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一株鄰苯二甲酸二丁酯降解菌的制造方法與工藝

文檔序號(hào):11202542閱讀:871來源:國(guó)知局
一株鄰苯二甲酸二丁酯降解菌的制造方法與工藝
本發(fā)明涉及一株降解鄰苯二甲酸二丁酯的菌株。

背景技術(shù):
DBP是有毒污染物酞酸酯的一種,在環(huán)境中普遍存在,是全球性的有機(jī)污染物,同時(shí)被美國(guó)國(guó)家環(huán)保局列為優(yōu)控污染物。DBP毒性較高具“三致危害”可以通過食物鏈在生物體內(nèi)富集,引起神經(jīng)、免疫、肝臟、生殖等毒性作用。DBP是一種重要的增塑劑,是塑料農(nóng)膜的重要成分,在中國(guó)塑料農(nóng)膜的使用量位居世界前列,所以在設(shè)施土壤中已大量檢測(cè)出DBP的存在。而且DBP不易溶于水,其固體吸附系數(shù)較大,遷移性較差,在自然環(huán)境中的性質(zhì)非常穩(wěn)定,不易降解,可以吸附在植物根系,并通過積累直接影響作物品質(zhì),對(duì)農(nóng)作物造成毒害,導(dǎo)致減產(chǎn),嚴(yán)重威脅農(nóng)業(yè)生產(chǎn)環(huán)境的生態(tài)健康。經(jīng)過國(guó)內(nèi)外學(xué)者的研究,發(fā)現(xiàn)生物降解是使DBP完全礦化的主要手法,本發(fā)明為減少農(nóng)業(yè)土壤中的DBP含量,采用特殊培養(yǎng)的方法分離提取了一株DBP降解菌,并對(duì)其高效性和降解速率進(jìn)行了探討和研究,不但為消除環(huán)境中的DBP的污染問題提供了可行性,而且為其應(yīng)用提供了理論依據(jù)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
本發(fā)明提供一株降解鄰苯二甲酸二丁酯的菌株,具有高效降解鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)的能力,為有效解決DBP的污染問題提供微生物基礎(chǔ)。本發(fā)明鄰苯二甲酸二丁酯降解菌為假單胞菌(Pseudomonassp.)DNB-S1,保藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(CGMCC),保藏地址是北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào),保藏日期為2014年11月6日,保藏編號(hào)為CGMCCNo.9526。本發(fā)明假單胞菌DNB-S1為革蘭氏陰性菌,菌落為白色,呈圓形,邊緣為鋸齒狀,光滑濕潤(rùn),中心凸起;該菌的淀粉水解試驗(yàn)、油脂水解試驗(yàn)、明膠水解試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn)、伏-普實(shí)驗(yàn)均為陽性,硫化氫試驗(yàn)、尿素測(cè)定試驗(yàn)、吲哚試驗(yàn)、檸檬酸鹽試驗(yàn)為陰性,能利用DBP為唯一碳源和能源進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖。本發(fā)明假單胞菌DNB-S1的培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單,可在無機(jī)鹽培養(yǎng)基中生長(zhǎng),生長(zhǎng)迅速,很難發(fā)生變異,其菌液可以直接作用于被DBP污染的土壤。該菌的最適生長(zhǎng)條件為:溫度35℃,pH值7,搖床轉(zhuǎn)速為125r/m,接菌量為3%,DBP濃度為500mg/L。本發(fā)明假單胞菌DNB-S1通過16SrDNA序列比對(duì)分析,與假單胞菌屬(Pseudomonassp.)有極高的同源性,同源性為99%。通過結(jié)合菌體形態(tài)特征、生長(zhǎng)條件、生理生化鑒定結(jié)果確定假單胞菌DNB-S1屬于假單胞菌屬(Pseudomonassp.)。將假單胞菌DNB-S1放在最適生長(zhǎng)條件下培養(yǎng)(溫度35℃,pH值7,搖床轉(zhuǎn)速為125r/m,接菌量為3%,DBP濃度為500mg/L),48h內(nèi)DBP的降解率能達(dá)到90%,效果顯著,為有效解決DBP的污染問題提供工具。同時(shí),在排除DBP濃度對(duì)其生長(zhǎng)過程抑制作用的基礎(chǔ)上,對(duì)其生長(zhǎng)過程中12-33h進(jìn)行動(dòng)力學(xué)研究,發(fā)現(xiàn)假單胞菌DNB-S1對(duì)DBP的降解過程符合一級(jí)反應(yīng)模型,其動(dòng)力學(xué)方程為c=6.444-0.032t(R2=0.9942)(為DBP濃度,t為反應(yīng)時(shí)間)。本發(fā)明假單胞菌DNB-S1屬于假單胞菌屬,保藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(CGMCC),保藏地址是北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)...
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