專利名稱：肝素鈉的純化方法、流水線及設(shè)備的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及動物來源粗品肝素鈉的純化技術(shù)領(lǐng)域，還涉及用于肝素鈉純化的流水線和設(shè)備。
背景技術(shù)：
肝素類藥物在臨床抗凝血、抗血栓等醫(yī)療領(lǐng)域應(yīng)用十分廣泛，動物器官如豬場來源的肝素鈉的用量巨大且持續(xù)上升，給肝素產(chǎn)業(yè)技術(shù)提出了越來越高的要求。最近，隨著肝素類藥品質(zhì)量研究的逐步深入及藥典標(biāo)準(zhǔn)的改版，對肝素產(chǎn)品中雜質(zhì)去除程度的要求也進(jìn)ー步提升，肝素類藥物生產(chǎn)廠家對肝素鈉供應(yīng)商也提出了比以往更為嚴(yán)格的質(zhì)量要求，肝素行業(yè)的上游企業(yè)因此承受著和以前不一樣的技術(shù)挑戰(zhàn)和成本壓力。其中，如何高效率地去除粗品肝素鈉中蛋白類雜質(zhì)且高產(chǎn)率的獲得肝素鈉產(chǎn)品則是肝素鈉純化工廠所面臨的 技術(shù)難題。從事肝素鈉純化的企業(yè)多采用重復(fù)肝素鈉粗品提取的傳統(tǒng)エ藝技術(shù)，使用傳統(tǒng)的提取設(shè)備如帶攪拌的普通容器、過濾硅膠樹脂的大孔徑過濾設(shè)備等，對粗品進(jìn)行再次或多次提取(樹脂吸附、洗脫、沉淀等)以獲得蛋白類雜質(zhì)含量較低的產(chǎn)品，之后再采用其他技術(shù)(如管式離心)將產(chǎn)品中剰余的無法洗去的蛋白類雜質(zhì)除棹。由于重復(fù)樹脂吸附、洗脫的做法在很大程度上増加了原輔料如溶剤、樹脂等的用量，増加了不少生產(chǎn)成本；也由于多次吸附洗脫而損失部分產(chǎn)品，導(dǎo)致產(chǎn)品純化工藝的收率不高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種肝素鈉的純化方法，本發(fā)明還提供了適用肝素鈉的純化方法的流水線和設(shè)備。本發(fā)明采用的技術(shù)方案是
肝素鈉的純化方法，將待純化的肝素鈉粗品用3-20倍重量的水溶解，以每分鐘30-65轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速攪拌，升溫70-90°C并調(diào)節(jié)pH值7-9，加入O. 1-0. 6倍重量的氯化鈉，使其中蛋白類物質(zhì)變性并從水中游離出來；將混合態(tài)液體通過碟式離心機(jī)以轉(zhuǎn)速4500-7500rpm的速度進(jìn)行離心，分離出蛋白類物質(zhì)；溶劑及其中溶解的物質(zhì)進(jìn)入管式離心機(jī)，經(jīng)過管式離心機(jī)轉(zhuǎn)速10000-13000rpm轉(zhuǎn)速的高速離心分離，去除固體雜質(zhì)；分離液體進(jìn)入帶釜腰抽液裝置的反應(yīng)釜，反應(yīng)釜內(nèi)加入1/5-4/5倍分離液體重量的質(zhì)量濃度90. 0%-99. 9%こ醇，控制溫度彡35°C，用NaOH或HCl溶液調(diào)節(jié)溶液pH值7. 0-8. 8，每分鐘30-65轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速攪拌，靜止，待溶液分層或出現(xiàn)類似分層的現(xiàn)象時，調(diào)節(jié)反應(yīng)釜釜腰抽液裝置，將分界層液體抽掉；打開反應(yīng)釜底閥放料至一封閉式平板離心機(jī)以800-1200rpm轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心，濾餅干燥即得純化產(chǎn)品O用于進(jìn)行肝素鈉純化的流水線，包括反應(yīng)釜，其特征是還包括蝶式離心機(jī)、管式離心機(jī)、具有釜腰抽液裝置的反應(yīng)釜和封閉式平板離心機(jī)，所述反應(yīng)釜底部通過管道與蝶式離心機(jī)連接，所述蝶式離心機(jī)通過管道與管式離心機(jī)連接，所述管式離心機(jī)通過管道與具有釜腰抽液裝置的反應(yīng)釜連接，所述具有釜腰抽液裝置的反應(yīng)釜底部通過管道與封閉式平板離心機(jī)連接。