5-氨基-1，4-二氫-1，8-萘啶衍生物及其藥物組合物和用途技術(shù)領(lǐng)域本發(fā)明涉及藥物化學(xué)領(lǐng)域，特別涉及一類5-氨基-1，4-二氫-1，8-萘啶類化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽及包含該化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的藥物組合物，涉及該類化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽及包含該化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的藥物組合物作為L(zhǎng)-型鈣通道阻滯劑或/和乙酰膽堿酯酶抑制劑的應(yīng)用，特備是在制備治療心血管疾病、腦血管疾病或癡呆藥物中的用途。

背景技術(shù)：
阿爾茨海默病，是一種以慢性、進(jìn)行性認(rèn)知障礙和記憶力損害為主的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，主要病理特征表現(xiàn)為老年斑、神經(jīng)元纖維纏結(jié)和神經(jīng)元丟失，嚴(yán)重影響患者的認(rèn)知、記憶、語(yǔ)言功能及個(gè)人生活能力和情感人格等。目前，世界上較為接受的阿爾茨海默病病理為“膽堿能缺失學(xué)說(shuō)”。學(xué)說(shuō)認(rèn)為患者大腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)——乙酸膽堿的缺失是導(dǎo)致阿爾茨海默病的關(guān)鍵原因。膽堿酯酶是生物神經(jīng)傳導(dǎo)中的一種關(guān)鍵性的酶，在膽堿能突觸間，該酶能夠降解乙酰膽堿，終止神經(jīng)遞質(zhì)對(duì)突觸后膜的興奮作用，保證神經(jīng)信號(hào)在生物體內(nèi)的正常傳遞。但是乙酰膽堿酯酶由于能夠催化乙酰膽堿的裂解反應(yīng)，會(huì)導(dǎo)致乙酰膽堿缺失，神經(jīng)信號(hào)傳遞失敗，從而影響機(jī)體的認(rèn)知、記憶等功能。目前多采用乙酰膽堿酯酶抑制劑來(lái)抑制膽堿酯酶的活性，延緩乙酰膽堿水解的速度，提高突觸間隙乙酰膽堿的水平，達(dá)到治療阿爾茨海默病的目的。血管性癡呆是由各種腦血管疾病引起的獲得性智能損害綜合征，臨床表現(xiàn)為記憶力、計(jì)算力、注意力及執(zhí)行功能等方面的智能衰退，是僅次于阿爾茨海默病的第二位最常見(jiàn)的癡呆原因。研究人員認(rèn)為，一種損傷機(jī)制為：腦梗死、缺血缺氧性低灌注及出血性病變，導(dǎo)致腦組織容積減少、神經(jīng)元遲發(fā)性壞死，進(jìn)而引起腦內(nèi)乙酰膽堿能神經(jīng)受損，乙酰膽堿釋放減少，逐漸出現(xiàn)記憶障礙、認(rèn)知障礙、社會(huì)和日常生活、活動(dòng)能力下降。服用乙酰膽堿酯酶抑制劑，能有效地改善患者的認(rèn)知功能、執(zhí)行功能和日常生活能力。血管性癡呆患者腦皮質(zhì)神經(jīng)元的另一損傷機(jī)制是由于腦內(nèi)鈣內(nèi)流增加，導(dǎo)致學(xué)習(xí)和記憶功能下降。如果鈣通道拮抗劑如尼莫地平等進(jìn)入腦組織，與鈣通道有關(guān)的受體可逆地與之結(jié)合，從而抑制鈣離子流入神經(jīng)細(xì)胞，就可以提高對(duì)缺血的耐受性，擴(kuò)張腦血管和改善腦供血，保護(hù)神經(jīng)元，有效改善血管性癡呆患者的認(rèn)知功能。而目前尚無(wú)一種既能抑制乙酰膽堿酯酶活性，又能阻滯細(xì)胞外鈣離子通過(guò)鈣通道流入細(xì)胞的化合物，因此，研發(fā)此類化合物，具有重要意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種既能抑制乙酰膽堿酯酶活性，又能阻滯細(xì)胞外鈣離子通過(guò)鈣通道流入細(xì)胞的化合物和藥物組合物及其作為L(zhǎng)-型鈣通道阻滯劑或/和乙酰膽堿酯酶抑制劑的應(yīng)用。為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供的技術(shù)方案為：一類如式I所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，式I其中，R選自芳基或雜芳基，所述芳基或雜芳基的環(huán)上任選位置被鹵素原子、羥基、巰基、氨基、硝基、氰基、芳基、雜芳基、C1-C10烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基取代，其中任選兩個(gè)位置的取代基可以合起來(lái)構(gòu)成脂肪環(huán)、雜環(huán)、芳環(huán)或雜芳環(huán)，所述C1-C10烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基中的任選-CH2-可被一個(gè)或多個(gè)-O-、-S-、-SO2-、-C(O)-或/和-NR6-置換，所述C1-C10烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基中的任意位置氫可被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子、氰基、硝基、雜脂環(huán)基、羥基、-NR8R9取代；X選自-O-，-NR7-；R8和R9獨(dú)立選自氫、C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基，或者R8和R9合起來(lái)形成一個(gè)5至9個(gè)環(huán)原子的雜脂環(huán)基；R6和R7獨(dú)立選自氫、C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基、C2-C8炔基；R1選自氫、羥基、芳基、雜芳基、C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基，所述C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基中的任選-CH2-可被一個(gè)或多個(gè)-O-、-S-、-SO2-、-C(O)-或/和-NR6-置換，所述C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基中的任意位置氫可被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子、氰基、硝基、芳基、雜芳基、-NR8R9取代；R2選自氫、鹵素原子、硝基、氨基、羥基、三鹵烷基、C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基，所述C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基中的任選-CH2-可被一個(gè)或多個(gè)-O-、-S-、-SO2-、-C(O)-或/和-NR6-置換，所述C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基中的任意位置氫可被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子、氰基、硝基、-NR8R9取代；R3選自氫、C1-C8烷基或C3-C8環(huán)烷基，所述C1-C8烷基或C3-C8環(huán)烷基中的任選-CH2-可被一個(gè)或多個(gè)-O-、-S-、-SO2-、-C(O)-或/和-NR6-置換，所述C1-C8烷基或C3-C8環(huán)烷基中的任意位置氫可被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子、氰基、硝基、-NR8R9取代；R4和R5獨(dú)立選自C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基，所述C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基中的任選-CH2-可被一個(gè)或多個(gè)-O-、-S-、-SO2-、-C(O)-或/和-NR6-置換，所述C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基中的任意位置氫可被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子、氰基、硝基、芳基、雜芳基、-NR8R9取代。作為優(yōu)選，上述化合物中，R選自C6-C12芳基或C3-C12雜芳基，所述芳基或雜芳基的環(huán)上任選位置被鹵素原子、氨基、硝基、氰基、C6-C12芳基、C3-C12雜芳基、C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基取代，其中任選兩個(gè)位置的取代基可以合起來(lái)構(gòu)成脂肪環(huán)、雜環(huán)、芳環(huán)或雜芳環(huán)，所述C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基中的任選-CH2-可被一個(gè)或多個(gè)-O-、-S-、-SO2-、-C(O)-或/和-NR6-置換，所述C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基中的任意位置氫可被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子、氰基、羥基、-NR8R9取代；X選自-O-，-NR7-；R8和R9獨(dú)立選自氫、C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基，或者R8和R9合起來(lái)形成一個(gè)5至9個(gè)環(huán)原子的雜脂環(huán)基；R6和R7獨(dú)立選自氫、C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基；R1選自C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基，所述C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基中的任選-CH2-可被一個(gè)或多個(gè)-O-、-S-、-C(O)-或/和-NR6-置換，所述C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基中的任意位置氫可被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子、氰基、硝基、C6-C12芳基、C3-C12雜芳基、-NR8R9取代；R2選自鹵素原子、C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基，所述C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基中的任選-CH2-可被一個(gè)或多個(gè)-O-、-S-或/和-NR6-置換，所述C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基中的任意位置氫可被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子、氰基、-NR8R9取代；R3選自氫、C1-C8烷基或C3-C8環(huán)烷基，所述C1-C8烷基或C3-C8環(huán)烷基中的任選-CH2-可被一個(gè)或多個(gè)-O-、-S-、-C(O)-或/和-NR6-置換，所述C1-C8烷基或C3-C8環(huán)烷基中的任意位置氫可被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子取代；R4和R5獨(dú)立選自C1-C4烷基、C3-C4環(huán)烷基、C2-C4鏈烯基或C2-C4炔基，所述C1-C4烷基、C3-C4環(huán)烷基、C2-C4鏈烯基或C2-C4炔基中的任選-CH2-可被一個(gè)或多個(gè)-O-、-S-、-SO2-、-C(O)-或/和-NR6-置換，所述C1-C4烷基、C3-C4環(huán)烷基、C2-C4鏈烯基或C2-C4炔基中的任意位置氫可被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子、氰基、硝基、C6-C12芳基、C3-C12雜芳基、-NR8R9取代。