本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及三嗪衍生物類間變性淋巴瘤激酶抑制劑、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，這些化合物的制備方法，含有這些化合物的藥物制劑和藥物組合物，以及該化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體在制備治療和/或預(yù)防由間變性淋巴瘤激酶介導(dǎo)的癌癥相關(guān)疾病的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
間變性淋巴瘤激酶(Anaplastic lymphoma kinase，ALK)是受體酪氨酸激酶家族成員，可通過自身磷酸化募集下游蛋白，進(jìn)而表達(dá)特定的基因，調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝和生長(zhǎng)。間變性淋巴瘤激酶最早發(fā)現(xiàn)于間變性大細(xì)胞淋巴瘤(Anaplastic large cell lymphoma，ALCL)中，后來發(fā)現(xiàn)在非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)中亦有高表達(dá)。研究發(fā)現(xiàn)，約有半數(shù)患者產(chǎn)生致癌性的異常間變性淋巴瘤激酶融合蛋白(比如：NPM-ALK)，這種變異的蛋白對(duì)臨床診斷、治療以及預(yù)后都有重要指導(dǎo)意義，成為目前研究的熱點(diǎn)。
ALK的小分子抑制劑可以有效的降低突變的ALK基因?qū)ο掠蔚鞍椎挠绊懀M(jìn)而影響到腫瘤細(xì)胞侵襲、增殖等效應(yīng)，最終影響腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，起到抗腫瘤的作用。目前已經(jīng)有輝瑞公司的克唑替尼(Crizotinib)成功上市，但已有大量臨床證明一代ALK抑制劑Crizotinib，容易產(chǎn)生耐藥性，因此，設(shè)計(jì)并篩選對(duì)Crizotinib產(chǎn)生耐藥的患者也有良好的療效的二代ALK抑制劑，具有顯著的臨床意義。
因此，通過化合物結(jié)構(gòu)修飾尋找新的化合物結(jié)構(gòu)，努力改善化合物的理化性質(zhì)，提高成藥性，如提高化合物的生物利用度，來尋找對(duì)ALK突變有活性的小分子抑制劑，對(duì)于臨床上因ALK突變引起的疾病的治療，具有重要的意義。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明以開發(fā)針對(duì)ALK的小分子抑制劑為目標(biāo)，發(fā)明了對(duì)治療和/或預(yù)防ALK介導(dǎo)的癌癥相關(guān)疾病具有良好效果的三嗪衍生物類間變性淋巴瘤激酶抑制劑。具體的技術(shù)方案為如下：
1.通式(Ⅰ)所示的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體：
其中，
R1選自-COR5，-CO2R5，-CONRR5，-SOR5，-SO2R5或-SO2NRR5；
R2選自氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、氨基、羥基、羧基、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、氨基C1-6烷基、磺?；鵆1-6烷基、C1-6烷氧基、羥基C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷氧基、C1-6烷氧基C1-6烷氧基、C2-8烯基、C2-8炔基、C1-6烷基氨基、(C1-6烷基)2氨基、C1-6烷基硫基、C1-6烷基羰基、C1-6烷基羰基氧基、C1-6烷基磺酰氨基、C1-6烷基氨基磺酰基、(C1-6烷基)2氨基磺酰基或C1-6烷基磺?；?/p>
R3選自任選被1～3個(gè)W取代的5～14元雜芳基或3～8元雜環(huán)基，
W選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素原子、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、(C1-6烷基)2氨基、鹵代C1-6烷基、鹵代C1-6烷氧基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷基羰基、C1-6烷基羰基氧基、C1-6烷基磺?；2-8烯基或C2-8炔基；
R4選自氫原子、鹵素原子、氰基、硝基、氨基、羧基、C1-6烷氧基、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、羥基C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷氧基、C2-8烯基、C2-8炔基、C1-6烷基氨基、C1-6烷基羰基或C1-6烷基羰基氧基；
R、R5獨(dú)立地選自氫原子、C1-6烷基或3～8元碳環(huán)；
R6、R7獨(dú)立地選自氫原子、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、氨基C1-6烷基或磺?；鵆1-6烷基；
A選自任選被1～3個(gè)Q取代的3～8元環(huán)烷基或任選被1～3個(gè)Q取代的3～8元雜環(huán)基，所述的取代基Q選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素原子、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、(C1-6烷基)2氨基、鹵代C1-6烷基、鹵代C1-6烷氧基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C2-8烯基、C2-8炔基或3～8元雜環(huán)基。
2.如技術(shù)方案1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
R1選自-CO2R5、-CONRR5、-SO2R5或-SO2NRR5；
