一種藻類中提取多糖的提取方法
【專利摘要】一種藻類中提取多糖的提取方法屬海洋生物醫(yī)藥領域。按照以下步驟進行：（1）將海藻去雜洗凈，干燥后粉碎；（2）稱取100g海藻粉末，加85~90%乙醇回流提取4~6小時,過濾，藥渣干燥后，加水超聲提取5次，每次10min過濾，合并濾液于80~90℃濃縮至比重為1.03，醇沉，18~24h醇沉濃度為75%；離心過濾得沉淀物，沉淀物反復水溶醇沉至無還原糖反應，再經無水乙醇，丙酮洗滌多次后得藻類中提取多糖粗提物；（3）粗提物經活性碳脫色，Sevage法脫蛋白,流水透析法脫小分子，醇沉，真空干燥得藻類中提取多糖；（4）多糖中加入改性淀粉，加入的質量為多糖的0.5-1.2倍，攪拌均勻后，使用微波干燥，得粉末狀混合物，在外滅菌15秒后，密封包裝。本發(fā)明一種藻類中提取多糖的提取方法，方法簡便快速，重現性好，回收率高。
【專利說明】一種藻類中提取多糖的提取方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬海洋生物醫(yī)藥領域，特別涉及一種藻類中提取多糖的提取方法。
【背景技術】
[0002]海藻為海產藻類植物的通稱。中藥海藻為馬尾藻科海蒿子或羊棲菜的干燥藻體，具有軟堅散結，消痰利水的功能。臨床用于治療癭瘤，睪丸腫痛，痰飲水腫等癥?，F代研究表明，海藻具有增強免疫能力、抑制病毒和抗腫瘤的活性等作用。這些生物活性與其所含的藻類中提取多糖密切相關。據報道藻類中提取多糖是自然界廣泛分布的一種非還原性雙糖。其分子結構獨特，化學性質穩(wěn)定。藻類中提取多糖是一類高效的生物吸附劑，海澡多糖具有降血脂、抗氧化、免疫調節(jié)等作用，藻類中提取多糖衍生物可作為細胞物質的寒冷保護介質。海藻糖這些奇妙的生物學特性，使其在醫(yī)藥、食品、化妝品、農業(yè)等方面具有廣闊的應用前景。藻類中提取多糖的開發(fā)已成為國際范圍的研究熱點。

【發(fā)明內容】

[0003]本發(fā)明提供一種藻類中提取多糖的提取方法，按照以下步驟進行:
(1)將海藻去雜洗凈，干燥后粉碎；
(2)稱取100g海藻粉末，加85、0%乙醇回流提取4~6小時，過濾，藥渣干燥后，加水超聲提取5次，每次IOmin過濾，合并濾液于80、0 °C濃縮至比重為1.03，醇沉，18^24h醇沉濃度為75% ;離心過濾得沉淀物，沉淀物反復水溶醇沉至無還原糖反應，再經無水乙醇，丙酮洗滌多次后得藻類中提取多糖粗提物；
(3)粗提物經活性碳脫色，Sevage法脫蛋白，流水透析法脫小分子，醇沉，真空干燥得藻類中提取多糖。
[0004](4)，多糖中加入改性淀粉，加入的質量為多糖的0.5-1.2倍，攪拌均勻后，使用微波干燥，得粉末狀混合物，在外滅菌15秒后，密封包裝。
[0005]藻類中提取多糖的含量測定按照以下方法進行:
標準曲線制作:精密稱取葡萄糖標準品12.50mg溶于100ml的容量瓶中，得到
0.1250mg/ ml的葡萄糖標準溶液。從標準溶液中，分別吸取0.0,0.4,0.5,0.6,0.7,0.8、
0.9、1.0ml,加水至lml。再加10%的苯酹溶液lml、濃硫酸5ml,搖勻后放置5min,置沸水浴放置15min，取出冷卻至室溫。在490nm測其吸光度。得吸光度與濃度的回歸方程:A= 53186C+ 010108。 ( r= 019990)。
[0006]穩(wěn)定性實驗稱取:取已知濃度的多糖溶液0.5ml,加水至lml,迅速加Iml 10%的苯酹溶液、5ml濃硫酸，搖勻后放置5min,置沸水浴放置15min,取出冷卻至室溫。在490nm測其吸光度。實驗中發(fā)現其吸光度在0- 25min內穩(wěn)定。
