：本發(fā)明涉及一種兼具食用和藥用價(jià)值的優(yōu)質(zhì)珍貴大型真菌的人工栽培方法，即蠶蛹北冬蟲(chóng)夏草高產(chǎn)菌株工廠(chǎng)化栽培技術(shù)，屬于食藥用真菌的人工栽培領(lǐng)域。

背景技術(shù)：
：北冬蟲(chóng)夏草[Cordycepsmilitaris(L.Fr)Link]也叫蛹蟲(chóng)草或蛹草，俗名不老草，是蟲(chóng)，菌結(jié)合的一種大型食藥用真菌，屬子囊菌亞門(mén)麥角菌科蟲(chóng)草屬真菌，與冬蟲(chóng)夏草同屬異種，寄生于鱗翅目、鞘翅目等昆蟲(chóng)的蛹和幼蟲(chóng)中，主要分布在排水良好的褐色或黑褐色的森林土壤中，生活在土中或樹(shù)葉、草叢及地上的樹(shù)皮縫里。多數(shù)子座叢生，少數(shù)單生，子座長(zhǎng)2-5cm，粗0.5-0.9mm，子座頂端有許多乳頭狀突起的子囊殼，每個(gè)鮮重0.8-1.3g，干重0.28-3.2g。北冬蟲(chóng)夏草為全草入藥，含蛹體、子座、菌絲體等，其有效成分包括：蟲(chóng)草素、蟲(chóng)草酸、蟲(chóng)草多糖、SOD等。性平，味甘，具有抗疲勞、抗衰老，增強(qiáng)免疫和性功能等作用，可殺滅喉癌細(xì)胞，能補(bǔ)肺益胃，壯陽(yáng)，有扶虛損、益精氣、止血、化痰、鎮(zhèn)靜等多種功能。1988年，由人民衛(wèi)生出版社出版的《全國(guó)中草藥匯編》中記載了北冬蟲(chóng)夏草的子實(shí)體及蟲(chóng)體可做冬蟲(chóng)夏草入藥。經(jīng)中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院，中科院藥物研究所等權(quán)威部門(mén)檢測(cè)表明，北冬蟲(chóng)夏草的一些主要營(yíng)養(yǎng)成分及活性成分(蟲(chóng)草素、蟲(chóng)草酸、蟲(chóng)草多糖、SOD酶活等)都要高于冬蟲(chóng)夏草，因此，北冬蟲(chóng)夏草已發(fā)展成為冬蟲(chóng)夏草的理想替代品。野生的北冬蟲(chóng)夏草為國(guó)家采集收購(gòu)品種，但資源極為短缺，市場(chǎng)價(jià)格又甚為昂貴，隨著其珍貴的食藥用價(jià)值被越來(lái)越多的人所接受、了解，市場(chǎng)需求逐漸增大，但是在其生產(chǎn)過(guò)程中常出現(xiàn)菌絲不轉(zhuǎn)色、徒長(zhǎng)，子實(shí)體產(chǎn)量減少或根本不產(chǎn)生子實(shí)體等現(xiàn)象，大規(guī)模生產(chǎn)時(shí)，尚存在技術(shù)不成熟、不配套，勞動(dòng)強(qiáng)度大、工作效率低、污染嚴(yán)重等問(wèn)題，這都成為了限制其進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)的因素，此時(shí)，大規(guī)模的生產(chǎn)藥用成分及性狀穩(wěn)定的北冬蟲(chóng)夏草勢(shì)在必行。目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)北冬蟲(chóng)夏草有效成分及藥理藥效方面的研究比較深入，人工栽培方面的研究也從未間斷過(guò)，近年來(lái)，使用大米、小麥等對(duì)北冬蟲(chóng)夏草進(jìn)行栽培都取得了成功，并已有一部分開(kāi)始了規(guī)?；a(chǎn)。