R2選自氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、氨基、羥基、羧基、C1-6烷基、羥基C1-6烷基或鹵代C1-6烷基；
R3選自任選被1～2個(gè)W取代的5～6元雜環(huán)基，
W選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素原子、C1-6烷基或C1-6烷氧基；
R4選自氫原子、鹵素原子、氰基、硝基、氨基、羧基、C1-6烷氧基或C1-6烷基；
R、R5獨(dú)立地選自氫原子或C1-6烷基；
R6、R7獨(dú)立地選自氫原子或C1-6烷基；
A選自任選被1～2個(gè)Q取代的5～6元環(huán)烷基或任選被1～2個(gè)Q取代的5～6元雜環(huán)基，所述的取代基Q選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素原子或C1-6烷基。
3.如技術(shù)方案2所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
R1選自-SO2R5或-SO2NRR5；
R2選自氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、氨基、羥基、羧基或C1-6烷基；
R3選自任選被1～2個(gè)W取代的5～6元含氮雜環(huán)基，
W選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素原子或C1-6烷基；
R4選自氫原子或C1-6烷基；
R、R5獨(dú)立地選自C1-6烷基；
R6、R7獨(dú)立地選自氫原子或C1-6烷基；
A選自任選被1～2個(gè)Q取代的含1～2個(gè)O、S和/或N原子的5～6元雜環(huán)基，所述的取代基Q選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素原子或C1-6烷基。
4.如技術(shù)方案3所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
R1選自-SO2R5；
R2選自氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、氨基、羥基、羧基或C1-4烷基；
R3選自任選被1～2個(gè)W取代的含1～2個(gè)N原子的5～6元雜環(huán)基，
W選自羥基、氨基、羧基或C1-6烷基；
R4選自氫原子或C1-4烷基；
R5獨(dú)立地選自C1-4烷基；
R6、R7獨(dú)立地選自氫原子或C1-4烷基；
A選自任選被1～2個(gè)Q取代的含1～2個(gè)O和/或S原子的5～6元雜環(huán)基，所述的取代基Q選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素原子、C1-4烷基。
5.如技術(shù)方案4所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
R3選自吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或嗎啉基；
A選自任選被1～2個(gè)Q取代的含2個(gè)O和/或S原子的6元雜環(huán)基，所述的取代基Q選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素原子、C1-4烷基。
6.如技術(shù)方案1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
R1選自-SO2R5或-SO2NRR5；
R2選自氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、氨基、羥基、羧基或C1-6烷基；
R3選自任選被1～2個(gè)W取代的5～6元雜環(huán)基，
W選自羥基、氨基、羧基、鹵素原子、C1-6烷基或C1-6烷氧基；
R4選自氫原子、鹵素原子、氰基、硝基、氨基、羧基、C1-6烷氧基或C1-6烷基；
R、R5獨(dú)立地選自氫原子或C1-6烷基；
R6、R7獨(dú)立地選自氫原子或C1-6烷基；
A選自任選被1～2個(gè)Q取代的5～6元雜環(huán)基，所述的取代基Q選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素原子或C1-6烷基。
7.如技術(shù)方案6所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
R3選自任選被1～2個(gè)W取代的5～6元含氮雜環(huán)基，
W選自羥基、氨基、羧基、鹵素原子、C1-6烷基或C1-6烷氧基；
A選自任選被1～2個(gè)Q取代的含1～2個(gè)O和/或S原子的5～6元雜環(huán)基，所述的取代基Q選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素原子或C1-6烷基。
8.如技術(shù)方案7所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
R1選自-SO2R5；
R2選自氫原子或C1-6烷基；
R3選自任選被1～2個(gè)W取代的6元飽和含氮雜環(huán)基，
W選自C1-6烷基；
R4選自氫原子或C1-6烷基；
R、R5獨(dú)立地選自氫原子或C1-6烷基；
R6、R7獨(dú)立地選自氫原子或C1-6烷基；
A選自任選被1～2個(gè)Q取代的含1～2個(gè)O和/或S原子的6元飽和雜環(huán)基，所述的取代基Q選自C1-6烷基。
9.如技術(shù)方案7所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
R3選自任選被1～2個(gè)W取代的吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或嗎啉基，
W選自C1-6烷基；
A選自任選被1～2個(gè)Q取代的含1～2個(gè)O和/或S原子的6元飽和雜環(huán)基，所述的取代 基Q選自C1-6烷基。
本發(fā)明的部分化合物
發(fā)明詳述
本發(fā)明所述的“鹵素原子”包括氟原子、氯原子、溴原子和碘原子等。