[0007]回收率試驗:吸取5份已知濃度的藻類中提取多糖溶液，各加標準葡萄糖溶液，依法測定吸光度，由回歸方程計算回收率。經計算，其回收率為95%以上，藻類中提取多糖含量提取率為4.26~4.36%。[0008]本發(fā)明從海藻中提取藻類中提取多糖，并可根據其具有較強的生物吸附能力、降血脂、抗氧化、增強免疫調節(jié)活性等，將其開發(fā)成功能食品及藥品，或制備微膠囊。藻類中提取多糖將可能成為人類主要的藥物資源。藻類中提取多糖的含量測定采用傳統(tǒng)的苯酚-硫酸法，方法簡便，回收率高，重現性好，數據可信。
[0009]本發(fā)明一種藻類中提取多糖的提取方法，方法簡便快速，重現性好，回收率高。【具體實施方式】
[0010]本發(fā)明所用海藻為浙江象山產，所用化學試劑為市購。
[0011]實施例1
一種藻類中提取多糖的提取方法，按照以下步驟進行:
(1)將海藻去雜洗凈，干燥后粉碎；
(2)稱取100g海藻粉末，加90%乙醇回流提取4小時，過濾，藥渣干燥后，加水超聲提取5次，每次IOmin過濾，合并濾液于80、0 °C濃縮至比重為1.03，醇，24h醇沉濃度為75% ;離心過濾得沉淀物，沉淀物反復水溶醇沉至無還原糖反應，再經無水乙醇，丙酮洗滌多次后得藻類中提取多糖粗提物；
(3)粗提物經活性碳脫色，Sevage法脫蛋白，流水透析法脫小分子，醇沉，真空干燥得藻類中提取多糖4.36g.(4)，多糖中加入改性淀粉，加入的質量為多糖的0.5-1.2倍，攪拌均勻后，使用微波干燥，得粉末狀混合物，在外滅菌15秒后，密封包裝。
[0012]實施例2 一種藻類中提取多糖的提取方法，按照以下步驟進行:
(1)將海藻去雜洗凈，干燥后粉碎；
(2)稱取100g海藻粉末，加70%乙醇回流提取4小時，過濾，藥渣干燥后，加水超聲提取5次，每次IOmin過濾，合并濾液于80 °C濃縮至比重為1.03，醇沉，18~24h醇沉濃度為75% ;離心過濾得沉淀物，沉淀物反復水溶醇沉至無還原糖反應，再經無水乙醇，丙酮洗滌多次后得藻類中提取多糖粗提物；
(3)粗提物經活性碳脫色，Sevage法脫蛋白，流水透析法脫小分子，醇沉，真空干燥得藻類中提取多糖4.34g。
[0013](4)，多糖中加入改性淀粉，加入的質量為多糖的0.5-1.2倍，攪拌均勻后，使用微波干燥，得粉末狀混合物，在外滅菌15秒后，密封包裝。
[0014]實施例3
一種藻類中提取多糖的提取方法，按照以下步驟進行:
(1)將海藻去雜洗凈，干燥后粉碎；
(2)稱取100g海藻粉末，加75%乙醇回流提取5小時，過濾，藥渣干燥后，加水超聲提取5次，每次IOmin過濾，合并濾液于85 °C濃縮至比重為1.03，醇沉，18~24h醇沉濃度為75% ;離心過濾得沉淀物，沉淀物反復水溶醇沉至無還原糖反應，再經無水乙醇，丙酮洗滌多次后得藻類中提取多糖粗提物；
(3)粗提物經活性碳脫色，Sevage法脫蛋白，流水透析法脫小分子，醇沉，真空干燥得藻類中提取多糖4.26g。[0015] (4)，多糖中加入改性淀粉，加入的質量為多糖的0.5-1.2倍，攪拌均勻后，使用微波干燥，得粉末狀混合物 ，在外滅菌15秒后，密封包裝。
【權利要求】
1.一種藻類中提取多糖的提取方法，其特征在于按照以下步驟進行: (1)將海藻去雜洗凈，干燥后粉碎； (2)稱取100g海藻粉末，加85、0%乙醇回流提取4飛小時，過濾，藥渣干燥后，加水超聲提取5次，每次IOmin過濾，合并濾液于80~90 °C濃縮至比重為1.03，醇沉，18~24h醇沉濃度為75% ;離心過濾得沉淀物，沉淀物反復水溶醇沉至無還原糖反應，再經無水乙醇，丙酮洗滌多次后得藻類中提取多糖粗提物； (3)粗提物經活性碳脫色，Sevage法脫蛋白，流水透析法脫小分子，醇沉，真空干燥得藻類中提取多糖； (4)，多糖中加入改性淀粉，加入的質量為多糖的0.5-1.2倍，攪拌均勻后，使用微波干燥，得粉末狀混合物，在外滅菌15秒后，密封包裝。
【文檔編號】C08L3/04GK103724675SQ201310622053
【公開日】2014年4月16日 申請日期:2013年11月30日 優(yōu)先權日:2013年11月30日
【發(fā)明者】陳宏 , 李梅, 劉興勇, 時慧 申請人:青島海之林生物科技開發(fā)有限公司