本發(fā)明涉及萬古霉素的制備方法技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種通過芐胺-正丙醛制備萬古霉素的制備方法。

背景技術(shù)：

萬古霉素是抗生素的一種，其分子式為C66H74Cl2N9O24。其半衰期：4～8小時，腎衰竭9天，對厭氧菌和革蘭氏陰性細菌無效，血液透析不會移除。在印度等南亞國家出現(xiàn)的“超級病菌”NDM-1，已經(jīng)蔓延到英國、美國、加拿大、澳大利亞、荷蘭等國家，國內(nèi)專家稱南亞超級病菌不會大流行，萬古霉素能見效。

萬古霉素屬于糖肽類大分子抗生素，萬古霉素的藥力較強，在其他抗生素對病菌無效時會被使用。主要用于葡萄球菌(包括耐青霉素和耐新青霉素株)、難辨梭狀芽胞桿菌等所致的系統(tǒng)感染和腸道感染，如心內(nèi)膜炎、敗血癥、偽膜性腸炎等。

為制得萬古霉素，需要通過離子交換、脫色、色譜分離、超濾、納濾、結(jié)晶、溶解、冷凍干燥等多種提取精制手段。其中結(jié)晶過程可以提高萬古霉素純度，去除部分色素等雜質(zhì)，但因萬古霉素鹽酸鹽晶體生長緩慢，結(jié)晶過程易受雜質(zhì)干擾，結(jié)晶難度較大，僅僅通過離子交換和脫色的粗提取液很難結(jié)晶出來。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種通過芐胺-正丙醛制備萬古霉素的制備方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：本發(fā)明提供一種通過芐胺-正丙醛制備萬古霉素的制備方法，包括以下步驟：

a、發(fā)酵液預(yù)處理，包括去除高價無機離子和蛋白質(zhì)，采用草酸或磷酸去除高價無機離子，蛋白質(zhì)的去除方法為：采用10％硫酸調(diào)節(jié)pH4.5-5.0加入0.05％質(zhì)量濃度的凝絮劑的方法，同時加入0.7％硅藻土作助濾劑，再通過板框過濾機多次過濾；

b、采用鼓式真空過濾器進行過濾；

c、將發(fā)酵濾液酸化至PH＝2，后加相當于發(fā)酵液體積1/3的芐胺-正丙醛，混合后以萃取罐分離，進行二級逆流萃取，得一次芐胺-正丙醛提取液，然后以1.3％-1.9％碳酸氫鈉在PH6.8-7.1條件下將萬古霉素從芐胺-正丙醛提取液萃取到緩沖液中，然后調(diào)PH至2.0后，再一次將萬古霉素從緩沖液轉(zhuǎn)入芐胺-正丙醛中去，重復(fù)上述步驟，得二次芐胺-正丙醛提取液；

d、將二次芐胺-正丙醛提取液以0.5mol/L NaOH液萃取，調(diào)PH至6.4-6.8，得萬古霉素鈉鹽水濃縮液，加3-4倍體積的丁醇，在16-26℃，5-10mm汞柱下真空蒸餾，將水和丁醇的共沸物蒸出，并隨時補加丁醇，當濃縮到濃縮液體積、蒸出餾分中含水達2-4％時，停止蒸餾，萬古霉素鈉鹽結(jié)晶析出，過濾，將晶體洗滌后加入葡萄糖溶液得到萬古霉素。

本發(fā)明優(yōu)選的，根據(jù)步驟a中，所述硫酸的pH為4.9。

本發(fā)明優(yōu)選的，根據(jù)步驟c中，所述碳酸氫鈉的pH為7。

本發(fā)明的有益效果如下：

采用上述方案，本發(fā)明制備所得萬古霉素有效組份大大得到提高，其它雜質(zhì)大大降低，純度很高，色譜純度可達到95％以上，同時產(chǎn)品外觀顏 色得到明顯改觀，適于口服或注射給藥；本發(fā)明具有制作方法簡便和工藝流程適用于大批量生產(chǎn)的優(yōu)點。

附圖說明

圖1為本發(fā)明所述一種通過芐胺-正丙醛制備萬古霉素的制備方法的流程圖。

具體實施方式

以下結(jié)合附圖和具體實施例，對本發(fā)明進行詳細說明。

請參閱圖1，本發(fā)明提供一種通過芐胺-正丙醛制備萬古霉素的制備方法，包括以下步驟：

a、發(fā)酵液預(yù)處理，包括去除高價無機離子和蛋白質(zhì)，采用草酸或磷酸去除高價無機離子，蛋白質(zhì)的去除方法為：采用10％硫酸調(diào)節(jié)pH4.5-5.0加入0.05％質(zhì)量濃度的凝絮劑的方法，同時加入0.7％硅藻土作助濾劑，再通過板框過濾機多次過濾；

