大豆分離蛋白高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠的制備及作為藥物控釋載體的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種大豆分離蛋白互穿網(wǎng)絡(luò)高分子水凝膠的制備方法，是將大豆分離蛋白粉分散于堿溶液中，加入單體甲基丙烯酸-2-羥乙酯，交聯(lián)劑N,N＇-亞甲基雙丙烯酰胺，引發(fā)劑過硫酸鉀，攪拌使其充分溶解；然后在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，升溫至40~80℃進(jìn)行聚合反應(yīng)0.5~5h；再加入交聯(lián)劑戊二醛攪拌1~20min使其溶解后于40~85℃下進(jìn)行交聯(lián)反應(yīng)0.5~9h，反應(yīng)液冷卻至室溫，用乙醇、二次水中浸泡，得到具有獨(dú)特的拓?fù)渚W(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的大豆分離蛋白互穿網(wǎng)絡(luò)高分子水凝膠。實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明制備的大豆分離蛋白互穿網(wǎng)絡(luò)高分子水凝膠對(duì)小分子和大分子模型藥物均具有很好的緩釋效果，因此可用于藥物控釋載體用藥物制劑的生產(chǎn)中。
【專利說明】大豆分離蛋白高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠的制備及作為藥物控釋載體的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于高分子【技術(shù)領(lǐng)域】，涉及一種大豆分離蛋白高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠的制備；本發(fā)明同時(shí)還涉及該高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠作為藥物控釋載體的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 大豆分離蛋白是以低溫脫溶大豆柏為原料生產(chǎn)的一種全價(jià)蛋白類食品添加劑。大豆分離蛋白中蛋白質(zhì)含量在90%以上，氨基酸種類有近20種，并含有人體必需氨基酸。其營(yíng)養(yǎng)豐富，不含膽固醇，是植物蛋白中為數(shù)不多的可替代動(dòng)物蛋白的品種之一。依據(jù)沉降系數(shù)，大豆分離蛋白可分為2S、7S、11S和15S四個(gè)組分，其中球蛋白占總蛋白的50 90% ο大?分尚蛋白主要包含大?球蛋白(常稱為IIS球蛋白)和β-伴大豆球蛋白(常稱為7S球蛋白)兩類球蛋白，占總蛋白的70%，它們均由17種氨基酸組成，其主要組成元素為為C、H、O、N、S、P及少量的Zn、Mg、Fe和Cu等，由?χ、υ>Λ?ι和Y四種亞基組成。大豆蛋白營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，具有良好的乳化性、凝膠性、附著性等，同時(shí)，具有可降解、無污染、綠色環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)，因而有巨大的潛在應(yīng)用價(jià)值。
[0003]聚甲基丙烯酸-2-羥乙酯作為一種傳統(tǒng)的生物基礎(chǔ)材料，具有良好的生物相容性，其載藥生物材料即有優(yōu)異的生物學(xué)功能，又能釋放藥物，是一種潛在的組織工程支架材料和緩、控釋藥物載體材料，被廣泛地應(yīng)用于補(bǔ)齒、藥物緩釋、燒傷涂覆、器官移植、接觸鏡制造、細(xì)胞培養(yǎng)及生物分子與酶固定化等方面。
[0004]互穿網(wǎng)絡(luò)聚合物(IPN)是一種新型的多相聚合物材料，它是由交聯(lián)聚合物I和交聯(lián)聚合物II各自交聯(lián)后所得的網(wǎng)絡(luò)連續(xù)地相互穿插而成，具有獨(dú)特的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)和協(xié)同效應(yīng)，能充分發(fā)揮多組分網(wǎng)絡(luò)的優(yōu)勢(shì)，并通過合成方法來控制其形態(tài)結(jié)構(gòu)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的特點(diǎn)，提供一種大豆分離蛋白高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠的制備方法。
