一種銀耳子實(shí)體多糖制備技術(shù)的制作方法
【專(zhuān)利摘要】一種銀耳子實(shí)體多糖制備技術(shù)，是一種結(jié)合逆流脫色、對(duì)輥擠壓粉碎、生物酶脫蛋白工藝和高壓提取、陶瓷膜分離工藝的銀耳多糖提取技術(shù)。其特征在于銀耳子實(shí)體經(jīng)70%乙醇逆流脫色，對(duì)輥擠壓粉碎，復(fù)合生物酶解脫膠脫蛋白后，用50-80倍水于105-121℃提取2-4小時(shí)，提取液經(jīng)0.5-5.0微米陶瓷膜除雜，0.01微米陶瓷膜濃縮，乙醇沉淀、真空干燥得銀耳多糖。應(yīng)用該技術(shù)制備銀耳子實(shí)體多糖提取率可達(dá)90%以上，所得多糖為酸性多糖和中性多糖混合物，多糖含量為85%-92%，灰分含量為5.4%-6.73%，蛋白含量為1.3%-1.5%，具有良好的乳化和保濕性能，可應(yīng)用于食品、藥品及日化領(lǐng)域。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種銀耳子實(shí)體多糖制備技術(shù)
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物活性成分提取【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種銀耳多糖及其提取制備?！颈尘凹夹g(shù)】
[0002]銀耳多糖是從銀耳子實(shí)體或孢子中提取出來(lái)的一種活性多糖。現(xiàn)代結(jié)構(gòu)分析證明銀耳多糖是一種雜多糖，包括酸性雜多糖、中性雜多糖、胞壁多糖、胞外多糖和酸性低聚糖等多種組分。國(guó)內(nèi)外大量研究證明，銀耳多糖具有優(yōu)異的提高人體免疫機(jī)能、抗病毒、抗腫瘤、抗?jié)?、降血脂、降血糖、降膽固醇等生理作用及保濕、增稠、乳化等物化功能，近年?lái)在食品、醫(yī)藥、日化等領(lǐng)域受到廣泛的重視。
[0003]目前國(guó)內(nèi)外耳多糖提取大多采用的是水溶劑回流提取、減壓濃縮、Savage脫蛋白、醇沉干燥的傳統(tǒng)工藝生產(chǎn)銀耳多糖。經(jīng)檢索，近年來(lái)關(guān)于銀耳多糖提取制備技術(shù)的相關(guān)文獻(xiàn)專(zhuān)利也有相關(guān)公開(kāi)報(bào)道，2005年劉桂云等申請(qǐng)了“銀耳雜多糖及其提取物、制備方法和用途”的專(zhuān)利(申請(qǐng)?zhí)?00510023427.4) ；2007年侯建明申請(qǐng)了 “一種銀耳多糖酶法逆向提取工藝”的專(zhuān)利(專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?00710014978.3);同時(shí)相關(guān)學(xué)術(shù)期刊也對(duì)銀耳多糖的提取工藝有所報(bào)道，經(jīng)過(guò)對(duì)比發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明所用銀耳子實(shí)體連續(xù)逆流脫色脫脂技術(shù)未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道；本發(fā)明所涉及高溫高壓提取技術(shù)雖在部分文獻(xiàn)中有所提及，但僅僅是作為方法比較，且為非優(yōu)選條件而淘汰，并未形成可用技術(shù)；所涉及的超濾濃縮工藝文獻(xiàn)有所報(bào)道，但所用濾膜為醋酸纖維素膜，本發(fā)明所用過(guò)濾膜為陶瓷膜，可以實(shí)施高溫過(guò)濾，與醋酸纖維素膜相比，對(duì)銀耳多糖的過(guò)濾具有不可比擬的優(yōu)勢(shì)和創(chuàng)新性。