本發(fā)明涉及下式的雙吲哚衍生物，即2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷，公開了它們的合成，涉及它們的抗血栓活性。因而本發(fā)明公開了2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷作為血栓抑制劑的臨床應用前景。

背景技術：

吲哚乙酸的衍生物吲哚美辛(Indomethacin)除具有抗炎以及解熱鎮(zhèn)痛作用外，還可以通過抑制血栓素TXA2的合成而抑制血小板的聚集。我們的前期發(fā)明披露，通式II的雙吲哚衍生物(式中AA為氨基酸殘基)在1nml/kg口服劑量下具有抗血栓活性。在急性毒性研究中，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)劑量通式II的雙吲哚衍生物的不能溶解。在通式II的雙吲哚衍生物的代謝研究中，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)大鼠的糞便中含較高量通式II的雙吲哚衍生物。這些發(fā)現(xiàn)使發(fā)明人認識到，提高雙吲哚衍生物的生物利用度至關重要。經(jīng)過3年摸索，終于發(fā)現(xiàn)將通式II的乙基用3-羥基-4-甲氧基苯基代替，并在乙酰-AA中插如Leu殘基可以達到改善生物利用度的目標。于是，發(fā)明人提出來本發(fā)明。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的第一個內(nèi)容是提供通式I的2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(式中AA為L-Leu，L-Phe，L-Asp，L-Ser，L-Val，L-Thr，L-Trp和L-Ile殘基)。

本發(fā)明的第二個內(nèi)容是提供通式I的2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-2-基)-(3-羥 基-4-甲氧基苯基)-甲烷的合成方法，該方法包括：

(1)吲哚乙酸在乙醇中經(jīng)濃硫酸催化，與異香草醛進行Pictet-Spengler縮合，生成2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酸乙酯-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷；

(2)2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酸乙酯-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷在NaOH溶液(4N)中皂化反應生成2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酸-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷；

(3)2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酸-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷與L-Leu-OBzl偶聯(lián)得到2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-OBzl-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷；

(4)2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-OBzl-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷在甲醇溶液中Pd/C催化生成2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷；

(5)2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷與AA-OBzl偶聯(lián)得到2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-OBzl-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷；

(6)2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-OBzl-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷在甲醇溶液中Pd/C催化生成2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷。

本發(fā)明的第三個內(nèi)容是評價2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-OBzl-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(式中AA為L-Leu，L-Phe，L-Asp，L-Ser，L-Val，L-Thr，L-Trp和L-Ile殘基)在大鼠模型上的抗栓活性。

附圖說明

圖1是2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-OBzl-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷示意圖(式中AA為L-Leu，L-Phe，L-Asp，L-Ser，L-Val，L-Thr，L-Trp和L-Ile殘基)的合成路線.i)異香草醛，濃H₂SO₄，97.7％乙醇；ii)4N NaOH，丙酮；iii)AA-OBzl、DCC、HOBt、無水THF；iv)Pd/C，甲醇；v)AA-OBzl、DCC、HOBt、無水THF；vi)Pd/c，甲醇。5a中AA＝Leu；5b中AA＝Phe；5c中AA＝Asp；5d中AA＝Ser；5e中AA＝Val；5f中AA＝Thr；5g中＝Trp；5h中＝Ile.6a中AA＝Leu；6b中AA＝Phe；6c中AA＝Asp；6d中AA＝Ser；6e中AA＝Val；6f中AA＝Thr；6g中AA＝Trp；6h中AA＝Ile。

具體實施方式

為了進一步闡述本發(fā)明，下面給出一系列實施例。這些實施例完全是例證性的，它們僅用來對本發(fā)明進行具體描述，不應當理解為對本發(fā)明的限制。

實施例1制備2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酸乙酯-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(1)

1g(5.71mmol)吲哚-3-乙酸溶于40ml無水乙醇，滴加1ml濃硫酸，活化20min。加500mg(3.29mmol)3-羥基4-甲氧基苯基醛，室溫反應6h，減壓濃縮至干。柱層析純化(石油醚/丙酮＝9/1-5/1)，得到870mg(57％)標題化合物，為淡黃色糖漿。ESI/MS(m/e)：541[M+H]⁺；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ＝8.40(s，2H)，7.55(m，2H)，7.34(m，2H)，7.13(m，4H)，6.78(m，3H)，6.15(m，1H)，4.18(m，4H)，3.83(s，3H)，3.56(m，4H)，1.30(m，6H)。