本發(fā)明所述的“C1-6烷基”表示直鏈或支鏈的含有1-6個(gè)碳原子的烷基，包括例如“C1-4烷基”、“C1-3烷基”等，具體實(shí)例包括但不限于：甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、2-甲基丙基、1-甲基丙基、1,1-二甲基乙基、正戊基、3-甲基丁基、2-甲基丁基、1-甲基丁基、1-乙基丙基、正己基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、1,2-二甲基丙基等。
本發(fā)明所述的“C2-8烯基”是指含有至少一個(gè)雙鍵的碳原子數(shù)為2-8的直鏈或支鏈或環(huán)狀的烯基，包括例如“C2-6烯基”、“C2-4烯基”、“C2-3烯基”、“C3-6環(huán)烯基”等，具體實(shí)例包括但不限于：乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-甲基-1-丙烯基、1-甲基-2-丙烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、2-甲基-1-丁烯基、3-甲基-1-丁烯基、2-甲基-3-丁烯 基、1,1-二甲基-2-丙烯基、1-乙基-2-丙烯基、2-己烯基、3-己烯基、2-甲基-1-戊烯基、3-甲基-1-戊烯基、1-甲基-2-戊烯基、3-甲基-2-戊烯基、2-甲基-3-戊烯基、1-甲基-4-戊烯基、3-甲基-4-戊烯基、1,1-二甲基-3-丁烯基、1,2-二甲基-3-丁烯基、1,3-二甲基-2-丁烯基、2,2-二甲基-3-丁烯基、2,3-二甲基-2-丁烯基、2,3-二甲基-1-丁烯基、2-乙基-1-丁烯基、2-乙基-3-丁烯基、2-庚烯基、3-庚烯基、4-庚烯基、1-辛烯基、3-辛烯基、4-辛烯基、1,3-丁二烯基、2,4-戊二烯基、1,4-己二烯基、2,4-己二烯基、1,5-庚二烯基、2,5-庚二烯基、2,6-辛二烯基、環(huán)戊烯基、1,3-環(huán)戊二烯基、環(huán)己烯基、1,4-環(huán)己二烯基、環(huán)庚烯基、1,4-環(huán)庚二烯基、環(huán)辛烯基等。
本發(fā)明所述的“C2-8炔基”是指含有三鍵的碳原子數(shù)為2-8的直鏈或支鏈的炔基，其中包括例如“C2-6炔基”、“C2-4炔基”、“C2-3炔基”等，具體實(shí)例包括但不限于：乙炔基、1-丙炔基、2-丁炔基、1-甲基-2-丙炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、1-甲基-2-丁炔基、2-甲基-3-丁炔基、1,1-二甲基-2-丙炔基、1-乙基-2-丙炔基、2-己炔基、3-己炔基、1-甲基-2-戊炔基、1-甲基-3-戊炔基、2-甲基-3-戊炔基、1,1-二甲基-3-丁炔基、2-乙基-3-丁炔基、2-庚炔基、3-庚炔基、4-甲基-2-己炔基、5-甲基-2-己炔基、2-甲基-3-己炔基、5-甲基-3-己炔基、2-甲基-4-己炔基4-甲基-5-己炔基、2-辛炔基、3-辛炔基、4-辛炔基、4-甲基-2-庚炔基、5-甲基-3-庚炔基、6-甲基-3-庚炔基、2-甲基-4-庚炔基、2-甲基-5-庚炔基、3-甲基-6-庚炔基等。
本發(fā)明所述的“C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、(C1-6烷基)2氨基、C1-6烷基硫基、C1-6烷基羰基、C1-6烷基羰基氧基、C1-6烷基磺酰氨基、C1-6烷基氨基磺?；?C1-6烷基)2氨基磺?；1-6烷基磺?；笔侵敢訡1-6烷基-O-、C1-6烷基-NH-、(C1-6烷基)2-N-、C1-6烷基-S-、C1-6烷基-C(O)-、C1-6烷基-C(O)-O-、C1-6烷基-SO2NH-、C1-6烷基-NHSO2-、(C1-6烷基)2-NHSO2-、C1-6烷基-SO2-方式形成的基團(tuán)，其中“C1-6烷基”的定義如前文所述。
本發(fā)明所述的“C1-4烷氧基、C1-4烷基氨基、(C1-4烷基)2氨基、C1-4烷基硫基、C1-4烷基羰基、C1-4烷基羰基氧基、C1-4烷基磺酰氨基、C1-4烷基氨基磺酰基、(C1-4烷基)2氨基磺?；1-4烷基磺?；笔侵敢訡1-4烷基-O-、C1-4烷基-NH-、(C1-4烷基)2-N-、C1-4烷基-S-、C1-4烷基-C(O)-、C1-4烷基-C(O)-O-、C1-4烷基-SO2NH-、C1-4烷基-NHSO2-、(C1-4烷基)2-NHSO2-、C1-4烷基-SO2-方式形成的基團(tuán)，其中“C1-4烷基”的定義如前文所述。
本發(fā)明所述的“鹵代C1-6烷基、羥基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、磺酰基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、鹵代C1-6烷氧基、羥基C1-6烷氧基、C1-6烷氧基C1-6烷氧基”是指一至多個(gè)，例如1～4個(gè)、1～3個(gè)、1～2個(gè)鹵素原子、羥基、氨基、磺?；?、C1-6烷氧基分別取代C1-6烷基、C1-6烷氧基中的氫原子所形成的基團(tuán)。
本發(fā)明所述的“鹵代C1-4烷基、羥基C1-4烷基、氨基C1-4烷基、磺酰基C1-4烷基、C1-4烷氧基C1-4烷基、鹵代C1-4烷氧基、羥基C1-4烷氧基、C1-4烷氧基C1-4烷氧基”是指一至多個(gè)， 例如1～4個(gè)、1～3個(gè)、1～2個(gè)鹵素原子、羥基、氨基、磺?；1-4烷氧基分別取代C1-4烷基、C1-4烷氧基中的氫原子所形成的基團(tuán)。
本發(fā)明所述的“3～8元環(huán)烷基”，是指3～8個(gè)碳原子的烷烴部分去除一個(gè)氫原子衍生的單環(huán)環(huán)狀烷基，包括例如“3～6元環(huán)烷基”、“4～7元環(huán)烷基”、“4～6元環(huán)烷基”、“5～6元環(huán)烷基”等。其實(shí)例包括但不限于：環(huán)丙烷基、環(huán)丁烷基、環(huán)戊烷基、環(huán)己烷基、環(huán)庚烷基、環(huán)辛烷基、甲基環(huán)丙烷基、二甲基環(huán)丙烷基、甲基環(huán)丁烷基、二甲基環(huán)丁烷基、甲基環(huán)戊烷基、二甲基環(huán)戊烷基、甲基環(huán)己烷基、二甲基環(huán)己烷基等。