通過(guò)比較還發(fā)現(xiàn)，傳統(tǒng)方法提取效率低、能耗大、多糖純度低，而且在提取純化過(guò)程中使用有機(jī)溶劑如:三氯甲烷、異戊醇或化學(xué)無(wú)機(jī)鹽(如氫氧化鈉、鹽酸)，存在化學(xué)溶劑殘留、產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定等缺陷，應(yīng)用領(lǐng)域較窄。
[0004]本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有銀耳多糖提取技術(shù)過(guò)程中使用有毒有害化學(xué)試劑，產(chǎn)品存在化學(xué)試劑殘留的和提`取時(shí)間長(zhǎng)，能耗大的缺點(diǎn)。通過(guò)實(shí)驗(yàn)比較表明:應(yīng)用本發(fā)明研究團(tuán)隊(duì)研發(fā)的對(duì)輥擠壓技術(shù)(已公開(kāi)發(fā)表論文:擠壓處理銀耳子實(shí)體對(duì)多糖提取效果的影響，食品工業(yè)科技2011年11期)處理后銀耳子實(shí)體，與傳統(tǒng)粉碎(即銀耳干粉，過(guò)80目)方式相比，多糖浸出率增加了 170%;經(jīng)胰蛋白酶、果膠酶復(fù)合酶解后，多糖浸提得率可提高20%-30% ;高溫高壓提取工藝可提高銀耳多糖提取得率10-15%，縮短提取時(shí)間30-50%。利用本發(fā)明技術(shù)，銀耳多糖浸提率達(dá)到84%-92.0%，粗多糖得率為30-40%，粗多糖純度達(dá)85%-92%。且全過(guò)程不使用有毒有害的化學(xué)試劑，產(chǎn)品安全性大大提高，是一種安全的銀耳多糖提取制備方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明涉及一種以銀耳子實(shí)體為原料提取制備銀耳多糖及其制備技術(shù)，主要包括4個(gè)步驟。
[0006]( I)原料處理
逆流脫脂脫色:銀耳子實(shí)體經(jīng)過(guò)篩選去雜，剪去色澤深黃的基部，于連續(xù)逆流提取器內(nèi)加入3-5倍重量的70-95%乙醇，50-65°C條件下，逆流提取2-3小時(shí)，以脫去子實(shí)體內(nèi)的色素和脂類(lèi)及小分子物質(zhì)；
擠壓破壁:將經(jīng)過(guò)逆流脫脂脫色處理的銀耳子實(shí)體用濾布濾擠壓除去殘留乙醇，然后用10-15倍重量的清水浸泡2-6小時(shí)，控制子實(shí)體吸水重量達(dá)到干重的8-12倍時(shí)，用差速對(duì)輥擠壓機(jī)進(jìn)行擠壓破壁處理，對(duì)輥擠壓間隙度為0.01-0.05毫米，對(duì)輥擠壓主輥轉(zhuǎn)速為300-500轉(zhuǎn)/分，副輥轉(zhuǎn)速為100-200轉(zhuǎn)/分，擠壓為2_3遍，以充分破壞子實(shí)體的細(xì)胞、組織結(jié)構(gòu)，利于多糖的溶出；
酶解脫膠脫蛋白:按擠壓處理子實(shí)體濕重的2-3倍的量加入清水，加入子實(shí)體濕重
0.5-1.0%的按照比例為5-8: I混合的胰蛋白酶和果膠酶物，48-53°C，酶解時(shí)間為4-6小時(shí)，然后用200-500目濾布過(guò)濾，除去酶解液，并用40°C _60°C溫水洗滌2_3遍以除去殘余的生物酶及酶解產(chǎn)物，即為多糖提取原料。
