專(zhuān)利名稱(chēng)：制備幾丁質(zhì)和殼聚糖的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及幾丁質(zhì)領(lǐng)域，特別是涉及一種制備幾丁質(zhì)和殼聚糖的方法。
背景技術(shù)：
幾丁質(zhì)又名甲殼素，是目前發(fā)現(xiàn)的自然界中唯一帶正電荷的可食性動(dòng)物纖維素， 大量存在于海洋節(jié)肢動(dòng)物(如蝦、蟹)的甲殼中，昆蟲(chóng)、藻類(lèi)細(xì)胞膜及真菌的細(xì)胞壁中，每年 的生物合成量近100億噸，是地球上僅次于纖維素的第二大可再生資源。由于幾丁質(zhì)不溶 于稀酸、稀堿和普通的有機(jī)溶劑中，限制了它的廣泛應(yīng)用。而幾丁質(zhì)的脫乙酰基產(chǎn)物殼聚 糖，它可溶于稀酸溶液中，并具有良好的成膜、保濕、吸附和對(duì)細(xì)胞的親和性等獨(dú)特功能，目 前已在食品、環(huán)保、醫(yī)藥、農(nóng)林業(yè)、輕工業(yè)和生物工程等許多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。
目前工業(yè)化生產(chǎn)的幾丁質(zhì)和殼聚糖主要來(lái)自于蝦、蟹的外殼，其制備方法是在天 然甲殼中加入4_6%鹽酸溶液，浸泡1-3天，有的加溫到80-90°C ，有的在室溫下進(jìn)行，以除 去碳酸鈣和無(wú)機(jī)鹽；然后在濃度為5-12% NaOH溶液中脫除蛋白質(zhì)等有機(jī)物，得到幾丁質(zhì)， 再以KMn04法對(duì)所得幾丁質(zhì)進(jìn)行脫色，脫色后再加入45-60%的堿液，溫度為70-160°C，時(shí) 間6小時(shí)-7天，從而脫去乙酰基，制得殼聚糖。 該生產(chǎn)方式存在不少缺陷，例如，在制備過(guò)程中大量用具有腐蝕性的酸、堿，大量 強(qiáng)酸性、強(qiáng)堿性廢液的排放給環(huán)境造成嚴(yán)重的污染；酸液中含有大量的CaC^，會(huì)造成水質(zhì) 的硬化；堿液中還含有大量的蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)的腐臭會(huì)造成生態(tài)的惡化；此外，使用KMn04 法對(duì)產(chǎn)品脫色也會(huì)產(chǎn)生含有Mn"和S02+的廢液。近年來(lái)，蝦殼、蟹殼被用作飼料生產(chǎn)原料， 已造成幾丁質(zhì)/殼聚糖生產(chǎn)原料短缺，隨著對(duì)幾丁質(zhì)、殼聚糖及其衍生物應(yīng)用研究的逐漸 深入，對(duì)幾丁質(zhì)和殼聚糖及其制品的需求大幅度增長(zhǎng)，因而急需尋找新的幾丁質(zhì)和殼聚糖 資源及其生產(chǎn)方法，以解決原料短缺問(wèn)題，并減輕現(xiàn)有生產(chǎn)方法對(duì)環(huán)境造成的污染。
近年來(lái)，大型真菌產(chǎn)品市場(chǎng)持續(xù)成長(zhǎng)，利用大量大型真菌子實(shí)體提取多糖或其他 活性物質(zhì)后的菌體殘?jiān)?，如非褶菌目多孔菌科的靈芝、樹(shù)舌、云芝等真菌子實(shí)體提取后殘?jiān)?中含有豐富的幾丁質(zhì)，且其細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)較蝦殼松軟，蛋白質(zhì)含量低，與傳統(tǒng)的從蝦、蟹外殼 中提取幾丁質(zhì)相比，不需要鹽酸脫鈣，減少了酸液的排放，并在較溫和的條件下制備幾丁 質(zhì)，有利于環(huán)保。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種制備幾丁質(zhì)和殼聚糖的方法。
本發(fā)明提供的制備幾丁質(zhì)的方法，包括如下步驟 1)將非褶菌目的真菌子實(shí)體粉碎后，加水，將在60-10(TC下提取l-4次后的殘?jiān)?烘干，破碎后過(guò)篩，得到用于提取幾丁質(zhì)的原料；
