本發(fā)明涉及組織細(xì)胞培養(yǎng)裝置，特別是一種利于懸浮細(xì)胞在培養(yǎng)環(huán)境下，能夠在培養(yǎng)液中自由正常生長(zhǎng)的組織細(xì)胞培養(yǎng)裝置。

背景技術(shù)：

細(xì)胞培養(yǎng)是指從體內(nèi)組織取出細(xì)胞，模擬體內(nèi)環(huán)境，在無菌、適當(dāng)溫度及酸堿度和一定營(yíng)養(yǎng)條件下，使其在體外生長(zhǎng)繁殖、并維持其結(jié)構(gòu)、功能、及生理特性的一種培養(yǎng)技術(shù)。細(xì)胞培養(yǎng)根據(jù)它們?cè)谂囵B(yǎng)器皿是否能貼附于支持物上生長(zhǎng)的特征，可分為貼附型生長(zhǎng)和懸浮型生長(zhǎng)兩大類。貼附型細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)能貼附在支持物表面生長(zhǎng)，一般可用纖維、微載體、多孔材料等作為培養(yǎng)體，細(xì)胞在培養(yǎng)體上貼附培養(yǎng)，而對(duì)懸浮型組織細(xì)胞，由于其不貼附在支持物生長(zhǎng)，它在培養(yǎng)時(shí)，一般不需培養(yǎng)體，直接在培養(yǎng)液中培養(yǎng)，該種細(xì)胞的培養(yǎng)裝置主要有培養(yǎng)皿（瓶）、攪拌裝置。如專利CN 201224734Y公開了“雙攪拌棒懸浮細(xì)胞培養(yǎng)瓶”， 一種雙攪拌棒懸浮細(xì)胞培養(yǎng)瓶，包括瓶體、瓶蓋和攪拌裝置，攪拌裝置的一端與瓶蓋內(nèi)側(cè)連接，攪拌裝置的另一端伸入瓶體內(nèi)并接近瓶體底端。所述的攪拌裝置由固定桿、上連接軟管、軸桿、叉形旋轉(zhuǎn)件、下連接軟管和磁棒構(gòu)成，固定桿的上端與所述的瓶蓋內(nèi)側(cè)中心固定連接，固定桿的下端通過上連接軟管與軸桿的上端連接；在每一分叉的下端各通過軟管與磁棒連接。它可用于細(xì)菌、真菌、植物等細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)，尤其適合哺乳動(dòng)物細(xì)胞和昆蟲細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)。CN 201762335U公開了“高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng)裝置”，它包括培養(yǎng)瓶、放置于瓶?jī)?nèi)底部的磁力攪拌子、低速調(diào)控磁力攪拌器；其中，培養(yǎng)瓶的頂端、培養(yǎng)瓶的上端兩側(cè)均設(shè)有開口；培養(yǎng)瓶放置于低速調(diào)控磁力攪拌器之上。通過磁力攪拌器控制置于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)底部的磁力攪拌子進(jìn)行旋轉(zhuǎn)，從而進(jìn)行細(xì)胞懸浮培養(yǎng)。而用上述現(xiàn)有技術(shù)培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，隨著細(xì)胞密度的增大，難以做到細(xì)胞均勻分布，會(huì)形成局部細(xì)胞密集區(qū)，影響培養(yǎng)液的傳送，培養(yǎng)液濃度不均勻，不利于細(xì)胞正常生長(zhǎng)，細(xì)胞密度大也會(huì)減緩細(xì)胞生長(zhǎng)速度，上述現(xiàn)有技術(shù)的攪拌方式具有較大剪切力，從而對(duì)細(xì)胞造成損傷，不利于細(xì)胞的培養(yǎng)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明目的是為了克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，而提供一種有利于細(xì)胞在培養(yǎng)液中自由正常生長(zhǎng)、均勻分布、使細(xì)胞正常生長(zhǎng)的組織細(xì)胞培養(yǎng)裝置。

