本發(fā)明涉及天然產(chǎn)物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種從紫丁香中同時(shí)分離制備紫丁香苷和橄欖苦苷的方法。

背景技術(shù)：
紫丁香苷、橄欖苦苷均具有多方面藥理活性，因而具有廣泛的醫(yī)療應(yīng)用前景。紫丁香苷又名刺五加苷B，為刺五加的主要藥用成分之一，是一種強(qiáng)的抗肝毒藥物。目前紫丁香苷主要來(lái)源于刺五加，而刺五加為國(guó)家三級(jí)保護(hù)植物，其加工利用受到嚴(yán)格的限制。已有研究表明，紫丁香苷在紫丁香中的含量是刺五加的2倍以上；橄欖苦苷主要從油橄欖葉中分離。油橄欖主要分布于地中海國(guó)家，我國(guó)近年雖有引種，但資源量十分有限，所以從其他植物資源中進(jìn)行橄欖苦苷制備的嘗試具有重要意義。因此利用本發(fā)明從紫丁香中分離紫丁香苷、橄欖苦苷，不僅原料來(lái)源廣泛，且可充分利用園林修剪所廢棄的紫丁香枝條，為制藥業(yè)及化妝品等領(lǐng)域提供高品質(zhì)原料。目前，尚未有從紫丁香中同時(shí)快速提取分離高純度紫丁香苷和橄欖苦苷兩個(gè)成分的相關(guān)研究。公開(kāi)號(hào)為CN101643484的中國(guó)專利公開(kāi)了一種高純度紫丁香苷、制備方法及應(yīng)用，其通過(guò)溶解刺五加膏、大孔吸附樹(shù)脂層析、脫色、大孔吸附樹(shù)脂層析、結(jié)晶、重結(jié)晶，得到高純度的紫丁香苷。其步驟繁雜，兩次層析富集，一次脫色，兩次結(jié)晶，不但增加吸附劑的成本，也加長(zhǎng)了生產(chǎn)周期，增加了提取成本。公開(kāi)號(hào)為CN101328198的中國(guó)專利公開(kāi)了一種紫丁香苷的提取分離方法，該方法將白丁香(SyringaoblataLindl.var.albaHort.exRehd.)枝粉碎，利用煎煮法從白丁香中提取紫丁香苷，將紫丁香苷提取液用XDA-1或AB-8大孔吸附樹(shù)脂柱以20％～60％的乙醇溶液洗脫，再用硅膠柱層析分離，制得純度97％以上的紫丁香苷晶體。該方法粉碎過(guò)程及煎煮過(guò)程分別進(jìn)行，耗能增加，且煎煮2～3次，每次耗時(shí)1～3h，生產(chǎn)周期過(guò)長(zhǎng)，生產(chǎn)成本增加。公開(kāi)號(hào)為CN101307079的中國(guó)專利公開(kāi)了一種從鐵冬青中提取分離紫丁香苷的方法，其將藥材粉碎成細(xì)粉，用苯回流提取，將提取后的藥渣晾干，加入丙酮再回流提取，合并濾液，濃縮提取液，靜置，有白色粉末析出，待析出完全后過(guò)濾，用丙酮洗滌析出物，將析出物用丙酮-甲醇的混合溶液反復(fù)重結(jié)晶，最后再用甲醇重結(jié)晶，即可得到紫丁香苷的白色針晶。該方法多次使用苯、丙酮等高毒性有機(jī)溶劑，將產(chǎn)生環(huán)境污染及生產(chǎn)人員中毒等危害。公開(kāi)號(hào)為CN101003557的中國(guó)專利公開(kāi)了富含高純度橄欖苦苷的油橄欖葉提取物的制備方法，其采用不同類型多次膜分離耦合技術(shù)和介質(zhì)吸附耦合技術(shù)代替?zhèn)鹘y(tǒng)溶劑萃取法，分離得到含量大于50％的富含橄欖苦苷的油橄欖葉提取物。但該方法所得橄欖苦苷含量較低，影響了其進(jìn)一步應(yīng)用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
為解決上述問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種從紫丁香中同時(shí)分離制備紫丁香苷和橄欖苦苷的方法，以拓寬紫丁香苷、橄欖苦苷的提取原料，為制藥業(yè)及化妝品企業(yè)提供高純度原料。