專利名稱：利用分子印跡—基質(zhì)固相分散技術(shù)分離喜樹堿的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種分離喜樹堿的方法。
背景技術(shù)：
喜樹喊(Camptothecin, CPT),淺黃色針狀結(jié)晶，分子式C20H16N2O4,分子量 348.3。它是廣泛分布在我國南方的珙桐科旱蓮屬落葉喬木喜樹(Camptotheca acuminata Decsne )中的一種生物堿；1966年Wal I等人從喜樹的葉和樹皮中分離出喜樹堿并確證了結(jié)構(gòu)，它有很強(qiáng)的抗腫瘤活性，尤其對消化道腫瘤、白血病、絨毛膜上皮癌、膀胱癌有效。喜樹堿一般從喜樹的根、皮、莖和種子中提取得到。但是由于喜樹中除喜樹堿以外還含有其它多種組分，導(dǎo)致喜樹堿提取分離困難。傳統(tǒng)提取分離技術(shù)存在著步驟復(fù)雜、能耗高、選擇性低、 有機(jī)溶劑消耗量大等缺點(diǎn)。建立一種新型有效的喜樹堿分離提取方法尤為重要。
基質(zhì)固相分散技術(shù)(MatrixSolid-phas e Dispersion, MSPD)是美國 Louisiana 州立大學(xué)的Barker教授在1989年提出并給予理論解釋的一種快速樣品預(yù)處理技術(shù)。其優(yōu)點(diǎn)是濃縮了傳統(tǒng)的樣品預(yù)處理中的樣品勻化、提取、凈化等過程，避免了樣品的損失，提高了凈化效率。然而，常用的基質(zhì)固相分散技術(shù)的分散劑為硅膠、二氧化硅、C18、活性炭等，缺乏選擇性。如何提高基質(zhì)固相分散技術(shù)的選擇性是目前迫切需要解決的問題
分子印跡技術(shù)也稱模板印跡技術(shù)，是指制備對某一特定的目標(biāo)分子具有特異選擇性的聚合物的過程。它可以被形象的描繪為制造識別“分子鑰匙”的“人工鎖”技術(shù)。這種技術(shù)制備的聚合物被稱為分子印跡聚合物(Molecularly Imprinted Polymer, MIP)。與傳統(tǒng)常用的樣品前處理方法相比，分子印跡技術(shù)可實(shí)現(xiàn)目標(biāo)組分的有效分離，并且選擇性高， 適用范圍廣。然而傳統(tǒng)的包埋法制備分子印跡聚合物需要反復(fù)研磨，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，產(chǎn)率低，并且有部分印跡位點(diǎn)被包埋在顆粒內(nèi)，不能發(fā)揮作用，降低了印跡位點(diǎn)的利用率。
綜上所述現(xiàn)有喜樹堿分離提取技術(shù)存在選擇性低、步驟復(fù)雜、有機(jī)溶劑消耗量大， 基質(zhì)固相分散技術(shù)的選擇性低，包埋法制備分子印跡聚合物需要反復(fù)研磨，費(fèi)時(shí)費(fèi)力的問題。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是要解決現(xiàn)有喜樹堿分離提取技術(shù)存在選擇性低、步驟復(fù)雜、有機(jī)溶劑消耗量大，基質(zhì)固相分散技術(shù)的選擇性低，包埋法制備分子印跡聚合物需要反復(fù)研磨，費(fèi)時(shí)費(fèi)力的問題，而提供的利用分子印跡-基質(zhì)固相分散技術(shù)分離喜樹堿的方法。
利用分子印跡-基質(zhì)固相分散技術(shù)分離喜樹堿的方法，具體是按照以下步驟完成的
一、將喜樹原料粉碎至細(xì)度為40目飛O目，得到喜樹粉末，按照分子印跡聚合物與喜樹粉末的質(zhì)量比為I 4，稱取喜樹粉末和分子印跡聚合物，將喜樹粉末和分子印跡聚合物混合，研磨均化5mirTlOmin,得到混合粉末；
二、將步驟一得到的混合粉末移入裝有玻璃棉墊底的注射器中，再在混合粉末上方放置玻璃棉，壓實(shí)；
三、將淋洗劑倒入壓實(shí)的注射器中，以lmL/mirT2mL/min的流速淋洗，其中注射器中混合粉末的質(zhì)量與淋洗劑的體積比為Ig 5mL^25mL ；