更優(yōu)選地，上述化合物中，R選自C6-C12芳基或C3-C12雜芳基，所述芳基或雜芳基的環(huán)上任選位置被鹵素原子、硝基、氰基、C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基取代，其中任選兩個(gè)位置的取代基可以合起來(lái)構(gòu)成脂肪環(huán)、雜環(huán)、芳環(huán)或雜芳環(huán)，所述C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基中的任選-CH2-可被一個(gè)或多個(gè)-O-、-S-、-SO2-、-C(O)-或/和-NR6-置換，所述C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基中的任意位置氫可被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子、氰基、-NR8R9取代；X為選自-O-，-NR7-；R8和R9獨(dú)立選自氫、C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基，或者R8和R9合起來(lái)形成一個(gè)5至9個(gè)環(huán)原子的雜脂環(huán)基；R6選自氫、C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基；R7選自氫、C1-C8烷基；R1選自C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基，所述C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基中的任選-CH2-可被一個(gè)或多個(gè)-O-、-S-、-C(O)-或/和-NR6-置換，所述C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基中的任意位置氫可被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子、氰基、C6-C12芳基、C3-C12雜芳基、-NR8R9取代；R2選自C1-C8烷基或C3-C8環(huán)烷基，所述C1-C8烷基或C3-C8環(huán)烷基中的任選-CH2-可被一個(gè)或多個(gè)-O-、-S-或/和-NR6-置換，所述C1-C8烷基或C3-C8環(huán)烷基中的任意位置氫可被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子、-NR8R9取代；R3選自氫、C1-C8烷基；R4和R5獨(dú)立選自C1-C4烷基、C2-C4鏈烯基或C2-C4炔基，所述C1-C4烷基、C2-C4鏈烯基或C2-C4炔基中的任選-CH2-可被一個(gè)或多個(gè)-O-、-S-、-SO2-或/和-C(O)-置換，所述C1-C4烷基、C2-C4鏈烯基或C2-C4炔基中的任意位置氫可被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子取代。更優(yōu)選地，上述化合物中，R選自苯基或C3-C6雜芳基，所述苯基或雜芳基的環(huán)上任選位置被鹵素原子、硝基、氰基、C1-C8烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基取代，其中兩個(gè)相鄰取代基可以合起來(lái)構(gòu)成脂肪環(huán)、雜環(huán)、芳環(huán)或雜芳環(huán)，所述C1-C8烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基中的任選-CH2-被一個(gè)或多個(gè)-O-、-S-、-SO2-、-C(O)-或/和-NR6-置換，所述C1-C8烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基中的任意位置氫可被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子、氰基、-NR8R9取代；X為-O-；R8和R9獨(dú)立選自氫、C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基，或者R8和R9合起來(lái)形成一個(gè)5至9個(gè)環(huán)原子的雜脂環(huán)基；R6選自氫、C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基；R1選自C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基，所述C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基中的任選-CH2-可被一個(gè)或多個(gè)-O-、-S-或/和-NR6-置換，所述C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基中的任意位置氫可被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子、氰基、-NR8R9取代；R2選自三鹵烷基、C1-C8烷基；R3選自氫、C1-C4烷基；R4和R5獨(dú)立選自C1-C4烷基，所述C1-C4烷基中的任選-CH2-可被一個(gè)或多個(gè)-O-、-S-、-SO2-或/和-C(O)-置換，所述C1-C4烷基中的任意位置氫可被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子取代。更優(yōu)選地，上述化合物中，R選自苯基或C3-C6雜芳基，所述苯基或雜芳基的環(huán)上任選位置被鹵素原子、硝基、氰基、C1-C6烷基取代，所述C1-C6烷基中的任選-CH2-被一個(gè)或多個(gè)-O-、-S-、-C(O)-或/和-NR6-置換，所述C1-C6烷基中的任意位置氫可被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子、氰基、-NR8R9取代；X為-O-；R8和R9獨(dú)立選自氫、C1-C8烷基、C3-C6環(huán)烷基，或者R8和R9合起來(lái)形成一個(gè)5至9個(gè)環(huán)原子的雜脂環(huán)基；R6選自氫、C1-C8烷基、C3-C6環(huán)烷基；R1選自C1-C8烷基、C3-C6環(huán)烷基、C2-C4鏈烯基或C2-C4炔基，所述C1-C8烷基、C3-C6環(huán)烷基、C2-C4鏈烯基或C2-C4炔基中的任選-CH2-可被一個(gè)或多個(gè)-O-、-S-、-C(O)-或/和-NR6-置換，所述C1-C8烷基、C3-C6環(huán)烷基、C2-C4鏈烯基或C2-C4炔基中的任意位置氫可被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子、氰基、-NR8R9取代；R2選自三鹵甲基、C1-6烷基；R3選自氫、甲基、乙基；R4和R5獨(dú)立選自C1-C4烷基。除非另有說(shuō)明，在權(quán)利要求書(shū)和說(shuō)明書(shū)中使用的以下術(shù)語(yǔ)具有下面討論的含義：本申請(qǐng)書(shū)中提到的基團(tuán)碳原子個(gè)數(shù)表示方法，例如C1-C10，是指該基團(tuán)可以含1個(gè)碳原子、2個(gè)碳原子、3個(gè)碳原子等，直至包含10個(gè)碳原子；烷基指的是飽和的脂烴基，包括直鏈和支鏈烴基，非限制性地包括甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基等；亞烷基指的是二價(jià)烷基；鏈烯基指的是由至少一個(gè)碳-碳雙鍵組成的不飽和的直鏈或支鏈烴基，非限制性地包括乙烯、丙烯、異丙烯、丁烯、異丁烯、叔丁烯、正戊烯、異戊烯、正己烯等；亞鏈烯基指的是二價(jià)鏈烯基；炔基指的是由一個(gè)或兩個(gè)以上碳-碳參鍵組成的不飽和的直鏈或支鏈烴基，非限制性地包括乙炔基、丙炔、異丙炔、丁炔、異丁炔、叔丁炔、戊炔、己炔；亞炔基指的是二價(jià)炔基；環(huán)烷基指全部為碳的單環(huán)或稠合的環(huán)(稠合環(huán)意味著系統(tǒng)中的每個(gè)環(huán)與系統(tǒng)中的其他環(huán)共享毗鄰的一對(duì)碳原子)基團(tuán)，其中一個(gè)或多個(gè)環(huán)不具有完全連接的π電子系統(tǒng)，環(huán)烷基的實(shí)例非限制性地包括環(huán)丙烷、環(huán)丁烷、環(huán)戊烷、環(huán)戊烯、環(huán)己烷、金剛烷、環(huán)己烯、環(huán)己二烯、環(huán)庚烷、環(huán)辛烷、環(huán)庚二烯和環(huán)庚三烯等；烷氧基指的是通過(guò)氧鍵連接的烷基或環(huán)烷基；芳氧基表示-O-芳基和-O-雜芳基，包括但不限于苯氧基、吡啶氧基、呋喃氧基、噻吩氧基、嘧啶氧基、吡嗪氧基等及其衍生物；取代的苯基指的是被一個(gè)或兩個(gè)以上取代基取代的苯基，其中取代基非限制性地包括C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基、C1-C6烷氧基、C2-C6烯氧基、苯氧基、芐氧基、羥基、羧基、過(guò)氧羥基、脲基、氨基甲?；奔柞；?、羰基、氨基、羥氨基、甲酰氨基、甲酰基、脒基、氰基、氰氨基、異氰基、異氰酸基、重氮基、疊氮基、肼基、三氮烷基、次氮基、硝基、亞硝基、異亞硝基、亞硝氨基、亞氨基、亞硝亞氨基、氧代、C1-C6烷硫基、磺氨基、氨磺?；?、亞氧硫基、巰基、亞硫?；?、磺基、磺酰基、硫代烷氧基、氰硫基、異氰硫基、硫代甲酰氨基、鹵代、鹵代烷基、亞氯氧基、氯氧基、高氯酸基、三氟甲基、亞碘?；?、碘?；?、膦基、氧膦基、二氧磷基、膦?；㈦匣?、硒烷基、乙硅烷基，甲硅烷氧基、甲硅烷基、亞甲硅烷基和碳環(huán)及雜環(huán)部分；“芳基”指的是有一個(gè)或兩個(gè)以上閉環(huán)的環(huán)狀芳烴部分，非限制性地包括苯基、芐基、萘基、蒽基、菲基、聯(lián)苯基等；芳基可以是取代的或未取代的；當(dāng)被取代時(shí)優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)，更優(yōu)選為一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)，取代基獨(dú)立地選自(不局限于)鹵素原子、硝基、氰基、三鹵烷基、?；?、雜脂環(huán)基、烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、炔基、單或二烷基氨基、羥基、巰基、烷氧基、烷硫基等；“雜芳基”表示5至12個(gè)環(huán)原子的單環(huán)或稠合環(huán)基團(tuán)，含有一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)或四個(gè)選自N、O或S的環(huán)雜原子，其余環(huán)原子是C，另外具有完全共軛的π電子系統(tǒng)；未取代的雜芳基非限制性地包括吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、吡啶、噁唑、異噁唑、噻唑基、吡唑、嘧啶、喹啉、異喹啉、嘌呤、咔唑、苯并呋喃、苯并噻吩、苯并噁二唑等；雜芳基可以是取代的或未取代的，取代基優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)，更優(yōu)選為一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)，獨(dú)立地選自(不局限于)鹵素原子、硝基、氰基、三鹵烷基、?；㈦s脂環(huán)基、烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、炔基、氨基、單或二烷基氨基、羥基、巰基、烷氧基、烷硫基等；雜脂環(huán)基表示單環(huán)或稠合環(huán)基團(tuán)，在環(huán)中具有5到9個(gè)環(huán)原子，其中一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)環(huán)原子選自N、O或S(O)m的雜原子，其中m是0至2的整數(shù)，其余環(huán)原子是C，這些環(huán)可以具有零條、一條或多條雙鍵，但這些環(huán)不具有完全共軛的π電子系統(tǒng)；未取代的雜脂環(huán)基非限制性地包括吡咯烷基、哌啶子基、哌嗪子基、嗎啉代基、硫代嗎啉代基、高哌嗪子基等；雜脂環(huán)基可以是取代的或未取代的，當(dāng)被取代時(shí)，取代基優(yōu)選為一個(gè)或兩個(gè)以上，更優(yōu)選為一個(gè)或兩個(gè)或三個(gè)，進(jìn)而更優(yōu)選為一個(gè)或兩個(gè)，非限制性地包括低級(jí)烷基、三鹵烷基、鹵素、羥基、烷氧基、巰基、烷硫基、氰基、?；?、硫代酰基、O-氨基甲?；?、N-氨基甲?；-硫代氨基甲?；?、N-硫代氨基甲酰基、C-酰氨基、N-酰氨基、硝基、N-磺酰氨基、S-磺酰氨基；優(yōu)選地，雜脂環(huán)基可選地被一個(gè)或兩個(gè)取代基取代，取代基非限制性地包括鹵素、低級(jí)烷基、三鹵烷基、羥基、巰基、氰基、N-酰氨基、單或二烷基胺基、羧基或N-磺酰氨基；鹵素原子指氟、氯、溴或碘基團(tuán)；三鹵烷基表示-CX3基團(tuán)，其中X是如上定義的鹵素原子；脂肪環(huán)表示3到9個(gè)碳原子組成的環(huán)狀基團(tuán)，環(huán)可以具有零條、一條或多條雙鍵，但這些環(huán)不具有完全共軛的π電子系統(tǒng)；脂肪環(huán)可以是取代的或未取代的，取代基優(yōu)選為一個(gè)或兩個(gè)以上，更優(yōu)選為一個(gè)或兩個(gè)或三個(gè)，進(jìn)而更優(yōu)選為一個(gè)或兩個(gè)，獨(dú)立選自(不局限于)鹵素原子、硝基、氰基、三鹵烷基、酰基、雜脂環(huán)基、烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、炔基、氨基、單或二烷基氨基、羥基、巰基、烷氧基、烷硫基等。雜環(huán)表示在環(huán)中具有5到9個(gè)環(huán)原子，其中一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)環(huán)原子選自N、O或S(O)m的雜原子，其中m是0至2的整數(shù)，其余環(huán)原子是C，這些環(huán)可以具有零條、一條或多條雙鍵，但這些環(huán)不具有完全共軛的π電子系統(tǒng)；未取代的雜環(huán)非限制性地包括吡咯烷、哌啶、哌嗪、嗎啉、硫代嗎啉、高哌嗪等；雜環(huán)可以是取代的或未取代的，當(dāng)被取代時(shí)，取代基優(yōu)選為一個(gè)或兩個(gè)以上，更優(yōu)選為一個(gè)或兩個(gè)或三個(gè)，進(jìn)而更優(yōu)選為一個(gè)或兩個(gè)，非限制性地包括低級(jí)烷基、三鹵烷基、鹵素、羥基、烷氧基、巰基、烷硫基、氰基、酰基、硫代?