本發(fā)明涉及新化合物的制備方法與應(yīng)用，具體是N-(4-烷基-5-芐基噻唑-2-基)氨基烷酰胺及其作為制備抗癌藥的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：Holla等[EuropeanMedicalChemistry，2003，38：313-318]描述了2-芳氨基-4-(2，4-二氯-5-氟苯基)噻唑的制備與生物活性；中國發(fā)明專利(CN1018445026，CN101781269)描述了5-(4-氯苯甲基)-4-叔丁基噻唑衍生物和4-叔丁基-2-(硝基芐亞氨基)噻唑的制備及其作為制備抗腫瘤藥物的應(yīng)用。中國發(fā)明專利(CN101277692A，2008.10.01公開)描述了5-芐基-4-甲基/三氟甲基-2-芳氨基噻唑的制備。中國發(fā)明專利(CN102070556A，2011.5.25公開；CN102067845A，2011.5.25公開)描述了5-芐基-4-烷基-2-芳氨基噻唑氫溴酸鹽的制備。中國發(fā)明專利(CN102964312A，2013.3.13公開；CN102924400A，2013.2.13公開；CN102936229A；2013.2.20公開)描述了N-(4-叔丁基-5-芐基噻唑-2-基)酰胺的制備及其生物活性。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供N-(4-烷基-5-芐基噻唑-2-基)氨基烷酰胺(I)或其鹽：式中R選自：C1～C2烷基、C3～C4直鏈或C3～C4支鏈烷基；Y1、Y3選自：氫、甲基、乙基、羥基、甲氧基、乙氧基、氟、氯、溴或碘；Y2、Y4選自：氫、甲基、乙基；n選自：1、2、3、4、5、6、7、8或9；鹽選自：鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、甲磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、蘋果酸鹽、乳酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽或富馬酸鹽。本發(fā)明的目的在于提供的N-(4-烷基-5-芐基噻唑-2-基)氨基烷酰胺選自下列化合物：本發(fā)明的目的在于提供N-(4-烷基-5-芐基噻唑-2-基)氨基烷酰胺的制備方法；其特征在于它制備反應(yīng)如下：式中R選自：C1～C2烷基、C3～C4直鏈或C3～C4支鏈烷基；Y1、Y3選自：氫、甲基、乙基、羥基、甲氧基、乙氧基、氟、氯、溴或碘；Y2、Y4選自：氫、甲基、乙基；n選自：1、2、3、4、5、6、7、8或9；X選自：氟、氯、溴或碘；X1選自：氯、溴或碘。本發(fā)明的目的在于提供N-(4-烷基-5-芐基噻唑-2-基)氨基烷酰胺及其鹽在制備抗癌藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的目的在于提供N-(4-烷基-5-芐基噻唑-2-基)鹵代烷酰胺(Ⅱ)或其鹽：式中R選自：C1～C2烷基、C3～C4直鏈或C3～C4支鏈烷基；Y1、Y3選自：氫、甲基、乙基、羥基、甲氧基、乙氧基、氟、氯、溴或碘；Y2、Y4選自：氫、甲基、乙基；n選自：5、6、7、8或9；X選自氟、氯、溴或碘；鹽選自：鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、甲磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、蘋果酸鹽、乳酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽或富馬酸鹽。本發(fā)明的目的在于提供N-(4-烷基-5-芐基噻唑-2-基)鹵代烷酰胺(Ⅱ)或其鹽在制備抗乳腺癌藥物中的應(yīng)用：式中R選自：C1～C2烷基、C3～C4直鏈或C3～C4支鏈烷基；Y1、Y3選自：氫、甲基、乙基、羥基、甲氧基、乙氧基、氟、氯、溴或碘；Y2、Y4選自：氫、甲基、乙基；n選自：1、2、3、4、5、6、7、8或9；X選自氟、氯、溴或碘；鹽選自：鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、甲磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、蘋果酸鹽、乳酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽或富馬酸鹽。