實施例2制備2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酸-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(2)

200mg(0.37mmol)2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酸乙酯-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(1)溶于5ml丙酮，4N NaOH調(diào)pH＝12。室溫反應6h。冰浴下用飽和KHSO₄調(diào)pH＝7，減壓濃縮除去丙酮后，用飽和KHSO₄調(diào)pH＝2，水層用50ml乙酸乙酯萃取3遍，合并乙酸乙酯層，用飽和NaCl洗至中性，無水Na₂SO₄干燥。減壓過濾，濾液減壓濃縮至干，得到172mg(98％)標題化合物，為紫色粉末。ESI/MS(m/e)：483[M-H]^-；¹HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ＝8.40(s，2H)，7.55(m，2H)，7.34(m，2H)，7.13(m，4H)，6.78(m，3H)，6.15(m，1H)，3.83(s，3H)，3.56(m，4H)。

實施例3制備2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-OBzl-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(3)

冰浴下將968mg(2mmol)2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酸-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(2)用無水THF溶解，先加入567mg(4.20mmol)HOBt，然后加入906mg(4.40mmol)DCC，攪拌0.5h后加入1729mg(4.40mmol)亮氨酸芐酯，用NMM調(diào)節(jié)pH到9，反應8h，TLC板監(jiān)測(石油醚∶丙酮＝1.5∶1)反應完全。濾除DCU，反應混合液減壓濃縮至干，殘留物用150mL乙酸乙酯溶解，濾除不溶物，得到的溶液依次用5％NaHCO₃水溶液、飽和NaCl水溶液、5％KHSO₄水溶液和飽和NaCl水溶液洗滌3次，乙酸乙酯層用無水Na₂SO₄干燥12h，過濾，濾液減壓濃縮至干，得到的淡黃色油狀物通過硅膠柱柱層析(石油醚∶丙酮＝1.5∶1)純化，得到650mg(37％)標題化合物，為淡黃色粉末。ESI/MS(m/e)：891[M+H]⁺；mp 112-113℃；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ＝10.90(s，1H)，9.89(s，1H)，7.49(m，2H)，7.38(m，11H)，7.11(m，5H)，6.75(m，2H)，6.61(m，1H)，6.19(m，2H)，5.98(s，1H)，5.62(s，1H)，5.27(q，J＝12.3Hz，2H)，5.15(s，2H)，4.75(m，2H)，3.88(s，3H)，3.58(q，J＝17.7Hz，2H)，3.48(d，J＝16.2Hz，1H)，3.15(d，J＝16.2Hz，1H)，1.60(m，4H)，1.29(m，2H)，0.85(m，12H)。

實施例4制備2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(4)

取100mg(0.11mmol)2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-OBzl-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基 苯基)-甲烷(3)溶于10ml甲醇中，加20mg Pd/C，通入氫氣。待TLC檢測原料點消失(石油醚∶丙酮＝1.5∶1)，減壓過濾，濾液減壓濃縮至干，得到72mg(90％)標題化合物，為紫色粉末。ESI/MS(m/e)：709[M-H]^-；mp 176-178℃；¹HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ＝12.61(s，1H)，11.22(s，1H)，10.87(s，1H)，8.99(s，1H)，8.41(m，2H)，7.59(m，2H)，7.24(m，2H)，6.99(m，4H)，6.80(m，1H)，6.61(s，1H)，6.48(m，1H)，6.70(s，1H)，4.50(s，1H)，4.25(m，2H)，3.73(s，3H)，3.41(m，4H)，1.51(m，6H)，0.80(m，12H)。

實施例5制備2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Leu-OBzl-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5a)