1987年開(kāi)始，陸續(xù)有大量的北冬蟲(chóng)夏草方面研究的專(zhuān)利被公開(kāi)，其中不乏關(guān)于對(duì)其進(jìn)行工廠(chǎng)化生產(chǎn)的內(nèi)容，專(zhuān)利號(hào)93111121.8的“蛹蟲(chóng)草子實(shí)體與菌絲體工廠(chǎng)化生產(chǎn)技術(shù)”主要通過(guò)發(fā)酵罐對(duì)菌絲體進(jìn)行擴(kuò)繁，滿(mǎn)足人們對(duì)其的需求；專(zhuān)利號(hào)00130381.3的“蠶蛹蟲(chóng)草工廠(chǎng)化生產(chǎn)方法”選擇柞蠶繭，剝繭選蛹，對(duì)蛹進(jìn)行消毒然后向蛹體內(nèi)注射菌液，培養(yǎng)僵菌；專(zhuān)利號(hào)為200910305635.1的“一種蛹蟲(chóng)草工廠(chǎng)化培養(yǎng)方法”采用先進(jìn)的自動(dòng)洗瓶機(jī)、自動(dòng)灌注機(jī)以及自動(dòng)液體接種機(jī)設(shè)備，并優(yōu)化了堆疊次序，但是對(duì)生產(chǎn)材料及具體生產(chǎn)方法及環(huán)境調(diào)控等未做進(jìn)一步的介紹；專(zhuān)利號(hào)為201210121382.4的“一種蛹蟲(chóng)草子實(shí)體的規(guī)?；耘喾椒ê唾|(zhì)量檢測(cè)方法”使用大米培養(yǎng)基進(jìn)行栽培蛹蟲(chóng)草，并且詳細(xì)說(shuō)明了整個(gè)過(guò)程中環(huán)境因子的調(diào)控。申鴻等(蠶體和蛹粉代料培養(yǎng)基上的蛹蟲(chóng)草生長(zhǎng)狀況和品質(zhì)檢測(cè).蠶業(yè)科學(xué)，2012，38(1)：0130-0134)研究表明，同一菌株在不同的培養(yǎng)基質(zhì)中培育蛹蟲(chóng)草，蠶體培養(yǎng)基中所培育的蛹蟲(chóng)草品質(zhì)性狀及蟲(chóng)草素含量高于蛹粉與粳米及糯米培養(yǎng)基。而目前，使用蠶蛹作為基質(zhì)進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)北冬蟲(chóng)夏草尚未實(shí)現(xiàn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
：本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是客服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種新型的北冬蟲(chóng)夏草工廠(chǎng)化栽培技術(shù)，該技術(shù)以蠶蛹為唯一原料，使用液體菌種直接向蛹體噴灑接種，蟲(chóng)草成品使用凍干機(jī)冷凍干燥，具有生產(chǎn)效率高，菌絲及子座生長(zhǎng)速度快，性狀穩(wěn)定，無(wú)外來(lái)污染，藥用成分高，生物學(xué)效率高，保存效果好，保存時(shí)間長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的：北冬蟲(chóng)夏草母種在PDA培養(yǎng)基上進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)后接種于液體培養(yǎng)基中獲得液體菌種，將液體菌種經(jīng)自動(dòng)接種機(jī)接種于已經(jīng)過(guò)高壓滅菌的蠶蛹中，培養(yǎng)直至菌種吃透蛹體。在蛹體表面出現(xiàn)淺黃色點(diǎn)狀突起即子座原基時(shí)，開(kāi)蓋等待出草，此時(shí)溫度控制在18℃，空氣相對(duì)濕度80％以上，光照強(qiáng)度200-300Lux。本發(fā)明選用的是一次成型的聚丙烯菌種瓶，根據(jù)不同生長(zhǎng)階段，通過(guò)調(diào)整瓶蓋內(nèi)的過(guò)濾網(wǎng)及適時(shí)摘除瓶蓋來(lái)調(diào)節(jié)通氣狀況。我院購(gòu)進(jìn)的20000L超大型高壓滅菌柜，每次可完成對(duì)4500瓶以上的培養(yǎng)基質(zhì)進(jìn)行高壓滅菌，同時(shí)我院引進(jìn)的自動(dòng)接種設(shè)備具備四口接種的功能，每小時(shí)可接種3800瓶，這都大大的提高了北冬蟲(chóng)夏草的生產(chǎn)效率。