[0006]本發(fā)明的另一目的是提供一種大豆分離蛋白高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠作為藥物載體的應(yīng)用。
[0007](—)大豆分離蛋白高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠的制備
本發(fā)明大豆分離蛋白高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠的制備方法，是先將大豆分離蛋白粉分散于堿溶液中，加入單體甲基丙烯酸-2-羥乙酯，交聯(lián)劑N，N ’ -亞甲基雙丙烯酰胺，引發(fā)劑過硫酸鉀，攪拌使單體、交聯(lián)劑及引發(fā)劑充分溶解；在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，升溫至40~80°C后聚合反應(yīng)0.5~5小時(shí)；再加入交聯(lián)劑戊二醛后攪拌I~20 min使其溶解，然后于40~85°C下交聯(lián)反應(yīng)0.5~9小時(shí)；反應(yīng)液冷卻至室溫，分別用乙醇、二次水依次浸泡，得到大豆分離蛋白高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠。
[0008]所述大豆分離蛋白粉的粒度為50-100目；大豆分離蛋白粉與甲基丙烯酸-2-羥乙酯的質(zhì)量比為1:0.5~1:5。[0009]所述堿溶液采用濃度l~10mOl/L的尿素溶液或NaOH溶液。
[0010]所述引發(fā)劑過硫酸鉀的用量為大豆分離蛋白粉質(zhì)量的廣5% ;交聯(lián)劑N，N '-亞甲基雙丙烯酰胺的加入量為大豆分離蛋白粉質(zhì)量的廣20% ;交聯(lián)劑戊二醛的加入量為大豆分離蛋白粉質(zhì)量的?0-ιοο%。
[0011 ] 上述制備的水凝膠呈淡褐色且成型效果良好。
[0012](二)大豆分離蛋白高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠的結(jié)構(gòu)、形貌表征
下面通過紅外光譜(FT-1R)、掃描電鏡(SEM)等表征手段，對(duì)本發(fā)明合成的大豆分離蛋白互穿網(wǎng)絡(luò)高分子水凝膠的表面官能團(tuán)類型、結(jié)構(gòu)形貌進(jìn)行分析研究。
[0013]圖1為本發(fā)明制備的大豆分離蛋白互穿網(wǎng)絡(luò)高分子水凝膠的紅外光譜圖(FT-1R)0其中，曲線I為大豆分離蛋白互穿網(wǎng)絡(luò)高分子水凝膠，曲線2為大豆分離蛋白，曲線3為聚甲基丙烯酸-2-羥乙酯均聚物。從圖1可以看到，在1726CHT1處有較強(qiáng)吸收，是由于互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠酯羰基的C=O伸縮振動(dòng)，1652cm-1處的吸收是由于酰胺一帶，來自蛋白質(zhì)中酰胺鍵的C=O伸縮振動(dòng)吸收，在1541 cnT1處的吸收峰是由于特征的酰胺二帶，來自N-H彎曲振動(dòng)，在1250 cnT1處是由于酰胺三帶，來自C-N伸縮振動(dòng)吸收，在1160CHT1和1080CHT1處有較強(qiáng)的吸收峰是由于甲基丙烯酸-2-羥乙酯均聚物的C-O伸縮振動(dòng)。用紅外表征甲基丙烯酸-2-羥乙酯均聚物和互穿網(wǎng)絡(luò)高分子水凝膠，枝鏈和甲基丙烯酸-2-羥乙酯均聚物的紅外譜圖基本一致，1750CHT1左右的-C=O伸縮振動(dòng)峰，1160CHT1和1080CHT1左右的-C-O-伸縮振動(dòng)峰，以及3000cm-l以上的-O-H伸縮振動(dòng)峰都對(duì)應(yīng)較好。說明所制備的水凝膠的原材料之間具有良好的相容性，形成了互穿網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。
[0014]圖2為甲基丙烯酸-2-羥乙酯和大豆分離蛋白互穿網(wǎng)絡(luò)高分子水凝膠的電鏡掃描(SEM)0從圖2可以看出，大豆分離蛋白互穿網(wǎng)絡(luò)高分子凝膠表面能看到明顯的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，具有多層次大小不均一的孔狀結(jié)構(gòu)，有利于大量分子量不同的藥物的負(fù)載，說明其具有良好的載藥性能。