本發(fā)明所述的“雜原子”是指N、O、C(O)、S、SO和/或SO2等，優(yōu)選N、O、S，更優(yōu)選N、O。
本發(fā)明所述的“3～8元雜環(huán)基”是指含有3～8個(gè)環(huán)原子、且含有至少一個(gè)(例如1、2、3、4或5個(gè))雜原子的飽和或部分飽和的單環(huán)雜環(huán)化合物除去一個(gè)氫原子得到的基團(tuán)。3～8元部分飽和單雜環(huán)基，是指含有雙鍵、雜原子的環(huán)狀基團(tuán)。3～8元飽和單雜環(huán)基，是指全部為飽和鍵的含有雜原子的環(huán)狀基團(tuán)。“3～8元雜環(huán)基”包括例如“3～7元雜環(huán)基”、“3～6元雜環(huán)基”、“4～7元雜環(huán)基”、“4～6元雜環(huán)基”、“5～6元雜環(huán)基”、“6元飽和雜環(huán)基”、“5～6元含氮雜環(huán)基”、“5～6元飽和含氮雜環(huán)基”、“6元含氮雜環(huán)基”、“6元飽和含氮雜環(huán)基”等，具體可以為“含1～2個(gè)N原子的5～6元雜環(huán)基”、“含1～2個(gè)O、S和/或N原子的5～6元雜環(huán)基”、“含1～2個(gè)O和/或S原子的5～6元雜環(huán)基”、“含1～2個(gè)O和/或S原子的6元雜環(huán)基”、“含2個(gè)O和/或S原子的6元雜環(huán)基”、“含1～2個(gè)O和/或S原子的5～6元飽和雜環(huán)基”、“含1～2個(gè)O和/或S原子的6元飽和雜環(huán)基”等。具體實(shí)例包括但不僅限于：氮雜環(huán)丙烷基、2H-氮雜環(huán)丙烷基、二氮雜環(huán)丙烷基、3H-二氮雜環(huán)丙烯基、氮雜環(huán)丁烷基、1,4-二氧雜環(huán)己烷基、1,3-二氧雜環(huán)己烷基、1,3-二氧雜環(huán)戊烷基、1,4-二氧雜環(huán)己二烯基、四氫呋喃基、二氫吡咯基、吡咯烷基、咪唑烷基、4,5-二氫咪唑基、吡唑烷基、4,5-二氫吡唑基、2,5-二氫噻吩基、四氫噻吩基、4,5-二氫噻唑基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、4,5-二氫噁唑基、4,5-二氫異噁唑基、2,3-二氫異噁唑基、2H-1,2-噁嗪基、6H-1,3-噁嗪基、4H-1,3-噻嗪基、6H-1,3-噻嗪基、2H-吡喃基、2H-吡喃-2-酮基、3,4-二氫-2H-吡喃基等。
“3～8元碳環(huán)”是指含有3～8個(gè)碳原子的飽和、部分飽和或不飽和的單環(huán)化合物。包括例如“3～7元碳環(huán)”、“3～6元碳環(huán)”、“4～7元碳環(huán)”、“4～6元碳環(huán)”、“5～6元碳環(huán)”等。具體實(shí)例包括但不僅限于：環(huán)丙烷基、環(huán)丁烷基、環(huán)戊烷基、環(huán)己烷基、環(huán)庚烷基、環(huán)辛烷基、環(huán)戊烯基、1,3-環(huán)戊二烯基、環(huán)己烯基、1,4-環(huán)己二烯基、環(huán)庚烯基、1,4-環(huán)庚二烯基、環(huán)辛烯基、苯基等。優(yōu)選“5～6元飽和或部分飽和的碳環(huán)”。
本發(fā)明還提供了上述化合物的制備方法，但不僅限于以下方法，反應(yīng)方程式如下：
反應(yīng)步驟：
步驟1中間體1的制備
購買或經(jīng)適當(dāng)方法制備得到中間體1。
步驟2中間體2的制備
中間體1溶于溶劑(例如N,N-二甲基甲酰胺)中，加入N-溴代丁二酰亞胺，加熱(例如50-70℃)過夜，反應(yīng)完成，加水淬滅，有機(jī)溶劑(例如乙酸乙酯)萃取，濃縮，經(jīng)純化(例如硅膠柱層析)得到中間體2。
步驟3中間體3的制備
將中間體2溶于適當(dāng)溶劑(例如乙醇)，加入有機(jī)溶劑(例如乙酸)，加熱(例如70℃)，將鐵粉加入，升溫(例如80℃)，反應(yīng)(例如2-4小時(shí))，反應(yīng)完成，冷卻(例如室溫)，過濾，有機(jī)溶劑(例如乙酸乙酯)萃取，濃縮，經(jīng)純化(例如硅膠柱層析)得到中間體3。
步驟4中間體4的制備
將中間體3溶于適當(dāng)溶劑(例如甲苯)，加入適量乙酸和N-碘代丁二酰亞胺，室溫反應(yīng) (例如2-4小時(shí))，反應(yīng)完成，加水淬滅，有機(jī)溶劑(例如乙酸乙酯)萃取，濃縮，經(jīng)純化(例如硅膠柱層析)得到中間體4。
步驟5中間體5的制備
將中間體4和原料1溶于合適溶劑(例如1,4-二氧六環(huán))，加入水、[1,1'-雙(二苯基磷)二茂鐵]二氯化鈀和碳酸鉀，加熱(例如70-90℃)，反應(yīng)(例如2-4小時(shí))，反應(yīng)完成，加水淬滅，有機(jī)溶劑(例如二氯甲烷)萃取，飽和食鹽水洗滌，濃縮，經(jīng)純化(例如硅膠柱層析)得到中間體5。
步驟6中間體6的制備
將中間體5溶于適當(dāng)溶劑(例如甲醇)，加入鈀炭，氫氣保護(hù)下反應(yīng)過夜，反應(yīng)完成，過濾，濃縮，得到中間體6。
步驟7中間體7的制備
將原料2和原料3溶于適當(dāng)溶劑(例如N,N-二甲基甲酰胺)，加入二異丙基乙胺，加熱(例如60-80℃)過夜，反應(yīng)完成，加水淬滅，有機(jī)溶劑(例如乙酸乙酯)萃取，飽和食鹽水洗滌，濃縮，經(jīng)純化(例如硅膠柱層析)得到中間體7。
步驟8本發(fā)明通式(I)化合物的制備
將中間體6和中間體7溶于適當(dāng)溶劑(例如1,4-二氧六環(huán))，加入[1,1'-雙(二苯基磷)二茂鐵]二氯化鈀和碳酸銫，加熱(例如70-90℃)過夜，反應(yīng)完成，過濾，濃縮，經(jīng)適當(dāng)方法(例如硅膠柱層析)得到本發(fā)明通式(I)化合物。
反應(yīng)方程式中，R1、R2、R3、R4、R6、R7和A環(huán)如前文所定義，X代表氟原子、氯原子、溴原子和碘原子。
