本發(fā)明涉及藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮(D4A)的鹽形式，以及所述鹽在制備與雄性激素功能有關(guān)的適應(yīng)癥的藥物中的用途。
背景技術(shù)：
：前列腺癌是世界范圍內(nèi)最普遍的惡性致死性腫瘤，并且隨年齡增長發(fā)病率升高。當(dāng)前的人口老齡化趨勢導(dǎo)致前列腺癌患者迅速增加，除肺癌外，前列腺癌為男性癌癥患者中的最常見形式。已經(jīng)證明，雄性激素在前列腺癌的發(fā)生，增長和擴散中起著重要作用。雄性激素中重要的有睪酮、雄酮、雄二酮和脫氫異雄酮。睪酮由睪丸的間質(zhì)細(xì)胞分泌，是體內(nèi)最重要的雄性激素。雄酮、雄二酮和脫氫異雄酮是睪酮的代謝產(chǎn)物。同時，腎上腺皮質(zhì)也能分泌一種雄性激素，即腎上腺雄酮。這些激素都可刺激前列腺癌的生長。目前治療前列腺癌的首選是通過藥物或手術(shù)抑制睪丸的雄性激素產(chǎn)生，但是，這些方法不能阻斷身體其他部位產(chǎn)生雄性激素。CYP17(17α-羥化酶/C17,20-裂解酶)(CYP17A1)是一種細(xì)胞色素P450酶，位于睪丸和腎上腺及其他如前列腺腫瘤組織中。它能催化兩種獨立調(diào)節(jié)類固醇17α-羥化酶和C17,20-裂解酶的酶活性，這兩種酶是雄性激素生物合成途徑中的關(guān)鍵酶，從而調(diào)節(jié)睪丸和身體其他部位的雄激素的合成。如果發(fā)生的腫瘤僅限于前列腺，病人可以通過手術(shù)或放療進行切除。但在患前列腺腫瘤的男子中，大約15％的人癌癥將會擴散。對于這些病人，目前并沒有治愈的辦法。CYP17酶抑制劑不僅能夠抑制睪丸中雄性激素的生物合成，還能抑制腎上腺及其他如前列腺腫瘤組織中雄性激素的生物合成，相比目前臨床上常用的去勢療法只能抑制睪丸中雄性激素的生物合成，具有更好的治療作用。此外，去勢抵抗性前列腺癌是前列腺癌治療的難點和重點，而腫瘤細(xì)胞獲得了將脫氫異維酮代謝成5α-二氫睪酮(DHT)的能力，是去勢性前列腺癌發(fā)生的主要原因。DHT的合成需要酶的參與，包括3β-羥化類固醇脫氫酶(3βHSD)、類固醇-5α-還原酶(SRD5A)、17β-羥化類固醇脫氫酶(17βHSD)。前列腺癌治療藥物阿比特龍，是一種CYP17(17α-羥化酶/C17,20-裂解酶)抑制劑，可以降低體內(nèi)雄性激素，如脫氫異維酮的含量，但對DHT合成中所用到酶的影響較小。研究發(fā)現(xiàn)，阿比特龍的代謝產(chǎn)物17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮(Ⅰ)，簡稱D4A，不僅可以抑制CYP17A1酶的活性，對酶3βHSD、SRD5A也有抑制作用。與阿比特龍相比，D4A對酶3βHSD的抑制作用是阿比特龍的10倍，還可以同時抑制人體內(nèi)3βHSD的2種同工酶，3βHSD1和3βHSD2。此外，D4A對CYP17A1的抑制作用與阿比特龍相似，在1nMD4A和1nM阿比特龍的作用下，孕烯醇酮轉(zhuǎn)化為脫氫異維酮的比例分別是4.2％和2.6％。值得注意的是，10μM的D4A幾乎完全抑制了酶SRD5A的活性，然而即使100μM阿比特龍對酶SRD5A也無抑制作用。除了對雄性激素的合成酶具有抑制作用外，D4A對雄激素受體也表現(xiàn)出較高的親和力。D4A對變異型(IC50＝5.3nM)和野生型(IC50＝7.9nM)雄激素受體的抑制作用遠(yuǎn)高于阿比特龍(IC50＝418nM，和>500nM)，稍高于目前最有效的非甾體類雄激素受體拮抗劑恩雜魯胺(IC50＝24nM，和23nM)。研究者在異種移植腫瘤VCaP和LNCaP細(xì)胞系中，測試了D4A的抗腫瘤活性，結(jié)果顯示，D4A的抗腫瘤活性強于阿比特龍。綜合上述抗癌性質(zhì)，D4A可以更有效的用于治療人前列腺癌，以及乳腺癌、卵巢癌等其它泌尿生殖系統(tǒng)癌癥，或其它與雄激素相關(guān)的疾病。但是，除了化合物的效能外，口服生物利用度也是開發(fā)分子治療劑時需要考慮的重要因素。經(jīng)初步研究顯示，D4A的游離堿具有較差的水溶性(2μg/ml)，同時在動物體內(nèi)，具有較低的生物利用度。堿性藥學(xué)活性化合物一般配制成藥物制劑，如酸加成鹽形式。雖然鹽形式的制劑可以改善堿性藥學(xué)活性化合物的物理活性藥學(xué)性質(zhì)是已知的，但是在真正制備和表征鹽形式前預(yù)測哪種鹽形式可能具有用于特定目的的優(yōu)點是不可能的。本發(fā)明的其它背景見文獻“conversionofabirateronetoD4Adrivesanti-tumouractivityinprostatecancer”，“pharmacologyofnovelsteroidalinhibitiorsofcytochromeP45017α(17α-Hydroxylase/C17-20Lyase)”等。本文提到的所有文獻都通過參考完整地結(jié)合于此。