專利名稱:從豬肺中提取肝素鈉并聯(lián)產(chǎn)多肽蛋白粉的工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明公開一種從豬肺中提取肝素鈉并聯(lián)產(chǎn)多肽蛋白粉的工藝。
背景技術(shù):
肝素鈉(Heparin Sodium)是一種含有硫酸基的酸性粘多糖,是典型的抗凝血藥, 能阻止血液的凝結(jié)過程,防止血栓的形成。雖肝素鈉用于臨床已有60余年的歷史,但迄今還沒有一種能夠完全代替它的產(chǎn)品,所以它仍然是最重要的抗凝血和抗血栓的升華藥物, 且目前只能從動(dòng)物的部分組織中提取,不能人工合成。多肽蛋白粉含有豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸、寡肽、鈣、磷、纖維素以及其他一些常量和微量元素,可作為飼料在斷奶仔豬、母豬和水產(chǎn)養(yǎng)殖中均有應(yīng)用。易被動(dòng)物體消化吸收,是一種動(dòng)物所必需的營(yíng)養(yǎng)素,多肽在蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)中有著重要的作用。多肽營(yíng)養(yǎng)理論是當(dāng)前蛋白質(zhì)理論體系研究的焦點(diǎn)之一。由于動(dòng)物蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)理論的研究進(jìn)展,肽類飼料的理論研究和開發(fā)利用成為近一個(gè)時(shí)期的研究熱點(diǎn),許多人關(guān)注肽類飼料在動(dòng)物蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)上的作用,尤其是關(guān)注在斷奶仔豬生產(chǎn)上的應(yīng)用性研究。目前國(guó)內(nèi)外一般是以豬小腸和牛肺為基礎(chǔ)原料提取肝素鈉,廢液和廢渣通常被丟棄,既污染環(huán)境又浪費(fèi)原料。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種從豬肺中提取肝素鈉并聯(lián)產(chǎn)多肽蛋白粉的工藝,該工藝充分利用豬肺既含有肝素鈉又含有豐富的蛋白質(zhì)這一性質(zhì),采用鹽解、除渣、超濾、沉淀、酶解、脫色、噴霧干燥等工藝從豬肺中提取肝素鈉并制備多肽蛋白粉。如上構(gòu)思,本發(fā)明的技術(shù)方案是一種從豬肺中提取肝素鈉并聯(lián)產(chǎn)多肽蛋白粉的工藝,其特征在于包括如下步驟(1)原料前處理豬肺去掉筋膜、洗凈、絞碎、磨漿,加入等量去離子水,攪拌均勻, 調(diào) ρΗ8-8· 5 ;(2)酶解將勻漿液攪拌升溫至45-55°C,加入動(dòng)物蛋白水解酶,保持pH8_8. 5,攪拌恒溫酶解3-5小時(shí);(3)兩次鹽解第一次鹽解將上述酶解液升溫至65-75°C,加入氯化鈉,攪拌鹽解 25-40分鐘,氯化鈉的添加量是2% -5% ;第二次鹽解將第一次鹽解液再升溫至75-90°C, 再加入氯化鈉,保溫10-20分鐘,氯化鈉的添加量1. 5% -3% ;(4)除渣(蛋白)將上述鹽解液溫度降至室溫,去掉上層油脂,按原料重量 0. 5% -1. 5%加入活化沉淀劑,調(diào)pH3-4,靜置3-5小時(shí),虹吸上層清液,下層懸濁物離心,收集清液,合并兩次清液,調(diào)PH至中性,固液離心機(jī)分離收集澄清清液;沉淀蛋白再酶解制備多肽蛋白粉;(5)將步驟中得到的澄清清液采用超濾的方式進(jìn)行濃縮除灰分;(6)銨鹽沉淀步驟(5)中得到的濃縮液調(diào)pH值到7. 5-9,按溶液量的4% -6%加入銨鹽,沉淀酸性多聚糖及蛋白質(zhì),離心收集清液;(7)沉淀肝素鈉將步驟(6)得到的清液調(diào)pH到10-12,180目尼龍網(wǎng)過濾,收集濾液,再調(diào)PH2. 