發(fā)明人認(rèn)為如果提供一種細(xì)胞培養(yǎng)裝置，該裝置通過一系列均布網(wǎng)格空間使細(xì)胞均勻分布，同時(shí)還能使在細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖過程中，隨著細(xì)胞數(shù)量逐漸增多致使細(xì)胞較為密集時(shí)，有仍能提供營(yíng)養(yǎng)液或新陳代謝物自由流動(dòng)的動(dòng)力源，來保證細(xì)胞的正常生長(zhǎng)條件，并通過液體流動(dòng)、網(wǎng)格保護(hù)來減少對(duì)細(xì)胞的剪切力則能克服現(xiàn)有技術(shù)的不足。

本發(fā)明目的通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

一種用于懸浮組織細(xì)胞的培養(yǎng)裝置，其特征在于：所述培養(yǎng)裝置內(nèi)包括一組織細(xì)胞培養(yǎng)體，該組織細(xì)胞培養(yǎng)體為一多孔材料；該多孔材料是以材料孔徑大小進(jìn)行分級(jí)的孔腔及圍繞形成孔腔的腔壁構(gòu)成，且圍繞構(gòu)成上級(jí)大孔腔的腔壁上設(shè)置下級(jí)小孔腔；各級(jí)孔腔均各自相互貫通且各級(jí)孔腔相互間也彼此貫通；所述培養(yǎng)裝置內(nèi)還包括一旋流裝置，能使培養(yǎng)裝置內(nèi)的培養(yǎng)液產(chǎn)生旋轉(zhuǎn)渦流。

上述組織細(xì)胞培養(yǎng)裝置中，作為組織細(xì)胞培養(yǎng)體的多孔材料以材料孔徑大小進(jìn)行分級(jí)的孔腔至少分為兩級(jí)以上。其中圍繞構(gòu)成上一級(jí)大孔腔的腔壁上設(shè)置下一級(jí)小孔腔；或者圍繞構(gòu)成上級(jí)大孔腔的腔壁上設(shè)置有下級(jí)各級(jí)小孔腔；或者圍繞構(gòu)成上級(jí)大孔腔的腔壁上設(shè)置有下級(jí)各級(jí)小孔腔的任意組合。

當(dāng)該多孔材料的孔腔分為三級(jí)時(shí)，圍繞構(gòu)成上一級(jí)大孔腔的腔壁上設(shè)置下一級(jí)小孔腔；或者圍繞構(gòu)成上級(jí)大孔腔的腔壁上設(shè)置有下級(jí)兩級(jí)小孔腔。當(dāng)然，下級(jí)小孔腔的腔壁都是由更下級(jí)的小孔腔圍繞構(gòu)成的。以此類推，分為更多級(jí)的多孔材料的孔腔，每一級(jí)的大孔腔的腔壁上都可以是只設(shè)置下一級(jí)的小孔腔，也可以是圍繞構(gòu)成上級(jí)大孔腔的腔壁上設(shè)置有下級(jí)的各級(jí)小孔腔或圍繞構(gòu)成上級(jí)大孔腔的腔壁上設(shè)置有下級(jí)各級(jí)小孔腔的任意組合。發(fā)明人認(rèn)為，當(dāng)多孔材料的孔腔分為三級(jí)時(shí)為最佳，也認(rèn)為當(dāng)多孔材料的孔腔分為三級(jí)時(shí)，其中圍繞構(gòu)成上一級(jí)大孔腔的腔壁上設(shè)置下一級(jí)小孔腔的結(jié)構(gòu)為最佳。

