小板減少等。低分子肝素(low molecular weight heparin, LMWH)是肝素分級(jí)或降解而得到的分子質(zhì)量較小的片段。近10年來，人們 對(duì)低分子肝素的研究發(fā)現(xiàn)，其抗血栓作用優(yōu)于肝素，具有生物利用度高、體內(nèi)半衰期長(zhǎng)、出 血傾向小，口服易吸收等特點(diǎn)。超低分子量肝素(ultra low molecular weight heparin, ULMWH)是在低分子肝素基礎(chǔ)上開發(fā)的又一個(gè)新品種的抗血栓藥物，與低分子肝素相比，其 抗血栓作用強(qiáng)，皮下注射易吸收，無毒副作用，主要用于血栓栓塞性疾病的預(yù)防，如腎病綜 合癥、手術(shù)后靜脈血栓的形成、老年靜脈血栓和心腦血管疾病的預(yù)防，防治高血脂癥等。由于低分子量肝素在治療和預(yù)防靜脈血栓栓塞方面的有效性，已在歐美等多個(gè)國(guó) 家上市，有取代傳統(tǒng)肝素的趨勢(shì)。因此，結(jié)合臨床實(shí)踐，研制理想分子量及分子量分布的低 分子肝素和超低分子量肝素產(chǎn)品具有十分廣闊的前景。我國(guó)是世界上生產(chǎn)肝素量最大的國(guó)家，粗品肝素的出口量一直居于生化藥物的首 位。但同時(shí)，我國(guó)大量進(jìn)口國(guó)外生產(chǎn)的低分子量肝素產(chǎn)品，因此，可以利用我國(guó)豐富的肝素 原料資源生產(chǎn)其替代產(chǎn)品，提高產(chǎn)品附加值。藥理研究顯示，隨著肝素分子量的降低，其抗凝血活性較快下降，但和抗血栓功 能密切相關(guān)的抗)(a活性下降相對(duì)較慢，基于這一發(fā)現(xiàn)，人們研究出具有較高抗血栓活性 (FXa)和較低出血傾向——低抗凝血活性(F II a)的肝素片段。研究表明，分子量在2000D 以下的肝素片段沒有抗)(a活性，分子量大于8000D的片段雖有較高的抗fe活性，但抗凝血 活性也較高，不符合藥典中關(guān)于FXa/F II a的要求。低分子量肝素的制備方法大體上可分為三類即物理分離法、裂解法和合成法。物 理降解反應(yīng)由于控制困難，無法實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。裂解法分化學(xué)裂解法和酶裂解法，化學(xué)裂 解法主要有亞硝酸控制解聚降解法、過氧化物降解法、β -消除降解法、自由基催化降解法、 苯甲基化并堿降解法、高磺酸氧化降解法等。酶裂解法為肝素酶降解法。降解反應(yīng)不同，產(chǎn) 品的末端結(jié)構(gòu)也不同。酶降解法由于生產(chǎn)成本太高而缺乏競(jìng)爭(zhēng)力。合成法是國(guó)外近年來對(duì) 肝素進(jìn)行研究的一個(gè)方向，利用不同糖基人工合成肝素片段，還未進(jìn)行產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。目前國(guó) 際市場(chǎng)上低分子量肝素主流產(chǎn)品均以化學(xué)降解方法制得，輝瑞公司生產(chǎn)的達(dá)肝素鈉、葛蘭 素生產(chǎn)的納曲肝素鈉都采用了亞硝酸鈉降解方法，賽諾菲-安萬特生產(chǎn)的依諾肝素鈉采用 了消除降解的方法，Opocin以雙氧水-氯化亞銅降解，諾華采用亞硝酸異戊酯降解生產(chǎn)低 分子量肝素鈉。我國(guó)現(xiàn)有公開號(hào)為CN101519459A的發(fā)明專利，公開了一種采用亞硝酸鈉降解、陰離子柱吸附分離、超濾純化、乙醇沉淀、冷凍干燥制備超低分子量肝素鈉(鈣)的生產(chǎn) 工藝，制備的超低分子量肝素平均分子量為23004900D，分子量在1500-5000D之間的比例 達(dá)到80%。