本發(fā)明中，所使用的菌種為經(jīng)過(guò)發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)的液體菌種，生產(chǎn)周期短，菌球密度均一，接種后，發(fā)菌速度均勻，菌絲吃料速度快，覆蓋料面時(shí)間短，接種后保持室溫25℃，不進(jìn)行通風(fēng)處理，靜置5天后，菌絲布滿(mǎn)料面，此時(shí)逐漸加光，并保證室內(nèi)空氣濕度80％以上；當(dāng)培養(yǎng)料表面有蟲(chóng)草原基產(chǎn)生時(shí)，調(diào)整光照強(qiáng)度至200-300Lux，此時(shí)打開(kāi)瓶蓋，使用專(zhuān)業(yè)噴霧設(shè)備向料面噴水，設(shè)置溫度為19-20℃，空氣相對(duì)濕度85-90％，直至蟲(chóng)草收獲；待蟲(chóng)草長(zhǎng)至4cm以上時(shí)，準(zhǔn)備開(kāi)始采收，將聚丙烯菌種瓶從瓶底部環(huán)切，將蟲(chóng)草子座與蛹體部分完整取出，冷凍干燥30小時(shí)后，采用真空密封盒包裝備用。本發(fā)明中所選用的各級(jí)菌種培養(yǎng)料配方為：母種培養(yǎng)基：PDA培養(yǎng)基：馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂20g，KH2PO41g，MgSO40.5g，加水至1000ml，pH自然。液體發(fā)酵罐培養(yǎng)基：馬鈴薯200g，白砂糖180g，蛋白胨12g，酵母粉8g，MgSO42g，KH2PO41g，加水至1000ml，pH自然。北冬蟲(chóng)夏草栽培培養(yǎng)料：選用速凍蠶蛹，每瓶150g，121℃高壓滅菌50min，冷卻后使用全自動(dòng)接種設(shè)備，每瓶接種5ml。本發(fā)明整體考察了北冬蟲(chóng)夏草栽培過(guò)程中各級(jí)培養(yǎng)基的組成、接種后至出草之前各種環(huán)境因子(溫度、濕度、光照強(qiáng)度等)對(duì)蟲(chóng)草長(zhǎng)勢(shì)及產(chǎn)量的影響程度，在此基礎(chǔ)上，優(yōu)化和篩選出了最適宜蟲(chóng)草生長(zhǎng)的因子，形成了一套完整、系統(tǒng)的北冬蟲(chóng)夏草人工栽培方法。本發(fā)明方法可有效提高北冬蟲(chóng)夏草生產(chǎn)效率，接種后發(fā)菌速度快，菌絲整齊致密，滿(mǎn)瓶時(shí)間短，現(xiàn)原基時(shí)間早，蟲(chóng)草子座質(zhì)量好，數(shù)量多，生物學(xué)效率可達(dá)100％以上。附圖說(shuō)明：圖1利用蠶蛹進(jìn)行工廠(chǎng)化栽培北冬蟲(chóng)夏草的工藝流程；圖2野生北冬蟲(chóng)夏草圖片；圖3北冬蟲(chóng)夏草母種及液體菌種培養(yǎng)；圖4北冬蟲(chóng)夏草鮮品圖片；圖5北冬蟲(chóng)夏草采收過(guò)程；圖6北冬蟲(chóng)夏草干品；圖7北冬蟲(chóng)夏草工廠(chǎng)化生產(chǎn)過(guò)程中所使用的自動(dòng)接種機(jī)、自動(dòng)洗瓶機(jī)、全自動(dòng)高壓滅菌柜及培養(yǎng)室內(nèi)一角。具體實(shí)施方式：下面結(jié)合具體實(shí)例來(lái)進(jìn)一步描述本發(fā)明，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和特點(diǎn)將會(huì)隨著描述更加清楚。但這些實(shí)例僅是范例性的，并不對(duì)本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。本領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍下可以對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案的細(xì)節(jié)和形式進(jìn)行修改或替換，但這些修改和替換均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。