2)脫除蛋白質(zhì)，得到幾丁質(zhì)粗品； 3)在pH值為6-11的條件下，將所述幾丁質(zhì)粗品分散于水中，加入氧化劑進(jìn)行氧化 脫色，得到所述幾丁質(zhì)。
該方法的步驟l)中，所述非褶菌目的真菌子實(shí)體選自靈芝、云芝、桑黃和樹(shù)舌中 的至少一種；水的加入量為用于提取幾丁質(zhì)的原料干重的10-20倍；所述過(guò)篩步驟是將所 述殘?jiān)^(guò)篩至40-300目，具體可為40-60目、40-80目、60-80目、80-100目或60-100目，優(yōu) 選60目； 所述步驟2)中，脫除蛋白質(zhì)步驟所用的脫除劑選自NaOH水溶液和KOH水溶液 中的至少 一 種；所述Na 0H水溶液和K 0H水溶液的質(zhì)量百分濃度均為5 -12 % ，具體可為 5-8%、8-12%、9-12%、9-11%或7-9%，優(yōu)選8% ;所述脫除劑與所述步驟1)處理完畢的 原料干重的比例為5-20ml : lg，具體可為5-15ml : lg、15-20ml : lg、10-20ml : lg或 12-18ml : lg，優(yōu)選10ml : lg ;用NaOH水溶液和KOH水溶液中的至少一種脫除蛋白質(zhì)時(shí)， 脫除的溫度為70-100°C ，優(yōu)選80°C ，脫除的時(shí)間為1-8小時(shí)，具體可為1-2小時(shí)、1_4小時(shí)或 2-4小時(shí)，優(yōu)選2小時(shí)； 所述步驟3)中，所述氧化劑為質(zhì)量百分濃度為30%的過(guò)氧化氫水溶液；水的用量 為所述幾丁質(zhì)粗品干重的5-20倍，優(yōu)選10倍；所述加入過(guò)氧化氫水溶液后，所述過(guò)氧化氫 占所述過(guò)氧化氫、水和所述幾丁質(zhì)粗品總重的質(zhì)量百分濃度為3-10%，優(yōu)選6% ;氧化脫色 的次數(shù)為1-3次，優(yōu)選2次；氧化脫色的時(shí)間為20分鐘-2小時(shí)，優(yōu)選1小時(shí)。
本發(fā)明提供的制備殼聚糖的方法，包括如下步驟
1)將前述幾丁質(zhì)進(jìn)行脫乙酰化反應(yīng)，得到殼聚糖粗品；
2)純化所述殼聚糖粗品，得到所述殼聚糖。 該方法的步驟l)中，所述脫乙?；磻?yīng)是將所述幾丁質(zhì)與NaOH的水溶液或KOH 的水溶液進(jìn)行反應(yīng)；所述NaOH的水溶液和KOH的水溶液的質(zhì)量百分濃度均為40_60%，優(yōu) 選45%。脫乙?；磻?yīng)的溫度為70-12(TC，優(yōu)選IO(TC，反應(yīng)時(shí)間為2-10小時(shí)，優(yōu)選3小 時(shí)；所述NaOH的水溶液或KOH的水溶液與所述幾丁質(zhì)干重的重量比為100-300 : 1，優(yōu)選 150 : 1 ; 所述步驟2)中，純化的方法為將所述殼聚糖粗品用酸進(jìn)行萃取，收集上清液，調(diào) 節(jié)所述上清液的pH值為6-ll，收集析出的沉淀，得到所述殼聚糖；所述酸選自乙酸、乳酸和 檸檬酸中的至少一種；所述酸的質(zhì)量百分濃度為1-30%，優(yōu)選10% ;所述酸的體積與所述 殼聚糖粗品干重的比例為100-300mL : lkg，優(yōu)選100mL : lkg ;萃取的溫度為20-100°C， 優(yōu)選70°C ;萃取的時(shí)間為1-10小時(shí)，優(yōu)選3小時(shí)。 上述制備幾丁質(zhì)和殼聚糖的方法中，所用的干燥方式為烘干、真空干燥、噴霧干 燥、氣流干燥或冷凍干燥等干燥方法，優(yōu)選為冷凍干燥。 按照上述方法制備所得幾丁質(zhì)和殼聚糖，也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。 本發(fā)明以靈芝提取多糖和其他化合物后的殘?jiān)鼮樵仙a(chǎn)幾丁質(zhì)及殼聚糖的工