本發(fā)明式(I)化合物的“立體異構(gòu)體”是指當(dāng)式(I)化合物存在不對(duì)稱碳原子時(shí)，會(huì)產(chǎn)生對(duì)映異構(gòu)體，當(dāng)化合物存在碳碳雙鍵或環(huán)狀結(jié)構(gòu)時(shí)，會(huì)產(chǎn)生順反異構(gòu)體，當(dāng)化合物存在酮或肟時(shí)，會(huì)產(chǎn)生互變異構(gòu)體，所有式(I)化合物的對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體、消旋異構(gòu)體、順反異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、幾何異構(gòu)體、差向異構(gòu)體及其混合物，均包括在本發(fā)明范圍中。
本發(fā)明的通式(I)所示的任一化合物合成得到的若是消旋體，所需要的對(duì)映體純的化合物可以通過手性拆分的方法得到：可以通過具有手性固定相的色譜法(像高壓制備液相色譜、超臨界流體色譜)。手性填料包括但不限于：Chiralcel OJ-H,Chiralpak AD-H，Chiralpak IA，Chiralpak AS-H。
本發(fā)明的通式(I)所示的任一化合物藥學(xué)上可接受的鹽是指由藥學(xué)上可接受的、非 毒性堿或酸制備的鹽，包括有機(jī)酸鹽、無機(jī)酸鹽、有機(jī)堿鹽、無機(jī)堿鹽。
有機(jī)酸鹽包括甲酸、乙酸、三氟乙酸鹽、苯磺酸、苯甲酸、對(duì)甲苯磺酸、樟腦磺酸、檸檬酸、甲磺酸、乙磺酸、丙磺酸、富馬酸、葡糖酸、谷氨酸、羥乙磺酸、乳酸、馬來酸、蘋果酸、扁桃酸、粘酸、雙羥萘酸、泛酸、琥珀酸、酒石酸等的鹽。
無機(jī)酸鹽包括氫溴酸、氫氯酸、硝酸、硫酸、磷酸等的鹽。
有機(jī)堿鹽包括伯、仲和叔胺，被取代胺包括天然存在的取代胺、環(huán)胺和堿離子交換樹脂，選自甜菜堿、咖啡因、膽堿、N,N’-二芐基乙二胺、二乙胺、2-二乙胺基乙醇、2-二甲胺基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基-嗎啉、N-乙基哌啶、葡甲胺、氨基葡萄糖、海巴明、異丙基胺、甲基葡糖胺、嗎啉、哌嗪、哌啶、普魯卡因、嘌呤、可可堿、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等的鹽。天然氨基酸鹽如甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、正亮氨酸、酪氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、羥基脯氨酸、組氨酸、鳥氨酸、賴氨酸、精氨酸、絲氨酸等的鹽。
無機(jī)堿鹽包括銨以及鋰、鈉、鉀、鈣、鎂、鋅、鋇、鋁、鐵、酮、亞鐵、錳、二價(jià)錳等的鹽。
本發(fā)明式(I)化合物的“酯”是指，當(dāng)式(I)化合物存在羧基時(shí)，可以與醇發(fā)生酯化反應(yīng)而形成的酯，當(dāng)式(I)化合物存在羥基時(shí)，可以有機(jī)酸、無機(jī)酸、有機(jī)酸鹽等發(fā)生酯化反應(yīng)而形成的酯。酯在酸或者堿存在的條件下，可以發(fā)生水解反應(yīng)生成相應(yīng)的酸或醇。
通式(I)所示的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯或其立體異構(gòu)體可以是溶劑化物形式。若溶劑化物是水合物的情況下，水合作用可以在制備過程中完成或者可以利用原始無水產(chǎn)物的吸濕性逐漸進(jìn)行。
本發(fā)明進(jìn)一步要求保護(hù)包括上述的式(I)所示的任一化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體與一種或多種藥用載體和/或稀釋劑的藥物組合物，可以制成藥學(xué)上可接受的任一劑型。以口服、腸胃外、直腸或經(jīng)肺給藥等方式施用于需要這種治療的患者。用于口服給藥時(shí)，可制成常規(guī)的固體制劑，如片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑等；也可制成口服液體制劑，如口服溶液劑、口服混懸劑、糖漿劑等。制成口服制劑時(shí)，可以加入適宜的填充劑、粘合劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑等。用于腸胃外給藥時(shí)，可制成注射劑，包括注射液、注射用無菌粉末與注射用濃溶液。制成注射劑時(shí)，可采用現(xiàn)有制藥領(lǐng)域中的常規(guī)方法生產(chǎn)，配制注射劑時(shí)，可以不加入附加劑，也可根據(jù)藥物的性質(zhì)加入適宜的附加劑。用于直腸給藥時(shí)，可制成栓劑等。用于經(jīng)肺給藥時(shí)，可制成吸入劑或噴霧劑等。
本發(fā)明進(jìn)一步要求保護(hù)包括上面所述的式(I)任一化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、 溶劑化物或其立體異構(gòu)體與其它一種或多種抗腫瘤劑和免疫抑制劑的藥物組合物。所述的抗腫瘤劑和免疫抑制劑為抗代謝物，包括但不限于卡培他濱、吉西他濱、培美曲塞二鈉；為生長(zhǎng)因子抑制劑，包括但不限于帕唑帕尼、伊馬替尼、埃羅替尼、拉帕替尼、吉非替尼、凡德他尼；為抗體，包括但不限于赫賽汀、貝伐單抗；為有絲分裂抑制劑，選自紫杉醇、長(zhǎng)春瑞濱、多西他賽、多柔比星；為抗腫瘤激素類，選自來曲唑、他莫西芬、氟維司群、氟他胺、曲普瑞林；為烷化劑類，包括但不限于環(huán)磷酰胺、氮芥、馬法蘭、瘤可寧、卡莫司?。粸榻饘巽K類，包括但不限于卡鉑、順鉑、奧沙利鉑；為免疫抑制類，包括但不限于依維莫司、西羅莫司、特癌適；為嘌呤類似物，包括但不限于6-巰基嘌呤、6-硫鳥嘌呤、硫唑嘌呤；為抗生素類，包括但不限于菌素D、柔紅霉素、阿霉素、米托蒽醌、爭(zhēng)光霉素、普卡霉素；為鉑配合物，包括但不限于順鉑、卡波鉑；為腎上腺皮質(zhì)抑制劑類，包括但不限于氨魯米特；為酶抑制劑，包括但不限于SAHA、阿糖胞苷、甲氨蝶呤、羥基脲、羥喜樹堿、拓?fù)涮乜稀⑼負(fù)涮婵?、依立替康?/p>
