專利名稱：由知母飲片提取知母多糖的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種由知母飲片提取知母多糖的方法，屬于知母多糖制備技術(shù)。
背景技術(shù)：
多糖為一類生物大分子物質(zhì)，自20世紀(jì)起開始了廣泛的研究，研究證明多糖具有 一系列的藥理活性，如提高機(jī)體免疫力，降血糖，抗炎，抗腫瘤等。與目前市場應(yīng)用的藥物 相比，具有效果好，無毒的優(yōu)點(diǎn)。文獻(xiàn)報(bào)道證明了知母多糖是一類具有較高藥理價(jià)值的多 糖，尤其在降血糖方面的作用比較突出。因此較好的提取知母多糖成為了知母多糖研究的 一個(gè)執(zhí)占。
I y 、W “、0知母(Rhizome Anemarrnema)為百合禾斗植物知母(AnemarrhenaashphodeIoides Bge)的干燥根莖，性苦味寒，具有清熱瀉火，生津潤燥的功效，是一類常用的清熱瀉火藥。目前對(duì)于知母的研究應(yīng)用，主要集中于醇提取得到的各種小分子成分，其中主要 成分含有留體皂苷類、黃酮類、木質(zhì)素類和留醇類，這些成分具有抗腫瘤、降血脂、抗老年癡 呆和抗炎等藥理作用，在現(xiàn)代的應(yīng)用也比較廣泛?，F(xiàn)有的由知母提取知母多糖的方法僅限于知母的水提法，如周永剛等用蒸餾水回 流提取知母粉末lh，提取液合并濃縮即得到知母多糖的提取液，并對(duì)提取液中知母多糖的 含量進(jìn)行了測定(周永剛，卞艷芳，陳萬生.知母總多糖的含量測定[J].藥學(xué)實(shí)踐雜志， 1999，17(5) :306-307.)；關(guān)紅暉等將知母粉末在90°C水浴回流3次，每次40min，合并濾 液，濃縮，四倍乙醇沉淀得到了知母多糖的總提取物(關(guān)紅暉，郭秋平，高英，等.不同產(chǎn)地 的知母中芒果苷和多糖的含量測定[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥，2009,20(1) :182-184.)。該方法的不足之處是將水提后的殘?jiān)暈閺U物而丟棄，造成殘?jiān)械闹付嗵怯?效成分白白浪費(fèi)掉。本發(fā)明主要針對(duì)了知母多糖的酸堿性質(zhì)的不同，采用兩種溶劑對(duì)知母飲片中的多 糖進(jìn)行提取，制備了兩種知母多糖，豐富了多糖的種類，提高了含量。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供一種由知母飲片提取知母多糖的方法，該方法過程簡單，提取 的知母多糖成分多，拓寬知母多糖藥理活性。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案加以實(shí)現(xiàn)的，一種由知母飲片提取知母多糖的方法， 其特征在于，包括以下步驟(1)將知母飲片在溫度60 65°C干燥后，粉碎過100目篩，精密稱定，將其加入質(zhì) 量濃度為60 80%乙醇水溶液在溫度90°C回流提取1 池，棄除提取液，并且按第1次回 流提取操作條件進(jìn)行回流提取3次，然后過濾回收知母粉末殘?jiān)?2)將步驟(1)知母粉末殘?jiān)跍囟?0_65°C干燥，按干燥的知母粉末殘?jiān)c去離 子水的質(zhì)量比為1 (10 30)，將知母粉末殘?jiān)尤肴ルx子水中，在溫度60 100°C回流 提取1 3h，回收提取液，并且按第1次回流提取操作條件進(jìn)行回流提取3次，回收水提知母飲片殘?jiān)?，合并提取液。