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有如下優(yōu)點：本發(fā)明首次制備N-(4-烷基-5-芐基噻唑-2-基)氨基烷酰胺及其鹽，并發(fā)現(xiàn)N-(4-烷基-5-芐基噻唑-2-基)氨基烷酰胺或其鹽具有抗癌活性。具體實施方式以下實施例旨在說明本發(fā)明而不是對本發(fā)明的進(jìn)一步限定。實施例1N-(4-叔丁基-5-(4-氯芐基)噻唑-2-基)-4-氯丁酰胺的制備(1)氯丁酰氯的制備1.5g無水氯化鋅溶于20mL二氯亞砜，攪拌，滴加19mL丁內(nèi)酯，60℃反應(yīng)5.0h，旋蒸過量的二氯亞砜，得到橙黃色液體4-氯丁酰氯，放入冰箱保存?zhèn)溆谩?2)N-(4-叔丁基-5-(4-氯芐基)噻唑-2-基)-4-氯丁酰胺的制備1mmol4-叔丁基-5-(4-氯芐基)噻唑-2-胺和20mL二氯甲烷，冰浴，攪拌，加入0.5mL三乙胺，滴加溶于2mL二氯甲烷的1.2mmol4-氯丁酰氯，TLC監(jiān)測反應(yīng)，反應(yīng)1.0h。旋蒸溶劑，干法上樣，柱層析分離得黃色固體N-(4-叔丁基-5-(4-氯芐基)噻唑-2-基)-4-氯丁酰胺，收率72.5％，m.p.90～92℃。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ：8.93(s，1H，CONH)，7.26(d，J＝8.0Hz，1H，C6H4)，7.11(d，J＝8.0Hz，1H，C6H4)，4.26(s，2H，CH2)，3.63(t，2H，ClCH2)，2.61(t，2H，COCH2)，2.21～2.15(m，2H，CH2)，1.35(s，9H，3×CH3)。實施例2N-(4-叔丁基-5-(4-氯芐基)噻唑-2-基)-5-氯戊酰胺的制備1mmol4-叔丁基-5-(4-氯芐基)噻唑-2-胺和20mL二氯甲烷，冰浴，攪拌，加入0.5mL三乙胺，滴加溶于2mL二氯甲烷的1.2mmol5-氯戊酰氯，TLC監(jiān)測反應(yīng)，反應(yīng)2.0h。旋蒸溶劑，干法上樣，柱層析分離得黃色固體N-(4-叔丁基-5-(4-氯芐基)噻唑-2-基)-5-氯戊酰胺，收率90.4％，m.p.143～144℃。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ：8.90(s，1H，CONH)，7.26(d，2H，J＝8.0Hz，C6H4)，7.11(d，2H，J＝8.0Hz，C6H4)，4.19(s，2H，CH2)，3.55(t，2H，ClCH2)，2.44(t，2H，COCH2)，1.90～1.80(m，4H，CH2CH2)，1.34(s，9H，3×CH3)。實施例3N-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-4-氯丁酰胺的制備1mmol4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-胺和20mL二氯甲烷，冰浴，攪拌，加入0.5mL三乙胺，滴加溶于2mL二氯甲烷的1.2mmol酰氯，TLC監(jiān)測反應(yīng)，反應(yīng)1.0h。旋蒸溶劑，干法上樣，柱層析分離，得深黃色固體N-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-4-氯丁酰胺，收率68.3％，m.p.123～124℃。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ：9.10(s，1H，CONH)，7.39(d，J＝2.0Hz，1H，C6H33-H)，7.18(dd，J＝8.4Hz，J＝2.0Hz，1H，C6H35-H)，7.03(d，J＝8.4Hz，1H，C6H36-H)，4.26(s，2H，CH2)，3.63(t，2H，ClCH2)，2.62(t，2H，COCH2)，2.18(m，2H，CH2)，1.34(s，9H，3×CH3)。