在具有釜腰抽液裝置的反應(yīng)釜中，其釜腰抽液裝置固定于反應(yīng)釜的側(cè)面，所述釜腰抽液裝置包括對視鏡、手柄、手桿和抽液管，所述對視鏡設(shè)于反應(yīng)釜側(cè)面，所述手柄分別固定于手桿的頂部和中下部，所述手桿通過其底部的傘齒輪與固定在抽液管上的傘齒輪活動連接。本發(fā)明可以高效率去除粗品肝素鈉或類似肝素鈉的動物提取物粗品中蛋白類物質(zhì)和硫酸軟骨素或類似于硫酸軟骨素物質(zhì)。產(chǎn)品純化工藝的總效價收率最高可達(dá)89%以上。


圖I為本發(fā)明用于進(jìn)行肝素鈉純化的流水線示意圖。 圖2為具有爸腰抽液裝置的反應(yīng)爸結(jié)構(gòu)示意圖。其中1、反應(yīng)釜，2、蝶式離心機(jī)，3、管式離心機(jī)，4、具有釜腰抽液裝置的反應(yīng)釜，5、封閉式平板離心機(jī)，6、手柄，7、手桿，8、抽液管，9、傘齒輪，10、對視鏡。
具體實(shí)施例方式下述實(shí)施例只是對本發(fā)明方法和設(shè)備的闡述，本發(fā)明的保護(hù)范圍不限于下述的實(shí)施例，所有具有與本發(fā)明相同構(gòu)思的方法和設(shè)備及流水線均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。實(shí)施例I
向反應(yīng)釜中加入約650kgエ藝用水，約每分鐘32轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速攪拌，將45. 243億單位的肝素鈉粗品(共62. 84kg，效價72 U/mg,含硫酸軟骨素27. 2%)投入反應(yīng)釜，加入約19kg氯化鈉，升溫至75±2°C左右，保溫并調(diào)節(jié)pH值到7. 5左右，通過碟式離心機(jī)離心(轉(zhuǎn)速約為5300rpm,出料管ロ壓カ控制在O. IMPa左右)，濾液再通過管式離心機(jī)離心(轉(zhuǎn)速約為10200rpm)，蝶式離心和管式離心共用時3小時左右，與之前單純用管式離心機(jī)離心的案例相比(相同處理量，會用8-18小吋)，其中相應(yīng)步驟的離心操作用時短了很多。管式離心濾液入前述所持別設(shè)計的反應(yīng)釜，加入約900kgこ醇，毎分鐘約63轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速攪拌20分鐘，調(diào)節(jié)pH值至7. 5，繼續(xù)攪拌約30分鐘，停止攪拌，靜止待溶液分層。調(diào)整反應(yīng)釜腰抽料裝置中的彎管方向，使其管ロ處于釜內(nèi)溶液中間分界層或類似分階層處，將該層液體抽出。然后打開反應(yīng)釜底閥放料至一封閉式平板離心機(jī)離心，濾餅干燥得38. 326億單位純化的產(chǎn)品(共約36. 16kg，效價為106 U/mg，硫酸軟骨素10. 3%)，總效價收率約為84. 71%。實(shí)施例2:
123. 733億單位的肝素鈉粗品(共169. 50kg，效價為63-87 U/mg不等，硫酸軟骨素含量15-35%不等)，用粉碎機(jī)粉碎，再用混合機(jī)混合。向反應(yīng)釜中加入約I. 7噸エ藝用水，以每分鐘約63轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速攪拌，將粉碎混合后的肝素鈉粗品投入反應(yīng)釜，加入約26kg氯化鈉，升溫至82±2°C左右，保溫并調(diào)節(jié)pH值到7. 5左右，通過碟式離心機(jī)離心(轉(zhuǎn)速約為5300rpm，出料管ロ壓カ控制在O. IMPa左右)，濾液再通過管式離心機(jī)離心(轉(zhuǎn)速約為10200rpm)。