[0007](2)多糖提取:將上述所得多糖提取原料，加入原料濕重5-10倍清水，于蒸汽高壓提取罐中進(jìn)行提取，提取溫度為105-115°C，壓力為0.024-0.072MPa，提取時(shí)間為1- 2小時(shí)，所得提取液經(jīng)300-500目濾布過(guò)濾，濾渣進(jìn)行再次提取，過(guò)濾，濾液合并即為銀耳多糖提取液。
[0008](3)分離濃縮:將上述步驟2所得提取液，過(guò)孔徑為0.5-5.0微米的陶瓷膜，以除去提取液中殘留的固體顆 粒和部分大分子物質(zhì)，過(guò)膜溫度為60-70°C，壓力為0.12-0.16MPa ；通過(guò)0.5-5.0微米陶瓷膜的率過(guò)液，直接用孔徑為0.01微米的陶瓷膜進(jìn)行過(guò)濾，過(guò)濾溫度為60-80°C，壓力為0.15-0.2MPa，得到料液重量比為1: 15-20的截留液，即為銀耳多糖濃縮液。
[0009](4)干燥制備:將上述步驟3所得的銀耳多糖濃縮液直接進(jìn)行冷凍干燥，或加入3-5倍的95%乙醇沉淀多糖，過(guò)濾分離后進(jìn)行冷凍干燥或50-60°C真空干燥得銀耳多糖。
[0010]【具體實(shí)施方式】:
實(shí)施案例I
步驟I選取無(wú)雜質(zhì)、剪去子實(shí)體基部顏色較深部分的市售朵形銀耳I公斤，置于逆流萃取器中，加入5公斤，70%的乙醇，60°C逆流提取2小時(shí)后，用濾布過(guò)濾除去殘留乙醇，用12公斤的清水浸泡3小時(shí)；將吸脹的銀耳子實(shí)體用差速對(duì)輥擠壓機(jī)進(jìn)行擠壓破壁處理，對(duì)輥擠壓間隙度為0.05毫米，對(duì)輥擠壓主輥轉(zhuǎn)速為300轉(zhuǎn)/分，副輥轉(zhuǎn)速為100轉(zhuǎn)/分，擠壓為3遍。
[0011]步驟2向擠壓處理過(guò)子實(shí)體中加水20公斤，并向漿液中加入胰蛋白酶10克，果膠酶1.5克，于53°C保溫4小時(shí)進(jìn)行酶解，酶解結(jié)束后用400目濾布過(guò)濾，除去酶解液，并用50°C溫水洗滌3遍以除去殘余的生物酶及酶解產(chǎn)物，即為多糖提取原料。
[0012]步驟3多糖提取原料中加入60公斤清水，于蒸汽高壓提取罐中進(jìn)行提取，提取溫度為110°c,提取時(shí)間為1.5小時(shí)后,將提取液趁熱用400目濾布過(guò)濾,濾洛加入40公斤水，110°C提取I小時(shí)，提取液趁熱用400目濾布過(guò)濾，將兩次過(guò)濾所得濾液合并，過(guò)孔徑為1.0微米的陶瓷膜，過(guò)膜溫度為70°C，壓力為0.14MPa ;濾過(guò)液再用孔徑為0.05微米的陶瓷膜進(jìn)行過(guò)濾，過(guò)濾溫度為80°C，壓力為0.2MPa，到截留液體積為15公斤時(shí)結(jié)束，將所得截留液進(jìn)行冷凍干燥得銀耳多糖干品366克。
[0013]實(shí)施案例2步驟I稱(chēng)取市售，銀耳碎片2公斤，剔除雜色碎片、雜質(zhì)，置于逆流萃取器中，加入8公斤，95%的乙醇，50°C逆流提取3小時(shí)后，用濾布過(guò)濾除去殘留乙醇，用20公斤的清水浸泡2小時(shí)；將吸脹的銀耳子實(shí)體用差速對(duì)輥擠壓機(jī)進(jìn)行擠壓破壁處理，對(duì)輥擠壓間隙度為0.02毫米，對(duì)輥擠壓主輥轉(zhuǎn)速為400轉(zhuǎn)/分，副輥轉(zhuǎn)速為200轉(zhuǎn)/分，擠壓為3遍。