；?、O-氨基甲酰基、N-氨基甲?；-硫代氨基甲?；-硫代氨基甲?；-酰氨基、N-酰氨基、硝基、N-磺酰氨基、S-磺酰氨基；優(yōu)選地，雜環(huán)可選地被一個(gè)或兩個(gè)取代基取代，取代基非限制性地包括鹵素、低級(jí)烷基、三鹵烷基、羥基、巰基、氰基、N-酰氨基、單或二烷基胺基、羧基或N-磺酰氨基；芳環(huán)表示有一個(gè)或兩個(gè)以上閉環(huán)的環(huán)狀芳烴部分，非限制性地包括苯、萘、蒽、菲等；芳環(huán)可以是取代的或未取代的；當(dāng)被取代時(shí)優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)，更優(yōu)選為一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)，取代基獨(dú)立地選自(不局限于)鹵素原子、硝基、氰基、三鹵烷基、?；?、雜脂環(huán)基、烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、炔基、單或二烷基氨基、羥基、巰基、烷氧基、烷硫基等；雜芳環(huán)表示表示5至12個(gè)環(huán)原子的單環(huán)或稠合環(huán)基團(tuán)，含有一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)或四個(gè)選自N、O或S的環(huán)雜原子，其余環(huán)原子是C，另外具有完全共軛的π電子系統(tǒng)；未取代的雜芳環(huán)非限制性地包括吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、吡啶、噁唑、異噁唑、噻唑基、吡唑、嘧啶、喹啉、異喹啉、嘌呤、咔唑、苯并呋喃、苯并噻吩、苯并噁二唑等；雜芳環(huán)可以是取代的或未取代的，取代基優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)，更優(yōu)選為一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)，獨(dú)立地選自(不局限于)鹵素原子、硝基、氰基、三鹵烷基、?；㈦s脂環(huán)基、烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、炔基、氨基、單或二烷基氨基、羥基、巰基、烷氧基、烷硫基等。本發(fā)明提供的化合物還包含該化合物在藥學(xué)上可接受的等價(jià)物或兩者以上的混合物。作為優(yōu)選，本發(fā)明提供的化合物在藥學(xué)上可接受的等價(jià)物可以包含藥學(xué)上可接受的鹽、水合物、溶劑合物、代謝物、前藥或等排物中的一種或兩者以上的混合物。作為優(yōu)選，本發(fā)明提供的化合物在藥學(xué)上可接受的等價(jià)物中，藥學(xué)上可接受的鹽包含本發(fā)明所提供化合物的酸式鹽或堿式鹽。所述藥學(xué)上可接受的鹽具有該化合物的藥學(xué)活性，且在生物學(xué)上和實(shí)際應(yīng)用中均符合需要。本發(fā)明提供的化合物在藥學(xué)上可接受的等價(jià)物中，藥學(xué)上可接受的酸式鹽非限制性地包括醋酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、甲酸鹽、丙酸鹽、己二酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、藻酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙基磺酸鹽、富馬酸鹽、葡庚酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、馬來(lái)酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、草酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽和十一烷酸鹽。作為優(yōu)選，本發(fā)明提供的化合物在藥學(xué)上可接受的等價(jià)物中，藥學(xué)上可接受的堿式鹽可以包含銨鹽、堿金屬鹽如鈉和鉀鹽、堿土金屬鹽如鈣和鎂鹽、與有機(jī)堿所成的鹽如二環(huán)己胺鹽、N-甲基-D葡糖胺鹽，與和氨基酸如精氨酸和賴氨酸所成的鹽。優(yōu)選地，含堿性氮基團(tuán)可被下述試劑季銨化，非限制性地包括低級(jí)烷基鹵化物如甲基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物；二烷基硫酸鹽如二甲基、二乙基、二丁基和二戊基的硫酸鹽；長(zhǎng)鏈鹵化物如癸基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基的氯化物、溴化物和碘化物；芳烷基鹵化物如苯基溴化物。作為優(yōu)選，本發(fā)明提供的化合物在藥學(xué)上可接受的等價(jià)物中，前藥指的是本發(fā)明化合物的衍生物，在表現(xiàn)其藥理學(xué)效用之前需要經(jīng)過(guò)生物轉(zhuǎn)化，如代謝。前藥由改善化學(xué)穩(wěn)定性、改善患者接受和依從度、改善生物利用度、延長(zhǎng)作用時(shí)間、改善了器官選擇性、改善制劑如增強(qiáng)水溶解性，或減少副作用如毒性的物質(zhì)配制而成。前藥可由本發(fā)明化合物用常規(guī)方法制備而成，見(jiàn)BURGER′SMEDICINALCHEMISTRYANDDRUGCHEMISTRY，第5版，Vol.1，pp.172-178，949-982(1995)。在本發(fā)明中，等排物指的是具有不同的分子式但顯示出相似的或同樣的物理特性的元素、官能團(tuán)、取代基、分子或離子。例如，四唑是羧酸的等排物，因?yàn)樗信c羧酸相似的性質(zhì)，即使它們有不同的分子式。典型地，兩個(gè)等排的分子有相似的或同樣的大小和形狀。理想地，等排的分子將是同構(gòu)的和能夠共同結(jié)晶。等排物分子其它物理性質(zhì)通常都包括沸點(diǎn)、密度、粘性和熱傳導(dǎo)性。然而，因?yàn)橥獠寇壍揽梢圆煌仉s化，故某些性質(zhì)可能會(huì)不同：偶極力矩、極性、極化作用、大小和形狀。等排物包括生物等排物。生物等排物之間，除了物理的相似性之外，共有某些生物學(xué)性質(zhì)。典型地，生物等排物與之相同的識(shí)別部位相互作用或廣泛地產(chǎn)生相似的生物學(xué)作用。在本發(fā)明中，代謝物指的是由代謝或由代謝過(guò)程產(chǎn)生的物質(zhì)。本發(fā)明提供了1，4-二氫-1，8-萘啶衍生物在制備鈣離子通道抑制劑藥物和乙酰膽堿酯酶抑制劑藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明還提供了1，4-二氫-1，8-萘啶衍生物在制備調(diào)節(jié)鈣體內(nèi)穩(wěn)態(tài)、治療心血管疾病、腦血管疾病或治療癡呆藥物中的應(yīng)用。其中，所述癡呆優(yōu)選為阿爾茨海默病或血管性癡呆。在本發(fā)明的實(shí)施例中，發(fā)明人利用膜片鉗技術(shù)及高內(nèi)涵篩選分析儀檢測(cè)了1，4-二氫-1，8-萘啶衍生物對(duì)L-型Ca2+通道阻滯活性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，1，4-二氫-1，8-萘啶衍生物對(duì)L-型Ca2+通道普遍具有較強(qiáng)的阻滯活性，且其活性優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照藥物Nifedipine和Nimodipine。在本發(fā)明的實(shí)施例中，發(fā)明人檢測(cè)了1，4-二氫-1，8-萘啶衍生物對(duì)乙酰膽堿酯酶的抑制活性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，1，4-二氫-1，8-萘啶衍生物能夠抑制乙酰膽堿酯酶的活性。綜合上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，本發(fā)明中的化合物是一種既能抑制乙酰膽堿酯酶活性，又能阻滯細(xì)胞外鈣通過(guò)鈣通道流入細(xì)胞的化合物，具有雙重活性。根據(jù)本發(fā)明的制備和效果實(shí)施例及本領(lǐng)域的知識(shí)，可以推斷出本發(fā)明通式中取代基R為芳基或雜芳基時(shí)，芳基或雜芳基的環(huán)上任意位置被鹵素原子、羥基、氰基、烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、炔基等取代基取代或成環(huán)，所得到的化合物在效果上相同或相近，且制備方法簡(jiǎn)單易行。其中，烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、炔基上的任意位置也可被取代基取代或其任意-CH2-被置換。根據(jù)本發(fā)明的制備和效果實(shí)施例及本領(lǐng)域的知識(shí)，可以推斷出本發(fā)明通式中取代基R1為氫、羥基、芳基、雜芳基、C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基時(shí)，C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基上的任意位置被取代基取代或其任意-CH2-被置換，所得到的化合物在效果上相同或相近，且制備方法簡(jiǎn)單易行。根據(jù)本發(fā)明的制備和效果實(shí)施例及本領(lǐng)域的知識(shí)，可以推斷出本發(fā)明通式中取代基R2為氫、鹵素原子、硝基、氨基、羥基、三鹵烷基、C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基時(shí)，C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基上的任意位置被取代基取代或其任意-CH2-被置換，所得到的化合物在效果上相同或相近，且制備方法簡(jiǎn)單易行。根據(jù)本發(fā)明的制備和效果實(shí)施例及本領(lǐng)域的知識(shí)，可以推斷出本發(fā)明通式中取代基R3為氫、C1-C8烷基或C3-C8環(huán)烷基時(shí)，C1-C8烷基或C3-C8環(huán)烷基上的任意位置被取代基取代或其任意-CH2-被置換，所得到的化合物在效果上相同或相近，且制備方法簡(jiǎn)單易行。根據(jù)本發(fā)明的制備和效果實(shí)施例及本領(lǐng)域的知識(shí)，可以推斷出本發(fā)明通式中取代基X為-O-或-NR7-時(shí)，所得到的化合物在效果上相同或相近，且制備方法簡(jiǎn)單易行。其中，R7為氫、芳基、雜芳基、C1-C8烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C8鏈烯基或C2-C8炔基。本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，其包含1，4-二氫-1，8-萘啶衍生物、藥學(xué)上可接受的等價(jià)物或其混合物以及藥學(xué)上可接受的載體。本發(fā)明通式化合物可經(jīng)過(guò)以下路線合成：具體實(shí)施方式本發(fā)明公開(kāi)了5-氨基-1，4-二氫-1，8-萘啶衍生物及其藥物組合物和用途，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借鑒本文內(nèi)容，適當(dāng)改進(jìn)工藝參數(shù)實(shí)現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動(dòng)對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)是顯而易見(jiàn)的，它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明的方法及應(yīng)用已經(jīng)通過(guò)較佳實(shí)施例進(jìn)行了描述，相關(guān)人員明顯能在不脫離本發(fā)明內(nèi)容、精神和范圍內(nèi)對(duì)本文所述的方法和應(yīng)用進(jìn)行改動(dòng)或適當(dāng)變更與組合，來(lái)實(shí)現(xiàn)和應(yīng)用本發(fā)明技術(shù)。為了使本領(lǐng)域的技術(shù)人員更好地理解本發(fā)明的技術(shù)方案，下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。本發(fā)明實(shí)施例中所制備的化合物如下：化合物1：5-氨基-7-乙基-2，6-二甲基-4-(3-硝基苯基)-1，4-2H-1，8-萘啶-3-羧酸甲酯，如S1所示?；衔?：5-氨基-7-乙基-4-(3-甲氧基苯基)-2，6-二甲基-1，4-2H-1，8-萘啶-3-羧酸乙酯，如S2所示。化合物3：5-氨基-7-乙基-4-(2，3二氯苯基)-2，6-二甲基-1，4-2H-1，8-萘啶-3-羧酸甲酯，如S3所示。化合物4：5-氨基-4-(3-硝基苯基)-2-甲基-6-乙基-7-丙基-1，4-2H-1，8-萘啶-3-羧酸甲酯，如S4所示?；衔?：5-氨基-7-乙基-2，6-二甲基-4-(3-氯苯基)-1，4-2H-1，8-萘啶-3-羧酸乙酯，如S5所示?