實施例4N-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-5-氯戊酰胺的制備按照實施例3的制備方法，反應(yīng)2.0h，得黃色固體N-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-5-氯戊酰胺，收率97.8％，m.p.108～110℃。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ：8.82(s，1H，CONH)，7.39(d，1H，J＝2.0Hz，C6H33-H)，7.17(dd，1H，J＝8.0Hz，J＝2.0Hz，C6H35-H)，7.03(d，1H，J＝8.0Hz，C6H36-H)，4.25(s，2H，CH2)，3.56(t，2H，ClCH2)，2.44(t，2H，COCH2)，1.90～1.82(m，4H，CH2CH2)，1.33(s，9H，3×CH3)。實施例5N-(4-叔丁基-5-(4-甲氧基芐基)噻唑-2-基)-4-氯丁酰胺的制備1mmol4-叔丁基-5-(4-甲氧基芐基)噻唑-2-胺和20mL二氯甲烷，冰浴，攪拌，加入0.5mL三乙胺，滴加溶于2mL二氯甲烷的1.2mmol酰氯，TLC監(jiān)測反應(yīng)，反應(yīng)1.5h。旋蒸溶劑，干法上樣，柱層析分離得黃色固體N-(4-叔丁基-5-(4-甲氧基芐基)噻唑-2-基)-4-氯丁酰胺，收率67.6％，m.p.79～80℃。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ：7.10(d，2H，J＝8.4Hz，C6H4)，6.83(d，2H，J＝8.0Hz，C6H4)，4.16(s，2H，CH2)，3.78(s，3H，CH3)，3.60(t，2H，ClCH2)，2.60(t，2H，COCH2)，2.16(m，2H，CH2)，1.37(s，9H，3×CH3)。實施例6N-(4-叔丁基-5-(4-甲氧基芐基)噻唑-2-基)-5-氯戊酰胺的制備按照實施例5的制備方法，反應(yīng)2.0h，得黃色固體N-(4-叔丁基-5-(4-甲氧基芐基)噻唑-2-基)-5-氯戊酰胺，收率86.5％，m.p.77～78℃。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ：10.01(s，1H，CONH)，7.07(s，2H，C6H4)，6.83(s，2H，C6H4)，4.13(s，2H，CH2)，3.77(s，3H，OCH3)，3.50(s，2H，CH2Cl)，2.53(s，2H，COCH2)，1.82(s，4H，CH2CH2)，1.34(s，9H，3×CH3)。實施例7N-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-4-氨基丁酰胺的制備(1)鄰苯二鉀酰亞胺鉀鹽的制備3.0g(20.4mmol)鄰苯二甲酰亞胺和30mL乙醇，攪拌，滴加溶于10mL乙醇中的30.6mmolKOH，滴完，回流，TLC監(jiān)測，反應(yīng)2.0h，冷卻，抽濾，干燥，得白色固體鄰苯二鉀酰亞胺鉀鹽3.43g，收率91.5％。(2)N-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-4-(1，3-二氧代吲哚啉-2-基)丁酰胺的制備1mmolN-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-5-氯丁酰胺與1.2mmol鄰苯二甲酰胺鉀鹽溶于10mLDMF，攪拌，回流，TLC監(jiān)測，反應(yīng)3.5h。反應(yīng)液冷卻，倒入20mL水中，2×20mL乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干燥，靜置過夜。