進(jìn)一步說，該多孔材料較小級(jí)的孔腔的孔徑為納米級(jí)，其他級(jí)孔腔的孔徑至少大于培養(yǎng)細(xì)胞的平均直徑。

進(jìn)一步說，當(dāng)該多孔材料的孔腔分為三級(jí)時(shí)，圍繞構(gòu)成上一級(jí)大孔腔的腔壁上設(shè)置下一級(jí)小孔腔；最小級(jí)孔腔的孔徑為納米級(jí)，比最小級(jí)孔腔的孔徑大一級(jí)的孔腔的孔徑至少大于培養(yǎng)細(xì)胞的平均直徑的兩倍，比最小級(jí)小孔腔的孔徑大二級(jí)的孔腔的孔徑至少大于培養(yǎng)細(xì)胞的平均直徑的四倍為佳。

本發(fā)明作為組織細(xì)胞培養(yǎng)體的多孔材料，可采用如下制備方法制得：

（1）材料準(zhǔn)備

將原料粉和用于制備最小一級(jí)孔的造孔劑混合，并配制成漿料；

將所述漿料均勻填充入高分子材料支架，形成坯體并干燥、破碎得到含有原料、造孔劑與高分子材料支架材料的混合顆粒；

（2）將前述得到的混合顆粒與用于制備比最小一級(jí)孔大的上級(jí)孔的造孔劑均勻混合，制成致密坯體；

（3）將致密坯體真空燒結(jié)；燒結(jié)后的坯體按照原料工藝進(jìn)行常規(guī)后續(xù)處理得到多孔材料。

更具體地說，所述的多孔材料的制備方法，在制備致密坯體前，先將混合顆粒與用于制備比最小一級(jí)孔大一級(jí)的孔的造孔劑均勻混合，均勻地灌入高分子材料支架中，該高分子材料支架孔徑大于混合顆粒粒徑及所述造孔劑粒徑，棱作為比最小一級(jí)孔大二級(jí)的孔的造孔劑，這樣，經(jīng)真空燒結(jié)后，就可制備出具有三級(jí)孔的多級(jí)孔材料，依次類推，可制備出更多級(jí)孔的多孔材料。

更具體地說，所述的多孔材料制備方法，孔徑大于混合顆粒粒徑及造孔劑孔徑的高分子材料支架的孔隙是三維貫通的，從而制備出的孔也是三維貫通的。

進(jìn)一步，上述懸浮組織細(xì)胞培養(yǎng)裝置，它還包括放置組織細(xì)胞培養(yǎng)體的培養(yǎng)皿，所述組織細(xì)胞培養(yǎng)體固定于所述培養(yǎng)皿中；所述的旋流裝置設(shè)置于所述組織細(xì)胞培養(yǎng)體下方。

上述旋流裝置包括多組由支座支撐的輸氣管，多組輸氣管上均設(shè)置有出氣管和進(jìn)氣管；所述進(jìn)氣管與所述培養(yǎng)皿外的控制閥連接，控制閥還連接有主進(jìn)氣管。

上述輸氣管呈環(huán)狀，環(huán)狀的輸氣管上設(shè)置的出氣管的軸線在水平面上投影與環(huán)狀的輸氣管的軸線在水平面上投影相切。

上述多組輸氣管以偶數(shù)組為佳，比如兩組、四組、六組或更多。而且在水平面投影上，如果一組出氣管的指向與輸氣管軸線順時(shí)針切向相同，則另一組出氣管的指向則與輸氣管軸線反時(shí)針切向相同，反之亦然。