四、將洗脫劑倒入淋洗后的注射器中，以lmL/mirT2mL/min的流速洗脫，其中注射器中混合粉末的質(zhì)量與洗脫劑的體積比為Ig :5mL 25mL，完成利用分子印跡一基質(zhì)固相分散技術(shù)分離喜樹堿的方法。
其中，步驟三中淋洗的目的是淋洗掉喜樹原料中除喜樹堿以外的其它組分，步驟四中洗脫目標(biāo)物為喜樹堿。
本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明采用基質(zhì)固相分散技術(shù)作為分離模式，提取分離喜樹堿，使得提取和凈化在一個(gè)體系中完成，使樣品制備過程簡單，減少了實(shí)驗(yàn)時(shí)間和溶劑使用量；應(yīng)用分子印跡聚合物作為分離介質(zhì)，提高了喜樹堿提取分離的選擇性效果，該聚合物對喜樹堿具有兩種結(jié)合方式，總的吸附量(Qmaxl+Qmax2)可達(dá)IOlOmg g-1;在制備分子印跡聚合物時(shí)采用的是表面印跡技術(shù)，把結(jié)合位點(diǎn)局限在具有良好可接近性的二氧化硅表面上， 從而有利于模板分子的洗脫和再結(jié)合，并且制備過程簡單，條件易于控制，生產(chǎn)成本低。
本發(fā)明用于分離喜樹堿。


圖1為實(shí)施例一制備的分子印跡聚合物的掃描電子顯微鏡圖2為實(shí)施例一制備的分子印跡聚合物的紅外光譜圖3為實(shí)施例一制備的分子印跡聚合物對喜樹堿的吸附等溫線圖4為實(shí)施例一制備的分子印跡聚合物吸附喜樹堿的Scatchard分析圖；
圖5為實(shí)施例一制備的分子印跡聚合物對模板分子喜樹堿的動力學(xué)曲線圖6為實(shí)施例一制備的分子印跡聚合物吸附喜樹堿的準(zhǔn)一級動力學(xué)擬合圖7為實(shí)施例一制備的分子印跡聚合物吸附喜樹堿的準(zhǔn)二級動力學(xué)擬合圖。
具體實(shí)施方式
本發(fā)明技術(shù)方案不局限于以下所列舉的具體實(shí)施方式
，還包括各具體實(shí)施方式
之間的任意組合。
具體實(shí)施方式
一本實(shí)施方式利用分子印跡-基質(zhì)固相分散技術(shù)分離喜樹堿的方法，其特征在于利用分子印跡一基質(zhì)固相分散技術(shù)分離喜樹堿的方法，具體是按照以下步驟完成的
一、將喜樹原料粉碎至細(xì)度為40目飛O目，得到喜樹粉末，按照分子印跡聚合物與喜樹粉末的質(zhì)量比為I 4，稱取喜樹粉末和分子印跡聚合物，將喜樹粉末和分子印跡聚合物混合，研磨均化5min IOmin,得到混合粉末；
二、將步驟一得到的混合粉末移入裝有玻璃棉墊底的注射器中，再在混合粉末上方放置玻璃棉，壓實(shí)；
三、將淋洗劑倒入壓實(shí)的注射器中，以lmL/mirT2mL/min的流速淋洗，其中注射器中混合粉末的質(zhì)量與淋洗劑的體積比為Ig 5mL^25mL ；
四、將洗脫劑倒入淋洗后的注射器中，以lmL/mirT2mL/min的流速洗脫，其中注射器中混合粉末的質(zhì)量與洗脫劑的體積比為Ig :5mL 25mL，完成利用分子印跡一基質(zhì)固相分散技術(shù)分離喜樹堿的方法。
其中，步驟三中淋洗的目的是淋洗掉喜樹原料中除喜樹堿以外的其它組分，步驟四中洗脫目標(biāo)物為喜樹堿。
本實(shí)施方式采用基質(zhì)固相分散技術(shù)作為分離模式，提取分離喜樹堿，使得提取和凈化在一個(gè)體系中完成，使樣品制備過程簡單，減少了實(shí)驗(yàn)時(shí)間和溶劑使用量；應(yīng)用分子印跡聚合物作為分離介質(zhì)，提高了喜樹堿提取分離的選擇性效果，該聚合物對喜樹堿具有兩種結(jié)合方式，總的吸附量(Qmaxl+Qmax2)可達(dá)l(T20mg g-1;在制備分子印跡聚合物時(shí)采用的是表面印跡技術(shù)，把結(jié)合位點(diǎn)局限在具有良好可接近性的二氧化硅表面上，從而有利于模板分子的洗脫和再結(jié)合，并且制備過程簡單，條件易于控制，生產(chǎn)成本低。
具體實(shí)施方式
