專利名稱：從茶花中提取制備茶花多糖的方法及所得茶花多糖的用途的制作方法
從茶花中提取制備茶花多糖的方法及所得茶花多糖的用途技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于食品、保健食品或藥品制備技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及從茶花中提取制備茶 花多糖的方法，并涉及該茶花多糖的醫(yī)藥用途。
背景技術(shù)：
茶花是茶樹的生殖器官之一。茶樹于每年5月開始花芽分化，9 10月開花，花期 多100 110天。我國南部茶區(qū)茶樹花期較長，可延續(xù)至翌年2 3月，個別地區(qū)甚至全年 可見茶花開放。全國茶區(qū)每年可產(chǎn)茶花300多萬噸，資源相當(dāng)豐富。
研究表明，茶花中含有豐富的多糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素等多種有益成分和活 性物質(zhì)，對人體具有降糖、降脂、解毒、抗癌、滋補、養(yǎng)顏等功效。實踐驗證，茶花的抗氧化功 能可與國際公認的抗氧化植物迷迭香媲美。
然而目前人們對茶的利用研究，主要涉及的是茶葉在食品、醫(yī)學(xué)和人體保健等方 面的作用，而對茶樹花的開發(fā)利用研究尚未全面展開，大量的茶花只能自行脫落回歸自然 與泥土相拌。直到2002年，我國著名的茶學(xué)專家徐紀(jì)英才提出開發(fā)利用茶樹花資源，充分 利用現(xiàn)有茶花資源，進行深度加工，開發(fā)出對人類有益的產(chǎn)品。如果充分利用茶花資源，提 取其有效成分，不僅具有較大的社會效益，而且能極大地提高經(jīng)濟效益。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題之一在于提供一種以茶花為原料提取制備茶花粗多 糖的方法以及用該方法獲得茶花多糖。
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題之二在于提供一種茶花粗多糖的純化方法。
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題之三在于提供茶花多糖的用途。
作為本發(fā)明第一方面的以茶花為原料提取制備茶花粗多糖的方法，具體包括如下 步驟
a、將干茶花經(jīng)粉碎后，加入水提取30分鐘后，過濾或離心分離得固體沉淀和提取 液；
b、濃縮提取液至密度大于1. lKg/L后，加入2倍以上體積低級醇靜置沉淀12小時 以上，上清液回收低級純重復(fù)利用，沉淀物干燥后得茶花粗多糖。
在上述以茶花為原料提取制備茶花粗多糖的方法中，所述水中可以加入酶制劑， 其中酶與水的質(zhì)量比為0. 1 1. 2 100。所述酶包括果膠酶、纖維素酶等任何破壞茶花纖 維結(jié)構(gòu)，有利于多糖提取高效、提高得率的單一酶制劑或其兩種以上的酶制劑混合物。
在上述以茶花為原料提取制備茶花粗多糖的方法中，所述提取可以在常溫至 100°C下進行。
在上述以茶花為原料提取制備茶花粗多糖的方法中，所述提取包括但不限于浸 提、沸水提取、超聲提取、微波提取或以及任何以水為媒介的提取工藝。
在上述以茶花為原料提取制備茶花粗多糖的方法中，所述低級醇優(yōu)選為乙醇。
在上述以茶花為原料提取制備茶花粗多糖的方法中，所述濃縮為55°C 100°C下 減壓濃縮，優(yōu)選75 °C。
在上述以茶花為原料提取制備茶花粗多糖的方法中，所述干燥包括55°C 100°C 下減壓真空干燥、低溫冷凍干燥或噴霧干燥。
作為本發(fā)明第二方面的茶花粗多糖的純化方法，具體包括如下方法
a、使用大孔吸附樹脂或離子交換樹脂對茶花粗多糖進行脫色及除去部分蛋白質(zhì)； 或者使用化學(xué)脫蛋白及脫色處理；或者使用濾膜將分子量小于1萬的茶花粗多糖、單糖、無 機鹽及其他雜質(zhì)去除得到茶多糖；
b、步驟a所得到的茶多糖，使用不同分子量的濾膜獲得多糖分子量分布不同的茶 多糖；
C、使用凝膠純化步驟a所得到的茶多糖，純化后分離獲得不同分子量
分布范圍的茶花多糖及不同電荷、離子強度的茶花多糖。
作為本發(fā)明的第三方面是茶花多糖的用途，其所述的茶花多糖可以用來制備預(yù)防 和治療糖尿病。
本發(fā)明的茶花多糖經(jīng)四氧嘧啶SD大鼠造模，灌胃30天后，與模型組大鼠相比，血 糖濃度具有顯著性降低。動物實驗結(jié)果證明，所獲茶花多糖即有防治糖尿病的功效。
本發(fā)明的提取制備工藝簡單、無污染。適合規(guī)?；a(chǎn)。
具體實施方式
實施例1
干燥茶花IOKg投料，粉碎過16目篩，加入80L體積水，攪拌，常溫提取30分鐘， 4500轉(zhuǎn)/分鐘離心，使固液分離，收集提取液。固體沉淀茶花再加入60L水，攪拌常溫提取 30分鐘，4500轉(zhuǎn)/分鐘離心，使固液分離，提取液與第一次提取液合并，固體沉淀茶花棄去。
合并后的提取液在75攝氏度下減壓濃縮至密度大于1. Ig/L，冷卻后加入4倍體 積乙醇沉淀12小時。上清液乙醇回收，沉淀物在75攝氏度下減壓真空干燥。得茶花粗多 糖 1. 68Kg。
實施例2
干燥茶花IOKg投料，粉碎過16目篩，加入80L體積水，攪拌，微波600w提取10分 鐘，板框過濾，收集提取液。固體茶花再加入60L水，微波600w提取10分鐘，板框過濾，使 固液分離，提取液與第一次提取液合并，固體沉淀茶花棄去。
合并后提取液在75攝氏度下減壓濃縮至密度大于1. lKg/L，冷卻后加入4倍體積 乙醇沉淀12小時。上清乙醇回收，冷凍真空干燥。得茶花粗多糖211g。