藝，所得產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，而且使靈芝提取多糖和其他化合物后的廢棄殘?jiān)靡杂行Ю?，?br> 高了資源綜合利用價(jià)值，降低了幾丁質(zhì)及殼聚糖的生產(chǎn)成本，減少了環(huán)境污染，有利于環(huán)境保護(hù)。


圖1為市售幾丁質(zhì)紅外圖譜。
圖2為本發(fā)明實(shí)施例1制備的精制幾丁質(zhì)紅外圖譜。
圖3為本發(fā)明實(shí)施例1制備的精制殼聚糖紅外圖譜。 圖4為本發(fā)明測(cè)定脫乙酰度方法中，不同濃度的N-乙酰基-D-葡萄糖胺溶液在波
長(zhǎng)200、201 、202和203nm處的吸光度曲線(xiàn)。 圖5為本發(fā)明測(cè)定脫乙酰度方法中的工作曲線(xiàn)。 圖6為本發(fā)明測(cè)定脫乙酰度方法中，各實(shí)施例所得殼聚糖產(chǎn)物在波長(zhǎng)200、201、 202和203nm處的吸光度曲線(xiàn)。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，但本發(fā)明并不限于以下實(shí)施例。下 述實(shí)施例中，如無(wú)特別說(shuō)明，所述濃度均為質(zhì)量百分濃度。
脫乙酰度測(cè)定方法 以O(shè). 85%磷酸為溶劑，配制濃度為100ug的N-乙?；?D-葡萄糖胺(Alfa Aesar) 標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別吸取0. 5， 1. 0，3. 0，4. 0和5. 0標(biāo)準(zhǔn)溶液置10ml容量瓶中，用0. 85%磷酸 溶液稀釋至刻度。配制成5ug/ml、10ug/ml、20ug/ml、30ug/ml、40ug/ml和50ug/ml的梯度 溶液。0. 85%磷酸溶液為參比，在紫外分光光度計(jì)上測(cè)定不同濃度的N-乙?；?D-葡萄 糖胺溶液在波長(zhǎng)200、201、202和203nm處的吸光度，所得曲線(xiàn)如圖4所示，并對(duì)波長(zhǎng)作圖 得到線(xiàn)性關(guān)系良好的一組直線(xiàn)，其斜率與對(duì)應(yīng)溶液濃度呈正比。因此利用斜率與對(duì)應(yīng)溶液 濃度繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，作為工作曲線(xiàn)，所得曲線(xiàn)如圖5所示，該曲線(xiàn)所對(duì)應(yīng)的線(xiàn)性方程為<formula>formula see original document page 6</formula>在同樣波長(zhǎng)下，測(cè)定待測(cè)樣品吸光度值并對(duì)波長(zhǎng)作圖求 出斜率，由工作曲線(xiàn)得到待測(cè)物濃度。 稱(chēng)取一定量殼聚糖樣品加入20ml85^磷酸溶液，6(TC下加熱40min使之溶解。從 中取出lml溶液于50ml容量瓶中，以蒸餾水定容，配成與工作曲線(xiàn)相同的O. 85%磷酸溶液。
以0. 85 %磷酸溶液為參比，分別測(cè)定樣品在200， 201 ， 202， 204nm下的吸光值，并 對(duì)波長(zhǎng)作圖求得斜率，通過(guò)工作曲線(xiàn)得到N-乙?；?D-葡萄糖胺濃度。按下式求得樣品的 脫乙酰度(％ DD):<formula>formula see original document page 6</formula>
C。殼聚糖樣品濃度； C :樣品中N-乙?；?D-葡萄糖胺測(cè)定濃度。
實(shí)施例1、制備幾丁質(zhì)和殼聚糖
—、制備幾丁質(zhì) 1.取50g靈芝粉碎后，加水，在9(TC下提取3次后的殘?jiān)?，干燥，高速粉碎機(jī)粉碎 至粉末狀，60目過(guò)篩。