[0015](三)載藥性能測(cè)試
1、對(duì)羅丹明B的載藥性能測(cè)試:將干燥的水凝膠樣品放置于羅丹明B水溶液中溶脹吸附3天，溶脹平衡后，采用紫外-可見光譜分別檢測(cè)吸附前后羅丹明B水溶液的吸光率并計(jì)算載藥量，每個(gè)樣品做三次平行。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:對(duì)羅丹明B的最大載藥量為4.8%。
[0016]2、對(duì)牛血清白蛋白的載藥性能測(cè)試:將干燥的水凝膠樣品放置于牛血清白蛋白水溶液中溶脹吸附3天，溶脹平衡后，采用紫外-可見光譜分別檢測(cè)吸附前后牛血清白蛋白水溶液的吸光率并計(jì)算載藥量，每個(gè)樣品做三次平行。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:對(duì)牛血清白蛋白的最大載藥量為6.4%ο
[0017](四)大豆分離蛋白互穿網(wǎng)絡(luò)高分子水凝膠的控制釋放性能
1、對(duì)藥物模型小分子(羅丹明B:RB)的釋放試驗(yàn)
將本發(fā)明制備的大豆分離蛋白互穿網(wǎng)絡(luò)高分子水凝膠冷凍干燥，將干燥的水凝膠樣品放置于RB (lmg/mL)水溶液中溶脹吸附3天，溶脹平衡后，將載藥后的水凝膠表面沖洗后，37°C下，浸入100 mL pH值分別為3,7.4和8.4的PBS緩沖溶液(0.02mol/L)中檢測(cè)其釋放行為。在PBS緩沖溶液中釋放的RB的含量可采用紫外-可見光譜檢測(cè)。一定時(shí)間間隔下取5 mL釋放介質(zhì)測(cè)RB的吸光度，再加5 mL新的同溫度的釋放介質(zhì)繼續(xù)振蕩釋放，每個(gè)樣品做3次平行，計(jì)算累計(jì)釋放率。
[0018]圖3為本發(fā)明大豆分離蛋白互穿網(wǎng)高分子絡(luò)水凝膠在pH為3、7.4,8.4的緩沖溶液中對(duì)羅丹明B的釋放曲線，其中，曲線I為水凝膠在pH=3的緩沖溶液中對(duì)羅丹明B的釋放，曲線2為水凝膠在pH=7.4的緩沖溶液中對(duì)羅丹明B的釋放，曲線3為水凝膠在pH=8.4的緩沖溶液中對(duì)羅丹明B的釋放。圖3的測(cè)試結(jié)果表明，本發(fā)明高分子水凝膠對(duì)對(duì)羅丹明B在不同pH值的緩沖溶液中均有控制釋放性能，12 h后釋放曲線趨于平衡，且pH=8.4時(shí)藥物釋放具有最大累積釋放率。
[0019]2、對(duì)藥物模型大分子(牛血清白蛋白:BSA)的釋放試驗(yàn)
將本發(fā)明制備的大豆分離蛋白高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠冷凍干燥，將干燥的水凝膠樣品放置于BSA(10mg/mL)水溶液中溶脹吸附3天，溶脹平衡后，將載藥后的水凝膠表面沖洗后，37°C下，浸入100 mL pH值分別為3、7.4和8.4的PBS緩沖溶液(0.02mol/L)中檢測(cè)其釋放行為。在PBS緩沖溶液中釋放的BSA的含量可采用紫外-可見光譜檢測(cè)。一定時(shí)間間隔下取5 mL釋放介質(zhì)測(cè)BSA的吸光度，再加5 mL新的同溫度的釋放介質(zhì)繼續(xù)振蕩釋放，每個(gè)樣品做3次平行，計(jì)算累計(jì)釋放率。
[0020]圖4為本發(fā)明大豆分離蛋白互穿網(wǎng)絡(luò)高分子水凝膠在pH為3、7.4、8.4的緩沖溶液中對(duì)牛血清白蛋白的釋放曲線，其中，曲線I為水凝膠在pH=3的緩沖溶液中對(duì)牛血清白蛋白的釋放，曲線2為水凝膠在pH=7.4的緩沖溶液中對(duì)牛血清白蛋白的釋放，曲線3為水凝膠在pH=8.4的緩沖溶液中對(duì)牛血清白蛋白的釋放。圖4的測(cè)試結(jié)果表明，本發(fā)明的大豆分離蛋白高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠對(duì)牛血清白蛋白在不同PH值的緩沖溶液中均有很好的控制釋放性能，12 h后釋放曲線趨于平衡，且pH=8.4時(shí)藥物釋放具有最大累積釋放率。
[0021]綜上所述，本發(fā)明利用甲基丙烯酸-2-羥乙酯和大豆分離蛋白的特點(diǎn)，制備的大豆分離蛋白高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠(SP1-PHEMA)對(duì)小分子和大分子模型藥物均具有很好的緩釋效果，因此可作為藥物控釋載體用于藥物制劑的生產(chǎn)中。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0022]圖1為本發(fā)明大豆分離蛋白互穿網(wǎng)絡(luò)高分子水凝膠(SP1-PHEMA)的紅外光譜圖(FT-1R)；