以化學(xué)法降解的低分子量肝素是分子量從幾百到近一萬的不同分子量片段的混 合物，因此需要采用有效的分離純化方法。目前采用的分級(jí)沉淀分離純化技術(shù)難以分離出 分子量分布范圍狹窄的片段；采用的凝膠過濾層析可以分離出合理的片段分布，但存在操 作繁雜、填料成本較高等問題；近年來超濾膜技術(shù)的發(fā)展，提供了一種很好的分子量分離純 化方法，但是由于有機(jī)膜耐熱性差，耐酸、堿和抗微生物侵蝕能力差等，在實(shí)際生產(chǎn)中的應(yīng) 用受到一定的限制。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于改進(jìn)目前超低分子量肝素制備和分離純化技術(shù)，提供一種超低 分子量肝素的制備及純化工藝。本發(fā)明的目的是通過以下的技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的因?yàn)榈头肿恿扛嗡責(zé)o論是抗凝活性還是抗栓活性，都是以肝素與抗凝血酶 III (ATIII)相結(jié)合為前提的，該結(jié)合要求肝素必須有一個(gè)五糖單位，此結(jié)構(gòu)為肝素抗FXa 及抗FIIa活性所必須。此外，抗FIIa活性不僅在五糖上與ATIII結(jié)合，還必須在十三糖上 與ATIII結(jié)合才能表達(dá)，所以低分子量肝素片段的抗FXa及抗FIIa活性與由肝素的降解 程度關(guān)系密切。如果肝素降解后只剩下五糖單位，那么制成的低分子肝素只能具有抗FXa 的活性，如果五糖單位也被降解了，那么抗Ffe的活性也將喪失，所以反應(yīng)條件需要控制準(zhǔn) 確，保證所得的低分子肝素相對(duì)分子質(zhì)量不低于2000D。本發(fā)明以肝素鈉為原料，在水溶液中與有機(jī)季銨鹽作用生成肝素季銨鹽，在二氯 甲烷溶液中肝素季銨鹽的羧基與芐氯發(fā)生親核取代反應(yīng)生成肝素芐基酯，在堿性條件下， 酯水解降解得到低分子量的肝素片段。通過控制酯化過程中的反應(yīng)條件可以控制肝素芐基 酯的生成量，生成量越高則降解后肝素片段的分子量越低，而酯水解降解時(shí)間的長(zhǎng)短與得 到的超低分子量肝素的結(jié)構(gòu)和生理活性相關(guān)。降解后沉淀得到的粗品，采用陶瓷膜結(jié)合中空纖維超濾膜進(jìn)行分離純化，通過選 擇陶瓷膜的孔徑、操作壓力和料液溫度，以及中空纖維膜的截留分子量，有效分離分子量分 布范圍合理的片段，同時(shí)無機(jī)陶瓷膜還具有的耐高溫、耐腐蝕、清洗方便、膜易消毒處理、機(jī) 械性能良好、膜的使用壽命長(zhǎng)等優(yōu)勢(shì)。實(shí)現(xiàn)本發(fā)明生產(chǎn)工藝的主要特征包括以下步驟(1)肝素季銨鹽的合成取肝素鈉(抗II a因子效價(jià)140IU/mg左右)，加水溶解，制成重量體積濃度為 15-25%的溶液，攪拌下緩慢加入20倍量芐素氯銨溶液(重量體積濃度為2-5% )，溶液逐 漸變渾濁，過濾后的濾餅用純化水洗滌，65°C烘干他，得肝素芐素氯銨鹽。(2)肝素芐基酯的合成取肝素芐索氯銨鹽，加入5倍量的二氯甲烷攪拌溶解，緩慢滴加氯芐，30-45°C反 應(yīng)15-2證，控制酯化率為14-15%，反應(yīng)結(jié)束時(shí)加入1. 5倍量溶有10%醋酸鈉的甲醇，待沉 淀析出后，過濾。濾餅用甲醇洗滌，干燥，得肝素芐基酯。4