2.脫除蛋白質(zhì) 取上述粉碎過(guò)篩后的原料50. Og (干重)，加入濃度為8. 0 %的NaOH溶液500ml ，加 熱攪拌使其混合均勻，加熱至80°C ，反應(yīng)2小時(shí)后，過(guò)濾除去堿液，并將所得過(guò)濾物用適量 蒸餾水沖洗，直至沖洗后的蒸餾水為中性，獲得的過(guò)濾物為幾丁質(zhì)粗品。
3.氧化脫色 將幾丁質(zhì)粗品分散在IO倍水中，用NaOH調(diào)節(jié)pH值至IO，加入一定量的30%過(guò)氧 化氫水溶液使反應(yīng)體系中過(guò)氧化氫濃度為6%，緩慢攪拌，脫色1小時(shí)后，過(guò)濾，將過(guò)濾物洗凈后，同上方法，再進(jìn)行一次脫色，過(guò)濾，將過(guò)濾物水洗至中性，冷凍干燥得本發(fā)明提供的幾丁質(zhì)9.0g。該幾丁質(zhì)的紅外圖譜如圖l所示，可知，其結(jié)構(gòu)正確。
二、制備殼聚糖
1.脫乙酰反應(yīng) 取上述幾丁質(zhì)9. Og，加入180ml 45%的NaOH溶液，100。C下回流反應(yīng)3小時(shí)，過(guò)濾除去堿液。將過(guò)濾物用適量蒸餾水沖洗至沖洗液呈中性，再次加入180ml 45%的NaOH溶液進(jìn)行反應(yīng)，最后將濾出物用蒸餾水充分清洗至中性，冷凍干燥得殼聚糖粗品1. 5g。
2.純化殼聚糖粗品 將步驟1所得殼聚糖粗品1. 5g中加入150ml 10 %的乙酸，室溫下攪拌萃取1小時(shí)，過(guò)濾，濾液用NaOH調(diào)節(jié)pH值至10，沉淀析出，收集沉淀，蒸餾水洗至中性，冷凍干燥后得白色片絮狀殼聚糖0. 96g，得率為0. 96g/50g殘?jiān)?。該殼聚糖的紅外譜圖如圖2所示，由圖可知，該化合物結(jié)構(gòu)正確。 將該殼聚糖產(chǎn)物按照前述方法測(cè)定脫乙酰度，其中，所得該殼聚糖產(chǎn)物的吸光度值與波長(zhǎng)關(guān)系曲線(xiàn)，如圖6中曲線(xiàn)a所示，該曲線(xiàn)a相關(guān)數(shù)據(jù)如表1所示；經(jīng)測(cè)定及計(jì)算，該殼聚糖產(chǎn)物的脫乙酰度為98. 82%。
實(shí)施例2、制備幾丁質(zhì)和殼聚糖
—、制備幾丁質(zhì) 1.取50g靈芝粉碎后，加水，在6(TC下提取4次后的殘?jiān)稍?，高速粉碎機(jī)粉碎至粉末狀，IOO目過(guò)篩。
2.脫除蛋白質(zhì) 取上述粉碎過(guò)篩后的原料50. 0g(干重)，加入濃度為5%的NaOH溶液1000ml，加熱攪拌使其混合均勻，加熱至10(TC，反應(yīng)4小時(shí)后，過(guò)濾除去堿液，并將所得過(guò)濾物用適量蒸餾水沖洗，直至沖洗后的蒸餾水為中性，獲得的過(guò)濾物為幾丁質(zhì)粗品。
3.氧化脫色 將幾丁質(zhì)粗品分散在10倍水中后用NaOH調(diào)pH至10，加入一定量30%過(guò)氧化氫水溶液使反應(yīng)體系中過(guò)氧化氫濃度為6X，緩慢攪拌，4(TC脫色1小時(shí)，過(guò)濾，將過(guò)濾物洗凈后，同上方法，再進(jìn)行一次脫色，過(guò)濾，將過(guò)濾物水洗至中性，冷凍干燥得本發(fā)明提供的幾丁質(zhì)15. 2g，其紅外圖譜與圖1無(wú)實(shí)質(zhì)性差別，表明結(jié)構(gòu)正確，不在熬述。
二、制備殼聚糖
1.脫乙酰反應(yīng) 將前述所得幾丁質(zhì)15. 0g，加入150ml 60%的NaOH溶液，90。C下回流反應(yīng)5小時(shí)，過(guò)濾除去堿液。將過(guò)濾物用適量蒸餾水沖洗至沖洗液呈中性，再次加入150ml 60X的NaOH溶液進(jìn)行反應(yīng)，將濾出物用蒸餾水充分清洗至中性，冷凍干燥得殼聚糖粗品3. 7g。