抽濾，旋蒸除去溶劑，得黃色油狀液體，冰箱中靜置，析出黃色晶體N-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-4-(1，3-二氧代吲哚啉-2-基)丁酰胺，干燥得0.22g，收率85.3％，m.p.95～96℃。(3)N-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-4-氨基丁酰胺的制備1.89mmolN-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-4-(1，3-二氧代吲哚啉-2-基)丁酰胺和20mL乙醇，攪拌，升溫至50℃，滴加溶于5mL乙醇的0.66g80％水合肼，滴完，升溫至回流，TLC監(jiān)測，反應(yīng)9.0h。冷卻，析出較多黃色固體，過濾，少量乙醇多次洗滌固體，減壓除去濾液中的乙醇，冷卻，加入10mL石油醚與乙酸乙酯混合溶劑，加入6mL10％稀鹽酸，攪拌溶解，25℃攪拌0.5h，用石油醚與乙酸乙酯的混合溶劑溶解，洗滌水層，分液，水層中加入10mL混合溶劑，NaOH調(diào)pH12～13，分層，用混合溶劑萃取水相，合并有機相并用無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓回收溶劑，干燥，得白色固體N-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-4-氨基丁酰胺0.35g，收率46.7％，m.p.118～119℃。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ：7.38(d，1H，J＝2.0Hz，C6H33-H)，7.18(dd，1H，J＝8.4Hz，J＝2.0Hz，C6H35-H)，7.08(d，1H，J＝8.4Hz，C6H36-H)，5.43(s，2H，NH2)，4.14(s，2H，CH2)，3.22(s，2H，NCH2)，2.28(t，2H，J＝6.8Hz，COCH2)，1.94(m，2H，CH2)，1.39(s，9H，3×CH3)；1HNMR(400MHz，CDCl3+D2O)δ：7.38(d，1H，J＝2.0Hz，C6H33-H)，7.18(dd，1H，J＝8.4Hz，J＝2.0Hz，C6H35-H)，7.08(d，1H，J＝8.4Hz，C6H36-H)，4.14(s，2H，CH2)，3.22(s，2H，NCH2)，2.28(t，2H，J＝6.8Hz，COCH2)，1.94(m，2H，CH2)，1.29(s，9H，3×CH3)。實施例8N-(4-叔丁基-5-(4-甲氧基芐基)噻唑-2-基)-4-氨基丁酰胺的制備(1)N-(4-叔丁基-5-(4-甲氧基芐基)噻唑-2-基)-4-(1，3-二氧代吲哚啉-2-基)丁酰胺的制備按照實施例7的方法制備，反應(yīng)2.0h，得黃色固體N-(4-叔丁基-5-(4-甲氧基芐基)噻唑-2-基)-4-(1，3-二氧代吲哚啉-2-基)丁酰胺，收率83.8％，m.p.89～90℃。(2)N-(4-叔丁基-5-(4-甲氧基芐基)噻唑-2-基)-4-氨基丁酰胺的制備按照實施例5的制備方法，反應(yīng)9.5h，得黃色固體N-(4-叔丁基-5-(4-甲氧基芐基)噻唑-2-基)-4-氨基丁酰胺，收率42.3％，m.p.135～136℃。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ：7.11(d，2H，J＝8.4Hz，C6H4)，6.83(d，2H，J＝8.4Hz，C6H4)，4.07(s，2H，CH2)，3.78(s，3H，CH3)，3.16(s，2H，NCH2)，2.25(t，2H，J＝6.8Hz，COCH2)，1.94(m，2H，CH2)，1.33(s，9H，3×CH3)；1HNMR(400MHz，CDCl3+D2O)δ：7.10(d，2H，J＝8.4Hz，C6H4)，6.83(d，2H，J＝8.4Hz，C6H4)，4.06(s，2H，CH2)，3.78(s，3H，CH3)，3.15(s，2H，NCH2)，2.25(t，2H，J＝6.8Hz，COCH2)，1.92(m，2H，CH2)，1.33(s，9H，3×CH3)。