二 本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一不同的是步驟一中分子印跡聚合物與喜樹堿樣品粉末的質(zhì)量比為1:1. 1 2。其它與具體實(shí)施方式
一相同。
具體實(shí)施方式
三本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一或二不同的是步驟二中玻璃棉的厚度為2mnT3mm。其它與具體實(shí)施方式
一或二相同。
具體實(shí)施方式
四本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至三之一不同的是步驟三中混合粉末的質(zhì)量與淋洗劑的體積比為Ig :10mL 20mL。其它與具體實(shí)施方式
一至三之一相同。
具體實(shí)施方式
五本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至四之一不同的是步驟三中淋洗劑為甲醇水溶液或乙醇水溶液，其中甲醇或乙醇與水的體積比為1:1(Γ20。其它與具體實(shí)施方式
一至四之一相同。
具體實(shí)施方式
六本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至五之一不同的是步驟四中混合粉末的質(zhì)量與洗脫劑的體積比為Ig :10mL 20mL。其它與具體實(shí)施方式
一至五之一相同。
具體實(shí)施方式
七本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至六之一不同的是步驟四中洗脫劑為乙酸與甲醇或乙醇的混合溶液，其中乙酸與甲醇或乙醇的體積比為1:1(Γ50。其它與具體實(shí)施方式
一至六之一相同。
具體實(shí)施方式
八本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一不同的是步驟一所述的分子印跡聚合物，具體是按照以下步驟制備的
Α、將硅烷偶聯(lián)劑ΚΗ570、蒸餾水、甲苯和濃硫酸混合均勻，在溫度為50°C 70°C條件下，控制轉(zhuǎn)速為200rmp 300rmp,保持3h 5h,得到混合溶液A,其中蒸懼水與甲苯的體積比為1:3飛，濃硫酸與蒸餾水的體積比為1: f 2，硅烷偶聯(lián)劑KH570與蒸餾水、甲苯和濃硫酸的總體積比為1:8 15;
B、采用分液漏斗將步驟一得到的混合溶液A進(jìn)行分液，除去水相部分，得到甲苯層，向甲苯層中加入納米二氧化硅，混合均勻，在溫度為100°c 120°C條件下，控制轉(zhuǎn)速為200rmp 300rmp，保持3tT5h，再用純甲醇進(jìn)行淋洗，然后在溫度為50°C 70°C條件下烘干，得到硅烷化修飾的SiO2，其中二氧化硅的質(zhì)量與步驟一的硅烷偶聯(lián)劑KH570體積比為 lg:3mL 5mL ；
C、將模板分子、溶劑和功能單體混合均勻，控制轉(zhuǎn)速為200rmp 300rmp，保持 lhlh，得到混合溶液B，其中模板分子與功能單體的物質(zhì)的量之比為1:3飛，模板分子的物質(zhì)的量與溶劑的體積比為lmmol IOOmLlOOmL,模板分子為喜樹堿，溶劑為甲醇、乙腈或氯仿，功能單體為甲基丙烯酸、丙烯酸或丙烯酰胺；
D、將步驟B得到的硅烷化修飾的SiO2加入到步驟C得到的混合溶液B中，再加入交聯(lián)劑和引發(fā)劑，在溫度為50°C 70°C條件下，控制轉(zhuǎn)速為200rmp 300rmp，保持20tT30h， 得到含模板分子的分子印跡聚合物，其中硅烷化修飾的SiO2的質(zhì)量與交聯(lián)劑的物質(zhì)的量之比為Ig :8mmof 15mmol，步驟C得到的混合溶液B中模板分子與交聯(lián)劑的物質(zhì)的量之比為1:1(Γ30，引發(fā)劑的質(zhì)量與混合溶液B的體積比為Ig :1000mL 2000mL，交聯(lián)劑為乙二醇二甲基丙烯酸酯、三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸酯或二乙烯基苯，引發(fā)劑為偶氮二異丁腈；