實(shí)驗(yàn)材料：野生的蛹蟲(chóng)草子座從長(zhǎng)白山采集，主要生物學(xué)性狀如下：子座單生或散生，從寄主頭部或者節(jié)間長(zhǎng)出，多為圓柱形，少數(shù)可見(jiàn)扁狀，橙黃色。子座高2-6cm，寬2-4mm；頂端稍寬，為3-6mm，子座頂端具有乳頭狀突起的子囊殼，一般為卵形，顏色稍深，半埋于子座中。北冬蟲(chóng)夏草菌種的分離：采用組織分離法，在無(wú)菌室內(nèi)，選用品質(zhì)優(yōu)良的北冬蟲(chóng)夏草子座，切取頂端子實(shí)體部分，大小0.2-0.4cm，將組織表面用清水洗凈，再用0.1-0.2％升汞水消毒處理1-2min，然后用無(wú)菌水沖洗2次，再接種于培養(yǎng)基(馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂20g，KH2PO41g，MgSO40.5g，加水至1000ml，pH自然)中央，整個(gè)過(guò)程都應(yīng)遵循無(wú)菌操作，接種后置于25℃恒溫暗培養(yǎng)，3-5天后可見(jiàn)由組織塊長(zhǎng)出白色絨毛狀菌絲。北冬蟲(chóng)夏草工廠(chǎng)化栽培技術(shù)：1、將從野生北冬蟲(chóng)夏草子座上分離得到的北冬蟲(chóng)夏草母種在PDA培養(yǎng)基上擴(kuò)大培養(yǎng)后，接種于液體培養(yǎng)基上(PDB培養(yǎng)基：配方同PDA，不加瓊脂)，靜置24h后，25℃震蕩培養(yǎng)，獲得北冬蟲(chóng)夏草液體菌種。2、將北冬蟲(chóng)夏草液體菌種接種于液體發(fā)酵罐中(營(yíng)養(yǎng)液配方：馬鈴薯200g，白砂糖180g，蛋白胨12g，酵母粉8g，MgSO42g，KH2PO41g，加水至1000ml，pH自然。)，25℃光培養(yǎng)5天，既得可以進(jìn)行大規(guī)模自動(dòng)接種使用的菌種。3、將采購(gòu)自山東省棲霞市的優(yōu)質(zhì)速凍蠶蛹按照150g/瓶的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行裝瓶，121℃高壓滅菌50min，冷卻后使用自動(dòng)接種設(shè)備進(jìn)行接種，每瓶接種5ml，接種后轉(zhuǎn)至培養(yǎng)室內(nèi)，25℃暗培養(yǎng)5天，菌絲即可覆蓋料面；此時(shí)轉(zhuǎn)至光培養(yǎng)，調(diào)整室內(nèi)溫度19-20℃，20-25天即可有蟲(chóng)草子座原基產(chǎn)生，增加光照至200-300lux，打開(kāi)瓶蓋，向料面均勻噴水，以噴霧狀落入瓶?jī)?nèi)而不積水為宜，保持空氣濕度在85-90％，子座原基開(kāi)始伸長(zhǎng)，顏色逐漸由淡黃色轉(zhuǎn)為深黃色，接種后45-50天，蟲(chóng)草伸長(zhǎng)可達(dá)4cm，此時(shí)即可采收。平均每瓶蟲(chóng)草子座鮮重90-120g，生物學(xué)效率為163.7％。其中，北冬蟲(chóng)夏草的生物學(xué)效率計(jì)算公式如下所示：生物學(xué)效率(％)＝(北冬蟲(chóng)夏草子座鮮重/蠶蛹干重)×100％4、采收的北冬蟲(chóng)夏草按照需求可將子座與蛹體分離或整體由瓶?jī)?nèi)取出，使用大型凍干機(jī)，凍干30小時(shí)以后，可完成對(duì)其冷凍干燥過(guò)程，將凍干后的成品裝入真空密封盒，密封保存，這樣就可以保證其干燥后顏色、形狀均不發(fā)生改變，并且貯存時(shí)間長(zhǎng)，藥效保存完整。北冬蟲(chóng)夏草工廠(chǎng)化栽培產(chǎn)量分析：我工廠(chǎng)現(xiàn)每天可加工鮮蛹1400kg，生產(chǎn)北冬蟲(chóng)夏草9300瓶，每瓶可產(chǎn)蟲(chóng)草子座鮮重90-120g，干重26-32g，即每天可生產(chǎn)蟲(chóng)草子座鮮品837-1116kg，干品241.8-297.6kg，生產(chǎn)周期45-60天。