(3)肝素芐基酯堿性條件下降解取肝素芐基酯，溶于水中至濃度為30-50%，加熱至55_65°C，加入氫氧化鈉使其 濃度不低于0. lmol/L，攪拌解聚1-1. 25h。反應(yīng)完畢，冷卻到室溫，用鹽酸調(diào)至pH值為 6. 0-7.0，加氯化鈉使其終濃度為10%。邊攪拌邊加入3倍體積甲醇，析出沉淀后過濾。濾 餅用甲醇洗滌，減壓干燥，得降解粗品。在鹽酸中和時(shí)，調(diào)節(jié)溶液的pH為6.0，加入氧化鈣和氯化鈣，使氯化鈣的濃度為 8. Omol/L，則制備得到超低分子量肝素鈣。(4)超低分子量肝素粗品純化取降解后的超低分子量肝素粗品，加水溶解制成4-8%的溶液，通過無機(jī)陶瓷超濾 膜進(jìn)行過濾，除去大分子量的肝素片段，本發(fā)明中采用江蘇久吾高科技有限公司生產(chǎn)的二 氧化鋯陶瓷超濾膜，其是以高純度的三氧化二鋁為支撐體，膜孔徑在lOnm，可實(shí)現(xiàn)分子篩級(jí) 過濾，根據(jù)其截留分子量，可以分離出分子量大于3000D的肝素片段，陶瓷膜過濾的操作壓 力選擇0. 1-0. 4MPa,優(yōu)選0. 2MPa,過濾溫度選擇40-60°C，提高溫度有利于提高膜通量。通過無機(jī)陶瓷膜過濾后的透過液，繼續(xù)通過中空纖維超濾膜進(jìn)行過濾，本發(fā)明中 選擇截留分子量為1000D的超濾膜，由于超低分子量肝素的分子呈螺旋型，實(shí)際透過的分 子量要高于1000D，超濾操作壓力在0. 05 0. 07MPa，循環(huán)流速控制在2d/s左右，料液溫度 20-40°C，截留的溶液為濃縮的超低分子量肝素溶液。在濃縮液中加入3倍量的乙醇進(jìn)行沉 淀，過濾后濾餅用乙醇洗滌，沉淀中加入少量純化水冷凍干燥，得到白色粉末狀固體為超低 分子量肝素鈉(鈣)。本發(fā)明的效果是(1)通過控制肝素降解反應(yīng)的溫度和時(shí)間，控制降解產(chǎn)物達(dá)到較低的分子量和較 窄的分子量分布范圍，得到分子量分布范圍在2000D-2500D，平均分子量為2200D的超低分 子量肝素鈉，其抗)(a因子效價(jià)在100-125IU/mg，抗II a因子效價(jià)在10_25IU/mg，F(xiàn)Xa/FII a的比值范圍在5. 0-10.0之間，溶解度和澄明度達(dá)到國(guó)際優(yōu)級(jí)產(chǎn)品的要求，波長(zhǎng)^Onm處的 吸光度為0. 06-0. 10，波長(zhǎng)260nm處的吸光度為0. 4-0. 6。(2)通過在堿性條件下解聚時(shí)加入氯化鈉或氯化鈣，可相應(yīng)得到超低分子量肝素 鈉或超低分子量肝素鈣。(3)本發(fā)明將膜超濾技術(shù)巧妙的應(yīng)用于不同分子量段的分離中，有效的解決了超 低分子量肝素的分離問題，避免了在純化中應(yīng)用繁瑣昂貴的凝膠柱吸附分離法。超低分子 量肝素鈉的分離采用無機(jī)陶瓷膜與中空纖維超濾膜結(jié)合的方法實(shí)現(xiàn)，同時(shí)首先進(jìn)行無機(jī)陶 瓷膜過濾也有效減少了膜過濾過程中出現(xiàn)的膜污染問題，滿足了工業(yè)化連續(xù)生產(chǎn)的條件。 采用的兩步法超濾技術(shù)解決了產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性，生產(chǎn)連續(xù)性。生產(chǎn)過程不產(chǎn)生環(huán)境污染， 產(chǎn)品的生產(chǎn)成本較低，相應(yīng)收率高。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1取未分級(jí)肝素鈉(抗II a因子效價(jià)140IU/mg) IOOg,加水500ml溶解，攪拌下緩慢 加入25%的芐素氯銨溶液10000ml，溶液逐漸變渾濁，過濾后的濾餅用純化水洗滌，65°C烘 干乩，得肝素芐素氯銨鹽325g。