實施例3
實施例1中所得茶花粗多糖，用水溶解后，每小時3倍柱體積流速上離子交換樹脂 RJA (購自上海摩速科學(xué)器材有限公司)柱，上樣后洗脫得茶多糖，得率82 %，脫色效果良 好。
實施例4
實施例3中所得茶花多糖經(jīng)過DEAE Sepharose Fast Flow凝膠純化，分離后得到 兩個單一峰，前者為中性糖峰，后者為酸性糖峰。經(jīng)HPGPC分析，分子量1. 8060萬，后者為4酸性糖峰，經(jīng)HPGPC分析，Mwl. 8687萬。
實施例5
取健康大鼠80只，適應(yīng)性飼養(yǎng)3d后，隨機留取10只作為正常對照組。其余70只 大鼠禁食不禁水12h，按180mg/ (Kg -bw)的劑量一次性腹腔注射2%四氧嘧啶溶液。7 后 禁食證尾靜脈取血測定空腹血糖，以血糖值11. 1 25mmol/L，并出現(xiàn)多飲、多食、多尿者確 定為糖尿病模型。選擇符合標(biāo)準(zhǔn)的模型動物50只，按空腹血糖和體重水平，隨機分為茶花 多糖(為實施例3所獲得茶多糖)高劑量組800mg/ (kg -bw)、中劑量組400mg/ (kg -bw)、低 劑量組200mg/ (kg -bw)、二甲雙胍組50mg/ (kg -bw)和模型對照組，每組10只。各劑量組和 二甲雙胍組分別給相應(yīng)藥品灌胃，正常組和模型對照組灌服生理鹽水。各組均以lml/100g 的容積灌胃。將每日藥量1次灌胃，連續(xù)15d。試驗結(jié)果顯示，藥物干預(yù)前，注射四氧嘧啶造 模各組與正常對照組相比均有高基線的空腹血糖水平(P < 0. 01)，且組間無顯著性差異(P >0.05)。實驗期間糖尿病模型組顯示持續(xù)的高血糖。茶花多糖各劑量組給藥后血糖緩慢 下降，實驗結(jié)束時與糖尿病模型組比較有顯著性差異，尤以中高劑量組降血糖作用明顯(P <0.05)。二甲雙胍組與糖尿病模型組相比則有極顯著性差異(P <0.01)，結(jié)果見表1。
表1茶花多糖對糖尿病大鼠第1天及第15天體重和血糖的影響(X士S)
權(quán)利要求
1.以茶花為原料提取制備茶花粗多糖的方法以及按照該方法獲得的茶花多糖，其特征 在于，具體包括如下步驟a、將干茶花經(jīng)粉碎后，加入水或酶溶液5 20倍質(zhì)量比提取30分鐘后，過濾或離心分離得固體沉淀和提取液；b、濃縮提取液至密度大于1.2Kg/L后，加入2倍以上體積低級醇靜置沉淀12小時以 上，上清液回收低級純重復(fù)利用，沉淀物干燥后得茶花粗多糖。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述水中加入酶制劑，其中酶與水的質(zhì)量比 為 0. 1 1. 2 100。
3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述酶包括果膠酶、纖維素酶中的一種或兩 種酶制劑混合物。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述提取在常溫至10(TC下進行。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述提取為任何以水為媒介的提取工藝。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述提取為浸提、沸水提取、超聲提取或微 波提取的一種或幾種的合用。
7.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述提取為一次或一次以上的提取。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述低級醇是乙醇。
9.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述濃縮為55°C 100°C下減壓濃縮。
10.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述干燥為55°C 100°C下減壓真空干燥、 低溫冷凍干燥或噴霧干燥。
11.一種由權(quán)利要求1提取制備的茶花粗多糖的純化方法，其特征在于，具體包括如下 方法a、使用大孔吸附樹脂或離子交換樹脂對茶花粗多糖進行脫色及除去部分蛋白質(zhì)，或者 使用化學(xué)脫蛋白及脫色處理；或者使用濾膜將分子量小于1萬的茶花粗多糖、單糖、無機鹽 及其他雜質(zhì)去除得到茶多糖；b、步驟a所得到的茶多糖，使用不同分子量的濾膜獲得多糖分子量分布不同的茶多糖；C、使用凝膠純化步驟a所得到的茶多糖，純化后分離獲得不同分子量分布范圍的茶花 多糖及不同電荷、離子強度的茶花多糖。
12.權(quán)利要求11制備的茶花多糖具有防治糖尿病的功效。
全文摘要
本發(fā)明涉及從茶花中提取、制備茶花多糖的方法及所得制備物的用途，其方法是首選水或加酶的水進行提取，提取液醇沉后分離，分離的沉淀物干燥得到茶花粗多糖，茶花粗多糖經(jīng)過樹脂或化學(xué)方法脫色脫蛋白后，經(jīng)過凝膠純化或超濾膜純化得到茶花多糖。同時本發(fā)明通過動物實驗證明，茶花多糖具有防治療糖尿病的功效。
文檔編號C08B37/00GK102030834SQ20091019629
公開日2011年4月27日 申請日期2009年9月24日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月24日
發(fā)明者張華 , 王元鳳, 茅仁剛, 袁萍, 魏新林 申請人:上海師范大學(xué), 上海新康制藥廠