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為：一種從紫丁香中同時(shí)分離制備紫丁香苷和橄欖苦苷的方法，包括如下步驟：S1、將干燥的紫丁香小枝切短至1～2cm，加入10～20倍量濃度為30～60％乙醇溶液勻漿提取2～3次，每次勻漿5～10min，將提取的溶液合并后過(guò)濾、減壓濃縮回收乙醇，得提取液；S2、將步驟S1所得的提取液用大孔樹(shù)脂柱以2～3BV/h流速吸附后，用濃度為15％～25％的乙醇4～6BV及濃度為35～45％的乙醇溶液6～8BV進(jìn)行梯度洗脫，可將吸附的紫丁香苷、橄欖苦苷分別洗脫下來(lái)；合并相同濃度的乙醇洗脫液，減壓濃縮后冷凍干燥分別得紫丁香苷粗品、橄欖苦苷粗品；S3、將步驟S2所得的紫丁香苷粗品干法上硅膠柱層析，用乙酸乙酯、甲醇、水混合液作為洗脫劑進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮后用甲醇重結(jié)晶2～3次，得純度大于97％的紫丁香苷晶體；S4、將步驟S2所得的橄欖苦苷粗品干法上硅膠柱層析，用乙酸乙酯、甲醇、水混合液作為洗脫劑進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮后靜置，析出橄欖苦苷結(jié)晶，用無(wú)水乙醇重結(jié)晶2～3次，得純度大于95％的橄欖苦苷晶體。優(yōu)選的，所述步驟S2中洗脫的流速為2～4BV/h。優(yōu)選的，所述的大孔樹(shù)脂為D101、HPD-100B或HPD400A中的一種。優(yōu)選的，所述步驟S3、S4中乙酸乙酯、甲醇、水的比例12∶1∶0.2。優(yōu)選的，所述步驟S3、S4中乙酸乙酯、甲醇、水的比例為16∶1∶0.2。本發(fā)明具有以下有益效果：開(kāi)辟了紫丁香苷、橄欖苦苷制備新途徑，其生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單，所用試劑及樹(shù)脂可回收利用，能耗低，適用于工業(yè)化生產(chǎn)；產(chǎn)品得率高，純度高，其中，紫丁香苷的純度大于95％，橄欖苦苷的純度大于97％。附圖說(shuō)明圖1為本發(fā)明實(shí)施例大孔樹(shù)脂柱洗脫液中的紫丁香苷液相色譜圖。圖2為本發(fā)明實(shí)施例大孔樹(shù)脂柱洗脫液中的橄欖苦苷液相色譜圖。圖3為本發(fā)明實(shí)施例硅膠分離純化后所得紫丁香苷液相色譜圖。圖4為本發(fā)明實(shí)施例硅膠分離純化后所得橄欖苦苷液相色譜圖。具體實(shí)施方式為了使本發(fā)明的目的及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。本發(fā)明實(shí)施例提供了一種從紫丁香中同時(shí)分離制備紫丁香苷和橄欖苦苷的方法，包括如下步驟：S1、將干燥的紫丁香小枝切短至1～2cm，加入10～20倍量濃度為30～60％乙醇溶液勻漿提取2～3次，每次勻漿5～10min，將提取的溶液合并后過(guò)濾、減壓濃縮回收乙醇，得提取液；S2、將步驟S1所得的提取液用大孔樹(shù)脂柱以2～3BV/h流速吸附后，用濃度為15％～25％的乙醇4～6BV及濃度為35～45％的乙醇溶液6～8BV進(jìn)行梯度洗脫，可將吸附的紫丁香苷、橄欖苦苷分別洗脫下來(lái)；合并相同濃度的乙醇洗脫液，減壓濃縮后冷凍干燥分別得紫丁香苷粗品、橄欖苦苷粗品；圖1為大孔樹(shù)脂柱洗脫液中的紫丁香苷液相色譜圖；圖2為大孔樹(shù)脂柱洗脫液中的橄欖苦苷液相色譜圖，其中，橫坐標(biāo)為保留時(shí)間，縱坐標(biāo)為信號(hào)響應(yīng)值。S3、將步驟S2所得的紫丁香苷粗品干法上硅膠柱層析，用乙酸乙酯、甲醇、水混合液作為洗脫劑進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮后用甲醇重結(jié)晶2～3次，得純度大于97％的紫丁香苷晶體；圖3為硅膠分離純化后所得紫丁香苷液相色譜圖。S4、將步驟S2所得的橄欖苦苷粗品干法上硅膠柱層析，用乙酸乙酯、甲醇、水混合液作為洗脫劑進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮后靜置，析出橄欖苦苷結(jié)晶，用無(wú)水乙醇重結(jié)晶2～3次，得純度大于95％的橄欖苦苷晶體，圖4為硅膠分離純化后所得橄欖苦苷液相色譜圖。所述步驟S2中洗脫的流速為2～4BV/h。所述的大孔樹(shù)脂為D101、HPD-100B或HPD400A中的一種。實(shí)施例1S11、提取液制備取紫丁香(SyringaoblataLindl.)小枝1kg，粉碎后用40％乙醇溶液勻漿提取3次，每次10min，料液比1∶10(kg/L)，提取液合并過(guò)濾，濃縮至4L。