；衔?：5-氨基-6-乙基-2-甲基-4-(4-氟苯基)-7-丙基-1，4-2H-1，8-萘啶-3-羧酸乙酯，如S6所示?；衔?：5-氨基-4-(2-氯苯基)-7-乙基-2，6-二甲基-1，4-2H-1，8-萘啶-3-羧酸異丙酯，如S7所示?；衔?：5-氨基-4-(2-氟苯基)-7-乙基-2，6-二甲基-1，4-2H-1，8-萘啶-3-羧酸異丙酯，如S8所示?；衔?：5-氨基-4-(3-硝基苯基)-6-乙基-2-甲基-7-丙基-1，4-2H-1，8-萘啶-3-羧酸異丙酯，如S9所示?；衔?0：5-氨基-4-(2-氯苯基)-7-乙基-2，6-二甲基-1，4-2H-1，8-萘啶-3-羧酸烯丙酯，如S10所示?；衔?1：5-氨基-4-(2-氯苯基)-7-乙基-2，6-二甲基-1，4-2H-1，8-萘啶-3-羧酸-2-甲氧基乙酯，如S11所示?；衔?2：5-氨基-4-(2-氟苯基)-6-乙基-2-甲基-7-丙基-1，4-2H-1，8-萘啶-3-羧酸烯丙酯，如S12所示?；衔?3：5-氨基-4-(3-硝基苯基)-6-乙基-2-甲基-7-丙基-1，4-2H-1，8-萘啶-3-羧酸-2，2，2-三氟乙酯，如S13所示。化合物14：5-氨基-4-(2-氟苯基)-7-乙基-2，6-二甲基-1，4-2H-1，8-萘啶-3-羧酸-2，2，2-三氟乙酯，如S14所示?；衔?5：5-氨基-4-(2，3，4，5，6-五氟苯基)-7-乙基-2，6-二甲基-1，4-2H-1，8-萘啶-3-羧酸-乙酯，如S15所示?；衔?6：5-氨基-4-(2-甲氧基苯基)-7-乙基-2，6-二甲基-1，4-2H-1，8-萘啶-3-羧酸-乙酯，如S16所示?；衔?7：5-氨基-4-(3-氟苯基)-2，6-二乙基-7-丙基-1，4-2H-1，8-萘啶-3-羧酸-甲酯，如S17所示?；衔?8：5-氨基-4-(2-氯苯基)-2-三氟甲基-6-甲基-7-乙基-1，4-2H-1，8-萘啶-3-羧酸-乙酯，如S18所示?；衔?9：5-氨基-4-(3-三氟甲基苯基)-7-乙基-2，6-二甲基-1，4-2H-1，8-萘啶-3-羧酸-乙酯，如S19所示?；衔?0：5-氨基-4-(3-氟苯基)-7-乙基-2，6-二甲基-1，4-2H-1，8-萘啶-3-羧酸-炔丙酯，如S20所示?；衔?1：5-氨基-4-苯基-7-乙基-2，6-二甲基-1，4-2H-1，8-萘啶-3-羧酸-環(huán)丙甲基酯，如S21所示。化合物22：5-氨基-4-苯基-7-乙基-2，6-二甲基-1，4-2H-1，8-萘啶-3-羧酸-氰乙基酯，如S22所示。化合物23：5-氨基-4-(嘧啶-5-基)-7-乙基-2，6-二甲基-1，4-2H-1，8-萘啶-3-羧酸-異丙酯，如S23所示實(shí)施例1：化合物S1的合成步驟1原料A的合成將丙二腈6.64g(10.06mmol)及4.63g無(wú)水乙醇(10.06mmol)混合，在反應(yīng)瓶中室溫?cái)嚢杈鶆蚝?，在冰浴下加入鹽酸的乙醚溶液(10.39mmol)，升至室溫?cái)嚢?h后有大量固體析出，置于冰箱冷藏過(guò)夜，過(guò)濾，洗滌，干燥即得A(12.1g)，收率80.4％，ESI-MS：113.1[M+H]+。步驟2化合物C1的合成將乙酰乙酸甲酯(13.0g，0.1mol)與醋酐(7.5g，0.073mol)混合，在冰浴攪拌下加入硫酸(0.8mL)，再加入3-硝基苯甲醛(16.1g，0.11mol)，固體緩慢溶解，攪拌1h后，TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)結(jié)束，加入95％乙醇100mL，攪拌均勻，冰箱冷藏1h后，過(guò)濾，固體干燥即得產(chǎn)品C120.1g收率80.7％。ESI-MS：250.2[M+H]+。步驟3中間體D1的合成將A(2.2g，0.015mol)，醋酸銨(3.3g，0.043mol)及10mL甲醇加入反應(yīng)瓶中，攪拌，回流反應(yīng)30min，加入C1(3.5g，0.014mol)，繼續(xù)回流30min，TLC檢測(cè)，反應(yīng)完全，真空下濃縮，粗品硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，得黃色固體粉末D1(2.4g)，收率54.5％。ESI-MS：313.4[M-H]-。步驟4將中間體D1(110mg，0.35mmol)溶于1，2-二氯乙烷10mL中，向其中加入3-戊酮(90.35mg，1.05mmol)和AlCl3(85mg0.63mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，微波(MW＝200W)反應(yīng)30min，TLC監(jiān)測(cè)原料反應(yīng)完全后，停止加熱，冷卻至室溫后，倒入THF∶H2O＝1∶1溶液(15mL)中，攪拌下滴加10％NaOH水溶液至PH＞7，混合物用二氯甲烷萃取(15mL×3)，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，分離得到產(chǎn)品S1黃色固體58.6mg，收率40％。ESI-MS[M+H]+＝383.1。1HNMR(400HZCDCl3)：δ1.20(3H，m)，1.94(3H，s)，2.71(2H，m)，2.51(3H，s)，3.62(3H，s)，5.44(2H，s)，7.56(1H，t，J＝8.0)，7.76(1H，d，J＝2.0)，8.05(1H，dd，J＝1.2，8.0)，8.38(1H，s).實(shí)施例2：化合物S2的合成步驟1化合物C2的合成將3-甲氧基苯甲醛(27.2g，0.2mol)、乙酰乙酸乙酯(26.1g，0.2mol)、催化量哌啶(0.85g，0.01mol)、醋酸(0.6g，0.01mol)及甲苯100mL加入反應(yīng)瓶中回流反應(yīng)4h，TLC檢測(cè)反應(yīng)結(jié)束后，加入乙酸乙酯稀釋反應(yīng)液，同時(shí)加適量水，進(jìn)行萃取，有機(jī)相用飽和NaHCO3溶液洗滌，飽和NaCl溶液洗滌，50×3，有機(jī)層污水Na2SO4干燥，即得油狀物產(chǎn)品C239.7g收率80％。ESI-MS：249.2[M+H]+。步驟2中間體D2的合成將A(2.2g，0.015mol)，醋酸銨(3.3g，0.043mol)及10mL甲醇加入反應(yīng)瓶中，攪拌，回流反應(yīng)30min，加入C2(3.47g，0.014mol)，繼續(xù)回流30min，TLC檢測(cè)，反應(yīng)完全，真空下濃縮，粗品硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，得黃色固體粉末D2(2.1g)，收率47.7％。ESI-MS：312.4[M-H]-。步驟3將中間體D2(110mg，0.35mmol)溶于1，2-二氯乙烷10mL中，向其中加入3-戊酮(90mg，1.05mmol)和AlCl3(85mg0.63mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，加熱回流反應(yīng)，TLC監(jiān)測(cè)原料反應(yīng)完全后，停止加熱，冷卻至室溫后，倒入THF∶H2O＝1∶1溶液(15mL)中，攪拌下滴加10％NaOH水溶液至PH＞7，混合物用二氯甲烷萃取(15mL×3)，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，分離得到產(chǎn)品S2黃色固體59.2mg，收率44％。ESI-MS[M+H]+＝382.1。1HNMR(400HzCDCl3)：1.21(6H，m)，1.90(3H，m)，2.33(3H，s)，2.68(2H，m)，3.69(3H，s)，4.06(2H，m)，5.18(1H，s)，6.73(1H，dd，J＝1.6，8.0)，6.86(1H，t，J＝8.0)，7.02(1H，s)，7.14(1H，t，J＝8.0).實(shí)施例3：化合物S3的合成步驟1化合物C3的合成將乙酰乙酸甲酯(13.0g，0.1mol)與醋酐(7.5g，0.073mol)混合，在冰浴攪拌下加入硫酸(0.8mL)，再加入2，3-二氯苯甲醛(18.9g，0.11mol)，固體緩慢溶解，攪拌1h后，TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)結(jié)束，加入95％乙醇100mL，攪拌均勻，冰箱冷藏1h后，過(guò)濾，固體干燥即得產(chǎn)品C323.5g收率86.1％。ESI-MS：274.2[M+H]+。步驟2中間體D3的合成將A(2.2g，0.015mol)，醋酸銨(3.3g，0.043mol)及10mL甲醇加入反應(yīng)瓶中，攪拌，回流反應(yīng)30min，加入C3(2.7g，0.01mol)，繼續(xù)回流30min，TLC檢測(cè)，反應(yīng)完全，真空下濃縮，粗品硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，得黃色固體粉末D3(2.1g)，收率63.6％。ESI-MS：337.2[M-H]-。步驟3將中間體D3(120mg，0.35mmol)溶于1，2-二氯乙烷10mL中，向其中加入3-戊酮(90mg，1.05mmol)和AlCl3(85mg0.63mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，加熱回流反應(yīng)，TLC監(jiān)測(cè)原料反應(yīng)完全后，停止加熱，冷卻至室溫后，倒入THF∶H2O＝1∶1溶液(15mL)中，攪拌下滴加10％NaOH水溶液至PH＞7，混合物用二氯甲烷萃取(15mL×3)，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，分離得到產(chǎn)品S3，黃色固體36.8mg，收率25.9％。ESI-MS[M+H]+＝406.0。1HNMR(400Hz，CDCl3)：1.21(3H，m)，1.97(3H，s)，2.46(3H，s)，2.66(2H，m)，3.64(3H，s)，4.51(2H，s)，5.15(1H，s)，7.11(1H，t，J＝8.0)，7.28(1H，dd，J＝1.6，8.0)，7.40(1H，dd，J＝1.6，8.0).實(shí)施例4：化合物S4的合成將中間體D1(100mg，0.32mmol)溶于1，2-二氯乙烷10mL中，向其中加入4-庚酮(75mg，0.64mmol)和AlCl3(85mg0.63mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，回流反應(yīng)，TLC監(jiān)測(cè)原料反應(yīng)完全后，停止加熱，冷卻至室溫后，倒入THF∶H2O＝1∶1溶液(15mL)中，攪拌下滴加10％NaOH水溶液至PH＞7，混合物用二氯甲烷萃取(15mL×3)，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1～3∶1)，分離得到產(chǎn)品S4黃色固體17.4mg，收率13％。ESI-MS[M+H]+＝411.3。1HNMR(400HzCDCl3)：1.02(3H，t，J＝7.2)，1.09(3H，t，J＝7.2)，1.65(2H，m)，2.44(3H，s)，2.59(2H，m)，2.65(2H，m)，3.69(3H，s)，4.48(2H，s)，5.15(1H，s)，7.44(1H，t，J＝8.0)，7.67(1H，d，J＝2.0)，8.06(1H，dd，J＝1.2，8.0)，8.21(1H，d，J＝2.0).實(shí)施例5：化合物S5的合成步驟1化合物C5的合成將3-氯苯甲醛(3.0g，0.02mol)、乙酰乙酸乙酯(2.8g，0.02mol)催化量哌啶8d、醋酸0.5mL)及甲苯15mL加入反應(yīng)瓶中回流過(guò)夜反應(yīng)，TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)結(jié)束，加水5mL，乙酸乙酯萃取(20mL×3)，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，得到產(chǎn)品C1淡黃色油狀物4.9g，收率94％。ESI-MS：253.2[M+H]+。步驟2中間體D5的合成將A(2.9g，0.019mol)，醋酸銨(4.5g，0.058mol)、C5(4.9g，0.019mol)及150mL甲醇加入反應(yīng)瓶中，攪拌，回流反應(yīng)45min，TLC檢測(cè)，反應(yīng)完全，真空下濃縮，粗品硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，得黃色固體粉末D5(1.0g)，收率16％。ESI-MS：316.2[M-H]-。步驟4將中間體D5(220mg，0.69mmol)溶于1，2-二氯乙烷30mL中，向其中加入4，4-二甲基環(huán)己酮(120mg，1.38mmol)和AlCl3(190mg1.43mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，加熱回流反應(yīng)，過(guò)夜，TLC監(jiān)測(cè)原料反應(yīng)完全后，停止加熱，冷卻至室溫后，倒入THF∶H2O＝1∶1溶液(15mL)中，攪拌下滴加10％NaOH水溶液至PH＞7，混合物用二氯甲烷萃取(15mL×3)，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，分離得到產(chǎn)品S5黃色油狀物124.3mg，收率46.6％。ESI-MS[M+H]+＝386.2。1HNMR(400HzDMSO-d6)：1.10(3H，m)，1.19(3H，m)，1.89(3H，s)，2.54(2H，m)，2.30(3H，s)，3.98(2H，m)，5.04(1H，s)，5.41(2H，m)，7.12(1H，m)，7.19(2H，t，J＝2)，7.42(1H，s).