冰浴下將800mg(1.13mmol)2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(4)用無水THF溶解，先加入319mg(2.37mmol)HOBt，然后加入512mg(2.48mmol)DCC，攪拌0.5h后加入974mg(2.49mmol)Tos·Leu-OBzl，用NMM調(diào)節(jié)pH到9，反應8h，TLC板監(jiān)測(石油醚∶丙酮＝1.5∶1)原料點消失，反應完全。濾除DCU，反應混合液減壓濃縮至干，殘留物用150mL乙酸乙酯溶解，濾除不溶物，得到的溶液依次用5％NaHCO₃水溶液、飽和NaCl水溶液、5％KHSO₄水溶液和飽和NaCl水溶液洗滌3次，乙酸乙酯層用無水Na₂SO₄干燥2h，過濾，濾液減壓濃縮至干，得到的淡黃色油狀物通過硅膠柱柱層析(石油醚∶丙酮＝1.5∶1)純化，得到630mg(52.5％)標題化合物，為淡黃色粉末。ESI/MS(m/e)：1117[M+H]⁺，1139[M+Na]⁺；Mp 121-122℃；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ＝11.07(s，1H)，10.38(s，1H)，7.51(d，J＝7.5Hz，1H)，7.37(m，13H)，7.09(m，4H)，6.71(m，2H)，6.56(m，1H)，6.41(m，3H)，6.29(m，1H)，5.9(s，1H)，5.75(s，1H)，5.20(m，4H)，4.70(m，1H)，4.52(m，3H)，3.88(s，3H)，3.74(d，J＝17.7Hz，1H)，3.58(d，J＝17.7Hz，1H)，3.39(d，J＝15.9Hz，1H)，3.09(d，J＝15.9Hz，1H)，1.62(m，6H)，1.42(m，6H)，0.90(m，12H)，0.71(m，12H)。

實施例6制備2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Phe-OBzl-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5b)

采用實施例5的方法從800mg(1.13mmol)2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(4)和723mg(2.49mmol)Tos·Phe-OBzl得到620mg(48％)標題化合物，為淡黃色粉末。ESI/MS(m/e)：1185[M+H]⁺，1207[M+Na]⁺；Mp 122-123℃；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ＝11.10(s，1H)，10.37(s，1H)，7.48(m，2H)，7.35(m，7H)，7.28(m，3H)，7.12(m，10H)，6.90(m，3H)，6.72(m，4H)，6.56(m，1H)，6.42(m，1H)，6.35(m，2H)，6.25(m，1H)，5.89(s，1H)，5.73(s，1H)，5.32(s，1H)，5.15(m，4H)，4.96(m，1H)，4.84(m，1H)，4.45(m，2H)，3.86(s，3H)，3.76(d， J＝17.7Hz，1H)，3.58(d，J＝17.7Hz，1H)，3.42(d，J＝15.9Hz，1H)，3.11(m，3H)，3.02(dd，J＝14.7，5.1Hz，1H)，2.74(dd，J＝14.7，6.0Hz，1H)，1.51(m，3H)，1.32(m，3H)，0.9(m，6H)，0.71(d，J＝6.0Hz，3H)，0.63(d，J＝6.0Hz，3H)。

實施例7制備2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Asp-OBzl-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5c)

采用實施例5的方法從800mg(1.13mmol)2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(4)和776mg(2.49mmol)Asp(OBzl)-OBzl得到630mg(36％)標題化合物，為淡黃色粉末。ESI/MS(m/e)：1323[M+Na]⁺；Mp 110-111℃；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ＝11.01(s，1H)，10.29(s，1H)，7.46(m，2H)，7.29(m，20H)，7.10(m，6H)，6.92(m，2H)，6.71(m，2H)，6.58(m，1H)，6.31(d，J＝8.4Hz，1H)，6.22(d，J＝8.4Hz，1H)，5.95(s，1H)，5.88(s，1H)，5.00(m，10H)，4.50(m，2H)，3.85(s，3H)，3.65(m，3H)，2.90(m，5H)，1.30(m，6H)，0.88(m，6H)，0.74(d，J＝6.0Hz，3H)，0.66(d，J＝6.0Hz，3H)。

實施例8制備2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Ser-OBzl-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5d)

采用實施例5的方法從800mg(1.13mmol)2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(4)和232mg(2.49mmol)HCl·Ser-OBzl得到610mg(51％)標題化合物，為淡黃色粉末。ESI/MS(m/e)：1087[M+Na]⁺；Mp 123-124℃；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ＝9.73(s，1H)，9.44(s，1H)，7.49(m，2H)，7.32(m，11H)，7.27(m，2H)，7.24(m，1H)，7.09(m，4H)，6.61(m，4H)，6.27(s，1H)，5.94(s，1H)，5.21(m，4H)，4.59(m，3H)，4.45(m，1H)，3.78(m，5H)，3.61(m，4H)，3.41(d，J＝16.2Hz，1H)，3.18(d，J＝16.2Hz，1H)，1.39(m，6H)，0.85(d，J＝6.0Hz，6H)，0.71(m，6H)。