S12、大孔樹(shù)脂分離將濃縮后提取液用HPD-100B大孔樹(shù)脂柱以3BV/h的流速吸附，再用體積濃度為20％和40％的乙醇溶液陸續(xù)先后洗脫，分段收集洗脫液，采用薄層色譜硅膠預(yù)制板(HSGF254)快速定性檢測(cè)。S13、將收集獲得的20％乙醇水溶液的洗脫液濃縮、干燥得紫丁香苷粗品，乙酸乙酯溶解后與少量硅膠攪拌后干法上樣過(guò)硅膠柱。硅膠柱以乙酸乙酯∶甲醇∶水體積比12∶1∶0.2進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮后析出結(jié)晶，用無(wú)水乙醇重結(jié)晶1次，得紫丁香苷晶體2.71g。用高效液相色譜檢測(cè)其純度為98.48％。S14、將收集獲得的40％乙醇水溶液的洗脫液濃縮、干燥得橄欖苦苷粗品，乙酸乙酯溶解后與少量硅膠攪拌后干法上樣過(guò)硅膠柱。硅膠柱以乙酸乙酯∶甲醇∶水體積比16∶1∶0.2進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮后干燥。再用無(wú)水乙醇溶解，結(jié)晶，重結(jié)晶2次，得橄欖苦苷晶體3.26g。用高效液相色譜檢測(cè)其純度為97.39％。實(shí)施例2S21、提取液制備取紫丁香(SyringaoblataLindl.)小枝0.5kg，粉碎后用30％乙醇溶液勻漿提取2次，每次8min，料液比1∶20(kg/L)，提取液合并過(guò)濾，濃縮至2L。S22、大孔樹(shù)脂分離將濃縮后提取液用HPD-400A大孔樹(shù)脂柱以2BV/h的流速吸附，再用體積濃度為25％和50％的乙醇溶液陸續(xù)先后洗脫，分段收集洗脫液，采用薄層色譜硅膠預(yù)制板(HSGF254)快速定性檢測(cè)。S23、將收集獲得的25％乙醇水溶液的洗脫液濃縮、干燥，乙酸乙酯攪拌后干法上樣過(guò)硅膠柱。以乙酸乙酯∶甲醇∶水體積比12∶1∶0.2進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮后析出結(jié)晶，用無(wú)水乙醇重結(jié)晶2次，得紫丁香苷晶體1.34g。用高效液相色譜檢測(cè)其純度為95.61％。S24、將收集獲得的50％乙醇水溶液的洗脫液濃縮、干燥，乙酸乙酯攪拌后干法上樣過(guò)硅膠柱。以乙酸乙酯∶甲醇∶水體積比16∶1∶0.2進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮后干燥。再用無(wú)水乙醇溶解，結(jié)晶，重結(jié)晶2次，得橄欖苦苷晶體1.63g。用高效液相色譜檢測(cè)其純度為98.11％。實(shí)施例3S31、提取液制備取紫丁香(SyringaoblataLindl.)小枝0.5kg，粉碎后用50％乙醇溶液勻漿提取3次，每次6min，料液比1∶10(kg/L)，提取液合并過(guò)濾，濃縮至1.5L。S32、大孔樹(shù)脂分離將濃縮后提取液用D101大孔樹(shù)脂柱以4BV/h的流速吸附，再用體積濃度為20％和50％的乙醇溶液陸續(xù)先后洗脫，分段收集洗脫液，采用薄層色譜硅膠預(yù)制板(HSGF254)快速定性檢測(cè)。S33、將收集獲得的20％乙醇水溶液的洗脫液濃縮、干燥，乙酸乙酯攪拌后干法上樣過(guò)硅膠柱。以乙酸乙酯∶甲醇∶水體積比12∶1∶0.2進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮后析出結(jié)晶，用無(wú)水乙醇重結(jié)晶2次，得紫丁香苷晶體1.52g。用高效液相色譜檢測(cè)其純度為96.75％。S34、將收集獲得的50％乙醇水溶液的洗脫液濃縮、干燥，乙酸乙酯攪拌后干法上樣過(guò)硅膠柱。以乙酸乙酯∶甲醇∶水體積比16∶1∶0.2進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮后干燥。再用無(wú)水乙醇溶解，結(jié)晶，重結(jié)晶3次，得橄欖苦苷晶體2.06g。用高效液相色譜檢測(cè)其純度為98.18％。以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以作出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。