實(shí)施例6：化合物S6的合成步驟1化合物C6的合成將乙酰乙酸甲酯(6.5g，0.05mol)與醋酐(3.8g，0.036mol)混合，在冰浴攪拌下加入硫酸(0.4mL)，再加入4-氟苯甲醛(6.2g，0.05mol)，固體緩慢溶解，攪拌1h后，TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)結(jié)束，加入少量水淬滅反應(yīng)，加入二氯甲烷50mL，分離有機(jī)層，有機(jī)層水洗，干燥，濃縮，柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)即得產(chǎn)品C610.1g收率85.6％。ESI-MS：237.2[M+H]+。步驟2中間體D6的合成將A(2.2g，0.015mol)，醋酸銨(3.3g，0.043mol)、C6(3.5g，0.014mol)及40mL甲醇加入反應(yīng)瓶中，攪拌，回流反應(yīng)30min，TLC檢測(cè)，反應(yīng)完全，真空下濃縮，粗品硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，得黃色固體粉末D6(1.4g)，收率33.3％。ESI-MS：313.4[M-H]-。步驟3將中間體D6(220mg，0.69mmol)溶于1，2-二氯乙烷10mL中，向其中加入3-戊酮(120mg，1.38mmol)和AlCl3(190mg1.43mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，回流反應(yīng)，TLC監(jiān)測(cè)原料反應(yīng)完全后，停止加熱，冷卻至室溫后，倒入THF∶H2O＝1∶1溶液(15mL)中，攪拌下滴加10％NaOH水溶液至PH＞7，混合物用二氯甲烷萃取(15mL×3)，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1～3∶1)，分離得到產(chǎn)品S6黃色固體124.3mg，收率46.6％。ESI-MS：398.2[M+H]+。1HNMR(400HzDMSO-d6)：0.95(6H，m)，1.18(3H，m)，1.68(2H，m)，2.29(3H，s)，2.48(4H，m)，3.97(2H，m)，5.02(1H，s)，5.32(2H，s)，7.00(2H，m)，7.33(2H，m)，9.13(1H，s).實(shí)施例7：化合物S7的合成步驟1化合物C7的合成將2-氯苯甲醛(2.8g，0.02mol)、乙酰乙酸異丙酯(2.88g，0.02mol)、催化量的哌啶0.5mL、醋酸0.5mL及甲苯20mL加入反應(yīng)瓶中加熱回流反應(yīng)，TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)結(jié)束，加水10mL，乙酸乙酯萃取(20mL×3)，合并有機(jī)相，有機(jī)相依次用飽和NaHSO3、NaCl洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)，分離得到產(chǎn)品C7淡黃色油狀物4.8g，收率91％。ESI-MS：267.1[M+H]+。步驟2中間體D7的合成將A(2.7g，0.018mol)，醋酸銨(4.2g，0.054mol)及20mL甲醇加入反應(yīng)瓶中，攪拌，回流反應(yīng)30min，加入C7(4.8g，0.018mol)，繼續(xù)回流30min，TLC檢測(cè)，反應(yīng)完全，真空下濃縮，粗品硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，得黃色固體粉末D7(2.0g)，收率34％。ESI-MS：330.1[M-H]-。步驟3將中間體D7(331mg，1mmol)溶于1，2-二氯乙烷10mL中，向其中加入3-戊酮(129mg，1.5mmol)和AlCl3(200mg，1.5mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，加熱回流反應(yīng)過(guò)夜，TLC監(jiān)測(cè)原料反應(yīng)完全后，停止加熱，冷卻至室溫后，倒入THF∶H2O＝1∶1溶液(15mL)中，攪拌下滴加10％NaOH水溶液至PH＞7，混合物用二氯甲烷萃取(15mL×3)，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，分離得到產(chǎn)品S7黃色固體188.1mg，收率47％。ESI-MS[M+H]+＝400.0。1HNMR(CDCl3，400MHz)：7.27-7.55(4H，m)，6.86(1H，s)，5.43(1H，s)，4.87(1H，m)，4.10(2H，s)，2.65-2.78(2H，m)，2.36(3H，s)，1.95(3H，s)，1.15-1.42(6H，m)，1.00-1.09(3H，m).實(shí)施例8：化合物S8的合成步驟1化合物C8的合成將2-氟苯甲醛(1.24g，0.01mol)、乙酰乙酸異丙酯(1.44g，0.01mol)、催化量的哌啶0.25mL、醋酸0.25mL及甲苯20mL加入反應(yīng)瓶中加熱回流反應(yīng)，TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)結(jié)束，加水10mL，乙酸乙酯萃取(20mL×3)，合并有機(jī)相，有機(jī)相依次用飽和NaHSO3、NaCl洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)，分離得到產(chǎn)品C8淡黃色油狀物1.4g，收率56％。ESI-MS：267.1[M+H]+。步驟2中間體D8的合成將A(0.83g，5.6mmol)，醋酸銨(1.3g，16.8mmol)及15mL甲醇加入反應(yīng)瓶中，攪拌，回流反應(yīng)30min，加入C8(1.4g，5.6mmol)，繼續(xù)回流30min，TLC檢測(cè)，反應(yīng)完全，真空下濃縮，粗品硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，得黃色固體粉末D8(0.63g)，收率36％。ESI-MS：314.1[M-H]-。步驟3將中間體D8(261mg，0.83mmol)溶于1，2-二氯乙烷10mL中，向其中加入3-戊酮(107mg，1.25mmol)和AlCl3(166mg，1.25mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，加熱回流反應(yīng)過(guò)夜，TLC監(jiān)測(cè)原料反應(yīng)完全后，停止加熱，冷卻至室溫后，倒入THF∶H2O＝1∶1溶液(15mL)中，攪拌下滴加10％NaOH水溶液至PH＞7，混合物用二氯甲烷萃取(15mL×3)，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，分離得到產(chǎn)品S8黃色固體153mg，收率48％。ESI-MS[M+H]+＝384.3。1HNMR(CDCl3，400MHz)：7.74(1H，s)，6.90-7.40(4H，m)，5.33(1H，s)，4.91-4.96(1H，m)，4.14(2H，s)，2.60-2.68(2H，m)，2.48(3H，s)，1.96(3H，s)，1.26(3H，d，J＝6.4Hz)，1.18(3H，d，J＝7.6Hz)，1.02(3H，d，J＝6.4Hz).實(shí)施例9：化合物S9的合成步驟1化合物C9的合成將3-硝基苯甲醛(1.51g，0.01mol)、乙酰乙酸異丙酯(1.44g，0.01mol)、催化量的哌啶0.25mL、醋酸0.25mL及甲苯20mL加入反應(yīng)瓶中加熱回流反應(yīng)，TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)結(jié)束，加水10mL，乙酸乙酯萃取(20mL×3)，合并有機(jī)相，有機(jī)相依次用飽和NaHSO3、NaCl洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，得到產(chǎn)品C9淡黃色油狀物2.77g，收率：定量。ESI-MS：278.1[M+H]+。步驟2中間體D9的合成將A(1.49g，10mmol)，醋酸銨(2.31g，30mmol)及15mL甲醇加入反應(yīng)瓶中，攪拌，回流反應(yīng)30min，加入C9(2.77g，10mmol)，繼續(xù)回流30min，TLC檢測(cè)，反應(yīng)完全，真空下濃縮，粗品硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，得黃色固體粉末D9(1.92g)，收率56％。ESI-MS：341.1[M-H]-。步驟3將中間體D9(342mg，1mmol)溶于1，2-二氯乙烷10mL中，向其中加入4-庚酮0.6mL和AlCl3(200mg，1.5mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，加熱回流反應(yīng)過(guò)夜，TLC監(jiān)測(cè)原料反應(yīng)完全后，停止加熱，冷卻至室溫后，倒入THF∶H2O＝1∶1溶液(15mL)中，攪拌下滴加10％NaOH水溶液至PH＞7，混合物用二氯甲烷萃取(15mL×3)，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，分離得到產(chǎn)品S9黃色固體198mg，收率45％。ESI-MS[M+H]+＝439.3。1HNMR(CDCl3，400MHz)：8.24(1H，s)，8.04(1H，d，J＝8.0Hz)，7.67(1H，d，J＝7.6Hz)，7.42(1H，t，J＝8.0Hz)，7.05(1H，s)，5.15(1H，s)，5.00-5.06(1H，m)，4.11(2H，s)，2.30-2.53(4H，m)，2.42(3H，s)，1.65-1.71(2H，m)，1.31(3H，d，J＝6.0Hz)，1.20(3H，d，J＝6.4Hz)，1.09(3H，t，J＝7.6Hz)，1.02(3H，t，J＝7.2Hz)。實(shí)施例10：化合物S10的合成步驟1化合物C10的合成將2-氯苯甲醛(2.8g，0.02mol)、乙酰乙酸烯丙酯(2.84g，0.02mol)、催化量的哌啶0.5ml、醋酸0.5ml及甲苯20ml加入反應(yīng)瓶中加熱回流反應(yīng)，TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)結(jié)束，加水10mL，乙酸乙酯萃取(20mL×3)，合并有機(jī)相，有機(jī)相依次用飽和NaHSO3、NaCl洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，得到產(chǎn)品C10淡黃色油狀物5.28g，收率：定量。步驟2中間體D10的合成將A(1.49g，10mmol)，醋酸銨(2.31g，30mmol)及15ml甲醇加入反應(yīng)瓶中，攪拌，回流反應(yīng)30min，加入C10(2.64g，1Ommol)，繼續(xù)回流30min，TLC檢測(cè)，反應(yīng)完全，真空下濃縮，粗品硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，得黃色固體粉末D10(1.33g)，收率40％。ESI-MS：328.1[M-H]-。步驟3將中間體D10(329mg，1mmol)溶于1，2-二氯乙烷10mL中，向其中加入3-戊酮1mL和AlCl3(200mg，1.5mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，加熱回流反應(yīng)過(guò)夜，TLC監(jiān)測(cè)原料反應(yīng)完全后，停止加熱，冷卻至室溫后，倒入THF∶H2O＝1∶1溶液(15mL)中，攪拌下滴加10％NaOH水溶液至PH＞7，混合物用二氯甲烷萃取(15mL×3)，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，分離得到產(chǎn)品S10黃色固體303mg，收率76％。ESI-MS[M+H]+＝398.2。1HNMR(CDCl3，400MHz)：7.50(1H，d，J＝7.6Hz)，7.27(1H，d，J＝7.6Hz)，7.17(1H，t，J＝7.6Hz)，7.09(1H，t，J＝7.6Hz)，6.70(1H，s)，5.86-5.93(1H，m)，5.47(1H，s)，5.13(1H，s)，5.08-5.12(1H，m)，4.57-4.60(2H，m)，4.50(2H，s)，2.58-2.72(2H，m)，2.46(3H，s)，1.96(3H，s)，1.20(3H，t，J＝7.6Hz).實(shí)施例11：化合物S11的合成步驟1化合物C11的合成將2-氯苯甲醛(2.8g，0.02mol)、乙酰乙酸甲氧基乙酯(3.2g，0.02mol)、催化量的哌啶0.5ml、醋酸0.5ml及甲苯20ml加入反應(yīng)瓶中加熱回流反應(yīng)，TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)結(jié)束，加水10mL，乙酸乙酯萃取(20mL×3)，合并有機(jī)相，有機(jī)相依次用飽和NaHSO3、NaCl洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，得到產(chǎn)品C11淡黃色油狀物5.1g，收率：定量。ESI-MS：283.1[M+H]+。