E、將步驟D得到的含模板分子的分子印跡聚合物放入索氏提取器中，用洗脫劑洗脫20tT30h，再在溫度為50°C 60°C條件下烘干，得到分子印跡聚合物，其中洗脫劑為甲醇或乙醇與乙酸的混合溶液，且乙酸與甲醇或乙醇的體積比為1: 3 5。其它與具體實(shí)施方式
一相同。
采用以下實(shí)施例驗(yàn)證本發(fā)明的有益效果
實(shí)施例一
本實(shí)施例利用分子印跡一基質(zhì)固相分散技術(shù)分離喜樹堿的方法，具體是按照以下步驟完成的
一、采用粉碎機(jī)將喜樹原料粉碎至細(xì)度為40目 50目，得到喜樹粉末，稱取O.1g 喜樹粉末和O.1g分子印跡聚合物，將喜樹粉末和分子印跡聚合物于研缽中混合，研磨均化 5min,得到混合粉末；
二、將步驟一得到的混合粉末移入裝有玻璃棉墊底的注射器中，再在混合粉末上方放置玻璃棉，壓實(shí)，玻璃棉厚度為2_ ；
三、將3mL體積濃度為5%的甲醇水溶液倒入壓實(shí)的注射器中，以lmL/min的流速淋洗；
四、將3mL體積濃度為5%的乙酸甲醇溶液倒入淋洗后的注射器中，以lmL/min的流速洗脫，完成利用分子印跡一基質(zhì)固相分散技術(shù)分離喜樹堿的方法。
步驟一所述的分子印跡聚合物的制備方法，具體是按照以下步驟制備的
A、將4mL硅烷偶聯(lián)劑KH570、8mL蒸餾水、25mL甲苯和6. 5mL濃硫酸混合均勻，在溫度為60°C條件下，控制轉(zhuǎn)速為250rmp，保持4h，得到混合溶液A ;
B、采用分液漏斗將步驟一得到的混合溶液A進(jìn)行分液，除去水相部分，得到甲苯層，向甲苯層中加入Ig納米二氧化娃，混合均勻，在溫度為110°c條件下,控制轉(zhuǎn)速為 250rmp，保持4h，再用純甲醇進(jìn)行淋洗，然后在溫度為60°C條件下烘干，得到硅烷化修飾的 SiO2 ；
C、將O. 5mmol喜樹堿、IOOmL氯仿和2mmol甲基丙烯酸混合均勻，控制轉(zhuǎn)速為 250rmp，保持2h，得到混合溶液B ；
D、將步驟B得到的硅烷化修飾的SiO2加入到步驟C得到的混合溶液B中，再加入 IOmmol乙二醇二甲基丙烯酸酯和O. 06g偶氮二異丁腈，在溫度為60°C條件下，控制轉(zhuǎn)速為 250rmp，保持24h，得到含模板分子的分子印跡聚合物；
E、將步驟D得到的含模板分子的分子印跡聚合物放入索氏提取器中，用體積含量為20%的乙酸甲醇溶液洗脫24h，再在溫度為60°C條件下烘干，得到分子印跡聚合物。
本實(shí)施例制備的分子印跡聚合物的掃描電子顯微鏡圖如圖1所示，從圖中可以看出制備得到的MIP粒徑較小，且分布均勻。
本實(shí)施例制備的分子印跡聚合物的紅外光譜圖如圖2所示，從圖中可以看出， 3448CHT1處為O-H的伸縮振動吸收峰2991(^1處為C-H的伸縮振動吸收峰1732(^-1處為 C = O伸縮振動吸收峰；1455cm_1和1390cm-1處為C-H彎曲振動吸收峰；1256cm_1處為C-O 的伸縮振動吸收峰JHScnT1處為S1-O的伸縮振動吸收峰，此結(jié)果顯示SiO2被MIP包裹。
本實(shí)施例制備的分子印跡聚合物對喜樹堿的吸附等溫線圖如圖3所示，分子印跡聚合物吸附喜樹堿的Scatchard分析圖如圖4所示，利用公式Q/C = (Qmax-Q)/Kd(Q為MIP 對喜樹堿的吸附量，C為吸附溶液中的平衡濃度，Qfflax為最大表觀吸附量，Kd為解離常數(shù))從圖4可以看出,MIP對喜樹堿有兩種結(jié)合方式,得到的Kdl = 25. 5mg L-1, Qmaxl = 7. 86mg g—1 ； Kd2 = 12. 8mg IAQmax2 = 6. 25mg g—1，此結(jié)果顯示制備得到的MIP對喜樹堿具有較強(qiáng)的吸附能力。