實施例9制備2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Val-OBzl-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5e)

采用實施例5的方法從800mg(1.13mmol)2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(4)和939mg(2.49mmol)Tos·Val-OBzl得到310mg(25％)標題化合物，為淡黃色粉末。ESI/MS(m/e)：1089[M+H]⁺；Mp 120-121℃；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ＝10.99(s，1H)，10.35(s，1H)，7.51(m，1H)，7.35(m，13H)，7.10(m，4H)，6.70(m，2H)，6.55(m，3H)，6.31(s，2H)，5.88(s，1H)，5.72(s，1H)，5.19(m，4H)，4.58(m，4H)，3.86(m，3H)，3.65(m，2H)，3.39(m，1H)，3.09(m，1H)，1.90(m，2H)，1.41(m，6H)，0.83(m，24H)。

實施例10制備2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Thr-OBzl-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5f)

采用實施例5的方法從800mg(1.13mmol)2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(4)和944mg(2.49mmol)Tos·Thr-OBzl得到500mg(42％)標題化合物，為淡黃色粉末。ESI/MS(m/e)：1093[M+H]⁺；Mp 123-125℃；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ＝10.07(s，1H)，9.64(s，1H)，7.56(m，1H)，7.45(m，1H)，7.33(m，11H)，7.24(m，1H)，7.10(m，6H)，6.69(m，2H)，6.56(m，3H)，6.08(s，1H)，5.96(s，1H)，5.20(m，4H)，4，53(m，4H)，4.25(m，2H)，3.88(m，3H)，3.61(m，2H)，3.42(d，J＝15.9Hz 1H)，3.19(d，J＝15.9Hz，1H)，1.5(m，6H)，1.08(d，J＝6.3Hz，3H)，0.97(d，J＝6.3Hz，3H)，0.88(m，6H)，0.69(m，6H)。

實施例11制備2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Trp-OBzl-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5g)

采用實施例5的方法從800mg(1.13mmol)2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(4)和819mg(2.49mmol)HCl·Trp-OBzl得到310mg(22％)標題化合物，為淡黃色粉末。ESI/MS(m/e)：1063[M+H]⁺；Mp 124-126℃；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ＝11.18(s，1H)，10.41(s，1H)，7.79(s，1H)，7.59(m，1H)，7.48(m，2H)，7.41(m，1H)，7.31(m，4H)，7.22(m，6H)，7.00(m，9H)，6.74(m，1H)，6.65(m，1H)，6.56(m，2H)，6.37(m，3H)，6.01(m，1H)，5.96(s，1H)，5.87(s，1H)，5.20(m，4H)，5.02(m，5H)，4.78(m，1H)，4.49(m，1H)，4.30(m，1H)，3.81(m，3H)，3.65(m，2H)，3.26(m，5H)，2.42(m，1H)，1.61(m，4H)，1.23(m，2H)，0.82(d，J＝5.7Hz，6H)，0.49(d，J＝6.0Hz，3H)，0.43(d，J＝6.0Hz，3H)。

實施例12制備2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Ile-OBzl-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5h)

采用實施例5的方法從800mg(1.13mmol)2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(4)和974mg(2.49mmol)Tos·Ile-OBzl得到430mg(34％)標題化合物，為淡黃色粉末。ESI/MS(m/e)：1117[M+H]⁺；Mp 120-122℃；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ＝11.09(s，1H)，10.40(s，1H)，7.52(d，J＝7.2Hz，1H)，7.35(m，13H)，7.09(m，4H)，6.71(m，2H)，6，56(m，3H)，6.31(m，2H)，5.89(s，1H)，5.71(s，1H)，5.16(m，4H)，4.68(m，1H)，4.52(m，3H)，3.87(s，3H)，3.73(d，J＝17.7Hz，1H)，3.58(d，J＝17.7Hz，1H)，3.39(d，J＝15.9Hz，1H)，3.09(d，J＝15.9Hz，1H)，1.92(m，1H)，1.62(m，5H)，1.29(m，6H)，0.89(m，12H)，0.81(m，3H)，0.72(m，3H)，0.60(m，6H)。

實施例13制備2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Leu-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(6a)