步驟2中間體D5的合成將A(2.69g，18.1mmol)，醋酸銨(4.19g，54.3mmol)及15ml甲醇加入反應(yīng)瓶中，攪拌，回流反應(yīng)30min，加入C11(5.1g，18.1mmol)，繼續(xù)回流30min，TLC檢測(cè)，反應(yīng)完全，真空下濃縮，粗品硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，得黃色固體粉末D11(3.31g)，收率53％。ESI-MS：348.1[M-H]-。步驟3將中間體D11(280mg，0.81mmol)溶于1，2-二氯乙烷10mL中，向其中加入3-戊酮1mL和AlCl3(160mg，1.2mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，加熱回流反應(yīng)過(guò)夜，TLC監(jiān)測(cè)原料反應(yīng)完全后，停止加熱，冷卻至室溫后，倒入THF∶H2O＝1∶1溶液(15mL)中，攪拌下滴加10％NaOH水溶液至PH＞7，混合物用二氯甲烷萃取(15mL×3)，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，分離得到產(chǎn)品S11黃色固體223mg，收率66％。ESI-MS[M+H]+＝416.2。1HNMR(CDCl3，400MHz)：7.50(1H，d，J＝7.6Hz)，7.27(1H，d，J＝7.6Hz)，7.17(1H，t，J＝7.6Hz)，7.09(1H，t，J＝7.6Hz)，6.70(1H，s)，5.46(1H，s)，4.51(2H，s)，4.15-4.28(2H，m)，3.55-3.67(2H，m)，3.33(3H，s)，2.48-2.59(2H，m)，2.45(3H，s)，1.96(3H，s)，1.20(3H，t，J＝7.6Hz).實(shí)施例12：化合物S12的合成步驟1化合物C12的合成將2-氟苯甲醛(0.62g，5mmol)、乙酰乙酸烯丙酯(0.71g，5mmol)、催化量的哌啶0.25ml、醋酸0.25ml及甲苯10ml加入反應(yīng)瓶中加熱回流反應(yīng)，TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)結(jié)束，加水10mL，乙酸乙酯萃取(10mL×3)，合并有機(jī)相，有機(jī)相依次用飽和NaHSO3、NaCl洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，得到產(chǎn)品C12淡黃色油狀物2g，收率：定量。ESI-MS：249.1[M+H]+。步驟2中間體D12的合成將A(1.2g，8.1mmol)，醋酸銨(1.87g，24.3mmol)及20ml甲醇加入反應(yīng)瓶中，攪拌，回流反應(yīng)30min，加入C12(2.64g，10mmol)，繼續(xù)回流30min，TLC檢測(cè)，反應(yīng)完全，真空下濃縮，粗品硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，得黃色固體粉末D12(1.6g)，收率63％。ESI-MS：312.1[M-H]-。步驟3將中間體D12(313mg，1mmol)溶于1，2-二氯乙烷10mL中，向其中加入4-庚酮1mL和AlCl3(200mg，1.5mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，加熱回流反應(yīng)過(guò)夜，TLC監(jiān)測(cè)原料反應(yīng)完全后，停止加熱，冷卻至室溫后，倒入THF∶H2O＝1∶1溶液(15mL)中，攪拌下滴加10％NaOH水溶液至PH＞7，混合物用二氯甲烷萃取(15mL×3)，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，分離得到產(chǎn)品S12黃色固體213mg，收率52％。ESI-MS[M+H]+＝410.3。1HNMR(CDCl3，400MHz)：7.39(1H，t，J＝6.8Hz)，7.11-7.16(1H，m)，6.69-7.10(2H，m)，6.76(1H，s)，5.83-5.93(1H，m)，5.38(1H，s)，5.14-5.17(1H，m)，5.12(1H，s)，4.51-4.58(2H，m)，4.37(2H，s)，2.50-2.58(3H，m)，2.47(3H，s)，2.28-2.38(1H，m)，1.60-1.72(2H，m)，1.09(3H，t，J＝7.2Hz)，1.02(3H，t，J＝7.2Hz).實(shí)施例13：化合物S13的合成步驟1化合物B13的合成將2，2，6-三甲基-1，3-二惡英-4-酮(7.1g，0.05mol)和2，2，2-三氟乙醇(10g，0.1mol)溶于二甲苯(60mL)中，加熱至90℃，反應(yīng)攪拌過(guò)夜，待反應(yīng)完全后，冷卻至室溫直接用于下一步。步驟2化合物C13的合成將3-硝基苯甲醛(2.5g，16.7mmol)、乙酰乙酸-2，2，2-三氟乙酯(約16.7mmol)、催化量的哌啶0.5ml、醋酸0.5ml及甲苯20ml加入反應(yīng)瓶中至90℃，TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)結(jié)束，加水10mL，乙酸乙酯萃取(30mL×3)，合并有機(jī)相，有機(jī)相依次用飽和NaHSO3、NaCl洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)，分離得到產(chǎn)品C13淡黃色油狀物1.0g，兩步收率19％。ESI-MS：318.1[M+H]+。步驟3中間體D13的合成將A(0.47g，3.15mmol)，醋酸銨(0.73g，9.45mmol)及20ml甲醇加入反應(yīng)瓶中，攪拌，回流反應(yīng)30min，加入C13(1.0g，3.15mmol)，繼續(xù)回流30min，TLC檢測(cè)，反應(yīng)完全，真空下濃縮，粗品硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，得黃色固體粉末D13(0.83g)，收率69％。ESI-MS：381.1[M-H]-。步驟4將中間體D13(357mg，0.93mmol)溶于1，2-二氯乙烷10mL中，向其中加入4-庚酮1mL和AlCl3(186mg，1.4mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，加熱回流反應(yīng)過(guò)夜，TLC監(jiān)測(cè)原料反應(yīng)完全后，停止加熱，冷卻至室溫后，倒入THF∶H2O＝1∶1溶液(15mL)中，攪拌下滴加10％NaOH水溶液至PH＞7，混合物用二氯甲烷萃取(15mL×3)，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，分離得到產(chǎn)品S13黃色固體267mg，收率60％。ESI-MS[M+H]+＝479.3。1HNMR(CDCl3，400MHz)：8.18(1H，s)，8.06(1H，d，J＝8.4Hz)，7.68(1H，d，J＝7.6Hz)，7.44(1H，d，J＝8.0Hz)，6.99(1H，s)，5.12(1H，s)，4.40-4.52(2H，m)，4.09(2H，s)，2.50-2.63(3H，m)，2.44(3H，s)，2.32-2.40(1H，m)，1.66-1.73(2H，m)，1.09(3H，t，J＝7.6Hz)，1.03(3H，t，J＝7.6Hz).實(shí)施例14：化合物S14的合成步驟1化合物C14的合成將2-氟苯甲醛(2.07g，16.7mmol)、乙酰乙酸-2，2，2-三氟乙酯(約16.7mmol)、催化量的哌啶0.5mL、醋酸0.5mL及甲苯20mL加入反應(yīng)瓶中至90℃，TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)結(jié)束，加水10mL，乙酸乙酯萃取(30mL×3)，合并有機(jī)相，有機(jī)相依次用飽和NaHSO3、NaCl洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)，分離得到產(chǎn)品C14淡黃色油狀物0.93g，兩步收率19％。ESI-MS：291.1[M+H]+。步驟2中間體D14的合成將A(0.48g，3.2mmol)，醋酸銨(0.74g，9.6mmol)及20mL甲醇加入反應(yīng)瓶中，攪拌，回流反應(yīng)30min，加入C14(0.93g，3.2mmol)，繼續(xù)回流30min，TLC檢測(cè)，反應(yīng)完全，真空下濃縮，粗品硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，得黃色固體粉末D14(0.63g)，收率56％。ESI-MS：354.1[M-H]-。步驟3將中間體D14(264mg，0.74mmol)溶于1，2-二氯乙烷10mL中，向其中加入3-戊酮1.0mL和AlCl3(148mg，1.11mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，加熱回流反應(yīng)過(guò)夜，TLC監(jiān)測(cè)原料反應(yīng)完全后，停止加熱，冷卻至室溫后，倒入THF∶H2O＝1∶1溶液(15mL)中，攪拌下滴加10％NaOH水溶液至PH＞7，混合物用二氯甲烷萃取(15mL×3)，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，分離得到產(chǎn)品S14黃色固體152mg，收率49％。ESI-MS[M+H]+＝424.2。1HNMR(CDCl3，400MHz)：7.37(1H，td，J1＝7.6Hz，J2＝2.0Hz)，7.13-7.19(1H，m)，6.97-7.08(2H，m)，6.94(1H，s)，5.34(1H，s)，4.36-4.43(2H，m)，4.35(2H，s)，2.59-2.70(2H，m)，2.48(3H，s)，1.98(3H，s)，1.20(3H，t，J＝7.6Hz).實(shí)施例15：化合物S15的合成步驟1五氟苯甲醛(500mg，2.55mmol)，乙酰乙酸乙酯(431mg，3.32mmol)，中間體A(383mg，2.55mmol)和醋酸銨(256mg，3.32mmol)置于圓底燒瓶中，加入30mL甲醇溶解，加熱回流下攪拌5h，冷卻至室溫，在真空下濃縮，硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，分離得到黃色油狀物的目標(biāo)中間體D15，102mg，收率11％。ESI-MS(m/z)：374.0[M+H]+，396.6[M+Na]+。步驟2將中間體D15(80mg，0.214mmol)置于微波反應(yīng)管中，用3mL1，2-二氯乙烷溶解，向其中加入3-戊酮(110mg，1.287mmol)和三氯化鋁(85.5mg，0.643mmol)，置于微波反應(yīng)器中進(jìn)行反應(yīng)，溫度T＝100℃，時(shí)間t＝3h，TLC監(jiān)測(cè)原料反應(yīng)完全后，停止反應(yīng)，冷卻至室溫后，倒入THF∶H2O＝1∶1溶液(10mL)中，攪拌下滴加10％NaOH水溶液至PH＞7，混合物用二氯甲烷萃取(10mL×3)，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，分離得到產(chǎn)品S15黃色油狀物24mg，收率25％。ESI-MS(m/z)：442[M+H]+。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.54(1H，s)，5.55(1H，s)，4.99(2H，s)，3.94(2H，m)，2.54(2H，m)，2.31(3H，s)，1.90(3H，s)，1.11(6H，t，J＝7.2Hz).實(shí)施例16：化合物S16的合成步驟1稱取2-甲氧基苯甲醛(6.8g，0.05mmol)溶于甲苯(20mL)中，向其中加入哌啶(3.1mL)，乙酰乙酸乙酯(8.4g，0.06mmol)和醋酸(6.2mL)，加熱回流過(guò)夜，真空下濃縮，濃縮液中加入水10mL，二氯甲烷萃取(20mL×3)，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)，分離得到產(chǎn)品C16，黃色油狀物8.6g，收率68.7％。步驟2將A(2.2g，14.6mmol)，醋酸銨(3.3g，42.8mmol)及20mL甲醇加入反應(yīng)瓶中，攪拌，回流反應(yīng)30min，加入C16(3.5g，14.1mmol)，繼續(xù)回流30min，TLC檢測(cè)，反應(yīng)完全，真空下濃縮，粗品硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，得黃色固體D16(1.1g)，收率27％。步驟3參照實(shí)施例15中S15的合成方法，利用中間體D16(80mg，0.256mmol)，3-戊酮(132mg，1.53mmol)和三氯化鋁(68mg，0.511mmol)進(jìn)行微波反應(yīng)，得到目標(biāo)產(chǎn)品S16黃色固體28mg，收率29％。ESI-MS(m/z)：382[M+H]+。1HNMR(400MHz，CDCl3)：δ7.38(1H，m)，7.15(1H，m)，6.88(1H，m)，5.47(1H，s)，4.89(2H，brs)，4.02(2H，m)，3.99(3H，s)，2.62(2H，q，J＝7.6Hz)，2.48(3H，s)，1.95(3H，s)，1.15(6H，m).實(shí)施例17：化合物S17的合成步驟1參照實(shí)施例15中D15的合成方法，3-氟苯甲醛(1.5g，0.012mol)，丙酰乙酸甲酯(2.04g，0.015mol)，中間體A(1.8g，0.012mol)和醋酸銨(1.1g，0.014mol)反應(yīng)得到目標(biāo)中間體D17，黃色固體365mg，收率11％。