本實(shí)施例制備的分子印跡聚合物對模板分子喜樹堿的動力學(xué)曲線圖如圖5所示， 分子印跡聚合物吸附喜樹堿的準(zhǔn)一級動力學(xué)擬合圖如圖6所示，MIP吸附喜樹堿的準(zhǔn)二級動力學(xué)擬合圖如圖7所示，由圖可知MIP對喜樹堿的吸附符合準(zhǔn)二級動力學(xué)模型，其中準(zhǔn)二級動力學(xué)的擬合公式為t/Qt = l/K2Qe2+t/Qe(Qt為平衡吸附量，Qe為理論最大吸附量，K2 為動力學(xué)二級平衡速率常數(shù))，得到MIP的K2 = O. 0596g mgHmirT1,此結(jié)果顯示制備得到的 MIP對喜樹堿具有快速的吸附速率。
本發(fā)明采用基質(zhì)固相分散技術(shù)作為分離模式，提取分離喜樹堿，使得提取和凈化在一個(gè)體系中完成，使樣品制備過程簡單，減少了實(shí)驗(yàn)時(shí)間和溶劑使用量；應(yīng)用分子印跡聚合物作為分離介質(zhì)，提高了喜樹堿提取分離的選擇性效果，該聚合物對喜樹堿具有兩種結(jié)合方式，總的吸附量(Qmaxl+Qmax2)可達(dá)IOlOmg g-1 ;在制備分子印跡聚合物時(shí)采用的是表面印跡技術(shù)，把結(jié)合位點(diǎn)局限在具有良好可接近性的二氧化硅表面上，從而有利于模板分子的洗脫和再結(jié)合，并且制備過程簡單，條件易于控制，生產(chǎn)成本低。
權(quán)利要求
1.利用分子印跡一基質(zhì)固相分散技術(shù)分離喜樹堿的方法，其特征在于利用分子印跡一基質(zhì)固相分散技術(shù)分離喜樹堿的方法，具體是按照以下步驟完成的一、將喜樹原料粉碎至細(xì)度為40目飛O目，得到喜樹粉末，按照分子印跡聚合物與喜樹粉末的質(zhì)量比為1:廣4，稱取喜樹粉末和分子印跡聚合物，將喜樹粉末和分子印跡聚合物混合，研磨均化5mirTlOmin,得到混合粉末；二、將步驟一得到的混合粉末移入裝有玻璃棉墊底的注射器中，再在混合粉末上方放置玻璃棉，壓實(shí)；三、將淋洗劑倒入壓實(shí)的注射器中，以lmL/min"2mL/min的流速淋洗,其中注射器中混合粉末的質(zhì)量與淋洗劑的體積比為Ig 5mL^25mL ；四、將洗脫劑倒入淋洗后的注射器中，以lmL/mirT2mL/min的流速洗脫，其中注射器中混合粉末的質(zhì)量與洗脫劑的體積比為Ig :5mL 25mL，完成利用分子印跡一基質(zhì)固相分散技術(shù)分離喜樹堿的方法。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用分子印跡一基質(zhì)固相分散技術(shù)分離喜樹堿的方法，其特征在于步驟一中分子印跡聚合物與喜樹堿樣品粉末的質(zhì)量比為1:1. Γ2
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的利用分子印跡一基質(zhì)固相分散技術(shù)分離喜樹堿的方法，其特征在于步驟二中玻璃棉的厚度為2mnT3mm。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的利用分子印跡一基質(zhì)固相分散技術(shù)分離喜樹堿的方法，其特征在于步驟三中混合粉末的質(zhì)量與淋洗劑的體積比為Ig :10mL 20mL。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的利用分子印跡一基質(zhì)固相分散技術(shù)分離喜樹堿的方法，其特征在于步驟三中淋洗劑為甲醇水溶液或乙醇水溶液，其中甲醇或乙醇與水的體積比為 1:10 20。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的利用分子印跡一基質(zhì)固相分散技術(shù)分離喜樹堿的方法，其特征在于步驟四中混合粉末的質(zhì)量與洗脫劑的體積比為Ig :10mL 20mL。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的利用分子印跡-基質(zhì)固相分散技術(shù)分離喜樹堿的方法，其特征在于步驟四中洗脫劑為乙酸與甲醇或乙醇的混合溶液，其中乙酸與甲醇或乙醇的體積比為 1:10 50。