實施例9N-(4-叔丁基-5-(4-甲氧基芐基)噻唑-2-基)-5-氨基戊酰胺的制備(1)N-(4-叔丁基-5-(4-甲氧基芐基)噻唑-2-基)-4-(1，3-二氧代吲哚啉-2-基)戊酰胺的制備按照實施例7的方法制備，反應(yīng)3.0h，得黃色固體N-(4-叔丁基-5-(4-甲氧基芐基)噻唑-2-基)-4-(1，3-二氧代吲哚啉-2-基)戊酰胺，收率88.5％，m.p.82～83℃。(2)N-(4-叔丁基-5-(4-甲氧基芐基)噻唑-2-基)-5-氨基戊酰胺的制備按照實施例5的制備方法，反應(yīng)11.0h，得黃色固體N-(4-叔丁基-5-(4-甲氧基芐基)噻唑-2-基)-5-氨基戊酰胺，收率43.8％，m.p.℃。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ：7.11(d，2H，J＝8.4Hz，C6H4)，6.83(d，2H，J＝8.4Hz，C6H4)，5.41(s，2H，NH2)，4.08(s，2H，CH2)，3.78(s，3H，OCH3)，3.11(t，2H，J＝6.0Hz，NCH2)，2.17(t，2H，J＝6.8Hz，COCH2)，1.73～1.58(m，4H，CH2CH2)，1.34(s，9H，3×CH3)；1HNMR(400MHz,CDCl3+D2O)δ：7.11(d,2H,J＝8.5Hz,C6H4),6.83(d,2H,J＝8.6Hz,C6H4),4.07(s,2H，CH2),3.79(s,3H，OCH3),3.10(t，2H，J＝6.6Hz，NCH2)，2.17(t，2H，J＝7.2Hz，COCH2)，1.70(m,2H，CH2)，1.61(m，2H，CH2),1.34(s，9H，3×CH3)。實施例10N-(4-叔丁基-5-(4-氯芐基)噻唑-2-基)-5-氨基戊酰胺的制備(1)N-(4-叔丁基-5-(4-氯基芐基)噻唑-2-基)-4-(1，3-二氧代吲哚啉-2-基)戊酰胺的制備按照實施例7的方法制備，反應(yīng)2.5h，得黃色固體N-(4-叔丁基-5-(4-氯基芐基)噻唑-2-基)-4-(1，3-二氧代吲哚啉-2-基)戊酰胺，收率88.2％，m.p.78～79℃。(2)N-(4-叔丁基-5-(4-氯基芐基)噻唑-2-基)-5-氨基戊酰胺的制備按照實施例7的制備方法，反應(yīng)11.5h，得黃色固體N-(4-叔丁基-5-(4-氯基芐基)噻唑-2-基)-5-氨基戊酰胺，收率45.5％，m.p.86～88℃。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ：7.26(d，2H，J＝8.0Hz，C6H4)，7.12(d，2H，J＝8.0Hz，C6H4)，5.50(s，2H，NH2)，4.10(s，2H，CH2)，3.55(t，2H，J＝6.0Hz，NCH2)，2.18(t，2H，J＝6.8Hz，COCH2)，1.73～1.60(m，4H，CH2CH2)，1.32(s，9H，3×CH3)；1HNMR(400MHz,CDCl3+D2O)δ：7.26(d，2H，J＝8.4Hz，C6H4),7.12(d，2H，J＝8.4Hz，C6H4),4.10(s，2H，CH2)，3.11(s,2H，NCH2)，2.18(t，2H，J＝7.2Hz,COCH2)，1.71(m，2H，CH2),1.62(m，2H，CH2)，1.32(s，9H，3×CH3)。實施例11N-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-5-氨基戊酰胺的制備(1)N-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-4-(1，3-二氧代吲哚啉-2-基)戊酰胺的制備按照實施例7的方法制備，反應(yīng)2.0h，得黃色固體N-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-4-(1，3-二氧代吲哚啉-2-基)戊酰胺，收率78.8％，m.p.89～90℃。