合并的提取液?jīng)減壓蒸發(fā)濃縮，向濃縮液中加入體積量的3倍的 乙醇，然后在溫度3-4°C下沉淀23-2 ，回收上清液，沉淀物用無水乙醇、乙醚洗滌，洗滌至 洗滌液無顏色為止，抽濾，濾餅冷凍干燥得到質(zhì)量含量為40% 50%的中性多糖N1為主的 知母浸膏；(3)將步驟O)回收的上清經(jīng)減壓蒸發(fā)濃縮，向濃縮液中加入體積量的4倍的乙 醇，然后在溫度3-4°C下沉淀23-2 ，去除上清液，沉淀物用無水乙醇、乙醚洗滌，洗滌至洗 滌液無顏色為止，抽濾，濾餅冷凍干燥得到質(zhì)量含量為60% 70%的中性多糖隊(duì)為主的知 母浸膏；(4)將步驟⑵回收的水提知母粉末殘?jiān)跍囟?0 65°C干燥后，按干燥的水提 知母粉末殘?jiān)|(zhì)量克數(shù)與氫氧化鈉溶液體積毫升數(shù)之比為1 (10-30)，將水提知母粉末 殘?jiān)尤?. 1 0. 3mol/L氫氧化鈉溶液中，在溫度60 100°C回流提取1 3h，回收提取 液，并且按第1次回流提取操作條件進(jìn)行回流提取3次，合并提取液。向合并提取液中滴加 0. 1 0. 3mol/L鹽酸至合并提取液的pH為6 8，經(jīng)減壓蒸發(fā)濃縮，向濃縮液中加入體積 量的3倍的乙醇，然后在溫度3-4°C下沉淀23-2 ，回收上清液，沉淀物用無水乙醇、乙醚洗 滌，洗滌至洗滌液無顏色為止，抽濾，濾餅冷凍干燥得到質(zhì)量含量為30% 40%的酸性多 糖A1為主的知母浸膏；(5)將步驟(4)回收的上清液經(jīng)減壓蒸發(fā)濃縮，向濃縮液中加入體積量的4倍的乙 醇，然后在溫度3-4°C下沉淀23-2 ，去除上清液，沉淀物用無水乙醇、乙醚洗滌，洗滌至洗 滌液無顏色為止，經(jīng)過濾，濾餅冷凍干燥得到質(zhì)量含量為40% 50%酸性多糖A2為主的知
母浸膏。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于，提取過程簡單，環(huán)保，同時(shí)提高了知母多糖的回收率，進(jìn)一步 明晰了知母總多糖的成分及含量，達(dá)到充分利用和保護(hù)中藥知母資源的目的。


圖1為本發(fā)明實(shí)施例1所提取的浸膏中所含有的知母多糖的紅外掃描圖，紅外曲 線1為知母多糖A1，紅外曲線2為知母多糖A2,紅外曲線3為知母多糖N1，紅外曲線4為知
母多糖N2。
具體實(shí)施例方式實(shí)例1將知母飲片于60°C烘箱中干燥，粉碎，過100目篩，精密稱取100g。加入質(zhì)量濃度 為80%乙醇水溶液中，在溫度90°C回流提取3次，每次lh，棄除提取液，過濾回收知母殘?jiān)?在溫度60°C干燥^g)，加入680ml去離子水中，90°C回流提取3次，每次lh，合并提取 液并回收水提知母殘?jiān)Ｌ崛∫簻p壓蒸發(fā)至400ml，加入1200ml乙醇攪拌均，4°C冰箱中沉 淀Mh。抽濾得上清和濾餅兩部分，上清液備用，濾餅用無水乙醇、乙醚洗滌至洗滌液無顏 色，冷凍干燥濾餅得含有中性多糖N1為主的知母浸膏。上清繼續(xù)減壓蒸發(fā)至體積為70ml， 用觀0!111乙醇4°C冰箱中沉淀Mh，洗滌冷凍干燥得含有中性多糖隊(duì)為主的知母浸膏。水提 知母殘?jiān)?0°C烘箱烘干(27. 34g)，加入410ml氫氧化鈉(0. lmol/L)于100°C提取3次，每 次1.證。合并提取液，用0. lmol/L鹽酸中和至提取液的PH = 6 8，減壓蒸發(fā)，沉淀方法同N1和N2,得到酸性多糖A1, A2為主的知母浸膏。共得到中性多糖浸膏N1 :13g, N2 :0. 58g ； 酸性多糖浸膏A1 6. 8g, A2 0. 36g。對(duì)得到的兩種類型的多糖浸膏中多糖的含量用硫酸-蒽 酮法進(jìn)行測定，并計(jì)算出知母藥材中多糖的含量，結(jié)果如表1
表1知母多糖的含量測定結(jié)果
權(quán)利要求