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供了17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的鹽形式；本發(fā)明的另一目的在于提供了17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的鹽的制備方法；本發(fā)明的又一目的在于提供 17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的鹽在制備與雄性激素功能有關(guān)的適應(yīng)癥的藥物中的用途。本發(fā)明的目的是由以下技術(shù)方案達到的，本發(fā)明涉及17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的酸加成鹽，其選自鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硝酸鹽或馬來酸鹽；優(yōu)選自鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硝酸鹽或馬來酸鹽。本發(fā)明還提供了制備17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的酸加成鹽的方法，所述方法包括：在有機溶劑中，在加熱或不加熱時將D4A或D4A溶液與有機酸或無機酸溶液組合。通過攪拌析出、蒸發(fā)溶劑或加入反溶劑的方式分離得到鹽型。其中有機溶劑選自低級醇或丙酮。本發(fā)明還提供了17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的酸加成鹽在制備與雄性激素功能有關(guān)的適應(yīng)癥的藥物中的用途。所述適應(yīng)癥可選自前列腺癌。本發(fā)明還提供了17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的酸加成鹽在調(diào)節(jié)選擇性細(xì)胞色素氧化酶CYP17A1、3βHSD、SRD5A、雄激素受體活性方面的用途。本發(fā)明還提供了含有可藥用載體和17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的酸加成鹽的藥物組合物。所述的酸加成鹽選自鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硝酸鹽或馬來酸鹽；特別是鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硝酸鹽或馬來酸鹽?？伤幱幂d體包括崩解劑、粘合劑、稀釋劑、表面活性劑、潤滑劑、防腐劑、抗氧化劑、芳香劑、著色劑等。本發(fā)明還提供了藥物組合物在制備與雄性激素功能有關(guān)的適應(yīng)癥的藥物中的用途。所述適應(yīng)癥可選自前列腺癌。本發(fā)明還提供了藥物組合物在調(diào)節(jié)選擇性細(xì)胞色素氧化酶CYP17A1、3βHSD、SRD5A、雄激素受體活性方面的用途。具體實施方式本發(fā)明公開了一種化合物及其制備方法、該化合物的中間體及其制備方法，及該化合物的應(yīng)用，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借鑒本文內(nèi)容，適當(dāng)改進工藝參數(shù)實現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明的方法及應(yīng)用已經(jīng)通過較佳實施例進行了描述，相關(guān)人員明顯能在不脫離本
發(fā)明內(nèi)容、精神和范圍內(nèi)對本文所述的方法和應(yīng)用進行改動或適當(dāng)變更與組合，來實現(xiàn)和應(yīng)用本發(fā)明技術(shù)。下面結(jié)合實施例，進一步闡述本發(fā)明：實施例117-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的鹽酸鹽17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮(150mg，0.43mmol)分散于丙酮中，隨后加入0.036ml鹽酸(11.94mol/l，0.432mmol)，室溫攪拌過夜，過濾和干燥后得白色固體154.1mg(收率：93％)。1H-NMR(400MHz,DMSO)δ:8.85(s,1H),8.74(d,J＝5.3Hz,1H),8.47(d,J＝8.2Hz,1H),7.92(dd,J＝8.1,5.6Hz,1H),6.47(s,1H),5.66(s,1H),2.49-2.35(m,2H),2.35-2.25(m,2H),2.14(ddd,J＝19.5,12.0,3.2Hz,3H),1.98(ddd,J＝13.1,4.6,3.0Hz,1H),1.84(dt,J＝11.1,6.6Hz,2H),1.71-1.48(m,4H),1.42(td,J＝12.1,4.6Hz,1H),1.21(s,3H),1.15-0.95(m,5H).