5-4,180目尼龍網(wǎng)過濾,再把濾液調(diào)至中性,加入85% -95%食用酒精,使酒精濃度達(dá)45%-50%,密封過夜,虹吸上層清液(酒精蒸餾回收),沉淀用85% -95%的食用酒精洗滌3-5遍,真空干燥得肝素鈉粗品;(8)酶解收集步驟⑷中的沉淀蛋白,檢測(cè)其干物質(zhì)及蛋白含量,按酶解液蛋白濃度7% -10%加入去離子水,稀釋攪拌均勻,酶解溫度升溫至45-55°C,邊升溫邊調(diào) PH7. 5-9,加入0. 3% -0. 8% (蛋白量計(jì))蛋白水解酶,恒溫酶解3_5小時(shí);(9)將步驟(8)得到的酶解液脫色酶解液加入2% -5% (以蛋白含量計(jì))活性炭,升溫80-90°C,攪拌10-20分鐘,靜置30-60分鐘吸附血紅素;(10)壓濾將上述吸附液泵入壓濾機(jī)壓濾,脫色得清液;(11)干燥壓濾液經(jīng)噴霧干燥得多肽蛋白粉。上述步驟O)中動(dòng)物蛋白水解酶的用量是原料的0. 3% -1. 0%。上述步驟( 是把步驟中得到的澄清清液超濾濃縮至原體積15% -25%時(shí), 加入0. 5-1. 5倍體積的去離子水,反復(fù)3-5次。上述步驟(9)是在酶解液中加入2%-5% (以蛋白含量計(jì))活性炭,升溫80_90°C, 攪拌10-20分鐘,靜置30-60分鐘吸附血紅素。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于1、工藝為聯(lián)產(chǎn),比單產(chǎn)工藝設(shè)備利用率高,節(jié)約原料、輔料、人力,可降低肝素鈉、 多肽蛋白粉生產(chǎn)成本。2、充分利用我國(guó)豬肺資源,增加豬肺的附加值。3、減少含蛋白廢液廢渣對(duì)環(huán)境的污染,變廢為寶,是補(bǔ)充我國(guó)蛋白質(zhì)飼料資源短缺的有效途徑。
具體實(shí)施例方式1、取豬肺一個(gè),去掉筋膜、洗凈、絞碎、磨漿,加入等量去離子水,攪拌均勻,調(diào)pH8。2、勻漿液攪拌升溫至55°C,加入原料重量0. 4%的動(dòng)物蛋白水解酶,保持pH為8, 恒溫酶解4小時(shí)。3、酶解液升溫至72°C,加入3%氯化鈉,攪拌鹽解30分鐘,再升溫至85°C,再加入 2%氯化鈉,保溫10分鐘。4、鹽解液溫度降至室溫,去掉上層油脂,按原料重量1 %加入明礬,調(diào)pH3. 5,靜置 4小時(shí),虹吸上層清液,下層懸濁物離心,收集清液,合并兩次清液,調(diào)pH至中性,固液離心機(jī)分離收集澄清清液。沉淀蛋白再酶解制備多肽蛋白粉。5、把澄清的清液超濾,濃縮至原體積20%時(shí),加入等量去離子水,反復(fù)4次。6、濃縮液調(diào)pH值到7. 5-9,按溶液量的4%加入銨鹽,沉淀酸性多聚糖及蛋白質(zhì)。7、清液調(diào)pH12,180目尼龍網(wǎng)過濾,收集濾液,再調(diào)pH3,180目尼龍網(wǎng)過濾,再把濾液調(diào)至中性,加入95%食用酒精,使酒精濃度達(dá)45%左右,密封過夜,虹吸上層清液(酒精蒸餾回收),沉淀用95%酒精洗滌3遍,真空干燥得肝素鈉粗品。8、收集步驟4中的沉淀,檢測(cè)其干物質(zhì)及蛋白含量,按酶解液蛋白濃度8%加入去離子水,稀釋攪拌均勻,升溫至55°C,邊升溫邊調(diào)pH8,加入0.5% (蛋白量計(jì))蛋白水解酶, 恒溫酶解5小時(shí)。9、酶解液加入3% (以蛋白含量計(jì))活性炭,升溫至80°C,攪拌10分鐘,靜置40 分鐘吸附血紅素。10、將上述吸附液泵入壓濾機(jī)壓濾,脫色得清液。11、壓濾液經(jīng)噴霧干燥得多肽蛋白粉。
權(quán)利要求
1.一種從豬肺中提取肝素鈉并聯(lián)產(chǎn)多肽蛋白粉的工藝,其特征在于包括如下步驟(1)原料前處理豬肺去掉筋膜、洗凈、絞碎、磨漿,加入等量去離子水,攪拌均勻,調(diào) ρΗ8-8· 5 ;(2)酶解將勻漿液攪拌升溫至45-55°C,加入動(dòng)物蛋白水解酶,保持pH8-8.5,攪拌恒溫酶解3-5小時(shí);(3)兩次鹽解第一次鹽解將上述酶解液升溫至65-75°C,加入氯化鈉,攪拌鹽解 25-40分鐘,氯化鈉的添加量是2% -5% ;第二次鹽解將第一次鹽解液再升溫至75-90°C, 再加入氯化鈉,保溫10-20分鐘,氯化鈉的添加量1. 