圖2為本發(fā)明大豆分離蛋白互穿網(wǎng)絡(luò)高分子水凝膠的電鏡掃描圖(SEM)；
圖3為本發(fā)明大豆分離蛋白互穿網(wǎng)高分子絡(luò)水凝膠在pH為3、7.4,8.4的緩沖溶液中對(duì)羅丹明B的釋放曲線；
圖4為本發(fā)明大豆分離蛋白互穿網(wǎng)絡(luò)高分子水凝膠在pH為3、7.4,8.4的緩沖溶液中對(duì)牛血清白蛋白的釋放曲線。
【具體實(shí)施方式】
[0023]下面通過具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明大豆分離蛋白互穿網(wǎng)絡(luò)高分子水凝膠的制備及載藥和緩釋性能作進(jìn)一步說明。
[0024]實(shí)施例一
1、大豆分離蛋白互穿網(wǎng)絡(luò)高分子水凝膠的制備
將0.1g大豆分離蛋白粉(100目)充分分散于10 mol/L氫氧化鈉溶液中(5mL)，在20°C攪拌使其充分分散；加入0.1 mL甲基丙烯酸-2-羥乙酯(0.1 g)，攪拌混合均勻后加入交聯(lián)劑NW -亞甲基雙丙烯酰胺0.01 g，過硫酸鉀溶液(過硫酸鉀0.01 g)，攪拌使其溶解，然后通氮?dú)獗Ｗo(hù)，升溫至40°C，攪拌反應(yīng)0.5 h，再加入戊二醛0.01 mL (0.01 g)，繼續(xù)攪拌1.5 min使其溶解后，在40°C下進(jìn)行交聯(lián)反應(yīng)0.5 h ;反應(yīng)液冷卻至室溫，分別用乙醇、二次水各浸泡lh，得到大豆分離蛋白高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠。
[0025]2、載藥性能測(cè)試
(I)對(duì)羅丹明B的載藥性能測(cè)試:將干燥的水凝膠樣品放置于羅丹明B (0.5mg/ mL)水溶液中溶脹吸附3天，溶脹平衡后，采用紫外-可見光譜檢測(cè)并計(jì)算得到載藥量為2.5%。
[0026](2)對(duì)牛血清白蛋白的載藥性能測(cè)試:將干燥的水凝膠樣品放置于牛血清白蛋白(5mg/ mL)水溶液中溶脹吸附3天，溶脹平衡后，采用紫外_可見光譜檢測(cè)并計(jì)算得到載藥量為4.9%ο
[0027]3、控制釋放性能的測(cè)定 (I)對(duì)羅丹明B的釋放性能測(cè)試
測(cè)試方法同前述。測(cè)試結(jié)果:大豆分離蛋白互穿網(wǎng)絡(luò)高分子水凝膠對(duì)羅丹明B在不同PH值的緩沖溶液中均有控制釋放性能，12 h后釋放曲線趨于平衡，且pH=8.4時(shí)藥物釋放具有最大累積釋放率，最大累計(jì)釋放量可達(dá)66%。
[0028]( 2 )對(duì)牛血清白蛋白的釋放性能測(cè)試
測(cè)試方法同前述。測(cè)試結(jié)果:大豆分離蛋白互穿網(wǎng)絡(luò)高分子水凝膠對(duì)牛血清白蛋白在不同PH值的緩沖溶液`中均有很好的控制釋放性能，12 h后釋放曲線趨于平衡，且pH=8.4時(shí)藥物釋放具有最大累積釋放率，最大累計(jì)釋放量可達(dá)65%。
[0029]實(shí)施例二
1、大豆分離蛋白互穿網(wǎng)絡(luò)高分子水凝膠的制備
將0.1g大豆分離蛋白粉(100目)充分分散于5 mol/L氫氧化鈉溶液中(8 mL)，在40°C攪拌使其充分分散；加入0.5 mL甲基丙烯酸-2-羥乙酯(0.5 g)，攪拌混合均勻后加入交聯(lián)劑N，N'-亞甲基雙丙烯酰胺0.05 g，過硫酸鉀溶液(過硫酸鉀0.02g)，充分?jǐn)嚢枋箚误w、交聯(lián)劑及引發(fā)劑溶解。通氮?dú)獗Ｗo(hù)下，升溫至50 °C后聚合反應(yīng)lh，再加入戊二醛0.02mL (0.02 g)，繼續(xù)攪拌2 min使其溶解；然后在50 1:下進(jìn)行交聯(lián)反應(yīng)I h ;反應(yīng)液冷卻至室溫，分別用乙醇、二次水各浸泡2 h，得到大豆分離蛋白高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠。
[0030]2、載藥性能測(cè)試
(I)對(duì)羅丹明B的載藥性能測(cè)試:將干燥的水凝膠樣品放置于羅丹明B(1.5mg/ mL )水溶液中溶脹吸附3天，溶脹平衡后，采用紫外-可見光譜檢測(cè)并計(jì)算得到載藥量為4.5%。
[0031](2)對(duì)牛血清白蛋白的載藥性能測(cè)試:將干燥的水凝膠樣品放置于牛血清白蛋白(8mg/ mL )水溶液中溶脹吸附3天，溶脹平衡后，采用紫外-可見光譜檢測(cè)并計(jì)算得到載藥量為4.9%ο