實施例217-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的氫溴酸鹽17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮(150mg，0.43mmol)分散于丙酮中，隨后加入0.05ml氫溴酸(8.6mol/l，0.43mmol)，室溫攪拌過夜，過濾和干燥后得棕色固體170.1mg(收率：92％)。1H-NMR(400MHz,DMSO)δ:8.87(s,1H),8.75(d,J＝5.3Hz,1H),8.48(d,J＝7.4Hz,1H),8.07-7.86(m,1H),6.47(s,1H),5.67(s,1H),2.44(ddd,J＝20.2,12.5,4.3Hz,2H),2.36-2.24(m,2H),2.23-2.06(m,3H),2.03-1.94(m,1H),1.84(dt,J＝11.1,6.6Hz,2H),1.69-1.49(m,4H),1.42(td,J＝12.1,4.6Hz,1H),1.21(s,3H),1.16-0.89(m,5H).實施例317-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的氫碘酸鹽17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮(150mg，0.43mmol)分散于丙酮溶液中，隨后加入0.08ml氫碘酸(5.4mol/l，0.432mmol)，室溫攪拌過夜，過濾和干燥后得棕色固體192.9mg(收率：94％)。1H-NMR(400MHz,DMSO)δ:8.85(s,1H),8.72(s,1H),8.46(s,1H),7.91(s,1H),6.45(s,1H),5.67(s,1H),2.49-2.37(m,2H),2.36-2.24(m,2H),2.14(ddd,J＝16.6,9.7,4.3Hz,3H),2.04-1.93(m,1H),1.84(dt,J＝11.1,6.6Hz,2H),1.72-1.49(m,4H),1.42(td,J＝12.0,4.5Hz,1H),1.21(s,3H),1.17-0.90(m,5H).實施例417-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的硝酸鹽17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮(150mg，0.43mmol)分散于乙醇中，隨后加入0.03ml 硝酸(14.36mol/l，0.432mmol)，室溫攪拌過夜，過濾和干燥后得白色固體161.2mg(收率：91％)。1H-NMR(400MHz,DMSO)δ:8.87(d,J＝1.8Hz,1H),8.74(d,J＝4.7Hz,1H),8.54-8.40(m,1H),7.93(dd,J＝8.2,5.6Hz,1H),6.46(dd,J＝3.0,1.7Hz,1H),5.66(s,1H),2.49-2.37(m,2H),2.36-2.24(m,2H),2.22-2.04(m,3H),1.98(ddd,J＝13.1,4.7,3.0Hz,1H),1.93-1.78(m,2H),1.71-1.48(m,4H),1.42(td,J＝12.1,4.6Hz,1H),1.21(s,3H),1.15-0.95(m,5H).實施例517-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的馬來酸鹽17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮(50mg，0.14mmol)分散于丙酮中，隨后加入馬來酸(16.7mg，0.14mmol)，室溫攪拌過夜，過濾和干燥后得白色固體59.36mg(收率：89％)。1H-NMR(400MHz,DMSO)δ:8.63(s,1H),8.48(d,J＝3.6Hz,1H),7.85(dd,J＝6.2,1.9Hz,1H),7.42(dd,J＝8.0,4.9Hz,1H),6.63(s,0H),6.25(s,2H),6.20-6.12(m,1H),5.66(s,1H),2.49-2.36(m,2H),2.36-2.11(m,3H),2.11-2.02(m,2H),2.02-1.92(m,1H),1.92-1.77(m,2H),1.70-1.47(m,4H),1.42(dd,J＝12.3,4.6Hz,1H),1.21(s,3H),1.19-0.92(m,5H).實施例6水溶解度將至少10mg的粉末與2ml的水混合，制備濃度大于5mg/ml的混合物。樣品室溫攪拌超過12小時，離心，直至上清液澄清，取上清液作為供試樣品溶液。以在80％乙腈中制備的標(biāo)準(zhǔn)溶液作參比，通過HPLC測定供試樣品溶液。測定結(jié)果，17-(3-吡啶)雄甾-4,6-二烯-3-酮的鹽在室溫下水中的溶解度在以下表1中列出。游離堿在室溫下水中的溶解度是2μg/ml。表1實施例的鹽室溫下水中的溶解度(μg/ml)119302133032543605890以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對于本
技術(shù)領(lǐng)域：
的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護范圍。當(dāng)前第1頁1 2 3