進(jìn)一步，各組出氣管與水平面的夾角為小于或等于45°。

進(jìn)一步，上述出氣管的出口設(shè)置有絲網(wǎng)或帶小孔的膜片。

本發(fā)明的有益效果：

1、本發(fā)明提供了有利于懸浮組織細(xì)胞三維空間自由正常生長(zhǎng)的組織細(xì)胞培養(yǎng)裝置，將多孔材料作為細(xì)胞培養(yǎng)體，特別是該多孔材料以材料孔徑大小進(jìn)行分級(jí)的孔腔及圍繞形成孔腔的腔壁進(jìn)行合理設(shè)計(jì)，將培養(yǎng)空間分割為一系列三維均布網(wǎng)格空間，其最小孔用于營(yíng)養(yǎng)液及新陳代謝物的傳輸，大孔用于細(xì)胞生長(zhǎng)空間，對(duì)任一個(gè)孔腔，由于其尺寸的局限，避免了細(xì)胞的過分密集，當(dāng)達(dá)到一定密集度時(shí)，細(xì)胞再向其他孔腔遷移，由于各級(jí)孔腔均各自相互貫通且各級(jí)孔腔相互間也彼此貫通，使得細(xì)胞可在大孔間自由移動(dòng)，給細(xì)胞隨意穿行其中提供條件，這樣結(jié)構(gòu)的細(xì)胞培養(yǎng)體在細(xì)胞培養(yǎng)過程中不易形成細(xì)胞過分密集區(qū)或者是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)富集區(qū)，使細(xì)胞分布均勻，便于細(xì)胞正常生長(zhǎng)。

2、本發(fā)明所述的組織細(xì)胞培養(yǎng)裝置，各級(jí)孔腔均各自相互貫通且各級(jí)孔腔相互間也彼此貫通及納米級(jí)孔的存在，可以使?fàn)I養(yǎng)液或新陳代謝物在其中隨意通過，即使細(xì)胞增多，孔腔變小或堵塞也不阻礙營(yíng)養(yǎng)液或新陳代謝物在細(xì)胞培養(yǎng)體內(nèi)的任意浸潤(rùn)或稱滲透，從而保障細(xì)胞的順利正常生長(zhǎng)。

3、本發(fā)明所述的組織細(xì)胞培養(yǎng)裝置，對(duì)多孔材料的孔腔進(jìn)行分級(jí)設(shè)置，而且合理設(shè)計(jì)各級(jí)孔腔的級(jí)數(shù)及在各級(jí)孔腔腔壁上的布置，以滿足各類組織細(xì)胞的各種生長(zhǎng)環(huán)境條件。特別是孔為三級(jí)時(shí)，第三級(jí)小孔腔的孔徑為納米級(jí)孔，第二級(jí)孔腔的孔徑至少大于培養(yǎng)細(xì)胞的平均直徑的兩倍，第一級(jí)孔腔的孔徑至少大于培養(yǎng)細(xì)胞的平均直徑的四倍，特別有利于細(xì)胞生長(zhǎng)，保證了細(xì)胞在第二級(jí)孔腔內(nèi)生長(zhǎng)，在第一級(jí)孔腔內(nèi)自由遷移，該最小一級(jí)孔腔孔徑是納米級(jí)孔，孔小會(huì)產(chǎn)生毛細(xì)力，會(huì)加速培養(yǎng)液、新陳代謝物的流動(dòng)，能將細(xì)胞吸入細(xì)胞培養(yǎng)體內(nèi)，并促進(jìn)其在組織細(xì)胞培養(yǎng)體中的遷移，而且毛細(xì)力還會(huì)通過培養(yǎng)液作用于細(xì)胞，從而加快細(xì)胞的生長(zhǎng)，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的高效批量培養(yǎng)，因而，本發(fā)明相對(duì)現(xiàn)有懸浮細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)具有顯著的優(yōu)勢(shì)。

4、本發(fā)明提供的作為組織細(xì)胞培養(yǎng)體的多孔材料制備方法，能有效地控制孔徑大小、孔的布置、貫通性，孔的分布均勻性，簡(jiǎn)便、易于實(shí)現(xiàn)，參數(shù)易于調(diào)整控制。

5、通過多組進(jìn)氣管、輸氣管、出氣管，結(jié)合閥體控制，可使進(jìn)氣在培養(yǎng)液中形成順時(shí)針、反時(shí)針轉(zhuǎn)向的回轉(zhuǎn)流動(dòng)，實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)液的高效攪拌，避免培養(yǎng)液不均勻，通過液體流動(dòng)及細(xì)胞培養(yǎng)體的保護(hù)，減少了對(duì)細(xì)胞的剪切力；出氣管與水平面有夾角會(huì)使培養(yǎng)液對(duì)上面的細(xì)胞培養(yǎng)體的作用更明顯。