取肝素芐索氯銨鹽200g，加入二氯甲烷IOOOml攪拌溶解，緩慢滴加氯芐200ml， 40°C反應(yīng)20h，控制酯化率為14. 5%，反應(yīng)結(jié)束時(shí)加入溶有10%醋酸鈉的甲醇1800ml，待沉 淀析出后，過濾。濾餅用甲醇洗滌，干燥，得肝素芐基酯71. 50g。取肝素芐基酯50g，溶于1500ml水中，加熱至65°C，加入氫氧化鈉6. 4g，攪拌解聚 1.25h。反應(yīng)完畢，冷卻到室溫，用鹽酸調(diào)至pH值為6. 5，加入分析純氯化鈉150g攪拌溶 解。邊攪拌邊加入3倍體積甲醇，析出沉淀后過濾。濾餅用甲醇洗滌，減壓干燥，得降解粗 口口 31. 8g0取降解后的超低分子量肝素粗品20g，加400ml水溶解制成約5%的溶液，通過無 機(jī)陶瓷超濾膜進(jìn)行過濾，采用江蘇久吾高科技有限公司生產(chǎn)的二氧化鋯陶瓷超濾膜，膜孔 徑在lOnm，過濾的操作壓力為0. 2MPa,過濾溫度60°C，獲得過濾透過液。通過無機(jī)陶瓷膜過 濾后的透過液，繼續(xù)通過截留分子量為IOOOD的中空纖維超濾膜進(jìn)行過濾，超濾操作壓力 在0. 06MPa,循環(huán)流速控制在2d/s左右，料液溫度30°C，截留的溶液為濃縮的超低分子量肝 素溶液，體積為68ml。在濃縮液中加入200ml 95%的乙醇進(jìn)行沉淀，過濾后濾餅用無水乙醇洗滌。收集 的沉淀中加入約15ml純化水溶解，預(yù)冷后冷凍干燥，得到白色粉末狀固體13. 6g，純化收率 為 68%。經(jīng)檢驗(yàn)，制備的超低分子量肝素鈉分子量分布范圍在2000D-2500D的比例占 92%，平均分子量為2200D。其抗)(a因子效價(jià)為lMIU/mg，抗II a因子效價(jià)為16IU/mg， FXa/F II a的比值為7. 75，溶解度和澄明度按照法定方法檢測(cè)，波長(zhǎng)^Onm處的吸光度為 0. 08，波長(zhǎng)^Onm處的吸光度為0. 52。實(shí)施例2取未分級(jí)肝素鈉(抗II a因子效價(jià)140IU/mg) 150g,加水750ml溶解，攪拌下緩慢 加入25%的芐素氯銨溶液15000ml，溶液逐漸變渾濁，過濾后的濾餅用純化水洗滌，65°C烘 干乩，得肝素芐素氯銨鹽477g。取肝素芐索氯銨鹽400g，加入二氯甲烷2000ml攪拌溶解，緩慢滴加氯芐400ml， 35 °C反應(yīng)25h，控制酯化率為13.8%，反應(yīng)結(jié)束時(shí)加入溶有10 %醋酸鈉的甲醇3500ml，待沉 淀析出后，過濾。濾餅用甲醇洗滌，干燥，得肝素芐基酯142g。取肝素芐基酯100g，溶于3000ml水中，加熱至62°C，加入氫氧化鈉12g，攪拌解聚 lh。反應(yīng)完畢，冷卻到室溫，用鹽酸調(diào)至pH值為6. 0，加入分析純氯化鈣1800g，攪拌溶解。邊 攪拌邊加入3倍體積甲醇，析出沉淀后過濾。濾餅用甲醇洗滌，減壓干燥，得降解粗品75g。取降解后的超低分子量肝素鈣粗品60g，加1200ml水溶解制成約5%的溶液，通過 無機(jī)陶瓷超濾膜進(jìn)行過濾，采用江蘇久吾高科技有限公司生產(chǎn)的二氧化鋯陶瓷超濾膜，膜 孔徑在lOnm，過濾的操作壓力為0. 3MPa,過濾溫度60°C，獲得過濾透過液。通過無機(jī)陶瓷膜 過濾后的透過液，繼續(xù)通過截留分子量為1000D的中空纖維超濾膜進(jìn)行過濾，超濾操作壓 力在0. OSMPa,循環(huán)流速控制在2d/s左右，料液溫度30°C，截留的溶液為濃縮的超低分子量 肝素溶液，體積為145ml。在濃縮液中加入450ml 95%的乙醇進(jìn)行沉淀，過濾后濾餅用無水乙醇洗滌。收集 的沉淀中加入約IOOml純化水溶解，預(yù)冷后冷凍干燥，得到白色粉末狀固體39. 6g，純化收 率為66%。