2.純化殼聚糖粗品 將步驟l所得殼聚糖粗品3.7g加入740ml 5%的乙酸，6(TC下回流萃取3小時(shí)，過(guò)濾，濾液用NaOH調(diào)節(jié)pH值至10，沉淀析出，收集沉淀物，蒸餾水洗至中性，冷凍干燥后得殼聚糖0. 3g，得率為0. 3g/50g殘?jiān)?，其紅外圖譜與圖2無(wú)實(shí)質(zhì)性差別，表明結(jié)構(gòu)正確，不在熬述。 將該殼聚糖產(chǎn)物按照前述方法測(cè)定脫乙酰度，其中，所得該殼聚糖產(chǎn)物的吸光度
7值與波長(zhǎng)關(guān)系曲線(xiàn)，如圖6中曲線(xiàn)b所示，該曲線(xiàn)b相關(guān)數(shù)據(jù)如表1所示；經(jīng)測(cè)定及計(jì)算，該
殼聚糖產(chǎn)物的脫乙酰度為97. 67%。
實(shí)施例3、制備幾丁質(zhì)和殼聚糖
—、制備幾丁質(zhì) 1.取50g靈芝粉碎后，加水，在10(TC下提取2次后的殘?jiān)?，干燥，高速粉碎機(jī)粉碎至粉末狀，100目過(guò)篩。
2.脫除蛋白質(zhì) 取上述粉碎過(guò)篩的原料50.0g(干重)，加入濃度為12X的NaOH溶液750ml，加熱攪拌使其混合均勻，加熱至70°C ，反應(yīng)2小時(shí)后，過(guò)濾除去堿液，并將所得過(guò)濾物用適量蒸
餾水沖洗，直至沖洗后的蒸餾水為中性，獲得的過(guò)濾物為幾丁質(zhì)粗品。
3.氧化脫色 將幾丁質(zhì)粗品分散在10倍水中后用NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值至IO，加入一定量30%過(guò)氧化氫水溶液使反應(yīng)體系中過(guò)氧化氫濃度為3%，緩慢攪拌，脫色1小時(shí)，過(guò)濾，將過(guò)濾物洗凈，同上方法，再進(jìn)行一次脫色，過(guò)濾，將過(guò)濾物水洗至中性，冷凍干燥得本發(fā)明提供的幾丁質(zhì)8. 0g，紅外圖譜與圖1無(wú)實(shí)質(zhì)性差別，表明結(jié)構(gòu)正確，不在熬述。
二、制備殼聚糖
1.脫乙酰反應(yīng)將前述所得幾丁質(zhì)8. Og，加入160ml 55%的NaOH溶液，70°C回流反應(yīng)6小時(shí)，過(guò)濾除去堿液。將過(guò)濾物用適量蒸餾水沖洗至沖洗液呈中性，再次加入160ml 55%的NaOH溶液進(jìn)行反應(yīng)，將濾出物用蒸餾水充分清洗至中性，冷凍干燥得殼聚糖粗品1. 2g。
2.純化殼聚糖粗品 將步驟l所得殼聚糖粗品1.2g中加入150ml 10%的乙酸，室溫下下攪拌萃取1小時(shí)，過(guò)濾，濾液用NaOH調(diào)節(jié)pH值至10，沉淀析出，收集沉淀物，蒸餾水洗至中性，冷凍干燥后得殼聚糖0. 8g，得率為0. 8g/50g殘?jiān)?，其紅外圖譜與圖1無(wú)實(shí)質(zhì)性差別，表明結(jié)構(gòu)正確，不在熬述。 將該殼聚糖產(chǎn)物按照前述方法測(cè)定脫乙酰度，其中，所得該殼聚糖產(chǎn)物的吸光度值與波長(zhǎng)關(guān)系曲線(xiàn)，如圖6中曲線(xiàn)c所示，該曲線(xiàn)c相關(guān)數(shù)據(jù)如表1所示；經(jīng)測(cè)定及計(jì)算，該殼聚糖產(chǎn)物的脫乙酰度為98. 68%。
實(shí)施例4制備幾丁質(zhì)和殼聚糖
—、制備幾丁質(zhì) 1.取50g靈芝粉碎后，加水，在9(TC下提取3次后的殘?jiān)稍?，高速粉碎機(jī)粉碎至粉末狀，80目過(guò)篩。
2.脫除蛋白質(zhì) 取上述粉碎過(guò)篩后的原料50. 0g(干重)，加入濃度為8%的NaOH溶液1000ml，加熱攪拌使其混合均勻，加熱至IO(TC，反應(yīng)2小時(shí)，過(guò)濾除去堿液，并將所得過(guò)濾物用適量蒸餾水沖洗，直至沖洗后的蒸餾水為中性，獲得的過(guò)濾物為幾丁質(zhì)粗品。