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用分子印跡-基質(zhì)固相分散技術(shù)分離喜樹堿的方法，其特征在于步驟一所述的分子印跡聚合物，具體是按照以下步驟制備的A、將硅烷偶聯(lián)劑KH570、蒸餾水、甲苯和濃硫酸混合均勻，在溫度為50°C 70°C條件下， 控制轉(zhuǎn)速為200rmp 300rmp,保持3h、h,得到混合溶液A,其中蒸懼水與甲苯的體積比為 1:3飛，濃硫酸與蒸餾水的體積比為1:廣2，硅烷偶聯(lián)劑1(冊70與蒸餾水、甲苯和濃硫酸的總體積比為1:8 15 ；B、采用分液漏斗將步驟一得到的混合溶液A進(jìn)行分液，除去水相部分，得到甲苯層， 向甲苯層中加入納米二氧化硅，混合均勻，在溫度為100°C 120°C條件下，控制轉(zhuǎn)速為 200rmp 300rmp，保持3tT5h，再用純甲醇進(jìn)行淋洗，然后在溫度為50°C 70°C條件下烘干，得到硅烷化修飾的SiO2，其中二氧化硅的質(zhì)量與步驟一的硅烷偶聯(lián)劑KH570體積比為 lg:3mL 5mL ；C、將模板分子、溶劑和功能單體混合均勻，控制轉(zhuǎn)速為200rmp 300rmp，保持ltT3h，得到混合溶液B，其中模板分子與功能單體的物質(zhì)的量之比為1:3飛，模板分子的物質(zhì)的量與溶劑的體積比為lmmol :100mL 300mL，模板分子為喜樹堿，溶劑為甲醇、乙腈或氯仿，功能單體為甲基丙烯酸、丙烯酸或丙烯酰胺；D、將步驟B得到的硅烷化修飾的SiO2加入到步驟C得到的混合溶液B中，再加入交聯(lián)劑和引發(fā)劑，在溫度為50°C 70°C條件下，控制轉(zhuǎn)速為200rmp 300rmp，保持20tT30h，得到含模板分子的分子印跡聚合物，其中硅烷化修飾的SiO2的質(zhì)量與交聯(lián)劑的物質(zhì)的量之比為Ig :8mmof 15mmol，步驟C得到的混合溶液B中模板分子與交聯(lián)劑的物質(zhì)的量之比為1: 1(Γ30，引發(fā)劑的質(zhì)量與混合溶液B的體積比為Ig :1000mL 2000mL，交聯(lián)劑為乙二醇二甲基丙烯酸酯、三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸酯或 二乙烯基苯，引發(fā)劑為偶氮二異丁腈；E、將步驟D得到的含模板分子的分子印跡聚合物放入索氏提取器中，用洗脫劑洗脫 20tT30h，再在溫度為50°C 60°C條件下烘干，得到分子印跡聚合物，其中洗脫劑為甲醇或乙醇與乙酸的混合溶液，且乙酸與甲醇或乙醇的體積比為1:3 5。
全文摘要
利用分子印跡—基質(zhì)固相分散技術(shù)分離喜樹堿的方法，本發(fā)明涉及一種分離喜樹堿的方法。本發(fā)明是要解決現(xiàn)有喜樹堿分離提取技術(shù)存在選擇性低、步驟復(fù)雜、有機(jī)溶劑消耗量大，基質(zhì)固相分散技術(shù)的選擇性低，包埋法制備分子印跡聚合物需要反復(fù)研磨，費(fèi)時(shí)費(fèi)力的問題。方法一、得到混合粉末；二、將混合粉末移入注射器；三、淋洗；四、洗脫。本發(fā)明樣品制備過程簡單，減少了實(shí)驗(yàn)時(shí)間和溶劑使用量；應(yīng)用分子印跡聚合物作為分離介質(zhì)，提高了喜樹堿提取分離的選擇性效果；在制備分子印跡聚合物時(shí)采用表面印跡技術(shù)，把結(jié)合位點(diǎn)局限在具有良好可接近性的二氧化硅表面上，有利于模板分子的洗脫和再結(jié)合，條件易于控制，生產(chǎn)成本低。本發(fā)明用于分離喜樹堿。
文檔編號C08F222/14GK102993209SQ201210540350
公開日2013年3月27日 申請日期2012年12月14日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月14日
發(fā)明者陳立鋼, 洪言鎖, 李斌 申請人:東北林業(yè)大學(xué)