6、出氣管出口裝有絲網(wǎng)或帶小孔的膜片可減小氣泡，避免大氣泡破碎損傷細(xì)胞。

附圖說明

下面將結(jié)合附圖與實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述。

圖1為本發(fā)明組織細(xì)胞培養(yǎng)裝置示意圖。

圖2為圖1中A-A截面圖。

圖3為圖1中組織細(xì)胞培養(yǎng)體結(jié)構(gòu)局部放大圖。

圖4為圖3中組織細(xì)胞培養(yǎng)體腔壁局部放大圖。

圖5為圖4中B-B截面圖。

圖6為圖2中C向局部視圖。

圖7為圖6中D向局部放大視圖。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式作說明，實(shí)施方式以本發(fā)明技術(shù)方案為前提，給出了詳細(xì)的實(shí)施方式和具體的操作過程，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不僅限于下述的實(shí)施方式。

在附圖中，1為培養(yǎng)皿，2為細(xì)胞培養(yǎng)體，3為主進(jìn)氣管，4為支撐輸氣管的支座，5為控制閥，6為進(jìn)氣管①，7為進(jìn)氣管②，8為輸氣管②，9為輸氣管①，10為出氣管②，11為出氣管①，12為組織細(xì)胞培養(yǎng)體的孔腔，13為孔腔的腔壁，14為腔壁13上的孔腔，15為孔腔14的腔壁，16為出氣管①或②出口處安裝的絲網(wǎng)或帶小孔的膜片。

以下詳細(xì)給出本發(fā)明的實(shí)施例：

實(shí)施例1：

參見附圖，一種用于懸浮組織細(xì)胞的培養(yǎng)裝置，所述培養(yǎng)裝置內(nèi)包括一組織細(xì)胞培養(yǎng)體2，該組織細(xì)胞培養(yǎng)體2為一多孔鉭材料；該多孔鉭材料是以材料孔徑大小進(jìn)行分級(jí)的孔腔及圍繞形成孔腔的腔壁構(gòu)成，且圍繞構(gòu)成上級(jí)大孔腔的腔壁上設(shè)置下級(jí)小孔腔；各級(jí)孔腔均各自相互貫通且各級(jí)孔腔相互間也彼此貫通。所述培養(yǎng)裝置內(nèi)還包括置于其中的旋流裝置。

具體到本例，該多孔鉭材料，它具有三級(jí)孔腔，其中，均勻分布、相互貫通的上二級(jí)大孔腔12（以下稱第一級(jí)孔腔）的腔壁13上有均勻分布、相互貫通的上一級(jí)大孔腔14（以下稱第二級(jí)孔腔），第二級(jí)孔腔14的腔壁15上有均勻分布、相互貫通的下級(jí)小孔腔（以下稱第三級(jí)孔腔）；且各級(jí)孔腔相互間也彼此貫通。第一級(jí)孔腔12孔徑為160μm-650μm，第二級(jí)孔腔14孔徑為60μm-90μm，第三級(jí)孔腔孔徑為400nm-700nm。

該多孔鉭材料的制備方法是：

（1）材料準(zhǔn)備

采用粒徑為1μm-10μm的鉭粉為原料，粒徑為450nm-780nm 的尿素做為最小一級(jí)孔造孔劑，用粒徑為450nm-780nm的聚苯乙烯作為粘合劑，按照鉭粉：尿素：聚苯乙烯：蒸餾水按體積比1：2：1：7.5配制成漿料。

采用孔徑為100μm-200μm的聚酯泡沫，將所述漿料用泡沫浸漬法均勻填充其中，形成坯體并干燥，然后破碎得到顆粒為65μm-100μm的含有原料、造孔劑與聚酯泡沫的混合顆粒。