3.氧化脫色 將幾丁質(zhì)粗品分散在10倍水中用NaOH調(diào)pH至IO，加入一定量30%過(guò)氧化氫水溶液使反應(yīng)體系中過(guò)氧化氫濃度為6X，緩慢攪拌，4(TC脫色2小時(shí)，過(guò)濾，將過(guò)濾物水洗至中性，冷凍干燥得本發(fā)明提供的幾丁質(zhì)13. 5g，紅外圖譜與圖1無(wú)實(shí)質(zhì)性差別，表明結(jié)構(gòu)正
確，不在熬述。 二、制備殼聚糖 1.脫乙酰反應(yīng) 將前述所得幾丁質(zhì)10. 0g，加入300ml 40%的K0H溶液，ll(TC回流反應(yīng)2小時(shí)，過(guò)濾除去堿液。將濾出物用蒸餾水充分清洗至中性，冷凍干燥得殼聚糖粗品1. lg。
2.純化殼聚糖粗品 將步驟l所得殼聚糖粗品l. lg加入330ml 20%的乙酸，IO(TC回流萃取1小時(shí)，過(guò)濾，濾液用NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值至10，沉淀析出，收集沉淀物，蒸餾水洗至中性，冷凍干燥后得殼聚糖0. 3g，得率為0. 3g/50g殘?jiān)?，其紅外圖譜與圖2無(wú)實(shí)質(zhì)性差別，表明結(jié)構(gòu)正確，不在熬述。 將該殼聚糖產(chǎn)物按照前述方法測(cè)定脫乙酰度，其中，所得該殼聚糖產(chǎn)物的吸光度值與波長(zhǎng)關(guān)系曲線(xiàn)，如圖6中曲線(xiàn)d所示，該曲線(xiàn)d相關(guān)數(shù)據(jù)如表1所示；經(jīng)測(cè)定及計(jì)算，該殼聚糖產(chǎn)物的脫乙酰度為97. 71%。表1圖6中曲線(xiàn)a-d相關(guān)數(shù)據(jù)列表實(shí)施例1實(shí)施例2實(shí)施例3實(shí)施例」A2000. 010. 2390. 0320. 212A2010. 0090. 230. 0290. 202A2020. 0070. 2210. 0270. 194A2030. 0060. 2120. 0250. 185K-0.0014-0.009-0.0023-0.0089C(ug/ml)0. 370. 730. 4140. 72CO(ug/ml25252525DD%98. 8297. 6798. 6897. 71
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權(quán)利要求
一種制備幾丁質(zhì)的方法，包括如下步驟1)將非褶菌目的真菌子實(shí)體粉碎后，加水，將在60-100℃下提取1-4次后的殘?jiān)娓?，破碎后過(guò)篩，得到用于提取幾丁質(zhì)的原料；2)脫除蛋白質(zhì)，得到幾丁質(zhì)粗品；3)在pH值為6-11的條件下，將所述幾丁質(zhì)粗品分散于水中，加入氧化劑進(jìn)行氧化脫色，得到所述幾丁質(zhì)。
2. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于所述步驟l)中，所述非褶菌目的真菌 子實(shí)體選自靈芝、云芝、桑黃和樹(shù)舌中的至少一種；所述過(guò)篩步驟是將所述殘?jiān)^(guò)篩至 40-300目，優(yōu)選40-100目，更優(yōu)選60目；所述步驟2)中，脫除蛋白質(zhì)步驟所用的脫除劑選自NaOH水溶液和KOH水溶液中的至 少一種；所述NaOH水溶液和KOH水溶液的質(zhì)量百分濃度均為5_12% ，優(yōu)選8% ; 所述步驟3)中，所述氧化劑為質(zhì)量百分濃度為30%的過(guò)氧化氫水溶液。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述步驟1)中，水的加入量為粉碎后非 褶菌目的真菌子實(shí)體干重的10-20倍；所述步驟2)中，所述脫除劑與所述用于提取幾丁質(zhì)的原料干重的比例為5-20ml : lg， 優(yōu)選10ml : lg;所述步驟3)中，水的用量為所述幾丁質(zhì)粗品干重的5-20倍，優(yōu)選10倍；所述加入過(guò)氧 化氫水溶液后，所述過(guò)氧化氫占所述過(guò)氧化氫、水和所述幾丁質(zhì)粗品總重的質(zhì)量百分濃度 為3-10%，優(yōu)選6%。