本發(fā)明還提供了本發(fā)明式(I)所示的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體在制備治療和/或預(yù)防ALK介導(dǎo)的癌癥相關(guān)疾病或增生性疾病的藥物中的應(yīng)用，所述癌癥相關(guān)的疾病包括但不限于腦瘤，肺癌，非小細(xì)胞性肺癌，鱗狀上皮細(xì)胞，膀胱癌，胃癌，卵巢癌，腹膜癌，胰腺癌，乳腺癌，頭頸癌，子宮頸癌，子宮內(nèi)膜癌，結(jié)直腸癌，肝癌，腎癌，食管腺癌，食管鱗狀細(xì)胞癌，非霍奇金淋巴瘤，腦瘤，中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，即神經(jīng)膠質(zhì)瘤，多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤，膠質(zhì)肉瘤，前列腺癌，甲狀腺癌，雌性生殖道癌，原位癌，淋巴瘤，組織細(xì)胞淋巴瘤，神經(jīng)纖維瘤病，骨癌，皮膚癌，結(jié)腸癌，睪丸癌，小細(xì)胞肺癌，胃腸道間質(zhì)瘤，前列腺腫瘤，肥大細(xì)胞腫瘤，多發(fā)性骨髓瘤，黑色素瘤，膠質(zhì)瘤，膠質(zhì)母細(xì)胞瘤，星形細(xì)胞瘤，神經(jīng)母細(xì)胞瘤，肉瘤；增生性疾病，包括但不限于皮膚或前列腺的良性增生。
本發(fā)明化合物具有以下優(yōu)點(diǎn)：
(1)本發(fā)明式(I)化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體具有優(yōu)異的ALK抑制活性；
(2)本發(fā)明式(I)化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體顯示出良好的生物穩(wěn)定性，作用更持久，生物利用度高；
(3)本發(fā)明化合物制備工藝簡(jiǎn)單，藥品純度高，質(zhì)量穩(wěn)定，易于進(jìn)行大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)。
以下通過體外酶學(xué)抑制活性實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步闡述本發(fā)明化合物有益效果，但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明化合物僅具有下列有益效果。
實(shí)驗(yàn)例1本發(fā)明化合物的體外酶學(xué)活性實(shí)驗(yàn)
供試品：本發(fā)明化合物1的三氟乙酸鹽，其化學(xué)名稱和制備方法見化合物1的三氟乙酸鹽的制備實(shí)施例。
下述中實(shí)驗(yàn)的縮寫所代表的含義如下：
DMSO：二甲基亞砜
DTT：二硫蘇糖醇
SEB：酶催化劑緩沖溶液
ATP：腺嘌呤核苷三磷酸
ALK：間變性淋巴瘤激酶
SA-XL665：鏈霉親和素標(biāo)記的供體
2.5×、5×、10×其中的“×”：倍
實(shí)驗(yàn)方法：
ALK激酶緩沖液配制：
分別取適量母液濃度為1000mM的MgCl2、2500nM的SEB、100mM的DTT、5×酶緩沖液，加入到超純水中，使得最終濃度分別為：5mM、25nM、1mM、1×酶緩沖液，混勻，待用。
2.5×供試品溶液配制：
化合物的1mM儲(chǔ)備液配制：稱取化合物1.62mg，加入適量DMSO溶解，混勻，備用。
取1mM儲(chǔ)備液，用DMSO稀釋制成濃度為200μM的溶液，作為母液。用DMSO將上述母液三倍逐級(jí)稀釋制成一系列濃度的溶液，然后每個(gè)濃度分別用ALK激酶緩沖液稀釋80倍，制成各2.5×供試品溶液，濃度分別為：2500nM、833.33nM、277.78nM、92.59nM、30.86nM、10.29nM、3.43nM、1.14nM、0.38nM、0.13nM、0.04nM。
各種其他試劑配制：
用ALK激酶緩沖液分別配制所需要的5×ALK激酶溶液、5×底物溶液、5×ATP溶液，備用。
ALK酶學(xué)反應(yīng)：
1)384孔板中相對(duì)應(yīng)的孔中分別加入4μL配制好的2.5×供試品溶液、2μL配制好的5×ALK激酶溶液，25℃孵育10分鐘。
2)相對(duì)應(yīng)的孔中再分別加入2μL配制好的5×底物溶液和2μL配制好的5×ATP溶液，啟動(dòng)酶反應(yīng)，25℃孵育30分鐘。
酶學(xué)檢測(cè)：
用檢測(cè)緩沖液(detection buffer)配制所需濃度的SA-XL665，然后和等體積的酪氨酸激酶抗體混勻，相對(duì)應(yīng)的孔中分別加入10μL配制好的此抗體溶液，終止反應(yīng)。25℃孵育1h。
酶標(biāo)儀665nm/615nm讀板。
IC50：計(jì)算抑制率(％)＝(最大值－樣本值)/(最大值－最小值)×100，采用Graph prism軟件進(jìn)行曲線擬合，得出IC50值。
最大值：不加化合物的陽性對(duì)照，最小值：不加酶的陰性對(duì)照。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果和結(jié)論：
表1本發(fā)明化合物的體外酶學(xué)抑制活性
由表1可見，本發(fā)明化合物對(duì)ALK激酶具有良好的抑制活性，可用于治療與激酶相關(guān)的疾病，特別是ALK激酶介導(dǎo)的病癥或病況，具有顯著的臨床意義。
具體實(shí)施方式
以下通過實(shí)施例形式的具體實(shí)施方式，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下實(shí)施例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
下述縮寫所代表的定義如下：
DMF：N,N-二甲基甲酰胺
Pd(dppf)Cl2：[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀
DIPEA：二異丙基乙胺
TFA：三氟乙酸
實(shí)施例1 N2-(2-(異丙基磺酰基)苯基)-N4-(7-甲基-8-(哌啶-4-基)-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-基)-1,3,5-三嗪-2,4-二胺(化合物1)的制備
(1)2-甲氧基-4-甲基-6-硝基苯酚的制備