5% -3% ;(4)除渣(蛋白)將上述鹽解液溫度降至室溫,去掉上層油脂,按原料重量 0. 5% -1. 5%加入活化沉淀劑,調(diào)pH3-4,靜置3-5小時(shí),虹吸上層清液,下層懸濁物離心,收集清液,合并兩次清液,調(diào)PH至中性,固液離心機(jī)分離收集澄清清液;沉淀蛋白再酶解制備多肽蛋白粉;(5)將步驟中得到的澄清清液采用超濾的方式進(jìn)行濃縮除灰分;(6)銨鹽沉淀步驟(5)中得到的濃縮液調(diào)pH值到7.5-9,按溶液量的4%-6%加入銨鹽,沉淀酸性多聚糖及蛋白質(zhì),離心收集清液;(7)沉淀肝素鈉將步驟(6)得到的清液調(diào)pH到10-12,180目尼龍網(wǎng)過濾,收集濾液, 再調(diào)pH2. 5-4,180目尼龍網(wǎng)過濾,再把濾液調(diào)至中性,加入85% -95%食用酒精,使酒精濃度達(dá)45%-50%,密封過夜,虹吸上層清液(酒精蒸餾回收),沉淀用85% -95%的食用酒精洗滌3-5遍,真空干燥得肝素鈉粗品;(8)酶解收集步驟中的沉淀蛋白,檢測(cè)其干物質(zhì)及蛋白含量,按酶解液蛋白濃度 7% -10%加入去離子水,稀釋攪拌均勻,酶解溫度升溫至45-55°C,邊升溫邊調(diào)pH7. 5_9,加入0. 3% -0. 8% (蛋白量計(jì))蛋白水解酶,恒溫酶解3-5小時(shí);(9)將步驟(8)得到的酶解液脫色酶解液加入2%-5%(以蛋白含量計(jì))活性炭,升溫80-90°C,攪拌10-20分鐘,靜置30-60分鐘吸附血紅素;(10)壓濾將上述吸附液泵入壓濾機(jī)壓濾,脫色得清液;(11)干燥壓濾液經(jīng)噴霧干燥得多肽蛋白粉。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從豬肺中提取肝素鈉并聯(lián)產(chǎn)多肽蛋白粉的工藝,其特征在于上述步驟O)中動(dòng)物蛋白水解酶的用量是原料的0.3%-1.0%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從豬肺中提取肝素鈉并聯(lián)產(chǎn)多肽蛋白粉的工藝,其特征在于上述步驟( 是把步驟(4)中得到的澄清清液超濾濃縮至原體積15% -25%時(shí),加入 0. 5-1. 5倍體積的去離子水,反復(fù)3-5次。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從豬肺中提取肝素鈉并聯(lián)產(chǎn)多肽蛋白粉的工藝,其特征在于上述步驟(9)是在酶解液中加入2% -5% (以蛋白含量計(jì))活性炭,升溫80-90°C, 攪拌10-20分鐘,靜置30-60分鐘吸附血紅素。
全文摘要
一種從豬肺中提取肝素鈉并聯(lián)產(chǎn)多肽蛋白粉的工藝,一次投料同時(shí)可獲得肝素鈉和多肽蛋白粉兩種產(chǎn)品。包括如下步驟(1)原料前處理;(2)酶解;(3)兩次鹽解;(4)除渣(蛋白)、收集清液;(5)超濾濃縮除灰分;(6)銨鹽沉淀;(7)沉淀肝素鈉,真空干燥得肝素鈉粗品;(8)酶解沉淀;(9)脫色;(10)壓濾;(11)噴霧干燥。該工藝為聯(lián)產(chǎn),比單產(chǎn)工藝設(shè)備利用率高,節(jié)約原料、輔料、人力,可降低肝素鈉、多肽蛋白粉生產(chǎn)成本;充分利用我國(guó)豬肺資源,增加豬肺的附加值;減少含蛋白廢液廢渣對(duì)環(huán)境的污染,變廢為寶,是補(bǔ)充我國(guó)蛋白質(zhì)飼料資源短缺的有效途徑等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)C08B37/10GK102295711SQ20111024266
公開日2011年12月28日 申請(qǐng)日期2011年8月23日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月23日
發(fā)明者夏繼華, 宋古全, 張立娟, 沈峰, 王長(zhǎng)維 申請(qǐng)人:湖北寶迪農(nóng)業(yè)科技有限公司