1.一種多孢菌的制備方法,其特征在于包括以下步驟:
1)將瓊脂、葡萄糖、酵母粉、牛肉膏、蛋白胨、MgSO4?7H2O滅菌20min;
2)將葡萄糖、MgSO4?7H2O、N-Z-AmineA、牛肉膏、酵母粉、滅菌20min。
3)將葡萄糖、玉米漿、MgSO4?7H2O、棉籽蛋白、蛋白胨、麥芽糖、CaCO3滅菌20min;
4)使用三角瓶,培養(yǎng)2天作為發(fā)酵所用的種子;
5)發(fā)酵培養(yǎng)使用三角瓶,每瓶裝發(fā)酵培養(yǎng)基接種子培養(yǎng)液,培養(yǎng)至對(duì)數(shù)期。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種多孢菌的制備方法,其特征在于所述瓊脂,2g/L;葡萄糖,10g/L;酵母粉,3g/L;牛肉膏,1g/L;蛋白胨10g/L;MgSO4?7H2O,2g/L;N-Z-AmineA,30g/L;牛肉膏,2g/L;玉米漿,15g/L;棉籽蛋白,24g/L;;麥芽糖,2g/L;CaCO3,5g/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述一種多孢菌的制備方法,其特征在于所述使用250mL三角瓶,每瓶裝液30mL,置于30℃,200rpm下培養(yǎng)2天作為發(fā)酵所用的種子;
發(fā)酵培養(yǎng)使用250mL三角瓶,每瓶裝發(fā)酵培養(yǎng)基30mL,接1mL種子培養(yǎng)液,置于30℃75條件下,220rpm培養(yǎng)至對(duì)數(shù)期。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述一種多孢菌的制備方法,其特征在于還包括以下步驟:
6)取10mL發(fā)酵液,用0.45μm微濾膜進(jìn)行過濾,并用預(yù)冷至4℃的蒸餾水洗滌兩次,抽干得到菌體,于液氮中保存?zhèn)溆茫?/p>
7)冷甲醇滅活刺糖多孢菌培養(yǎng)72h,將2mL發(fā)酵液用注射器噴入8mL預(yù)冷至-80℃的冷甲醇中,5000轉(zhuǎn)離心2min,移除上清液,保存菌體于液氮中備用。