[0014]步驟2向擠壓處理過(guò)子實(shí)體中加入50公斤水，并向漿液中加入胰蛋白酶20克，果膠酶3克，于50°C保溫4小時(shí)進(jìn)行酶解，酶解結(jié)束后用400目濾布過(guò)濾，除去酶解液，并用40°C溫水洗滌遍以除去殘余的生物酶及酶解產(chǎn)物，即為多糖提取原料。
[0015]步驟3多糖提取原料中加入100公斤清水，于蒸汽高壓提取罐中進(jìn)行提取，提取溫度為108°C,提取時(shí)間為2小時(shí)后,將提取液趁熱用400目濾布過(guò)濾,濾洛加入80公斤水，105°C提取I小時(shí)，提取液趁熱用400目濾布過(guò)濾，將兩次過(guò)濾所得濾液合并，過(guò)孔徑為1.0微米的陶瓷膜，過(guò)膜溫度為70°C，壓力為0.14MPa ;濾過(guò)液再用孔徑為0.01微米的陶瓷膜進(jìn)行過(guò)濾，過(guò)濾溫度為80°C，壓力為0.2MPa，到截留液體積為25公斤時(shí)結(jié)束，加入75公斤95%乙醇沉淀，濾布過(guò) 濾除去多余乙醇，沉淀于60°C真空干燥得銀耳多糖干品723克。
【權(quán)利要求】
1.一種銀耳子實(shí)體多糖制備技術(shù)，其特征在于該多糖生產(chǎn)過(guò)程包括:連續(xù)逆流脫脂脫色、對(duì)輥擠壓粉碎、生物酶解處理、組合陶瓷膜高溫分離濃縮過(guò)程，所得銀耳多糖為酸性多糖和中性多糖混合物，多糖含量為85%-92%，灰分含量為5.4%-6.73%，蛋白含量為1.3%-1.5%, 25°C下，0.5% 溶液粘度為 22.623mm2/s_45.8 mm2/s, 1.0% 水溶液 pH6.52-6.73，外觀(guān)為白色或淺灰白色粉末。
2.如權(quán)利I所述連續(xù)逆流脫脂脫色工藝所用設(shè)備為螺旋式連續(xù)逆流提取器，實(shí)施過(guò)程中，銀耳子實(shí)體物料由進(jìn)料口投入，萃取溶劑由溶劑進(jìn)口加入，物料螺旋推進(jìn)旋片轉(zhuǎn)速為20-50轉(zhuǎn)/分鐘，物料由進(jìn)料口到出料口行進(jìn)時(shí)間為2-3小時(shí)，溶劑為體積百分比70-95%的乙醇，逆流溫度為50-65°C，濃縮罐濃縮溫度為70-85°C。
3.如權(quán)利I所述生物酶解處理，所用酶為胰蛋白酶和果膠酶的混合物，胰蛋白酶和果膠酶比例為5-8: 1，用量為銀耳子實(shí)體重量的0.5-1.0%，酶解溫度48-53°C，pH6.5-7.0，酶解時(shí)間為4-6小時(shí)。
4.如權(quán)利I所述高溫高壓提取所用提取溶劑為水，加水量為銀耳子實(shí)體重量的50-80倍，提取溫度為105-115°C，壓力為0.024-0.072MPa，提取時(shí)間為1- 2小時(shí)，提取次數(shù)為1_2次。
5.如權(quán)利I所述，組合陶瓷膜高溫分離濃縮所用分離膜孔徑為0.5-5.0微米，分離溫度為40-50°C，壓力為0.12-0.16MPa ;濃縮膜孔徑為0.01微米，濃縮溫度為60_80°C，壓力為·0.15_0.2MPaο
【文檔編號(hào)】C08B37/00GK103819571SQ201310704708
【公開(kāi)日】2014年5月28日 申請(qǐng)日期:2013年12月20日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月20日
【發(fā)明者】趙伯濤, 黃曉德, 錢(qián)驊, 朱羽堯, 陳斌 申請(qǐng)人:中華全國(guó)供銷(xiāo)合作總社南京野生植物綜合利用研究所