取300mg(0.27mmol)2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Leu-OBzl-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5a)溶于20mL甲醇中，加60mg Pd/C，通入氫氣。待TLC檢測原料點消失(石油醚∶丙酮＝1.5∶1)，減壓過濾，濾液減壓濃縮至干，得到230mg(92％)標題化合物，為紫色粉末。ESI/MS(m/e)：935[M-H]^-；Mp 176-177℃；¹HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ＝12.49(s，1H)，11.62(s，1H)，11.04(s，1H)，8.89(s，1H)，8.40(m，2H)，8.26(m，2H)，7.56(m，2H)，7.31(m，1H)，7.21(m，1H)，6.96(m，4H)，6.79(m，1H)，6.60(s，1H)，6.49(m，1H)，6.19(s，1H)，4.40(m，2H)，4.22(m，2H)，3.72(s，3H)，3.48(m，4H)，1.61(m，6H)，1.49(m，6H)，0.82(m，24H)。

實施例14制備2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Phe-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(6b)

采用實施例13的方法從300mg(0.25mmol)2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Phe-OBzl-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5b)得到250mg(90％)標題化合物，為紫色粉末。ESI/MS(m/e)：1003[M-H]^-；Mp 170-171℃；¹HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ＝12.67(s，1H)，11.70(s，1H)，10.99(s，1H)，8.90(s，1H)，8.38(m，4H)，7.57(m，2H)，7.30(m，1H)，7.19(m，11H)，6.98(m，4H)，6.79(m，1H)，6.60(s，1H)，6.41(m，1H)，6.19(s，1H)，4.41(m，4H)，4.09(s，1H)，3.72(s，3H)，3.41(m，3H)，2.99(m，5H)，1.62(m，2H)，1.49(m，4H)，0.79(m，12H)。

實施例15制備2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Asp-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(6c)

采用實施例13的方法從300mg(0.23mmol)2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Asp-OBzl-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5c)得到200mg(93％)標題化合物，為紫色粉末。ESI/MS(m/e)：939[M-H]^-；Mp 176-179℃；¹HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ＝12.71(s，3H)，11.64(s，1H)，10.97(s，1H)，8.93(s，1H)，8.45(m，4H)，7.59(m，2H)，7.24(m，2H)，6.99(m，4H)，6.80(m，1H)，6.60(s，1H)，6.41(m，1H)，6.20(s，1H)，4.56(m，2H)，4.42(m，2H)，4.12(s，1H)，3.72(s，3H)，3.38(m，4H)，2.63(m，4H)，1.56(m，2H)，1.45(m，4H)，0.81(m，12H)。

實施例16制備2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Ser-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(6d)

采用實施例13的方法從300mg(0.28mmol)2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Ser-OBzl-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5d)得到220mg(88％)標題化合物，為紫色粉末。ESI/MS(m/e)：883[M-H]^-；Mp 178-180℃；¹HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ＝11.65(s，1H)，10.98(s，1H)，8.93(s，1H)，8.39(m，4H)，7.58(m，2H)，7.25(m，2H)，6.99(m，4H)，6.80(m，1H)，6.59(s，1H)，6.40(m，1H)，6.20(s，1H)，4.49(m，2H)，4.24(m，2H)，4.12(s，1H)，3.72(s，3H)，3.38(m，8H)， 1.59(m，2H)，1.4/(m，4H)，0.80(m，12H)。

實施例17制備2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Val-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(6e)

采用實施例13的方法從300mg(0.28mmol)2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Val-OBzl-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5e)得到230mg(92％)標題化合物，為紫色粉末。ESI/MS(m/e)：907[M-H]^-；Mp 168-169℃；¹HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ＝11.58(s，1H)，11.16(s，1H)，8.91(s，1H)，8.43(m，2H)，8.13(m，2H)，7.55(m，2H)，7.33(m，1H)，7.21(m，1H)，6.98(m，4H)，6.78(m，1H)，6.59(s，1H)，6.38(m，1H)，6.19(s，1H)，4.43(m，2H)，4.19(m，2H)，3.72(s，3H)，3.38(m，4H)，2.01(m，2H)，1.61(m，2H)，1.44(m，4H)，0.81(m，24H)。

實施例18制備2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Thr-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(6f)