4. 根據(jù)權(quán)利要求l-3任一所述的方法，其特征在于所述步驟2)中，用NaOH水溶液和 KOH水溶液中的至少一種脫除蛋白質(zhì)時(shí)，脫除的溫度為70-100°C ，優(yōu)選80°C ，脫除的時(shí)間為 l-8小時(shí)，優(yōu)選2小時(shí)；所述步驟3)中，氧化脫色的次數(shù)為1-3次；氧化脫色的時(shí)間為20分鐘-2小時(shí)，優(yōu)選1 小時(shí)。
5. 權(quán)利要求l-4任一所述方法制備得到的幾丁質(zhì)。
6. —種制備殼聚糖的方法，包括如下步驟1) 將權(quán)利要求5所述幾丁質(zhì)進(jìn)行脫乙?；磻?yīng)，得到殼聚糖粗品；2) 純化所述殼聚糖粗品，得到所述殼聚糖。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于所述步驟1)中，所述脫乙酰化反應(yīng)是將所述幾丁質(zhì)與NaOH的水溶液或KOH的水溶液進(jìn)行反應(yīng)；所述NaOH的水溶液和KOH的水溶 液的質(zhì)量百分濃度均為40-60%，優(yōu)選45%。
8. 根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的方法，其特征在于所述步驟1)中，所述NaOH的水 溶液或KOH的水溶液與權(quán)利要求5所述幾丁質(zhì)干重的重量比為100-300mL : lkg，優(yōu)選 150mL : lkg ;所述步驟2)中，純化的方法為將所述殼聚糖粗品用酸進(jìn)行萃取，收集上清液，調(diào)節(jié)所 述上清液的pH值為6-ll，收集析出的沉淀，得到所述殼聚糖；所述酸選自乙酸、乳酸和檸檬 酸中的至少一種；所述酸的質(zhì)量百分濃度為1-30%，優(yōu)選10% ;所述酸的體積與所述殼聚 糖粗品干重的比例為100-300mL : lg，優(yōu)選100mL : lg。
9. 根據(jù)權(quán)利要求6-8任一所述的方法，其特征在于所述步驟l)中，脫乙酰化反應(yīng)的溫度為70-12(TC，優(yōu)選IO(TC，反應(yīng)時(shí)間為2-10小時(shí)，優(yōu)選3小時(shí)；所述步驟2)中，萃取的溫度為20-10(TC，優(yōu)選7(TC ;萃取的時(shí)間為1_10小時(shí)，優(yōu)選3 小時(shí)。
10.權(quán)利要求6-9任一所述方法制備得到的殼聚糖。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種制備幾丁質(zhì)和殼聚糖的方法。該方法采用靈芝子實(shí)體提取多糖和其他化合物后的殘?jiān)鼮樵?，?jīng)烘干粉碎，脫蛋白和脫色獲得精制幾丁質(zhì)，再經(jīng)脫乙?；磻?yīng)獲得精制殼聚糖。該方法所得產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，而且使靈芝提取多糖和其他化合物后的廢棄殘?jiān)靡杂行Ю?，提高了資源綜合利用價(jià)值，降低了幾丁質(zhì)及殼聚糖的生產(chǎn)成本，減少了環(huán)境污染，有利于環(huán)境保護(hù)。
文檔編號(hào)C08B37/08GK101735337SQ20091024463
公開(kāi)日2010年6月16日 申請(qǐng)日期2009年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月31日
發(fā)明者文華安, 李賽飛 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院微生物研究所