管式離心濾液入前述所持別設(shè)計的反應(yīng)釜，加入約2噸98%的こ醇，以每分鐘約32轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速攪拌40分鐘，調(diào)節(jié)pH值至7. 8，繼續(xù)攪拌約30分鐘，停止攪拌，靜止待溶液分層。調(diào)整反應(yīng)釜腰抽料裝置中的彎管方向，使其管ロ處于釜內(nèi)溶液中間分界層或類似分階層處，將該層液體抽出。然后打開反應(yīng)釜底閥放料至一封閉式平板離心機(jī)離心，濾餅干燥得108. 875億單位純化的產(chǎn)品(共約96. 35kg，效價為113 U/mg，硫酸軟骨素為8. 3%)，總效價收率約為87. 99%ο實(shí)施例3
向反應(yīng)釜中加入約730kgエ藝用水，以每分鐘約63轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速攪拌，將粉碎混合好的62. 144億單位的肝素鈉粗品(共73. Ilkg，效價為85 U/mg，硫酸軟骨素為32. 2%)投入反應(yīng)釜，加入約35kg氯化鈉，升溫至90 ±2 °C左右，保溫并調(diào)節(jié)pH值到6. 8左右，通過碟式離心機(jī)離心(轉(zhuǎn)速約為6700rpm,出料管ロ壓カ控制在O. 35MPa左右)，濾液再通過管式離心機(jī)離心(轉(zhuǎn)速約為11300rpm)。管式離心濾液入前述所持別設(shè)計的反應(yīng)釜，加入97. 8%的こ醇約550kg，每分鐘約63轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速攪拌30分鐘，調(diào)節(jié)pH值至8. O,繼續(xù)攪拌約30分鐘，停止攪拌，靜止待溶液分層。調(diào)整反應(yīng)釜腰抽料裝置中的彎管方向，使其管ロ處于釜內(nèi)溶液中間分界層或類似分階層處，將該層液體抽出。然后打開反應(yīng)釜底閥放料至一封閉式平板離心機(jī)離心，濾餅干燥得55. 379億單位純化的產(chǎn)品(共約42. 27kg，效價為131 U/mg，硫酸軟骨素為12. 2%)，總效價收率約為89. 11%。 實(shí)施例4
如圖I所示，用于進(jìn)行肝素鈉純化的流水線，包括反應(yīng)釜1，還包括蝶式離心機(jī)2、管式離心機(jī)3、具有釜腰抽液裝置的反應(yīng)釜4和封閉式平板離心機(jī)5，反應(yīng)釜I底部通過管道與蝶式離心機(jī)2連接，蝶式離心機(jī)2通過管道與管式離心機(jī)3連接，管式離心機(jī)3通過管道與具有釜腰抽液裝置的反應(yīng)釜4連接，具有釜腰抽液裝置的反應(yīng)釜4底部通過管道與封閉式平板離心機(jī)5連接。實(shí)施例5
如圖2所示，在具有釜腰抽液裝置的反應(yīng)釜4中，其釜腰抽液裝置固定于反應(yīng)釜的側(cè)面，釜腰抽液裝置包括對視鏡10、手柄6、手桿7和抽液管8，對視鏡10設(shè)于反應(yīng)釜側(cè)面，手柄6分別固定于手桿7的頂部和中下部，手桿7通過其底部的傘齒輪9與固定在抽液管8上的傘齒輪9活動連接。當(dāng)需要進(jìn)行抽液時，轉(zhuǎn)動手桿7上的手柄6，手桿7底部通過與抽液管8之間的傘齒輪9組合帶動抽液管8轉(zhuǎn)動，抽液管8在對視鏡10的觀察下緩慢將分界層液體抽掉，然后肝素鈉溶液進(jìn)入下一流程。
權(quán)利要求
1.肝素鈉的純化方法，其特征是將待純化的肝素鈉粗品用3-20倍重量的水溶解，以每分鐘30-65轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速攪拌，升溫70-90°C并調(diào)節(jié)pH值7_9，加入O. 1-0. 6倍重量的氯化鈉，使其中蛋白類物質(zhì)變性并從水中游離出來；將混合態(tài)液體通過碟式離心機(jī)以轉(zhuǎn)速4500-7500rpm的速度進(jìn)行離心，分離出蛋白類物質(zhì)；溶劑及其中溶解的物質(zhì)進(jìn)入管式離心機(jī)，經(jīng)過管式離心機(jī)轉(zhuǎn)速10000-13000rpm轉(zhuǎn)速的高速離心分離，去除固體雜質(zhì)；分離液體進(jìn)入帶釜腰抽液裝置的反應(yīng)釜，反應(yīng)釜內(nèi)加入1/5-4/5倍分離液體重量的質(zhì)量濃度90. 