采用實施例13的方法從300mg(0.28mmol)2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Thr-OBzl-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5f)得到225mg(90％)標題化合物，為紫色粉末。ESI/MS(m/e)：911[M-H]^-；Mp 175-178℃；¹HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ＝11.59(s，1H)，11.06(s，1H)，8.93(s，1H)，8.45(m，2H)，8.03(m，2H)，7.56(m，2H)，7.30(m，1H)，7.21(m，1H)，6.98(m，4H)，6.79(m，1H)，6.59(s，1H)，6.40(m，1H)，6.19(s，1H)，4.50(m，2H)，4.16(m，4H)，3.72(s，3H)，3.38(m，4H)，1.62(m，2H)，1.48(m，4H)，1.15(m，6H)，0.81(m，12H)。

實施例19制備2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Trp-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(6g)

采用實施例13的方法從300mg(0.24mmol)2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Trp-OBzl-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5g)得到230mg(90％)標題化合物，為紫色粉末。ESI/MS(m/e)：1081[M-H]^-；Mp 170-172℃；¹HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ＝11.55(s，1H)，10.99(s，1H)，10.79(s，1H)，8.92(s，1H)，8.35(m，4H)，7.59(m，1H)，7.52(m，3H)，7.30(m，3H)，7.15(m，3H)，6.96(m，8H)，6.77(m，1H)，6.59(s，1H)，6.41(m，1H)，6.19(s，1H)，4.48(m，4H)，3.71(s，3H)，3.42(m，4H)，3.10(m，4H)，1.11(m，3H)，1.41(m，3H)，0.79(m，12H)。

實施例20制備2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Ile-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(6h)

采用實施例13的方法從300mg(0.27mmol)2，2’-雙(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-Ile-OBzl-2-基)-(3-羥基-4-甲氧基苯基)-甲烷(5h)得到210mg(83％)標題化合物，為紫色粉末。ESI/MS(m/e)：935[M-H]^-；Mp 170-171℃；¹HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ＝12.51(s，1H)，11.61(s，1H)，11.03(s，1H)，8.90(s，1H)，8.41(m，2H)，8.17(m，2H)，7.56(m，2H)，7.31(m，1H)，7.21(m，1H)，6.96(m，4H)， 6.79(m，1H)，6.60(s，1H)，6.49(m，1H)，6.19(s，1H)，4.48(m，2H)，4.18(m，2H)，3.72(s，3H)，3.38(m，4H)，1.74(m，2H)，1.62(m，2H)，1.45(m，6H)，1.15(m，2H)，0.82(m，24H)。

實施例21評價6a-h的抗血栓活性

1)聚乙烯管的組裝：將聚乙烯管拉成一端為斜口的細管，定長為10.0cm，分別為右經(jīng)靜脈(管徑較粗)及左頸動脈(管徑較細)插管；中段聚乙烯管定長為8.0cm，血栓線壓在頸動脈插管方向，插管前需在管中充滿肝素。

2)SD大鼠以0.1nmol/kg劑量6a-h灌胃，30分鐘后腹腔注射20％的烏拉坦進行麻醉。仰臥位將大鼠固定于鼠板上，剪開頸部皮膚，分離右頸總動脈及左頸靜脈，血管下壓線，結(jié)扎遠心端，靜脈靠遠心端處剪一小口，進行靜脈端插管，注射肝素，系線固定，再用動脈夾夾住動脈近心端，靠近遠心端方向剪一小口，進行動脈端結(jié)扎，系線固定后松開動脈夾，建立體外循環(huán)旁路。循環(huán)15分鐘后先剪斷靜脈端觀察血液循環(huán)是否正常，若正常從動脈端取出血栓線，在紙上沾干浮血后稱量并記錄其濕重，大鼠斷頸處死。每組大鼠10只，最后進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計并評價化合物活性。以栓重表示化合物的活性。表1的數(shù)據(jù)表明，6a-h具有優(yōu)秀的抗血栓活性，有效劑量低達0.1nmol/kg，比發(fā)明人先前公開的雙吲哚化合物的有效劑量低10倍，獲得了顯著的技術效果。在這些化合物中，6a-c，e-g的有效劑量是阿司匹林的1/1670000。

表1 化合物6a-h對SD大鼠栓重的影響

n＝10；a)與生理鹽水比p＜0.01；b)與生理鹽水及化合物4比p＜0.01，與阿司匹林比p＞0.05；c)與生理鹽水比p＜0.01，與化合物4比p＜0.05，與阿司匹林比p＞0.05。