將2-甲氧基-4-甲基苯酚(50.0g,0.362mol)溶解在1L氯仿中，降溫至0℃將發(fā)煙硝酸(22.8g,0.362mol)溶解在120mL乙酸中，慢慢滴加至溶液中，內(nèi)部溫度控制在0℃以下，升至室溫繼續(xù)反應(yīng)0.5小時(shí)。反應(yīng)完全，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，剩余物加入200mL甲醇，過濾，真空干燥得產(chǎn)物(30g,產(chǎn)率45.3％)。
(2)5-甲基-3-硝基苯-1,2-二醇的制備
將2-甲氧基-4-甲基-6-硝基苯酚(30.0g,0.164mol)加入到200mL氫溴酸中(80％)，加入20g四丁基氟化銨，加熱至110℃，反應(yīng)過夜。反應(yīng)完成，加入1000mL水，用乙酸乙酯(5×500mL)萃取，有機(jī)相合并，250mL飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥。過濾，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，剩余物直接用于下一步(20g,產(chǎn)率72.2％)。
(3)7-甲基-5-硝基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英的制備
將5-甲基-3-硝基苯-1,2-二醇(20g,0.118mol)溶于100mL N,N-二甲基甲酰胺中，加入1,2-二溴乙烷(44.4g,0.236mol)和碳酸鉀(49.2g,0.354mol)。加熱至60℃，反應(yīng)過夜。反應(yīng)完成，加入300mL水，乙酸乙酯(3×200mL)萃取，合并有機(jī)相，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，剩余物經(jīng)硅膠柱層析(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)得到產(chǎn)物(19g,產(chǎn)率82.6％)。
(4)6-溴-7-甲基-5-硝基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英的制備
將7-甲基-5-硝基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英(19g,0.097mol)溶解在200mL N,N-二甲 基甲酰胺中，分批加入N-溴代丁二酰亞胺(34.5g,0.194mol)。加熱至60℃，反應(yīng)過夜。反應(yīng)完成，加入300mL水，乙酸乙酯(3×200mL)萃取，合并有機(jī)相，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，剩余物經(jīng)硅膠柱層析(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)得到產(chǎn)物(18g,產(chǎn)率67.7％)。
(5)6-溴-7-甲基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-胺的制備
將6-溴-7-甲基-5-硝基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英(18g,65.7mmol)溶解在200mL乙醇中，加入20mL乙酸，加熱至70℃，將鐵粉(36.8g,657.1mmol)分批加入。升溫至80℃，反應(yīng)3小時(shí)，反應(yīng)完成后，冷卻至室溫，過濾，濾液中加入300mL水，乙酸乙酯(3×300mL)萃取，合并有機(jī)相，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，剩余物經(jīng)硅膠柱層析(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)得到產(chǎn)物(12g,產(chǎn)率75％)。
(6)6-溴-8-碘-7-甲基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-胺的制備
將6-溴-7-甲基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-胺(12g,49.2mmol)溶于100mL甲苯中，加入5mL乙酸和N-碘代丁二酰亞胺(16.6g,73.8mmol)，室溫下反應(yīng)3小時(shí)。反應(yīng)完成，加入100mL水，乙酸乙酯(3×200mL)萃取，合并有機(jī)相，用200mL亞硫酸氫鈉溶液洗滌，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)相，剩余物經(jīng)硅膠柱層析(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)得到產(chǎn)物(7g,產(chǎn)率38.5％)。
(7)叔丁基4-(8-氨基-7-溴-6-甲基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-基)-3,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸酯的制備
將6-溴-8-碘-7-甲基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-胺(7.0g,18.9mmol)和叔丁基4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧戊硼烷-2-基)-3,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸酯(5.8g,18.8mmol)溶于100mL 1,4-二氧六環(huán)中，加入15mL水和[1,1'-雙(二苯基磷)二茂鐵]二氯化鈀(1.4g,1.91 mmol)，碳酸鉀(7.83g,56.7mmol)，加熱至80℃，反應(yīng)3小時(shí)。反應(yīng)完成，加入100mL水，3×200mL二氯甲烷(3×200mL)萃取，合并有機(jī)相，用100mL飽和食鹽水洗滌，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)相，剩余物經(jīng)硅膠柱層析(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)得到產(chǎn)物(5g,產(chǎn)率62.1％)。