經(jīng)檢驗(yàn)，制備的超低分子量肝素鈣分子量分布范圍在2000D-2500D的比例占 90%，平均分子量為2200D。其抗)(a因子效價(jià)為105IU/mg，抗II a因子效價(jià)為12. 8IU/mg， FXa/FII a的比值為8. 20，溶解度和澄明度按照法定方法檢測(cè)，波長(zhǎng)^Onm處的吸光度為 0.082，波長(zhǎng)洸Onm處的吸光度為0.55。鈣含量10.80%。實(shí)施例3取分級(jí)肝素鈉(抗II a因子效價(jià)150IU/mg，硫酸皮膚素含量低于2% ) 100g，加 水500ml溶解，攪拌下緩慢加入25%的芐素氯銨溶液10000ml，溶液逐漸變渾濁，過濾后的 濾餅用純化水洗滌，65 °C烘干他，得肝素芐素氯銨鹽332g。取肝素芐索氯銨鹽300g，加入二氯甲烷1500ml攪拌溶解，緩慢滴加氯芐300ml， 40 °C反應(yīng)20h，控制酯化率為14. 0-14. 5%,反應(yīng)結(jié)束時(shí)加入溶有10 %醋酸鈉的甲醇 2700ml，待沉淀析出后，過濾。濾餅用甲醇洗滌，干燥，得肝素芐基酯115g。取肝素芐基酯100g，溶于3000ml水中，加熱至65°C，加入氫氧化鈉9g，攪拌解聚 lh。反應(yīng)完畢，冷卻到室溫，用鹽酸調(diào)至pH值為6. 5，加入分析純氯化鈉300g攪拌溶解。邊攪 拌邊加入3倍體積甲醇，析出沉淀后過濾。濾餅用甲醇洗滌，減壓干燥，得降解粗品68. 60g。取降解后的超低分子量肝素粗品50g，加IOOOml水溶解制成約5%的溶液，通過無 機(jī)陶瓷超濾膜進(jìn)行過濾，采用江蘇久吾高科技有限公司生產(chǎn)的二氧化鋯陶瓷超濾膜，膜孔 徑在lOnm，過濾的操作壓力為0. 3MPa,過濾溫度60°C，獲得過濾透過液。通過無機(jī)陶瓷膜過 濾后的透過液，繼續(xù)通過截留分子量為1000D的中空纖維超濾膜進(jìn)行過濾，超濾操作壓力 在0. 06MPa,循環(huán)流速控制在2d/s左右，料液溫度30°C，截留的溶液為濃縮的超低分子量肝 素溶液，體積為158ml。在濃縮液中加入450ml 95%的乙醇進(jìn)行沉淀，過濾后濾餅用無水乙醇洗滌。收集 的沉淀中加入約15ml純化水溶解，預(yù)冷后冷凍干燥，得到白色粉末狀固體32. 8g，純化收率 為 65. 6%。經(jīng)檢驗(yàn)，制備的超低分子量肝素鈉分子量分布范圍在2000D-2500D的比例占 93%，平均分子量為2200D。其抗)(a因子效價(jià)為120IU/mg，抗II a因子效價(jià)為15IU/mg， FXa/F II a的比值為8，溶解度和澄明度按照法定方法檢測(cè)，波長(zhǎng)^Onm處的吸光度為 0. 068，波長(zhǎng)260nm處的吸光度為0. 50。權(quán)利要求
1.一種超低分子量肝素鈉(鈣)的制備及純化工藝，其特征在于，包括以下步驟(1)肝素季銨鹽的合成；(2)肝素芐基酯的合成；(3)肝素芐基酯堿性條件下降解；(4)超低分子量肝素粗品純化；(5)超低分子量肝素的真空冷凍干燥及成品。未分級(jí)或分級(jí)肝素原料在水溶液中與有機(jī)季銨鹽作用生成肝素季銨鹽，在二氯甲烷溶 液中肝素季銨鹽的羧基與芐氯發(fā)生親核取代反應(yīng)生成肝素芐基酯，在堿性條件下，酯水解 降解得到低分子量的肝素片段。