步驟2參照實(shí)施例15中S15的合成方法，利用中間體D17(150mg，0.5mmol)，4-庚酮(510mg，5.0mmol)和三氯化鋁(133mg，1.0mmol)進(jìn)行微波反應(yīng)，得到目標(biāo)產(chǎn)品S17黃色固體11mg，收率6％。ESI-MS(m/z)：398[M+H]+。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.19(1H，s)，7.24-7.18(1H，m)，7.14-7.09(2H，m)，6.92-6.87(1H，m)，5.46(2H，brs)，5.08(1H，s)，3.55(3H，s)，2.82-2.75(1H，m)，2.74-2.60(1H，m)，2.49-2.30(4H，m)，1.61-1.52(2H，m)，1.09(3H，t，J＝7.2Hz)，0.95-0.92(6H，m).實(shí)施例18：化合物S18的合成步驟1參照實(shí)施例15中D15的合成方法，2-氯苯甲醛(1.4g，0.01mol)，三氟乙酰乙酸乙酯(2.4g，0.013mol)，中間體A(1.5g，0.01mol)和醋酸銨(0.92g，0.012mol)反應(yīng)得到目標(biāo)中間體D18，黃色固體430mg，收率12％。步驟2參照實(shí)施例15中S15的合成方法，利用中間體D18(120mg，0.323mmol)，3-戊酮(167mg，1.941mmol)和三氯化鋁(85.9mg，0.646mmol)進(jìn)行微波反應(yīng)，得到目標(biāo)產(chǎn)品S18黃色固體51mg，收率36％。ESI-MS(m/z)：440[M+H]+。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)：δ9.52(1H，brs)，7.41-7.35(2H，m)，7.29(1H，t，J＝7.2Hz)，7.23-7.19(1H，m)，5.36(1H，s)，5.23(2H，brs)，4.01-3.97(2H，m)，2.58-2.55(2H，m)，1.88(3H，s)，1.10-1.09(6H，m).實(shí)施例19：化合物S19的合成步驟1化合物C19的合成乙酰乙酸乙酯(1.95g，0.015mol)，溶于30mL甲苯中，同時(shí)加入間三氟苯甲醛(2.61g，0.015mol)，在攪拌的的過(guò)程中緩慢滴加2滴哌啶，攪拌2min，隨后緩慢滴加2滴醋酸，繼續(xù)攪拌，有大量白色煙霧產(chǎn)生，待反應(yīng)平穩(wěn)后，將上述反應(yīng)體系至于95℃油浴中加熱回流，TLC檢測(cè)，4h后停止反應(yīng)，冷卻、并將反應(yīng)溶劑于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，粗品經(jīng)硅膠柱層析色譜進(jìn)行分離，采用石油醚與乙酸乙酯的體積比為20∶1-10∶1的梯度進(jìn)行洗脫，得到淡黃色油狀化合物C19(3.0g)，收率70％。步驟2中間體D19的合成將A(2.35g，0.015mol)置于100mL反應(yīng)瓶中，加入30mL甲醇，然后加入醋酸銨(3.0g，0.038mol)，于80℃油浴中加熱回流，攪拌0.5h后，停止攪拌，向該體系中加入C19(3.0g，0.01mol)，繼續(xù)回流攪拌，TLC檢測(cè)，1h后停止反應(yīng)，冷卻，并將反應(yīng)溶劑于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，粗品經(jīng)硅膠柱層析色譜進(jìn)行分離，采用石油醚與乙酸乙酯的體積比為4∶1-2∶1的梯度進(jìn)行洗脫，得到白色固體化合物D19(2g)，收率35％。步驟3將D19(70mg，0.20mmol)溶于15mL的1，2-二氯乙烷中，加入3-戊酮(100mg，1.2mmol)，然后加入三氯化鋁(40mg，0.3mmol)，上述體系于95℃油浴中加熱回流攪拌，TLC檢測(cè)，48h后停止反應(yīng)，冷卻，將上述反應(yīng)液倒于30mL的四氫呋喃/水＝1∶1的混合溶液中，緩慢滴加10％的NaOH溶液調(diào)節(jié)PH＞7.0，攪拌0.5h后，兩相分層，水相用二氯甲烷(3×10mL)萃取，合并有機(jī)相用飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾、濃縮后，硅膠柱層析色譜進(jìn)行分離，采用石油醚與乙酸乙酯的體積比為6∶1-4∶1的梯度進(jìn)行洗脫，得到化合物S19，35mg，收率39.3％。ESI-MS[M+H]+＝420.2。1HNMR(400MHz，CDCl3)：δ1.29(6H，m)，1.99(3H，s)，2.41(3H，s)，2.66(2H，m)，4.01(2H，s)，4.13(2H，m)，5.10(1H，s)，6.22(1H，m)，7.36(1H，t，J＝8.0Hz)，7.43(1H，d，J＝7.6Hz)，7.50(1H，d，J＝7.6Hz)，7.63(1H，s).實(shí)施例20：化合物S20的合成步驟1.稱量2，2，6-三甲基-4H-1，3-二噁英-4-酮(5.4g，0.037mol)，溶于60mL二甲苯中，然后緩慢滴加丙炔醇(2.76g，0.049mol)，將上述體系至于115℃油浴中加熱回流，TLC檢測(cè)，4h后停止反應(yīng)，冷卻，并將反應(yīng)溶劑于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，粗品經(jīng)硅膠柱層析色譜進(jìn)行分離，采用石油醚與乙酸乙酯的體積比為40∶1-20∶1的梯度進(jìn)行洗脫，得到無(wú)色油狀化合物B20(4.11g)，收率77.4％，ESI-MS[M+H]+＝141.1。步驟2.稱量化合物B20(2.2g，0.015mol)，溶于30mL甲苯中，同時(shí)加入間氟苯甲醛(1.94g，0.015mol)，在攪拌的的過(guò)程中緩慢滴加2滴哌啶，攪拌2min，隨后緩慢滴加2滴醋酸，繼續(xù)攪拌，有大量白色煙霧產(chǎn)生，待反應(yīng)平穩(wěn)后，將上述反應(yīng)體系至于95℃油浴中加熱回流，TLC檢測(cè)，4h后停止反應(yīng)，冷卻、并將反應(yīng)溶劑于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，粗品經(jīng)硅膠柱層析色譜進(jìn)行分離，采用石油醚與乙酸乙酯的體積比為20∶1-10∶1的梯度進(jìn)行洗脫，得到淡黃色油狀化合物C20(2.078g)，收率54％。步驟3.將化合物A(1.5g，0.01mol)置于100mL反應(yīng)瓶中，加入75mL甲醇，然后加入醋酸銨(1.6g，0.01mol)，于80℃油浴中加熱回流，攪拌0.5h后，停止攪拌，向該體系中加入上述制得化合物C20(2.1g，0.01mol)，繼續(xù)回流攪拌，TLC檢測(cè)，1h后停止反應(yīng)，冷卻，并將反應(yīng)溶劑于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干，粗品經(jīng)硅膠柱層析色譜進(jìn)行分離，采用石油醚與乙酸乙酯的體積比為4∶1-2∶1的梯度進(jìn)行洗脫，得到白色固體化合物D20(1.34g)，收率43％。步驟4.將上述制得的化合物D20(260mg，0.8mmol)溶于15mL的1，2-二氯乙烷中，加入3-戊酮(345mg，4.2mmol)，三氯化鋁(319mg，2.5mmol)，上述體系于95℃油浴中加熱回流攪拌，TLC檢測(cè)，48h后停止反應(yīng)，冷卻，將上述反應(yīng)液倒于30mL的四氫呋喃/水＝1∶1的混合溶液中，緩慢滴加10％的NaOH溶液調(diào)節(jié)PH＞7.0，攪拌0.5h后，兩相分層，水相用二氯甲烷(3×10mL)萃取，合并有機(jī)相用飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾、濃縮后，硅膠柱層析色譜進(jìn)行分離，采用石油醚與乙酸乙酯的體積比為6∶1-4∶1的梯度進(jìn)行洗脫，得到化合物S20，90mg，收率30％。ESI-MS[M+H]+＝380.2；ESI-MS[M-H]-＝378.2。1HNMR(400MHz，CDCl3)：δ1.23(3H，t，J＝7.6Hz)，1.99(3H，s)，2.42(3H，s)，2.47(1H，m)，2.68(2H，m)，4.04(2H，s)，4.70(2H，m)，5.07(1H，s)，6.69(1H，m)，6.87(1H，m)，7.07(1H，m)，7.20(1H，m).實(shí)施例21：化合物S21的合成步驟1化合物C21的合成將乙酰乙酸環(huán)丙甲基酯(15.6g，0.1mol)與醋酐(7.5g，0.073mol)混合，在冰浴攪拌下加入硫酸(0.8mL)，加入苯甲醛(11.6g，0.11mol)，固體緩慢溶解，攪拌1h后，TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)結(jié)束，加水5mL，二氯甲烷萃取(20mL×3)，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)，分離得到產(chǎn)品C21淡黃色油狀物10.98g，收率45％。步驟2中間體D21的合成將A(1.24g，8.4mmol)，醋酸銨(1.94g，25.2mmol)及10mL甲醇加入反應(yīng)瓶中，攪拌，回流反應(yīng)30min，加入C21(2.04g，84mmol)，繼續(xù)回流30min，TLC檢測(cè)，反應(yīng)完全，真空下濃縮，粗品硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，得黃色固體粉末D21(0.71g)，收率56％。步驟3準(zhǔn)確稱取D21(280mg，0.91mmol)，溶于10mL1，2-二氯乙烷溶液中，攪拌溶解，然后緩慢滴加3-戊酮(117mg，1.36mmol)，加入AlCl3(181mg，1.36mmol)。加熱至回流反應(yīng)12h，TLC檢測(cè)無(wú)原料，冷卻。加入THF∶H2O＝1∶1水溶液10mL稀釋。滴加1mol/LNaOH水溶液調(diào)節(jié)PH至堿性，室溫?cái)嚢?0min，二氯甲烷萃取20mL×3，合并有機(jī)層，干燥，柱層析，二氯甲烷∶甲醇＝100∶1～40∶1，得到淡黃色固體50mg，收率14.66％。ESI-MS：378.1[M+H]+。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.86(2H，m)，1.24(6H，m)，1.64(2H，m)，1.98(3H，s)，2.11(2H，m)，2.68(3H，s)，2.70(1H，m)，4.21(2H，m)，4.97(1H，m)，7.19(1H，m)，7.28(2H，m)，7.36(2H，m)。實(shí)施例22：化合物S22的合成步驟1化合物C22的合成將乙酰乙酸氰基乙酯(15.5g，0.1mol)與醋酐(7.5g，0.073mol)混合，在冰浴攪拌下加入硫酸(0.8mL)，再加入苯甲醛(11.6g，0.11mol)，固體緩慢溶解，攪拌1h后，TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)結(jié)束，加水5mL，二氯甲烷萃取(20mL×3)，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)，分離得到產(chǎn)品C22淡黃色油狀物18.96g，收率50.4％。步驟2中間體D22的合成將A(1.24g，8.4mmol)，醋酸銨(1.94g，25.2mmol)及10mL甲醇加入反應(yīng)瓶中，攪拌，回流反應(yīng)30min，加入C22(2.04g，84mmol)，繼續(xù)回流30min，TLC檢測(cè)，反應(yīng)完全，真空下濃縮，粗品硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，得黃色固體粉末D22(0.71g)，收率56％。步驟3準(zhǔn)確稱取D22(308mg，1mmol)，溶于10mL1，2-二氯乙烷溶液中，攪拌溶解，然后緩慢滴加3-戊酮(129mg，1.5mmol)，加入AlCl3(200mg，1.5mmol)。加熱至回流反應(yīng)12h，TLC檢測(cè)無(wú)原料，冷卻。加入THF∶H2O＝1∶1水溶液10mL稀釋。滴加1mol/LNaOH水溶液調(diào)節(jié)PH至堿性，室溫?cái)嚢?0min，二氯甲烷萃取20mL×3，合并有機(jī)層，干燥，柱層析，石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1～1∶1，得到淡黃色固體S22(30mg)，收率7.98％。ESI-MS：377.0[M+H]+；375.0[M-H]-。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)：δ1.12(3H，t，J＝7.6Hz)，1.90(3H，s)，2.33(3H，s)，2.54(2H，m)，2.88(2H，m)，4.13(2H，m)，5.01(1H，s)，5.25(2H，s)，7.08(1H，m)，7.18(2H，t，J＝7.6Hz)，7.32(2H，d，J＝7.2Hz)，9.27(1H，s)。