1. 一種由知母飲片提取知母多糖的方法，其特征在于，包括以下步驟(1)將知母飲片在溫度60 65°C干燥后，粉碎過100目篩，精密稱定，將其加入質(zhì)量濃 度為60 80%乙醇水溶液在溫度90°C回流提取1 池，棄除提取液，并且按第1次回流提 取操作條件進(jìn)行回流提取3次，然后過濾回收知母粉末殘?jiān)?2)將步驟(1)知母粉末殘?jiān)跍囟?0-65°C干燥，按干燥的知母粉末殘?jiān)c去離子 水的質(zhì)量比為1 (10 30)，將知母粉末殘?jiān)尤肴ルx子水中，在溫度60 100°C回流提 取1 池，回收提取液，并且按第1次回流提取操作條件進(jìn)行回流提取3次，回收水提知母 飲片殘?jiān)?，合并提取液；合并的提取液?jīng)減壓蒸發(fā)濃縮，向濃縮液中加入體積量的3倍的乙 醇，然后在溫度3-4°C下沉淀23-2 ，回收上清液，沉淀物用無水乙醇、乙醚洗滌，洗滌至洗 滌液無顏色為止，抽濾，濾餅冷凍干燥得到質(zhì)量含量為40% 50%的中性多糖N1為主的知 母浸膏；(3)將步驟O)回收的上清經(jīng)減壓蒸發(fā)濃縮，向濃縮液中加入體積量的4倍的乙醇，然 后在溫度3-4°C下沉淀23-2 ，去除上清液，沉淀物用無水乙醇、乙醚洗滌，洗滌至洗滌液 無顏色為止，抽濾，濾餅冷凍干燥得到質(zhì)量含量為60% 70%的中性多糖N2為主的知母浸 膏；(4)將步驟( 回收的水提知母粉末殘?jiān)跍囟?0 65°C干燥后，按干燥的水提知母 粉末殘?jiān)|(zhì)量克數(shù)與氫氧化鈉溶液體積毫升數(shù)之比為1 (10-30)，將水提知母粉末殘?jiān)?加入0. 1 0. 3mol/L氫氧化鈉溶液中，在溫度60 100°C回流提取1 3h，回收提取液，并 且按第1次回流提取操作條件進(jìn)行回流提取3次，合并提取液。向合并提取液中滴加0. 1 0. 3mol/L鹽酸至合并提取液的pH為6 8，經(jīng)減壓蒸發(fā)濃縮，向濃縮液中加入體積量的3 倍的乙醇，然后在溫度3-4°C下沉淀23-2 ，回收上清液，沉淀物用無水乙醇、乙醚洗滌，洗 滌至洗滌液無顏色為止，抽濾，濾餅冷凍干燥得到質(zhì)量含量為30% 40%的酸性多糖A1為 主的知母浸膏；(5)將步驟回收的上清液經(jīng)減壓蒸發(fā)濃縮，向濃縮液中加入體積量的4倍的乙醇， 然后在溫度3-4°C下沉淀23-2 ，去除上清液，沉淀物用無水乙醇、乙醚洗滌，洗滌至洗滌 液無顏色為止，經(jīng)過濾，濾餅冷凍干燥得到質(zhì)量含量為40% 50%酸性多糖A2為主的知母浸膏。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種由知母飲片提取知母多糖的方法。該方法過程包括知母飲片乙醇提取除去小分子，殘?jiān)稍镉萌ルx子水提取，提取液合并濃縮，用乙醇沉淀，抽濾，得到上清和濾餅兩部分，濾餅洗滌得到含中性多糖N1的浸膏；上清用乙醇沉淀，抽濾，洗滌濾餅得到含中性多糖N2的浸膏；水提殘?jiān)稍镏笥脡A液提取，提取液用鹽酸中和至中性，濃縮之后沉淀，抽濾，得到上清和濾餅兩部分，濾餅洗滌得到含酸性多糖A1的浸膏；上清用乙醇沉淀，抽濾，洗滌濾餅得到含酸性多糖A2的浸膏。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于利用知母殘?jiān)?，在水提基礎(chǔ)之上采用了堿提，提高了知母多糖的提取率，豐富了知母中多糖的種類及提高了多糖的含量。
文檔編號(hào)C08B37/00GK102134286SQ201110120368
公開日2011年7月27日 申請(qǐng)日期2011年5月11日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月11日
發(fā)明者李霞, 趙云平, 高文遠(yuǎn) 申請(qǐng)人:天津大學(xué)