0%-99. 9%乙醇，控制溫度≤35°C，用NaOH或HCl溶液調(diào)節(jié)溶液pH值7. 0-8. 8，每分鐘30-65轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速攪拌，靜止，待溶液分層或出現(xiàn)類似分層的現(xiàn)象時，調(diào)節(jié)反應(yīng)釜釜腰抽液裝置，將分界層液體抽掉；打開反應(yīng)釜底閥放料至一封閉式平板離心機(jī)以800-1200rpm轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心，濾餅干燥即得純化產(chǎn)品。
2.用于進(jìn)行權(quán)利要求I肝素鈉純化的流水線，包括反應(yīng)釜，其特征是還包括蝶式離心機(jī)、管式離心機(jī)、具有釜腰抽液裝置的反應(yīng)釜和封閉式平板離心機(jī)，所述反應(yīng)釜底部通過管道與蝶式離心機(jī)連接，所述蝶式離心機(jī)通過管道與管式離心機(jī)連接，所述管式離心機(jī)通過管道與具有釜腰抽液裝置的反應(yīng)釜連接，所述具有釜腰抽液裝置的反應(yīng)釜底部通過管道與封閉式平板離心機(jī)連接。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的肝素鈉的純化方法，其特征是在具有釜腰抽液裝置的反應(yīng)釜中，其釜腰抽液裝置固定于反應(yīng)釜的側(cè)面，所述釜腰抽液裝置包括對視鏡、手柄、手桿和抽液管，所述對視鏡設(shè)于反應(yīng)釜側(cè)面，所述手柄分別固定于手桿的頂部和中下部，所述手桿通過其底部的傘齒輪與固定在抽液管上的傘齒輪活動連接。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述用于進(jìn)行肝素鈉純化的流水線，其特征是在具有釜腰抽液裝置的反應(yīng)釜中，其釜腰抽液裝置固定于反應(yīng)釜的側(cè)面，所述釜腰抽液裝置包括對視鏡、手柄、手桿和抽液管，所述對視鏡設(shè)于反應(yīng)釜側(cè)面，所述手柄分別固定于手桿的頂部和中下部，所述手桿通過其底部的傘齒輪與固定在抽液管上的傘齒輪活動連接。
全文摘要
本發(fā)明公開了肝素鈉的純化方法，其特征是將待純化的肝素鈉粗品水溶解，升溫并調(diào)節(jié)pH值7-9，加入氯化鈉；將混合態(tài)液體進(jìn)行離心，分離出蛋白類物質(zhì)；溶劑及其中溶解的物質(zhì)進(jìn)入管式離心機(jī)離心分離，去除固體雜質(zhì)；分離液體進(jìn)入反應(yīng)釜，反應(yīng)釜內(nèi)加入乙醇，用NaOH或HCl溶液調(diào)節(jié)溶液pH值7.0-8.8，每分鐘30-65轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速攪拌，靜止，待溶液分層或出現(xiàn)類似分層的現(xiàn)象時，調(diào)節(jié)反應(yīng)釜釜腰抽液裝置，將分界層液體抽掉；打開反應(yīng)釜底閥放料至一封閉式平板離心機(jī)進(jìn)行離心，濾餅干燥即得純化產(chǎn)品。本發(fā)明可以高效率去除粗品肝素鈉或類似肝素鈉的動物提取物粗品中蛋白類物質(zhì)和硫酸軟骨素或類似于硫酸軟骨素物質(zhì)，總效價收率最高可達(dá)89%以上。
文檔編號C08B37/10GK102863558SQ201210385199
公開日2013年1月9日 申請日期2012年10月12日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月12日
發(fā)明者楊邦孝, 陳軍 申請人:江蘇天慧生物科技有限公司