通過無機(jī)陶瓷超濾與中空纖維超濾結(jié)合的方法進(jìn)行分離純 化，獲得合理分子量分布范圍的超低分子量肝素鈉(鈣)，真空干燥后制得成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法在肝素芐基酯的合成過程中的反應(yīng)條件控制，其特征在 于取肝素芐索氯銨鹽，加入5倍量的二氯甲烷攪拌溶解，緩慢滴加氯芐，酯化反應(yīng)的條件 為30-45°C反應(yīng)15-2證，控制酯化率為14-15%，優(yōu)選反應(yīng)溫度35°C反應(yīng)20h。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法在肝素芐基酯降解過程中堿性條件的控制，其特征在 于氫氧化鈉的加入濃度在0. 1-0. 15mol/L之間，加熱至55_65°C，攪拌解聚1_1. 25h。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法采用的超低分子量肝素粗品純化方法，其特征在于采 用無機(jī)陶瓷超濾膜結(jié)合中空纖維超濾膜的方法進(jìn)行純化，獲得分子量分布范圍合理的超低 分子量肝素。
5.權(quán)利要求4所述的純化方法中的無機(jī)陶瓷超濾膜，其特征在于所述的無機(jī)陶瓷膜 是二氧化鋯陶瓷超濾膜，以高純度的三氧化二鋁為支撐體，膜孔徑在lOnm，可以分離出分子 量大于3000D的肝素片段。
6.權(quán)利要求4所述的純化方法中的中空超濾膜，其特征在于所述的中空纖維超濾膜 的截留分子量為1000D。
7.權(quán)利要求4所述的無機(jī)陶瓷膜超濾的操作條件，其特征在于操作壓力選擇 0. 1-0. 4MPa，優(yōu)選0. 2Mpa ；過濾溫度選擇40-60°C，提高溫度有利于提高膜通量。
8.一種由上述權(quán)利要求制備和純化方法獲得的超低分子量肝素鈉(鈣)，其特征在 于分子量分布范圍在2000-2500D的超低分子量肝素占85%以上，平均分子量為2200D， 其抗)(a因子效價(jià)在100-125IU/mg，抗II a因子效價(jià)在10_25IU/mg，F(xiàn)Xa/F II a的比值范 圍在5. 0-10. O之間，溶解度和澄明度達(dá)到國(guó)際優(yōu)級(jí)產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)，280nm處波長(zhǎng)的吸光度為 0. 06-0. 10，波長(zhǎng)260nm處的吸光度為0. 4-0. 6。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種超低分子量肝素鈉(鈣)的制備及純化工藝肝素與有機(jī)季銨鹽作用生成的肝素季銨鹽親核取代后生成的肝素芐基酯，堿性條件下降解得到低分子量的肝素片段，通過無機(jī)陶瓷超濾與中空纖維超濾結(jié)合的方法進(jìn)行分離純化，獲得分子量分布范圍在2000-2500D、平均分子量為2200D的超低分子量肝素鈉(鈣)。本發(fā)明通過控制酯化過程中的反應(yīng)條件以及酯水解的降解時(shí)間，獲得較低分子量的肝素片段；采用陶瓷膜結(jié)合中空纖維超濾膜進(jìn)行分離純化，通過選擇陶瓷膜的孔徑、操作壓力和料液溫度，以及中空纖維膜的截留分子量，有效分離肝素片段的分子量分布范圍。
文檔編號(hào)C08B37/10GK102040671SQ20091018028
公開日2011年5月4日 申請(qǐng)日期2009年10月13日 優(yōu)先權(quán)日2009年10月13日
發(fā)明者姬勝利, 王秀云, 肖佳普 申請(qǐng)人:北京貫虹科技有限公司