(2)N-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-5-氨基戊酰胺的制備按照實施例7的制備方法，反應(yīng)7.0h，得黃色固體N-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-5-氨基戊酰胺，收率46.7％，m.p.115～117℃。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ：7.38(s，1H，C6H33-H)，7.18(d，1H，J＝8.4Hz，C6H35-H)，7.08(d，1H，J＝8.4Hz，C6H36-H)，5.40(s，2H，NH2)，4.15(s，2H，CH2)，3.15(t，2H，J＝6.0Hz，NCH2)，2.19(t，2H，J＝6.8Hz，COCH2)，1.73～1.64(m，4H，CH2CH2)，1.30(s，9H，3×CH3)；1HNMR(400MHz,CDCl3+D2O)δ：7.38(d，1H，J＝2.0Hz，C6H33-H)，7.17(dd，1H，J＝8.4Hz，2.0Hz，C6H35-H)，7.10(d，1H，J＝8.4Hz，C6H36-H)，4.15(s，2H，CH2),3.14(t，2H，NCH2)，2.20(t，2H，COCH2)，1.73(m，2H，CH2),1.65(m，2H，CH2)，1.30(s，9H，3×CH3)。實施例12N-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-4-氨基丁酰胺的制備按照實施例7的方法制備。實施例13N-(4-烷基-5-芐基噻唑-2-基)氨基烷酰胺及其鹽的抗腫瘤活性1.抗腫瘤活性原理MTT法生物活性測試又稱MTT比色法，是一種檢測細(xì)胞存活和生長的方法。MTT分析法以活細(xì)胞代謝物還原劑噻唑藍(lán)[3-(4，5-二甲基-2-噻唑)-2，5-二苯基溴化四氮唑；3-(4，5-dimethylthiazol-2-yl)-2，5-diphenyltetrazoliumbromide，MTT]為基礎(chǔ)。MTT是一種能接受氫原子的染料?；罴?xì)胞線粒體中與NADP相關(guān)的脫氫酶在細(xì)胞內(nèi)可將黃色的MTT轉(zhuǎn)化成不溶性的藍(lán)紫色的甲瓚(formazon)，而死細(xì)胞則無此功能。用DMSO溶解formazon后，在一定波長下用酶標(biāo)儀測定光密度值，既可定量測出細(xì)胞的存活率。根據(jù)光密度值的變化觀察樣品對腫瘤細(xì)胞的抑制作用。2.抗腫瘤活性實驗試樣：N-(4-烷基-5-芐基噻唑-2-基)氨基烷酰胺和N-(4-烷基-5-芐基噻唑-2-基)鹵代烷酰胺及其鹽。式中R選自：C1～C2烷基、C3～C4直鏈或C3～C4支鏈烷基；Y1、Y3選自：氫、甲基、乙基、羥基、甲氧基、乙氧基、氟、氯、溴或碘；Y2、Y4選自：氫、甲基、乙基；n選自：1、2、3、4、5、6、7、8或9；X選自氟、氯、溴或碘。鹽選自：鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、甲磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、蘋果酸鹽、乳酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽或富馬酸鹽。細(xì)胞系：宮頸癌細(xì)胞系Hela、肺腺癌細(xì)胞系A(chǔ)549和乳腺癌細(xì)胞系MCF-7(中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院細(xì)胞庫提供)。試劑：噻唑藍(lán)(MTT)、RPMI1640培養(yǎng)液、新生牛血清、抗生素(美國英杰生命技術(shù)公司)；胰酶(美國AMRESCO公司)；96孔培養(yǎng)板(美國英杰生命技術(shù)公司)；二甲基亞砜(美國Sigma公司)。儀器：HFsafe-1500型超凈工作臺、HF151UV型CO2培養(yǎng)箱(上海力申科學(xué)儀器有限公司)；XSP-15C型倒置顯微鏡(上海長方光學(xué)儀器有限公司)；MultiskanMK3型酶標(biāo)儀(美國Thermo公司)；超純水制備儀(美國Milli-Q公司)。