（2）將混合顆粒、粒徑為65μm-100μm的乙基纖維素按體積比2：1均勻混合后均勻地灌入棱直徑為200μm-720μm、孔徑為400μm-600μm的三維貫通的聚酯泡沫中，然后將聚酯泡沫放入密閉模具壓制成致密坯體。

（3）將致密坯體真空燒結(jié)；燒結(jié)后的坯體按照鉭材工藝進(jìn)行常規(guī)后續(xù)熱處理得到級(jí)數(shù)為三級(jí)的多孔鉭。

進(jìn)一步參見附圖，可以看出本例的組織細(xì)胞培養(yǎng)裝置，它還包括放置組織細(xì)胞培養(yǎng)體的培養(yǎng)皿1，所述組織細(xì)胞培養(yǎng)體2固定于所述培養(yǎng)皿1中；所述的旋流裝置設(shè)置于所述組織細(xì)胞培養(yǎng)體下方。

該旋流裝置包括兩組由支座4支撐的輸氣管，該輸氣管呈環(huán)狀，即圖中的輸氣管①9與輸氣管②8，都是由支座4支撐；在輸氣管①9與輸氣管②8上分別均勻布置與自身連通的出氣管①11與出氣管②12，出氣管①11與出氣管②12軸線在水平面上投影分別與輸氣管①9與輸氣管②8的軸線在水平面上投影相切；分別與輸氣管①9與輸氣管②8連通的進(jìn)氣管①6與進(jìn)氣管②7穿出培養(yǎng)皿1與控制閥5連接，主進(jìn)氣管3與控制閥5連接，控制閥5可控制氣體同一時(shí)刻僅通過進(jìn)氣管①6或進(jìn)氣管②7。在水平面上投影上，出氣管①11指向與輸氣管環(huán)①9軸線順時(shí)針切向相同，則出氣管②12指向與輸氣管環(huán)②8軸線反時(shí)針切向相同。

出氣管①11、出氣管②12與水平面的夾角θ1、θ2為30°。

出氣管①11、出氣管②12出口裝有絲網(wǎng)16，絲網(wǎng)16的平均孔徑為0.5mm。

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，采用DMEM培養(yǎng)液，將培養(yǎng)細(xì)胞S180肉瘤細(xì)胞放入組織細(xì)胞培養(yǎng)體2內(nèi)，再將組織細(xì)胞培養(yǎng)體2放入培養(yǎng)皿1中，進(jìn)氣管①6與進(jìn)氣管②7分別交替進(jìn)氣，每次3分鐘。

培養(yǎng)結(jié)果表明，培養(yǎng)的細(xì)胞胞體豐滿，生長(zhǎng)狀態(tài)良好。

實(shí)施例2：

本實(shí)施例的組織細(xì)胞培養(yǎng)裝置的細(xì)胞培養(yǎng)體2采用多孔二氧化硅材料，具有兩級(jí)孔腔，均勻分布、相互貫通的上級(jí)大孔腔12的腔壁13上有均勻分布、相互貫通的下級(jí)小孔腔14，且兩級(jí)孔腔相互間也彼此貫通。上級(jí)大孔腔12孔徑為20μm-80μm，下級(jí)小孔腔14的孔徑為100nm-300nm。出氣管①11、出氣管②12與水平面的夾角θ1、θ2為15°，出氣管①11、出氣管②12出口裝有帶孔膜片16，其平均孔徑為0.3mm。

該種多孔二氧化硅材料的制備方法是：

（1）材料準(zhǔn)備

采用1μm-10μm的二氧化硅粉和粒徑為130nm-350nm的尿素作為最小級(jí)孔造孔劑，將其均勻混合，并用130nm-350nm的淀粉作為粘合劑，按照二氧化硅粉：尿素：淀粉：蒸餾水按體積比1：1.5：1：7配制成漿料。