[0032]3、控制釋放性能的測(cè)定
(I)對(duì)羅丹明B的釋放性能:大豆分離蛋白/高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠對(duì)羅丹明B在不同pH值的緩沖溶液中均有控制釋放性能，12 h后釋放曲線趨于平衡，且pH=8.4時(shí)藥物釋放具有最大累積釋放率，最大累計(jì)釋放量可達(dá)58%。
[0033](2)對(duì)牛血清白蛋白的釋放試驗(yàn):大豆分離蛋白/高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠對(duì)牛血清白蛋白在不同PH值的緩沖溶液中均有很好的控制釋放性能，12 h后釋放曲線趨于平衡，且pH=8.4時(shí)藥物釋放具有最大累積釋放率，最大累計(jì)釋放量可達(dá)69%。
[0034]實(shí)施例三
1、 大豆分離蛋白互穿網(wǎng)絡(luò)高分子水凝膠的制備
將0.1 g大豆分離蛋白粉(100目)充分分散于3 mol/L氫氧化鈉溶液中(10 mL)，在50°C攪拌使其充分分散，得到大豆分離蛋白分散液；加入0.8 mL甲基丙烯酸-2-羥乙酯(0.8 g)，攪拌混合均勻后依次加入交聯(lián)劑N，N'-亞甲基雙丙烯酰胺0.08 g，過硫酸鉀溶液(過硫酸鉀0.03 g)，充分?jǐn)嚢枋箚误w、交聯(lián)劑及引發(fā)劑溶解。在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，升溫至60°C后聚合反應(yīng)1.5 h，再加交聯(lián)劑入戊二醛0.03 mL (0.03 g)，繼續(xù)攪拌2.5 min使其溶解；然后在60°C下進(jìn)行交聯(lián)反應(yīng)1.5 h;反應(yīng)液冷卻至室溫，分別用乙醇、二次水浸泡3 h，得到大豆分離蛋白高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠。
[0035]2、載藥性能測(cè)試
(I)對(duì)羅丹明B的載藥性能測(cè)試:將干燥的水凝膠樣品放置于羅丹明B (2.5mg/ mL)水溶液中溶脹吸附3天，溶脹平衡后，采用紫外-可見光譜檢測(cè)并計(jì)算得到載藥量為3.5%。
[0036](2)對(duì)牛血清白蛋白的載藥性能測(cè)試:將干燥的水凝膠樣品放置于牛血清白蛋白(12mg/ mL )水溶液中溶脹吸附3天，溶脹平衡后，采用紫外-可見光譜檢測(cè)并計(jì)算得到載藥量為5.1%。
[0037]3、控制釋放性能的測(cè)定
(I)對(duì)羅丹明B的釋放性能:大豆分離蛋白/高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠對(duì)羅丹明B在不同pH值的緩沖溶液中均有控制釋放性能，12 h后釋放曲線趨于平衡，且pH=8.4時(shí)藥物釋放具有最大累積釋放率，最大累計(jì)釋放量可達(dá)70%。
[0038](2)對(duì)牛血清白蛋白的釋放性能:大豆分離蛋白/高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠對(duì)牛血清白蛋白在不同PH值的緩沖溶液中均有很好的控制釋放性能，12 h后釋放曲線趨于平衡，且pH=8.4時(shí)藥物釋放具有最大累積釋放率，最大累計(jì)釋放量可達(dá)74%。
[0039]實(shí)施例四
1、大豆分離蛋白互穿網(wǎng)絡(luò)高分子水凝膠的制備
將0.1g大豆分離蛋白粉(100目)充分分散于I mol/L尿素溶液中(15mL),在60°C攪拌使其充分分散；加入I mL甲基丙烯酸-2-羥乙酯(lg)，攪拌混合均勻后依次加入交聯(lián)劑N，N'-亞甲基雙丙烯酰胺0.01 g，過硫酸鉀溶液(過硫酸鉀0.04g)，充分?jǐn)嚢枋箚误w、交聯(lián)劑及引發(fā)劑溶液。在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，升溫至70°C后聚合反應(yīng)3 h;再加入戊二醛0.04 mL(0.04g)，繼續(xù)攪拌3 min后，在80 °C進(jìn)行交聯(lián)反應(yīng)2 h ;反應(yīng)液冷卻至室溫，分別用乙醇、二次水中浸泡4h，得到大豆分離蛋白互穿網(wǎng)絡(luò)高分子水凝膠。
[0040]2、載藥性能測(cè)試
(I)對(duì)羅丹明B的載藥性能測(cè)試:將干燥的水凝膠樣品放置于羅丹明B (3.5mg/ mL)水溶液中溶脹吸附3天，溶脹平衡后，采用紫外-可見光譜檢測(cè)并計(jì)算得到載藥量為4.8%。