實(shí)施例23：化合物S23的合成步驟1化合物C23的合成將乙酰乙酸異丙酯(0.72g，5mmol)與醋酐(0.1g，0，9mmol)混合，在冰浴攪拌下加入硫酸(0.01mL)，加入嘧啶-5-甲醛(0.54g，5mmol)，固體緩慢溶解，攪拌1h后，TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)結(jié)束，加水5mL，二氯甲烷萃取(20mL×3)，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮，硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)，分離得到產(chǎn)品C23淡黃色油狀物0.88g，收率75％。步驟2中間體D23的合成將A(0.56g，3.7mmol)，醋酸銨(0.87g，11.1mmol)及10mL甲醇加入反應(yīng)瓶中，攪拌，回流反應(yīng)30min，加入C23(0.88g，3.7mmol)，繼續(xù)回流30min，TLC檢測(cè)，反應(yīng)完全，真空下濃縮，粗品硅膠柱層析(石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1)，得黃色固體粉末D23(0.53g)，收率47％。步驟3準(zhǔn)確稱取D23(125mg，0.42mmol)，溶于10mL1，2-二氯乙烷溶液中，攪拌溶解，然后緩慢滴加3-戊酮(36mg，0.42mmol)，加入AlCl3(84mg，0.63mmol)。微波98℃反應(yīng)2h，TLC檢測(cè)無(wú)原料，冷卻。加入THF∶H2O＝1∶1水溶液10mL稀釋。滴加1mol/LNaOH水溶液調(diào)節(jié)PH至堿性，室溫?cái)嚢?0min，二氯甲烷萃取20mL×3，合并有機(jī)層，干燥，柱層析，石油醚∶丙酮＝10∶1～3∶1，得到淡黃色固體53.4mg，收率65.91％。ESI-MS：368.3[M+H]+；366.0：[M-H]-。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.91(3H，t，J＝6.8Hz)，1.22(6H，m)，2.01(3H，s)，2.42(3H，s)，2.68(2H，m)，4.02(2H，s)，5.02(1H，s)，5.05(1H，m)，8.70(2H，s)，9.03(1H，s)。實(shí)施例24：利用高內(nèi)涵篩選分析儀檢測(cè)化合物對(duì)L-型Ca2+通道阻滯活性利用高內(nèi)涵篩選分析儀(HCS)平臺(tái)，實(shí)時(shí)熒光法測(cè)定化合物(@10μM，@50μM)對(duì)KCl誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞電壓門控鈣離子內(nèi)流抑制活性，從而評(píng)價(jià)實(shí)施例所制備的部分化合物對(duì)鈣離子通道抑制活性。實(shí)驗(yàn)采用Fluo-4-AM鈣離子探針在生理?xiàng)l件下，對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞進(jìn)行負(fù)載，然后利用KCl誘導(dǎo)電壓門控鈣通道開(kāi)發(fā)，鈣離子經(jīng)細(xì)胞膜鈣通道內(nèi)流，與熒光探針結(jié)合產(chǎn)生熒光信號(hào)；于此同時(shí)，高內(nèi)涵記錄細(xì)胞內(nèi)實(shí)時(shí)熒光信號(hào)，反映鈣流自內(nèi)流強(qiáng)度。Fluo-4-AM本身不能被激發(fā)產(chǎn)生熒光，當(dāng)進(jìn)入細(xì)胞后被胞漿內(nèi)酯酶切割成Fluo-4，再與鈣離子結(jié)合后，經(jīng)488nm光激發(fā)產(chǎn)生強(qiáng)烈綠色熒光。KCl作為電壓門控鈣離子通道的激動(dòng)劑：當(dāng)K+達(dá)到一定濃度時(shí)，電壓門控鈣離子通道開(kāi)放，鈣離子內(nèi)流進(jìn)入細(xì)胞，與染料結(jié)合產(chǎn)生熒光。如果鈣通道被化合物抑制，則進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的鈣離子減少，熒光強(qiáng)度降低，降低程度與化合物對(duì)鈣離子通道的抑制程度相關(guān)。L型鈣離子通道屬于電壓門控鈣離子通道。本實(shí)驗(yàn)中采用的SH-SY5Y細(xì)胞，其細(xì)胞膜表面電壓門控鈣離子通道以L-型為主，故KCl誘導(dǎo)產(chǎn)生的鈣流信號(hào)大多為L(zhǎng)-型鈣通道信號(hào)。材料與儀器：1640+10％FBS+1％P/S培養(yǎng)液、胰酶均購(gòu)自Gibico。SH-SY5Y細(xì)胞來(lái)自南京醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)研究室。Fluo-4DirectTMCalciumAssayKits：購(gòu)自Invitrogen，貨號(hào)F10471。高內(nèi)涵篩選分析儀(HCS)：MolecularDevices公司，型號(hào)：Imagexpress。96孔黑板：Corning3603。KCL無(wú)機(jī)試劑(分析純)：購(gòu)自sigma，使用時(shí)配制成1M儲(chǔ)液，使用時(shí)候稀釋成250mM應(yīng)用液。實(shí)驗(yàn)步驟染料配制過(guò)程：完全按照Fluo-4DirectTMCalciumAssayKits(Invitrogen，貨號(hào)F10471)說(shuō)明書(shū)配制好染料應(yīng)用液，簡(jiǎn)介如下：一瓶組分A(染料固體)加入10mL組分C(緩沖液)溶解，一管組分B(Probenecid)加入1mL組分C(緩沖液)；然后向溶解好的組分A染料中加入200μL組分B即得到2×Fluo-4-AM應(yīng)用液；按照與細(xì)胞孔對(duì)應(yīng)的孔每孔加入100μL染料應(yīng)用液到一塊新的96孔板(Corning3599)并放入HCS儀器待用。2×化合物溶液配制過(guò)程：本實(shí)驗(yàn)測(cè)定所有化合物在高濃度50μM以及低濃度10μM時(shí)對(duì)鈣通道的抑制率，具體的配藥過(guò)程如下：先將所有化合物用DMSO配制成0.01M的儲(chǔ)液，然后每個(gè)化合物用DMSO稀釋成5000μM以及1000μM兩個(gè)濃度，每個(gè)濃度再用1640完全培養(yǎng)液稀釋50倍(以DMSO作為純?nèi)軇?duì)照)即得到2×化合物溶液備用。細(xì)胞操作過(guò)程：將匯合度為90％左右的SH-SY5Y細(xì)胞胰酶消化，以20000個(gè)/孔接入96孔黑板中；培養(yǎng)24h后去掉培養(yǎng)液，每孔加入45μL上述不同濃度的2×化合物溶液(以DMSO作為純?nèi)軇?duì)照)，每個(gè)濃度設(shè)置4個(gè)復(fù)孔，具體96孔設(shè)置如表4所示：表496孔設(shè)置設(shè)置HCS自動(dòng)加樣的程序，儀器自動(dòng)每孔依次加入45μL完全按照說(shuō)明書(shū)配置好的2×Fluo-4-AM應(yīng)用液，設(shè)置參數(shù)使每孔加入染料的時(shí)間與每孔的檢測(cè)所需要的時(shí)間相同，同時(shí)使所有孔加完染料所需要的時(shí)間與染料孵育的時(shí)間相同(本實(shí)驗(yàn)染料孵育時(shí)間為30min)設(shè)置HCS程序，按照加染料的孔的順序，每孔依次加入(保證每孔染料孵育的時(shí)間相同)30μL濃度為250mM的KCl溶液，并實(shí)時(shí)掃描每孔的熒光強(qiáng)度變化，加入KCl之前掃描10個(gè)時(shí)間點(diǎn)的熒光強(qiáng)度，F(xiàn)1、F2、F3、...F10；加入KCl之后再掃描40個(gè)時(shí)間點(diǎn)的熒光強(qiáng)度：F11、F12、F13、...、F50。結(jié)果處理，結(jié)果見(jiàn)表5。取F1、F2、...F10的平均值F0，取F11、F12、F13、...F50中的最大值Fmax，記錄Δ＝Fmax-F0抑制率＝100％*(Δ對(duì)照組-Δ給藥組)/Δ對(duì)照組表5本發(fā)明提供的化合物對(duì)L-型Ca2+通道阻滯活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明提供的化合物對(duì)L-型Ca2+通道有明顯的阻滯活性，大部分化合物的活性優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照藥物Nimodipine。實(shí)施例25：化合物對(duì)乙酰膽堿酯酶抑制活性的檢測(cè)樣品：實(shí)施例1-22所制備的化合物材料與儀器：AmplexRRedAcetylcholine/AcetylcholinesteraseAssayKit，A12217，invitrogen；96孔黑板，Costar#3925；InfiniteM200酶標(biāo)檢測(cè)儀，Tecan公司。試劑盒儲(chǔ)備液配置：一支AmplexRedreagent，ComponentA，加入200μLDMSO，ComponentB，-20℃避光保存；5×buffer，ComponentE使用時(shí)根據(jù)所需要的體積用去離子水稀釋到1×，即為1×ReactionBuffer；一支hrp，ComponentC，加入1mL1×ReactionBuffer，分裝后-20oC保存；5μL3.3％的H2O2，ComponentD，加入到234.1μL去離子水中，得到20mmol/L的H2O2工作液，現(xiàn)配現(xiàn)用；一支CholineOxidase，加入600μL1×ReactionBuffer，分裝后-20℃保存；5mgAch-cl，Componentg，加入275μL去離子水的比例配置100mmol/LAch應(yīng)用液，現(xiàn)稱現(xiàn)配現(xiàn)用；一支AchE，加入600μL1×ReactionBuffer，分裝后-20℃保存?；衔锏呐渲茫焊鶕?jù)樣品質(zhì)量及分子量將化合物用DMSO配置成0.01mol/L的儲(chǔ)液；配制100×化合物濃度：即先用DMSO將化合物儲(chǔ)液配置成1000μmol/L、200μmol/L、40μmol/L、8μmol/L、1.6μmol/L、0.32μmol/L、0.064μmol/L的濃度梯度。4×AchE應(yīng)用液的配置：根據(jù)實(shí)際需要的體積按照1：250的比例將AchE儲(chǔ)備液用1×ReactionBuffer稀釋。2×工作液的配置：根據(jù)實(shí)際需要的體積按照200μLAmplexRedreagent：100μLHorseradishperoxidas：100μLCholineOxidase：10μLAch：9590μL1×ReactionBuffer的比例將各儲(chǔ)備液進(jìn)行混合得到2×工作液。操作過(guò)程：在設(shè)計(jì)好的96孔黑板的化合物測(cè)定孔中每孔先加入48μL的1×ReactionBuffer，以每孔2μL的量加入100×化合物濃度的溶液于上述化合物測(cè)定孔中，化合物每個(gè)濃度設(shè)置2個(gè)復(fù)孔；陽(yáng)性對(duì)照孔加入2μLDMSO+48μL1×ReactionBuffer，陽(yáng)性驗(yàn)證孔直接加入100μL20mM的H2O2工作液，陰性對(duì)照孔加入2μLDMSO+98μL1×ReactionBuffer，每孔均設(shè)置兩個(gè)復(fù)孔；化合物測(cè)定孔與陽(yáng)性對(duì)照孔每孔加入50μL4×AchE應(yīng)用液，所有的孔以每孔100μL加入2×工作液，混勻，啟動(dòng)酶促反應(yīng)，總反應(yīng)體系為200μL，這樣得到的化合物終濃度分別為10μmol/L、2μmol/L、0.4μmol/L、0.08μmol/L、0.016μmol/L、0.0032μmol/L、0.00064μmol/L；室溫孵育30-45min。熒光檢測(cè)：在InfiniteM200酶標(biāo)檢測(cè)儀下檢測(cè)各孔在激發(fā)波長(zhǎng)540nm，發(fā)射波長(zhǎng)590nm下的熒光值，參數(shù)設(shè)置gain值選擇optimal。數(shù)據(jù)處理：計(jì)算所有給藥組和對(duì)照組的平均值，按如下公式計(jì)算抑制率：求出給藥濃度以10為底的對(duì)數(shù)值，以該對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo)，抑制率為縱坐標(biāo)，在origin6.0中畫(huà)圖，擬合出一條藥理學(xué)量效關(guān)系S形曲線，求出對(duì)應(yīng)50％抑制率時(shí)的藥物濃度，即為此化合物抑制乙酰膽堿酯酶活性的IC50值?；衔飳?duì)乙酰膽堿酯酶抑制活性的檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表6。表6本發(fā)明化合物對(duì)乙酰膽堿酯酶抑制活性的檢測(cè)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，實(shí)施例所制備的化合物能夠抑制乙酰膽堿酯酶的活性。結(jié)論：綜合上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，本發(fā)明中的化合物是一種既能抑制乙酰膽堿酯酶活性，又能阻滯細(xì)胞外鈣通過(guò)鈣通道流入細(xì)胞的化合物，具有雙重活性，具有重要的潛在治療價(jià)值。以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。