將所述漿料用泡沫浸漬法均勻填充入棱直徑為25μm-90μm的聚酯泡沫中，形成坯體并干燥，然后破碎得到顆粒為25μm-90μm的含有二氧化硅粉、造孔劑與聚酯泡沫的混合顆粒。

（2）將混合顆粒、粒徑為25μm-90μm的甲基纖維素按體積比2：1均勻混合放入密閉模具壓制成致密坯體。

（3）將致密坯體真空燒結(jié)；燒結(jié)后的坯體按照二氧化硅的常規(guī)工藝進(jìn)行后續(xù)處理得到級(jí)數(shù)為二級(jí)的多孔二氧化硅。

其他同實(shí)施例1。

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，采用BME培養(yǎng)液，將培養(yǎng)細(xì)胞淋巴細(xì)胞放入組織細(xì)胞培養(yǎng)體2內(nèi)，再將組織細(xì)胞培養(yǎng)體2放入培養(yǎng)皿1中，進(jìn)氣管①6與進(jìn)氣管②7分別交替進(jìn)氣，每次5分鐘。

培養(yǎng)結(jié)果表明，培養(yǎng)的細(xì)胞胞體豐滿，生長(zhǎng)狀態(tài)良好。

實(shí)施例3：

本實(shí)施例的組織細(xì)胞培養(yǎng)裝置的細(xì)胞培養(yǎng)體2采用多孔鈦材料，具有三級(jí)孔腔，其中，均勻分布、相互貫通的上二級(jí)大孔腔12（以下稱第一級(jí)孔腔）的腔壁13上有均勻分布、相互貫通的上一級(jí)大孔腔14（以下稱第二級(jí)孔腔），上一級(jí)大孔腔的腔壁15上有均勻分布、相互貫通的下級(jí)小孔腔（以下稱第三級(jí)孔腔）；且各級(jí)孔腔相互間也彼此貫通。第一級(jí)孔腔12孔徑為300μm-700μm，第二級(jí)孔腔14孔徑為60μm-95μm，第三級(jí)孔腔孔徑為400nm-700nm，出氣管①11、出氣管②12與水平面的夾角θ1、θ2為45°，出氣管①11、出氣管②12出口裝有帶孔膜片16，其平均孔徑為0.7mm。

該多孔鈦材料的制備方法是：

（1）材料準(zhǔn)備

采用粒徑為1μm-10μm的鈦粉為原料，粒徑為430nm-750nm 的尿素做為最小一級(jí)孔造孔劑，用粒徑為430nm-750nm的聚苯乙烯作為粘合劑，按照鈦粉：尿素：聚苯乙烯：蒸餾水按體積比1：2：1：7.5配制成漿料。

采用孔徑為100μm-200μm的聚酯泡沫，將所述漿料用泡沫浸漬法均勻填充其中，形成坯體并干燥，然后破碎得到顆粒為65μm-105μm的含有原料、造孔劑與聚酯泡沫的混合顆粒。

（2）將混合顆粒、粒徑為65μm-105μm的乙基纖維素按體積比2：1均勻混合后均勻地灌入棱直徑為350μm-780μm、孔徑為400μm-600μm的三維貫通的聚酯泡沫中，然后將聚酯泡沫放入密閉模具壓制成致密坯體。

（3）將致密坯體真空燒結(jié)；燒結(jié)后的坯體按照鈦材工藝進(jìn)行常規(guī)后續(xù)熱處理得到級(jí)數(shù)為三級(jí)的多孔鈦。

其他同實(shí)施例1。

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，采用MEM培養(yǎng)液，將培養(yǎng)細(xì)胞K562放入組織細(xì)胞培養(yǎng)體2內(nèi)，再將組織細(xì)胞培養(yǎng)體2放入培養(yǎng)皿1中，進(jìn)氣管①6與進(jìn)氣管②7分別交替進(jìn)氣，每次4分鐘。

培養(yǎng)結(jié)果表明，培養(yǎng)的細(xì)胞胞體豐滿，生長(zhǎng)狀態(tài)良好。