[0041](2)對(duì)牛血清白蛋白的載藥性能測(cè)試:將干燥的水凝膠樣品放置于牛血清白蛋白(14mg/ mL)水溶液中溶脹吸附3天，溶脹平衡后，采用紫外-可見光譜檢測(cè)并計(jì)算得到載藥量為6.4%ο
[0042]3、控制釋放性能的測(cè)定(I)對(duì)羅丹明B的釋放性能:大豆分離蛋白/高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠對(duì)羅丹明B在不同pH值的緩沖溶液中均有控制釋放性能，12 h后釋放曲線趨于平衡，且pH=8.4時(shí)藥物釋放具有最大累積釋放率，最大累計(jì)釋放量可達(dá)67%。
[0043](2)對(duì)牛血清白蛋白的釋放性能:大豆分離蛋白/高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠對(duì)牛血清白蛋白在不同PH值的緩沖 溶液中均有很好的控制釋放性能，12 h后釋放曲線趨于平衡，且pH=8.4時(shí)藥物釋放具有最大累積釋放率，最大累計(jì)釋放量可達(dá)78%。
【權(quán)利要求】
1.一種大豆分離蛋白/高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠的制備方法，是先將大豆分離蛋白粉分散于堿溶液中，加入單體甲基丙烯酸-2-羥乙酯，交聯(lián)劑N，N ’ -亞甲基雙丙烯酰胺，引發(fā)劑過硫酸鉀，攪拌使單體、交聯(lián)劑及引發(fā)劑充分溶解；在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，升溫至40~80°C后聚合反應(yīng)0.5~5小時(shí)；再加入交聯(lián)劑戊二醛后攪拌I~20 min使其溶解，然后于40~85°C下交聯(lián)反應(yīng)0.5~9小時(shí)；反應(yīng)液冷卻至室溫，分別用乙醇、二次水依次浸泡，得到大豆分離蛋白/高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠。
2.如權(quán)利要求1所述大豆分離蛋白/高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠的制備方法，其特征在于:所述大豆分離蛋白粉的為粒度50~100目。
3.如權(quán)利要求1或2所述大豆分離蛋白/高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠的制備方法，其特征在于:大豆分離蛋白粉與甲基丙烯酸-2-羥乙酯的質(zhì)量比為1:0.5~1:5。
4.如權(quán)利要求1或2所述大豆分離蛋白/高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠的制備方法，其特征在于:所述堿溶液為濃度I~10 mol/L的尿素溶液或氫氧化鈉水溶液。
5.如權(quán)利要求1或2所述大豆分離蛋白/高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠的制備方法，其特征在于:所述引發(fā)劑過硫酸鉀的用量為大豆分離蛋白粉質(zhì)量的I~5%。
6.如權(quán)利要求1或2所述大豆分離蛋白/高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠的制備方法，其特征在于:交聯(lián)劑N，N '-亞甲基雙丙烯酰胺的加入量為大豆分離蛋白粉質(zhì)量的I~20%。
7.如權(quán)利要求1或2所述大豆分離蛋白/高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠的制備方法，其特征在于:交聯(lián)劑戊二醛的加入量為大豆分離蛋白粉質(zhì)量的10~100%。
8.如權(quán)利要求1所述大豆分離蛋白/高分子互穿網(wǎng)絡(luò)水凝膠作為藥物控釋載體的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】C08F220/28GK103524764SQ201310449288
【公開日】2014年1月22日 申請(qǐng)日期:2013年9月27日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月27日
【發(fā)明者】王榮民, 李榕, 何玉鳳, 馬瓊, 徐知麗 申請(qǐng)人:西北師范大學(xué)