(8)叔丁基4-(8-氨基-6-甲基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-基)哌啶-1-甲酸酯的制備
將叔丁基4-(8-氨基-7-溴-6-甲基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-基)-3,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸酯(5g,11.76mmol)溶解在150mL甲醇中，加入4g鈀炭，通入氫氣，室溫下反應(yīng)過夜。反應(yīng)完成，過濾，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，得到產(chǎn)物(2.5g,產(chǎn)率61.1％)。
(9)4-氯-N-(2-(異丙基磺酰基)苯基)-1,3,5-三嗪-2-胺的制備
將2-(異丙基磺?；?苯胺(2.0g,10.0mmol)，2,4–二氯-1,3,5-三嗪(2.26g,15.07mmol)溶于20mL N,N-二甲基甲酰胺中，加入2mL二異丙基乙胺，加熱至70℃，反應(yīng)過夜。反應(yīng)完成，加入100mL水，乙酸乙酯(3×50mL)萃取，合并有機(jī)相，用100mL飽和食鹽水洗滌，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)相，剩余物經(jīng)硅膠柱層析(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)得到產(chǎn)物(2.5g,產(chǎn)率79.9％)。
(10)叔丁基4-(8-((4-((2-(異丙基磺?；?苯基)氨基)-1,3,5-三嗪-2-基)氨基)-6-甲基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-基)哌啶-1-甲酸酯的制備
將4-氯-N-(2-(異丙基磺?；?苯基)-1,3,5-三嗪-2-胺(2.3g,7.35mmol)和叔丁基4-(8-氨基-6-甲基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-基)哌啶-1-甲酸酯(1.28g,3.67mmol)溶于50mL 1,4-二氧六環(huán)中，加入[1,1'-雙(二苯基磷)二茂鐵]二氯化鈀(0.404g,0.552mmol)，碳酸銫(3.59g,11.0mmol)，加熱至80℃，反應(yīng)過夜。反應(yīng)完成，過濾，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，剩余物經(jīng)硅膠 柱層析(二氯甲烷:甲醇＝20:1)得到產(chǎn)物(0.6g,產(chǎn)率26.2％)。
(11)N2-(2-(異丙基磺酰基)苯基)-N4-(7-甲基-8-(哌啶-4-基)-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-基)-1,3,5-三嗪-2,4-二胺的制備
將叔丁基4-(8-((4-((2-(異丙基磺?；?苯基)氨基)-1,3,5-三嗪-2-基)氨基)-6-甲基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-基)哌啶-1-甲酸酯(0.6g,0.96mmol)溶于10mL二氯甲烷中，加入2mL三氟乙酸，室溫下反應(yīng)2小時(shí)。反應(yīng)完成，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，加入50mL乙酸乙酯，用飽和碳酸氫鈉洗滌，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)相，剩余物經(jīng)硅膠柱層析(二氯甲烷:甲醇＝15:1)得到終產(chǎn)物(0.3g,產(chǎn)率59.6％)。
分子式：C26H32N6O4S 分子量：524.64 LC-MS(m/z)：525.3[M+H]+
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.33(s,1H),9.01(s,1H),8.38(brs,1H),8.32(s,1H),7.80(d,J＝8.0Hz,1H),7.60(brs,1H),7.30(t,J＝7.6Hz,1H),6.93(s,1H),4.19(s,4H),3.40-3.44(m,3H),2.94-3.06(m,3H),2.37-2.43(m,2H),2.22(s,3H),1.63-1.66(m,2H),1.14(d,J＝7.2Hz,6H).
實(shí)施例2 N2-(2-(異丙基磺?；?苯基)-N4-(7-甲基-8-(哌啶-4-基)-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-基)-1,3,5-三嗪-2,4-二胺(化合物1)三氟乙酸鹽的制備
在一只100mL的單口瓶中加入叔丁基4-(8-((4-((2-(異丙基磺?；?苯基)氨基)-1,3,5-三嗪-2-基)氨基)-6-甲基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-基)哌啶-1-甲酸酯(按照實(shí)施例1步驟(1)-步驟(10)的方法制備，20mg,0.03mmol)、二氯甲烷(10mL)和三氟乙酸(2mL)。然后混合物室溫?cái)嚢璺磻?yīng)2小時(shí)，減壓濃縮，粗產(chǎn)物通過Prep-HPLC制備。收集組分減壓濃縮，得到產(chǎn)物(8.9mg,產(chǎn)率為44％)。
分子式：C28H33N6F3O6S 分子量：638.66 LC-MS(m/z):525[M+H]+
1H-NMR(300MHz,CD3OD)δ:1.324(m,6H),1.761-1.849(m,2H),2.566-2.698(m,2H),3.008-3.552(m,9H),4.300(s,3H),7.319-7.374(m,2H),7.609-7.699(m,1H),7.894-7.925(m,1H),8.319(s,1H),8.334-8.524(m,1H)。