實驗操作：試樣對Hela細(xì)胞、A549細(xì)胞和MCF-7細(xì)胞的測試。每種細(xì)胞的實驗操作過程相同，一次實驗過程中，每種試樣設(shè)置5個濃度梯度(0.010μmol/mL、0.030μmol/mL、0.100μmol/mL、0.300μmol/mL和1.000μmol/mL)，每個濃度四個平行試樣，每組實驗平行3次，并通過空白組對照得出結(jié)論。酶標(biāo)儀檢測各孔OD值，檢測波長570nm。3.抗腫瘤活性評價1)細(xì)胞抑制率計算：2)IC50值計算試樣濃度對數(shù)值與細(xì)胞抑制率線性回歸，利用軟件計算試樣對細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度IC50值。優(yōu)選化合物對Hela細(xì)胞、A549細(xì)胞和MCF-7細(xì)胞的IC50見表1～3。表1N-(4-烷基-5-芐基噻唑-2-基)氨基烷酰胺及其中間體對Hela細(xì)胞的抑制活性N-(4-烷基-5-芐基噻唑-2-基)氨基烷酰胺及其中間體IC50，μmol/LN-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-4-氯丁酰胺36±1N-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-4-氨基丁酰胺19±2N-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-5-氨基戊酰胺55±4N-(4-叔丁基-5-(4-氯芐基)噻唑-2-基)-5-氨基戊酰胺63±6N-(4-叔丁基-5-(4-甲氧基芐基)噻唑-2-基)-5-氨基戊酰胺51±0表2N-(4-烷基-5-芐基噻唑-2-基)氨基烷酰胺及其中間體對A549細(xì)胞的抑制活性N-(4-烷基-5-芐基噻唑-2-基)氨基烷酰胺及其中間體IC50，μmol/LN-(4-叔丁基-5-(4-甲氧基芐基)噻唑-2-基)氯乙酰胺24±4N-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-4-氯丁酰胺37±1N-(4-叔丁基-5-(4-氯芐基)噻唑-2-基)-5-氨基戊酰胺72±5N-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-4-氨基丁酰胺48±7N-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-5-氨基戊酰胺84±7N-(4-叔丁基-5-(4-甲氧基芐基)噻唑-2-基)-5-氨基戊酰胺59±19 表3N-(4-烷基-5-芐基噻唑-2-基)氨基烷酰胺及其中間體對MCF-7細(xì)胞的抑制活性N-(4-烷基-5-芐基噻唑-2-基)氨基烷酰胺及其中間體IC50，μmol/LN-(4-叔丁基-5-(4-甲氧基芐基)噻唑-2-基)氯乙酰胺27±1N-(4-叔丁基-5-(4-甲氧基芐基)噻唑-2-基)-4-氯丁酰胺39±10N-(4-叔丁基-5-(4-氯芐基)噻唑-2-基)-4-氯丁酰胺29±1N-(4-叔丁基-5-(4-氯芐基)噻唑-2-基)-5-氯戊酰胺37±4N-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-4-氯丁酰胺73±6N-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-4-氨基丁酰胺34±2N-(4-叔丁基-5-(4-甲氧基芐基)噻唑-2-基)-4-氨基丁酰胺48±5N-(4-叔丁基-5-(4-氯芐基)噻唑-2-基)-5-氨基戊酰胺57±2N-(4-叔丁基-5-(2，4-二氯芐基)噻唑-2-基)-5-氨基戊酰胺65±2活性測試結(jié)果顯示，N-(4-烷基-5-芐基噻唑-2-基)氨基烷酰胺及其中間體N-(4-烷基-5-芐基噻唑-2-基)鹵代烷酰胺或其鹽對宮頸癌細(xì)胞、人肺腺癌細(xì)胞(A549細(xì)胞)和人乳腺癌細(xì)胞(MCF-7細(xì)胞)具有良好的抑制活性，可用于制備抗腫瘤藥物。當(dāng)前第1頁1 2 3