b、采用鼓式真空過濾器進行過濾；

c、將發(fā)酵濾液酸化至PH＝2，后加相當于發(fā)酵液體積1/3的芐胺-正丙醛，混合后以萃取罐分離，進行二級逆流萃取，得一次芐胺-正丙醛提取液，然后以1.3％-1.9％碳酸氫鈉在PH6.8-7.1條件下將萬古霉素從芐胺-正丙醛提取液萃取到緩沖液中，然后調(diào)PH至2.0后，再一次將萬古霉素從緩沖液轉(zhuǎn)入芐胺-正丙醛中去，重復(fù)上述步驟，得二次芐胺-正丙醛提取液；

d、將二次芐胺-正丙醛提取液以0.5mol/L NaOH液萃取，調(diào)PH至6.4-6.8，得萬古霉素鈉鹽水濃縮液，加3-4倍體積的丁醇，在16-26℃， 5-10mm汞柱下真空蒸餾，將水和丁醇的共沸物蒸出，并隨時補加丁醇，當濃縮到濃縮液體積、蒸出餾分中含水達2-4％時，停止蒸餾，萬古霉素鈉鹽結(jié)晶析出，過濾，將晶體洗滌后加入葡萄糖溶液得到萬古霉素。

根據(jù)步驟a中，所述硫酸的pH為4.9。

根據(jù)步驟c中，所述碳酸氫鈉的pH為7。

實施例一：

本發(fā)明包括以下步驟：

a、發(fā)酵液預(yù)處理，包括去除高價無機離子和蛋白質(zhì)，采用草酸或磷酸去除高價無機離子，蛋白質(zhì)的去除方法為：采用10％硫酸調(diào)節(jié)pH4.5加入0.05％質(zhì)量濃度的凝絮劑的方法，同時加入0.7％硅藻土作助濾劑，再通過板框過濾機多次過濾；

b、采用鼓式真空過濾器進行過濾；

c、將發(fā)酵濾液酸化至PH＝2，后加相當于發(fā)酵液體積1/3的芐胺-正丙醛，混合后以萃取罐分離，進行二級逆流萃取，得一次芐胺-正丙醛提取液，然后以1.3％碳酸氫鈉在PH6.8條件下將萬古霉素從芐胺-正丙醛提取液萃取到緩沖液中，然后調(diào)PH至2.0后，再一次將萬古霉素從緩沖液轉(zhuǎn)入芐胺-正丙醛中去，重復(fù)上述步驟，得二次芐胺-正丙醛提取液；

d、將二次芐胺-正丙醛提取液以0.5mol/L NaOH液萃取，調(diào)PH至6.4，得萬古霉素鈉鹽水濃縮液，加3倍體積的丁醇，在16℃，5mm汞柱下真空蒸餾，將水和丁醇的共沸物蒸出，并隨時補加丁醇，當濃縮到濃縮液體積、蒸出餾分中含水達2％時，停止蒸餾，萬古霉素鈉鹽結(jié)晶析出，過濾， 將晶體洗滌后加入葡萄糖溶液得到萬古霉素。

實施例二：

本發(fā)明包括以下步驟：

a、發(fā)酵液預(yù)處理，包括去除高價無機離子和蛋白質(zhì)，采用草酸或磷酸去除高價無機離子，蛋白質(zhì)的去除方法為：采用10％硫酸調(diào)節(jié)pH5.0加入0.05％質(zhì)量濃度的凝絮劑的方法，同時加入0.7％硅藻土作助濾劑，再通過板框過濾機多次過濾；

b、采用鼓式真空過濾器進行過濾；

c、將發(fā)酵濾液酸化至PH＝2，后加相當于發(fā)酵液體積1/3的芐胺-正丙醛，混合后以萃取罐分離，進行二級逆流萃取，得一次芐胺-正丙醛提取液，然后以1.9％碳酸氫鈉在PH7.1條件下將萬古霉素從芐胺-正丙醛提取液萃取到緩沖液中，然后調(diào)PH至2.0后，再一次將萬古霉素從緩沖液轉(zhuǎn)入芐胺-正丙醛中去，重復(fù)上述步驟，得二次芐胺-正丙醛提取液；

d、將二次芐胺-正丙醛提取液以0.5mol/L NaOH液萃取，調(diào)PH至6.8，得萬古霉素鈉鹽水濃縮液，加4倍體積的丁醇，在26℃，10mm汞柱下真空蒸餾，將水和丁醇的共沸物蒸出，并隨時補加丁醇，當濃縮到濃縮液體積、蒸出餾分中含水達4％時，停止蒸餾，萬古霉素鈉鹽結(jié)晶析出，過濾，將晶體洗滌后加入葡萄糖溶液得到萬古霉素。

綜上所述，采用上述方案，本發(fā)明制備所得萬古霉素有效組份大大得到提高，其它雜質(zhì)大大降低，純度很高，色譜純度可達到95％以上，同時產(chǎn)品外觀顏色得到明顯改觀，適于口服或注射給藥；本發(fā)明具有制作方法 簡便和工藝流程適用于大批量生產(chǎn)的優(yōu)點。

以上僅為本發(fā)明的較佳實施例而已，并不用于限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。